一種檢測(cè)scn11a基因第673位堿基突變的試劑盒的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種變異的SCN11A基因，即人類周圍神經(jīng)發(fā)作性疼痛致病基因SCN11A，其特征在于該變異的SCN11A基因的第673位堿基由野生型的C變異為T；或該變異的SCN11A基因的第2423位堿基由野生型的C變異為G。本發(fā)明還提供了一種檢測(cè)來(lái)源于人體生物樣本中是否存在所述基因的突變方法及檢測(cè)試劑盒。本發(fā)明提供的變異的人類SCN11A基因可用于制備人類周圍神經(jīng)發(fā)作性疼痛基因診斷芯片，變異的人類SCN11A基因所編碼的蛋白質(zhì)可作為治療人類周圍神經(jīng)發(fā)作性疼痛的藥物靶點(diǎn)。
【專利說(shuō)明】-種檢測(cè)SCN11A基因第673位堿基突變的試劑盒
[0001] 本申請(qǐng)是201310070553X號(hào)專利申請(qǐng)的分案申請(qǐng)。原申請(qǐng)?zhí)枮?01310070553X ; 原申請(qǐng)日為2013年3月6日；原發(fā)明名稱為人類周圍神經(jīng)發(fā)作性疼痛致病基因及其編碼蛋 白。

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0002] 本發(fā)明涉及一種人體變異的基因，即人類周圍神經(jīng)發(fā)作性疼痛致病基因 SCN11A。 本發(fā)明還涉及這種變異基因及其編碼的蛋白在檢測(cè)和作為治療人類周圍神經(jīng)發(fā)作性疼痛 疾病的藥物靶點(diǎn)中的作用和意義。

【背景技術(shù)】
[0003] 疼痛是在人體受到各種傷害性刺激時(shí)所產(chǎn)生的感覺，是存在于人體內(nèi)部的警戒與 保護(hù)系統(tǒng)，它能引起機(jī)體產(chǎn)生被動(dòng)性防御反應(yīng)以躲避傷害刺激，對(duì)機(jī)體具有保護(hù)作用。但 是過(guò)度的傷害性刺激不但會(huì)引起強(qiáng)烈的疼痛感覺而且還會(huì)導(dǎo)致機(jī)體生理功能的紊亂，甚 至休克。人類疼痛分為急性疼痛和慢性疼痛，急性痛是人體免受傷害，是組織損傷的生理性 預(yù)警信號(hào)。然而慢性疼痛是一種病理狀態(tài)，依據(jù)疼痛病理機(jī)制，慢性疼痛可分為傷害性或炎 癥性疼痛（對(duì)疼痛刺激的適當(dāng)反應(yīng)）和神經(jīng)性疼痛（由神經(jīng)系統(tǒng)損害誘發(fā)的不適當(dāng)反應(yīng)）。 1994國(guó)際疼痛研究會(huì)將神經(jīng)性疼痛（neurogenic pain)定義為"周圍或中樞神經(jīng)系統(tǒng)原發(fā) 性或繼發(fā)性損害或功能障礙或短暫紊亂引起的疼痛"。神經(jīng)性疼痛一直是困擾醫(yī)學(xué)界的難 題，發(fā)病機(jī)理不是十分清楚。周圍神經(jīng)性痛常涉及小直徑神經(jīng)纖維的信號(hào)傳遞，目前發(fā)現(xiàn)三 種鈉離子通道蛋白NavL 7、NavL 8和NavL 9在周圍神經(jīng)中大量表達(dá)，2004年中國(guó)醫(yī)學(xué)科 學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院沈巖院士等研究人員從遺傳上將NavL 7鈉離子通道蛋白獲得性功能 突變與人類疼痛關(guān)聯(lián)起來(lái)，隨后世界其他研究小組發(fā)現(xiàn)30%的小直徑神經(jīng)纖維痛的患者是 由該蛋白獲得性功能突變所造成的。2012年10月31號(hào)美國(guó)耶魯大學(xué)醫(yī)學(xué)院Waxman所領(lǐng) 導(dǎo)的研究團(tuán)隊(duì)，在104例先天性神經(jīng)痛患者中發(fā)現(xiàn)7個(gè)NavL 8鈉離子通道蛋白的獲得性功 能突變，占6. 7%。然而還有許多疼痛患者的致病原因不清楚。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的任務(wù)是提供一種變異的SCNllA基因及其編碼的蛋白質(zhì)。
[0005] 本發(fā)明的另一個(gè)任務(wù)是提供檢測(cè)人類SCNllA基因突變的方法及試劑盒。
[0006] 本發(fā)明的又一個(gè)任務(wù)是提供這種變異的SCNllA基因在制備人類周圍神經(jīng)發(fā)作性 疼痛基因診斷芯片中的應(yīng)用。
[0007] 實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的技術(shù)方案是：
[0008] 本發(fā)明提供的變異的SCNllA基因是：
[0009] (1)該變異的SCNllA基因的第673位堿基由野生型的C變異為T，其核苷酸序列 為 SEQ ID NO :3 所示；
[0010] (2)該變異的SCNllA基因的第2423位堿基由野生型的C變異為G，其核苷酸序列 為 SEQ ID NO :5 所示。
[0011] 其所編碼的蛋白質(zhì)的氨基酸序列分別為SEQ ID N0:4和6所示（p.R225C、 P.A808G)。該蛋白質(zhì)可作為治療人類周圍神經(jīng)發(fā)作性疼痛的藥物靶點(diǎn)。本發(fā)明提供的變異 的人類SCNllA基因可用于制備人類周圍神經(jīng)發(fā)作性疼痛基因診斷芯片。
[0012] 本發(fā)明提供的檢測(cè)人類SCNllA基因突變的試劑盒，含有以下21對(duì)引物中的一對(duì) 或幾對(duì)或全部：
[0013]
[0014]

【權(quán)利要求】
1. 一種體外檢測(cè)SCN11A基因第673位堿基突變的試劑盒，含有以下引物： F:5'CAAGCCCATGCCTTCCCTGT 3' R:5'TTGCTTTCAAAGCTCTGAACACCC 3' 。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，還含有Taq酶、PCR反應(yīng)緩沖液、dNTP、 限制性內(nèi)切酶Ben I和/或Hind III。
【文檔編號(hào)】C12Q1/68GK104293911SQ201410356343
【公開日】2015年1月21日 申請(qǐng)日期:2013年3月6日 優(yōu)先權(quán)日:2013年3月6日
【發(fā)明者】劉靜宇, 張學(xué), 姚鏡 申請(qǐng)人:華中科技大學(xué)