一種活性肽組合物、其制備方法和包含其的膠囊的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種活性肽組合物、其制備方法和包含其的膠囊。所述方法包括用蛋白酶和木瓜蛋白酶將乳清蛋白、大豆蛋白、牛奶和雞蛋酶解而獲得所述活性肽組合物，其，大豆蛋白、乳清蛋白、雞蛋和牛奶的比例為40～75重量份：5～30重量份：5～25重量份：10～35重量份，優(yōu)選為50～65重量份：5～20：5～15重量份：15～25重量份，最優(yōu)選為55重量份:15重量份:10重量份:20重量份，其中雞蛋和牛奶以干物質(zhì)計。本發(fā)明活性肽組合物，有利于機(jī)體的迅速吸收，提供能量供應(yīng)，促進(jìn)機(jī)體蛋白質(zhì)合成和肌肉增長，清除體內(nèi)自由基，提高機(jī)體抗氧化性，增強(qiáng)機(jī)體免疫能力和延緩疲勞。
【專利說明】-種活性肽組合物、其制備方法和包含其的膠囊

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種活性肽組合物、其制備方法和包含其的膠囊，屬于醫(yī)療保健領(lǐng)域。

【背景技術(shù)】
[0002] 現(xiàn)代營養(yǎng)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，人類攝食蛋白質(zhì)經(jīng)消化道的酶作用后，大多以低肽形式被 吸收，以游離氨基酸形式吸收的比例很小。進(jìn)一步的試驗(yàn)證實(shí)了肽比游離氨基酸消化更快、 吸收更多，表明肽的生物效價和營養(yǎng)價值比游離氨基酸更高，這也正是活性肽的無窮魅力 所在，而活性肽在我國的研究與開發(fā)還未起步。
[0003] 生物活性肽是蛋白質(zhì)中20個氨基酸，以不同組成和排列方式構(gòu)成的二肽到復(fù)雜 的線形和環(huán)形的不同肽類的總稱?；钚噪木哂卸喾N人體代謝和生理調(diào)節(jié)功能，易消化吸 收，有調(diào)節(jié)免疫、平衡激素、抗菌、抗病毒、降血壓、降血脂等作用，食用安全性極高，是當(dāng)前 國際食品界最熱門的研究課題和極具發(fā)展前景的功能因子。
[0004] 活性肽可按原料來源及保健功能分類，如乳肽、大豆肽、玉米肽、豌豆肽、卵白肽、 畜產(chǎn)肽、水產(chǎn)肽、絲蛋白肽等；按功能分類有抗菌肽、抑制膽固醇作用肽、促進(jìn)礦物質(zhì)吸收 肽、促消化吸收肽等。
[0005] CN101801209A提供了一種用于生成乳清蛋白水解物的方法，包括：a)提供包含 β_乳球蛋白和α-乳清蛋白的乳清蛋白的水性組合物；b)使所述組合物受到在精氨酸或 賴氨酸的羧基端一側(cè)進(jìn)行特異性切割的微生物內(nèi)肽酶的作用；c)使所述內(nèi)肽酶失活。
[0006] CN102178028A提供了一種大豆肽生產(chǎn)方法，是以發(fā)酵豆柏為原料，再利用動物源 性的蛋白酶生產(chǎn)大豆多肽的一種生產(chǎn)方法，包括：1)液體酶解：將發(fā)酵豆柏與水按重量比 為1:4 一 8混合，加入胰蛋白酶，保溫酶解；2)高溫滅酶；3)過濾：將酶解液過濾分離得到 大?蛋白粗品；4)脫色除味；5)精煉；6)嗔霧干媒，滅囷制成成品。
[0007] 但是，目前，大部分研究往往集中在單一來源的活性肽的研究，如動物蛋白來源的 活性肽和植物蛋白來源的活性肽。但是，動物蛋白來源的肽往往含過量飽和脂肪、膽固醇， 長期進(jìn)食后，易使人血管粥樣硬化、血壓升高、誘發(fā)腦溢血和心肌梗塞等疾病。而植物蛋白 來源的肽其所含氨基酸種類和相對數(shù)量與人體的要求有一定差距，缺乏免疫球蛋白，吸收 要比動物蛋白的吸收相對來說要困難一些。
[0008] 因此，目前迫切需要一種結(jié)合二者優(yōu)點(diǎn)，同時避免二者缺點(diǎn)的產(chǎn)品，以顯著提高的 蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價值。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 本發(fā)明提供了滿足上述要求的活性肽組合物，其具有良好的增強(qiáng)機(jī)體免疫力和抗 疲勞作用，適合于免疫功能低下者和運(yùn)動員，特別是運(yùn)動員在專業(yè)運(yùn)動訓(xùn)練的長期過程。 [0010] 本發(fā)明的一個目的在于提供一種活性肽組合物的制備方法，所述方法包括用蛋白 酶和木瓜蛋白酶將乳清蛋白、大豆蛋白、牛奶和雞蛋酶解而獲得所述活性肽組合物，其中， 大豆蛋白、乳清蛋白、雞蛋和牛奶的比例為40?75重量份：5?30重量份：5?25重量份 ： 10?35重量份，優(yōu)選為50?65重量份：5?20 :5?15重量份：15?25重量份，最優(yōu)選 為55重量份：15重量份：10重量份：20重量份，其中雞蛋和牛奶以干物質(zhì)計。
[0011] 本發(fā)明的另一目的在于提供一種活性肽組合物，所述活性肽組合物通過上述方法 制備。
[0012] 本發(fā)明的又一目的在于提供一種膠囊，所述膠囊包括上述活性肽組合物。
[0013] 有益效果
[0014] 現(xiàn)有的生物活性肽原料主要采用單一的乳源蛋白、大豆蛋白、乳清蛋白等。由于各 種蛋白源均有各自特有的結(jié)構(gòu)組成，所形成多肽結(jié)構(gòu)相對比較單一，功能也相對較為簡單， 而本發(fā)明以多種蛋白作為原料，經(jīng)酶解后所形成的多肽結(jié)構(gòu)組成有較大的不均一性。由于 結(jié)構(gòu)不同，所發(fā)揮的生物活性功能也呈現(xiàn)多樣化。
[0015] 另外，由于蛋白酶和木瓜蛋白酶等復(fù)合酶對蛋白底物的酶解位點(diǎn)不同，所產(chǎn)生的 多肽分子大小、組成、結(jié)構(gòu)均不同，其生物活性功能也呈現(xiàn)多樣化。
[0016] 此外，由于各種酶的作用時間、溫度、酶解位點(diǎn)不同,采用復(fù)合酶處理工藝,產(chǎn)品的 組成結(jié)構(gòu)多樣化，生物活性功能也更趨完善。
[0017] 經(jīng)驗(yàn)證，通過本發(fā)明方法制備的活性肽組合物，有利于機(jī)體的迅速吸收，提供能 量供應(yīng)，促進(jìn)機(jī)體蛋白質(zhì)合成和肌肉增長，清除體內(nèi)自由基，提高機(jī)體抗氧化性，增強(qiáng)機(jī)體 免疫能力和延緩疲勞，適合于免疫功能低下者和運(yùn)動員，特別是運(yùn)動員在專業(yè)運(yùn)動訓(xùn)練的 長期過程。
[0018] 此外，如果將本發(fā)明的活性肽組合物進(jìn)一步冷凍干燥，得到干粉，可以無需添加任 何賦形劑即可制成膠囊，從而減少了工藝步驟，降低了成本。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0019] 圖1 :不同蛋白原料的配比的水解曲線。
[0020] 圖2 :原料酶解前后凝膠電泳結(jié)果對比，其中泳道1為酶解前樣品1，泳道2為樣品 1酶解后，泳道3為酶解前樣品2,泳道4為樣品2酶解后，泳道5為蛋白標(biāo)記。

【具體實(shí)施方式】
[0021] 本發(fā)明人對生物活性肽的進(jìn)行了多年研究，致力于發(fā)現(xiàn)一種能夠兼具動物蛋白源 肽和植物源肽優(yōu)點(diǎn)的活性肽。但是，如果僅僅將乳清蛋白、大豆蛋白混合進(jìn)行酶解，發(fā)現(xiàn)產(chǎn) 生了不同程度的豆腥味和苦澀味。據(jù)推測，豆腥味可能來源于大豆中的脂肪氧化酶氧化大 豆不飽和脂肪酸后生成的多種低分子醇、醛和酮等揮發(fā)性成份，而苦澀味可能來源于低分 子苦味肽。如果要除去豆腥味和苦澀味，需要額外的工藝，從而增加了成本，還降低了產(chǎn)率。 發(fā)明人經(jīng)過進(jìn)一步研究，發(fā)現(xiàn)如果在乳清蛋白和大豆蛋白的混合物中加入合適量的牛奶和 雞蛋進(jìn)行酶解，可消除上述豆腥味和苦澀味，從而形成了本發(fā)明。
[0022] 以下對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)描述
[0023] 1.活性肽組合物的制備方法
[0024] 本發(fā)明的活性肽組合物通過用蛋白酶和木瓜蛋白酶將乳清蛋白、大豆蛋白、牛奶 和雞蛋酶解而制備。
[0025] 乳清蛋白
[0026] 乳清蛋白主要由α-乳球蛋白、β-乳白蛋白、牛血清蛋白、免疫球蛋白組成，此外 還含有一些具有生物活性的微量成分，包括乳鐵蛋白、乳過氧化物酶、溶菌酶、酪蛋白巨肽、 脂肪球膜蛋白、生長因子等。正是這些成分提供了乳清蛋白卓越的價值。乳清蛋白可促消 化吸收，促雙歧桿菌增殖，抗病原菌感染。
[0027] 大豆蛋白
[0028] 大豆蛋白含有大量生理活性物質(zhì)，包括有低聚糖類、磷脂、維生素類、異黃酮、大豆 皂苷等。大豆蛋白具有促消化吸收，降膽固醇，降血壓，增強(qiáng)免疫，抗肥胖，降血糖，抗氧化， 抗疲勞，抗過敏，促進(jìn)微生物發(fā)育等優(yōu)良的生理功能。
[0029] 雞蛋
[0030] 雞蛋具有促消化吸收，抗氧化，抗過敏等優(yōu)良的生理功能。
[0031] 牛奶
[0032] 牛奶中的酪蛋白含有10%的磷，對促進(jìn)幼兒的大腦發(fā)育起至關(guān)重要的作用。牛奶 中含有鉀使動脈血管壁在血奔流高時保持穩(wěn)定，使中風(fēng)危險減少一半。牛奶可以阻止人體 吸收食物中有毒的金屬鉛和鉻，具有輕度的解毒功能。牛奶中含有將近5 %的乳糖，可促進(jìn) 人體對鈣和鐵的吸收，增強(qiáng)腸蠕動，促進(jìn)排泄。
[0033] 蛋白酶
[0034] 主要來源于枯草芽孢桿菌，酶切位點(diǎn)比較廣。最適pH為7. 0-7. 5,最適作用溫度為 45-60。。。
[0035] 木瓜蛋白酶
[0036] 主要來源于木瓜提取物，主要特異性的水解多肽、酰胺及酯中連接堿性氨基酸 Leu、Gly的鏈，最適pH為5. 0-7. 5,最適作用溫度為60-75°C。
[0037] 本發(fā)明的制備方法中，大豆蛋白、乳清蛋白、雞蛋和牛奶的比例為40?75重量份： 5?30重量份：5?25重量份：10?35重量份，優(yōu)選為50?65重量份：5?20 :5?15 重量份：15?25重量份，最優(yōu)選為55重量份：15重量份：10重量份：20重量份，需要指出 的是雞蛋和牛奶以干物質(zhì)計。通常，雞蛋中的干物質(zhì)占雞蛋重量的25 %，牛奶中的干物質(zhì)占 牛奶重量的10%。如果大豆蛋白的添加比例過高，則酶解產(chǎn)物中不可避免地帶有豆腥味和 苦澀味，如果大豆蛋白的添加比例過低，則達(dá)不到植物蛋白活性肽與動物蛋白活性肽的良 好平衡。反之，如果牛奶和雞蛋的添加比例過高，會導(dǎo)致大豆蛋白的添加比例降低，如果牛 奶和雞蛋的添加比例過低，將無法消除酶解產(chǎn)物的豆腥味和苦澀味。
[0038] 基于所述乳清蛋白、大豆蛋白、牛奶和雞蛋的總重量，蛋白酶和木瓜蛋白酶的加入 總量為〇. 5?2重量％ ,優(yōu)選1重量％。如果蛋白酶和木瓜蛋白酶的加入總量過低，反應(yīng)時 間變長，無法充分酶解；如果總量過高，則容易造成過度酶解，而且增加總體成本。
[0039] 在蛋白酶和木瓜蛋白酶中，蛋白酶和木瓜蛋白酶的比例為80%?60% :40%? 20%，優(yōu)選為75%?65% :35%?25%，最優(yōu)選為70% :30%。蛋白酶是生物體內(nèi)的一類 酵素酶，它們能夠分解蛋白質(zhì)。分解方法是打斷那些將氨基酸連結(jié)成多肽鏈的肽鍵。如果 蛋白酶的比例過低會延長反應(yīng)時間并且導(dǎo)致水解蛋白質(zhì)不徹底，反之會過度酶解。
[0040] 以下給出本發(fā)明方法的一個【具體實(shí)施方式】，但這并不意圖將本發(fā)明限定為該具體 實(shí)施方式。
[0041] 將大豆蛋白和乳清蛋白按比例混勻，以以1:5?1:6,優(yōu)選1 :5的比例加水浸泡 20?30min，優(yōu)選20min后加牛奶、雞蛋攪拌均勻，在70°C?80°C，優(yōu)選80°C保溫Ih? I. 5h，優(yōu)選lh，降溫至60°C?70°C，優(yōu)選55°C，調(diào)節(jié)pH至6. 0?7. 5,優(yōu)選7,加入所述蛋白 酶和木瓜蛋白酶，酶解5h?6h，優(yōu)選5h，得到酶解產(chǎn)物。
[0042] 為了便于長期貯存，減少環(huán)境對本發(fā)明的活性肽組合物的活性的影響，本發(fā)明的 方法還優(yōu)選包括將所述酶解產(chǎn)物進(jìn)一步進(jìn)行冷凍干燥，得到干粉。冷凍干燥可以最大程度 地減少工藝對活性的影響，避免恒溫干燥、真空干燥、噴霧干燥等方法造成產(chǎn)品氧化，從而 使產(chǎn)品顏色變深。
[0043] 本發(fā)明的最優(yōu)選產(chǎn)品為膠囊形式，其可以通過將上述干粉直接填充為膠囊即可制 備。這是因?yàn)樯鲜龈煞鄣牧鲃有浴w散性、黏附性良好，粉末顆粒形狀大小均勻、外形美觀， 制得的膠囊的崩解性、溶解性也良好。由于無需添加賦形劑，因此減少了工藝步驟，也節(jié)省 了成本。
[0044] 經(jīng)測定，本發(fā)明的活性肽組合物中分子量5000D以下的小分子多肽的重量比為 90%以上，并且分子量3000D以下的小分子多肽的重量比為40%以上。因此，非常有利于機(jī) 體的迅速吸收，提供能量供應(yīng)，促進(jìn)機(jī)體蛋白質(zhì)合成和肌肉增長。
[0045] 此外，還發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的活性肽組合物能夠清除體內(nèi)自由基，提高機(jī)體抗氧化性，增 強(qiáng)機(jī)體免疫能力和延緩疲勞，適合于免疫功能低下者和運(yùn)動員，特別是運(yùn)動員在專業(yè)運(yùn)動 訓(xùn)練的長期過程。
[0046] 為了更好的理解本發(fā)明，下面借助于實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)一步說明。但本發(fā)明絕不 限于所述實(shí)施例
[0047] 實(shí)施例1
[0048] 1、原、輔料的鑒別、鑒定
[0049] 乳清蛋白來源于深圳市標(biāo)青健美用品有限公司（蛋白含量為80%以上），本品符 合 GBl 1674-2005 標(biāo)準(zhǔn)。
[0050] 大豆蛋白來源于上海深遠(yuǎn)食品（集團(tuán)）有限公司（蛋白含量為80%以上），本品 符合企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)附錄B. 2標(biāo)準(zhǔn)。
[0051] 雞蛋來源于市售無公害雞蛋，本品符合GB2748-2003標(biāo)準(zhǔn)。
[0052] 牛奶來源于西安現(xiàn)代農(nóng)業(yè)綜合開發(fā)總公司畜牧開發(fā)公司，本品符合GB19301-2003 標(biāo)準(zhǔn)。
[0053] 蛋白酶來源于廣西南寧龐博生物工程有限公司，本品符合（FCC，IV )標(biāo)準(zhǔn)，其來源 于枯草芽孢桿菌。
[0054] 木瓜蛋白酶來源于廣西南寧龐博生物工程有限公司，本品符合 (DX440000X413-1987)標(biāo)準(zhǔn)。
[0055] 2、助劑及質(zhì)量等級
[0056] 藥用明膠硬膠囊，符合中華人民共和國國標(biāo)GB13731-2000《藥用明膠硬膠囊》的 要求。
[0057] 3、投料名稱及投料量見表1 :
[0058] 表1投料明細(xì)表
[0059]

【權(quán)利要求】
1. 一種活性肽組合物的制備方法，其特征在于，所述方法包括用蛋白酶和木瓜蛋白酶 將乳清蛋白、大豆蛋白、牛奶和雞蛋酶解而獲得所述活性肽組合物，其中，大豆蛋白、乳清蛋 白、雞蛋和牛奶的比例為40?75重量份：5?30重量份：5?25重量份：10?35重量份， 優(yōu)選為50?65重量份：5?20 :5?15重量份：15?25重量份，最優(yōu)選為55重量份：15 重量份：10重量份：20重量份，其中雞蛋和牛奶以干物質(zhì)計。
2. 如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述蛋白酶為枯草芽孢桿菌蛋白酶。
3. 如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，基于所述乳清蛋白、大豆蛋白、牛奶和 雞蛋的總重量，所述蛋白酶和木瓜蛋白酶的加入總量為〇. 5?2重量％，優(yōu)選1重量％。
4. 如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述蛋白酶和木瓜蛋白酶的重量比為 80%?60% :40%?20%，優(yōu)選為 75%?65% :35%?25%，最優(yōu)選為 70% :30%。
5. 如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述方法包括： 將大豆蛋白和乳清蛋白按比例混勻，以1:5?1:6,優(yōu)選1 :5的比例加水浸泡20? 30min，優(yōu)選20min后加牛奶、雞蛋攪拌均勻，在70°C?80°C，優(yōu)選80°C保溫Ih?I. 5h，優(yōu) 選lh，降溫至60°C?70°C，優(yōu)選55°C，調(diào)節(jié)pH至6. 0?7. 5,優(yōu)選7,加入所述蛋白酶和木 瓜蛋白酶，酶解5h?6h，優(yōu)選5h，得到酶解產(chǎn)物。
6. 如權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述方法還包括將所述酶解產(chǎn)物進(jìn)一 步進(jìn)行冷凍干燥，得到干粉。
7. 如權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述方法還包括將所述干粉填充為膠 囊。
8. -種活性肽組合物，其特征在于，所述活性肽組合物通過權(quán)利要求1?7中任一項(xiàng)所 述的方法制備。
9. 如權(quán)利要求8所述的活性肽組合物，其特征在于，所述活性肽組合物中分子量5000D 以下的小分子多肽的重量比為90%以上，并且分子量3000D以下的小分子多肽的重量比為 40%以上。
10. -種膠囊，其特征在于，所述膠囊包括權(quán)利要求8所述的多肽組合物。
【文檔編號】C12P21/06GK104313095SQ201410568456
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2014年10月23日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月23日
【發(fā)明者】曹珉, 楊賽 申請人:上海弭陽生物技術(shù)有限公司