一種胰月示-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂培養(yǎng)基及其應(yīng)用的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明為微生物領(lǐng)域，特別涉及一種胰月示-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基的組分包括21g/L皰肉培養(yǎng)基、4.0g/L乳糖、15.0g/L胰月示、7.55g/L大豆胨、1.54g/L偏亞硫酸氫鈉、1.5g/L檸檬酸鐵銨，pH值為7.5-7.7。所述皰肉培養(yǎng)基為每升皰肉培養(yǎng)基中含有蛋白胨20.0g、牛肉浸粉3.0g、酵母浸粉5.0g、可溶性淀粉1.5g、葡萄糖3g、枸櫞酸鈉5.8g、去氧膽酸鈉0.33g、磷酸二氫鈉2.0g。本發(fā)明培養(yǎng)基組方簡(jiǎn)單，制備操作方便，成本低，利于推廣應(yīng)用；菌生長(zhǎng)迅速，變異率低；便于觀察，分析。
【專(zhuān)利說(shuō)明】-種胰月示-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂培養(yǎng)基及其應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明為微生物領(lǐng)域，特別涉及一種胰月示-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂培養(yǎng)基及 其應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002] 產(chǎn)氣莢膜梭菌（C.perfringens)是臨床上氣性壞疽病原菌中最多見(jiàn)的一種梭菌， 因能分解肌肉和結(jié)締組織中的糖，產(chǎn)生大量氣體，導(dǎo)致組織嚴(yán)重氣腫，繼而影響血液供應(yīng)， 造成組織大面積壞死，加之本菌在體內(nèi)能形成莢膜，故名產(chǎn)氣夾膜梭菌。
[0003] 肉毒桿菌是一種生長(zhǎng)在缺氧環(huán)境下的細(xì)菌，在罐頭食品及密封腌漬食物中具有極 強(qiáng)的生存能力，是毒性最強(qiáng)的毒素之一。肉毒桿菌是一種致命病菌，在繁殖過(guò)程中分泌毒 素，是毒性最強(qiáng)的蛋白質(zhì)之一。軍隊(duì)常常將這種毒素用于生化武器。人們食入和吸收這種 毒素后，神經(jīng)系統(tǒng)將遭到破壞，出現(xiàn)頭暈、呼吸困難和肌肉乏力等癥狀。
[0004] 培養(yǎng)基（Medium)是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料， 一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽（包括微量元素）以及維生素和水等。有的培養(yǎng) 基還含有抗菌素和色素，用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定。培養(yǎng)基由于配制的原料不同，使用要 求不同，而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后，易被細(xì)菌污染或分解變 質(zhì)，因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對(duì)一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基（如組織培 養(yǎng)基），較長(zhǎng)時(shí)間的貯存，必須放在3?6°C的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長(zhǎng)期保管，現(xiàn)在 均改制成粉末。
[0005] 培養(yǎng)基根據(jù)化學(xué)分類(lèi)為天然培養(yǎng)基、組合培養(yǎng)基和半組合培養(yǎng)基；根據(jù)物理分類(lèi) 為液體培養(yǎng)基、固定培養(yǎng)基和脫水培養(yǎng)基；根據(jù)微生物分類(lèi)為選擇性培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種胰月示-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂培養(yǎng) 基及其應(yīng)用。
[0007] 本發(fā)明運(yùn)用生物化學(xué)，微生物學(xué)及無(wú)機(jī)、有機(jī)、分析化學(xué)和熒光技術(shù)的原理，對(duì)不 同的碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽類(lèi)、維生素、生長(zhǎng)促進(jìn)劑等諸類(lèi)營(yíng)養(yǎng)組分的組合進(jìn)行篩選，對(duì)培養(yǎng)基 的pH值、離子強(qiáng)度、氧化-還原電勢(shì)、表面張力、氣體環(huán)境等物化因子進(jìn)行了比較，研究出了 本發(fā)明的培養(yǎng)基。
[0008] 本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為：
[0009] -種胰月示-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基的組分包括21g/L皰 肉培養(yǎng)基、4. Og/L乳糖、15. Og/L胰月示、7. 55g/L大豆胨、1. 54g/L偏亞硫酸氫鈉、1. 5g/L檸 檬酸鐵銨，pH值為7. 5-7. 7。
[0010] 在以上方案的基礎(chǔ)上，所述皰肉培養(yǎng)基為每升皰肉培養(yǎng)基中含有蛋白胨20. 0g、 牛肉浸粉3. 0g、酵母浸粉5. 0g、可溶性淀粉1. 5g、葡萄糖3g、枸櫞酸鈉5. 8g、去氧膽酸鈉 〇· 33g、磷酸二氫鈉2. 0g。 toon] 本發(fā)明還公開(kāi)了所述的胰月示-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂培養(yǎng)基的應(yīng)用，用于產(chǎn) 氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)。
[0012] 胰月示、大豆胨、蛋白胨和酵母浸粉提供碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子；葡萄糖和乳 糖為可發(fā)酵糖類(lèi)提供碳源；偏亞硫酸氫鈉和檸檬酸鐵銨用于檢測(cè)硫化氫的產(chǎn)生，使菌落中 心呈黑色；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑；D-環(huán)絲氨酸抑制非梭菌的細(xì)菌。
[0013] 稱取本品47. 0g，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，分裝于500ml錐形瓶中各250ml， 121°C高壓滅菌15分鐘。傾倒平皿前，每250ml培養(yǎng)基（50°C )中，加入過(guò)濾除菌的0. 5% D-環(huán)絲氨酸溶液20ml。
[0014] 本發(fā)明的有益效果：
[0015] 1、培養(yǎng)基組方簡(jiǎn)單，制備操作方便，成本低，利于推廣應(yīng)用；
[0016] 2、菌生長(zhǎng)迅速，變異率低；
[0017] 3、便于觀察，分析。

【具體實(shí)施方式】 [0018] 實(shí)施例1 :
[0019] 一種胰月示-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基的組分包括21g/L皰 肉培養(yǎng)基、4. Og/L乳糖、15. Og/L胰月示、7. 55g/L大豆胨、1. 54g/L偏亞硫酸氫鈉、1. 5g/L檸 檬酸鐵銨，pH值為7. 5-7. 7。
[0020] 所述皰肉培養(yǎng)基為每升皰肉培養(yǎng)基中含有蛋白胨20. 0g、牛肉浸粉3. 0g、酵母浸 粉5. 0g、可溶性淀粉1. 5g、葡萄糖3g、枸櫞酸鈉5. 8g、去氧膽酸鈉0. 33g、磷酸二氫鈉2. 0g。
[0021] 胰月示、大豆胨、蛋白胨和酵母浸粉提供碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子；葡萄糖和乳 糖為可發(fā)酵糖類(lèi)提供碳源；偏亞硫酸氫鈉和檸檬酸鐵銨用于檢測(cè)硫化氫的產(chǎn)生，使菌落中 心呈黑色；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑；D-環(huán)絲氨酸抑制非梭菌的細(xì)菌。
[0022] 稱取本品47. 0g，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，分裝于500ml錐形瓶中各250ml， 121°C高壓滅菌15分鐘。傾倒平皿前，每250ml培養(yǎng)基（50°C )中，加入過(guò)濾除菌的0. 5% D-環(huán)絲氨酸溶液20ml。
[0023] 在 36 ± 1 °C 培養(yǎng) 20-24 小時(shí)
[0024] 質(zhì)控菌株 |生長(zhǎng)情況|其它特征 產(chǎn)氣莢膜梭菌i 黑色菌落 生孢梭菌 +++ / 沙門(mén)氏菌 ~ 7
[0025] 上述【具體實(shí)施方式】中的實(shí)施例是說(shuō)明性的而不是限定性的，可按照所限定范圍列 舉出若干個(gè)實(shí)施例，因此在不脫離本發(fā)明總體構(gòu)思下所做的任何變化和修改，都應(yīng)屬本發(fā) 明所限定的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1. 一種胰月示-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂培養(yǎng)基，其特征在于所述培養(yǎng)基的組分包括 21g/L皰肉培養(yǎng)基、4. Og/L乳糖、15. Og/L胰月示、7. 55g/L大豆胨、1. 54g/L偏亞硫酸氫鈉、 1. 5g/L檸檬酸鐵銨，pH值為7. 5-7. 7。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的胰月示-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂培養(yǎng)基，其特征在于所述 皰肉培養(yǎng)基為每升皰肉培養(yǎng)基中含有蛋白胨20. Og、牛肉浸粉3. Og、酵母浸粉5. Og、可溶性 淀粉1. 5g、葡萄糖3g、枸櫞酸鈉5. 8g、去氧膽酸鈉0. 33g、磷酸二氫鈉2. 0g。
3. -種根據(jù)權(quán)利要求1所述的胰月示-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂培養(yǎng)基的應(yīng)用，其特 征在于用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)。
【文檔編號(hào)】C12R1/145GK104232735SQ201410473324
【公開(kāi)日】2014年12月24日 申請(qǐng)日期:2014年9月16日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月16日
【發(fā)明者】吳聯(lián)順, 楊光 申請(qǐng)人:青島永通電梯工程有限公司