一株生棘孢木霉菌株、菌劑及其在有機(jī)垃圾處理中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于微生物【技術(shù)領(lǐng)域】，特別涉及一株高產(chǎn)復(fù)合纖維素降解酶的生物防治菌株，即棘孢木霉(Trichoderma asperellum)T-1，該菌株已于2014年9月24日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)為CGMCC 9722。本發(fā)明還提供了一種由棘孢木霉T-1菌株制成的垃圾堆肥菌劑及其在有機(jī)垃圾降解處理中的應(yīng)用。本技術(shù)發(fā)明涉及的棘孢木霉生長(zhǎng)快，產(chǎn)孢能力強(qiáng)，pH耐受性強(qiáng)，可以多種纖維素類材料為底物，是生防菌中的一員，應(yīng)用于農(nóng)作物種植可防病。本發(fā)明提供的棘孢木霉T-1菌劑添加到有機(jī)垃圾中可減少垃圾堆肥產(chǎn)生的滲透液，提高垃圾中纖維素類物質(zhì)的降解效率，提高垃圾堆肥產(chǎn)品的質(zhì)量。
CGMCC 9722
20140924
【專利說明】一株生棘孢木霉菌株、菌劑及其在有機(jī)垃圾處理中的應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物【技術(shù)領(lǐng)域】，特別涉及一株高產(chǎn)復(fù)合纖維素酶的生防菌株棘孢木霉 T-1和含有該棘孢木霉的微生物菌劑，及其在有機(jī)垃圾處理處置與資源化中的應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002] 隨著城鎮(zhèn)化進(jìn)程的加快和人民生活水平的提高，我國(guó)的垃圾產(chǎn)生量在不斷增長(zhǎng)。 但是，與此相對(duì)應(yīng)的，我國(guó)的生活垃圾處理水平和污染防治水平還相對(duì)滯后。如何實(shí)現(xiàn)垃圾 資源化和縮減垃圾處理量已成為一個(gè)亟待解決的問題。
[0003] 據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國(guó)每年產(chǎn)生的有機(jī)廢棄物可達(dá)到41. 3-43. 3X 108噸，其中包括餐廚垃 圾、畜禽糞便、園林剪切物廢棄物、秸作物桿、批發(fā)市場(chǎng)水果蔬菜廢棄物等。目前這類有機(jī)廢 棄物大多作為垃圾處理，這種易腐性有機(jī)垃圾組分一般可占到垃圾總量的50%以上。
[0004] 這種有機(jī)垃圾往往含水量高，易腐爛發(fā)臭，不便遠(yuǎn)距離運(yùn)輸，若得不到及時(shí)處理將 產(chǎn)生惡臭腐敗氣味，招惹蚊蠅，傳播疾病，影響居住環(huán)境和人類健康。此外，直接將這類有機(jī) 垃圾與不可降解垃圾一起進(jìn)行處理，如衛(wèi)生填埋，不僅是一種資源浪費(fèi)，而且在占用填埋土 地使用的同時(shí)，會(huì)加速垃圾填埋污染，例如有機(jī)垃圾的高含水量會(huì)增加填埋場(chǎng)滲透液析出， 加速不可降解垃圾中的重金屬、多環(huán)芳烴等污染物進(jìn)入周邊土壤和地下水。
[0005] 垃圾堆肥是有機(jī)垃圾處理的一項(xiàng)重要手段。經(jīng)過堆肥處理后的有機(jī)垃圾不僅可以 實(shí)現(xiàn)無害化和減量化，還可以轉(zhuǎn)變成富含有機(jī)質(zhì)和氮、磷、鉀等營(yíng)養(yǎng)元素的有機(jī)肥，實(shí)現(xiàn)從 農(nóng)林來又回歸農(nóng)林的良性循環(huán)。
[0006] 但是由于垃圾中的物質(zhì)成分比較復(fù)雜，包括微生物容易利用的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（如碳水 化合物、蛋白質(zhì)和脂肪等）和不容易分解的物質(zhì)（如纖維素和木質(zhì)素等），只依靠垃圾中原 有的土著微生物往往不能達(dá)到理想的分解效果。因此，向垃圾堆肥體系中引入外源優(yōu)勢(shì)微 生物，尤其是具有特殊分解功能的菌劑，將可以增強(qiáng)垃圾有機(jī)物的降解，提高堆肥處理的垃 圾減量化效率。此外，某些外源菌劑引入堆肥體系可以減少堆肥臭氣和滲透液的產(chǎn)生，改善 堆肥環(huán)境。從資源化的角度上看，合適的外源菌劑的接種還改變有機(jī)垃圾原有的生物化學(xué) 代謝過程，從而改變堆肥產(chǎn)物的性質(zhì)，使得有機(jī)垃圾的堆肥產(chǎn)物更適合作為有機(jī)肥用于植 物栽培。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 為了解決上述的技術(shù)問題，本發(fā)明第一目的在于提供一株可用于有機(jī)垃圾堆肥處 理的棘孢木霉菌株T-1及其微生物菌劑。
[0008] 本發(fā)明第二目的在于提供上述微生物菌劑的制備方法。
[0009] 本發(fā)明第三目的在于提供上述棘孢木霉菌株T-1及其微生物菌劑在有機(jī)垃圾堆 肥處理上的應(yīng)用。
[0010] 為了實(shí)現(xiàn)上述的第一個(gè)目的，本發(fā)明采用了以下的技術(shù)方案：
[0011] -種棘孢木霉T-1，其分類命名為棘孢木霉菌（Trichoderma asperellum)，已保藏 于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，其保藏編號(hào)為CGMCC 9722,保藏日期 為2014年9月24日，保藏地址為北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)中國(guó)科學(xué)院微生物研 究所。
[0012] 作為優(yōu)選，所述棘孢木霉T-1的ITS基因序列為序列表中SEQ ID N0 :1。
[0013] 作為優(yōu)選，所述的棘孢木霉菌株T-1是一株高產(chǎn)復(fù)合纖維素降解酶的生防菌株， 利用多種纖維素材料進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖。
[0014] 菌株生理特征：上述棘孢木霉T-1在PDA培養(yǎng)基上，在28 °C培養(yǎng)4天長(zhǎng)滿整個(gè)9cm 培養(yǎng)皿，菌落形成同心環(huán)，在同心環(huán)上產(chǎn)生稠密的分生孢子，分生孢子暗綠色，無黃色色素 滲出到瓊脂培養(yǎng)基上。
[0015] 菌株的鑒定：通過提取上述棘孢木霉T-1菌株的基因組，并用ITS4/ITS5通用引物 對(duì)該菌株進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定的序列表如SEQ ID NO. 1所示，從ITS rDNA基因序列測(cè)定結(jié)果來 看上述菌株可以歸為棘孢木霉。
[0016] 上述棘孢木霉T-1生長(zhǎng)快，產(chǎn)孢能力強(qiáng)，pH耐受性強(qiáng)，是重要的生物防治菌株，對(duì) 植物病原真菌有拮抗作用，且能高產(chǎn)復(fù)合纖維素降解酶，可利用多種纖維素材料進(jìn)行生長(zhǎng) 繁殖。
[0017] 為了實(shí)現(xiàn)上述的第二個(gè)目的，本發(fā)明采用了以下的技術(shù)方案：
[0018] -種微生物菌劑，所述微生物菌劑為固體菌劑，由棘孢木霉T-1和固體培養(yǎng)基組 成；其活性成分為上述的棘孢木霉T-1菌絲、孢子和其胞外酶中的一種或多種。
[0019] 作為優(yōu)選，該微生物菌劑內(nèi)含有的棘孢木霉T-1活菌數(shù)大于1. OX 108cfu/g。
[0020] 為了實(shí)現(xiàn)上述的第三個(gè)目的，本發(fā)明采用了以下的技術(shù)方案：
[0021] 上述微生物菌劑的制備方法，包括以下步驟：
[0022] 1)菌株活化培養(yǎng)，將權(quán)利要求1所述的棘孢木霉T-1菌株斜面保藏物接種到PDA 平板，置于25°C -30°C下培養(yǎng)3-5天，直至形成大量孢子；
[0023] 2)制備固體培養(yǎng)基，按固體量為3:1的比例，將粉碎粒度為20-40目的秸桿與麩皮 進(jìn)行混合，然后按固液量為1:1的比例，在秸桿和麩皮混合物中加入Mandel培養(yǎng)液，121°C 高壓滅菌20min，冷卻后作為棘孢木霉T-1的固體培養(yǎng)基，其中Mandel培養(yǎng)液含有NaN0 32g， KH2P041. 5g, CaCl20. 3g, MgS04 ? 7H20 0. 3g, FeS04 ? 7H20 0. 005g, MnS04 ? H20 0. 0016g, ZnS04 ? H200. 0014g, C〇C120. 0005g,水 1000ml，pH 為 6 ;
[0024] 3)制備固體微生物菌劑，用無菌水將PDA平板上的棘孢木霉T-1的孢子及菌絲體 沖洗出來作為接種液，均勻?yàn)⒌焦腆w培養(yǎng)基的表面，于25_30°C培養(yǎng)4天后將發(fā)酵產(chǎn)物風(fēng)干 或冷凍干燥，即得微生物菌劑。
[0025] 制備上述棘孢木霉T-1及其微生物菌劑所使用的PDA平板均為常規(guī)操作方法制 備。
[0026] 為了實(shí)現(xiàn)上述的第四個(gè)目的，本發(fā)明采用了以下的技術(shù)方案：
[0027] 上述的棘孢木霉T-1及其微生物菌劑應(yīng)用于有機(jī)垃圾減量和資源化生產(chǎn)有機(jī)肥。
[0028] 上述的有機(jī)垃圾指的是城市、村鎮(zhèn)可堆腐生活垃圾，包括餐廚廢棄物、蔬菜廢棄 物、城市綠化廢棄物、農(nóng)村秸作物桿等富含纖維素和蛋白質(zhì)的有機(jī)廢棄物。
[0029] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于：
[0030] (1)本發(fā)明提供的棘孢木霉T-1生長(zhǎng)快，產(chǎn)孢能力強(qiáng)，pH耐受性強(qiáng)，在環(huán)境pH 4-10 之間均能生長(zhǎng)且分泌纖維素酶，其可以農(nóng)用廢棄秸桿為主要生長(zhǎng)底物和載體形成微生物固 體菌劑，制備成本低，過程簡(jiǎn)單，同時(shí)實(shí)現(xiàn)農(nóng)業(yè)廢棄秸桿的再利用。
[0031] (2)本發(fā)明提供的棘孢木霉T-1及其微生物菌劑接種到有機(jī)垃圾堆肥體系中減少 了垃圾滲透壓的產(chǎn)生，提高了垃圾中有機(jī)物的降解率，降低了堆肥產(chǎn)物中纖維素的含量。
[0032] (3)本發(fā)明提供的棘孢木霉T-1及其微生物菌劑應(yīng)用于有機(jī)垃圾堆肥體系減少了 堆肥前后總磷和總鉀的損失，堆肥產(chǎn)物的A/F值（放線菌數(shù)量/真菌數(shù)量）和B/F比值（細(xì) 菌數(shù)量/真菌數(shù)量）高于不接種棘孢木霉T-1及其微生物菌劑的堆肥產(chǎn)物，有利于減少有 機(jī)肥施用后土傳病害的發(fā)生。
[0033] (4)本發(fā)明將棘孢木霉作為直接堆肥菌劑用于有機(jī)生活垃圾的降解轉(zhuǎn)化，獲得的 有機(jī)肥由于帶有棘孢木霉將具備生物防治的功能。
[0034] 生物保藏聲明
[0035] 棘孢木霉菌（Trichoderma asperellum)，已保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員 會(huì)普通微生物中心，其保藏編號(hào)為CGMCC 9722,保藏日期為2014年9月24日，保藏地址為 北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)中國(guó)科學(xué)院微生物研究所。

【具體實(shí)施方式】
[0036] 下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明 而不用于限制本發(fā)明的范圍。在不背離本發(fā)明精神和實(shí)質(zhì)的情況下，對(duì)本發(fā)明的方法、步驟 或條件所做的修改或替換，均屬于本發(fā)明范圍，若未特別指明，實(shí)施例中所用的技術(shù)手段為 本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟悉的常規(guī)手段。
[0037] 實(shí)施例1 :棘孢木霉T-1的獲得
[0038] 本發(fā)明所涉及的棘孢木霉菌株是采用羧甲基纖維素平板和稀釋涂布法從土壤中 分離獲得，通過剛果紅染色和濾紙條分解試驗(yàn)確定為高效纖維素降解菌，隨后經(jīng)過生理特 征分析和ITS rDNA鑒定確定為棘孢木霉菌，具體步驟如下：
[0039] 1、分離：稱取土樣10g，放入盛有90ml無菌水的三角瓶中，振蕩約20分鐘，即為 10-1稀釋度的土壤溶液，用移液槍從中吸取lml 土壤懸液注入盛有9ml無菌水的試管中，吹 吸三次，試充分混勻，即為10-2稀釋度的土壤溶液，然后再?gòu)拇嗽嚬苤形ml溶液注入盛 有9ml無菌水的試管中，依次類推制成10-3,10-4,10-5,10-6,10-7,10-8,10-9各種稀釋 度的土壤溶液。分別從上述試管稀釋液中吸取200 yl溶液，對(duì)號(hào)放入已寫好稀釋度的羧甲 基纖維素平板中，用無菌刮刀在培養(yǎng)基表面輕輕涂布均勻，倒置于恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)一定時(shí) 間。用無菌的接種環(huán)從上面羧甲基纖維素平板上挑取生長(zhǎng)快速的絲狀真菌菌落，點(diǎn)接種于 羧甲基纖維素雙層平板中央，隨后進(jìn)行剛果紅染色，以透明圈的形成和大小大致反映該菌 的產(chǎn)纖維素酶能力。
[0040] 本實(shí)驗(yàn)挑取了 17個(gè)真菌，在雙層平板上培養(yǎng)3-3. 5天，剛果紅染色，測(cè)量透明圈的 直徑，分析透明圈直徑與菌落直徑之比（HC)，挑選出HC>1的菌株，并通過濾紙條分解試驗(yàn) 進(jìn)一步考察菌株的纖維素分解能力。棘孢木霉T-1就是其中一株高效纖維素降解菌，其HC 值高于其它真菌。
[0041] 2、鑒定
[0042] 該菌株的生物學(xué)特征為：菌落在PDA平板上28°C培養(yǎng)，3-4天擴(kuò)展到9cm，初期白 色稀疏，菌絲在表面匍匐生長(zhǎng)，后形成深綠色產(chǎn)孢區(qū)，反面白色；分生孢子球形，近球形，單 個(gè)近無色，聚集時(shí)呈淡黃綠色，壁光滑。形態(tài)學(xué)特征符合棘孢木霉菌特征。
[0043] 該菌株的分子生物學(xué)鑒定：用通用引物ITS5/ITS4(White et al.，1990)對(duì)真菌 ITS-5. 8SrDNA區(qū)域進(jìn)行擴(kuò)增獲得一個(gè)900bp左右的片段，然后對(duì)PCR片段進(jìn)行序列測(cè)定和 NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)Blast分析。菌株T-1測(cè)序得到的序列如SEQ ID NO. 1所示，經(jīng)分析確定菌株 T-1為棘孢木霉，命名為棘孢木霉T-1。
[0044] 實(shí)施例2 :棘孢木霉T-1的平板拮抗實(shí)驗(yàn)
[0045] 采用對(duì)峙培養(yǎng)法，制備PDA平板，用打孔器在棘孢木霉菌和待拮抗菌邊緣打取一 小塊菌餅，接種到新的PDA屏蔽相對(duì)的兩側(cè)中央，28°C培養(yǎng)，觀察棘孢木霉對(duì)待拮抗菌的作 用。研究結(jié)果表明棘孢木霉T-1可以抑制植物病原菌尖孢鐮刀菌、腐皮鐮刀菌的生長(zhǎng)。
[0046] 實(shí)施例3 :棘孢木霉T-1微生物菌劑的制備
[0047] 以農(nóng)作物秸桿為主要底物，采用固態(tài)發(fā)酵的方式培養(yǎng)棘孢木霉T-1制備微生物菌 齊U，具體制備步驟如下：
[0048] 菌株活化培養(yǎng)，將棘孢木霉T-1菌株斜面保藏物接種到PDA平板，置于25°C _30°C 下培養(yǎng)3-5天，直至形成大量孢子；
[0049] 制備固體培養(yǎng)基，按固體量為3:1的比例，將粉碎粒度為20-40目的秸桿與麩皮進(jìn) 行混合，然后按固液量為1:1的比例，在秸桿和麩皮混合物中加入Mandel培養(yǎng)液，121°C高 壓滅菌20min，冷卻后作為棘孢木霉T-1的固體培養(yǎng)基，其中Mandel培養(yǎng)液含有NaN0 32g， KH2P041. 5g, CaCl20. 3g, MgS04 ? 7H20 0. 3g, FeS04 ? 7H20 0. 005g, MnS04 ? H20 0. 0016g, ZnS04 ? H200. 0014g, C〇C120. 0005g,水 1000ml，pH 為 6 ;
[0050] 制備固體微生物菌劑，用無菌水將PDA平板上的棘孢木霉T-1的孢子及菌絲體沖 洗出來作為接種液，均勻?yàn)⒌焦腆w培養(yǎng)基的表面，于25-30°C培養(yǎng)4天后將發(fā)酵產(chǎn)物風(fēng)干 或冷凍干燥，即得微生物菌劑。
[0051] 實(shí)施例4 :棘孢木霉T-1微生物菌劑的木質(zhì)纖維素酶活測(cè)定
[0052] 浸提液（粗酶液）：將4g棘孢木霉T-1微生物菌劑與80ml檸檬酸緩沖液 (pH4. 8, 0. 05M)混合，于37°C，180rpm振蕩提取2h，離心收集上清。
[0053] 濾紙酶酶活測(cè)定（FPAase):反應(yīng)體系為檸檬酸緩沖液（0.05M，pH 4.8)650iil， Waterman No. 1濾紙0. 5mg (直徑為0. 5cm的圓紙片2個(gè)），50〇 C預(yù)熱lOmin后，加入100 y 1 粗酶液，50°C保溫50min。加入含750iU DNS液的反應(yīng)管中，沸水浴5min，冰水終止反應(yīng)。 測(cè)定540nm處的吸光度。酶活定義：在測(cè)定條件下，每分鐘催化底物水解生成1 y mol葡萄 糖的酶量為一個(gè)酶活力單位IU。
[0054] 羧甲基纖維素酶酶活測(cè)定（CMCase):在650 ill的2% CMC-Na溶液（CMC-Na溶于 0. 05M，pH 4. 8的檸檬酸緩沖液）中加入100 yl粗酶液，50°C保溫30min。在反應(yīng)液中加入 750iil DNS，沸水浴5min，冰水冷卻。測(cè)定540nm處的吸光度。酶活定義：在測(cè)定條件下， 每分鐘催化底物水解生成1 U mol葡萄糖的酶量為一個(gè)酶活力單位IU。
[0055] -葡萄糖苷酶酶活測(cè)定：在450 ill的0. 4M Na2HP04-0. 1M檸檬酸緩沖液（pH 5) 中加入5〇111粗酶液，5〇1：保溫1〇111111，再加入0.51111已在5〇1：預(yù)熱了1〇111111以上的51111對(duì) 硝基苯-0-D-吡喃葡萄糖苷（pNPG)，在50°C反應(yīng)10min后，加入500 ill Na2C03 (1M)終止 反應(yīng)。室溫放置5min后，測(cè)定400nm處的吸光度。酶活定義：在測(cè)定條件下，每小時(shí)催化底 物水解生成1 y mol產(chǎn)物的酶量為一個(gè)酶活力單位IU。
[0056] 木聚糖酶酶活測(cè)定：將500 ii 1的1. 0 %燕麥木聚糖溶液（燕麥木聚糖溶于 0.05M，pH 4.8的檸檬酸緩沖液）與250iil稀釋的粗酶混合，50〇C保溫30min。加入含 750iil DNS液的反應(yīng)管中，沸水浴5min，冰水終止反應(yīng)。測(cè)定540nm處的吸光度。酶活定 義：在測(cè)定條件下，每分鐘催化底物水解生成1 U mol木糖的酶量為一個(gè)酶活力單位IU。
[0057] 我們將棘孢木霉T-1微生物菌劑與其他纖維素降解真菌微生物菌劑進(jìn)行對(duì)比，酶 活測(cè)定結(jié)果見表1。由表1可知，棘孢木霉T-1具有高效的木質(zhì)纖維素酶分泌能力。
[0058] 表1棘孢木霉T-1微生物菌劑和部分纖維素降解真菌微生物菌劑的纖維素酶測(cè)定 結(jié)果
[0059]

【權(quán)利要求】
1. 一種棘孢木霉T-1，其分類命名為棘孢木霉菌（Trichoderma asperellum)，已保藏 于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，其保藏編號(hào)為CGMCC 9722,保藏日期 為2014年9月24日，保藏地址為北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)中國(guó)科學(xué)院微生物研 究所。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種棘孢木霉T-1，其特征在于：所述棘孢木霉T-1的ITS基 因序列為序列表中SEQ ID NO :1。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種棘孢木霉T-1，其特征在于：所述棘孢木霉菌株T-1是一 株高產(chǎn)復(fù)合纖維素降解酶的生防菌株，利用多種纖維素材料進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖。
4. 一種微生物菌劑，其特征在于：所述微生物菌劑為固體菌劑，由棘孢木霉T-1和固體 培養(yǎng)基組成；其活性成分為權(quán)利要求1所述的棘孢木霉T-1菌絲、孢子和其胞外酶中的一種 或多種。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的微生物菌劑，其特征在于：其內(nèi)含有的棘孢木霉T-1活菌數(shù) 大于 1. 0X108cfu/g。
6. 根據(jù)權(quán)利要求4或5所述微生物菌劑的制備方法，其特征在于該方法包括以下步 驟： 1) 菌株活化培養(yǎng)，將權(quán)利要求1所述的棘孢木霉T-1菌株斜面保藏物接種到PDA平板， 置于25°C -30°C下培養(yǎng)3-5天，直至形成大量孢子； 2) 制備固體培養(yǎng)基，按固體量為3:1的比例，將粉碎粒度為20-40目的秸桿與麩皮進(jìn) 行混合，然后按固液量為1:1的比例，在秸桿和麩皮混合物中加入Mandel培養(yǎng)液，121°C高 壓滅菌20min，冷卻后作為棘孢木霉T-1的固體培養(yǎng)基，其中Mandel培養(yǎng)液含有NaN032g， KH2P041. 5g, CaCl20. 3g, MgS04 ? 7H20 0. 3g, FeS04 ? 7H20 0. 005g, MnS04 ? H20 0. 0016g, ZnS04 ? H200. 0014g, C〇C120. 0005g,水 1000ml，pH 為 6 ; 3) 制備固體微生物菌劑，用無菌水將PDA平板上的棘孢木霉T-1的孢子及菌絲體沖洗 出來作為接種液，均勻?yàn)⒌焦腆w培養(yǎng)基的表面，于25-30°C培養(yǎng)4天后將發(fā)酵產(chǎn)物風(fēng)干或冷 凍干燥，即得微生物菌劑。
7. 權(quán)利要求1所述的棘孢木霉T-1在有機(jī)垃圾減量和資源化生產(chǎn)有機(jī)肥中的應(yīng)用。
8. 權(quán)利要求4或5所述的微生物菌劑在有機(jī)垃圾減量和資源化處理中的應(yīng)用。
9. 根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的有機(jī)垃圾應(yīng)指的是城市、村鎮(zhèn)可堆腐生活垃圾，包括餐 廚廢棄物、蔬菜廢棄物、城市綠化廢棄物、農(nóng)村秸作物桿等富含纖維素和蛋白質(zhì)的有機(jī)廢棄 物。
【文檔編號(hào)】C12R1/885GK104450530SQ201410578593
【公開日】2015年3月25日 申請(qǐng)日期:2014年10月24日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月24日
【發(fā)明者】林輝, 符建榮, 馬軍偉, 夏蕓, 趙宇華, 姜麗娜, 葉靜, 王強(qiáng), 俞巧鋼, 孫萬春, 鄒平 申請(qǐng)人:浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院