利用磷肥廠廢水養(yǎng)殖半裸舟形藻的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種利用磷肥廠廢水養(yǎng)殖半裸舟形藻的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法，該方法不僅可以低成本處理磷肥廠廢水，廢物利用，變廢為寶，而且可獲得有重要餌料價值的半裸舟形藻，廢物利用，變廢為寶。傳統(tǒng)上半裸舟形藻采用f/2培養(yǎng)基配方并采用塑料桶或塑料薄膜袋培養(yǎng)，生長慢，易污染，成本高，效益低，操作費力，工作量大，現(xiàn)在我采用改進(jìn)的長方形跑道池培養(yǎng)，并在培養(yǎng)基中添加了磷肥廠廢水、硅酸鈉、鉑酸鈉、雞糞浸出液、羧甲基纖維素鈉、海藻酸丙二醇酯、D-異抗血酸鈉、M-F微量元素溶液、檸檬酸鐵等成分，有機(jī)肥和無機(jī)肥混合使用，營養(yǎng)更全面、均衡，不易污染，操作方便，成本低，效益高，半裸舟形藻生長速度大幅提高，產(chǎn)量提高360％。
【專利說明】利用磷肥廠廢水養(yǎng)殖半裸舟形藻的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域，尤其涉及一種利用磷肥廠廢水養(yǎng)殖半裸舟形藻的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]近年來磷肥工業(yè)的迅速發(fā)展所造成的污染日趨嚴(yán)重，已引起人們的廣泛關(guān)注。資料顯示，每生產(chǎn)I噸鈣鎂磷肥要排放40噸廢水。磷肥生產(chǎn)過程中排出的廢水含氟濃度高達(dá)120mg/L。氟是一種對人體及動物體和環(huán)境有害的元素，科研人員調(diào)查顯示，磷肥廠工人、家屬和周圍300米以內(nèi)居民的氟斑牙檢出率為8.4%，兒童、少年更高，為36%，氟污染還會引起骨密度增加和骨小梁增粗、網(wǎng)格增大、結(jié)構(gòu)模糊等為癥狀的氟骨癥，對人體血液和神經(jīng)也有不良影響。過磷酸鈣是最常用的磷肥，原料為磷灰土或磷灰石和62-70%硫酸，生產(chǎn)反應(yīng)過程如下:溶解磷灰土的過程中放出有害氣體氟化氫和四氟化硅，在密封的冷凝裝置內(nèi)用水洗滌，可分解成為無毒的硅酸及硅氟酸。從這個過程排出的廢水無色透明，呈弱酸性。過磷酸鈣的生產(chǎn)往往同氟硅酸鈉的生產(chǎn)合在一起，因此用水淋洗廢氣并回收氟硅酸鈉，就成為廢水處理的方法。氟硅酸鈉經(jīng)過濾、水洗、干化可成為一種有價值的副產(chǎn)品。廢水如需進(jìn)一步處理，則可通 過石灰石濾床過濾，或者用石灰石粉或石灰乳液中和，中和后的廢水經(jīng)過沉淀排出，沉淀物中主要含氯化鈉和鈣。該法處理廢水投資大，如中小型磷肥廠的污水處理設(shè)備投資達(dá)10萬元以上，而且年運轉(zhuǎn)費還需9萬多元，占地面積大，操作麻煩，處理效果受天氣、溫度及生產(chǎn)工藝影響較大，工藝復(fù)雜，石灰中和后的廢渣堆放問題也難以解決，容易造成二次污染。更有甚者，不少磷肥廠將未經(jīng)處理的廢水通過明溝或暗道直接排入河道或城市下水道，對環(huán)境和人體健康造成嚴(yán)重影響，還會引起水體富營養(yǎng)化等次生污染。
[0003]為了解決目前技術(shù)的不足，我發(fā)明了一種利用磷肥廠廢水養(yǎng)殖半裸舟形藻方法，既能低成本處理磷肥廠廢水，又能獲得有重要餌料價值的生物產(chǎn)品-半裸舟形藻，變廢為寶，化害為利，綜合利用效益好，可大幅度減少廢水處理設(shè)備投資及運轉(zhuǎn)費用，一舉多得，是磷肥廠廢水處理的最佳選擇。
[0004]半裸舟形藻(Navicula seminulum)屬娃藻門、羽紋娃藻綱、舟形藻目、舟形藻科、舟形藻屬。舟形藻屬是硅藻中種類最多的屬，近千種。半裸舟形藻是鮑魚、刺參等經(jīng)濟(jì)海產(chǎn)動物幼體主要開口餌料。因剛變態(tài)和附著的刺參稚參個體纖小，對環(huán)境適應(yīng)性弱，生長慢，此時提供質(zhì)優(yōu)量足的優(yōu)質(zhì)餌料特別是半裸舟形藻是提高海參成活率、決定海參養(yǎng)業(yè)能否成功的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。半裸舟形藻在生長過程中向培養(yǎng)液分泌具有多種生物活性的硫酸化多糖，該多糖不僅可以作為廣譜免疫促進(jìn)劑，提高免疫能力，還有抗感染、抗凝血、降血糖、預(yù)防和治療腫瘤及愛滋病等功效。生化分析表明，半裸舟形藻還含有多種高不飽和脂肪酸，其中Y -亞麻酸、二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸等成分對心血管疾病、高血脂、腫瘤及炎癥等疾病有顯著預(yù)防作用，是具有潛在藥學(xué)價值的海洋生物之一，具有廣闊的開發(fā)前景。半裸舟形藻長11-30 μ m，寬6-20 μ m,細(xì)胞舟形至橢圓形，中部寬兩端尖。殼面中線上有殼縫，能自由活動。除縱軸左右對稱外，橫軸和殼環(huán)軸也左右對稱。縱軸長，橫軸短，殼環(huán)軸一般短于橫軸，殼面花紋左右對稱，為線紋。殼中央有中央結(jié)節(jié)，兩端各有一端結(jié)節(jié)，向壁內(nèi)凸出，有加強(qiáng)硅質(zhì)胞壁作用，沒有船骨突。色素體2-4個，有復(fù)大孢子。最適光照強(qiáng)度3000-8000LUX，最適溫度21-28 °C，最適鹽度25-34，最適pH7.2-8.5。
[0005]傳統(tǒng)上半裸舟形藻培養(yǎng)基配方是:KN03600毫克、Na2HPO4.12H2060毫克、FeCl312暈克、Na2S ?03.9Η20700暈克、乙二胺四乙酸鈉4.3暈克、檸檬酸鐵3.9暈克、維生素B120.5微克、維生素B1IO微克、1000毫升消毒的純凈海水，過去采用塑料桶或塑料薄膜袋培養(yǎng)，生長慢，易污染，成本高，效益低，操作費力，工作量大，現(xiàn)在我采用改進(jìn)的長方形跑道池培養(yǎng)且在培養(yǎng)基中添加了磷肥廠廢水、硅酸鈉、鉬酸鈉、雞糞浸出液、羧甲基纖維素鈉、海藻酸丙二醇酯、D-異抗血酸鈉、硫代乙醇酸鈉、L-精氨酸、麥飯石粉、920植物生長刺激素、維生素S-3溶液、M-F微量元素溶液、土壤浸出液、海泥浸出液、胰蛋白、三羥甲基氨基甲烷、尿素、羥基乙酸、鈦溶液、酵母浸粉、脫氧膽酸鈉、馬糞浸出液、乙二胺四乙酸鈉、檸檬酸鐵等營養(yǎng)成分，有機(jī)肥和無機(jī)肥混合使用，營養(yǎng)更加全面、均衡，操作方便，成本低，效益高，半裸舟形藻生長速度和產(chǎn)量大幅提高，培養(yǎng)周期縮短，產(chǎn)量提高360%。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]為了克服目前技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種利用磷肥廠廢水養(yǎng)殖半裸舟形藻培養(yǎng)基，配方如下:
[0007]磷肥廠廢水85毫升，硅酸鈉20微克，鉬酸鈉7微克，雞糞浸出液I毫升，羧甲基纖維素鈉3毫克，海藻酸丙二醇酯2毫克，D-異抗血酸鈉5毫克，硫代乙醇酸鈉6毫克，L-精氨酸3毫克，麥飯石粉12毫克，920植物生長刺激素3國際單位，維生素S-3溶液1.5毫升，M-F微量兀素溶液1.5毫升,土壤浸出液1.5毫升,海泥浸出液1.8毫升,胰蛋白15暈克,三羥甲基氨基甲烷0.5毫克，尿素6毫克，羥基乙酸2毫升，鈦溶液2毫升，酵母浸粉8毫克，脫氧膽酸鈉3暈克,馬糞浸出液2毫升，乙二胺四乙酸鈉I暈克，檸檬酸鐵3暈克,次氯酸鈉消毒后的純凈海水1000毫升；一種利用磷肥廠廢水養(yǎng)殖半裸舟形藻方法，具體步驟如下:
[0008]培養(yǎng)設(shè)備為一長方形跑道池，長50米，寬25米，東西走向，以接收更多太陽光照，跑道池寬度為1.5米,跑道池為混磚結(jié)構(gòu),池水槽深65厘米,工作狀態(tài)時藻液水深50厘米。跑道池中間安一水車，由電動機(jī)帶動，轉(zhuǎn)動的水車驅(qū)動培養(yǎng)液在長方形跑道池中流動，水車轉(zhuǎn)動速度不宜太快，只要保持藻液流動，藻細(xì)胞不下沉即可，太快會形成較大的剪切力而打碎藻細(xì)胞。水槽上方安裝一排玻璃，相當(dāng)于蓋子，這樣培養(yǎng)基處于一種半封閉狀態(tài)，既不阻擋太陽光照射藻液，進(jìn)行光合作用，又能避免空氣中的灰塵、泥沙、樹葉、紙屑、原生動物和其它微生物的孢子等進(jìn)入培養(yǎng)液造成污染。將長方形跑道池用自來水洗刷干凈，后用0.2%過氧乙酸消毒溶液浸泡2小時，再用次氯酸鈉消毒過的海水沖洗2遍，放入培養(yǎng)液至水深45厘米，開動水車轉(zhuǎn)動20分鐘，停止水車，選擇處于指數(shù)生長期、生命力旺盛、潔凈無污染的藻種接種，接種密度4Χ 104cell/mL，接種后開動水車攪動藻液，使藻細(xì)胞均勻分布，補(bǔ)充培養(yǎng)液至水深50厘米，開動水車進(jìn)行培養(yǎng)，室外培養(yǎng)，太陽光照射，最佳溫度25±2°C，最佳光照強(qiáng)度4000-10000LUX，至第7天，再補(bǔ)充新鮮培養(yǎng)基至水深50厘米，以彌補(bǔ)因揮發(fā)消耗的水分。至第9天，藻細(xì)胞密度達(dá)600 X 104cell/mL，停止電機(jī)，通過培養(yǎng)池底部的地漏將藻液放出，將長方形跑道池洗刷干凈后，加入中藥消毒液消毒30分鐘，后進(jìn)入下一輪培養(yǎng)；
[0009] 所述中藥消毒液由以下重量比的物質(zhì)組成--每100份85%乙醇中加入以下重量份的中藥材:板藍(lán)根30~50份、柴胡15~25份、薄荷15~25份、桅子5~15份、艾葉5~15份，中藥消毒液制作方法:將新鮮板藍(lán)根、柴胡、薄荷葉、艾葉、山桅果切碎，于60-70°C下烘干，再用中藥材粉碎機(jī)分別粉碎至70目備用，用托盤天平分別稱取烘干并粉碎的板藍(lán)根120克，柴胡60克，薄荷葉60克，艾葉30克，山桅果30克，置于三角燒瓶中充分混合后，加入1000毫升85%乙醇，浸泡48小時，200篩絹過濾，將清液靜置沉淀36小時，撇去液面漂浮物，取中上層的清液，即為復(fù)方中藥消毒液，密封于黑色試劑瓶中，貼上標(biāo)簽，置于4°C冰禮備用。
[0010]優(yōu)選地，對選用的所述的跑道池，洗刷干凈后進(jìn)行消毒，使用紫外燈消毒，消毒10-20分鐘。
[0011]優(yōu)選地，對選用的所述的跑道池，洗刷干凈后進(jìn)行消毒，使用高壓氮氣噴射消毒，消毒5-10分鐘；
[0012]優(yōu)選地，對選用的所述的跑道池，洗刷干凈后進(jìn)行消毒，使用高壓二氧化碳噴射消毒，消毒5-6分鐘；
[0013]優(yōu)選地，對選用的所述的跑道池，洗刷干凈后分兩個階段消毒，先使用高壓氮氣噴射消毒，消毒2-3分鐘；使用高壓二氧化碳噴射消毒，消毒2-3分鐘；消毒完畢后再進(jìn)行藻類培養(yǎng)。有益結(jié)果:
[0014]為了克服味精廠廢水傳統(tǒng)處理方法缺點，本人發(fā)明了一種利用磷肥廠廢水養(yǎng)殖半裸舟形藻方法，不僅可以低成本處理磷肥廠廢水，廢物利用，變廢為寶，而且可獲得有重要餌料價值的半裸舟形藻，一舉多得，實在是巧妙之極，妙不可言。半裸舟形藻培養(yǎng)傳統(tǒng)的培養(yǎng)基配方是:KN03600 毫 克、Na2HPO4.12H2060 毫克、FeCl312 毫克、Na2S ?03.9H20700 毫克、乙二胺四乙酸鈉4.3毫克、檸檬酸鐵3.9毫克、維生素B120.5微克、維生素B1IO微克、1000毫升消毒的純凈海水，且采用塑料桶或塑料薄膜袋培養(yǎng)，生長慢，易污染，成本高，效益低，操作費力，工作量大，現(xiàn)在我采用改進(jìn)的長方形跑道池培養(yǎng)并在培養(yǎng)基中添加了磷肥廠廢水、硅酸鈉、鉬酸鈉、雞糞浸出液、羧甲基纖維素鈉、海藻酸丙二醇酯、D-異抗血酸鈉、硫代乙醇酸鈉、L-精氨酸、麥飯石粉、920植物生長刺激素、維生素S-3溶液、M-F微量元素溶液、土壤浸出液、海泥浸出液、胰蛋白、三羥甲基氨基甲烷、尿素、羥基乙酸、鈦溶液、酵母浸粉、脫氧膽酸鈉、馬糞浸出液、乙二胺四乙酸鈉、檸檬酸鐵等營養(yǎng)成分，有機(jī)肥和無機(jī)肥混合使用，營養(yǎng)更加全面、均衡，操作方便，成本低，效益高，半裸舟形藻生長速度和產(chǎn)量大幅提高，培養(yǎng)周期縮短，產(chǎn)量提高360%。
[0015]【專利附圖】

【附圖說明】圖1為半裸舟形藻形態(tài)結(jié)構(gòu)圖；
[0016]其中附圖標(biāo)記為:1端結(jié)節(jié),2中央結(jié)節(jié)，3殼縫，4線紋；
[0017]圖2為利用磷肥廠廢水養(yǎng)殖半裸舟形藻方法圖；
[0018]其中附圖標(biāo)記為:5電動機(jī)，6水車的葉輪，7玻璃，8磚墻，9跑道式養(yǎng)殖池。
【具體實施方式】
[0019]I)磷肥廠廢水預(yù)處理方法:磷肥廠廢水用于養(yǎng)藻前需要進(jìn)行預(yù)處理，方法是:先用60目的篩絹過濾廢水，除去漂浮物、玻璃渣子、毛發(fā)、泥沙、樹葉、塑料袋等體積較大固形物，后將污水引入長30米、寬20米、深0.7米的水泥曝氣池中，池子呈東西走向，以接受更多的陽光照射；水深保持在60厘米；按每立方米污水加入50克生石灰的量均勻潑灑生石灰(生石灰最好預(yù)先按I公斤加入5升純水的量在塑料桶中溶解、稀釋、攪拌均勻，再全池潑灑)，隔60分鐘，再按每立方米污水加入80克的量全池潑灑明礬(明礬最好預(yù)先按100克加4升純水的量在塑料桶中溶解、稀釋并攪拌均勻，再全池潑灑)，然后用耙子攪動或充氣攪拌60分鐘，使石灰和明礬充分溶解、混合并與污水中有機(jī)物充分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，然后自然沉淀、發(fā)酵、曝光72小時，撇去水面泡沫等漂浮物，勿攪動池底，取中上層的污水，裝入不透光的黑色塑料桶中，密封，4 °C冰箱或冷庫，保存，備用；
[0020] 2)鈦溶液配法:把736.6毫克草酸鈦，溶解于100毫升蒸餾水中，加入5克氫氧化銨，使之成堿性，發(fā)生沉淀，用離心法將沉淀集中，用20毫升0.05mol/L的硫酸溶解即得。
[0021]3)M-F微量元素溶液配法:硼酸0.2克，氯化錳0.2克，三氧化鑰0.2毫克，硫酸銅
0.02克，硫酸鋅0.02克，氯化鈷0.02克，溶解于1000毫升蒸餾水中，最后滴入一滴濃硫酸，搖勻即得。
[0022]4)維生素S-3溶液配法:硫胺素鹽酸鹽50毫克，尼古丁酸10毫克，泛酸鈣10毫克，對氨基苯甲酸1.0克，維生素H0.1克，肌醇0.5克，葉酸0.2微克，胸間氮苯0.3克，蒸餾水1000毫升；
[0023]5)次氯酸鈉消毒海水方法:取海水，脫脂棉過濾，按I立方米海水中加入漂白粉75克的量加入漂白粉，使海水中有效氯含量達(dá)到20mg/L，充氣12小時后，用硫代硫酸鈉中和余氯。硫代硫酸鈉量由余氯的多少來確定，直到滴入淀粉碘化鉀液不變色為止；
[0024]6)過氧乙酸消毒液制備方法和使用注意事項:市售過氧乙酸原液含量35% (以重量計)，無色液體，有強(qiáng)烈刺激性氣味。使用時應(yīng)用潔凈自來水稀釋成0.2%溶液，浸泡跑道池內(nèi)壁2小時。該品對眼睛、皮膚、粘膜和上呼吸道有強(qiáng)烈刺激作用，頭痛、惡心且易燃，具爆炸性、強(qiáng)腐蝕性、強(qiáng)刺激性，可致人體灼傷，加熱至100°C即猛烈分解，遇火或受熱、受震都可起爆。與還原劑、促進(jìn)劑、有機(jī)物、可燃物等接觸會發(fā)生劇烈反應(yīng)；不可直接用手接觸，操作時應(yīng)帶膠皮手套、口罩和眼鏡，對金屬有腐蝕性，不可用于金屬器械的消毒；原液長期放置可分解，注意保質(zhì)期，應(yīng)貯于塑料桶內(nèi)涼暗處保存。
[0025]7)接種用的半裸舟形藻預(yù)先進(jìn)行提純(本領(lǐng)域常規(guī)方法，只要可實現(xiàn)提純即可，例如凱氏提取法)，以確保接種時藻種處于生長旺盛的指數(shù)生長期；
[0026]8)各種營養(yǎng)鹽要按配方中提供的順序加入，以免發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；
[0027]9)各種無機(jī)物營養(yǎng)鹽和維生素需預(yù)先配成母液且置于4°C冰箱冷藏保存?zhèn)溆?，放置時間不要超過45天；
[0028]10)雞糞浸出液制備方法:把干雞糞、青草、豆餅、米糠、穎殼(五谷雜糧的外殼)和腐殖土按60: 10: 12: 15: 2: I的重量比例混合，攪拌均勻，裝入缸內(nèi)密閉進(jìn)行發(fā)酵，30天后，倒出，在干凈水泥地上，攤成薄層，晾干48小時，后取2公斤，置于塑料水桶，加自來水10公斤，攪拌均勻，用80目篩絹過濾，將清液煮沸5分鐘，冷卻，靜置24小時，取上清液，裝入試劑瓶，貼上標(biāo)簽，置于4°C冰箱，備用；
[0029]11) 土壤抽出液制備方法:到樹林中取松散、富含有機(jī)質(zhì)的上層土壤I公斤，加自來水5升，煮沸20分鐘，將泥漿倒入燒杯中，靜置24小時，后吸取上清液，倒入三角燒瓶中，加棉花塞，煮沸15分鐘，冷卻，靜置沉淀12小時，取上清液即得土壤抽出液，裝入磨口塞試劑瓶，密封，貼上標(biāo)簽，置于4°C冰箱備用；
[0030]12)麥飯石粉是麥飯石的粉制品，由麥飯石原礦經(jīng)過篩選，粉碎，加工成面粉狀，顆粒大小可以通過200目篩絹即可；
[0031]13)920植物生長刺激素為白色結(jié)晶粉末，不易溶解于水，可先用酒精充分溶解(一般每克用50毫升酒精或60度白酒溶解I小時以上)，再按所需濃度兌水稀釋；
[0032]14)馬糞浸出液制備方法:取新鮮馬糞50公斤，加入麩皮3公斤，玉米面I公斤，自來水4升，充分?jǐn)嚢?，堆成圓錐狀，自然發(fā)酵15天，后攤成薄層，陽光下暴曬3天，后取3公斤放入水桶中，加入10升蒸餾水，充分?jǐn)噭颍o置，48小時后100目篩絹過濾，取濾液加熱，煮沸45分鐘，殺死其中的細(xì)菌、霉菌、病毒等，冷卻，沉淀48小時，取上清液，即得馬糞浸出液，裝入磨口塞試劑瓶，密封，置于4°C冰箱備用；
[0033]15)海泥抽取液制備方法:取比較肥沃又不於黑的海泥，以1份泥加2份淡水，充分?jǐn)嚢杈鶆?，靜置1-2分鐘，取上層泥漿于鋁鍋中，按每1000毫升泥漿加I克NaOH的量加入NaOH,煮沸15分鐘。煮時需不斷攪拌均勻，煮后靜置24小時取上清液備用；
[0034]16)所用化學(xué)藥品純度均需化學(xué)純級別；
[0035]17)為了克服目前技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種利用磷肥廠廢水養(yǎng)殖半裸舟形藻的培養(yǎng)基，配方如下:
[0036]18)磷肥廠廢水85毫升，硅酸鈉20微克，鉬酸鈉7微克，雞糞浸出液I毫升，羧甲基纖維素鈉3毫克，海藻酸丙二醇酯2毫克，D-異抗血酸鈉5毫克，硫代乙醇酸鈉6毫克，L-精氨酸3毫克，麥飯石粉 12毫克，920植物生長刺激素3國際單位，維生素S-3溶液1.5毫升,M-F微量兀素溶液1.5毫升,土壤浸出液1.5毫升,海泥浸出液1.8毫升,胰蛋白15暈克，三羥甲基氨基甲烷0.5毫克，尿素6毫克，羥基乙酸2毫升，鈦溶液2毫升，酵母浸粉8暈克，脫氧膽酸鈉3暈克,馬糞浸出液2毫升，乙二胺四乙酸鈉I暈克，檸檬酸鐵3暈克,次氯酸鈉消毒后的純凈海水1000毫升；
[0037]19) 一種利用磷肥廠廢水養(yǎng)殖半裸舟形藻方法，具體步驟如下:
[0038]培養(yǎng)設(shè)備為一長方形跑道池，長50米，寬25米，東西走向，以接收更多太陽光照，跑道池寬度為1.5米,跑道池為混磚結(jié)構(gòu),池水槽深65厘米,工作狀態(tài)時藻液水深50厘米。跑道池中間安一水車，由電動機(jī)帶動，轉(zhuǎn)動的水車驅(qū)動培養(yǎng)液在長方形跑道池中流動，水車轉(zhuǎn)動速度不宜太快，只要保持藻液流動，藻細(xì)胞不下沉即可，太快會形成較大的剪切力而打碎藻細(xì)胞。水槽上方安裝一排玻璃，相當(dāng)于蓋子，這樣培養(yǎng)液處于一種半封閉狀態(tài)，既不阻擋太陽光照射藻液，進(jìn)行光合作用，又能避免空氣中的灰塵、泥沙、樹葉、紙屑、原生動物和其它微生物的孢子等進(jìn)入培養(yǎng)液造成污染。將長方形跑道池用自來水洗刷干凈，后用0.2%過氧乙酸消毒溶液浸泡2小時，再用次氯酸鈉消毒過的海水沖洗2遍，放入培養(yǎng)液至水深45厘米，開動水車轉(zhuǎn)動20分鐘，停止水車，選擇處于指數(shù)生長期、生命力旺盛、潔凈無污染的藻種接種，接種密度4X104cell/mL，接種后開動水車攪動藻液，使藻細(xì)胞均勻分布，補(bǔ)充培養(yǎng)液至水深50厘米，開動水車進(jìn)行培養(yǎng)，室外培養(yǎng)，太陽光照射，最佳溫度25±2°C，最佳光照強(qiáng)度4000-10000LUX，至第7天，再補(bǔ)充新鮮培養(yǎng)液至水深50厘米，以彌補(bǔ)因揮發(fā)消耗的水分。至第9天，藻細(xì)胞密度達(dá)600 X 104cell/mL，停止電機(jī)，通過培養(yǎng)池底部的地漏將藻液放出，將長方形跑道池洗刷干凈后，將長方形跑道池洗刷干凈后，加入中藥消毒液消毒30分鐘，后進(jìn)入下一輪培養(yǎng)；
[0039]所述中藥消毒液由以下重量比的物質(zhì)組成--每100份85%乙醇中加入以下重量份的中藥材:板藍(lán)根30~50份、柴胡15~25份、薄荷15~25份、桅子5~15份、艾葉5~15份，中藥消毒液制作方法:將新鮮板藍(lán)根、柴胡、薄荷葉、艾葉、山桅果切碎，于60-70°C下烘干，再用中藥材粉碎機(jī)分別粉碎至70目備用，用托盤天平分別稱取烘干并粉碎的板藍(lán)根120克，柴胡60克，薄荷葉60克，艾葉30克，山桅果30克，置于三角燒瓶中充分混合后，加入1000毫升85%乙醇，浸泡48小時，200篩絹過濾，將清液靜置沉淀36小時，撇去液面漂浮物，取中上層的清液，即為復(fù)方中藥消毒液，密封于黑色試劑瓶中，貼上標(biāo)簽，置于4°C冰禮備用。
[0040]最后應(yīng)說明的是:以上實施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案，而非對其限制；盡管參照前述實施例對本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解:其依然可以對前述實施 例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改，或者對其中部分技術(shù)特征進(jìn)行等同替換；而這些修改或者替換，并不使相應(yīng)技術(shù)方案的本質(zhì)脫離本發(fā)明實施例技術(shù)方案的精神和范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種利用磷肥廠廢水養(yǎng)殖半裸舟形藻培養(yǎng)基，其特征在于配方如下: 磷肥廠廢水85毫升，硅酸鈉20微克，鉬酸鈉7微克，雞糞浸出液I毫升，羧甲基纖維素鈉3毫克，海藻酸丙二醇酯2毫克，D-異抗血酸鈉5毫克，硫代乙醇酸鈉6毫克，L-精氨酸3毫克，麥飯石粉12毫克，920植物生長刺激素3國際單位，維生素S-3溶液1.5毫升，M-F微量兀素溶液1.5毫升,土壤浸出液1.5毫升,海泥浸出液1.8毫升,胰蛋白15暈克,三輕甲基氨基甲烷0.5毫克，尿素6毫克，羥基乙酸2毫升，鈦溶液2毫升，酵母浸粉8毫克，脫氧膽酸鈉3毫克，馬糞浸出液2毫升，乙二胺四乙酸鈉I毫克，檸檬酸鐵3毫克，次氯酸鈉消毒后的純凈海水1000毫升。
2.一種利用磷肥廠廢水養(yǎng)殖半裸舟形藻方法，其特征在于具體步驟如下: 培養(yǎng)設(shè)備為一長方形跑道池，長50米，寬25米，東西走向，以接收更多太陽光照，跑道池寬度為1.5米,跑道池為混磚結(jié)構(gòu),池水槽深65厘米,工作狀態(tài)時藻液水深50厘米,跑道池中間安一水車，由電動機(jī)帶動，轉(zhuǎn)動的水車驅(qū)動培養(yǎng)液在長方形跑道池中流動，水車轉(zhuǎn)動速度不宜太快，只要保持藻液流動，藻細(xì)胞不下沉即可，太快會形成較大的剪切力而打碎藻細(xì)胞，水槽上方安裝一排玻璃，相當(dāng)于蓋子，這樣培養(yǎng)液處于一種半封閉狀態(tài)，既不阻擋太陽光照射藻液，進(jìn)行光合作用，又能避免空氣中的灰塵、泥沙、樹葉、紙屑、原生動物和微生物的孢子進(jìn)入培養(yǎng)液造成污染，將長方形跑道池用自來水洗刷干凈，后用0.2%過氧乙酸消毒溶液浸泡2小時，再用次氯酸鈉消毒過的海水沖洗2遍，放入權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基至水深45厘米，開動水車轉(zhuǎn)動20分鐘，停止水車，選擇處于指數(shù)生長期、生命力旺盛、潔凈無污染的藻種接種，接種密度4X 104cell/mL，接種后開動水車攪動藻液，使藻細(xì)胞均勻分布，補(bǔ)充培養(yǎng)液至水深50厘米，開動水車進(jìn)行培養(yǎng)，室外培養(yǎng)，太陽光照射，最佳溫度25±2°C，最佳光照強(qiáng)度4000-1OOOOLux，至第7天，再補(bǔ)充新鮮權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基至水深50厘米，以彌補(bǔ)因揮發(fā)消耗的水分，至第9天，藻細(xì)胞密度達(dá)600 X 104cell/mL,停止電機(jī)，通過培養(yǎng)池底部的地漏將藻液放出，將長方形跑道池洗刷干凈后，加入中藥消毒液消毒30分鐘，后進(jìn)入下一輪培養(yǎng)； 所述中藥消毒液由以下重量比的物質(zhì)組成:每100份85%乙醇中加入以下重量份的中藥材:板藍(lán)根30~50份、柴胡15~25份、薄荷15~25份、桅子5~15份、艾葉5~15份，中藥消毒液制作方法:將新鮮板藍(lán)根、柴胡、薄荷葉、艾葉、山桅果切碎，于60-70°C下烘干，再用中藥材粉碎機(jī)分別粉碎至70目備用，用托盤天平分別稱取烘干并粉碎的板藍(lán)根120克，柴胡60克，薄荷葉60克，艾葉30克，山桅果30克，置于三角燒瓶中充分混合后，加入1000毫升85%乙醇，浸泡48小時，200篩絹過濾，將清液靜置沉淀36小時，撇去液面漂浮物，取中上層的清液，即為復(fù)方中藥消毒液，密封于黑色試劑瓶中，貼上標(biāo)簽，置于4°C冰禮備用。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種利用磷肥廠廢水養(yǎng)殖半裸舟形藻方法，其特征在于，對選用的所述的反應(yīng)器，洗刷干凈后進(jìn)行消毒，使用紫外燈消毒，消毒10-20分鐘。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種利用磷肥廠廢水養(yǎng)殖半裸舟形藻方法，其特征在于，對選用的所述的反應(yīng)器，洗刷干凈后進(jìn)行消毒，使用高壓氮氣噴射消毒，消毒5-10分鐘。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種利用磷肥廠廢水養(yǎng)殖半裸舟形藻方法，其特征在于，對選用的所述的反應(yīng)器，洗刷干凈后進(jìn)行消毒，使用高壓二氧化碳噴射消毒，消毒5-6分鐘。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種利用磷肥廠廢水養(yǎng)殖半裸舟形藻方法，其特征在于，對選用的所述的反應(yīng)器，洗刷干凈后分兩個階段消毒，先使用高壓氮氣噴射消毒，消毒2-3分鐘，使用高壓二氧化 碳噴射消毒，消毒2-3分鐘，消毒完畢后再進(jìn)行藻類培養(yǎng)。
【文檔編號】C12N1/12GK103981099SQ201410247884
【公開日】2014年8月13日 申請日期:2014年6月6日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月6日
【發(fā)明者】王培磊 申請人:臨沂大學(xué)