具有保護(hù)肝損傷的制品的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種具有保護(hù)肝損傷的制品，按照質(zhì)量份數(shù)計(jì)包括如下組分：16份～20份的絞股藍(lán)提取物、30份～40份的丹參提取物、35份～45份的葛根提取物以及8份～10份的五味子提取物。這種具有保護(hù)肝損傷的制品包括絞股藍(lán)提取物、丹參提取物、葛根提取物和五味子提取物，通過(guò)清熱解毒、活血化瘀、滋養(yǎng)肝腎、養(yǎng)陰生津益精，能夠?qū)瘜W(xué)性肝損傷起到輔助保護(hù)作用。絞股藍(lán)提取物、丹參提取物、葛根提取物、五味子提取物均具有保護(hù)肝臟的作用，并且這種具有保護(hù)肝損傷的制品的安全性毒理學(xué)試驗(yàn)、動(dòng)物功能學(xué)試驗(yàn)、功效成分試驗(yàn)、穩(wěn)定性試驗(yàn)、衛(wèi)生學(xué)試驗(yàn)報(bào)告表明，這種具有保護(hù)肝損傷的制品對(duì)化學(xué)性肝損傷具有輔助保護(hù)作用。
【專(zhuān)利說(shuō)明】具有保護(hù)肝損傷的制品

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及保健食品領(lǐng)域，尤其涉及一種具有保護(hù)肝損傷的制品。

【背景技術(shù)】
[0002]肝臟為人體消化系統(tǒng)中最大、最重要的消化腺體，具有重要的消化功能。肝臟也是人體的主要代謝器官和防御器官，對(duì)人體外來(lái)的和代謝產(chǎn)生的許多有害因素實(shí)施其強(qiáng)大的防御解毒功能。一般情況下，肝臟對(duì)外來(lái)化學(xué)毒物有很強(qiáng)的生物轉(zhuǎn)化、解毒功能，主要有以下四種方式:(1)氧化解毒。例如，酒精是許多人飲酒中的主要有害化學(xué)物，肝臟通過(guò)乙醇?xì)涿?，順次將酒精氧化成醛和酸，其他醇?lèi)、醛類(lèi)也按該模式轉(zhuǎn)化成酸，酸與其他物質(zhì)結(jié)合成鹽類(lèi)，毒性消失，排除體外。(2)還原解毒。例如，工業(yè)毒物硝基苯，苯環(huán)上的硝基可還原為氨基，氨基的毒性遠(yuǎn)比硝基的毒性??；催眠用的三氯乙醛，在肝內(nèi)還原為三氯乙醇而失去催眠作用，臨床上用的氯霉素、曾大量應(yīng)用過(guò)的有機(jī)氯農(nóng)藥也都是在肝中脫氧還原實(shí)現(xiàn)解毒。(3)水解解毒。許多有害化學(xué)物質(zhì)在歸納中經(jīng)水解酶的作用，發(fā)生加水分解，改變結(jié)構(gòu)，失去或破壞有毒基團(tuán)而消失或減輕了毒性。例如體內(nèi)H202、自由基、過(guò)氧化脂質(zhì)溶解后均可失去有害作用。(4)結(jié)合毒性。結(jié)合毒性肝臟中毒物解毒的最主要方式，往往是結(jié)合一些極性基團(tuán)，形成水溶性較大的物質(zhì)，減輕或消失了毒性而排除體外，例如有機(jī)物與羧基，與硫酸根，與黃酸基，與葡萄糖醛酸，與甘氨酸，與谷胱甘肽等相結(jié)合，都是肝臟解毒性生物轉(zhuǎn)化的重要形式。在這種防御有害因素對(duì)機(jī)體損害的同時(shí)，肝臟本身也難免受到傷害。
[0003]由化學(xué)性肝毒性物質(zhì)所造成的肝損傷稱(chēng)為化學(xué)性肝損傷。根據(jù)毒性的強(qiáng)弱，這些親肝毒物可分為三類(lèi):(1)劇毒類(lèi):包括磷、三硝基甲苯、四氯化碳、氯奈、丙烯醛等。(2)高毒類(lèi):砷、汞、銻、苯胺、氯仿、呻化氫、二甲基甲酰胺等。(3)低毒類(lèi):二硝基酚、乙醛、有機(jī)磷、丙烯晴、鉛等。一些親肝毒物與其他非毒性化學(xué)物質(zhì)結(jié)合，可增加毒性，如脂肪醇類(lèi)(甲醇、乙醇、異丙醇等)能增強(qiáng)鹵代烴類(lèi)(四氯化碳、氯仿等)的毒性。這些化學(xué)物質(zhì)也包括酒精及某些藥物引起的肝損傷，而且酒精肝損傷是目前最常見(jiàn)的。這些毒物在人群中普遍易感，潛伏期短，病變的過(guò)程與感染的劑量直接相關(guān)，可引起肝臟不同程度的肝細(xì)胞壞死、脂肪變形、肝硬化、膽汁淤積、肝纖維化、甚至肝癌。
[0004]化學(xué)毒物損傷肝臟的機(jī)理主要有:(I)脂肪變性。四氯化碳、黃磷等可干擾脂蛋白的合成與轉(zhuǎn)運(yùn)，形成脂肪肝。(2)脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，這是中毒性肝損傷的特殊表現(xiàn)形式，如四氯化碳經(jīng)體內(nèi)代謝使得體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物MDA升高，GSH和NADPH降低，導(dǎo)致生物膜上的脂質(zhì)過(guò)氧化，破壞膜的磷脂，改變細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與功能。此類(lèi)反應(yīng)最嚴(yán)重可導(dǎo)致肝壞死。
(3)膽汁郁積反應(yīng)，主要表現(xiàn)在急性肝損傷中，與肝細(xì)胞膜和微絨毛受損，膽管壁的通透性改變，引起膽汁酸排泄障礙，化學(xué)物質(zhì)在膽管內(nèi)沉積有關(guān)。
[0005]隨著社會(huì)發(fā)展和世界人口的老齡化，酗酒問(wèn)題的廣泛存在，藥物的濫用，使得化學(xué)性肝損傷已經(jīng)成為一種常見(jiàn)病、多發(fā)病，嚴(yán)重影響人民的健康。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]基于此，有必要提供一種能夠?qū)瘜W(xué)性肝損傷起到輔助保護(hù)作用的具有保護(hù)肝損傷的制品。
[0007]一種具有保護(hù)肝損傷的制品，按照質(zhì)量份數(shù)計(jì)包括如下組分:
[0008]16份?20份的絞股藍(lán)提取物、30份?40份的丹參提取物、35份?45份的葛根提取物以及8份?10份的五味子提取物。
[0009]在一個(gè)實(shí)施例中，所述絞股藍(lán)提取物為17份。
[0010]在一個(gè)實(shí)施例中，所述丹參提取物為34份。
[0011]在一個(gè)實(shí)施例中，所述葛根提取物為39份。
[0012]在一個(gè)實(shí)施例中，所述五味子提取物為9份。
[0013]在一個(gè)實(shí)施例中，還包括0.8份?I份的輔料。
[0014]在一個(gè)實(shí)施例中，所述輔料為硬脂酸鎂、二氧化硅或微晶纖維素。
[0015]在一個(gè)實(shí)施例中，所述具有保護(hù)肝損傷的制品為膠囊劑或片劑。
[0016]這種具有保護(hù)肝損傷的制品包括絞股藍(lán)提取物、丹參提取物、葛根提取物和五味子提取物，通過(guò)清熱解毒、活血化瘀、滋養(yǎng)肝腎、養(yǎng)陰生津益精，能夠?qū)瘜W(xué)性肝損傷起到輔助保護(hù)作用?，F(xiàn)代藥理學(xué)文獻(xiàn)表明，絞股藍(lán)提取物、丹參提取物、葛根提取物、五味子提取物均具有保護(hù)肝臟的作用，并且這種具有保護(hù)肝損傷的制品的安全性毒理學(xué)試驗(yàn)、動(dòng)物功能學(xué)試驗(yàn)、功效成分試驗(yàn)、穩(wěn)定性試驗(yàn)、衛(wèi)生學(xué)試驗(yàn)報(bào)告表明，這種具有保護(hù)肝損傷的制品對(duì)化學(xué)性肝損傷的輔助保護(hù)作用功能明確，質(zhì)量可控，食用安全。

【具體實(shí)施方式】
[0017]本發(fā)明可以以許多不同的形式來(lái)實(shí)現(xiàn)，并不限于本文所描述的實(shí)施例。相反地，提供這些實(shí)施例的目的是使對(duì)本發(fā)明的公開(kāi)內(nèi)容的理解更加透徹全面。
[0018]化學(xué)性肝損傷產(chǎn)生的原因一方面為藥毒酒食釀成濕熱滯留體內(nèi)，阻滯肝膽氣機(jī)，影響脾胃運(yùn)化；另一方面毒邪傷正，耗損肝腎陰血精氣。其病機(jī)概括為肝腎陰虛、精血不足、濕熱瘀毒阻滯，故而治療當(dāng)補(bǔ)益肝腎、清熱化濕、活血化瘀。中醫(yī)治療學(xué)說(shuō)中素有“養(yǎng)正積自消”觀點(diǎn)，對(duì)于化學(xué)性肝損傷的治療，強(qiáng)調(diào)從補(bǔ)益精血、滋養(yǎng)肝腎入手，以扶助正氣為要。
[0019]一實(shí)施方式的具有保護(hù)肝損傷的制品，按照質(zhì)量份數(shù)計(jì)包括如下組分:
[0020]16份?20份的絞股藍(lán)提取物、30份?40份的丹參提取物、35份?45份的葛根提取物以及8份?10份的五味子提取物。
[0021]絞股藍(lán)是一種草質(zhì)藤本植物，屬葫蘆科。我國(guó)民間自古就將其列為健身延壽的佳品。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，絞股藍(lán)味苦、甘，性微寒，歸肺、脾、心、腎經(jīng)，具有清熱解毒，清肺化痰止咳，補(bǔ)氣養(yǎng)陰生津，養(yǎng)心安神，固精的功效。絞股藍(lán)呈人參苦甘為上品，呈甘草樣甜味為正品?，F(xiàn)代藥理研宄表明，絞股藍(lán)中主要含有皂苷和多糖，另外還含有黃酮類(lèi)化合物、萜類(lèi)、有機(jī)酸、生物堿、蛋白質(zhì)、維生素、胡蘿卜素、脂肪、纖維等以及鋅、銅、鎂、鐵、錳、砸等微量元素。其中4種皂苷與人參皂苷屬同一物質(zhì)，皂苷總含量高于人參，故有“第二人參”之譽(yù)。絞股藍(lán)具有降血脂、抗動(dòng)脈硬化、降血糖、降血壓、調(diào)節(jié)免疫功能、抗衰老、保護(hù)肝臟等作用。
[0022]近代生物醫(yī)學(xué)研宄表明，許多工業(yè)化學(xué)物質(zhì)對(duì)機(jī)體的損害與增強(qiáng)脂質(zhì)過(guò)氧化作用有著密切的關(guān)系。而肝臟是體內(nèi)重要的代謝、解毒器官，是脂質(zhì)過(guò)氧化最敏感的器官之一，肝臟脂質(zhì)過(guò)氧化作用增強(qiáng)致使肝細(xì)胞受損又進(jìn)一步影響到許多物質(zhì)在體內(nèi)的代謝轉(zhuǎn)化和解毒。因此抑制這一損傷作用對(duì)保護(hù)人群健康有著重要意義。脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)是自由基介導(dǎo)的鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，機(jī)體內(nèi)的自由基與細(xì)胞膜上不飽和脂肪酸反應(yīng)形成脂質(zhì)過(guò)氧化物，可導(dǎo)致膜結(jié)構(gòu)和功能受損，LPO水平反映了體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的速率。在機(jī)體內(nèi)還存在著抵御自由基損傷的防御系統(tǒng)，其中GSH-Px是該系統(tǒng)中的重要抗氧化酶類(lèi)，它能還原過(guò)氧化物，保護(hù)組織免受損害。機(jī)體在代謝過(guò)程中所產(chǎn)生的自由基能作用于生物膜磷脂中的不飽和脂肪酸、產(chǎn)生脂質(zhì)過(guò)氧化物，如丙二醛(MDA);許多工業(yè)化學(xué)毒物致肝損傷的機(jī)理之一正是通過(guò)激活02產(chǎn)生過(guò)多自由基，并抑制抗氧化酶的活性，使肝細(xì)胞膜的脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)增強(qiáng)，致使肝細(xì)胞受損。陶建武等用四氯化碳制作肝損傷動(dòng)物模型，觀察絞股藍(lán)在大鼠肝的抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用(陶建武，等.絞股藍(lán)在大鼠肝的抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用.中國(guó)臨床藥學(xué)雜志，2001，10 (3):160-161) ο實(shí)驗(yàn)表明，CCL4組的脂質(zhì)過(guò)氧化物(LPO)含量明顯高于對(duì)照組，谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性低于對(duì)照組；而同時(shí)給予絞股藍(lán)的D組可減弱CCL4S發(fā)的上述作用。提示絞股藍(lán)能夠提高機(jī)體的抗氧化能力，并可抑制脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物的形成；且能保護(hù)肝臟受損大鼠的自由基清除酶系的活力，減弱自由基作用于肝細(xì)胞膜的脂質(zhì)過(guò)氧化作用，從而在一定程度上減弱了 0:14對(duì)肝臟的損傷。
[0023]丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶ALT與天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶AST主要分布在肝細(xì)胞內(nèi)，如果肝細(xì)胞受到損傷，血液中ALT和AST就會(huì)升高，因此，這兩個(gè)指標(biāo)能夠反映出肝臟實(shí)質(zhì)細(xì)胞膜通透性的變化。肖增平等研宄了絞股藍(lán)多糖對(duì)小鼠CCl4肝損傷的保護(hù)作用(肖增平，等.絞股藍(lán)多糖對(duì)小鼠四氯化碳肝損傷的保護(hù)作用.中國(guó)生化藥物雜志，2008，29(3):186-188)。實(shí)驗(yàn)對(duì)絞股藍(lán)多糖進(jìn)行了分離純化，以絞股藍(lán)多糖對(duì)小鼠連續(xù)灌胃7d之后，腹腔注射0.5%的CCl4花生油溶液，建立肝損傷模型，繼續(xù)給藥2次，檢測(cè)血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)和天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)活性；測(cè)定肝組織中丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽(GSH)活性；采用光學(xué)顯微鏡觀察肝組織病理組織學(xué)變化。結(jié)果顯示，絞股藍(lán)多糖各劑量組能明顯抑制肝損傷小鼠ALT、AST活性的升高；抑制肝組織中MDA含量的升高，提高肝組織中GSH活性；減輕CCl4對(duì)肝臟細(xì)胞的病理?yè)p傷。提示絞股藍(lán)多糖對(duì)CCl4造成的小鼠急性肝損傷具有明顯保護(hù)作用。
[0024]絞股藍(lán)總皂苷具有保肝和促進(jìn)肝細(xì)胞再生的作用。陳幾香等從生化和病理的角度對(duì)絞股藍(lán)總皂苷保肝作用進(jìn)行研宄(陳幾香，等.絞股藍(lán)總皂苷保肝作用實(shí)驗(yàn)研宄.藥物研宄，2007，16(13):7-8)。實(shí)驗(yàn)采用四氯化碳致急性肝損傷及絞股藍(lán)總皂苷對(duì)肝細(xì)胞再生作用模型，檢測(cè)降酶率、再生度等指標(biāo)。結(jié)果顯示，絞股藍(lán)總皂苷對(duì)大白鼠急性肝損傷具有降酶作用，能促進(jìn)肝細(xì)胞再生，提示絞股藍(lán)總皂苷對(duì)四氯化碳引起的大白鼠急性肝損傷具有明顯的改善作用。
[0025]絞股藍(lán)提取物可以采用如下操作制備得到:
[0026]稱(chēng)量配料:按生產(chǎn)要求，稱(chēng)取規(guī)定量的絞股藍(lán)藥材
[0027]粉碎:取絞股藍(lán)，粗粉碎。
[0028]提取:取絞股藍(lán)粗粉，用50%乙醇10倍量、8倍量提取2次，時(shí)間分別為2h、1.5h進(jìn)行提取，合并兩次提取液，過(guò)濾進(jìn)入第一濃縮工序。
[0029]第一濃縮:合并后提取液濃縮，濃縮至藥材的I?1.2B倍量。(注:濃縮過(guò)程中容易起泡，可加適量消泡劑)
[0030]沉降:將濃縮好的濾液常溫下靜置過(guò)夜，沉降析出，待沉降完全后，將上清液與沉淀分開(kāi)，上清液直接進(jìn)入第二濃縮工序。
[0031]溶解:將靜置后的沉淀用1.5倍沉淀量的正丁醇60°C充分溶解，離心，取上清液進(jìn)入第二濃縮工序，沉淀直接真空干燥。
[0032]第二濃縮:合并上清液，減壓回收至無(wú)正丁醇味，濃縮至相對(duì)密度約為1.20(55°C熱測(cè))，真空干燥。
[0033]粉碎:真空干燥后的沉淀和濃縮液干燥粉粉碎過(guò)80目篩，粉碎細(xì)粉經(jīng)二維混合機(jī)進(jìn)行混合均勻即可。
[0034]本實(shí)施方式中，絞股藍(lán)提取物可以為17份。
[0035]丹參為唇形科植物丹參的干燥根和根莖，首見(jiàn)于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品，其性味苦，微寒，歸心、肝經(jīng)，具有活血祛瘀，通經(jīng)止痛，清心除煩，涼血消癰的功效。丹參是一味常用的活血調(diào)血藥，用于保健，主要針對(duì)瘀血體質(zhì)者。祖國(guó)醫(yī)學(xué)認(rèn)為，酒精傷肝多為酒毒瘀積，濕熱熏蒸肝臟所致，從病因、病理分析都存在瘀的因素。而丹參的藥理作用正是活血化瘀。現(xiàn)代藥理學(xué)證明，丹參還具有抗氧化作用，通過(guò)提高血中超氧化物歧化酶的活性，清除細(xì)胞內(nèi)氧自由基，增強(qiáng)體內(nèi)抗氧化防御能力，以提高細(xì)胞膜穩(wěn)定性，從而保護(hù)細(xì)胞。
[0036]研宄證實(shí)，脂多糖(LPS)通過(guò)TLR4受體復(fù)合物及⑶14共同作用激活肝內(nèi)枯否細(xì)胞產(chǎn)生、釋放多種促炎性細(xì)胞因子(如TNF-α，IL-1)，從而導(dǎo)致肝損傷的發(fā)生。姚瑩華等探討了丹參多糖對(duì)小鼠急性肝損傷的影響(姚瑩華，等.丹參多糖對(duì)小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2010，16 (6):227-229) ο實(shí)驗(yàn)將小鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組、丹參多糖高劑量組(15.6g.kg'')、丹參多糖中劑量組(7.8g.kg'')和丹參多糖低劑量組(3.9g.kg- O，連續(xù)ig7d后，采用尾iv脂多糖(LPS)誘導(dǎo)小鼠急性肝損傷模型，檢測(cè)各組小鼠肝組織中丙二醛(MDA)、還原型谷胱甘肽(GSH)、血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)的活性以及肝組織的病理改變。結(jié)果顯示，丹參多糖能降低LPS誘導(dǎo)的急性肝損傷模型小鼠肝組織中MDA含量，升高GSH含量，降低血清ALT含量。提示丹參多糖對(duì)小鼠急性肝損傷有顯著的保護(hù)作用。
[0037]王瑋煒等觀察丹參對(duì)酒精所致大鼠急性肝損傷肝組織的保護(hù)作用(王瑋煒，等.丹參對(duì)急性酒精性肝損傷肝組織保護(hù)作用的研宄.湖北中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2007，9(3):29-30)。實(shí)驗(yàn)將大鼠分為正常組(以正常飲食、飲水喂養(yǎng))、模型組(連續(xù)6天高濃度白酒灌胃)、丹參低、中、高劑量組(白酒灌胃造模后，給予丹參腹腔注射)。9天后處死大鼠，觀察大鼠肝臟的組織病理學(xué)改變及肝細(xì)胞的超微病理學(xué)改變。結(jié)果顯示，模型組大鼠的肝組織呈現(xiàn)明顯的水樣變性和脂肪變性，并可見(jiàn)少量片狀肝細(xì)胞壞死。而丹參組肝細(xì)胞未見(jiàn)壞死改變，水樣變性和脂肪變性程度也較輕，以高劑量丹參組最為顯著。提示丹參對(duì)急性酒精性肝損傷肝組織有一定的保護(hù)作用。
[0038]丹參具有清除毒性自由基、抑制正常及損傷肝細(xì)胞脂質(zhì)過(guò)氧化的作用。至今已從丹參中分離出30多種化學(xué)成分，其中的酚類(lèi)成分如丹酚酸A、B、C、原兒茶醛、丹參素具有很強(qiáng)的抗氧化活性。吳百靈以四氯化碳誘導(dǎo)大鼠急性肝損傷，檢測(cè)各組損傷后24h、48h、72h的肝組織SOD活性，MDA含量，血清ALT、AST活性，以及光鏡下肝組織的改變(吳百靈.丹參對(duì)CCl4所致急性肝損傷保護(hù)作用的研宄.中醫(yī)藥學(xué)刊，2002，20(3):363，轉(zhuǎn)381)。結(jié)果顯示，丹參可提高SOD活性，降低MDA含量。光鏡下觀察對(duì)肝組織有明顯的修復(fù)作用。指出丹參可抑制ALT、AST酶活性增高，這種保護(hù)肝細(xì)胞作用的機(jī)理之一是其有顯著抗脂質(zhì)過(guò)氧化損傷作用，亦可用于病毒、酒精藥物對(duì)肝造成損傷的保護(hù)作用。
[0039]丹參提取物可以采用如下操作制備得到:
[0040]提取:取檢驗(yàn)合格的丹參飲片，除去雜質(zhì)，置多功能提取罐中，加8倍量50%乙醇，浸泡0.5小時(shí)，回流提取1.5小時(shí)，提取液過(guò)濾，藥渣加6倍量50%乙醇回流提取I小時(shí)，提取液過(guò)濾，過(guò)濾液備用。
[0041]濃縮離心:合并兩次提取過(guò)濾液，至外循環(huán)濃縮器中，真空度為0.04-0.08mpa，溫度為60-80°C，濃縮至比重1.06-1.14。濃縮液用離心機(jī)離心，取離心液備用。離心液測(cè)溶化性和總固體。
[0042]噴霧干燥:取合格離心液至噴霧干燥器中干燥，噴霧干燥器進(jìn)風(fēng)溫度為180?2050C，出風(fēng)溫度為90?105°C。
[0043]粉碎過(guò)篩混合:取噴霧干燥所得干膏粉至內(nèi)置80目粉碎機(jī)中粉碎，所得細(xì)粉至混合機(jī)中混合50分鐘，混合后的細(xì)粉送檢測(cè)溶化性和水分，檢測(cè)合格即可。
[0044]本實(shí)施方式中，丹參提取物為34份。
[0045]葛根為豆科植物野葛的干燥根，其主要有效成分為黃酮類(lèi)物質(zhì)，如大豆苷、大豆苷元、葛根素等。葛根味甘性涼，入脾、胃、肺經(jīng)，具有解肌退熱，生津止渴，透瘆，升陽(yáng)止瀉，通經(jīng)活絡(luò)，解酒毒的功效。歷代本草的記載如，《神農(nóng)本草經(jīng)》主消渴，身大熱，嘔吐，諸痹，起陰氣，解諸毒?！薄侗静萁?jīng)集注》:“殺野葛、巴豆、百藥毒?！薄端幮哉摗分翁煨猩蠚?，嘔逆，開(kāi)胃下食，主解酒毒，止煩渴?！薄侗静菔斑z》:“生者破血，合瘡，墮胎，解酒毒，身熱赤，酒黃，小便赤澀?？蓴喙炔火嚒??！肚Ы鸱健分尉谱聿恍?葛根汁一斗二升，飲之，取醒，止。唐代藥王孫思邈的千金方中記載:酒醉不醒，用葛汁。宋《本草衍義》曰:葛，病酒及渴者，行之甚良。可見(jiàn)葛根是我國(guó)傳統(tǒng)的解酒中藥。
[0046]酒精是導(dǎo)致人類(lèi)肝損傷的重要原因之一。TNF-α是一個(gè)重要的促炎因子和免疫調(diào)節(jié)因子，在酒精性肝病中TNF-α主要由肝臟庫(kù)普弗細(xì)胞、脾巨噬細(xì)胞和外周單核細(xì)胞產(chǎn)生。大量研宄顯示，在酒精性肝損傷時(shí)，腸源性?xún)?nèi)毒素血癥與TNF-α的過(guò)度表達(dá)密切相關(guān)。TNF-α是一種重要的炎性細(xì)胞因子，它的過(guò)度表達(dá)與多種疾病有關(guān)，尤其是在酒精性肝病的發(fā)病機(jī)制中起關(guān)鍵作用。TNF- α被普遍認(rèn)為是酒精相關(guān)性肝壞死性炎癥發(fā)病機(jī)制中的最后共同通路。在清除TNF-α受體基因的大鼠給予酒精喂養(yǎng)不引起肝臟的炎癥和壞死性改變。TNF-α又通過(guò)介導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡、觸發(fā)炎癥反應(yīng)等途徑引起肝損傷。欒玉泉等觀察葛根對(duì)酒精性肝損傷大鼠肝組織腫瘤壞死因子_ α (Tumor Necrosis Factor- α，TNF- α )水平的變化(欒玉泉，等.葛根提取物對(duì)酒精性肝損傷大鼠肝組織TNF-α表達(dá)變化的研宄.大理學(xué)院學(xué)報(bào)，2009，8 (2): 1-4) ο實(shí)驗(yàn)以56%酒精灌胃，造成大鼠酒精性肝損傷模型，取肝組織做免疫組織化學(xué)檢測(cè)TNF-α表達(dá)。結(jié)果顯示，模型組和治療對(duì)照組大鼠毛發(fā)光澤差，食欲差，大便溏瀉，肝組織出現(xiàn)肝脂肪變性，肝組織中見(jiàn)大量TNF- α蛋白陽(yáng)性產(chǎn)物棕褐色細(xì)顆粒；治療組肝組織中見(jiàn)少量脂滴空泡，少量TNF-α蛋白陽(yáng)性產(chǎn)物棕褐色細(xì)顆粒。提示葛根提取物能降低酒精性肝損傷大鼠肝組織TNF- α的表達(dá)。
[0047]趙鵬等采用乙醇建立大鼠肝損傷模型，測(cè)定肝組織的丙二醛(MDA)、甘油三酯(TG)及還原型谷胱甘肽(GSH)含量，并觀察肝臟的病理組織學(xué)改變(趙鵬，等.葛根黃酮對(duì)乙醇性肝損傷的保護(hù)作用.中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué)，2009，9(3):444-445)。結(jié)果顯示，受試樣品高、中、低劑量組大鼠肝組織的MDA含量均值分別為18.6,18.7,18.4nmol/g(肝組織)，均低于肝損模型組的32.4nmol/g ;TG含量分別為2.27,2.74,2.69mmol/100g (肝組織)，均低于肝損模型組的4.97mmol/100g ;而GSH含量分別為351.2,336.9,360.3 μ moL/100g (肝組織)，均高于肝損模型組的276.4ymoL/100g ;各劑量組大鼠肝臟病理改變?cè)u(píng)分均值分別為51.4,61.3、102.6分，均低于肝損模型組的206.6分。提示葛根黃酮對(duì)乙醇引起的肝損傷具有保護(hù)作用。
[0048]宋小莉從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的角度觀察葛根對(duì)化學(xué)性肝損傷的保護(hù)作用(宋小莉.葛根對(duì)化學(xué)性肝損傷小鼠的保護(hù)作用.山東中醫(yī)雜志，2010，29(2):121-122)。具體實(shí)驗(yàn)方法:0.12% CCl4花生油溶液經(jīng)腹腔注射制備小鼠急性肝損傷模型，采用賴(lài)氏法測(cè)定血清中丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天門(mén)冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性，解剖取肝臟稱(chēng)重，計(jì)算肝臟指數(shù)。實(shí)驗(yàn)顯示，中、低劑量葛根組能微弱降低小鼠血清中ALT和AST的水平，高劑量組小鼠血清中的ALT和AST的水平有所升高，肝臟指數(shù)以聯(lián)苯雙酯組偏高。提示葛根水提取物對(duì)小鼠CCl4肝損傷模型具有一定的保護(hù)作用趨勢(shì)。
[0049]葛根提取物可以采用如下操作制備得到:
[0050]前處理:取檢驗(yàn)合格的葛根藥材，除去雜質(zhì)，粗粉碎。
[0051]提取:取粗粉碎的葛根藥材，置多功能提取罐中，加8倍量60%乙醇浸泡0.5小時(shí)，回流提取2小時(shí)，提取液過(guò)濾，藥渣加6倍量60%乙醇回流提取1.5小時(shí)。提取液200目過(guò)濾，過(guò)濾液備用。
[0052]濃縮離心:合并兩次提取過(guò)濾液，至外循環(huán)濃縮器中濃縮，真空度控制為0.04-0.08mpa，溫度為55_65°C，濃縮至無(wú)醇味，比重1.06-1.14(55-65。。)。濃縮液進(jìn)行離心，濃縮液用離心機(jī)離心，取離心液備用。離心液測(cè)溶化性和總固體。
[0053]噴霧干燥:取合格離心液，加入總固體量的10%麥芽糊精至噴霧干燥器中干燥，噴霧干燥器進(jìn)風(fēng)溫度為180?205°C，出風(fēng)溫度為90?105°C。
[0054]粉碎、篩混:取噴霧干燥所得干膏粉粉碎過(guò)80目篩，所得細(xì)粉至混合機(jī)中混合50分鐘，即可。
[0055]本實(shí)施方式中，葛根提取物為39份。
[0056]五味子為木蘭科植物五味子的干燥成熟果實(shí)，是常用的中藥之一。唐《新修本草》載:“五味皮肉甘酸，核中辛苦，有咸味”，故有五味子之名。《神農(nóng)本草經(jīng)》中五味子被列為上品，是中醫(yī)常用的滋補(bǔ)強(qiáng)壯藥。五味子性溫，味酸、甘，歸肺、心、腎經(jīng)，具有收斂固澀，益氣生津，補(bǔ)腎寧心的作用?，F(xiàn)代科學(xué)研宄證明，五味子中含有揮發(fā)油、有機(jī)酸、維生素、木脂素、三萜、倍半萜及多糖等多種化學(xué)成分，能益氣強(qiáng)肝、增進(jìn)細(xì)胞排除廢物的效率、供應(yīng)更多氧氣、營(yíng)造和運(yùn)用能量、提高記憶力?，F(xiàn)代藥理學(xué)研宄證明，五味子不僅對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)等均有調(diào)節(jié)作用，還具有抑制腫瘤、保護(hù)肝臟、抗氧化和抗衰老等方面的作用。
[0057]在正常情況下，肝臟主要通過(guò)微粒體細(xì)胞色素P450酶系的生物轉(zhuǎn)化過(guò)程達(dá)到解毒的目的。在此過(guò)程中產(chǎn)生大量的親電子基、自由基等活性代謝物，直接攻擊細(xì)胞的膜結(jié)構(gòu)中磷脂分子，引起膜脂質(zhì)過(guò)氧化，改變膜的結(jié)構(gòu)和功能，導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷。中藥五味子對(duì)CCl4等化學(xué)毒物引起的肝損傷具有促進(jìn)肝細(xì)胞的修復(fù)、降低血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)活性、保護(hù)肝細(xì)胞的作用。另外，五味子可以增強(qiáng)肝細(xì)胞的谷胱甘肽氧化還原體系，調(diào)節(jié)某些熱休克蛋白的表達(dá)，調(diào)節(jié)肝細(xì)胞核基質(zhì)蛋白代謝，并與其護(hù)肝作用有著密切的聯(lián)系。
[0058]蔡紹先等通過(guò)建立CCl4中毒大鼠動(dòng)物模型，觀察五味子提取物對(duì)CCl4中毒大鼠肝細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的保護(hù)作用(蔡紹先，等.五味子提取物對(duì)CCl4中毒大鼠肝超微結(jié)構(gòu)的保護(hù)作用.2010，22 (I):52-54)。結(jié)果顯示，CCl4中毒24h組大鼠肝組織超微結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，表現(xiàn)為胞質(zhì)基質(zhì)疏松、空泡化；肝細(xì)胞線粒體腫脹，嵴斷裂或消失；內(nèi)質(zhì)網(wǎng)呈片層狀；核膜皺縮、斷裂，染色質(zhì)邊集于核膜下，CCl4中毒1d組肝細(xì)胞核形態(tài)仍呈明顯異型性。與CCl4中毒組大鼠相比較，五味子組大鼠肝細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的病理性改變減輕。提示五味子提取物對(duì)CCl4中毒大鼠肝細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)具有保護(hù)作用。
[0059]許珂玉等研宄五味子多糖對(duì)CCljI起肝損傷大鼠超微結(jié)構(gòu)的保護(hù)作用(許珂玉，柳春.五味子多糖對(duì)CCl4誘導(dǎo)的肝損傷大鼠亞細(xì)胞水平的保護(hù)作用.中國(guó)老年學(xué)雜志，2011,31 (8): 1352-1354)。實(shí)驗(yàn)顯示，大鼠攝入五味子多糖后的低、中、高劑量組與CCl4誘導(dǎo)的肝損傷大鼠血清ALT、AST活性比較顯著降低(P〈0.01)，肝中MDA的生成量顯著減少〔對(duì)照組(0.91±0.27)，模型組(3.69±0.34)，低劑量組(1.30±0.26)，中劑量組(0.99±0.13)，高劑量組(0.96±0.43)，P〈0.01〕，SOD、ATPase 和 γ-GT 酶活性均明顯增強(qiáng)(Ρ〈0.01)，并呈現(xiàn)劑量依賴(lài)效應(yīng)。經(jīng)治療后肝臟組織的總抗氧化能力顯著提高，電鏡下可見(jiàn)CCl4引起的肝臟組織氣球樣變、脂肪變性、炎癥浸潤(rùn)及線粒體腫脹的超微結(jié)構(gòu)均得到明顯改善。證實(shí)五味子多糖提取物對(duì)肝細(xì)胞具有明顯的保護(hù)作用，這種作用可能與其拮抗CCl4毒性代謝產(chǎn)物導(dǎo)致的脂質(zhì)過(guò)氧化對(duì)肝亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的損傷有關(guān)。
[0060]齊彥等觀察五味子對(duì)四氯化碳(CCl4)所致小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用(齊彥，等.五味子對(duì)四氯化碳所致小鼠急性肝損傷的作用研宄.中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2009，37(4):26-27)。采用CCl4造成小鼠急性肝損傷模型，終點(diǎn)比色法測(cè)定小鼠血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶(AST)、白蛋白(ALB)含量，觀察病理組織學(xué)改變。結(jié)果顯示，五味子明顯降低CCl4引起的ALT、AST增高；病理組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)五味子明顯減輕肝細(xì)胞的損傷。說(shuō)明五味子對(duì)CCl4所致小白鼠急性肝損傷具有明顯的保護(hù)作用。
[0061]五味子提取物可以采用如下操作制備得到:
[0062]提取:取檢驗(yàn)合格的北五味子，除去雜質(zhì)，置多功能提取罐中，加4倍量70%乙醇回流提取2小時(shí)，提取液過(guò)濾，藥渣加3倍量70%乙醇回流提取1.5小時(shí)，提取液過(guò)濾，過(guò)濾液備用。
[0063]回收濃縮離心:合并兩次提取過(guò)濾液，至外循環(huán)濃縮器中濃縮，真空度控制為0.04-0.08mpa，溫度控制為60-80°C，濃縮至比重1.06-1.08 (避免目標(biāo)成分析出而達(dá)不到含量要求)。濃縮液用離心機(jī)離心，取離心液備用。離心液測(cè)溶化性和總固體。
[0064]噴霧干燥:取合格離心液，加入總固提量15%的糊精，至噴霧干燥器中干燥，噴霧干燥器進(jìn)風(fēng)溫度為180?205°C，出風(fēng)溫度為90?105°C。
[0065]粉碎、篩混:取噴霧干燥所得干膏粉至內(nèi)置80目粉碎機(jī)中粉碎，過(guò)80目，所得細(xì)粉至混合機(jī)中混合50分鐘，混合后的細(xì)粉送檢測(cè)溶化性和水分，檢測(cè)合格即可。
[0066]本實(shí)施方式中，五味子提取物為9份。
[0067]綜上所述，化學(xué)性肝損傷，屬于中醫(yī)“脅痛”的范疇，其病因?yàn)樗幎揪剖翅劤蓾駸釡趔w內(nèi)，阻滯肝膽氣機(jī)，氣不行，血不暢，日久氣滯血瘀，毒邪傷正，耗損肝腎陰血精氣?？偟牟C(jī)表現(xiàn)為濕熱毒邪阻滯、氣滯血瘀、肝腎陰虛、精血不足。故本方針對(duì)上述特點(diǎn)，首選葛根解毒祛濕，配以絞股藍(lán)清熱解毒，養(yǎng)陰生津益精，而丹參味苦，微寒，歸心、肝經(jīng)，具有活血化瘀、通經(jīng)止痛的作用，而五味子性溫，味酸、甘，酸甘化陰，具有益氣生津、補(bǔ)肝腎益精的作用。四藥配伍，兼顧多方，首先，葛根、絞股藍(lán)、丹參直達(dá)病所，解毒祛瘀，另一方面，五味子、絞股藍(lán)補(bǔ)益精血，達(dá)到“養(yǎng)正積自消”的作用。
[0068]這種具有保護(hù)肝損傷的制品通過(guò)清熱解毒，活血化瘀，滋養(yǎng)肝腎，養(yǎng)陰生津益精，達(dá)到對(duì)化學(xué)性肝損傷的輔助保護(hù)作用?，F(xiàn)代藥理學(xué)文獻(xiàn)表明，絞股藍(lán)提取物、丹參提取物、葛根提取物、五味子提取物均具有保護(hù)肝臟的作用。故本產(chǎn)品對(duì)化學(xué)性肝損傷輔助保護(hù)作用保健功能明確。
[0069]這種具有保護(hù)肝損傷的制品以絞股藍(lán)提取物、丹參提取物、葛根提取物、五味子提取物為主要原料，由于中藥提取物易吸潮而結(jié)塊，影響產(chǎn)品質(zhì)量，根據(jù)原料的此特點(diǎn)，選擇了膠囊作為本產(chǎn)品的劑型。
[0070]膠囊劑整潔美觀，可掩蓋原料的不良味道，可防止原料吸潮，能夠提高原料的穩(wěn)定性，且在腸胃中崩解、分散快，吸收好，生物利用度較片劑、丸劑高，能夠保證劑量準(zhǔn)確，攜帶食用方便，密封安全。另外，膠囊劑還具有工藝簡(jiǎn)便，生產(chǎn)成本低等優(yōu)點(diǎn)。因此，將這種具有保護(hù)肝損傷的制品原輔料制成均勻的粉末，填裝于空心硬膠囊中，可以防止原料吸潮，還可以簡(jiǎn)化工藝，降低生產(chǎn)成本，提高原料利用率，而且進(jìn)入人體后很容易被機(jī)體吸收。故這種具有保護(hù)肝損傷的制品制成硬膠囊是合理的。
[0071]從膠囊劑的一般制劑規(guī)則出發(fā)，并結(jié)合原料的性質(zhì)，這種具有保護(hù)肝損傷的制品還包括0.8份?I份的輔料。
[0072]這種具有保護(hù)肝損傷的制品的主要原料均為固體粉末，為增加粉末的流動(dòng)性，便于膠囊灌裝，本實(shí)施方式中可以選擇加入硬脂酸鎂作為輔料。
[0073]在其他的實(shí)施方式中，還可以選擇加入二氧化硅或微晶纖維素作為輔料。
[0074]這種具有保護(hù)肝損傷的制品的制備工藝按照膠囊的一般制備原則出發(fā)，結(jié)合原料的性質(zhì)進(jìn)行確定。
[0075]這種具有保護(hù)肝損傷的制品的主要原料均為固體粉末，將其和輔料按混合原則混合均勻后，直接灌裝或壓片，不僅可以簡(jiǎn)化工藝，降低生產(chǎn)成本，提高原料利用率，而且進(jìn)入人體后很容易被機(jī)體吸收。
[0076]這種具有保護(hù)肝損傷的制品的生產(chǎn)工藝大致如下:首先，將絞股藍(lán)提取物、丹參提取物、葛根提取物、五味子提取物、硬脂酸鎂分別過(guò)80目篩，然后將過(guò)篩后的絞股藍(lán)提取物、丹參提取物、葛根提取物、五味子提取物、硬脂酸鎂置混合機(jī)中混合15min，得總混合細(xì)粉，接著進(jìn)行裝膠囊，拋光、挑選，包裝，檢驗(yàn)，入庫(kù)。
[0077]肝臟是人體內(nèi)最大的實(shí)質(zhì)性腺體，是體內(nèi)新陳代謝的主要器官，是人體中重要的解毒器官，也是許多化學(xué)性物質(zhì)的重要靶點(diǎn)。隨著現(xiàn)代化工業(yè)的發(fā)展，肝毒性化合物的種類(lèi)越來(lái)越多，由此造成的化學(xué)性肝損傷大大增加，其中酒精肝損傷是目前最常見(jiàn)的。隨著酒精消費(fèi)人口逐漸增多，酒精對(duì)人體的損害作用，尤其是對(duì)肝臟的毒性作用日益引起人們的重視。隨著人們健康觀念的加強(qiáng)和醫(yī)療模式向預(yù)防、治療、康復(fù)、保健的復(fù)合型模式的逐漸轉(zhuǎn)變，人們會(huì)越來(lái)越傾向于借助保健食品來(lái)達(dá)到護(hù)肝的目的。
[0078]這種具有保護(hù)肝損傷的制品是以絞股藍(lán)提取物、丹參提取物、葛根提取物、五味子提取物為主要原料，通過(guò)清熱解毒，活血化瘀，滋養(yǎng)肝腎，養(yǎng)陰生津益精，達(dá)到對(duì)化學(xué)性肝損傷的輔助保護(hù)作用。并且這種具有保護(hù)肝損傷的制品的安全性毒理學(xué)試驗(yàn)、動(dòng)物功能學(xué)試驗(yàn)、功效成分試驗(yàn)、穩(wěn)定性試驗(yàn)、衛(wèi)生學(xué)試驗(yàn)報(bào)告表明，這種具有保護(hù)肝損傷的制品功能明確，質(zhì)量可控，食用安全，這種具有保護(hù)肝損傷的制品將會(huì)產(chǎn)生顯著的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。
[0079] 以上所述實(shí)施例僅表達(dá)了本發(fā)明的幾種實(shí)施方式，其描述較為具體和詳細(xì)，但并不能因此而理解為對(duì)發(fā)明專(zhuān)利范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的是，對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進(jìn)，這些都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。因此，本發(fā)明專(zhuān)利的保護(hù)范圍應(yīng)以所附權(quán)利要求為準(zhǔn)。
【權(quán)利要求】
1.一種具有保護(hù)肝損傷的制品，其特征在于，按照質(zhì)量份數(shù)計(jì)包括如下組分: 16份?20份的絞股藍(lán)提取物、30份?40份的丹參提取物、35份?45份的葛根提取物以及8份?10份的五味子提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有保護(hù)肝損傷的制品，其特征在于，所述絞股藍(lán)提取物為17份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有保護(hù)肝損傷的制品，其特征在于，所述丹參提取物為34份。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有保護(hù)肝損傷的制品，其特征在于，所述葛根提取物為39份。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有保護(hù)肝損傷的制品，其特征在于，所述五味子提取物為9份。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有保護(hù)肝損傷的制品，其特征在于，還包括0.8份?I份的輔料。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的具有保護(hù)肝損傷的制品，其特征在于，所述輔料為硬脂酸鎂、二氧化硅或微晶纖維素。
8.根據(jù)權(quán)利要求1或7所述的具有保護(hù)肝損傷的制品，其特征在于，所述具有保護(hù)肝損傷的制品可為膠囊劑或片劑。
【文檔編號(hào)】A23L1/29GK104432023SQ201410614237
【公開(kāi)日】2015年3月25日 申請(qǐng)日期:2014年11月3日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月3日
【發(fā)明者】孫鶴鳴 申請(qǐng)人:深圳市麥金利實(shí)業(yè)有限公司