利用罐頭廠廢水培養(yǎng)橢圓雙眉藻的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種利用罐頭廠廢水培養(yǎng)橢圓雙眉藻的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法,不僅可低成本處理罐頭廠廢水,廢物利用且可獲得有重要餌料價值的微藻。橢圓雙眉藻傳統(tǒng)采用廖氏改良培養(yǎng)液并使用開放跑道池培養(yǎng),生長慢、產(chǎn)量低、易污染、效益低,現(xiàn)我采用透明的1.5立方米圓柱狀食品級塑料桶充氣培養(yǎng),成本低,生長快,不易污染,易于操作,且培養(yǎng)基中增加了罐頭廠廢水、硅酸鈉、檸檬酸鐵銨、鉬酸銨、鉻酸鉀、魚粉、羧甲基纖維素鈉、L-精氨酸、磷酸二氫鉀、麥飯石粉、920植物生長刺激素、維生素S-3溶液、M-F微量元素溶液、硫代乙醇酸鈉等,有機肥和無機肥混合使用,營養(yǎng)更全面、均衡,橢圓雙眉藻生長速度大幅提高,產(chǎn)量提高420%。
【專利說明】利用罐頭廠廢水培養(yǎng)橢圓雙眉藻的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域,尤其涉及一種利用罐頭廠廢水培養(yǎng)橢圓雙眉藻的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]罐頭廠每年排放大量廢水,其中含較高濃度的糖、有機酸、果膠、酸、堿等有機物,如不經(jīng)處理直接排入江、河、湖泊、水庫,會大量消耗溶氧,造成水體缺氧,使魚類和其它水生生物死亡。隨著罐頭食品業(yè)的迅速發(fā)展,廢水處理問題日益引起人們的普遍關(guān)注。
[0003]罐頭廠主要有四大類產(chǎn)品,水果、蔬菜、肉類、水產(chǎn)。四種產(chǎn)品所排出的廢水水質(zhì)與水量差異甚大,廢水中主要含有蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物。生產(chǎn)過程中排出廢水可分三類。第一類為較清潔水,如水果蔬菜的浸泡及漂洗水和殺菌后冷卻水,其中部分水消毒后可回收利用。第二類為生產(chǎn)過程中排出的廢水,處理后才能排放。第三類為高濃度廢水,如水果罐頭荸薺預(yù)煮水,蔬菜罐頭蘑菇預(yù)煮水,肉類罐頭預(yù)煮水。水果罐頭加工工藝的主要程序有:洗凈、去皮、裝罐、封罐及殺菌、設(shè)備及器具洗滌等。罐頭加工有較強的季節(jié)性,廢水量變化幅度大,主要包括前處理洗果水,設(shè)備清洗水,地面沖洗水,外排循環(huán)水等。資料顯示,水果罐頭廠平均排水量為3-8m3/t原料,主要含碳水化合物、糖類和果膠,含磷量較高,含氮量較低,pH值5-10,易被微生物降解,有機物和懸浮物濃度高,B0D5/C0Dcr比值高,可生化性好,傳統(tǒng)上采用以下處理方法。
[0004]1、生物自然凈化法
[0005]生物自然凈化法包括穩(wěn)定塘和污水土地處理系統(tǒng),投資少,運行費用低,適合中小城鎮(zhèn)和干旱缺水地區(qū)。水果罐頭生產(chǎn)季節(jié)性較強,更適宜采用穩(wěn)定塘處理,一般春秋為旺季,產(chǎn)生的廢水可儲存在穩(wěn)定塘內(nèi),經(jīng)過冬季水質(zhì)可得到凈化,翌年再排入江河。經(jīng)研究豌豆罐頭廢水經(jīng)五個月儲存后,95%的B0D5被降解。小型罐頭廠廢水排放量少,可以考慮采用穩(wěn)定塘和土地自然凈化法處理,既節(jié)省基建投資和運行管理費,又能綜合利用廢水。缺點是占地面積大,處理時間長,效率低下,處理效果易受天氣影響。
[0006]2、好氧法
[0007]廢水的好氧處理是在提供游離氧的情況下,以好氧微生物處理工藝為主,使有機物穩(wěn)定降解的處理方法。張海林等采用人工合成的輕質(zhì)濾料,利用空氣震蕩方式設(shè)計了一種高負荷生物濾池,即Biosmedi濾池,在上海梅林三得利食品廠污水處理中試驗運行了一年多,效果較好。Biosmedi生物濾池的處理工藝設(shè)計進水量為3500m3/d,濾料溶劑負荷為
3.6kgB0D5/m3.d,進水B0D5為100mg/L,出水B0D5為30mg/L。運行記錄顯示二級生物濾池出水COD全部低于100mg/L,平均值在50mg/L左右,去除率均大于30%,最高達70%。缺點是工程投資大,維護費用高。
[0008]3、厭氧法
[0009]厭氧生物處理法是厭氧微生物在無氧條件下,將有機物轉(zhuǎn)化為甲烷和二氧化碳。梨罐頭廢水處理試驗表明,經(jīng)30小時厭氧消化,有機物去除率達90%,增加堿度并向消化液投加氨鹽或尿素可減少消化時間。德國采用厭氧消化系統(tǒng)處理果汁加工廢水,整個處理流程由一個粗濾系統(tǒng)(去處果皮、沙子等沉淀物)、兩個緩沖池(調(diào)節(jié)pH值及氮、磷等)、一個升流式厭氧污泥床反應(yīng)器(591m3)以及一個好氧池(8.5m3)組成,系統(tǒng)中UASB反應(yīng)器有機負荷CODcr為60kg/m3.d,CODcr去除率達80-90%。但該法工藝復(fù)雜,操作麻煩。
[0010]4、厭氧-好氧組合工藝
[0011]厭氧-好氧處理工藝既能充分發(fā)揮出厭氧微生物承擔(dān)高濃度和高負荷能力優(yōu)勢,又能回收有機能源,好氧微物生長速度快,處理效果好。缺點是操作麻煩,占地面積大,基礎(chǔ)投資大。
[0012]為了解決目前技術(shù)的不足,我發(fā)明了一種利用罐頭廠廢水養(yǎng)殖橢圓雙眉藻方法,既能低成本處理罐頭廠廢水,又能獲得有重要餌料價值的生物產(chǎn)品-橢圓雙眉藻,變廢為寶,化害為利,可大幅度減少廢水處理設(shè)備投資及運轉(zhuǎn)費用,是罐頭廠廢水處理的最佳選擇。
[0013]橢圓雙眉藻屬硅藻門,羽紋硅藻綱,雙殼逢目,羽紋藻科,雙眉藻屬,細胞兩側(cè)對稱,殼面披針形,兩端截頭狀,兩條殼逢發(fā)達,具中央結(jié)節(jié),色素體片狀或帶狀,細胞長20-24微米,寬15-18微米。生長最適溫度25°C,最佳光照強度5000Lux,最適pH值7-8.5,最適鹽度28-32。橢圓雙眉藻是鮑、海參和海膽等名貴水產(chǎn)動物苗種生產(chǎn)的重要餌料,是決定幼苗成活率和幼苗體質(zhì)強壯程度的關(guān)鍵因素。在海參人工育苗中,橢圓雙眉藻影響海參幼蟲附著與變態(tài),藻的數(shù)量和質(zhì)量與海參育苗成敗、產(chǎn)量高低有直接關(guān)系。
[0014]橢圓雙眉藻傳統(tǒng)上采用廖氏改良培養(yǎng)液,即KN0360毫克,Na2Si0320毫克,Na2HPO4.12H2040毫克,1000毫升消毒海水并使用開放長方形跑道池培養(yǎng),生長慢、產(chǎn)量低、投資大、易污染、效益低,現(xiàn)在我采用透明的1.5立方米圓柱狀食品級塑料水桶充氣培養(yǎng),成本低,生長快,不易污染,洗刷方便,易于操作,而且我在培養(yǎng)基中增加了罐頭廠廢水、硅酸鈉、檸檬酸鐵銨、鑰酸銨、鉻酸鉀、魚粉、羧甲基纖維素鈉、黃原膠、海藻酸丙二醇酯、D-異抗壞血酸鈉、谷朊粉、三羥甲基氨基甲烷、尿素、羥基乙酸、鈦溶液、酵母浸粉、脫氧膽酸鈉、土壤浸出液、海泥浸出液、馬糞浸出液、雞糞浸出液、L-精氨酸、磷酸二氫鉀、麥飯石粉、920植物生長刺激素、維生素S-3溶液、M-F微量元素溶液、胰蛋白、過磷酸鈣、山梨醇、甘露醇、硫代乙醇酸鈉等營養(yǎng)成分,有機肥和無機肥混合使用,營養(yǎng)更加全面、均衡,橢圓雙眉藻生長速度大幅提高,培養(yǎng)周期縮短,產(chǎn)量提高420 %。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0015]為了克服目前技術(shù)的不足,本發(fā)明提供了一種利用罐頭廠廢水養(yǎng)殖橢圓雙眉藻的培養(yǎng)基,配方如下:罐頭廠廢水90毫升,硅酸鈉2毫克,檸檬酸鐵銨I毫克,鑰酸銨2毫克,鉻酸鉀I毫克,魚粉20毫克,羧甲基纖維素鈉I毫克,黃原膠3毫克,海藻酸丙二醇酯I毫克,D-異抗壞血酸鈉5毫克,谷朊粉1.2毫克,三羥甲基氨基甲烷0.1毫克,尿素I毫克,羥基乙酸I毫升,鈦溶液I毫升,酵母浸粉10毫克,脫氧膽酸鈉3毫克,土壤浸出液1.5毫升,海泥浸出液1.2毫升,馬糞浸出液2.5毫升,雞糞浸出液1.5毫升,L-精氨酸I毫克,磷酸二氫鉀4毫克,麥飯石粉4毫克,920植物生長刺激素8國際單位,維生素S-3溶液I毫升,M-F微量元素溶液I毫升,胰蛋白4毫克,過磷酸鈣4毫克,山梨醇6毫克,甘露醇3毫克,硫代乙醇酸鈉2毫克,次氯酸鈉消毒后的純凈海水1000毫升;[0016]一種橢圓雙眉藻培養(yǎng)方法,具體步驟如下:
[0017]培養(yǎng)容器為圓柱狀食品級塑料水桶,容積1.5立方米,高密度聚乙烯材料制成(市場有售),無色或白色,有較好的透光性,以利藻類進行光合作用,水桶為一體式構(gòu)造,壁厚6毫米,具有很大的強度和堅固性。水桶頂部有一圓形蓋子,上有旋絲,可旋轉(zhuǎn)而密封。水桶頂部蓋子直徑40厘米,蓋子打上2個孔,一個孔插入充氣管,另一個孔插入排氣管,充氣管和排氣管都是玻璃管,內(nèi)徑8毫米。將反應(yīng)器洗刷干凈,后用蒸餾水潤洗3遍,裝入權(quán)利要求I所述的培養(yǎng)基1000升,充氣混合5分鐘,選擇生命力旺盛、無污染的橢圓雙眉藻接種,接種密度4X 104cell/mL ;蓋子上插入兩根干凈玻璃管,一根較長,65厘米,頂端露出蓋子15厘米,下端通過料管與散氣石連接,用以充氣(散氣石的作用是形成很小的氣泡,避免大氣泡或翻滾的波浪打碎藻細胞);另一根較短,30厘米,兩端露出蓋子即可,用以排氣;兩根玻璃管同樣粗細,內(nèi)徑8毫米;用干凈的透明膠帶將兩根玻璃管固定;長的玻璃管上端用料管與充氣泵相連,充入混合氣體,混合氣體成分和體積比例是空氣:純二氧化碳:臭氧:氨氣=92%: 6%: 1%: 1% ;連續(xù)充氣,充氣量不宜太大,以藻細胞浮起不下沉即可;室外培養(yǎng),太陽光照射,最佳溫度25±2°C,最佳光照強度5000-10000Lux ;培養(yǎng)的前5天,水桶上方搭建一簡易棚,上放置簾子遮擋光線,使光照強度維持在1500-2800LUX,避免強烈陽光對細胞造成的光傷害?’第6天撤掉簾子,較強的光照有利于細胞的生長繁殖和高不飽和脂肪酸的合成;培養(yǎng)至第7天,停止充氣,拿開蓋子,補充新鮮培養(yǎng)基100升,以彌補蒸發(fā)掉的水分,蓋上蓋子,充氣,繼續(xù)培養(yǎng),至第9天,橢圓雙眉藻密度增加至2 50X 104cell/mL,停止培養(yǎng),從底部的水龍頭放出藻液,將培養(yǎng)容器洗刷干凈后,加入中藥消毒液消毒30分鐘,后進入下一輪培養(yǎng);
[0018]所述中藥消毒液由以下重量比的物質(zhì)組成--每100份85%乙醇中加入以下重量份的中藥材:白屈菜20~50份、忍冬藤10~20份、桉樹葉15~25份、桅子5~10份、甘草5~15份,防腐輔料1-3份;中藥消毒液制作方法:將新鮮白屈菜、忍冬藤、桉樹葉、甘草、山桅果切碎,于60-70°C下烘干,再用中藥材粉碎機分別粉碎至80目備用,用托盤天平分別稱取烘干并粉碎的白屈菜120克,忍冬藤60克,桉樹葉葉60克,甘草30克,山桅果30克,防腐輔料6克,置于三角燒瓶中充分混合后,加入1000毫升85%乙醇,浸泡48小時,200篩絹過濾,將清液靜置沉淀32-36小時,撇去液面漂浮物,取中上層的清液,即為復(fù)方中藥消毒液,密封于黑色試劑瓶中,貼上標(biāo)簽,置于4°C冰箱備用。
[0019]優(yōu)選地,對選用的所述的反應(yīng)器,洗刷干凈后進行消毒,使用紫外燈消毒,消毒10-20分鐘。
[0020]優(yōu)選地,對選用的所述的反應(yīng)器,洗刷干凈后進行消毒,使用高壓氮氣噴射消毒,消毒5-10分鐘,
[0021]優(yōu)選地,對選用的所述的反應(yīng)器,洗刷干凈后進行消毒,使用高壓二氧化碳噴射消毒,消毒5-6分鐘,
[0022]優(yōu)選地,對選用的所述的反應(yīng)器,洗刷干凈后分兩個階段消毒,先使用高壓氮氣噴射消毒,消毒2-3分鐘,使用高壓二氧化碳噴射消毒,消毒2-3分鐘,消毒完畢后再進行藻類培養(yǎng)。
[0023]優(yōu)選地,所述防腐輔料為食用鹽。
[0024]優(yōu)選地,所述防腐輔料為出梨酸、尼泊酸乙酯、莽草酸、氫氰酸的混合物,混合比例為重量混合比1:1:1: 0.5。
[0025]優(yōu)選地,所述防腐輔料組分為出梨酸、尼泊酸乙酯、莽草酸、氫氰酸的混合物,混合比例為重量混合比1:1:1: 0.5,所述防腐輔料的制備步驟為:用托盤天平分別稱取出梨酸、尼泊酸乙酯、莽草酸、氫氰酸,混合比例為重量混合比1:1:1: 0.5,置于三角燒瓶中充分混合后,加入混合物30-50倍體積的85%乙醇,搖勻靜置沉淀12-15小時,撇去液面漂浮物,取中上層的清液,即為防腐輔料,密封于黑色試劑瓶中,貼上標(biāo)簽,置于3-4°C冰箱備用。
[0026]有益結(jié)果:
[0027]為了克服罐頭廠廢水傳統(tǒng)處理方法缺點,本人發(fā)明了一種利用罐頭廠廢水培養(yǎng)橢圓雙眉藻的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法,不僅可以低成本處理罐頭廠廢水,廢物利用,變廢為寶,而且可獲得有重要餌料價值的橢圓雙眉藻,一舉多得,實在是巧妙之極,妙不可言。橢圓雙眉藻傳統(tǒng)上采用廖氏改良培養(yǎng)液即KN0360毫克,Na2Si0320毫克,Na2HPO4.12H2040毫克,1000毫升消毒海水并使用開放長方形跑道池培養(yǎng),生長慢、產(chǎn)量低、投資大、易污染、效益低,現(xiàn)在我采用透明的1.5立方米圓柱狀食品級PE塑料水桶充氣培養(yǎng),成本低,生長快,不易污染,洗刷方便,易于操作,而且我在培養(yǎng)基中增加了罐頭廠廢水、硅酸鈉、檸檬酸鐵銨、鑰酸銨、鉻酸鉀、魚粉、羧甲基纖維素鈉、黃原膠、海藻酸丙二醇酯、D-異抗壞血酸鈉、谷朊粉、三羥甲基氨基甲烷、尿素、羥基乙酸、鈦溶液、酵母浸粉、脫氧膽酸鈉、土壤浸出液、海泥浸出液、馬糞浸出液、雞糞浸出液、L-精氨酸、磷酸二氫鉀、麥飯石粉、920植物生長刺激素、維生素S-3溶液、M-F微量元素溶液、胰 蛋白、過磷酸鈣、山梨醇、甘露醇、硫代乙醇酸鈉等營養(yǎng)成分,有機肥和無機肥混合使用,營養(yǎng)更加全面、均衡,橢圓雙眉藻生長速度大幅提高,培養(yǎng)周期縮短,產(chǎn)量提高420%。
[0028]【專利附圖】
【附圖說明】圖1為橢圓雙眉藻形態(tài)結(jié)構(gòu)圖;
[0029]其中附圖標(biāo)記為:1細胞壁,2色素體,3中央結(jié)節(jié),4殼縫;
[0030]圖2為一種利用罐頭廠廢水培養(yǎng)橢圓雙眉藻的培養(yǎng)方法圖;
[0031]其中附圖標(biāo)記為:5充氣管,6塑料水桶,7藻液,8散氣石,9水龍頭,10排氣管。
【具體實施方式】
[0032]罐頭廠廢水預(yù)處理方法:罐頭廠廢水用于養(yǎng)藻前需要進行預(yù)處理,方法是:先用60目的篩絹過濾廢水,除去漂浮物、玻璃渣子、毛發(fā)、泥沙、樹葉、塑料袋等體積較大固形物,后將污水引入長30米、寬20米、深0.7米的水泥曝氣池中,池子呈東西走向,以接受更多的陽光照射;水深保持在60厘米;按每立方米污水加入50克生石灰的量均勻潑灑生石灰(生石灰最好預(yù)先按I公斤加入5升純水的量在塑料桶中溶解、稀釋、攪拌均勻,再全池潑灑),隔60分鐘,再按每立方米污水加入80克的量全池潑灑明礬(明礬最好預(yù)先按100克加4升純水的量在塑料桶中溶解、稀釋并攪拌均勻,再全池潑灑),然后用耙子攪動或充氣攪拌60分鐘,使石灰和明礬充分溶解、混合并與污水中有機物充分發(fā)生化學(xué)反應(yīng),然后自然沉淀、發(fā)酵、曝光72小時,撇去水面泡沫等漂浮物,勿攪動池底,取中上層的污水,裝入不透光的黑色塑料桶中,密封,4°C冰箱或冷庫,保存,備用;
[0033]次氯酸鈉消毒海水方法:取海水,脫脂棉過濾,按I立方米海水中加入漂白粉75克的量加入漂白粉,使海水中有效氯含量達到20mg/L,充氣混合12小時后,用硫代硫酸鈉中和余氯。硫代硫酸鈉量由余氯的多少來確定,直到滴入淀粉碘化鉀液不變色為止;
[0034]過氧乙酸消毒液制備方法和使用注意事項:市售過氧乙酸原液含量35% (以重量計),無色液體,有強烈刺激性氣味。使用時應(yīng)用潔凈自來水稀釋成0.2%溶液,浸泡跑道池內(nèi)壁2小時。該品對眼睛、皮膚、粘膜和上呼吸道有強烈刺激作用,頭痛、惡心且易燃,具爆炸性、強腐蝕性、強刺激性,可致人體灼傷,加熱至100°C即猛烈分解,遇火或受熱、受震都可起爆。與還原劑、促進劑、有機物、可燃物等接觸會發(fā)生劇烈反應(yīng);不可直接用手接觸,操作時應(yīng)帶膠皮手套、口罩和眼鏡,對金屬有腐蝕性,不可用于金屬器械的消毒;原液長期放置可分解,注意保質(zhì)期,應(yīng)貯于塑料桶內(nèi)涼暗處保存。
[0035]接種用的橢圓雙眉藻預(yù)先進行提純(本領(lǐng)域常規(guī)方法,只要可實現(xiàn)提純即可,例如凱氏提取法),以確保接種時藻種處于生長旺盛的指數(shù)生長期;
[0036]各種營養(yǎng)鹽要按配方中提供的順序加入,以免發(fā)生化學(xué)反應(yīng);
[0037]各種無機營養(yǎng)鹽和維生素需預(yù)先配成母液且置于4°C冰箱冷藏保存?zhèn)溆?,放置時間不要超過45天;
[0038]雞糞浸出液制備方法:把干雞糞、青草、豆餅、米糠、穎殼(五谷雜糧的外殼)和腐殖土按60: 10: 12: 15: 2: I的重量比例混合,攪拌均勻,裝入缸內(nèi)密閉進行發(fā)酵,30天后,倒出,在干凈水泥地上,攤成薄層,晾干48小時,后取2公斤,置于塑料水桶,加自來水10公斤,攪拌均勻,用80目篩絹過濾,將清液煮沸5分鐘,冷卻,靜置24小時,取上清液,裝入試劑瓶,貼上標(biāo)簽,置于4°C冰箱,備用;
[0039]土壤抽出液制備方法:取樹林中松散、富含有機質(zhì)的上層土壤I公斤,加自來水5升,煮沸20分鐘,將泥漿倒入燒杯中,靜置24小時,后吸取上清液,倒入三角燒瓶中,加棉花塞,煮沸15分鐘,冷卻,靜置沉淀12小時,取上清液即得土壤抽出液,裝入磨口塞試劑瓶,密封,貼上標(biāo)簽,置于4°C冰箱備用;
[0040]麥飯石粉由麥飯石原礦經(jīng)過篩選、粉碎加工成面粉狀,顆粒大小可以通過200目篩絹即可;
[0041]920植物生長刺激素為白色結(jié)晶粉末,不易溶解于水,可先用酒精充分溶解(一般每克用50毫升酒精或60度白酒溶解I小時以上),再按所需濃度兌水稀釋;
[0042]馬糞浸出液制備方法:取新鮮馬糞50公斤,加入麩皮3公斤,玉米面I公斤,自來水4升,充分?jǐn)嚢?,堆成圓錐狀,自然發(fā)酵15天,后攤成薄層,陽光下暴曬3天,后取3公斤放入水桶中,加入10升蒸餾水,充分?jǐn)噭颍o置,48小時后100目篩絹過濾,取濾液加熱,煮沸45分鐘,殺死其中的細菌、霉菌、病毒等,冷卻,沉淀24小時,取上清液,即得馬糞浸出液,裝入磨口塞試劑瓶,密封,置于4°C冰箱或冷庫備用;
[0043]海泥抽取液制備方法:取比較肥沃又不於黑的海泥,以1份泥加2份淡水,充分?jǐn)嚢杈鶆?,靜置1-2分鐘,取上層泥漿于鋁鍋中,按每1000毫升泥漿加I克NaOH的量加入NaOH,煮沸25分鐘。煮時需不斷攪拌均勻,煮后靜置24小時取上清液,密封,置于4°C冰箱或冷庫備用;
[0044]鈦溶液配法:把736.6毫克草酸鈦,溶解于100毫升蒸餾水中,加入5克氫氧化銨,使之成堿性,發(fā)生沉淀,用離心法將沉淀集中,用20毫升0.05mol/L的硫酸溶解即得;
[0045]M-F微量元素溶液配法:硼酸0.2克,氯化錳0.2克,三氧化鑰0.2毫克,硫酸銅
0.02克,硫酸鋅0.02克,氯化鈷0.02克,溶解于1000毫升蒸餾水中,最后滴入一滴濃硫酸,搖勻即得;
[0046]維生素S-3溶液配法:硫胺素鹽酸鹽50毫克,尼古丁酸10毫克,泛酸鈣10毫克,對氨基苯甲酸1.0克,維生素H0.1克,肌醇0.5克,葉酸0.2微克,胸間氮苯0.3克,蒸餾水1000毫升;
[0047]所用化學(xué)藥品純度均需化學(xué)純級別;
[0048]一種利用罐頭廠廢水養(yǎng)殖橢圓雙眉藻的培養(yǎng)基,配方如下:罐頭廠廢水90毫升,硅酸鈉2毫克,檸檬酸鐵銨I毫克,鑰酸銨2毫克,鉻酸鉀I毫克,魚粉20毫克,羧甲基纖維素鈉I毫克,黃原膠3毫克,海藻酸丙二醇酯I毫克,D-異抗壞血酸鈉5毫克,谷朊粉1.2毫克,三羥甲基氨基甲烷0.1毫克,尿素I毫克,羥基乙酸I毫升,鈦溶液I毫升,酵母浸粉10毫克,脫氧膽酸鈉3毫克,土壤浸出液1.5毫升,海泥浸出液1.2毫升,馬糞浸出液2.5毫升,雞糞浸出液1.5毫升,L-精氨酸I毫克,磷酸二氫鉀4毫克,麥飯石粉4毫克,920植物生長刺激素8國際單位,維生素S-3溶液I毫升,M-F微量兀素溶液I毫升,胰蛋白4暈克,過磷酸鈣4毫克,山梨醇6毫克,甘露醇3毫克,硫代乙醇酸鈉2毫克,次氯酸鈉消毒后的純凈海水1000毫升;
[0049]一種橢圓雙眉藻培養(yǎng)方法,具體步驟如下:
[0050]培養(yǎng)容器為圓柱狀食品級塑料水桶,容積1.5立方米,高密度聚乙烯材料制成(市場有售),無色或白色,有較好的透光性,以利藻類進行光合作用,水桶為一體式構(gòu)造,壁厚6毫米,具有很大的強度和堅固性。水桶頂部有一圓形蓋子,上有旋絲,可旋轉(zhuǎn)而密封。水桶頂部蓋子直徑40厘米,蓋子打上2個孔,一個孔插入充氣管,另一個孔插入排氣管,充氣管和排氣管都是玻璃管,內(nèi)徑8毫米。將反應(yīng)器洗刷干凈,后用蒸餾水潤洗3遍,裝入權(quán)利要求I所述的培養(yǎng)基1000升,充氣混合5分鐘,選擇生命力旺盛、無污染的橢圓雙眉藻接種,接種密度4X 104cell/mL ;蓋子上插入兩根干凈玻璃管,一根較長,65厘米,頂端露出蓋子15厘米,下端通過料管與散氣石連接,用以充氣(散氣石的作用是形成很小的氣泡,避免大氣泡或翻滾的波浪打碎藻細胞);另一根較短,30厘米,兩端露出蓋子即可,用以排氣;兩根玻璃管同樣粗細,內(nèi)徑8毫米;用干凈的透明膠帶將兩根玻璃管固定;長的玻璃管上端用料管與充氣泵相連,充入混合氣體,混合氣體成分和體積比例是空氣:純二氧化碳:臭氧:氨氣=92%: 6%: 1%: 1% ;連續(xù)充氣,充氣量不宜太大,以藻細胞浮起不下沉即可;室外培養(yǎng),太陽光照射,最佳溫度25±2°C,最佳光照強度5000-10000Lux ;培養(yǎng)的前5天,水桶上方搭建一簡易棚,上放置簾子遮擋光線,使光照強度維持在1500-2800LUX,避免強烈陽光對細胞造成的光傷害?’第6天撤掉簾子,較強的光照有利于細胞的生長繁殖和高不飽和脂肪酸的合成;培養(yǎng)至第7天,停止充氣,拿開蓋子,補充新鮮培養(yǎng)基100升,以彌補蒸發(fā)掉的水分,蓋上蓋子,充氣,繼續(xù)培養(yǎng),至第9天,橢圓雙眉藻密度增加至250X 104cell/mL,停止培養(yǎng),從底部的水龍頭放出藻液,將培養(yǎng)容器洗刷干凈后,加入中藥消毒液消毒30分鐘,后進入下一輪培養(yǎng);
[0051]所述中藥消毒液由以下重量比的物質(zhì)組成--每100份85%乙醇中加入以下重量份的中藥材:白屈菜20~50份、忍冬藤10~20份、桉樹葉15~25份、桅子5~10份、甘草5~15份,防腐輔料1-3份;中藥消毒液制作方法:將新鮮白屈菜、忍冬藤、桉樹葉、甘草、山桅果切碎,于60-70°C下烘干,再用中藥材粉碎機分別粉碎至80目備用,用托盤天平分別稱取烘干并粉碎的白屈菜120克,忍冬藤60克,桉樹葉葉60克,甘草30克,山桅果30克,防腐輔料6克,置于三角燒瓶中充分混合后,加入1000毫升85%乙醇,浸泡48小時,200篩絹過濾,將清液靜置沉淀32-36小時,撇去液面漂浮物,取中上層的清液,即為復(fù)方中藥消毒液,密封于黑色試劑瓶中,貼上標(biāo)簽,置于4°C冰箱備用。
[0052]優(yōu)選地,對選用的所述的反應(yīng)器,洗刷干凈后進行消毒,使用紫外燈消毒,消毒10-20分鐘。
[0053]優(yōu)選地,對選用的所述的反應(yīng)器,洗刷干凈后進行消毒,使用高壓氮氣噴射消毒,消毒5-10分鐘,
[0054]優(yōu)選地,對選用的所述的反應(yīng)器,洗刷干凈后進行消毒,使用高壓二氧化碳噴射消毒,消毒5-6分鐘,
[0055]優(yōu)選地,對選用的所述的反應(yīng)器,洗刷干凈后分兩個階段消毒,先使用高壓氮氣噴射消毒,消毒2-3分鐘,使用高壓二氧化碳噴射消毒,消毒2-3分鐘,消毒完畢后再進行藻類培養(yǎng)。
[0056]優(yōu)選地,所述防腐輔料為食用鹽。
[0057]優(yōu)選地,所述防腐輔料為出梨酸、尼泊酸乙酯、莽草酸、氫氰酸的混合物,混合比例為重量混合比1:1:1: 0.5。
[0058]優(yōu)選地,所述防腐輔料組分為出梨酸、尼泊酸乙酯、莽草酸、氫氰酸的混合物,混合比例為重量混合比1:1:1: 0.5,所述防腐輔料的制備步驟為:用托盤天平分別稱取出梨酸、尼泊酸乙酯、莽草酸、氫氰酸,混合比例為重量混合比1:1:1: 0.5,置于三角燒瓶中充分混合后,加入混合物30-50倍體積的85%乙醇,搖勻靜置沉淀12-15小時,撇去液面漂浮物,取中上層的清液,即為防腐輔料,密封于黑色試劑瓶中,貼上標(biāo)簽,置于3-4°C冰箱備用。
[0059]最后應(yīng)說明的是:以上實施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案,而非對其限制;盡管參照前述實施例對本發(fā)明進行了詳細的說明,本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解:其依然可以對前述實施例所記載的技術(shù)方案進行修改,或者對其中部分技術(shù)特征進行等同替換;而這些修改或者替換,并不使相應(yīng)技術(shù)方案的本質(zhì)脫離本發(fā)明實施例技術(shù)方案的精神和范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種利用罐頭廠廢水養(yǎng)殖橢圓雙眉藻的培養(yǎng)基,其特征在于配方如下:罐頭廠廢水90毫升,硅酸鈉2毫克,檸檬酸鐵銨I毫克,鑰酸銨2毫克,鉻酸鉀I毫克,魚粉20毫克,羧甲基纖維素鈉I毫克,黃原膠3毫克,海藻酸丙二醇酯I毫克,D-異抗壞血酸鈉5毫克,谷朊粉1.2毫克,三羥甲基氨基甲烷0.1毫克,尿素I毫克,羥基乙酸I毫升,鈦溶液I毫升,酵母浸粉10毫克,脫氧膽酸鈉3毫克,土壤浸出液1.5毫升,海泥浸出液1.2毫升,馬糞浸出液2.5毫升,雞糞浸出液1.5毫升,L-精氨酸I毫克,磷酸二氫鉀4毫克,麥飯石粉4毫克,920植物生長刺激素8國際單位,維生素S-3溶液I毫升,M-F微量兀素溶液I毫升,胰蛋白4毫克,過磷酸鈣4毫克,山梨醇6毫克,甘露醇3毫克,硫代乙醇酸鈉2毫克,次氯酸鈉消毒后的純凈海水1000毫升。
2.一種利用罐頭廠廢水養(yǎng)殖橢圓雙眉藻的方法,其特征在于具體步驟如下: 培養(yǎng)容器為圓柱狀食品級塑料水桶,容積1.5立方米,高密度聚乙烯材料制成(市場有售),無色或白色,有較好的透光性,以利藻類進行光合作用,水桶為一體式構(gòu)造,壁厚6毫米,具有很大的強度和堅固性,水桶頂部有一圓形蓋子,上有旋絲,可旋轉(zhuǎn)而密封,水桶頂部蓋子直徑40厘米,蓋子打上2個孔,一個孔插入充氣管,另一個孔插入排氣管,充氣管和排氣管都是玻璃管,內(nèi)徑8毫米,將反應(yīng)器洗刷干凈,后用蒸餾水潤洗3遍,裝入權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基1000升,充氣混合5分鐘,選擇生命力旺盛、無污染的橢圓雙眉藻接種,接種密度4X104cell/mL,蓋子上插入兩根干凈玻璃管,一根較長,65厘米,頂端露出蓋子15厘米,下端通過料管與散氣石連接,用以充氣(散氣石的作用是形成很小的氣泡,避免大氣泡或翻滾的波浪打碎藻細胞),另一根較短,30厘米,兩端露出蓋子即可,用以排氣,兩根玻璃管同樣粗細,內(nèi)徑8毫米,用干凈的透明膠帶將兩根玻璃管固定,長的玻璃管上端用料管與充氣泵相連,充入混合氣體,混合氣體成分和體積比例是空氣:純二氧化碳:臭氧:氨氣=92%: 6%: 1%: 1%;連續(xù)充氣,充氣量不宜太大,以藻細胞浮起不下沉即可;室外培養(yǎng),太陽光照射,最佳溫度25±2°C,最佳光照強度5000-10000LUX ;培養(yǎng)的前5天,水桶上方搭建一簡易棚,上放置簾子遮擋光線,使光照強度維持在1500-2800LUX,避免強烈陽光對細胞造成的光傷害,第6天撤掉簾子,較強的光照有利于細胞的生長繁殖和高不飽和脂肪酸的合成,培養(yǎng)至第7天,停止充氣,拿開蓋子,補充新鮮培養(yǎng)基100升,以彌補蒸發(fā)掉的水分,蓋上蓋子,充氣,繼續(xù)培養(yǎng),至第9天,橢圓雙眉藻密度增加至250 X 104cell/mL,停止培養(yǎng),從底部的水龍頭放出藻液,將培養(yǎng)容器洗刷干凈后,加入中藥消毒液消毒30分鐘,后進入下一輪培養(yǎng)。 所述中藥消毒液由以下重量比的物質(zhì)組成:每100份85 %乙醇中加入以下重量份的中藥材:白屈菜20~50份、忍冬藤10~20份、按樹葉15~25份、桅子5~10份、甘草5~15份,防腐輔料1-3份;中藥消毒液制作方法:將新鮮白屈菜、忍冬藤、桉樹葉、甘草、山桅果切碎,于60-70°C下烘干,再用中藥材粉碎機分別粉碎至80目備用,用托盤天平分別稱取烘干并粉碎的白屈菜120克,忍冬藤60克,桉樹葉葉60克,甘草30克,山桅果30克,防腐輔料6克,置于三角燒瓶中充分混合后,加入1000毫升85%乙醇,浸泡48小時,200篩絹過濾,將清液靜置沉淀32-36小時,撇去液面漂浮物,取中上層的清液,即為復(fù)方中藥消毒液,密封于黑色試劑瓶 中,貼上標(biāo)簽,置于4°C冰箱備用。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種利用罐頭廠廢水養(yǎng)殖橢圓雙眉藻的方法,其特征在于,對選用的所述的反應(yīng)器,洗刷干凈后進行消毒,使用紫外燈消毒,消毒10-20分鐘。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種利用罐頭廠廢水養(yǎng)殖橢圓雙眉藻的方法,其特征在于,對選用的所述的反應(yīng)器,洗刷干凈后進行消毒,使用高壓氮氣噴射消毒,消毒5-10分鐘。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種利用罐頭廠廢水養(yǎng)殖橢圓雙眉藻的方法,其特征在于,對選用的所述的反應(yīng)器,洗刷干凈后進行消毒,使用高壓二氧化碳噴射消毒,消毒5-6分鐘。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種利用罐頭廠廢水養(yǎng)殖橢圓雙眉藻的方法,其特征在于,對選用的所述的反應(yīng)器,洗刷干凈后分兩個階段消毒,先使用高壓氮氣噴射消毒,消毒2-3分鐘,使用高壓二氧化碳噴射消毒,消毒2-3分鐘,消毒完畢后再進行藻類培養(yǎng)。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種利用罐頭廠廢水養(yǎng)殖橢圓雙眉藻的方法,其特征在于:所述防腐輔料為食用鹽。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種利用罐頭廠廢水養(yǎng)殖橢圓雙眉藻的方法,其特征在于:所述防腐輔料為出梨酸、尼泊酸乙酯、莽草酸、氫氰酸的混合物,混合比例為重量混合比1:1:1: 0.5。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種利用罐頭廠廢水養(yǎng)殖橢圓雙眉藻的方法,其特征在于:所述防腐輔料組分為出梨酸、尼泊酸乙酯、莽草酸、氫氰酸的混合物,混合比例為重量混合比1:1:1: 0.5,所述防腐輔料的制備步驟為:用托盤天平分別稱取出梨酸、尼泊酸乙酯、莽草酸、 氫氰酸,混合比例為重量混合比1:1:1: 0.5,置于三角燒瓶中充分混合后,加入混合物30-50倍體積的85%乙醇,搖勻靜置沉淀12-15小時,撇去液面漂浮物,取中上層的清液,即為防腐輔料,密封于黑色試劑瓶中,貼上標(biāo)簽,置于3-4°C冰箱備用。
【文檔編號】C12N1/12GK104017730SQ201410280626
【公開日】2014年9月3日 申請日期:2014年6月23日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月23日
【發(fā)明者】王培磊 申請人:臨沂大學(xué)