本發(fā)明屬于生物技術(shù)發(fā)酵領(lǐng)域，具體涉及一種以飼用酶協(xié)同凝結(jié)芽孢桿菌生產(chǎn)高效蛋白飼料的方法。
背景技術(shù)：
：動(dòng)物對(duì)大分子蛋白的吸收明顯沒有對(duì)小分子多肽和氨基酸的吸收好,同時(shí)植物性蛋白原料存在有多種抗?fàn)I養(yǎng)因子,如脲酶、胰蛋白酶抑制劑、植酸、凝集素、脂肪氧化酶和大豆抗原蛋白等，影響營(yíng)養(yǎng)成分的消化、吸收和代謝，對(duì)動(dòng)物體的健康和生產(chǎn)性能產(chǎn)生不良影響，從而制約了植物蛋白在禽蓄飼養(yǎng)中更有效的應(yīng)用。目前生產(chǎn)高效生物蛋白飼料的方法主要包括蛋白酶酶解和微生物降解。采用酶解蛋白飼料具有許多物理、化學(xué)改性無可比擬的優(yōu)點(diǎn)，首先它可以在不降低營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的前提下改善蛋白質(zhì)的功能特性。酶解蛋白產(chǎn)物主要是肽而不是氨基酸，如小肽鐵、抗菌肽、免疫增強(qiáng)肽等等，這些肽類物質(zhì)的消化率經(jīng)實(shí)踐證明，比氨基酸的消化吸收更快更好更完全，從而顯著增加了豆粕的消化利用率，并可保護(hù)維生素效價(jià)。其次酶反應(yīng)的條件溫和，效率高，不產(chǎn)生消旋作用，也不破壞氨基酸。但是酶解豆粕存在一系列的限制因素，首先蛋白質(zhì)水解過程中若沒有微生物的參與改造，所產(chǎn)生的小肽類很多帶有苦味，適口性不佳，尤其是大規(guī)模生產(chǎn)中，降低和脫除水解過程中的苦味和臭味需要很高的成本。其次固體酶解飼料蛋白，酶量添加量大，生產(chǎn)成本高。乳酸菌固體發(fā)酵蛋白飼料原料,可在發(fā)酵過程中增加蛋白質(zhì)的消化率、提高游離氨基酸的含量,從而改善豆粕營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,同時(shí),絕大多數(shù)乳酸菌能調(diào)節(jié)動(dòng)物腸道功能紊亂和維系內(nèi)源微生態(tài)平衡。然而傳統(tǒng)的乳酸菌不能生成芽孢,對(duì)高溫、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿及膽鹽的耐受性較差，經(jīng)制粒、膨化等加工過程制備成微生態(tài)飼料并飼喂動(dòng)物后能到達(dá)腸道的活菌數(shù)相對(duì)較少。凝結(jié)芽孢桿菌屬于硬壁門腸道乳酸菌,是一類可產(chǎn)芽孢的特殊乳酸菌。除了具有傳統(tǒng)乳酸菌可調(diào)節(jié)動(dòng)物腸道健康、提高消化能力和提高免疫力等作用外，其芽孢狀態(tài)對(duì)環(huán)境具有相當(dāng)?shù)目鼓嫘?對(duì)高溫、胃酸和膽鹽都有一定的耐受能力。1992年該菌種被美國(guó)食品與藥品管理局(fda)和美國(guó)飼料控制官員協(xié)會(huì)列入可用于飼料的安全菌株名單中。近年來，利用微生物發(fā)酵法和酶解法去除豆粕中的抗?fàn)I養(yǎng)因子及抑制劑，提高豆粕的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值方面的研究比較深，也取得了一些較好的成果。但是在利用菌、酶協(xié)同作用，提高植物蛋白(豆粕為主)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值及利用率的研究報(bào)道較少。飼用酶協(xié)同凝結(jié)芽孢桿菌生產(chǎn)高效蛋白飼料的方法，目前未見有關(guān)報(bào)道。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：為了克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)與不足，本發(fā)明的目的在于提供一種一種以飼用酶協(xié)同凝結(jié)芽孢桿菌生產(chǎn)高效蛋白飼料的方法。具體是一種凝結(jié)芽孢桿菌協(xié)同飼用復(fù)合酶生產(chǎn)高效蛋白飼料的方法。本發(fā)明利用凝結(jié)芽孢桿菌(bacilluscoagulans)為飼用芽孢乳酸菌，除了具有傳統(tǒng)乳酸菌可調(diào)節(jié)動(dòng)物腸道健康、提高消化能力和提高免疫力等作用外，其芽孢狀態(tài)對(duì)環(huán)境具有相當(dāng)?shù)目鼓嫘裕瑢?duì)高溫、胃酸和膽鹽都有一定的耐受能力，通過生物發(fā)酵植物蛋白原料，提高飼料干燥后的有機(jī)酸和芽孢乳酸菌數(shù)。同時(shí)本發(fā)明利用復(fù)合蛋白酶在酶解法生產(chǎn)的飼用肽，其肽含量和可溶性蛋白含量高，產(chǎn)品的營(yíng)養(yǎng)性好，免疫活性強(qiáng)。利用凝結(jié)芽孢桿菌發(fā)酵過程將酶解產(chǎn)生的苦味肽基團(tuán)進(jìn)行重新組合與修飾，飼料苦味進(jìn)一步降低。本發(fā)明把微生物發(fā)酵生產(chǎn)和酶解過程有機(jī)地結(jié)合在一起，降低了生產(chǎn)成本，提高飼料的利用率和飼料品質(zhì)。本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：一種以飼用酶協(xié)同凝結(jié)芽孢桿菌生產(chǎn)高效蛋白飼料的方法，包含如下步驟：各組分按質(zhì)量百分比計(jì)：(1)制備凝結(jié)芽孢桿菌種子液；(2)凝結(jié)芽孢桿菌液體培養(yǎng)：液體培養(yǎng)基配方：酵母粉：15～30g/l，蛋白胨：0～10g/l，氯化鈉：1～5g/l，麥芽糖：6～10g/l，淀粉：10～20g/l，硫酸鎂：0.8～1.2g/l，硫酸錳：0.1～0.3g/l，磷酸氫二鈉：1～5g/l，磷酸二氫鈉：0～5g/l，初始ph值：6.8～7.4；培養(yǎng)時(shí)發(fā)酵罐裝液量20～60％，種子液量1～3％，轉(zhuǎn)速120～200r/min，通氣量0.5～0.7m3/h，35～39℃培養(yǎng)15～20h；(3)凝結(jié)芽孢桿菌固態(tài)培養(yǎng)：物料與步驟(2)得到菌液按照1：0.8～1：1.2攪拌均勻，裝入滅菌罐中，封口，36～42℃培養(yǎng)2～3天；所述的物料為豆粕：麩皮＝1:9；(4)將步驟(3)所得培養(yǎng)料0.4～1.0％、堿性蛋白酶(≥80u/mg)不低于0.2％、中性蛋白酶(≥70u/mg)不低于0.4％、酸性蛋白酶(≥150u/mg)不低于0.08％、料水比為1：0.6～1：1，均勻混合，得到豆粕混合物；所述的料水比中的料為豆粕：麩皮＝9.8：0.2～9.4：0.6；(5)將步驟(4)中得到的豆粕混合物直接裝填在發(fā)酵罐中發(fā)酵，密封防止水分散發(fā)；(6)密封好后進(jìn)行協(xié)同37～42℃酶解發(fā)酵，發(fā)酵時(shí)間3～5天；(7)得到的酶解發(fā)酵好的發(fā)酵豆粕，可直接飼喂畜禽。(8)按照步驟(7)所得發(fā)酵豆粕，在50～60℃條件下烘干至水分含量為10％，即得高效蛋白飼料。為了更好地實(shí)現(xiàn)本發(fā)明，步驟(1)中所述的凝結(jié)芽孢桿菌種子液，通過如下步驟制備得到：挑取凝結(jié)芽孢桿菌斜面1環(huán)，接種到裝有l(wèi)b液體培養(yǎng)基中，搖床37℃，180r/min培養(yǎng)6h，制成凝結(jié)芽孢桿菌種子液。步驟(1)中所述的凝結(jié)芽孢桿菌優(yōu)選為凝結(jié)芽孢桿菌gim1.646、凝結(jié)芽孢桿菌gim1.421、凝結(jié)芽孢桿菌gw1.0042或凝結(jié)芽孢桿菌活菌片等；更優(yōu)選為凝結(jié)芽孢桿菌gim1.646、凝結(jié)芽孢桿菌gim1.421或凝結(jié)芽孢桿菌gw1.0042。步驟(1)中所述的培養(yǎng)的溫度優(yōu)選為37℃；步驟(2)中所述的培養(yǎng)的溫度優(yōu)選為37℃；步驟(2)中所述的液體培養(yǎng)基配方：酵母粉：25g/l，蛋白胨：5g/l，氯化鈉：2g/l，麥芽糖：6g/l，淀粉：20g/l，硫酸鎂：1.2g/l，硫酸錳：0.3g/l，磷酸氫二鈉：3g/l，磷酸二氫鈉：5g/l，初始ph值：7.2；步驟(2)中所述的發(fā)酵罐裝液量60％，種子液接種量1％，轉(zhuǎn)速120r/min，空氣流量0.6m2/h，37℃培養(yǎng)15h；步驟(3)中所述的物料與菌液按照1：1，攪拌均勻，裝入滅菌罐中，封口，37℃培養(yǎng)3天；步驟(4)考慮經(jīng)濟(jì)成本及成品品質(zhì)，選擇固體培養(yǎng)料0.8％、堿性蛋白酶(80u/mg)0.2％、中性蛋白酶(70u/mg)0.4％、酸性蛋白酶(150u/mg)0.08％、料(豆粕：麩皮＝9.6：0.4)水比：1：0.8；步驟(6)中所述的發(fā)酵溫度39℃，發(fā)酵時(shí)間4天；步驟(8)中所述的在55℃條件下烘干至水分含量為10％。一種高效蛋白飼料，是通過上述制備方法得到；所述的干燥后高效蛋白飼料形成較濃郁的酸香味；ph在3.2～4.5，有機(jī)酸含量2.8％以上；酸溶性蛋白較發(fā)酵前提高6.5倍以上，可溶性蛋白質(zhì)相對(duì)分子量在500以內(nèi)占60％以上；尿素酶活性低于0.073u/g，棉子糖含量低于0.42％，水蘇糖低于0.035％；凝結(jié)芽孢乳酸菌數(shù)達(dá)5×109cfu/g以上。本發(fā)明的機(jī)理是：在密閉環(huán)境中，溫度及初始培養(yǎng)ph值適宜條件下，初期蛋白生料中需氧菌利用有限氧氣競(jìng)爭(zhēng)性生長(zhǎng)，氧氣消耗后，霉菌及耗氧細(xì)菌無法生長(zhǎng)。凝結(jié)芽孢桿菌有效利用堿性和中性蛋白酶解植物蛋白原料(豆粕)產(chǎn)生的酸溶性蛋白和氨基酸態(tài)氮和無氧環(huán)境成為優(yōu)勢(shì)菌，大量繁殖和產(chǎn)生有機(jī)酸(乳酸為主)，ph降低，抑制其他雜菌生長(zhǎng)的同時(shí)，提供酸性蛋白酶酶解環(huán)境，協(xié)同組合和修飾苦味肽和提供酸溶性蛋白含量，提高干燥飼料的芽孢乳酸菌和蛋白質(zhì)量。本發(fā)明相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)，具有如下的優(yōu)點(diǎn)及效果：(1)凝結(jié)芽孢桿菌是一種孢子型乳酸菌，具有一般乳酸菌因其有穩(wěn)定好、抗逆性強(qiáng)、復(fù)活率高、代謝旺盛等特點(diǎn)。能夠產(chǎn)生細(xì)菌素、有機(jī)酸和過氧化氫等物質(zhì)抑制生料中致病菌生長(zhǎng)，減少胺類有害物質(zhì)的產(chǎn)生。(2)凝結(jié)芽孢桿菌產(chǎn)生的芽孢具有較強(qiáng)的抗逆性，飼料干燥過程，有效保存活菌數(shù)，動(dòng)物攝入機(jī)體，能提高機(jī)體免疫和抗病能力，減少腸道疾病的發(fā)生，提高動(dòng)物的健康水平。(3)堿性蛋白酶和中性蛋白酶酶解產(chǎn)生酸溶性蛋白，促進(jìn)凝結(jié)芽孢桿菌的生長(zhǎng)。凝集芽孢桿菌產(chǎn)酸，ph降低，提供酸性蛋白酶酶解環(huán)境，提高蛋白質(zhì)水解程度。可溶性蛋白質(zhì)相對(duì)分子量在500以內(nèi)占60％以上，避開大豆多肽苦味最強(qiáng)的相對(duì)分子量500～1000d的區(qū)域。(4)菌酶協(xié)同處理豆粕，無需對(duì)豆粕進(jìn)行滅菌處理，整個(gè)過程兼性厭氧和厭氧發(fā)酵，能耗小，干物質(zhì)損失低。本發(fā)明的工藝流程操作簡(jiǎn)便，既適合養(yǎng)殖場(chǎng)直接生產(chǎn)投喂，也適合飼料廠規(guī)?；a(chǎn)，同時(shí)，原料成本低，適合工業(yè)化生產(chǎn)。(5)本發(fā)明的發(fā)酵豆粕在發(fā)酵過程中產(chǎn)生大量有機(jī)酸以及有益菌，有較強(qiáng)的酸香味，適口性強(qiáng)。ph在3.2～4.5，有機(jī)酸含量2.8％以上；酸溶性蛋白較發(fā)酵前提高6.5倍以上，可溶性蛋白質(zhì)相對(duì)分子量在500以內(nèi)占60％以上；尿素酶活性低于0.073u/g，棉籽糖含量低于0.42％，水蘇糖低于0.035％；凝結(jié)芽孢乳酸菌芽孢數(shù)達(dá)2.0×109cfu/g以上。具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。實(shí)施例1按如下步驟實(shí)施：下述組分均按質(zhì)量百分比計(jì)(1)不同來源凝結(jié)芽孢桿菌種子液制備：挑取凝結(jié)芽孢桿菌斜面1環(huán)，接種到裝有100mllb液體培養(yǎng)基中250ml三角瓶中，搖床37℃，180r/min培養(yǎng)6h，制成種子液；(2)凝結(jié)芽孢桿菌液體培養(yǎng)：培養(yǎng)基配方：酵母粉：15g/l，氯化鈉：5g/l，麥芽糖：8g/l，淀粉：15g/l，硫酸鎂：0.8g/l，硫酸錳：0.2g/l，磷酸氫二鈉：1g/l，磷酸二氫鈉：3g/l，初始ph值：7.4。培養(yǎng)時(shí)發(fā)酵罐裝液量40％，種子液量3％，轉(zhuǎn)速160r/min，通氣量0.6m3/h，培養(yǎng)35℃培養(yǎng)18h；(3)凝結(jié)芽孢桿菌固態(tài)培養(yǎng)：物料(豆粕：麩皮＝1:9)與步驟(2)得到菌液按照1：0.8攪拌均勻，裝入滅菌罐中，封口，42℃培養(yǎng)2天；(4)將步驟(3)所得固體培養(yǎng)料0.4％、堿性蛋白酶(80u/mg)0.2％、中性蛋白酶(70u/mg)0.4％、酸性蛋白酶(150u/mg)0.08％、料(豆粕：麩皮＝9.8：0.2)水比：1：0.6，均勻混合，得到豆粕混合物；(5)將步驟(4)中得到的豆粕混合物直接裝填在發(fā)酵罐中發(fā)酵，密封防止水分散發(fā)；(6)密封好后進(jìn)行37℃協(xié)同酶解發(fā)酵，發(fā)酵時(shí)間5天。得到發(fā)酵好的發(fā)酵豆粕，可以直接作為飼料成品直接使用。得到的發(fā)酵豆粕干燥前作為飼料成品時(shí)的測(cè)量結(jié)果見表1。其中，酸溶性蛋白的含量依據(jù)qb/t2653-2004方法，有機(jī)酸是通過gb/t5009.39-2003方法測(cè)得，乳酸菌菌數(shù)含量依據(jù)gb4789.35-2010方法測(cè)得。得到的發(fā)酵豆粕干燥前作為飼料成品時(shí)的測(cè)量結(jié)果見表1。表1干燥前飼料成品的測(cè)量結(jié)果表1中所述凝結(jié)芽孢桿菌gim1.646、凝結(jié)芽孢桿菌gim1.421，由廣東省微生物菌種保藏中心購(gòu)買。表1中所述凝結(jié)芽孢桿菌gw1.0042，由廣州市微生物研究所菌種庫購(gòu)買。表1中所述的凝結(jié)芽孢桿菌活菌片是市售產(chǎn)品。產(chǎn)品名稱：爽舒寶(國(guó)藥準(zhǔn)字s20050032)。實(shí)施例2按如下步驟實(shí)施：下述組分均按質(zhì)量百分比計(jì)(1)凝結(jié)芽孢桿菌(凝結(jié)芽孢桿菌gim1.646)種子液制備：挑取凝結(jié)芽孢桿菌斜面1環(huán)，接種到裝有100mllb液體培養(yǎng)基中250ml三角瓶中，搖床37℃，180r/min培養(yǎng)6h，制成種子液；(2)凝結(jié)芽孢桿菌液體培養(yǎng)：培養(yǎng)基配方：酵母粉：30g/l，蛋白胨：10g/l，氯化鈉：1g/l，磷酸氫二鈉：5g/l，麥芽糖、淀粉、硫酸鎂、硫酸錳含量設(shè)計(jì)試驗(yàn)(見表2)，初始ph值：6.8。培養(yǎng)時(shí)發(fā)酵罐裝液量20％，種子液量2％，轉(zhuǎn)速200r/min，通氣量0.6m3/h，培養(yǎng)39℃培養(yǎng)20h；表2麥芽糖、淀粉、硫酸鎂、硫酸錳含量設(shè)計(jì)試驗(yàn)試驗(yàn)編號(hào)a麥芽糖(g/l)b淀粉(g/l)c硫酸鎂(g/l)d硫酸錳(g/l)11(6)1(10)1(0.8)1(0.1)21(6)2(15)2(1.0)2(0.2)31(6)3(20)3(1.2)3(0.3)42(8)1(10)2(1.0)3(0.3)52(8)2(15)3(1.2)1(0.1)62(8)3(20)1(0.8)2(0.2)73(10)1(10)3(1.2)2(0.2)83(10)2(15)1(0.8)3(0.3)93(10)3(20)2(1.0)1(0.1)(3)凝結(jié)芽孢桿菌固態(tài)培養(yǎng)：物料(豆粕：麩皮＝1:9)與步驟(2)得到菌液按照1：1.2攪拌均勻，裝入滅菌罐中，封口，36℃培養(yǎng)3天；(4)將步驟(3)所得培養(yǎng)料1.0％、堿性蛋白酶(80u/mg)0.2％、中性蛋白酶(70u/mg)0.4％、酸性蛋白酶(150u/mg)0.08％、料(豆粕：麩皮＝9.4：0.6)水比：1：1，均勻混合，得到豆粕混合物；(5)將步驟(4)中得到的豆粕混合物直接裝填在發(fā)酵罐中發(fā)酵，密封防止水分散發(fā)；(6)密封好后進(jìn)行協(xié)同42℃酶解發(fā)酵，發(fā)酵時(shí)間3天；(7)得到的酶解發(fā)酵好的發(fā)酵豆粕，可直接飼喂畜禽。(8)按照步驟(7)所得發(fā)酵豆粕，在60℃條件下烘干至水分含量為10％。即得高效蛋白飼料。得到的發(fā)酵豆粕干燥后作為飼料成品時(shí)的測(cè)量結(jié)果見表3。有機(jī)酸測(cè)量見實(shí)施例1。芽孢菌數(shù)測(cè)量方法參考gb4789.2-2010，其中樣品處理方法改為取25g樣品置于225ml生理鹽水煮沸15min。酸溶性蛋白提高倍數(shù)＝發(fā)酵后酸溶性蛋白/發(fā)酵前酸溶性蛋白，酸溶性蛋白測(cè)量方法見實(shí)施例1。尿素酶活性降低＝(發(fā)酵前尿素酶活性-發(fā)酵后尿素酶活性)/發(fā)酵前尿素酶活性×100％，尿素酶活性是通過gb/t8622-2006測(cè)得。表3干燥后飼料成品的測(cè)量結(jié)果實(shí)施例3按如下步驟實(shí)施：下述組分均按質(zhì)量百分比計(jì)(1)凝結(jié)芽孢桿菌(凝結(jié)芽孢桿菌gim1.646)種子液制備：挑取凝結(jié)芽孢桿菌斜面1環(huán)，接種到裝有100mllb液體培養(yǎng)基中250ml三角瓶中，搖床37℃，180r/min培養(yǎng)6h，制成種子液；(2)凝結(jié)芽孢桿菌液體培養(yǎng)：培養(yǎng)基配方：酵母粉：25g/l，蛋白胨：5g/l，氯化鈉：2g/l，麥芽糖：6g/l，淀粉：20g/l，硫酸鎂：1.2g/l，硫酸錳：0.3g/l，磷酸氫二鈉：3g/l，磷酸二氫鈉：5g/l，初始ph值：7.2。培養(yǎng)時(shí)發(fā)酵罐裝液量60％，種子液量1％，轉(zhuǎn)速120r/min，通氣量0.6m3/h，培養(yǎng)37℃培養(yǎng)15h；(3)凝結(jié)芽孢桿菌固態(tài)培養(yǎng)：物料(豆粕：麩皮＝1:9)與步驟(2)得到菌液按照1：1攪拌均勻，裝入滅菌罐中，封口，37℃培養(yǎng)3天；(4)將步驟(3)所得培養(yǎng)料0.8％、堿性蛋白酶(80u/mg)0.2％、中性蛋白酶(70u/mg)0.4％、酸性蛋白酶(150u/mg)0.08％、料(豆粕：麩皮＝9.6：0.4)水比：1：0.8，均勻混合，得到豆粕混合物；(5)將步驟(4)中得到的豆粕混合物直接裝填在發(fā)酵罐中發(fā)酵，密封防止水分散發(fā)；(6)密封好后進(jìn)行協(xié)同39℃酶解發(fā)酵，發(fā)酵時(shí)間3，4，5天；(7)得到的酶解發(fā)酵好的發(fā)酵豆粕，可直接飼喂畜禽。(8)按照步驟(7)所得發(fā)酵豆粕，在55℃條件下烘干至水分含量為10％。即得高效蛋白飼料。得到的發(fā)酵豆粕干燥后作為飼料成品時(shí)的測(cè)量結(jié)果見表4、表5。有機(jī)酸測(cè)量見實(shí)施例1。凝結(jié)芽孢桿菌芽孢數(shù)測(cè)量方法、酸溶性蛋白提高倍數(shù)見實(shí)施例2。尿素酶活性是通過gb/t8622-2006測(cè)得。棉籽糖、水蘇糖、可溶性蛋白質(zhì)相對(duì)分子量分布圖是通過gpc-sec法測(cè)得。表4二次發(fā)酵不同天數(shù)干燥前飼料成品的測(cè)量結(jié)果表5可溶性蛋白質(zhì)相對(duì)分子量分布圖應(yīng)用實(shí)施例1本發(fā)明發(fā)酵豆粕的應(yīng)用：進(jìn)行大豬喂養(yǎng)生長(zhǎng)性能試驗(yàn)。豬舍的溫度與濕度：試驗(yàn)期間于每天10:00、14:00測(cè)定豬舍的溫度與濕度，取其平均值作為豬舍當(dāng)天的溫度與濕度；經(jīng)測(cè)定，試驗(yàn)期間豬舍內(nèi)平均溫度為30.52±2.03℃、平均濕度為69.21±2.53％。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：體重約60kg的杜×長(zhǎng)×大雜交閹公豬100頭；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組：將100頭豬隨機(jī)分為對(duì)照組和試驗(yàn)組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10頭豬，每個(gè)重復(fù)為1欄，單欄面積為4.5m×5.0m。飼料：對(duì)照組飼喂常規(guī)日糧，添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)4％生長(zhǎng)豬復(fù)合預(yù)混料，所用日糧采用玉米-豆粕型，參照nrc(1998)豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制；試驗(yàn)組生物發(fā)酵料35％，玉米33％，糠麩或雜糧12％，豆粕或豆餅16％，生豬預(yù)混料4，生物發(fā)酵料是由實(shí)施例3制備得到的高效蛋白飼料。生長(zhǎng)豬復(fù)合預(yù)混料購(gòu)買自北京農(nóng)大利生物技術(shù)有限公司，其他市場(chǎng)購(gòu)置。每天早晚各投喂1次，直到停止采食；喂養(yǎng)期為30天；試驗(yàn)動(dòng)物按欄飼養(yǎng)，自由飲水，其他飼養(yǎng)管理按常規(guī)進(jìn)行。喂養(yǎng)期結(jié)束后，測(cè)定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生長(zhǎng)性能指標(biāo)。測(cè)定方法如下：生長(zhǎng)性能指標(biāo)測(cè)定：在試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)禁食1夜，對(duì)逐頭動(dòng)物稱重量，每個(gè)重復(fù)的飼料采食量單獨(dú)記錄，計(jì)算日增重量、日采食量、料重比。實(shí)驗(yàn)結(jié)果，見表6。表6發(fā)酵飼料對(duì)大豬生產(chǎn)性能的影響p<0.01，表明差異極顯著；p<0.05，表明差異顯著；p>0.05，表明差異不顯著。應(yīng)用實(shí)施例2本發(fā)明發(fā)酵豆粕的應(yīng)用：將其直接投喂，進(jìn)行肉雞喂養(yǎng)試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：aa商品肉雞苗，1000只。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組：將1000只雞隨機(jī)分為對(duì)照組和試驗(yàn)組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)100只雞，每個(gè)重復(fù)為1欄。飼料：試驗(yàn)組飼喂配方：玉米55.3％，豆粕38％，磷酸氫鈣1.4％，石粉1％，食鹽0.3％，油3％，添加劑1％。生物發(fā)酵料按照總量的4％添加。生物發(fā)酵料是由實(shí)施例3制備得到的高效蛋白飼料。對(duì)照組和試驗(yàn)組營(yíng)養(yǎng)成分相同，飼養(yǎng)管理方式相同。喂養(yǎng)期為55天，喂養(yǎng)期結(jié)束后，測(cè)定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生長(zhǎng)性能指標(biāo)。見表7。表7發(fā)酵豆粕對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響組別平均每只質(zhì)量(kg)料肉比成活率(％)對(duì)照組2.082.5794.1試驗(yàn)組2.432.1497.2本發(fā)明制備的高效蛋白飼料直接喂養(yǎng)雞后，毛色光亮，身體狀況較好，而對(duì)照組的毛色明顯較差。飼養(yǎng)過程中飼料的轉(zhuǎn)化率較高，減少了疾病的發(fā)生，具有較高的成活率。上述實(shí)施例為本發(fā)明較佳的實(shí)施方式，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不受上述實(shí)施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡(jiǎn)化，均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。當(dāng)前第1頁12