一種用于真菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種用于真菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基及其制備方法，所述培養(yǎng)基包括固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，所述固體培養(yǎng)基配方為：稀釋0～4倍的廢水、葡萄糖濃度為0～20g/L、NH4NO3濃度為0～2.5g/L、pH為4.0～8.0、瓊脂濃度為10～30g/L；所述液體培養(yǎng)基配方為：稀釋0～4倍的廢水、葡萄糖濃度為0～25g/L、NH4NO3濃度為0～4.0g/L、pH為5.0～9.0。本發(fā)明以廢水為原料，通過對其成分分析，添加部分營養(yǎng)要素，開發(fā)出針對真菌的固體和液體培養(yǎng)基，形成以廢水為原料的培養(yǎng)基配方和配制技術(shù)，將廢水變廢為寶，實現(xiàn)資源化利用，為特種產(chǎn)業(yè)加工廢水的開發(fā)利用提供一種新的思路，開辟了廢水利用的新途徑，具有很大的經(jīng)濟(jì)價值和社會效益。
【專利說明】一種用于真菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基及其制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種培養(yǎng)基，尤其是涉及一種用于真菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基及其制備方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 隨著廢水處理技術(shù)的逐步進(jìn)步與普及，當(dāng)前廢水處理技術(shù)的研究已經(jīng)從量大面廣 的工業(yè)廢水和生活污水轉(zhuǎn)向一些以往被忽視的特種產(chǎn)業(yè)廢水的處理上。特種產(chǎn)業(yè)廢水的水 質(zhì)因產(chǎn)生源的不同差異懸殊，有的富含有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)，有的富含重金屬等有毒化合物，必須 進(jìn)行有針對性的研究，進(jìn)行專門治理。山核桃加工中產(chǎn)生的廢水就屬于典型的特種產(chǎn)業(yè)廢 水。山核桃臨安市的支柱性產(chǎn)業(yè)之一，特別是兩昌地區(qū)經(jīng)濟(jì)發(fā)展的農(nóng)業(yè)支柱產(chǎn)業(yè)。山核桃 加工廢水日形成量近1500t/d，年形成廢水量達(dá)近30萬噸。目前臨安市山核桃加工廢水主 要以傳統(tǒng)的生物降解法（如活性污泥法、MBR法、厭氧消化法等）為主，這些方法主要是對 山核桃加工廢水進(jìn)行降解處理，達(dá)到排放要求。
[0003] 從目前文獻(xiàn)報道的廢水處理方法及技術(shù)和企業(yè)實際采用的廢水處理技術(shù)情況來 分析，無論是大面積的工業(yè)廢水和生活污水，還是諸如山核桃這類特種產(chǎn)業(yè)廢水的處理上， 都以降解處理工藝為主，沒有企業(yè)真正考慮將廢水進(jìn)行資源化利用，進(jìn)一步開發(fā)成產(chǎn)品，在 實現(xiàn)利益最大化的同時又保護(hù)環(huán)境，實現(xiàn)真正意義上的生態(tài)生產(chǎn)，持續(xù)發(fā)展的目標(biāo)。特別是 對于一些特種產(chǎn)業(yè)的廢水，如山核桃加工廢水主要由蒸煮山核桃產(chǎn)生，廢水中含有豐富的 有機(jī)物和營養(yǎng)成分，都被當(dāng)做污染物被處理了，沒有得到很好的利用，造成很大浪費。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 為了解決山核桃加工過程中廢水資源的浪費情況，本發(fā)明提供了一種以山核桃加 工廢水為原料用于真菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基及其制備方法。
[0005] -種用于真菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基包括固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，所述固 體培養(yǎng)基配方為：稀釋0?4倍的廢水、葡萄糖濃度為0?20g/L、NH 4N03濃度為0?2. 5g/ L、pH為4. 0?8. 0、瓊脂濃度為10?30g/L ;所述液體培養(yǎng)基配方為：稀釋0?4倍的廢 水、葡萄糖濃度為〇?25g/L、NH4NO3濃度為0?4. Og/L、pH為5. 0?9. 0。
[0006] 作為優(yōu)選，所述廢水為山核桃加工廢水。山核桃加工廢水是由蒸煮山核桃而產(chǎn)生 的，廢水中含有豐富的有機(jī)物及從山核桃中蒸煮出來的營養(yǎng)物質(zhì)，極具資源化的潛力，尤其 在微生物方面實現(xiàn)這類特種產(chǎn)業(yè)廢水有非常大的優(yōu)勢，因為其在山核桃蒸煮過程中獲得大 量的山核桃營養(yǎng)物質(zhì)等高濃度的有機(jī)物，可以作為微生物生長的營養(yǎng)要素，所以可以開發(fā) 成實驗室或工業(yè)生產(chǎn)中的微生物培養(yǎng)基。
[0007] 作為優(yōu)選，所述固體培養(yǎng)基配方為：稀釋1倍的廢水、葡萄糖濃度為16g/L、NH4NO 3 濃度為2. Og/L、pH為6. 0、瓊脂濃度為20g/L。NH4NO3作為液體培養(yǎng)基中的氮源，葡萄糖作 為液體培養(yǎng)基中的碳源。
[0008] 作為優(yōu)選，所述液體培養(yǎng)基配方為：稀釋2倍的廢水、葡萄糖濃度為20g/L、NH4NO 3 濃度為2. 0g/L、pH為7. 0。NH4NO3作為液體培養(yǎng)基中的氮源，葡萄糖作為液體培養(yǎng)基中的碳 源。
[0009] -種用于真菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基的制備方法，包括下述步驟：
[0010] (1)廢水進(jìn)行預(yù)處理；
[0011] (2)廢水中的成分分析；
[0012] (3) PDA培養(yǎng)基中的成分分析；
[0013] (4)廢水與PDA培養(yǎng)基的成分比較；
[0014] (5)根據(jù)步驟（4)的比較結(jié)果，將廢水稀釋一定倍數(shù)，并添加相應(yīng)量的葡萄糖及 NH4NO3，調(diào)節(jié)pH值制備得到用于真菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
[0015] 作為優(yōu)選,所述廢水為山核桃加工廢水。把山核桃加工廢水資源化利用，開發(fā)成適 合于真菌，尤其是米根霉生長的培養(yǎng)基。
[0016] 作為優(yōu)選，步驟（1)中，所述的預(yù)處理為：廢水經(jīng)離心后再進(jìn)行過濾處理。原廢水 經(jīng)離心后，去除掉廢水中的大顆粒物質(zhì)，再過濾，除去小的顆粒。
[0017] 作為優(yōu)選，步驟（2)中，所述廢水中的成分包括廢水中的營養(yǎng)物質(zhì)、COD及其金屬 離子，所述營養(yǎng)物質(zhì)包括氮、磷、碳，所述金屬離子包括銅、錳、鈉、鈣、鉀、鎂、鐵、鋅。
[0018] 作為優(yōu)選，步驟（3)中，所述PDA培養(yǎng)基的成分包括PDA培養(yǎng)基的營養(yǎng)物質(zhì)、COD及 其金屬離子，所述營養(yǎng)物質(zhì)包括氮、磷、碳，所述金屬離子包括銅、錳、鈉、鈣、鉀、鎂、鐵、鋅。
[0019] 作為優(yōu)選，步驟（5)中，所述pH值為6.0?7.0。
[0020] 本發(fā)明以廢水為原料，優(yōu)選山核桃加工廢水，通過對其成分分析，添加部分營養(yǎng)要 素，開發(fā)出針對真菌的固體和液體培養(yǎng)基，形成以廢水為原料的培養(yǎng)基配方和配制技術(shù)，開 發(fā)出系列微生物半合成培養(yǎng)基，用于實驗室微生物培養(yǎng)或工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)，將廢水變廢為寶， 實現(xiàn)資源化利用，為特種產(chǎn)業(yè)加工廢水的開發(fā)利用提供一種新的思路，開辟了廢水利用的 新途徑，具有很大的經(jīng)濟(jì)價值和社會效益。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0021] 圖1是氮源的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；
[0022] 圖2是磷的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；
[0023] 圖3是葡萄糖的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；
[0024] 圖4是Cu的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；
[0025] 圖5是Mn的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；
[0026] 圖6是Na的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；
[0027] 圖7是Ca的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；
[0028] 圖8是K的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；
[0029] 圖9是Mg的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；
[0030] 圖10是Fe的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；
[0031] 圖11是Zn的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；
[0032] 圖12是稀釋倍數(shù)對米根霉在廢水固體培養(yǎng)基上生長的影響曲線圖；
[0033] 圖13是pH對米根霉在廢水固體培養(yǎng)基上生長的影響曲線圖；
[0034] 圖14是碳源（葡萄糖）對米根霉在廢水固體培養(yǎng)基上生長的影響曲線圖；
[0035] 圖15是氮源（NH4NO3)對米根霉在廢水固體培養(yǎng)基上生長的影響曲線圖；
[0036] 圖16是稀釋倍數(shù)對米根霉在廢水液體培養(yǎng)基上生長的影響曲線圖；
[0037] 圖17是pH對米根霉在廢水液體培養(yǎng)基上生長的影響曲線圖；
[0038] 圖18是碳源（葡萄糖）對米根霉在廢水液體培養(yǎng)基上生長的影響曲線圖；
[0039] 圖19是氮源（NH4NO3)對米根霉在廢水液體培養(yǎng)基上生長的影響曲線圖。

【具體實施方式】
[0040] 下面結(jié)合附圖和具體實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不限 于此。
[0041] 山核桃加工廢水：取自臨安山核桃加工廠；米根霉菌株：由浙江中醫(yī)藥大學(xué)生物 與制藥工程實驗中心提供。
[0042] 實施例1
[0043] 一種用于真菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基的制備方法，包括下述步驟：
[0044] (1)廢水進(jìn)行預(yù)處理：原山核桃加工廢水經(jīng)離心后，去除掉廢水中的大顆粒物質(zhì)， 再過濾，除去小的顆粒；
[0045] (2)廢水中的成分分析；
[0046] (3) PDA培養(yǎng)基中的成分分析；
[0047] (4)廢水與PDA培養(yǎng)基的成分比較；
[0048] (5)根據(jù)步驟（4)的比較結(jié)果，將廢水稀釋一定倍數(shù)，并添加相應(yīng)量的葡萄糖及 NH4NO3，調(diào)節(jié)pH值制備得到用于真菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
[0049] 本發(fā)明的廢水和PDA的成分分析及其相互之間的比較為配制不經(jīng)改造的培養(yǎng)基 提供依據(jù)，PDA和廢水中的營養(yǎng)物質(zhì)、COD及其金屬離子等測定如下所述。
[0050] I. COD測定一重鉻酸鉀法
[0051] CODcr (02, mg/L) = (V0-V1) XCX8X 1000/V
[0052] 式中：C :硫酸亞鐵銨標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度（mol/L) ;VQ :滴定空白時硫酸亞鐵銨標(biāo)準(zhǔn)溶 液的用量（ml) J1 :滴定水樣時硫酸亞鐵銨標(biāo)準(zhǔn)溶液的用量（ml);
[0053] COD的測定結(jié)果如表1所示：
[0054] 表 1
[0055]

【權(quán)利要求】
1. 一種用于真菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基，其特征在于：所述培養(yǎng)基包括固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng) 基，所述固體培養(yǎng)基配方為：稀釋0?4倍的廢水、葡萄糖濃度為0?20g/L、NH 4N03濃度為 0?2. 5g/L、pH為4. 0?8. 0、瓊脂濃度為10?30g/L ;所述液體培養(yǎng)基配方為：稀釋0? 4倍的廢水、葡萄糖濃度為0?25g/L、ΝΗ4Ν03濃度為0?4. Og/L、pH為5. 0?9. 0。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于真菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基，其特征在于：所述廢水為山核桃加 工廢水。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于真菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基，其特征在于：所述固體培養(yǎng)基配方 為：稀釋1倍的廢水、葡萄糖濃度為16g/L、NH 4N03濃度為2. 0g/L、pH為6. 0、瓊脂濃度為20g/ L〇
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于真菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基，其特征在于：所述液體培養(yǎng)基配方 為：稀釋2倍的廢水、葡萄糖濃度為20g/L、ΝΗ 4Ν03濃度為2. Og/L、pH為7. 0。
5. -種權(quán)利要求1所述用于真菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于包括下述步 驟： (1) 廢水進(jìn)行預(yù)處理； (2) 廢水中的成分分析； (3) PDA培養(yǎng)基中的成分分析； (4) 廢水與PDA培養(yǎng)基的成分比較； (5) 根據(jù)步驟⑷的比較結(jié)果，將廢水稀釋一定倍數(shù)，并添加相應(yīng)量的葡萄糖及ΝΗ4Ν03， 調(diào)節(jié)pH值制備得到用于真菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的用于真菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于：所述廢水 為山核桃加工廢水。
7. 根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的用于真菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于：步驟 (1) 中，所述的預(yù)處理為：廢水經(jīng)離心后再進(jìn)行過濾處理。
8. 根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的用于真菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于：步驟 (2) 中，所述廢水中的成分包括廢水中的營養(yǎng)物質(zhì)、COD及其金屬離子，所述營養(yǎng)物質(zhì)包括 氮、磷、碳，所述金屬離子包括銅、猛、鈉、興、鉀、鎂、鐵、鋅。
9. 根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的用于真菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于：步驟 (3) 中，所述PDA培養(yǎng)基的成分包括PDA培養(yǎng)基的營養(yǎng)物質(zhì)、COD及其金屬離子，所述營養(yǎng)物 質(zhì)包括氮、磷、碳，所述金屬離子包括銅、錳、鈉、鈣、鉀、鎂、鐵、鋅。
10. 根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的用于真菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于：步驟 (5)中，所述pH值為6.0?7.0。
【文檔編號】C12N1/14GK104277983SQ201410475730
【公開日】2015年1月14日 申請日期:2014年9月17日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月17日
【發(fā)明者】劉文洪, 張貝貝, 李俊峰, 葉志青, 葛立軍, 陳少云 申請人:浙江中醫(yī)藥大學(xué)