本發(fā)明涉及從原料中富集α-醇溶蛋白的方法以及提純得到蛋白產(chǎn)品的方法，還涉及由上述方法得到的蛋白產(chǎn)品，屬于農(nóng)作物加工領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：：玉米醇溶蛋白(玉米朊，zein)是一種從玉米或含玉米蛋白的物質(zhì)、如玉米黃粉飼料(又稱玉米蛋白粉，cornglutenmeal)或玉米干酒糟及可溶物(ddgs)等產(chǎn)品中提取的產(chǎn)品。醇溶蛋白是玉米胚乳中含量最高的蛋白，占玉米胚乳蛋白中的44wt％～79wt％。玉米黃粉主要從玉米淀粉濕法生產(chǎn)中獲得。在玉米濕法生產(chǎn)中，首先制備亞硫酸浸泡玉米，浸泡水與玉米分離后進(jìn)行蒸發(fā)得到玉米漿，玉米隨后進(jìn)行一次和二次破碎分離出胚芽，接著胚乳經(jīng)過精磨分離出纖維，并將淀粉乳經(jīng)過預(yù)濃縮后在主分離步驟中將麩質(zhì)分離出來，淀粉經(jīng)過洗滌后經(jīng)過脫水、干燥的成品；而上述的麩質(zhì)經(jīng)過濃縮、脫水、干燥后制得玉米黃粉；上述胚芽經(jīng)過脫水、干燥并提取玉米油后得到胚芽粕，上述纖維經(jīng)過脫水干燥后與胚芽粕分別噴玉米漿后得到纖維蛋白飼料、高粕飼料等產(chǎn)品。玉米醇溶蛋白作為《中國藥典(2010)》中的藥用輔料，也獲得了美國fda批準(zhǔn)，是公認(rèn)安全(gras)的可直接加入食品中的物質(zhì)。玉米蛋白質(zhì)具有表面活性及獨(dú)特的成膜特性，可作為藥劑靶向疏松載體、食品保鮮涂膜、生物可降解包裝材料、口香糖、蛋白纖維等，在食品、醫(yī)藥、化工等領(lǐng)域應(yīng)用日趨廣泛。玉米醇溶蛋白屬于醇溶性蛋白質(zhì)，可以溶于乙醇、異丙醇或丙酮的水溶液，在純水或無水乙醇中不溶。主要包含四種組分，即α-醇溶蛋白(約占玉米醇溶蛋白的70wt％～85wt％)、β-醇溶蛋白(約占1wt％～5wt％)、γ-醇溶蛋白(約占10wt％～20wt％)和δ-醇溶蛋白(約占1wt％～5wt％)(cerealchemistry,2011,88(2):159-173)。其中，α-醇溶蛋白是最主要的商業(yè)化玉米醇溶蛋白。加工制備玉米醇溶蛋白工藝主要利用不同醇溶蛋白組分在提取溶劑中的溶解度差別。上述在玉米濕磨工藝中產(chǎn)出的玉米黃粉，蛋白干基含量為約65wt％左右，還主要包含約15wt％～20wt％的淀粉、10wt％～13wt％的纖維以及約6wt％的脂肪，也是商業(yè)化玉米醇溶蛋白提取的主要原料之一。商業(yè)化工藝主要采用swallen1941年的專利(us2287649a)和carter與reck1970年的專利(us3535305)，如圖3所示。用異丙醇或95％乙醇(v/v)在較高的ph值和溫度(50-60℃)分批或連續(xù)處理玉米黃粉，提取物過濾或離心，再用過量的冷水或低溫(-10℃～-25℃)沉淀醇溶蛋白，經(jīng)真空干燥磨粉得成品。當(dāng)然，制備玉米醇溶蛋白還有其他或改進(jìn)工藝，但都是使用有機(jī)溶劑(us6602985b1；cerealchemistryjournal,2006,83(5):565-568；cerealchemistry,2011,88(4):356-362)或有機(jī)酸(cerealchemistry,2008,85(2):202-206)為提取劑的工藝方案。也有研究者對蛋白原料的非蛋白雜質(zhì)進(jìn)行研究脫除，提高玉米總蛋白含量，或由此提高后續(xù)溶劑提取的效率。蔡木易等人在專利cn101390564中公開了一種使用堿熱處理玉米黃粉從而使得部分淀粉、脂肪和色素變?yōu)榭扇軓亩?，從而獲得以醇溶蛋白和谷蛋白為主的分離蛋白產(chǎn)品。但由于黃粉中存在與纖維或蛋白連接的淀粉，并且色素(主要是玉米黃質(zhì))嵌合于蛋白內(nèi)部，所以很難通過單一糊化或皂化作用而除去。美國cpc公司及日本昭和產(chǎn)業(yè)株式會社采用冷凍脫色生產(chǎn)白色玉米朊(jp2004059537)，但該工藝涉及甲醇、丙酮等有安全隱患的試劑的使用。sessa在專利us20080242842中公開一種使用沸石和活性炭對溶解于醇溶液的醇溶蛋白進(jìn)行脫色和脫臭的方法。另外，也有人使用正己烷或者乙酸乙酯等溶劑對醇溶蛋白低水分原料或成品進(jìn)行脫色脫臭。另外，通過溶劑或者脂肪酶等酶類脫除其中的脂肪從而進(jìn)一步提高總蛋白純度；以及通過化學(xué)試劑如臭氧、過硫酸或過氧化物或者酶(如脂肪氧合酶等)來脫色。但是，過高的加熱溫度還會導(dǎo)致來自蛋白中的氨基酸殘基參與生成某些有害物質(zhì)，如當(dāng)溫度大于100℃時，半胱氨酸和蛋氨酸會與葡萄糖反應(yīng)形成有毒物質(zhì)——丙烯酰胺(foodchemistry，4threvisedandextendededition，h.-d.belitz、w.grosch和p.schieberle編著，第25-29頁)。liaw等人(us5968585a)利用膜分離技術(shù)將胚乳中的淀粉與蛋白分開，得到蛋白干基含量在約70wt％的料液。目前制備玉米醇溶蛋白的有機(jī)溶劑或有機(jī)溶劑水溶液的各種提取工藝依然存在溶劑損失、使用成本高、溶劑廢水處理難度大、大幅升降溫操作能耗大的問題，需要進(jìn)一步予以解決。另外，在提取過程中會發(fā)生的凝膠化是有機(jī)溶劑或有機(jī)溶劑水溶液提取分離工藝的另一個弊端，主要由于γ-醇溶蛋白的存在而引起(journalofagriculturalandfoodchemistry60(7):1742-1747)。有工藝方法將ph調(diào)節(jié)到11.5在70℃保溫30min來防止凝膠，然而蛋白在強(qiáng)堿的環(huán)境中會發(fā)生部分肽鍵水解以及天冬酰胺和谷氨酰胺的脫酰胺或者巰基的破壞，另外在后期調(diào)酸步驟也會使得體系產(chǎn)生較多的鹽分。也有研究使用90％乙酸-水溶液(v/v)提取醇溶蛋白，但是其中的含脂量高于醇提蛋白產(chǎn)品，并且作為材料的拉伸強(qiáng)度也較低(sellinggw,woodskk.improvedisolationofzeinfromcornglutenmealusingaceticacidandisolatecharacterizationassolvent[j].cerealchemistry,2008,85(2):202-206)。也有技術(shù)通過化學(xué)處理將醇提的醇溶蛋白改性為水性應(yīng)用的產(chǎn)品(cn103781796a)。但目前沒有一種在完全不含有機(jī)溶劑(如乙醇、異丙醇等)或高含量有機(jī)酸(如90％乙酸)的水相體系中生產(chǎn)醇溶蛋白的工藝方法。技術(shù)實現(xiàn)要素：尋找一種醇溶蛋白的新型生產(chǎn)工藝，同時更有效地利用相關(guān)原料中的其他組分資源成為擺在本領(lǐng)域技術(shù)人員面前的難題，但也最為可能成為降低生產(chǎn)成本有效途徑。因此，提供一種從包含醇溶性蛋白的原料中在無有機(jī)溶劑的溫和酸堿度(ph＝3～11)條件下分離出的醇溶蛋白產(chǎn)品將是十分有益的。提供生產(chǎn)該產(chǎn)品的方法也將是十分有益的。提供實施該方法的系統(tǒng)也將是十分有益的。本發(fā)明人通過對玉米蛋白原料中的各組分，包括不同蛋白組分研究后首次發(fā)現(xiàn)：針對其中不同組分、尤其是蛋白組份，可使用相應(yīng)的酶和分離方法，在完全不包含有機(jī)溶劑的水相環(huán)境(具有溫和的酸堿度，ph＝3～11)中即可達(dá)到純化玉米醇溶蛋白、尤其是α-醇溶蛋白的效果，并且可以控制β-/γ-醇溶蛋白的在產(chǎn)品中的含量；同時形成多種有用的副產(chǎn)品，從而給淀粉或乙醇生產(chǎn)企業(yè)對玉米蛋白的深度開發(fā)利用帶來良好的契機(jī)。本發(fā)明的第一方面涉及一種從原料中富集α-醇溶蛋白的方法，所述原料包含醇溶蛋白和非醇溶蛋白，并且任選包含大分子碳水化合物(本發(fā)明中的大分子碳水化合物主要包括淀粉和纖維素)和/或油脂，其特征在于，所述方法不使用有機(jī)溶劑，并包括下述步驟：(1)將所述原料粉碎并調(diào)漿；(2)采用蛋白酶處理，將原料中的至少一部分β-醇溶蛋白、γ-醇溶蛋白和非醇溶蛋白進(jìn)行完全水解或部分水解，并利用粒徑差異過濾去除水解產(chǎn)物，從而得到α-醇溶蛋白得以富集的粗產(chǎn)物；(3)將所述粗產(chǎn)物洗滌、脫水、干燥，得到最終產(chǎn)品。本發(fā)明的第二方面涉及一種從原料中提純得到蛋白產(chǎn)品的方法，所述原料包含β-醇溶蛋白、γ-醇溶蛋白和非醇溶蛋白，并且任選包含大分子碳水化合物和/或油脂，其特征在于，所述方法不使用有機(jī)溶劑，并包括下述步驟：(1)將所述原料粉碎并調(diào)漿；(2)采用水解酶處理，對原料中的至少一部分大分子碳水化合物進(jìn)行完全水解或部分水解，并利用粒徑差異過濾去除水解產(chǎn)物，從而得到蛋白粗產(chǎn)物；(3)將所述蛋白粗產(chǎn)物洗滌、脫水、干燥，得到最終的蛋白產(chǎn)品。本發(fā)明的第三方面涉及根據(jù)本發(fā)明的上述方面制得的蛋白產(chǎn)品，所述蛋白產(chǎn)品包含醇溶蛋白和碳水化合物，其特征在于，所述醇溶蛋白占蛋白干基的70wt％以上；同時，α-醇溶蛋白占所述醇溶蛋白的75wt％以上，β-醇溶蛋白占所述醇溶蛋白的20wt％以下，γ-醇溶蛋白占所述醇溶蛋白的6wt％以下。在本發(fā)明上述方面優(yōu)選的實施方式中，原料選自于由玉米黃粉、玉米胚乳發(fā)酵醪和酒糟所組成的組。在本發(fā)明上述方面優(yōu)選的實施方式中，蛋白酶為選自于由羧基蛋白酶、絲氨酸蛋白酶、金屬蛋白酶、巰基蛋白酶所組成的組中的一種或多種。優(yōu)選地，所述羧基蛋白酶為霉菌羧基蛋白酶，優(yōu)選曲霉羧基蛋白酶，更優(yōu)選米曲霉羧基內(nèi)切蛋白酶；所述絲氨酸蛋白酶為芽孢桿菌的絲氨酸蛋白酶，優(yōu)選枯草桿菌的絲氨酸內(nèi)切蛋白酶；所述金屬蛋白酶為霉菌或芽孢桿菌的金屬蛋白酶，優(yōu)選米曲霉金屬內(nèi)切蛋白酶或枯草芽孢桿菌金屬內(nèi)切蛋白酶；所述巰基蛋白酶為來源于植物的巰基蛋白酶，優(yōu)選菠蘿蛋白酶和/或木瓜蛋白酶。在本發(fā)明上述方面優(yōu)選的實施方式中，水解酶選自于由α淀粉酶、糖化酶、纖維素酶、β-葡聚糖酶、普魯蘭酶、木聚糖酶、果膠酶、阿拉伯聚糖酶、半纖維素酶所組成的組中的一種或多種。優(yōu)選地，所述α淀粉酶為霉菌或細(xì)菌的α淀粉酶，優(yōu)選霉菌α淀粉酶，更優(yōu)選曲霉α淀粉酶；所述糖化酶為霉菌葡萄糖淀粉酶，優(yōu)選曲霉或木霉葡萄糖淀粉酶；所述纖維素酶為霉菌纖維素酶，優(yōu)選木霉纖維素酶；所述β-葡聚糖酶為真菌或細(xì)菌β-葡聚糖酶；所述普魯蘭酶為桿菌普魯蘭酶。在本發(fā)明上述方面優(yōu)選的實施方式中，在進(jìn)行所述蛋白酶處理或水解酶處理時，任選加入試劑組合物對酶進(jìn)行調(diào)節(jié)，所述試劑組合物為選自于由以下物質(zhì)所組成的組中的一種或多種：能夠打開蛋白中的二硫鍵的化合物，例如含磷化合物或含硫化合物，其中含磷化合物優(yōu)選三(2-羧乙基)膦，含硫化合物優(yōu)選含自由巰基的化合物和/或可提供亞硫酸根的化合物，更優(yōu)選巰基乙醇、二硫蘇糖醇、半胱氨酸及包含半胱氨酸的寡肽(由2-10個氨基酸組成的肽)、亞硫酸鹽、亞硫酸、亞硫酸氫鹽、焦亞硫酸鹽；金屬離子，優(yōu)選堿金屬離子、堿土金屬離子、二價過渡金屬離子，更優(yōu)選鈉離子、鉀離子、鎂離子、鈣離子、錳離子、鈷離子、鋅離子；金屬螯合劑，優(yōu)選edta、egta。在本發(fā)明上述方面優(yōu)選的實施方式中，蛋白酶處理在下述條件下進(jìn)行：ph3.5～10.5，優(yōu)選3.8～10；處理溫度20℃～65℃，優(yōu)選35℃～55℃；處理時間0.2h～10h，優(yōu)選0.5h～5h。更優(yōu)選地，所述條件選自于：ph4.8、45℃；ph7.5、52℃；ph3.8、35℃；ph8.3、52℃；ph8.5、65℃；ph6.5、45℃；ph8.0、45℃；ph10.2、45℃；ph4.2、35℃；ph6.5、45℃；ph4.8、55℃；ph4.8、53℃；ph7.2、53℃；ph7.5、25℃；ph10.1、55℃。在本發(fā)明上述方面優(yōu)選的實施方式中，水解酶處理在如下條件下進(jìn)行：ph3～8，優(yōu)選3.3～7.5，更優(yōu)選4～6.5，最優(yōu)選4.5～5.5；處理溫度30℃～72℃，優(yōu)選35℃～63℃，更優(yōu)選40℃～60℃，最優(yōu)選45℃～55℃；處理時間0.5h～12h，優(yōu)選1h～10h，更優(yōu)選2h～8h，最優(yōu)選2h～7h；更優(yōu)選地，上述水解酶處理條件選自于：ph5.0、63℃；ph5.5、50℃；ph3.0、35℃；ph6.5、45℃；ph4.0、40℃；ph6.5、45℃；ph4.5、60℃；ph8、45℃；ph5、55℃；ph7.5、50℃；ph3.5、30℃；ph5.6、50℃。在本發(fā)明上述方面優(yōu)選的實施方式中，過濾采用1μm～80μm、優(yōu)選10μm～50μm的過濾孔徑進(jìn)行，或者采用10nm～10μm、優(yōu)選20nm～1μm的膜過濾孔徑進(jìn)行。在本發(fā)明上述方面優(yōu)選的實施方式中，醇溶蛋白占所述蛋白干基的74wt％以上、優(yōu)選80wt％以上、更優(yōu)選85wt％以上、進(jìn)一步優(yōu)選90wt％以上、進(jìn)一步更優(yōu)選95wt％以上、最優(yōu)選97wt％以上，α-醇溶蛋白占所述醇溶蛋白的77wt％以上、優(yōu)選85wt％以上、更優(yōu)選90wt％以上、進(jìn)一步優(yōu)選95wt％以上、最優(yōu)選100wt％，β-醇溶蛋白占所述醇溶蛋白的10wt％以下、優(yōu)選5wt％以下、更優(yōu)選3wt％以下、進(jìn)一步優(yōu)選2wt％以下、最優(yōu)選0％，γ-醇溶蛋白占所述醇溶蛋白的10wt％以下、優(yōu)選5wt％以下、更優(yōu)選2wt％以下、最優(yōu)選0％，蛋白干基占所述蛋白產(chǎn)品的85wt％以上、優(yōu)選90wt％以上、更優(yōu)選94wt％以上、最優(yōu)選99wt％以上。與現(xiàn)有技術(shù)醇溶蛋白制備的方法相比，本申請所涉及的技術(shù)方案具有如下優(yōu)點(diǎn)：本發(fā)明所述的醇溶蛋白產(chǎn)品中的總蛋白含量以及α-醇溶蛋白、β-醇溶蛋白、γ-醇溶蛋白的含量與使用乙醇、異丙醇等其他有機(jī)溶劑按照傳統(tǒng)提取方法所得產(chǎn)品無明顯差別。α-醇溶蛋白是提供產(chǎn)品成膜性等功能性的最主要蛋白組分。本發(fā)明所述的醇溶蛋白產(chǎn)品中的α-醇溶蛋白在總蛋白中的含量可以高于傳統(tǒng)工藝制備的產(chǎn)品。在無須進(jìn)行單獨(dú)的脫色工藝的情況下，本發(fā)明所述的醇溶蛋白產(chǎn)品的色澤比傳統(tǒng)方法制備的黃色醇溶蛋白產(chǎn)品的顏色更淺，且可接近白色，亦比傳統(tǒng)方法制得的產(chǎn)品具有更低的玉米特征性氣味，產(chǎn)品的應(yīng)用范圍更寬和單食品樣品用量可以更大而不影響原食品表觀和風(fēng)味。本發(fā)明所述的醇溶蛋白產(chǎn)品與使用乙醇、異丙醇等其他有機(jī)溶劑按照傳統(tǒng)提取方法所得產(chǎn)品在如醇溶液溶解性、成膜性、成纖維性、成型性、制備微球特性、可降解性等功能特性方面無明顯差別，有些特性、如微球水溶液穩(wěn)定性等甚至優(yōu)于傳統(tǒng)工藝制備的產(chǎn)品。本發(fā)明所述的醇溶蛋白產(chǎn)品的制備方法可以一步實現(xiàn)在專一性保留α-醇溶蛋白的同時任意調(diào)節(jié)β-醇溶蛋白、γ-醇溶蛋白在產(chǎn)品中的含量，而不需要按照傳統(tǒng)制備方法中使用有機(jī)溶劑的水溶液，并且通過調(diào)節(jié)有機(jī)溶劑的濃度來分步分離α-醇溶蛋白、β-醇溶蛋白和γ-醇溶蛋白。本發(fā)明所述的醇溶蛋白產(chǎn)品的制備方法，由于在全水相體系中進(jìn)行，即便保留γ-醇溶蛋白也可完全避免制備過程中的物料凝膠化的發(fā)生，即可產(chǎn)出保留有γ-醇溶蛋白的產(chǎn)品，從而大大拓寬了醇溶蛋白產(chǎn)品的類型。本發(fā)明所述的醇溶蛋白產(chǎn)品的制備方法，在淀粉低度降解(de值<40)或淀粉非糊化狀態(tài)的條件下，即可實現(xiàn)淀粉及其衍生品與醇溶蛋白的分離。本發(fā)明所述的醇溶蛋白產(chǎn)品的制備方法在產(chǎn)出醇溶蛋白產(chǎn)品同時，可聯(lián)產(chǎn)粗糖產(chǎn)品或寡糖、二糖、單糖產(chǎn)品的精制原料、其他飼料級或食品級蛋白類副產(chǎn)品。本發(fā)明所述的醇溶蛋白產(chǎn)品的制備方法相比傳統(tǒng)制備方法，無須專門脫色、脫臭工藝即可獲得色澤明亮、乳白，原有特征性氣味平淡的醇溶蛋白產(chǎn)品。就本發(fā)明所述的醇溶蛋白產(chǎn)品的制備方法所涉及的過程而言，由于整個過程只使用水為媒介，而不使用傳統(tǒng)提取工藝中所使用的乙醇、丙酮、正己烷、乙酸乙酯等屬于火災(zāi)危險性甲類的溶劑，因此車間防爆等級較低，生產(chǎn)過程安全性好。本發(fā)明所述的醇溶蛋白產(chǎn)品的制備方法所涉及的設(shè)備為化工過程、食品藥品加工常用設(shè)備，設(shè)備投入成本較低。并且，所用原料不需要脫水干燥即可進(jìn)行制備，可降低部分能耗。附圖說明圖1是本發(fā)明所述的醇溶蛋白生產(chǎn)工藝的工藝流程示意圖。圖2a和2b是本發(fā)明所述的實施醇溶蛋白生產(chǎn)工藝的生產(chǎn)設(shè)備示意圖。圖3為現(xiàn)有技術(shù)中的玉米醇溶蛋白的主要加工工藝。圖4a-4e為示例的原料和不同玉米蛋白產(chǎn)品中的蛋白質(zhì)組分在進(jìn)行還原性十二烷基硫酸鈉(sds)聚丙烯酰胺凝膠電泳后的電泳圖(下)及光密度值分析圖(上)。其中，a為原料；b為乙醇提取(傳統(tǒng)方法)的α-醇溶蛋白產(chǎn)品；c為本專利方法得到的α-醇溶蛋白產(chǎn)品；d和e均為本專利方法得到的醇溶蛋白組合物產(chǎn)品。圖5為玉米醇溶蛋白為實施例1-6與對比例所得的玉米醇溶蛋白制得的膜的拉斷應(yīng)力表。具體實施方式下面結(jié)合附圖對本發(fā)明所提供的玉米蛋白及其制備方法作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。圖1為從玉米醇溶蛋白原料中提取醇溶蛋白的工藝流程示意圖。將原料102加水調(diào)節(jié)104后進(jìn)行磨漿106，通過108得到大小合適的物料顆粒，含該物料顆粒的漿液進(jìn)入分別由酶解系統(tǒng)112和分離系統(tǒng)114通過串聯(lián)、并聯(lián)或串并聯(lián)組成的酶解分離系統(tǒng)110中，在110中降解物料中的一部分如淀粉、纖維等的碳水化合物以及降解或/和修飾非醇溶蛋白組份并將組分分離。通過110得到富含醇溶蛋白的分離物116進(jìn)入洗滌系統(tǒng)124，而后將得到富含醇溶蛋白的分離物126進(jìn)行干燥128后得到醇溶蛋白產(chǎn)品。通過110還可得到富含蛋白分離物118，進(jìn)入干燥系統(tǒng)132或進(jìn)行精制130后進(jìn)入干燥系統(tǒng)132，得到蛋白類產(chǎn)品。通過110還可得到富含碳水化合物分離物120，可進(jìn)入碳水化合物回收系統(tǒng)132進(jìn)行利用。酶解分離系統(tǒng)110產(chǎn)出的廢水和洗滌系統(tǒng)產(chǎn)生的洗滌水進(jìn)入水處理系統(tǒng)136。玉米醇溶蛋白生產(chǎn)工藝在實施過程中所用的設(shè)備在圖2中進(jìn)行示例性的說明?；鞠嗤脑O(shè)備用于不同的原料(如玉米黃粉、玉米胚乳發(fā)酵醪、干酒糟)和目的物(包含β-和γ-醇溶蛋白并富含α-醇溶蛋白的醇溶蛋白、包含β-醇溶蛋白并富含α-醇溶蛋白的醇溶蛋白、α-醇溶蛋白)。根據(jù)一個示例性的實施方式，所用的原料為玉米黃粉漿。根據(jù)另一個實施方式，所用的原料可為玉米胚乳發(fā)酵醪干粉。圖2a為從玉米黃粉漿中提取醇溶蛋白的工藝流程示意圖。根據(jù)一個示例性的實施方式，將玉米黃粉漿202加水在調(diào)節(jié)罐204混合后進(jìn)入粉碎機(jī)206中，例如可使用膠體磨。根據(jù)一個示例性的實施方式，將204中的物料水分調(diào)節(jié)到95％；根據(jù)一個優(yōu)選的實施方式，將水分調(diào)節(jié)到75％～90％。如圖所示，料液通過過濾器208后與酶(如復(fù)合纖維素酶)、試劑組合物(如氫氧化鈉、焦亞硫酸鈉)、水、蒸汽等進(jìn)入第一酶解反應(yīng)器210。完畢后依次進(jìn)入第一分離器212和214，如旋流分離器，所得醇溶蛋白的物料與酶(如蛋白酶)、試劑組合物(如氫氧化鈉、二價錳離子、乙二胺四乙酸二鈉(edta-2na))、水、蒸汽等進(jìn)入第二酶解反應(yīng)器216反應(yīng)，而后進(jìn)入離心機(jī)218，如三相碟式離心機(jī)。根據(jù)一個示例性的實施方式，216中的物料使用氫氧化鈉調(diào)節(jié)ph至7.5，添加占蛋白重量0.3％的枯草桿菌中性蛋白酶和0.5％的枯草桿菌堿性蛋白酶、0.1mmmn2+在55℃下進(jìn)行1.5小時后添加0.05mmedta-2na。如圖所示，離心機(jī)218所得醇溶蛋白的物料與酶(如淀粉酶)、試劑組合物(如鹽酸)、水、蒸汽等進(jìn)入第三酶解反應(yīng)器220。反應(yīng)完畢后依次進(jìn)入過濾裝置222和224，并在224中實現(xiàn)洗滌后進(jìn)入干燥器228得到醇溶蛋白成品。根據(jù)示例性的實施方式，裝置222(例如可以是微濾膜裝置)和224(例如可以是板框壓濾機(jī))可實現(xiàn)非醇溶蛋白組份與醇溶蛋白的最終分離。如圖所示，離心機(jī)218所得的非醇溶蛋白的蛋白組分可以與酶(如蛋白酶)、試劑組合物(如鹽酸)、水、蒸汽等進(jìn)入酶解反應(yīng)器230進(jìn)一步處理后通過過濾機(jī)組232(如100nm～20nm超濾膜組)選擇透過并濃縮后，通過色譜柱234(如離子交換柱)精制后干燥得蛋白產(chǎn)品。212、214含碳水化合物料液可進(jìn)行回收；218的第三相料液和224的洗滌水可進(jìn)入水處理系統(tǒng)。圖2b為從玉米胚乳發(fā)酵醪干粉中提取高純度α-醇溶蛋白的工藝流程示意圖。根據(jù)一個示例性的實施方式，將玉米黃粉通過粉碎機(jī)240粉碎后(如輥壓機(jī))，進(jìn)入調(diào)節(jié)罐242加水混合，打入磨漿機(jī)244中，通過過濾器246后進(jìn)入反應(yīng)器248中。根據(jù)示例性的實施方式，過濾器246可具有例如200目的過濾孔徑。如圖所示，料液與酶(如復(fù)合纖維素/淀粉酶)、試劑組合物(如氫氧化鉀)、水、蒸汽等進(jìn)入第一反應(yīng)器248反應(yīng)完畢后打入過濾器250中。根據(jù)示例性的實施方式，過濾器250可具有例如300目的過濾孔徑。如圖所示，通過250的物料進(jìn)入到分離機(jī)252(如臥螺離心機(jī))中進(jìn)行分離，所得含醇溶蛋白的重相物料與酶(如蛋白酶)、試劑組合物(如氫氧化鈉、二價鈣離子)、水、蒸汽等進(jìn)入第二酶解反應(yīng)器254中反應(yīng)。過濾器250的截留物和分離機(jī)252的清液可進(jìn)行碳水化合物回收。根據(jù)示例性的實施方式，254還可以是兩個串聯(lián)的酶反應(yīng)器組(254-1和254-2)，在254-1反應(yīng)器中物料使用鹽酸調(diào)節(jié)ph至4.2，添加占蛋白重量0.8％的真菌酸中性蛋白酶、蛋白重量1％的三(2-羧乙基)膦，在45℃下進(jìn)行2小時。而后進(jìn)入254-1反應(yīng)器使用氫氧化鉀調(diào)節(jié)ph至8.3，添加占蛋白重量0.3％的枯草桿菌堿性蛋白酶和0.1mmca2+在50℃下進(jìn)行0.5小時反應(yīng)。如圖所示，254打出的物料進(jìn)入到過濾器256中進(jìn)行分離，截留物料進(jìn)入過濾機(jī)258，進(jìn)行水洗(260)后進(jìn)入干燥機(jī)262(如冷凍干燥機(jī))，粉碎機(jī)264粉碎后得到高純度α-醇溶蛋白產(chǎn)品。過濾器256中透過物料進(jìn)入過濾機(jī)266中，截留物料經(jīng)過洗滌(268)后進(jìn)入干燥器270(如管束干燥及)干燥，并由粉碎機(jī)272(如錘式粉碎機(jī))粉碎后得蛋白飼料產(chǎn)品。過濾機(jī)258和266的透過料液排入水處理系統(tǒng)。根據(jù)示例性的實施方式，過濾機(jī)258可具有例如500目的過濾孔徑。下表1中列出了玉米醇溶蛋白提取的工作參數(shù)，其為各個操作步驟提供了典型范圍、優(yōu)選范圍。原料粉碎粒徑的典型范圍為2～150μm。原料粉碎粒徑的優(yōu)選范圍為10～100μm(粒徑與目數(shù)可查表換算)。原料的水分調(diào)節(jié)的典型范圍為含水50％～95％。原料的水分調(diào)節(jié)的優(yōu)選范圍為含水75％～90％。蛋白酶添加量的典型范圍為原料中蛋白重量的0.01wt％～10wt％。蛋白酶添加量的優(yōu)選范圍為原料中蛋白重量的0.1wt％～3wt％。蛋白酶酶解ph的典型范圍為3.5～10.5。蛋白酶酶解ph的優(yōu)選范圍為3.8～10。蛋白酶酶解溫度的典型范圍為20℃～65℃。蛋白酶酶解溫度的優(yōu)選范圍為35℃～55℃。蛋白酶酶解時間的典型范圍為0.2h～10h。蛋白酶酶解時間的優(yōu)選范圍為0.5h～5h。淀粉酶添加量的典型范圍為原料中淀粉重量的0.05wt％～20wt％。淀粉酶添加量的優(yōu)選范圍為原料中淀粉重量的0.25wt％～15wt％。淀粉酶酶解ph的典型范圍為3～8。淀粉酶酶解ph的優(yōu)選范圍為3.3～7.5。淀粉酶酶解溫度的典型范圍為30℃～72℃。淀粉酶酶解溫度的優(yōu)選范圍為35℃～63℃。淀粉酶酶解時間的典型范圍為1h～10h。淀粉酶酶解時間的優(yōu)選范圍為2h～7h。纖維水解酶添加量的典型范圍為原料中纖維重量的0.2wt％～30wt％。纖維水解酶添加量的優(yōu)選范圍為原料中纖維重量的0.5wt％～20wt％。纖維水解酶ph的典型范圍為4～6.5。纖維水解酶ph的優(yōu)選范圍為4.5～5.5。纖維水解酶溫度的典型范圍為40℃～60℃。纖維水解酶溫度的優(yōu)選范圍為45℃～55℃。纖維水解酶時間的典型范圍為0.5h～12h。纖維水解酶時間的優(yōu)選范圍為2h～8h。堿包括氫氧化鈉、氫氧化鉀。堿添加量根據(jù)反應(yīng)ph確定。酸包括鹽酸、硫酸、亞硫酸、有機(jī)酸(包括乳酸、檸檬酸、蘋果酸)。酸添加量根據(jù)反應(yīng)ph確定。體系中的試劑組合物在料液中的添加情況(濃度為料液所含水部分的摩爾濃度)：含硫化合物添加量的典型范圍為1mm～50mm。含硫化合物添加量的優(yōu)選范圍為5mm～30mm。含磷化合物添加量的典型范圍為0.5mm～60mm。含磷化合物添加量的優(yōu)選范圍為2mm～40mm。鈉離子、鉀離子、二價堿土金屬離子、二價過渡金屬離子的添加量的典型范圍為0.01mm～20mm。鈉離子、鉀離子、二價堿土金屬離子、二價過渡金屬離子的添加量的優(yōu)選范圍為0.1mm～12mm。金屬螯合劑添加量的典型范圍為0mm～35mm。金屬螯合劑添加量的優(yōu)選范圍為0.1mm～18mm。反應(yīng)容器內(nèi)工作壓力典型范圍為-0.1mpa～0.3mpa。離心力的典型范圍為200g～150000g。離心力的優(yōu)選范圍為1000g～7000g。過濾孔徑的典型范圍為1μm～80μm。過濾孔徑的優(yōu)選范圍為10μm～50μm。膜過濾孔徑的典型范圍為10nm～10um。膜過濾孔徑的優(yōu)選范圍為20nm～1μm。在本發(fā)明的水解體系中，酸、堿作為ph調(diào)節(jié)劑，用于調(diào)節(jié)使反應(yīng)處于合適的酸堿環(huán)境，并且也用于調(diào)節(jié)組分的溶解狀態(tài)。含硫化合物、含磷化合物和金屬離子主要用于調(diào)節(jié)蛋白底物的結(jié)構(gòu)，具體而言其作用為打開蛋白底物中的二硫鍵，因此理論上可以選用任何合適的能夠打開蛋白中的二硫鍵的化合物。金屬離子和螯合劑用于調(diào)節(jié)蛋白酶、碳水化合物酶等酶的活性或穩(wěn)定性。表1：用于提取醇溶蛋白的工作參數(shù)表應(yīng)當(dāng)指出的是，以下實施例中記載的提取原料的組成以及蛋白成品組成等數(shù)值并不用于將所涉及的提取原料和蛋白成品限定為具體的特定產(chǎn)品，而僅是用于描述提取原料或蛋白成品的客觀參數(shù)。在本發(fā)明中，根據(jù)《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)gb5009.5-2010--食品中蛋白質(zhì)的測定》中的“第一法”測定產(chǎn)品中的蛋白含量，蛋白換算系數(shù)為6.24。根據(jù)gb/t5009.6的方法測定產(chǎn)品中脂肪含量。根據(jù)gb/t5009.3的方法測定產(chǎn)品中的水分含量。根據(jù)gb5009.12、gb5009.17和gb5009.11的方法測定產(chǎn)品中鉛含量。根據(jù)的方法測定產(chǎn)品中汞含量。根據(jù)的方法測定產(chǎn)品中砷含量。根據(jù)gb5009.23的方法測定產(chǎn)品中黃曲霉毒素含量。根據(jù)gb4789.2、gb4789.3、gb4789.15和gb4789.4的方法分別測定產(chǎn)品中菌落總數(shù)、大腸菌群、霉菌和致病菌的量。在本發(fā)明中，通過以下方法測定蛋白質(zhì)的光密度值(如圖4所示)：采用濃度為15％(w/v)的分離膠對所制備的添加有10％(v/v)β-巰基乙醇的樣品進(jìn)行還原性sds聚丙烯酰胺凝膠電泳，對電泳后的凝膠進(jìn)行考馬斯亮藍(lán)染色(圖4a–e中的下部圖)。使用quantityone軟件對凝膠中條帶進(jìn)行光密度分析可產(chǎn)生信號峰(圖4a–e中的上部圖)。信號峰的面積為該組分蛋白的光密度值與蛋白含量呈函數(shù)關(guān)系。具體而言，將不同醇溶蛋白組分的光密度值記為di(i＝1,2,3,…,n)，對醇溶蛋白各組分占醇溶蛋白的百分比光密度值之比進(jìn)行計算，即di/d0％。根據(jù)示例性的實施方式，本發(fā)明所用到的含醇溶蛋白的提取原料可具有例如圖4a包含α-醇溶蛋白、β-醇溶蛋白、γ-醇溶蛋白和δ-醇溶蛋白的電泳譜圖和其光密度圖譜。根據(jù)示例性的實施方式，本發(fā)明的醇溶蛋白產(chǎn)品可具有例如圖4c的包含α-醇溶蛋白的電泳譜圖和其光密度圖譜。根據(jù)示例性的實施方式，本發(fā)明的醇溶蛋白產(chǎn)品可具有例如圖4d的包含α-醇溶蛋白、β-醇溶蛋白和γ-醇溶蛋白的電泳譜圖和其光密度圖譜。根據(jù)示例性的實施方式，本發(fā)明的醇溶蛋白產(chǎn)品可具有例如圖4a的包含α-醇溶蛋白和β-醇溶蛋白的電泳譜圖和其光密度圖譜。根據(jù)示例性的實施方式，本發(fā)明所使用的堿性蛋白酶為芽孢桿菌的絲氨酸蛋白酶。根據(jù)示例性的實施方式，本發(fā)明所使用的酸性蛋白酶為霉菌羧基蛋白酶。根據(jù)示例性的實施方式，本發(fā)明所使用的中性蛋白酶為霉菌或芽孢桿菌的金屬蛋白酶。根據(jù)示例性的實施方式，本發(fā)明所使用的巰基蛋白酶為來源于植物(如菠蘿的果莖、葉、皮和木瓜果實)的巰基蛋白酶，例如菠蘿蛋白酶、木瓜蛋白酶。在上表1中所列的試劑組合物中，酸、堿用于調(diào)節(jié)使反應(yīng)處于合適的酸堿環(huán)境，并且也用于調(diào)節(jié)組分的溶解狀態(tài)。含硫化合物、含磷化合物和金屬離子主要用于調(diào)節(jié)蛋白底物的結(jié)構(gòu)；金屬離子和螯合劑用于調(diào)節(jié)蛋白酶、碳水化合物酶等酶的活性或穩(wěn)定性。本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明的教導(dǎo)，完全有能力理解應(yīng)當(dāng)如何根據(jù)實際所使用的酶以及相應(yīng)的底物來選擇合適的試劑組合物及其濃度，以實現(xiàn)本發(fā)明的目的(例如，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以適當(dāng)?shù)貙γ柑幚頃r間進(jìn)行選擇，并通過本領(lǐng)域普通技術(shù)知識控制水解時間，使得底物達(dá)到所希望的水解程度，以實現(xiàn)本發(fā)明所強(qiáng)調(diào)的利用粒徑差異過濾去除水解產(chǎn)物)。實施例除另有說明以外，本發(fā)明中所指明的百分含量均為重量百分含量。在以下實施例中，在加入相關(guān)試劑時若僅指明濃度，則表示該試劑在加入到體系中后所達(dá)到的濃度。如無特別說明，所有反應(yīng)均在常壓下進(jìn)行。實施例1將含水8.9％、蛋白64％(干基)的玉米黃粉調(diào)節(jié)水分含量至70％后打入酶解罐調(diào)節(jié)至ph4.8、45℃，并添加占所含蛋白量的4.8％的酸性蛋白酶(ma-sd，阿瑪諾天野酶制劑有限公司)、60mm三(2-羧乙基)膦反應(yīng)1.2小時后調(diào)節(jié)至ph7.5、52℃，添加2.6％的堿性蛋白酶(2709，龐博生物工程有限公司)和2％的中性蛋白酶(sukaprone，蘇柯漢生物工程股份有限公司)、1mm巰基乙醇反應(yīng)0.5小時后離心，洗滌并收集沉淀。所得產(chǎn)品中總蛋白干基含量61.1％，蛋白中的醇溶蛋白含量大于74％，且α-醇溶蛋白含量為95％，β-醇溶蛋白含量為2％。實施例2將含水62.4％、蛋白70％(干基)的玉米黃粉加水調(diào)節(jié)到75％后打入酶解罐調(diào)節(jié)至ph3.8、35℃，并添加所含蛋白重量0.38％的酸性蛋白酶(sukaproac蘇柯漢生物工程股份有限公司)、0.26％的菠蘿蛋白酶(食品級，龐博生物工程有限公司)、50mm焦亞硫酸鈉、0.5mm三(2-羧乙基)膦、4mm錳離子先反應(yīng)10小時，再升溫到50℃維持0.5小時，然后調(diào)節(jié)至ph8.3、52℃，并添加0.33％的堿性蛋白酶(2709，龐博生物工程有限公司)反應(yīng)1小時后添加10mmedta并離心，洗滌并收集沉淀。所得產(chǎn)品中總蛋白干基含量54.1％，蛋白中的醇溶蛋白含量97.55％，其中含95.85％的α-醇溶蛋白、1.9％的β-醇溶蛋白和0.95％的γ-醇溶蛋白。實施例3將含水89.9％、蛋白68％(干基)的玉米黃粉物料調(diào)節(jié)水分含量至80％后，打入酶解罐調(diào)節(jié)至ph6.5、45℃，添加所含蛋白重量0.01％的木瓜蛋白酶(食品級，龐博生物工程有限公司)、20mm巰基乙醇和0.01mm的鈷離子反應(yīng)1.5小時后，再調(diào)節(jié)至ph10.2、45℃，并添加0.01％的堿性蛋白酶(protex6l，杰能科生物工程有限公司)反應(yīng)2小時后離心，洗滌并收集沉淀。所得產(chǎn)品中總蛋白干基含量55.9％，蛋白中的醇溶蛋白含量大于90.66％，其中含85.54％的α-醇溶蛋白、9.91％的β-醇溶蛋白和4.34％的γ-醇溶蛋白。實施例4將含水9.0％、蛋白28％(干基)的干酒糟(ddg)調(diào)節(jié)水分至80％后打入酶解罐，在ph4.2、35℃下添加所含蛋白重量0.8％的酸性蛋白酶(ma-sd，阿瑪諾天野酶制劑有限公司)、40mm三(2-羧乙基)膦反應(yīng)6小時，調(diào)節(jié)ph至6.5、45℃，加入0.5％的中性蛋白酶(1398，龐博生物工程有限公司)和1.7％的木瓜蛋白酶(食品級，龐博生物工程有限公司)、5mm巰基乙醇、0.1mm鋅離子反應(yīng)0.5小時后離心，洗滌并收集沉淀。所得產(chǎn)品中總蛋白干基含量23.9％，蛋白中的醇溶蛋白含量81.30％，其中含94.5％的α-醇溶蛋白、1.95％的β-醇溶蛋白和0.04％的γ-醇溶蛋白。實施例5將含水11.0％、蛋白30％(干基)的干酒糟和可溶物(ddgs)加水調(diào)制并水洗兩次后調(diào)節(jié)水分含量至95％，在ph4.8、55℃下加入所含蛋白重量0.23wt％的酸性蛋白酶(sukaproac蘇柯漢生物工程股份有限公司)和2mm三(2-羧乙基)膦反應(yīng)0.5小時后，在ph4.8、53℃下添加所含蛋白重量0.3％的菠蘿蛋白酶(食品級，龐博生物工程有限公司)反應(yīng)2.8小時，再調(diào)節(jié)ph至7.2并在53℃下加入0.5％的中性蛋白酶(1398，龐博生物工程有限公司)、6mm鈣離子、15mm巰基乙醇和15mm半胱氨酸反應(yīng)3.1小時后離心，洗滌并收集沉淀。所得產(chǎn)品中總蛋白干基含量24.3％，蛋白中含87.5％的α-醇溶蛋白、3.1％的β-醇溶蛋白和5.1％的γ-醇溶蛋白。實施例6將含水31.0％、蛋白32％(干基)的濕酒糟(wdg)加水調(diào)節(jié)水分含量至80％，在ph7.5、25℃下添加所含蛋白重量0.04wt％的中性蛋白酶(sukaprone，蘇柯漢生物工程股份有限公司)、2mm鎂離子、2mm鈣離子和20mm巰基乙醇反應(yīng)4.5小時，再調(diào)節(jié)ph至10.1維持0.2小時。使用1μm孔徑濾膜過濾得到第一透過液和截留液，調(diào)節(jié)截留液水分至80％，打回酶解罐調(diào)節(jié)ph至10.1、55℃后添加物料所含蛋白重量0.02wt％的堿性蛋白酶(2709，龐博生物工程有限公司)保溫0.5小時后離心，洗滌并收集沉淀。所得產(chǎn)品中總蛋白干基含量25.7％，蛋白中醇溶蛋白含量大于93.1％，其中含77.9％的α-醇溶蛋白、17.2％的β-醇溶蛋白和1.3％的γ-醇溶蛋白。實施例7-12均使用含水量為80％的玉米黃粉并在ph4.2、35℃下添加所含蛋白重量2％的酸性蛋白酶(ma-sd，阿瑪諾天野酶制劑有限公司)、10mm三(2-羧乙基)膦反應(yīng)3小時，調(diào)節(jié)ph至6.5、45℃，加入0.5％的中性蛋白酶(1398，龐博生物工程有限公司)和1.7％的木瓜蛋白酶(食品級，龐博生物工程有限公司)反應(yīng)1小時后的物料。實施例7將上述物料用膠體磨(magiclab，ika公司)粉碎(磨盤間隙約40μm)后，打入酶解罐調(diào)節(jié)至ph5.0、63℃，并加入所含淀粉重量8wt％的α淀粉酶(spezymefred，杰能科生物工程有限公司)和4％的糖化酶(spirizymeultra，諾維信酶制劑有限公司)反應(yīng)2小時；200g離心15min(allegra30r，美國貝克曼庫爾特有限公司)，收集沉淀調(diào)節(jié)水分含量至70％而后打入第二酶解罐調(diào)節(jié)至ph5.5、50℃，并添加所含纖維重量的3.0％的纖維素酶(sukazym-sukacell，蘇柯漢生物工程股份有限公司)和2％的包含阿拉伯聚糖酶、纖維素酶、β-葡聚糖酶、半纖維素酶、木聚糖酶等酶的復(fù)合酶(viscozymel，諾維信酶制劑有限公司)、10mm鈣離子、10mm鉀離子反應(yīng)2小時后，使用50μm孔徑濾布過濾(含蛋白的目標(biāo)相平均粒徑約100μm，非目標(biāo)相粒徑不同組分的平均粒徑大都小于30μm(含可溶物))得到第一濾餅，將其調(diào)節(jié)至水分含量70％、ph7.5、55℃，并加入35mmedta后，通過10μm膜過濾(含蛋白的目標(biāo)相平均粒徑約15μm，非目標(biāo)相大都為可溶物)后得到第二濾液和濾餅，對所得濾餅經(jīng)過洗滌、干燥后得到蛋白干基含量為88.4％的玉米蛋白產(chǎn)品。實施例8將上述物料用膠體磨(magiclab，ika公司)粉碎(磨盤間隙約2μm)后加水調(diào)節(jié)到75％打入第一酶解罐調(diào)節(jié)至ph3.0、35℃，并加入所含淀粉重量1wt％的α淀粉酶(liquozymescds諾維信酶制劑有限公司)和1wt％包含糖化酶和普魯蘭酶的復(fù)合淀粉酶(novozymens50013，諾維信酶制劑有限公司)反應(yīng)7小時，使用1μm孔徑濾網(wǎng)過濾(含蛋白的目標(biāo)相平均粒徑約150μm，非目標(biāo)相不同組分的平均粒徑大都小于2μm(含可溶物))得到第一濾餅，調(diào)節(jié)水分含量至75％；物料打入第三酶解罐調(diào)節(jié)至ph6.5、45℃，并加入纖維重量12％的纖維素酶、5％的β-葡聚糖酶(ultraflo諾維信酶制劑有限公司，主要包含β-葡聚糖酶，還包含木聚糖酶等)和13％的復(fù)合酶(viscozymel諾維信酶制劑有限公司)反應(yīng)4小時后添加10mmedta并調(diào)節(jié)ph至5.0，使用40μm孔徑濾布過濾(含蛋白的目標(biāo)相平均粒徑約110μm，非目標(biāo)相不同組分的平均大都小于30μm(含可溶物))得到第二濾液和濾餅，濾餅經(jīng)過洗滌、干燥后得到蛋白干基含量為99.2％的玉米蛋白產(chǎn)品。實施例9將上述物料用膠體磨(magiclab，ika公司)粉碎(磨盤間隙約10μm)后，打入第一酶解罐調(diào)節(jié)至ph4.0、40℃，加入所含纖維重量0.2wt％的纖維素酶(celluclast，諾維信酶制劑有限公司)、0.4％的復(fù)合酶(viscozymel諾維信酶制劑有限公司)和0.01mm的鉀離子反應(yīng)8小時。使用80μm孔徑濾布過濾(含蛋白的目標(biāo)相平均粒徑約140μm，非目標(biāo)相不同組分的平均粒徑大都小于9μm(含可溶物))得到第一濾液和濾餅，第一濾餅調(diào)節(jié)水分含量至80％后，打入第二酶解罐調(diào)節(jié)至ph6.5、45℃，再加入所含淀粉重量0.1％的α淀粉酶(spezymefred，杰能科生物工程有限公司)、0.05％的糖化酶(spirizymeultra，諾維信酶制劑有限公司)、0.1％的普魯蘭酶(promozymed2諾維信酶制劑有限公司)，并升溫到72℃維持5小時后調(diào)節(jié)至ph10.5后使用20nm孔徑濾膜過濾(含蛋白的目標(biāo)相平均粒徑約0.5μm，非目標(biāo)相大都為可溶物)得到第二透過液和截留液，將截留液洗滌、脫水干燥后得到蛋白干基含量為85.7％的玉米蛋白產(chǎn)品。實施例10將上述物料用膠體磨(magiclab，ika公司)粉碎(磨盤間隙約100μm)后調(diào)節(jié)水分至80％，打入第一酶解罐，在ph4.5、60℃下加入所含纖維重量0.2wt％的復(fù)合纖維素酶(viscozymel諾維信酶制劑有限公司)、0.1mmedta，反應(yīng)12小時后離心分離，水洗一次后調(diào)節(jié)水分至80％；調(diào)節(jié)ph至8在45℃添加所含淀粉重量0.05％的復(fù)合淀粉酶(spirizymeexcel，諾維信酶制劑有限公司)維持10小時后使用80μm孔徑濾布過濾(含蛋白的目標(biāo)相平均粒徑約5μm，非目標(biāo)相不同組分的平均粒徑大都大于90μm)得到第一濾液和濾餅，第一濾液再通過100nm的微濾膜(含蛋白的目標(biāo)相平均粒徑約5μm，非目標(biāo)相大都為可溶物)得到第二濾液。第二截留液在1000g下離心10min得到沉淀經(jīng)過洗滌、脫水干燥后得到蛋白干基含量為75.8％的玉米蛋白產(chǎn)品。實施例11將上述物料用膠體磨(magiclab，ika公司)粉碎(磨盤間隙約150μm)后，打入第一酶解罐，在ph5、55℃下加入所含纖維重量12wt％的纖維素酶(celluclast，諾維信酶制劑有限公司)、8wt％的β-葡聚糖酶(ultraflo諾維信酶制劑有限公司)、12mm鈣離子，反應(yīng)0.5小時；使用10μm孔徑濾膜過濾(含蛋白的目標(biāo)相平均粒徑約110μm，非目標(biāo)相為可溶物)得到第一透過液和截留液，調(diào)節(jié)截留液水分至85％后打入第二酶解罐，再調(diào)節(jié)ph至7.5并在50℃下加入所含淀粉重量1％的α淀粉酶(spezymefred，杰能科生物工程有限公司)、1％的糖化酶(spirizymeultra，諾維信酶制劑有限公司)和3％的復(fù)合淀粉酶(spirizymeexcel，諾維信酶制劑有限公司)18mmegta反應(yīng)3.5小時后使用50μm孔徑濾布過濾(含蛋白的目標(biāo)相平均粒徑約15μm及可溶物，非目標(biāo)相不同組分的平均粒徑大都大于140μm)得到第二透過液和濾餅，透過液在2000g下離心10min所得固相經(jīng)過洗滌、脫水干燥后得到蛋白干基含量為80.0.％的玉米蛋白產(chǎn)品。實施例12將上述物料粉碎粒徑至約30μm，打入第一酶解罐，在ph3.5、30℃下加入所含淀粉重量5wt％的α淀粉酶(liquozymescds，諾維信酶制劑有限公司)、3wt％的糖化酶(spirizymeultra，諾維信酶制劑有限公司)、2wt％的普魯蘭酶(promozymed2諾維信酶制劑有限公司)、10％復(fù)合淀粉酶(novozymens50013，諾維信酶制劑有限公司)、2mm鈣離子反應(yīng)1小時；而后調(diào)節(jié)ph至5.6并在50℃下加入所含纖維重量10％的復(fù)合纖維水解酶(gc518，杰能科生物工程有限公司)反應(yīng)5小時；使用1μm孔徑濾膜過濾(含蛋白的目標(biāo)相平均粒徑大都大于100μm，非目標(biāo)相為可溶物)得到第一透過液和截留液，調(diào)節(jié)截留液水分至80％，打入調(diào)漿罐，調(diào)節(jié)ph至10、55℃后通過20μm的濾網(wǎng)(含蛋白的目標(biāo)相平均粒徑約1μm，非目標(biāo)相不同組分的平均粒徑為約29μm及可溶物)得到第二濾液和截留液，將濾液脫水干燥后得到蛋白干基含量為95.0％的玉米蛋白產(chǎn)品。實施例13、14中的原料均使用含水80％的玉米黃粉，調(diào)節(jié)ph至5.6并在50℃下加入所含纖維重量8％的復(fù)合纖維水解酶和2.0％的纖維素酶反應(yīng)2小時，或是用其他條件使降解的纖維量約占原纖維量的十分之一。實施例13將上述物料通過磨盤間隙為20μm的膠體磨，并將研磨物料的ph分別調(diào)節(jié)至3、4和6.2，并使用孔徑為10μm的濾膜得到過濾截留液，并將截留液離心并干燥后，分別得到蛋白含量為71.25％、70.76％和70.36％的產(chǎn)品；當(dāng)使用孔徑為48μm的濾網(wǎng)過濾得到濾餅，并將濾餅脫水干燥后，分別得到蛋白含量為77.7％、76.8％和76.3％的產(chǎn)品。當(dāng)使用孔徑為0.1μm的濾膜或孔徑為75μm、150μm的濾網(wǎng)處理本實施例中的ph4的物料后，所得截留液或濾餅進(jìn)一步脫水并干燥，分別得到蛋白含量為69.9％、76.4％和71.9％的蛋白產(chǎn)品。實施例14將上述物料的ph分別調(diào)節(jié)至6.9、8和10.5，并使用孔徑為1μm的濾膜得到透過液，將透過液離心并干燥后，分別得到蛋白含量為93.2％、96.0％和97.5％的蛋白產(chǎn)品；當(dāng)使用孔徑為75μm的濾網(wǎng)過濾得到濾餅，并將濾餅脫水干燥后，分別得到蛋白含量為76.9％、78.8％和79.7％的產(chǎn)品。當(dāng)使用孔徑為0.1μm的濾膜或孔徑為38μm、150μm的濾網(wǎng)處理本實施例中的ph8的物料后，所得截留液或濾餅進(jìn)一步脫水并干燥，分別得到蛋白含量為99.5％、87.2％和72.2％的蛋白產(chǎn)品。實施例15、16中的原料均使用含水80％的玉米黃粉，調(diào)節(jié)至ph6.5、45℃，再加入所含淀粉重量2％的α淀粉酶、1％的糖化酶、2％的普魯蘭酶，并升溫到72℃維持2.5小時，或使用其他條件使液化的淀粉量約占原淀粉的一半，調(diào)節(jié)ph至5.6并在50℃下加入所含纖維重量8％的復(fù)合纖維水解酶和2.0％的纖維素酶反應(yīng)2小時，或是用其他條件使降解的纖維量約占原纖維量的十分之一。實施例15將上述物料通過磨盤間隙為20μm的膠體磨，并將研磨物料的ph分別調(diào)節(jié)至3、4和6.2，并使用孔徑為10μm的濾膜得到過濾截留液，并將截留液離心并干燥后，分別得到蛋白含量為79.0％、78.7％和78.3％的產(chǎn)品；當(dāng)使用孔徑為48μm的濾網(wǎng)過濾得到濾餅，并將濾餅脫水干燥后，分別得到蛋白含量為83.6％、83.0％和82.63％的產(chǎn)品。當(dāng)使用孔徑為0.1μm的濾膜或孔徑為75μm、150μm的濾網(wǎng)處理本實施例中的ph4的物料后，所得截留液或濾餅進(jìn)一步脫水并干燥，分別得到蛋白含量為78.0％、82.7％和79.4％的蛋白產(chǎn)品。實施例16將上述物料的ph分別調(diào)節(jié)至6.9、8和10.5，并使用孔徑為1μm的濾膜得到透過液，將透過液離心并干燥后，分別得到蛋白含量為95.9％、97.4％和98.2％的蛋白產(chǎn)品；當(dāng)使用孔徑為75μm的濾網(wǎng)過濾得到濾餅，并將濾餅脫水干燥后，分別得到蛋白含量為84.8％、86.1％和86.8％的產(chǎn)品。當(dāng)使用孔徑為0.1μm的濾膜或孔徑為38μm、150μm的濾網(wǎng)處理本實施例中的ph8的物料后，所得截留液或濾餅進(jìn)一步脫水并干燥，分別得到蛋白含量為99.5％、92.3％和80.0％的蛋白產(chǎn)品。實施例17將含水8.9％的玉米黃粉使用氣流粉碎機(jī)(fqs15型，上海致凱粉體機(jī)械制造有限公司)粉碎粒徑至約40μm后加水調(diào)節(jié)到50％充分水化后，進(jìn)入酶解和分離系統(tǒng)：物料首先進(jìn)入第一酶解罐調(diào)節(jié)至ph5.0、63℃，并加入所含淀粉重量8wt％的α淀粉酶(spezymefred，杰能科生物工程有限公司)和4％的糖化酶(spirizymeultra，諾維信酶制劑有限公司)反應(yīng)2小時；200g離心15min(allegra30r，美國貝克曼庫爾特有限公司)，收集沉淀調(diào)節(jié)水分含量至70％而后打入第二酶解罐調(diào)節(jié)至ph5.5、50℃，并添加所含纖維重量的3.0％的纖維素酶(sukazym-sukacell，蘇柯漢生物工程股份有限公司)和2％的復(fù)合酶(viscozymel，諾維信酶制劑有限公司)、10mm鈣離子、10mm鉀離子反應(yīng)2小時后，使用50μm孔徑濾布過濾得到第一濾餅，將其調(diào)節(jié)水分含量至70％后打入第三酶解罐調(diào)節(jié)至ph4.8、35℃，并添加所含蛋白量的5％的酸性蛋白酶(羧基蛋白酶ma-sd，阿瑪諾天野酶制劑有限公司)、60mm三(2-羧乙基)膦反應(yīng)1.5小時后調(diào)節(jié)至ph7.5、55℃，添加3％的堿性蛋白酶(絲氨酸蛋白酶2709，龐博生物工程有限公司)和2％的中性蛋白酶(金屬蛋白酶sukaprone，蘇柯漢生物工程股份有限公司)、1mm巰基乙醇反應(yīng)0.5小時后加入35mmedta，通過10μm膜過濾后得到第二濾液和濾餅。所得濾餅進(jìn)行洗滌、干燥后得到蛋白干基含量為90％的玉米醇溶蛋白產(chǎn)品，蛋白中的醇溶蛋白含量大于74％，且全部為α-醇溶蛋白(100％)，脂肪和灰分干基含量分別為1.04％和4.01％。另外，第二濾液通過1μm的微濾膜過濾，截留液精制并脫水干燥后得到蛋白干基含量86％的產(chǎn)品。實施例18將含水62.4％的玉米黃粉使用輥壓機(jī)(s120，常州自力化工機(jī)械有限公司)粉碎(輥子間隙約2μm)后加水調(diào)節(jié)到75％后，進(jìn)入酶解和分離系統(tǒng)：物料首先進(jìn)入第一酶解罐調(diào)節(jié)至ph3.0、35℃，并加入所含淀粉重量1wt％的α淀粉酶(liquozymescds諾維信酶制劑有限公司)和1wt％包含糖化酶和普魯蘭酶的復(fù)合淀粉酶(novozymens50013，諾維信酶制劑有限公司)反應(yīng)7小時，使用1μm孔徑濾網(wǎng)過濾得到第一濾餅，將其調(diào)節(jié)水分含量至75％；打入第二酶解罐調(diào)節(jié)至ph3.8、35℃，并添加所含蛋白重量0.4％的酸性蛋白酶(羧基蛋白酶sukaproac蘇柯漢生物工程股份有限公司)、0.3％的菠蘿蛋白酶(食品級，龐博生物工程有限公司)、50mm焦亞硫酸鈉、0.5mm三(2-羧乙基)膦、4mm錳離子先反應(yīng)10小時，再升溫到50℃維持0.5小時，然后調(diào)節(jié)至ph8.5、65℃，并添加0.3％的堿性蛋白酶(絲氨酸蛋白酶2709，龐博生物工程有限公司)反應(yīng)1小時后150000g離心10s(optimatmxe，美國貝克曼庫爾特有限公司)，收集沉淀調(diào)節(jié)水分含量至75％；物料打入第三酶解罐調(diào)節(jié)至ph6.5、45℃，并加入纖維重量12％的纖維素酶、5％的β-葡聚糖酶(ultraflo諾維信酶制劑有限公司)和13％的復(fù)合酶(viscozymel諾維信酶制劑有限公司)反應(yīng)4小時后添加10mmedta并調(diào)節(jié)至ph至5.0，使用40μm孔徑濾布過濾得到第二濾液和濾餅，濾餅經(jīng)過洗滌、干燥后得到蛋白干基含量為99.1％的玉米醇溶蛋白產(chǎn)品，蛋白中的醇溶蛋白含量大于98.4％，其中含97％的α-醇溶蛋白、2％的β-醇溶蛋白和1％的γ-醇溶蛋白，脂肪和灰分干基含量分別為0.5％和0.2％。另外，第二濾液通過1μm的微濾膜過濾，截留液精制并脫水干燥后得到蛋白干基含量75.1％的產(chǎn)品。實施例19將含水89.9％的玉米黃粉使用膠體磨(magiclab，ika公司)粉碎(磨盤間隙約10μm)，打入酶解和分離系統(tǒng)：物料首先進(jìn)入第一酶解罐調(diào)節(jié)至ph4.0、40℃后，加入所含纖維重量0.2wt％的纖維素酶(celluclast，諾維信酶制劑有限公司)、0.4％的復(fù)合酶(viscozymel諾維信酶制劑有限公司)和0.01mm的鉀離子反應(yīng)8小時。使用80μm孔徑濾布過濾得到第一濾液和濾餅，第一濾液再通過1μm的微濾膜得到第二濾液，第二濾液通過10nm的超濾膜，得到第三截留液，將第一濾餅和第三截留液合并并調(diào)節(jié)水分含量至80％后，打入第二酶解罐調(diào)節(jié)至ph8.0、45℃，添加所含蛋白重量0.4％的堿性蛋白酶(protex6l，杰能科生物工程有限公司)、20mm巰基乙醇反應(yīng)1.5小時，再加入所含淀粉重量0.1％的α淀粉酶(spezymefred，杰能科生物工程有限公司)、0.05％的糖化酶(spirizymeultra，諾維信酶制劑有限公司)、0.1％的普魯蘭酶(promozymed2諾維信酶制劑有限公司)，并升溫到72℃維持5小時；物料打入第三酶解罐調(diào)節(jié)至ph10.5、45℃反應(yīng)0.5小時后使用20nm孔徑濾膜過濾得到第四透過液和截留液，將截留液洗滌、脫水干燥后得到蛋白干基含量為85％的玉米醇溶蛋白產(chǎn)品，蛋白中的醇溶蛋白含量大于92％，其中含91％的α-醇溶蛋白、7％的β-醇溶蛋白和2％的γ-醇溶蛋白，脂肪和灰分干基含量分別為3.2％和1.52％。另外，第四透過液精制后得到蛋白干基含量94.7％的產(chǎn)品。實施例20將含水9.0％的干酒糟(ddg)使用氣流粉碎機(jī)(fqs15型，上海致凱粉體機(jī)械制造有限公司)粉碎粒徑至約100μm后調(diào)節(jié)水分至80％，打入酶解和分離系統(tǒng)：物料首先進(jìn)入第一酶解罐，在ph4.5、60℃下加入所含纖維重量0.2wt％的復(fù)合纖維素酶(viscozymel諾維信酶制劑有限公司)、0.1mmedta，反應(yīng)12小時后離心分離，水洗一次后調(diào)節(jié)水分至80％；將物料打入第二酶解罐，在ph4.2、35℃下添加所含蛋白重量1％的酸性蛋白酶(ma-sd，阿瑪諾天野酶制劑有限公司)、40mm三(2-羧乙基)膦反應(yīng)6小時，調(diào)節(jié)ph至6.5、45℃，加入0.5％的中性蛋白酶(1398，龐博生物工程有限公司)和1.5％的木瓜蛋白酶(食品級，龐博生物工程有限公司)、5mm巰基乙醇、0.1mm鋅離子反應(yīng)0.5小時后調(diào)節(jié)ph至8在45℃添加所含淀粉重量0.05％的復(fù)合淀粉酶(spirizymeexcel，諾維信酶制劑有限公司)維持10小時后使用80μm孔徑濾布過濾得到第一濾液和濾餅，第一濾液再通過100nm的微濾膜得到第二濾液。第二截留液在1000g下離心10min得到沉淀經(jīng)過洗滌、脫水干燥后得到蛋白干基含量為75％的玉米醇溶蛋白產(chǎn)品，蛋白中的醇溶蛋白含量大于81.50％，其中含98％的α-醇溶蛋白、1.99％的β-醇溶蛋白和0.03％的γ-醇溶蛋白，脂肪和灰分干基含量分別為4.98％和2.11％。另外，第二透過液和第一濾餅合并并干燥后得到蛋白干基含量50％的產(chǎn)品。實施例21將含水11.0％的干酒糟和可溶物(ddgs)加水調(diào)制并水洗兩次后調(diào)節(jié)水分含量至95％，使用膠體磨(magiclab，ika公司)粉碎(磨盤間隙約150μm)，打入酶解和分離系統(tǒng)：物料首先進(jìn)入第一酶解罐，在ph5、55℃下加入所含纖維重量12wt％的纖維素酶(celluclast，諾維信酶制劑有限公司)、8wt％的β-葡聚糖酶(ultraflo諾維信酶制劑有限公司)、12mm鈣離子、所含蛋白重量0.2wt％的酸性蛋白酶(sukaproac蘇柯漢生物工程股份有限公司)和2mm三(2-羧乙基)膦)反應(yīng)0.5小時；使用10μm孔徑濾膜過濾得到第一透過液和截留液，調(diào)節(jié)截留液水分至85％后打入第二酶解罐，在ph5、50℃下添加所含蛋白重量0.3％的菠蘿蛋白酶(食品級，龐博生物工程有限公司)反應(yīng)3小時，再調(diào)節(jié)ph至7.5并在50℃下加入0.5％的中性蛋白酶(1398，龐博生物工程有限公司)、所含淀粉重量1％的α淀粉酶(spezymefred，杰能科生物工程有限公司)、1％的糖化酶(spirizymeultra，諾維信酶制劑有限公司)和3％的復(fù)合淀粉酶(spirizymeexcel，諾維信酶制劑有限公司)、15mm巰基乙醇和15mm半胱氨酸和18mmegta反應(yīng)3.5小時后使用50μm孔徑濾布過濾得到第二透過液和濾餅，透過液在2000g下離心10min所得固相經(jīng)過洗滌、脫水干燥后得到蛋白干基含量為79％的玉米醇溶蛋白產(chǎn)品，蛋白中的醇溶蛋白含量大于85.60％，其中含87.5％的α-醇溶蛋白、3.1％的β-醇溶蛋白和5.1％的γ-醇溶蛋白，脂肪和灰分干基含量分別為1.16％和0.51％。另外，第二濾餅干燥后得到蛋白干基含量49％的產(chǎn)品。實施例22將含水31.0％的濕酒糟(wdg)加水調(diào)節(jié)水分含量至80％，使用膠體磨(magiclab，ika公司)粉碎(磨盤間隙約30μm)，打入酶解和分離系統(tǒng)：物料首先進(jìn)入第一酶解罐，在ph3.5、30℃下加入所含淀粉重量5wt％的α淀粉酶(liquozymescds，諾維信酶制劑有限公司)、3wt％的糖化酶(spirizymeultra，諾維信酶制劑有限公司)、2wt％的普魯蘭酶(promozymed2諾維信酶制劑有限公司)、10％復(fù)合淀粉酶(novozymens50013，諾維信酶制劑有限公司)、2mm鎂離子和2mm鈣離子反應(yīng)1小時；而后調(diào)節(jié)ph至5.6并在50℃下加入所含纖維重量10％的復(fù)合纖維水解酶(gc518，杰能科生物工程有限公司)反應(yīng)5小時；將物料打入第二酶解罐，在ph8、20℃下添加所含蛋白重量0.03wt％的中性蛋白酶(sukaprone，蘇柯漢生物工程股份有限公司)和20mm巰基乙醇反應(yīng)5小時，再調(diào)節(jié)ph至10維持0.2小時。使用1μm孔徑濾膜過濾得到第一透過液和截留液，調(diào)節(jié)截留液水分至80％，打入第三酶解罐，調(diào)節(jié)ph至10、55℃后添加物料所含蛋白重量0.02wt％的堿性蛋白酶(2709，龐博生物工程有限公司)保溫0.5小時，而后通過20μm的濾網(wǎng)得到第二濾液和截留液，將濾液脫水干燥后得到蛋白干基含量為94.8％的玉米醇溶蛋白產(chǎn)品，蛋白中的醇溶蛋白含量大于93.7％，其中含81.1％的α-醇溶蛋白、17.6％的β-醇溶蛋白和1.3％的γ-醇溶蛋白，脂肪和灰分干基含量分別為2.48％和0.70％。另外，第二截留液干燥后得到蛋白干基含量55％的產(chǎn)品。對比例將含水9.0％的干酒糟(ddg)使用氣流粉碎機(jī)(fqs15型，上海致凱粉體機(jī)械制造有限公司)粉碎粒徑至約100μm后加入70％乙醇和3.5％的氫氧化鈉溶液在70℃提取30min。其中，乙醇溶液占料液總重的83％。而后使用離心機(jī)(allegra30r，美國貝克曼庫爾特有限公司)分離出清液(2000g，10min)，將清液使用孔徑為1微米的濾膜過濾，濾液再通過截留分子量為10kda的濾膜進(jìn)行濃縮后在真空干燥箱(dzf-6210，上海一恒科學(xué)儀器有限公司)中干燥后粉碎為150目的蛋白干基含量為86.4％的產(chǎn)品。表2：實施例17-22的產(chǎn)品組成粒徑分析粒徑的測定采用英國malverninstrument公司的mastersizer3000激光粒度儀測試，測試采用水為介質(zhì)，取一定量的產(chǎn)品于介質(zhì)中，機(jī)械攪拌使其充分分散在介質(zhì)里，粒度儀測定可給出平均粒徑。醇溶蛋白產(chǎn)品顏色的測定取150目的使用實施例17-22和對比例方法制備的醇溶蛋白樣品以及市售的醇溶蛋白樣品(蛋白干基含量89％，購于珠海市榮寧貿(mào)易有限公司)。在色差儀(cr2400，日本柯尼卡美能達(dá)色差儀)上記錄粉體表面顏色的l(亮度值)、a(紅度值)和b(黃度值)值。由下表3可見，與市售的和對比例方法制備的醇溶蛋白樣品相比，實施例17-22中的醇溶蛋白產(chǎn)品的黃度值(b)有明顯降低，最少可降低約20％，最大可降低約78％。說明本發(fā)明工藝還具有很好的脫色效果。本發(fā)明產(chǎn)品作為配料對原有應(yīng)用體系(如食品或藥品)顏色的影響更低。表3：lab顏色測定結(jié)果醇溶蛋白產(chǎn)氣味感官評定取實施例17-22和對比例方法制備的醇溶蛋白樣品以及市售的醇溶蛋白樣品(蛋白干基含量89％，購于珠海市榮寧貿(mào)易有限公司)各25g。在室溫20～22℃，相對濕度保持在55％—65％左右。樣品在黃色光源照射下，進(jìn)行玉米醇溶蛋白特征氣味評測。按照氣味強(qiáng)度分為7檔，分別為1-沒有，2-基本沒有，3-較為不明顯，4-一般，5-較為明顯，6-明顯，7-非常明顯。測試人數(shù)為25人。結(jié)果為平均值取整。由下表4可見，實施例17-22中的醇溶蛋白產(chǎn)品的特征性氣味均為一般(4)到基本沒有(2)之間，工藝本身兼具脫臭的效果。本發(fā)明產(chǎn)品作為配料對原有應(yīng)用體系(如食品或藥品)氣味的影響更低。表4：氣味感官評定結(jié)果醇溶蛋白產(chǎn)品成膜性能比較取實施例17-22中樣品、對比例方法制備的醇溶蛋白樣品以及市售的醇溶蛋白樣品進(jìn)行對比試驗。稱取一定量的上述醇溶蛋白樣品，加入75％乙醇溶液，配制成10wt％蛋白質(zhì)溶液，攪拌混合均勻，濾紙或濾膜過濾后，分別加入20％甘油和聚乙二醇-400(與蛋白質(zhì)量比)，攪拌20min，放入80℃恒溫水浴加熱攪拌15min后取出，將一定體積的蛋白成膜液注入成膜托盤，50℃空氣加熱干燥成膜，2h后揭膜，在45％相對濕度和室溫環(huán)境中平衡24h后測定機(jī)械性能。將質(zhì)地均一的玉米醇溶蛋白膜裁成15mm×50mm的尺寸，參照gb/t6672—2001方法測定其厚度.在蛋白膜樣品上對稱選取5個點(diǎn)測量厚度，取平均值。膜的機(jī)械性能用質(zhì)構(gòu)儀(ta-xt2i，英國stablemicrosystems公司)測定.測定時拉伸速度為1mm/s，膜的有效測定長度是80mm?？估瓘?qiáng)度(ts)為拉伸過程中膜斷裂時單位橫截面上的力，計算公式如下：式中：ts為抗拉強(qiáng)度，mpa；f為最大拉力(n)；δ為膜的厚度(mm)，mm；w為膜樣品的寬度(w＝15mm)。由圖5可見，與市售樣品相比，實施例17-22中的醇溶蛋白產(chǎn)品同樣均具有直接成膜性。蛋白膜的抗拉強(qiáng)度與樣品中醇溶蛋白含量呈線性關(guān)系，擬合良好(r2＝0.8766)。同等醇溶蛋白含量下，本發(fā)明的樣品(如實施例22)蛋白膜的抗拉強(qiáng)度還會略優(yōu)于參比的市售玉米醇溶蛋白制成的膜。醇溶蛋白微球穩(wěn)定性比較為比較實施例17-22中樣品所含醇溶蛋白的微囊穩(wěn)定性，將除實施例18以外的實施例樣品中的一個(如實施例17)和對比例樣品再使用80％的乙醇溶液在65℃提取30min，得到醇溶蛋白干基含量大于85％的樣品。將實施例2的樣品、市售樣品(蛋白干基含量89％，購于珠海市榮寧貿(mào)易有限公司)連同新制備的實施例17、實施例19-22、對比例樣品一起，分別取適量溶解于體積分?jǐn)?shù)為80％的乙醇溶液中，制備出醇溶蛋白乙醇溶液，質(zhì)量分?jǐn)?shù)控制為3％。在高速攪拌速率為12000rpm下，將上述zein乙醇溶液注入適量的高純水中，通過膜分離控制最終體系的醇溶蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1％得到醇溶蛋白微球溶液。經(jīng)過減壓低溫蒸發(fā)使該溶液中醇溶蛋白質(zhì)量為3％左右。將該微球溶液至于刻度容器中并在冷藏條件(4℃)下保存，儲存期間記錄發(fā)生明顯聚沉?xí)r間(即沉淀層體積大于總?cè)芤后w積的5％)。由下表5可見，本發(fā)明的醇溶蛋白產(chǎn)品(實施例18)或從產(chǎn)品中再次提取的二次醇溶蛋白產(chǎn)品(實施例17)制備的微球溶液具有良好的穩(wěn)定性。同時與現(xiàn)有一次溶劑提取工藝(即直接從原料中使用乙醇或其他有機(jī)溶劑提取)所制備的醇溶蛋白產(chǎn)品(如對比例和市售產(chǎn)品)相比，具有更長的穩(wěn)定時間。表5：微球穩(wěn)定性實施例17實施例18對比例市售玉米醇溶蛋白聚沉?xí)r間(天)1121059092考慮到示例性的方法和設(shè)備，參照各圖的流程圖將更好地理解可根據(jù)本公開的主體實施的方法，但為了簡化解釋的目的，以一系列框圖顯示和描述方法，應(yīng)當(dāng)并且可以理解，因為一些框圖可能會與所描繪和敘述的不同的順序發(fā)生和/或與其他框圖同時發(fā)生，要求保護(hù)的主題不被框圖的順序所限制。此外，并不是所有說明的框圖都是在實施方法中所需的。當(dāng)前第1頁12當(dāng)前第1頁12