一種長(zhǎng)孢洛德酵母及其應(yīng)用的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種長(zhǎng)孢洛德酵母及其應(yīng)用，屬微生物應(yīng)用【技術(shù)領(lǐng)域】。本發(fā)明的菌株分類(lèi)命名為長(zhǎng)孢洛德酵母Lodderomyces?elongisporus?OF-08；于2012年10月08日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)為CGMCC?No.6645。OF-08菌株的生理生化特征及26S?rDNA基因序列(此序列在GeneBank數(shù)據(jù)庫(kù)中的序列號(hào)為JQ916053)是鑒別該菌株的主要特征依據(jù)。噴施該菌株制劑可以使煙葉香氣品質(zhì)、還原糖含量增加,使蛋白質(zhì)、纖維素、總氮、煙堿含量下降。因而，糖氮比、糖堿比和氮堿比的比值趨于上升,使化學(xué)品質(zhì)更為協(xié)調(diào)，煙葉評(píng)吸品質(zhì)得到提升。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種長(zhǎng)孢洛德酵母及其應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于應(yīng)用微生物【技術(shù)領(lǐng)域】，更具體說(shuō)，本發(fā)明涉及一種能提高烤煙品質(zhì)的長(zhǎng)孢洛德酵母。同時(shí)，本發(fā)明還涉及所述的長(zhǎng)孢洛德酵母在煙草生產(chǎn)中的用途。

【背景技術(shù)】
[0002]煙草是我國(guó)財(cái)政的重要支柱之一。近二十年來(lái)，每年煙草稅收占國(guó)家財(cái)政收入的10%左右，對(duì)我國(guó)的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)發(fā)展作出了巨大貢獻(xiàn)。要推進(jìn)我國(guó)煙草進(jìn)程，實(shí)現(xiàn)卷煙工業(yè)可持續(xù)發(fā)展，就必須走煙草科技創(chuàng)新之路。國(guó)家煙草專(zhuān)賣(mài)局在“十一五”中國(guó)卷煙科技發(fā)展綱要第7條明確指出，要“攻克影響煙葉香氣質(zhì)、香氣量的關(guān)鍵技術(shù)”，縮小與國(guó)外煙葉質(zhì)量差距，以提高國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力。
[0003]煙葉發(fā)酵是煙草加工過(guò)程中的主要工藝環(huán)節(jié)。改進(jìn)煙葉發(fā)酵技術(shù)，增進(jìn)煙葉的香吃味質(zhì)量，已成為卷煙工業(yè)提高加工工藝技術(shù)水平的重要手段。特別是在醇化發(fā)酵過(guò)程中，煙葉主要化學(xué)成分會(huì)發(fā)生相應(yīng)的變化，青雜氣和刺激性逐漸降低，香氣顯露，吃味醇和，色澤均勻并加深，故而煙葉醇化在卷煙工業(yè)中對(duì)煙葉質(zhì)量的改變起著非常重要的作用。
[0004]研究表明，煙草中存在大量的微生物群落，包括細(xì)菌、放線(xiàn)菌、真菌和酵母等，其中以細(xì)菌為主，且芽孢桿菌屬是優(yōu)勢(shì)菌屬。煙葉中的微生物種類(lèi)、數(shù)量不僅因不同煙草品種和不同時(shí)期而有所不同， 而且與醇化條件和醇化效果密切相關(guān)。微生物的作用貫穿煙草發(fā)酵、醇化的始終，對(duì)改善煙葉品質(zhì)起著重要的作用。
[0005]國(guó)內(nèi)外煙草工作者在煙草微生物分離和利用微生物發(fā)酵改善煙草品質(zhì)、改進(jìn)煙葉發(fā)酵進(jìn)程、縮短煙葉發(fā)酵周期等方面做了很多工作，特別是通過(guò)施加選育的微生物及制劑于煙草中，通過(guò)微生物的代謝活動(dòng)降低煙堿等有害成分，增加煙草香吃味，提高煙草質(zhì)量坐寸ο
[0006]目前，關(guān)于添加微生物提高煙葉品質(zhì)的研究已有報(bào)道。但經(jīng)文獻(xiàn)檢索，尚未發(fā)現(xiàn)與本
【發(fā)明內(nèi)容】
相同文獻(xiàn)的公開(kāi)報(bào)道。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的目的在于針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，從煙葉表面篩選具有工業(yè)化生產(chǎn)前景的菌株，提供一種能提高烤煙品質(zhì)的長(zhǎng)孢洛德酵母。
[0008]本發(fā)明的目的還在于提供一種所述長(zhǎng)孢洛德酵母在煙草生產(chǎn)中的應(yīng)用，即提供一種能有效提聞烤煙品質(zhì)的方法。
[0009]本發(fā)明的目的通過(guò)下述技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)。
[0010]*除非另有說(shuō)明，本發(fā)明中所采用的百分?jǐn)?shù)均為質(zhì)量百分?jǐn)?shù)。
[0011]A.本發(fā)明從烤煙新鮮煙葉中分離了一株優(yōu)勢(shì)微生物0F-08作為試驗(yàn)菌種，對(duì)其進(jìn)行了 26S rDNA分析,鑒定結(jié)果表明該細(xì)菌屬于長(zhǎng)孢洛德酵母,其分類(lèi)命名為L(zhǎng)odderomyceselongisporus.0F-08，保藏號(hào)為 CGMCCN0.6645。
[0012]本發(fā)明所述的長(zhǎng)孢洛德酵母0F-08 (L.elongisporus 0F-08)菌株的形態(tài)學(xué)特征為:菌落較大，呈卵球形，奶白色凸起，菌落比較粗糙，邊緣整齊；在液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)液澄清有沉淀，且有菌蹼。
[0013]本發(fā)明所述的長(zhǎng)孢洛德酵母0F-08的分子鑒定特征為:利用通用引物NL-1 (5，CATATCAATAAGCGGAGGAAAAG 3’)和 NL-4 (5，GGTCCGTGITTCAAGACGG3’)，以長(zhǎng)孢洛德酵母0F-08的基因組DNA作為模板擴(kuò)增得到600 bp左右的PCR產(chǎn)物，回收測(cè)序、校正之后得到的0F-08菌株的部分26S rDNA基因序列578bp，該序列已經(jīng)提交國(guó)際核苷酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)(GenBank)，序列索引號(hào)為:JQ916053。
[0014]本發(fā)明提供了一種長(zhǎng)孢洛德酵母制劑，該制劑按常規(guī)方法制備，即將長(zhǎng)孢洛德酵母0F-08 (L.elongisporus 0F-08)擴(kuò)大發(fā)酵培養(yǎng)后制成菌劑。
[0015]B.本發(fā)明還提供了一種所述長(zhǎng)孢洛德酵母在煙草生產(chǎn)中的應(yīng)用，即所述長(zhǎng)孢洛德酵母提高烤煙品質(zhì)的方法。其具體作法如下:
[0016]稱(chēng)取預(yù)先平衡水分至13 %的煙絲，噴施長(zhǎng)孢洛德酵母0F-08 (L.elongisporus0F-08)菌劑，以煙絲重量計(jì)，每100克煙絲噴施菌劑量為15~30mL，然后將處理后的煙絲放入22°C，60%的恒溫恒濕箱內(nèi)發(fā)酵24h，即可。
[0017]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下突出的優(yōu)點(diǎn):
[0018]1.試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，所述的長(zhǎng)孢洛德酵母能有效提高烤煙品質(zhì)和增加煙葉香氣。本發(fā)明成功地將生物技術(shù)引入煙草生產(chǎn)中，是煙草生產(chǎn)技術(shù)的一個(gè)重要突破；
[0019]2.通過(guò)改善煙葉品質(zhì)，大大提高煙葉可用性。加速煙葉發(fā)酵，提高煙葉等級(jí)質(zhì)量。使煙葉可溶性還原糖含量增加；而蛋白質(zhì)、纖維素、總氮、煙堿含量下降。因而糖氮比、糖堿比和氮堿比的比值趨于上升，使化學(xué)品質(zhì)更為協(xié)調(diào)，煙葉評(píng)吸品質(zhì)得到明顯提升。
[0020]3.工藝簡(jiǎn)單，操作容易，成本低，適于推廣應(yīng)用，對(duì)促進(jìn)卷煙工業(yè)健康發(fā)展具有積極意義。
[0021]保藏生物材料的說(shuō)明
[0022]本發(fā)明的菌株，已于2012年10月08日，保藏在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(CGMCG);該中心地址:中國(guó)北京市朝陽(yáng)區(qū)大屯路，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所。該菌株分類(lèi)命名為長(zhǎng)孢洛德酵母(Lodderomyces elongisporus).0F-08 ;保藏號(hào)為CGMCC N0.6645。

【具體實(shí)施方式】
[0023]為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下通過(guò)實(shí)施例及試驗(yàn)數(shù)據(jù)，對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
[0024]實(shí)施例1
[0025]——試驗(yàn)煙葉樣品的采集
[0026]本研究所用的煙葉樣品均采自紅云煙草(集團(tuán))有限公司原料部煙葉醇化車(chē)間，煙葉的具體情況見(jiàn)表1。
[0027]表1.供試煙葉樣品
[0028]

【權(quán)利要求】
1.一種長(zhǎng)孢洛德酵母，其特征在于:該菌株的分類(lèi)命名為長(zhǎng)孢洛德酵母Lodderomyceselongisporus 0F-08，保藏編號(hào)為 CGMCC N0.6645。
2.權(quán)利要求1所述的長(zhǎng)孢洛德酵母的應(yīng)用，其特征在于，將該長(zhǎng)孢洛德酵母作為提高烤煙品質(zhì)的生物催化劑使用，具體做法如下:稱(chēng)取預(yù)先平衡水分至13%的煙絲，噴施長(zhǎng)孢洛德酵母Lodderomyces elongisporus.0F-08菌劑，以煙絲重量計(jì),每100克煙絲噴施菌劑量為15~30mL，然后將處理后的煙絲放入22°C，60%的恒溫恒濕箱內(nèi)發(fā)酵24小時(shí)。
【文檔編號(hào)】C12R1/645GK104164372SQ201410409466
【公開(kāi)日】2014年11月26日 申請(qǐng)日期:2014年8月19日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月19日
【發(fā)明者】段焰青, 馮斌, 楊培香, 者為, 夏建軍, 朱保昆, 黨立志, 王文元 申請(qǐng)人:云南中煙工業(yè)有限責(zé)任公司