一種用于油菜秸稈和菌核腐解的噴施型復(fù)合菌劑的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種用于油菜秸稈和菌核腐解的噴施型復(fù)合菌劑制備方法。一種用于油菜秸稈和菌核腐解的噴施型復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于包括如下步驟：1)哈茨木霉菌劑的制備；2)棘孢曲霉菌劑的制備；3)按哈茨木霉菌劑：棘孢曲霉菌劑的質(zhì)量比為1～2∶1，將哈茨木霉菌劑和棘孢曲霉菌劑混合裝袋，得到噴施型復(fù)合菌劑。該方法得到的復(fù)合菌劑的有效活菌數(shù)高，可高效腐解油菜秸稈和菌核，該方法成本低。
【專利說明】—種用于油菜秸稈和菌核腐解的噴施型復(fù)合菌劑的制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種用于油菜秸桿和菌核腐解的噴施型復(fù)合菌劑制備方法。

【背景技術(shù)】
[0002]近年來，我國油菜全程機械化進程加快，隨著油菜機械收獲面積的增加，伴隨的現(xiàn)象是大量的油菜秸桿直接還田，但給大田后茬作物生產(chǎn)帶來了兩個重要問題，一是油菜秸桿如何能快速腐熟，既不影響后茬作物幼苗生長、又能快速提供后茬作物幼苗的養(yǎng)分需求，二是如何降解寄生油菜秸桿中菌核，降低土傳病害一油菜菌核病對下季油菜的危害。所以，田間原位生物轉(zhuǎn)化、簡便高效秸桿還田的油菜秸桿和菌核腐解的噴施型復(fù)合菌劑(及其制備方法)的施用是支撐機械化油菜生產(chǎn)的重要途徑。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的在于提供一種用于油菜秸桿和菌核腐解的噴施型復(fù)合菌劑的制備方法，該方法得到的復(fù)合菌劑的有效活菌數(shù)高，可高效腐解油菜秸桿和菌核，該方法成本低。
[0004]為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是:一種用于油菜秸桿和菌核腐解的噴施型復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于包括如下步驟:
[0005]I)哈茨木霉菌劑的制備:
[0006]①接種真菌:將哈茨木霉菌體接種在含有V8+S培養(yǎng)基的搪瓷盤中，蓋上干凈雙層沙布，28°C培養(yǎng)5天，然后35°C風(fēng)干2天；
[0007]先將哈茨木霉配制成孢子懸浮液，接種量為每公斤V8+S培養(yǎng)基加10毫升孢子懸浮液，每毫升孢子量為> 5 X 14個；
[0008]②按各組份所占重量百分數(shù)為:可溶性淀粉85.0%，葡萄糖13.5%，熒光增白劑0.3%，真菌孢子1.2%，選取可溶性淀粉、葡萄糖、熒光增白劑和步驟①接種后的哈茨木霉真菌孢子；用可溶性淀粉、葡萄糖和熒光增白劑與干燥的真菌孢子充分混合后，過100目篩網(wǎng)，35°C再風(fēng)干I天，得到哈茨木霉菌劑；
[0009]2)棘抱曲霉囷劑的制備:
[0010]①接種真菌:將棘孢曲霉菌體接種在含有V8+S培養(yǎng)基的搪瓷盤中，蓋上干凈雙層沙布，28°C培養(yǎng)5天，然后35°C風(fēng)干2天；
[0011]先將棘孢曲霉配制成孢子懸浮液，接種量為每公斤V8+S培養(yǎng)基加10毫升孢子懸浮液，每毫升孢子量為> 5 X 14個；
[0012]②按各組份所占重量百分數(shù)為:可溶性淀粉85.0%，葡萄糖13.5%，熒光增白劑0.3%，真菌孢子1.2%，選取可溶性淀粉、葡萄糖、熒光增白劑和步驟①接種后的棘孢曲霉真菌孢子；用可溶性淀粉、葡萄糖和熒光增白劑與干燥的真菌孢子充分混合后，過100目篩網(wǎng)，35°C再風(fēng)干I天，得到棘孢曲霉菌劑；
[0013]3)按哈茨木霉菌劑:棘孢曲霉菌劑的質(zhì)量比為I?2:1，將哈茨木霉菌劑和棘孢曲霉菌劑混合裝袋，得到噴施型復(fù)合菌劑。
[0014]步驟3)中按每袋15克分裝(每袋15克中有10克為哈茨木霉菌劑，另5克為棘孢曲霉菌劑)，施用量為每畝15克；最終每克含真菌孢子量為111個/克以上。
[0015]所述的V8+S培養(yǎng)基為:馬鈴薯30wt%、番爺20wt%、胡蘿卜1wt%、洋蔥1wt%、青椒1wt%、療菜5wt%、菠菜5wt%、大蒜5wt%、鹿糖5wt%。
[0016]上述V8+S培養(yǎng)基的制備:
[0017]I)按各組份所占重量百分數(shù):馬鈴薯30%、番茄20%、胡蘿卜10%、洋蔥10%、青椒10%、芹菜5%、菠菜5%、大蒜5%、蔗糖5%，選取馬鈴薯、番茄、胡蘿卜、洋蔥、青椒、芹菜、菠菜、大蒜和蔗糖；
[0018]2)將馬鈴薯、番茄、胡蘿卜、洋蔥、青椒、芹菜、菠菜、大蒜分別切成小塊，并混合均勻，粉碎，加入蔗糖并混合均勻，得到V8+S培養(yǎng)基。
[0019]其中，V8代表8種蔬菜，S代表蔗糖。
[0020]本發(fā)明以V8+S培養(yǎng)基培養(yǎng)和產(chǎn)生大量真菌孢子，可溶性淀粉為載體，吸附孢子；該噴施型復(fù)合菌劑噴施后，葡萄糖可縮短芽孢萌發(fā)的時間并加快菌絲的生長，腐解油菜秸桿和菌核；熒光增白劑可有效地防御太陽中紫外線對真菌孢子和菌絲的傷害，保證持續(xù)的高菌數(shù)和延長微生物存活時間，在秸桿和菌核上持續(xù)發(fā)展并形成局部優(yōu)勢類群。它具有耐環(huán)境條件、有效活菌數(shù)高、可在室溫長期保存，施用(噴施)后受環(huán)境影響小并對紫外線帶來的傷害有一定的防護，能有效地在田間原位快速腐解油菜秸桿和菌核。
[0021]本發(fā)明的有益效果是:
[0022]1、本發(fā)明的菌劑持有很高的有效菌數(shù)，超過目前所有菌肥的有效活菌數(shù)。室溫貯藏12個月后，真菌孢子仍保持在111個/克以上。
[0023]2、本發(fā)明的菌劑耐環(huán)境條件，不需要無菌操作和無菌包裝，生產(chǎn)工藝簡便、成本低(單位使用量減少，降低了生產(chǎn)和使用成本)。
[0024]3、本發(fā)明的菌劑，實現(xiàn)油菜秸桿田間原位生物轉(zhuǎn)化還田和土傳病害(油菜菌核病等)的生物防治，促進下茬作物生長。
[0025]4、本發(fā)明的菌劑，施用方便，即可機械也可人工噴施，該制劑中的熒光增白劑可有效地防御太陽中紫外線對真菌孢子和菌絲的傷害，保證持續(xù)的高菌數(shù)和延長微生物存活時間，在秸桿和菌核上持續(xù)發(fā)展并形成局部優(yōu)勢類群。
[0026]本發(fā)明的噴施型復(fù)合菌劑適合油菜收獲時施用，實現(xiàn)油菜秸桿田間原位生物轉(zhuǎn)化還田和傳病害(油菜菌核病等)的生物防治。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0027]圖1是本發(fā)明噴施型復(fù)合菌劑的粉劑圖。

【具體實施方式】
[0028]為了更好地理解本發(fā)明，下面結(jié)合實施例進一步闡明本發(fā)明的內(nèi)容，但本發(fā)明的內(nèi)容不僅僅局限于下面的實施例。
[0029]下述實施例中:V8+S培養(yǎng)基(由8種蔬菜組成，此培養(yǎng)基利于真菌形成孢子)為:馬鈴薯30wt%、番爺20wt%、胡蘿卜1wt%、洋蔥1wt%、青椒1wt%、芳:菜5wt%、菠菜5wt %、大蒜 5wt %、鹿糖 5wt %。
[0030]上述V8+S培養(yǎng)基的制備:
[0031]I)按各組份所占重量百分數(shù):馬鈴薯30%、番茄20%、胡蘿卜10%、洋蔥10%、青椒10%、芹菜5%、菠菜5%、大蒜5%、蔗糖5%，選取馬鈴薯、番茄、胡蘿卜、洋蔥、青椒、芹菜、菠菜、大蒜和蔗糖；
[0032]2)將馬鈴薯、番茄、胡蘿卜、洋蔥、青椒、芹菜、菠菜、大蒜(8種蔬菜)分別切成表面為1-2平方厘米的小塊，并混合均勻，再用均漿器打碎，加入蔗糖并混合均勻，平放入搪瓷盤中，高度小于0.5厘米，得到V8+S培養(yǎng)基(即可用于接種真菌菌體)，備用。
[0033]實施例1:
[0034]一種用于油菜秸桿和菌核腐解的噴施型復(fù)合菌劑的制備方法，包括如下步驟:
[0035]I)哈茨木霉菌劑的制備:
[0036]①接種真菌:將哈茨木霉菌體接種在含有V8+S培養(yǎng)基的搪瓷盤中，蓋上干凈雙層沙布，28°C培養(yǎng)5天，然后35°C風(fēng)干2天；
[0037]先將哈茨木霉配制成孢子懸浮液，接種量為每公斤V8+S培養(yǎng)基加10毫升孢子懸浮液，每毫升孢子量為> 5 X 14個；
[0038]②按各組份所占重量百分數(shù)為:可溶性淀粉85.0%，葡萄糖13.5%，熒光增白劑0.3%，真菌孢子1.2%，選取可溶性淀粉、葡萄糖、熒光增白劑和步驟①接種后的哈茨木霉真菌孢子；用可溶性淀粉、葡萄糖和熒光增白劑與干燥的真菌孢子充分混合后，過100目篩網(wǎng)，35°C再風(fēng)干I天，得到哈茨木霉菌劑；
[0039]2)棘抱曲霉囷劑的制備:
[0040]①接種真菌:將棘孢曲霉菌體接種在含有V8+S培養(yǎng)基的搪瓷盤中，蓋上干凈雙層沙布，28°C培養(yǎng)5天，然后35°C風(fēng)干2天；
[0041]先將棘孢曲霉配制成孢子懸浮液，接種量為每公斤V8+S培養(yǎng)基加10毫升孢子懸浮液，每毫升孢子量為> 5 X 14個；
[0042]②按各組份所占重量百分數(shù)為:可溶性淀粉85.0%，葡萄糖13.5%，熒光增白劑0.3%，真菌孢子1.2%，選取可溶性淀粉、葡萄糖、熒光增白劑和步驟①接種后的棘孢曲霉真菌孢子；用可溶性淀粉、葡萄糖和熒光增白劑與干燥的真菌孢子充分混合后，過100目篩網(wǎng)，35°C再風(fēng)干I天，得到棘孢曲霉菌劑；
[0043]3)按哈茨木霉菌劑:棘孢曲霉菌劑的質(zhì)量比為2:1，將哈茨木霉菌劑和棘孢曲霉菌劑混合裝袋，
[0044]按每袋15克分裝(每袋15克中有10克為哈茨木霉菌劑，另5克為棘孢曲霉菌劑)，施用量為每畝15克；最終每克含真菌孢子量為111個/克以上，得到噴施型復(fù)合菌劑。
[0045]根據(jù)當(dāng)年田間所調(diào)查的油菜菌核病病情指數(shù)決定哈茨木霉和棘孢曲霉的分裝比例。油菜菌核病病情指數(shù)< 20時，哈茨木霉和棘孢曲霉的分裝比例為2:1。哈茨木霉腐解秸桿的能力要強于棘孢曲霉，但棘孢曲霉腐解油菜菌核的能力要強于哈茨木霉。其目的在于確保油菜秸桿和菌核能同時田間原位有效腐解。
[0046]施用效果:30天調(diào)查，同未噴施“噴施型復(fù)合菌劑”對照比較，油菜秸桿腐解率提高16.5% ;菌核腐解率提高38.1%。
[0047]實施例2:
[0048]一種用于油菜秸桿和菌核腐解的噴施型復(fù)合菌劑的制備方法，包括如下步驟:
[0049]I)哈茨木霉菌劑的制備:
[0050]①接種真菌:將哈茨木霉菌體接種在含有V8+S培養(yǎng)基的搪瓷盤中，蓋上干凈雙層沙布，28°C培養(yǎng)5天，然后35°C風(fēng)干2天；
[0051]先將哈茨木霉配制成孢子懸浮液，接種量為每公斤V8+S培養(yǎng)基加10毫升孢子懸浮液，每毫升孢子量為> 5 X 14個；
[0052]②按各組份所占重量百分數(shù)為:可溶性淀粉85.0%，葡萄糖13.5%，熒光增白劑0.3%，真菌孢子1.2%，選取可溶性淀粉、葡萄糖、熒光增白劑和步驟①接種后的哈茨木霉真菌孢子；用可溶性淀粉、葡萄糖和熒光增白劑與干燥的真菌孢子充分混合后，過100目篩網(wǎng)，35°C再風(fēng)干I天，得到哈茨木霉菌劑；
[0053]2)棘抱曲霉囷劑的制備:
[0054]①接種真菌:將棘孢曲霉菌體接種在含有V8+S培養(yǎng)基的搪瓷盤中，蓋上干凈雙層沙布，28 °C培養(yǎng)5天，然后35 °C風(fēng)干2天；
[0055]先將棘孢曲霉配制成孢子懸浮液，接種量為每公斤V8+S培養(yǎng)基加10毫升孢子懸浮液，每毫升孢子量為> 5 X 14個；
[0056]②按各組份所占重量百分數(shù)為:可溶性淀粉85.0%，葡萄糖13.5%，熒光增白劑0.3%，真菌孢子1.2%，選取可溶性淀粉、葡萄糖、熒光增白劑和步驟①接種后的棘孢曲霉真菌孢子；用可溶性淀粉、葡萄糖和熒光增白劑與干燥的真菌孢子充分混合后，過100目篩網(wǎng)，35°C再風(fēng)干I天，得到棘孢曲霉菌劑；
[0057]3)按哈茨木霉菌劑:棘孢曲霉菌劑的質(zhì)量比為1:1，將哈茨木霉菌劑和棘孢曲霉菌劑混合裝袋，
[0058]按每袋15克分裝(每袋15克中有7.5克為哈茨木霉菌劑，另7.5克為棘孢曲霉菌劑)，施用量為每畝15克；最終每克含真菌孢子量為111個/克以上，得到噴施型復(fù)合菌劑。
[0059]根據(jù)當(dāng)年田間所調(diào)查的油菜菌核病病情指數(shù)決定哈茨木霉和棘孢曲霉的分裝比例。油菜菌核病病情指數(shù)> 20時，哈茨木霉和棘孢曲霉的分裝比例為1:1。哈茨木霉腐解秸桿的能力要強于棘孢曲霉，但棘孢曲霉腐解油菜菌核的能力要強于哈茨木霉。其目的在于確保油菜秸桿和菌核能同時田間原位有效腐解。
[0060]施用效果:30天調(diào)查，同未噴施“噴施型復(fù)合菌劑”對照比較，油菜秸桿腐解率提高23.9% ;菌核腐解率提高31.4%。
【權(quán)利要求】
1.一種用于油菜秸桿和菌核腐解的噴施型復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于包括如下步驟: 1)哈茨木霉菌劑的制備: ①接種真菌:將哈茨木霉菌體接種在含有V8+S培養(yǎng)基的搪瓷盤中，蓋上干凈雙層沙布，28°C培養(yǎng)5天，然后35°C風(fēng)干2天； 先將哈茨木霉配制成孢子懸浮液，接種量為每公斤V8+S培養(yǎng)基加10毫升孢子懸浮液，每暈升孢子量為彡5 X 14個； ②按各組份所占重量百分數(shù)為:可溶性淀粉85.0 %，葡萄糖13.5 %，熒光增白劑0.3%，真菌孢子1.2%，選取可溶性淀粉、葡萄糖、熒光增白劑和步驟①接種后的哈茨木霉真菌孢子；用可溶性淀粉、葡萄糖和熒光增白劑與干燥的真菌孢子充分混合后，過100目篩網(wǎng)，35°C再風(fēng)干I天，得到哈茨木霉菌劑； 2)棘抱曲霉囷劑的制備: ①接種真菌:將棘孢曲霉菌體接種在含有V8+S培養(yǎng)基的搪瓷盤中，蓋上干凈雙層沙布，28°C培養(yǎng)5天，然后35°C風(fēng)干2天； 先將棘孢曲霉配制成孢子懸浮液，接種量為每公斤V8+S培養(yǎng)基加10毫升孢子懸浮液，每暈升孢子量為彡5 X 14個； ②按各組份所占重量百分數(shù)為:可溶性淀粉85.0 %，葡萄糖13.5 %，熒光增白劑0.3%，真菌孢子1.2%，選取可溶性淀粉、葡萄糖、熒光增白劑和步驟①接種后的棘孢曲霉真菌孢子；用可溶性淀粉、葡萄糖和熒光增白劑與干燥的真菌孢子充分混合后，過100目篩網(wǎng)，35°C再風(fēng)干I天，得到棘孢曲霉菌劑； 3)按哈茨木霉菌劑:棘孢曲霉菌劑的質(zhì)量比為I?2:1，將哈茨木霉菌劑和棘孢曲霉菌劑混合裝袋，得到噴施型復(fù)合菌劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于油菜秸桿和菌核腐解的噴施型復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于:步驟3)中按每袋15克分裝，每克含真菌孢子量為111個/克以上。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于油菜秸桿和菌核腐解的噴施型復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于:所述的V8+S培養(yǎng)基為:馬鈴薯30wt%、番茄20wt%、胡蘿卜10wt%、洋蔥1wt%、青椒 1wt%、療菜 5wt%、菠菜 5wt%、大蒜 5wt%、鹿糖 5wt%。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種用于油菜秸桿和菌核腐解的噴施型復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于:所述V8+S培養(yǎng)基的制備: 1)按各組份所占重量百分數(shù):馬鈴薯30%、番茄20%、胡蘿卜10%、洋蔥10%、青椒10%、芹菜5%、菠菜5%、大蒜5%、蔗糖5%，選取馬鈴薯、番茄、胡蘿卜、洋蔥、青椒、芹菜、菠菜、大蒜和蔗糖； 2)將馬鈴薯、番茄、胡蘿卜、洋蔥、青椒、芹菜、菠菜、大蒜分別切成小塊，并混合均勻，粉碎，加入蔗糖并混合均勻，得到V8+S培養(yǎng)基。
【文檔編號】C12R1/66GK104312930SQ201410584321
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2014年10月27日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月27日
【發(fā)明者】謝立華, 廖星, 胡小加, 余常兵, 李銀水, 秦路, 張銀波, 胡磊 申請人:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院油料作物研究所