一種發(fā)酵法生產(chǎn)16a-輕基-氫化可的松的工藝的制作方法
【專利摘要】一種發(fā)酵法生產(chǎn)16a-輕基-氫化可的松的方法，用產(chǎn)玫瑰色鏈霉菌在16a位羥化氫化可的松，得到產(chǎn)品，生產(chǎn)工藝綠色環(huán)保，產(chǎn)率高，有很好的應(yīng)用前景。
【專利說(shuō)明】-種發(fā)酵法生產(chǎn)16 α -羥基-氫化可的松的工藝

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明為留體化合物生產(chǎn)領(lǐng)域，特別是微生物發(fā)酵法生產(chǎn)16 α -羥基-氫化可的 松的技術(shù)。

【背景技術(shù)】
[0002] 留體在16α位羥基化，可以產(chǎn)生很強(qiáng)的抗炎和糖（腎上腺）皮質(zhì)激素活性，其中， 16 α -羥基-氫化可的松是生產(chǎn)丙縮羥強(qiáng)龍等留體藥物的重要中間體，以前采用化學(xué)合成， 這種生產(chǎn)工藝復(fù)雜，步驟繁瑣，副產(chǎn)物多，同時(shí)生產(chǎn)過(guò)程中需要使用一些有毒試劑。
[0003] 中國(guó)發(fā)明專利申請(qǐng) 2006100515112. Χ、201310576849· 9、200710061260· X、 200710060202. 5公開(kāi)了留體化合物及留體中間體的生產(chǎn)方法，然而，它們均沒(méi)有涉及 16 α -羥基-氫化可的松。
[0004] 因此，研究和開(kāi)發(fā)一種收率高、工藝簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)實(shí)用且盡量避免使用各種有害試劑 的生產(chǎn)方法，對(duì)用生物轉(zhuǎn)化法生產(chǎn)16 α -羥基-氫化可的松有著非常重要的意義。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明為留體化合物生產(chǎn)領(lǐng)域，特別是微生物發(fā)酵法生產(chǎn)16 α -羥基-氫化可的 松的技術(shù)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明用微生物發(fā)酵法生產(chǎn)16 α -羥基-氫化可的松，即Α，結(jié)構(gòu)式如下：

【權(quán)利要求】
1. 一種發(fā)酵法生產(chǎn)16 α -羥基-氫化可的松的方法，其特征在于用產(chǎn)玫瑰色鏈霉菌羥 化氫化可的松，生產(chǎn)16 α -羥基-氫化可的松；所用發(fā)酵培養(yǎng)基成份：葡萄糖10_14g/L，酵 母浸膏 5-7g/L，麥芽浸膏 30-40g/L，KH2PO4 4.5 g/ L ,K2HPO4 20 g/L，pH 7.0,發(fā)酵過(guò) 程如下： 種子培養(yǎng)；在帶夾套發(fā)酵罐加入培養(yǎng)基，裝料系數(shù)為〇. 7-0. 8,滅菌，冷卻至30-35°C， 接種，接入產(chǎn)玫瑰色鏈霉菌，接種量為5-8%，發(fā)酵分為2個(gè)階段： (1) 細(xì)胞生長(zhǎng)階段，接種后20-24h，調(diào)節(jié)pH為6. 0-6. 5,加入底物氫化可的松，使其 在發(fā)酵液中濃度為〇. 5-0. 9 g/L，通入潔凈空氣，使溶氧飽和度為20-30 %，調(diào)節(jié)溫度為 30-35 0C ； (2) 微生物轉(zhuǎn)化階段，從接種后20-24h開(kāi)始，直到發(fā)酵結(jié)束，全部發(fā)酵時(shí)間為120-140 小時(shí)；調(diào)節(jié)pH為7. 0-7. 5,流加加入底物氫化可的松，使其在發(fā)酵液中濃度為1. 5-2. 0 g/L， 通入潔凈空氣，使溶氧飽和度為50-60%，調(diào)節(jié)溫度為35-40°C ;發(fā)酵結(jié)束前40-50h停止流 加氫化可的松，以消耗剩余的底物氫化可的松； 發(fā)酵結(jié)束，用離心或過(guò)濾除去細(xì)胞，用乙酸乙酯萃取發(fā)酵液，使16 α -羥基-氫化可的 松轉(zhuǎn)入有機(jī)相，蒸出有機(jī)相，得到產(chǎn)品，產(chǎn)品收率90-95 %。
【文檔編號(hào)】C12P33/14GK104212868SQ201410451152
【公開(kāi)日】2014年12月17日 申請(qǐng)日期:2014年9月6日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月6日
【發(fā)明者】張媛媛, 宿烽, 鄒慧斌, 劉均洪 申請(qǐng)人:青島科技大學(xué)