一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法
【專利摘要】本發(fā)明一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法，涉及一種花粉萌發(fā)能力的測定方法，特別是涉及一種用于甜瓜的花粉萌發(fā)能力的測定方法。其目的是為了提供一種耗時(shí)短、操作簡單、成本低的快速有效測定甜瓜花粉活力的方法。本發(fā)明一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法包括以下步驟：制備培養(yǎng)液；花粉萌發(fā)培養(yǎng)；觀察統(tǒng)計(jì)。本發(fā)明的一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法，培養(yǎng)液制備方便，操作簡單，耗時(shí)短，成本低，效果好。本發(fā)明用于甜瓜花粉萌發(fā)能力的測定領(lǐng)域。
【專利說明】一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種花粉萌發(fā)能力的測定方法，特別是涉及一種用于甜瓜的花粉萌發(fā) 能力的測定方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 公元前4000-2000年，生物技術(shù)首次被人類利用，將某些雄性樹的花粉選擇性地 授予雌性樹來培育棕櫚樹。18世紀(jì)初實(shí)現(xiàn)了在不同谷物植物中成功雜交?；ǚ鄣碾x體培養(yǎng) 開始于20世紀(jì)50年代，Tulecke首先培養(yǎng)銀杏的成熟花粉粒得到愈傷組織。我國的研究 始于20世紀(jì)70年代，將花粉離體培養(yǎng)和傳統(tǒng)育種手段相結(jié)合先后培育出大批具有研究和 應(yīng)用價(jià)值的品種，如煙草、小麥、玉米、甜椒等。
[0003] 在生物技術(shù)工作中，珍貴、稀有遺傳種質(zhì)的儲備很重要，而成熟花粉包含著植物的 全部遺傳信息，花粉貯藏是有效利用珍稀種質(zhì)的簡捷、高效途徑。為了進(jìn)行雜交授粉和人工 輔助授粉，通常需要早期采集和貯藏花粉，尤其是在雜交育種中，為解決親本花期不一致 和遠(yuǎn)距離雜交的問題，都需要進(jìn)行花粉貯藏，需要對花粉活力進(jìn)行測定，從而打破雜交親本 的空間和時(shí)間隔離，擴(kuò)大雜交育種的范圍，增加獲得新品種的機(jī)會。
[0004] 花粉活力是指花粉具有存活、生長、萌發(fā)或發(fā)育的能力。花粉壽命表示花粉在自然 狀態(tài)下的生命期限，是影響花粉活力的一個(gè)重要因素。花粉活力受自身遺傳特性和外界因 素的影響。
[0005] 在親本花期不一致或者遠(yuǎn)距離雜交的研究中，運(yùn)輸及貯藏花粉經(jīng)常需要對花粉活 力進(jìn)行測定?，F(xiàn)有技術(shù)對花粉活力的測定中，采用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)操作相對復(fù)雜，不便于攜 帶和制備，無法隨時(shí)使用；而采用液體培養(yǎng)基，一般需要培養(yǎng)2小時(shí)左右才能進(jìn)行觀察和測 定，且大多需要蓋上蓋玻片，蓋蓋玻片會導(dǎo)致花粉生長一段時(shí)間后因缺氧死亡，無法觀察花 粉從開始生長到釋放內(nèi)容物的全過程，如何快速的培養(yǎng)花粉萌發(fā)，也是目前急需解決的問 題。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明是為了解決以上技術(shù)問題，而提供的一種耗時(shí)短、操作簡單、成本低的快速 有效測定甜瓜花粉活力的方法。
[0007] 本發(fā)明一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法，包括以下步驟：
[0008] -、培養(yǎng)液的制備；
[0009] 二、將一滴步驟一中制備的培養(yǎng)液置于載玻片上，將花粉均勻的撒在培養(yǎng)液上； [0010] 三、將載玻片置于放有濕濾紙的培養(yǎng)皿中，放置在黑暗或自然光中培養(yǎng) 2〇-30min； toon] 四、鏡檢，計(jì)算萌發(fā)率；
[0012]其中，所述的培養(yǎng)液包括質(zhì)量濃度為10 % -15 %的蔗糖、質(zhì)量濃度為 0. 01% -0. 05%的硼酸和水。
[0013] 可選的，本發(fā)明一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法中所述步驟一中的培養(yǎng)基 中還包括氯化鈣，所述的氯化鈣的濃度為0. 01% -0. 05%。
[0014] 本發(fā)明一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法具有如下有益效果：
[0015] 1、采用本發(fā)明的快速有效測定甜瓜花粉活力的方法，只需培養(yǎng)20-30分鐘即可得 到結(jié)果，大大縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間，該方法操作簡單，更適用于實(shí)際的生產(chǎn)應(yīng)用。
[0016] 2、本發(fā)明的快速有效測定甜瓜花粉活力的方法中，培養(yǎng)基質(zhì)的配制簡單易操作， 相比人工及大型機(jī)械等費(fèi)用、成本低。
[0017] 3、采用本發(fā)明的快速有效測定甜瓜花粉活力的方法，可以實(shí)時(shí)觀察，提前檢測花 粉活力，避免直接人工授粉后由于甜瓜花粉活性的缺失，而造成的制種經(jīng)濟(jì)損失。
[0018] 下面結(jié)合實(shí)施例和驗(yàn)證試驗(yàn)對本發(fā)明的快速有效測定甜瓜花粉活力的方法作進(jìn) 一步說明。

【具體實(shí)施方式】
[0019] 實(shí)施例1
[0020] 本實(shí)施例一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法，包括以下步驟：
[0021] 一、制備培養(yǎng)液：稱取125g蔗糖、0. 2g硼酸，加水定容至1L，溶解，即制得培養(yǎng)液；
[0022] 二、用膠頭滴管將一滴步驟一中制備的培養(yǎng)液置于載玻片上，將花粉均勻的撒在 培養(yǎng)液上；
[0023] 三、將載玻片置于放有濕濾紙的培養(yǎng)皿中，放置在自然光中培養(yǎng)30min;
[0024] 四、鏡檢，計(jì)算萌發(fā)率。
[0025] 實(shí)施例2
[0026] 本實(shí)施例一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法，包括以下步驟：
[0027] -、制備培養(yǎng)液：稱取140g蔗糖、0. 5g硼酸，加水定容至1L，溶解，即制得培養(yǎng)液；
[0028] 二、用膠頭滴管將一滴步驟一中制備的培養(yǎng)液置于載玻片上，將花粉均勻的撒在 培養(yǎng)液上；
[0029] 三、將載玻片置于放有濕濾紙的培養(yǎng)皿中，放置在黑暗中培養(yǎng)20min;
[0030] 四、鏡檢，計(jì)算萌發(fā)率。
[0031] 實(shí)施例3
[0032] 本實(shí)施例一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法，包括以下步驟：
[0033] -、制備培養(yǎng)液：稱取IOOg蔗糖、0. 3g硼酸，加水定容至1L，溶解，即制得培養(yǎng)液；
[0034] 二、用膠頭滴管將一滴步驟一中制備的培養(yǎng)液置于載玻片上，將花粉均勻的撒在 培養(yǎng)液上；
[0035] 三、將載玻片置于放有濕濾紙的培養(yǎng)皿中，放置在自然光中培養(yǎng)25min;
[0036] 四、鏡檢，計(jì)算萌發(fā)率。
[0037] 實(shí)施例4
[0038] 本實(shí)施例一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法，包括以下步驟：
[0039] -、制備培養(yǎng)液：稱取150g蔗糖、0.Ig硼酸，加水定容至1L，溶解，即制得培養(yǎng)液；
[0040] 二、用膠頭滴管將一滴步驟一中制備的培養(yǎng)液置于載玻片上，將花粉均勻的撒在 培養(yǎng)液上；
[0041] 三、將載玻片置于放有濕濾紙的培養(yǎng)皿中，放置在自然光中培養(yǎng)30min;
[0042] 四、鏡檢，計(jì)算萌發(fā)率。
[0043] 實(shí)施例5
[0044] 本實(shí)施例一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法，包括以下步驟：
[0045] 一、制備培養(yǎng)液：稱取IlOg蔗糖、0. 4g硼酸，加水定容至1L，溶解，即制得培養(yǎng)液；
[0046] 二、用膠頭滴管將一滴步驟一中制備的培養(yǎng)液置于載玻片上，將花粉均勻的撒在 培養(yǎng)液上；
[0047] 三、將載玻片置于放有濕濾紙的培養(yǎng)皿中，放置在黑暗中培養(yǎng)20min;
[0048] 四、鏡檢，計(jì)算萌發(fā)率。
[0049]經(jīng)鏡檢驗(yàn)證，實(shí)施例1-5中培養(yǎng)的花粉，萌發(fā)率高于95%，花粉管長度為花粉粒直 徑的6-8倍，花粉管生長的一致性高，適于萌發(fā)率的觀察和計(jì)算。
[0050] 驗(yàn)證試驗(yàn)
[0051] 為了驗(yàn)證本發(fā)明快速有效測定甜瓜花粉活力的方法的效果，設(shè)計(jì)以下試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn) 證。
[0052] 不同培養(yǎng)基配方對甜瓜花粉活力測定的影響
[0053] 1、設(shè)計(jì)9組含蔗糖和硼酸的不同濃度梯度的培養(yǎng)培養(yǎng)液，編號1-9 ;3組添加不同 濃度氯化鈣的培養(yǎng)液，編號10-12 ;由于目前沒有針對甜瓜花粉的培養(yǎng)基，也沒有同屬種花 粉的培養(yǎng)基，所以選用花粉基本培養(yǎng)基作為對照：蔗糖濃度2 %，硼酸濃度0. 1 %，氯化鈣濃 度0. 1% (所述濃度均為質(zhì)量濃度）。具體參數(shù)如表1所示。
[0054] 表1對比試驗(yàn)中各成分的配比
[0055]

【權(quán)利要求】
1. 一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法，其特征在于包括以下步驟： 一、 培養(yǎng)液的制備； 二、 將一滴步驟一中制備的培養(yǎng)液置于載玻片上，將花粉均勻的撒在培養(yǎng)液上； 三、 將載玻片置于放有濕濾紙的培養(yǎng)皿中，放置在黑暗或自然光中培養(yǎng)20-30min ; 四、 鏡檢，計(jì)算萌發(fā)率； 其中，所述的培養(yǎng)液包括質(zhì)量濃度為10% -15%的蔗糖、質(zhì)量濃度為0. 01% -0. 05%的 硼酸和水。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速有效測定甜瓜花粉活力的方法，其特征在于：所述 步驟一中的培養(yǎng)基中還包括氯化鈣，所述的氯化鈣的濃度為0. 01% -0. 05%。
【文檔編號】C12Q1/02GK104357532SQ201410534166
【公開日】2015年2月18日 申請日期:2014年10月11日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月11日
【發(fā)明者】黨繼革, 范冬冬, 趙翠媛, 代云志, 李濤, 吳濤, 高雪萍, 張慧 申請人:河北雙星種業(yè)有限公司