專利名稱:有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)抗氧化能力的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種可有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的 組合物，尤其涉及有效改善已降低的肝功能、保護(hù)和治療因過(guò)飲或慢性酒精攝取而引起的 肝損傷、降低酒后血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力，從而防止肝疾病并改善肝功能的 組合物。所述組合物包括短乳桿菌HY7401 (Lactobacillus brevis HY7401)、發(fā)酵乳桿菌 CS332 (Lactobaci 1 lus fermentum CS332)、嗜酸性乳桿菌 CSG (Lactobaci 1 lusacidophi lus CSG)、長(zhǎng)雙歧桿菌 HY8001 (Bifidobacterium longum HY8001)、赤楊提取物(alder tree extract)、夏枯草提取物(Selfheal extract)、水飛薊提取物(milk thistle extract)、生 豆-米糠發(fā)酵提取物、蘿卜汁(turnipextract)、西紅柿提取物、花椰菜提取物(broccoli extract)、菠蘿提取物、初乳粉末、甜菜堿以及維生素Bp B2、B3、B6、B9、B12、C和E。
背景技術(shù)：
氧是地球上含量最多的元素，占所有元素的(53.8% )，干燥空氣中的21%是氧 氣。氧氣被多數(shù)動(dòng)物吸收后轉(zhuǎn)化成能量。氧氣雖然是人類維持生存所必不可少的元素，但 也會(huì)對(duì)生命造成致命毒性。氧的Janus樣的性質(zhì)由氧的分子狀態(tài)所決定。最穩(wěn)定的基態(tài) 三線態(tài)氧的氧分子才對(duì)維持生命起作用。但當(dāng)處于穩(wěn)定狀態(tài)的氧分子因?yàn)槭艿襟w內(nèi)酶系、 還原代謝、化學(xué)藥品、污染物及光化學(xué)反應(yīng)等各種物理、化學(xué)及環(huán)境因素的影響而轉(zhuǎn)換成高 反應(yīng)性自由基的反應(yīng)性氧(R0S)，諸如超氧化物自由基(02‘)、羥基自由基(H0‘)、過(guò)氧化氫 (H202)及單線態(tài)氧O02)之類時(shí)，會(huì)使體內(nèi)引起嚴(yán)重疾病。例如，R0S可以和構(gòu)成細(xì)胞的物 質(zhì)如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、糖及DNA核酸等進(jìn)行反應(yīng)并破壞細(xì)胞中的這些物質(zhì)，成為引起老化和各 種疾病，包括腦中風(fēng)及帕金森病等的腦疾病，心臟病、缺血、動(dòng)脈硬化等的心血管疾病，皮膚 病損傷，炎癥，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎及自免疫疾病等各種疾病的原因。脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)所生成的 體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化物也會(huì)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行氧化破壞并引起各種功能障礙，導(dǎo)致老化之類的各種疾 病。尤其是當(dāng)攝取藥物、毒物或酒精等氧化性物質(zhì)時(shí)，會(huì)引起體內(nèi)發(fā)生氧化反應(yīng)，導(dǎo)致對(duì)肝 臟的損壞，嚴(yán)重時(shí)達(dá)到肝硬化的程度。
肝臟是人體內(nèi)最大的器官，在代謝中起著重要作用。肝在體內(nèi)的幾個(gè)功能包括解 毒、儲(chǔ)存肝糖和合成血漿蛋白。血液中包含了各種重要的蛋白質(zhì)，而其中的90%左右是在 肝內(nèi)生成的。肝還具有解毒作用并擔(dān)任免疫器官的角色。進(jìn)入人體的各種藥物和有害物質(zhì) 在肝內(nèi)被轉(zhuǎn)換成破壞性較低的物質(zhì)后，通過(guò)尿或膽汁排出體外。肝內(nèi)具有稱為枯否氏細(xì)胞 (kupffer cell)的巨噬細(xì)胞，該細(xì)胞可以清除血液中的任何微粒狀污染物，如細(xì)菌、毒素及 異物。
由于肝具有前述各種重要功能，因此肝功能受到較重的傷害時(shí)將衍生出各種問(wèn) 題。然而肝的再生力也非常強(qiáng)大，切除了 75%的肝，4-6個(gè)月后就能恢復(fù)原來(lái)的大小和功 能。
肝病根據(jù)致病原因可分為由病毒感染引起的病毒性肝病、由過(guò)度攝取酒精而引起的酒精性肝病、由藥物引起的毒性肝病，由脂肪積累而引起的脂肪肝、由人體免疫系統(tǒng)異常 而引起的自身免疫性肝病、以及由毒性物質(zhì)積累過(guò)多而引起的代謝性肝病等。
最普遍的慢性肝病之一是由B型肝炎病毒導(dǎo)致的肝炎，C型則呈增加趨勢(shì)。此外， 雖然病例比病毒性肝病少，但是近來(lái)由于常年飲酒而引起的酒精性肝病增加了很多。
從臨床及病理學(xué)觀點(diǎn)來(lái)說(shuō)，酒精性肝病可以分為脂肪肝、酒精性肝炎及酒精性肝 硬化癥等。在常年飲酒的人中有90-100 %的人會(huì)得酒精性脂肪肝，10-35 %的人得酒精性肝 炎，8-20 %的人得酒精性肝硬化癥。
酒精主要在由消化道器官吸收，被吸收到體內(nèi)的酒精中有10%會(huì)通過(guò)肺、尿及汗 排出體外，其余的90%在肝里進(jìn)行代謝。通過(guò)血液進(jìn)入肝臟的酒精，被肝臟生成的各種酶， 諸如醇脫氫酶、微粒體乙醇氧化系統(tǒng)、過(guò)氧化氫酶(Alcohol Dehydrogenase, Microsomal ethanol oxidizing system, Catalase)等氧化成乙醛，乙醛再被酶氧化成對(duì)人體無(wú)害的醋 酸。酒精也能被腸里的眾多微生物氧化成乙醛。最近的研究結(jié)果表明，腸內(nèi)乳酸菌可以把 乙醇轉(zhuǎn)換成乙醛，再把乙醛轉(zhuǎn)換成醋酸，不僅可以抑制對(duì)酒精和乙醛的吸收處理，還可以保 護(hù)肝臟。由于并不是所有的乳酸菌都具有這種功能，因此開發(fā)出具有這種能阻止吸收乙醇 和乙醛，并保護(hù)肝臟功能的乳酸菌變得很重要了。開發(fā)這種乳酸菌時(shí)需要注意的是，這些乳 酸菌應(yīng)該在人體的腸內(nèi)容易寄生并增殖。由于乳酸菌具有宿主特異性，因此針對(duì)人體的乳 酸菌必須來(lái)源于人體才能在人體里存活并發(fā)揮應(yīng)有的效果。
作為酒精氧化后生成的代謝產(chǎn)物，乙醛是反應(yīng)性很強(qiáng)的毒性物質(zhì)，與蛋白質(zhì)結(jié)合 后可以降低酶活性、增加脂質(zhì)過(guò)氧化作用而損傷線粒體、降低谷胱甘肽量、減少吡多辛、維 生素A、鋅及硒等物的數(shù)量，是妨礙微管蛋白聚合并對(duì)蛋白質(zhì)的分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)起著抑制作用而 使肝受損的主要致病因子。乙醛生成的自由基可以促進(jìn)肝的膠原蛋白合成，而這是慢性酒 精攝取者引起肝纖維化(肝硬化)的原因之一。
為了解決前述的眾多問(wèn)題，人們已經(jīng)開發(fā)出包括酒精代謝抑制劑、酒精代謝促進(jìn) 劑及或醇脫氫酶的護(hù)肝產(chǎn)品或組合物，例如韓國(guó)專利號(hào)0178696公開了可以護(hù)肝及治療肝 病的醫(yī)藥物組合物，韓國(guó)專利公開號(hào)2001-0050333公開了可以解除宿醉并改善肝功能的 生藥飲料及其制造方法，韓國(guó)專利0345798公開了使用枳犋、赤楊及葛的提取物混合物制 造的防宿醉功能性食品及其制造方法，韓國(guó)專利公開號(hào)2002-0021980公開了酒精代謝促 進(jìn)催化劑和肝障礙改善劑，韓國(guó)專利公開號(hào)2002-0004193公開了含有酒精吸收抑制劑的 防宿醉和護(hù)肝的組合物，韓國(guó)專利公開號(hào)2003-0005127公開了以枳犋和赤楊的提取物為 主要成分的保健食品(health food)，此外還公開了很多專利。
韓國(guó)專利號(hào)0403720公開了從枳犋嫩枝分離出來(lái)的具有解除肝毒性、防宿醉及消 除疲勞功能的低級(jí)醇的不溶性提取組分(fraction)、從該提取物中獲得的多糖物質(zhì)及含有 該提取物的組合物。韓國(guó)專利號(hào)0403721公開了從枳犋分離出來(lái)的具有解除肝毒性及防宿 醉功能的低級(jí)醇的不溶性提取組分、從該提取物組分中獲得的多糖物質(zhì)及含有所述提取物 組分的組合物。韓國(guó)專利號(hào)0403722公開了含有從枳犋木質(zhì)部分離出來(lái)且具有護(hù)肝活性的 低級(jí)醇的不溶性提取物及從它分離出來(lái)的多糖物質(zhì)和含有所述提取物的組合物。韓國(guó)專利 公開號(hào)2004-0052930公開了防宿醉劑以及含有該防宿醉劑的組合物為有效成分的防宿醉 劑等。然而前述專利主要用于解除了因飲酒過(guò)度而引起的宿醉，不是以預(yù)防為主的護(hù)肝及 改善肝功能為改善物質(zhì)預(yù)防手段。[0012]截止目前，并沒(méi)有公開基于短乳桿菌HY7401、發(fā)酵乳桿菌CS332、嗜酸性乳桿菌CSG、長(zhǎng)雙歧桿菌HY8001、赤楊提取物、夏枯草提取物、水飛薊提取物、生豆-米糠發(fā) 酵提取物、蘿卜汁(turnip extract)、西紅柿提取物、花椰菜提取物、菠蘿提取物、初乳 粉末、甜菜堿、維生素B1, B2, B3, B6, B9, B12、C和E的組合物，該組合物具有促進(jìn)肝臟功能 (hepatostimulant)、保肝作用及促進(jìn)肝細(xì)胞的再生功能(h印atogenerativeactivity)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種能有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗 氧化能力的組合物。
本發(fā)明的另一目的在于提供一種可有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體 內(nèi)抗氧化能力的包含該組合物為有效成分的發(fā)酵乳食品。
本發(fā)明的另一目的在于提供一種可有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體 內(nèi)抗氧化能力的包含該組合物為有效成分的飲料食品。
本發(fā)明的另一目的在于提供一種可有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體 內(nèi)抗氧化能力的包含該組合物為有效成分的保健食品。
為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種可有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及 加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物，該組合物包括短乳桿菌HY7401、發(fā)酵乳桿菌CS332、嗜酸性 乳桿菌CSG、長(zhǎng)雙歧桿菌HY8001、赤楊提取物、夏枯草提取物、水飛薊提取物、生豆-米糠發(fā) 酵提取物、蘿卜汁、西紅柿提取物、花椰菜提取物、菠蘿提取物、初乳粉末、甜菜堿、維生素 B1, B2, B3, B6, B9, B12、C 禾口 E0
本發(fā)明的一個(gè)方案提供了一種包含下述可有效改善肝功能、降低血液酒精濃度 及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物為有效成分的發(fā)酵乳食品，所述組合物包括短乳桿菌 HY7401、發(fā)酵乳桿菌CS332、嗜酸性乳桿菌CSG、長(zhǎng)雙歧桿菌HY8001、赤楊提取物、夏枯草提 取物、水飛薊提取物、生豆-米糠發(fā)酵提取物、蘿卜汁、西紅柿提取物、花椰菜提取物、菠蘿 提取物、初乳粉末、甜菜堿、維生素B1, B2, B3, B6, B9, B12, C和E0
本發(fā)明的另一方案提供了一種包含下述可有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及 加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物為有效成分的功能飲料，所述組合物包括短乳桿菌HY7401、 發(fā)酵乳桿菌CS332、嗜酸性乳桿菌CSG、長(zhǎng)雙歧桿菌HY8001、赤楊提取物、夏枯草提取物、水 飛薊提取物、生豆-米糠發(fā)酵提取物、蘿卜汁、西紅柿提取物、花椰菜提取物、菠蘿提取物、 初乳粉末、甜菜堿、維生素B1, B2, B3, B6, B9, B12, C和E。
本發(fā)明的方案提供了一種包含下述可有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng) 體內(nèi)抗氧化能力的組合物為有效成分的保健食品，所述組合物包括短乳桿菌HY7401、發(fā)酵 乳進(jìn)一步桿菌CS332、嗜酸性乳桿菌CSG、長(zhǎng)雙歧桿菌HY8001、赤楊提取物、夏枯草提取物、 水飛薊提取物、生豆-米糠發(fā)酵提取物、蘿卜汁、西紅柿提取物、花椰菜提取物、菠蘿提取 物、初乳粉末、甜菜堿、維生素B1, B2, B3, B6, B9, B12, C和E0


參照下述附圖可更好地理解本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施方式的應(yīng)用，其中類似和相應(yīng)部分采 用類似附圖標(biāo)記，其中[0022]圖1是本發(fā)明組合物使試驗(yàn)動(dòng)物血液酒精濃度下降的曲線圖。
圖2a是本發(fā)明組合物使慢性攝取酒精的試驗(yàn)動(dòng)物AST水平下降的曲線圖。
圖2b是本發(fā)明組合物使慢性攝取酒精的試驗(yàn)動(dòng)物ALT水平下降的曲線圖。
圖3a是本發(fā)明組合物刺激慢性攝取酒精的試驗(yàn)動(dòng)物的GSH S_轉(zhuǎn)移酶活性的曲線 圖。
圖3b是本發(fā)明組合物通過(guò)使慢性攝取酒精的試驗(yàn)動(dòng)物的超氧化物歧化酶(SOD) 失活而增進(jìn)抗氧化能力的曲線圖。
圖3c是本發(fā)明組合物抑制慢性攝取酒精的試驗(yàn)動(dòng)物的肝細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化的曲 線圖。
圖4是本發(fā)明組合物使試驗(yàn)動(dòng)物的醇脫氫酶活性增進(jìn)的曲線圖。
圖5a是本發(fā)明組合物使人體內(nèi)AST水平下降的曲線圖。
圖5b是本發(fā)明組合物使人體內(nèi)ALT水平下降的曲線圖。
圖5c是本發(fā)明組合物使人體內(nèi)Y-GTP水平下降的曲線圖。
圖6a是本發(fā)明組合物使人體內(nèi)血液酒精濃度(第一次試驗(yàn))下降的曲線圖。
圖6b是本發(fā)明組合物使人體內(nèi)血液酒精濃度(第二次試驗(yàn))下降的曲線圖。
圖7a是本發(fā)明組合物使人體內(nèi)總抗氧化水平(TAS)增進(jìn)的效果曲線圖。
圖7b是本發(fā)明組合物使人體內(nèi)TBARS (硫代巴比妥酸反應(yīng)物質(zhì))水平下降的曲線 圖。
發(fā)明詳述
本發(fā)明涉及一種能有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的 組合物，該組合物包括短乳桿菌HY7401、發(fā)酵乳桿菌CS332、嗜酸性乳桿菌CSG、長(zhǎng)雙歧桿菌 HY8001、赤楊提取物、夏枯草提取物、水飛薊提取物、生豆-米糠發(fā)酵提取物、蘿卜汁、西紅 柿提取物、花椰菜提取物、菠蘿提取物、初乳粉末、甜菜堿、維生素B” B2，B3，B6，B9，B12、C和
E0
有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物中所包含的 短乳桿菌HY7401(韓國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)?0-2003-0077488，保藏機(jī)構(gòu)韓國(guó)農(nóng)業(yè)生命工學(xué)研究 院(National Institute of AgriculturalBiotechnology, Korea),保藏號(hào)KACC91069, 保藏日2003年10月06日)菌株是從韓國(guó)健康成人的糞便里分離出來(lái)的。該菌株的酒精 (乙醇)脫氫酶和乙醛脫氫酶的活性很高，可以將腸所攝取的酒精(乙醇)轉(zhuǎn)換成乙醛，進(jìn) 而轉(zhuǎn)化成乙酸。由于該菌株可將腸內(nèi)通過(guò)酒精(乙醇)生成的對(duì)肝有損傷的乙醛轉(zhuǎn)換成對(duì) 肝無(wú)毒的乙酸，從而可有效阻止酒精(乙醇)被吸收到肝臟中，由此可阻止因酒精過(guò)度代謝 而引起的肝功能障礙、酒精性肝病及腸疾病等疾病的發(fā)生。
有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物中所包含的 發(fā)酵乳桿菌CS332(韓國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)?0-2004-0098717，保藏機(jī)構(gòu)韓國(guó)農(nóng)業(yè)生命工學(xué)研究 院，保藏號(hào)KACC91138，保藏日2004年10月26日)也參與小腸酒精(乙醇)代謝，從而降 低血液中的酒精和乙醛含量。因此，該菌可將小腸中的酒精氧化成無(wú)毒形式，從而抑制小腸 對(duì)酒精的吸收，進(jìn)而避免過(guò)量酒精進(jìn)入肝臟進(jìn)行分解。(Yang, ff. Y.，Ahn Y. T.，Lim, K. S.， Huh, C. S. ,Baek, Y. J. , and Kim,H. S. 2004. Ethanol metabolismby probiotic lactic acid bacteria in vivo. Proceeding of 2004J0INT ANNUALMEETING. American Dairy ScienceAssociation, American Society ofAnimal Science, Poultry Science Association, p. 384)。
有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物中所包含 的嗜酸性乳桿菌CSG和長(zhǎng)雙歧桿菌HY8001 (韓國(guó)專利號(hào)142615)可以抑制肝毒性物質(zhì)四 氯化碳對(duì)鼠肝的損傷，肝酶(AST和ALT)水平下降效果優(yōu)于市售肝臟藥。(韓松爾(HAN， Song E)、許哲成(HUH，Cheol Sung)、金東賢(KIM，Tong Hyun), Hepatoprotective effect of lactic acid bacteria, inhibitor of β -glucuronidase production against intestinal bacteria. ThePharmaceutical Society of Korea,Fall Academic Symposium Proceeding. 2004 (大韓唷學(xué)會(huì)秋季學(xué)術(shù)大會(huì))2004)。
有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物中所包含的赤楊提取物、夏枯草提取物、水飛薊提取物、生豆_米糠發(fā)酵提取物及蘿卜汁的混合物具有 保護(hù)肝臟并分解酒精的活性(命名為Y-MIX，韓國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)?0-2004-0072213)，并具有 如下效果。
赤楊(Alnus japonica Steud.)是屬于樺木科的落葉高樹，生長(zhǎng)在亞洲。據(jù)文獻(xiàn) 報(bào)道只有長(zhǎng)在韓國(guó)的赤楊才能解除酒毒并保護(hù)肝臟。該樹的提取物中的主要成分有丹寧酸 (tannin)、蒲公英賽醇(taraxerol)，一種三萜系化合物、樺木酸(betulinic acid)和精油 (essential oil)。赤楊被認(rèn)為是對(duì)肝炎、肝硬化及脂肪肝等各種肝病具有治療作用的草藥。
夏枯草(Prunellavulgaris var. Iilacina Nakai)是在夏季果樹枯萎了一半 時(shí)進(jìn)行采集的，曬干后可作為藥材使用。該草藥用于治療慢性腫瘤、天花、急性乳腺炎 及結(jié)核性淋巴腺病變等疾病。主要成分包括諸如齊墩果酸、熊果酸等的皂苷類和胡羅
卜素、維生素C、維生素K、丹寧酸、咖啡酸以及綠原酸等[韓國(guó)有用植物資源研究縱覽， 韓國(guó)化學(xué)研究所，PP.第 480-482 頁(yè)(1988) (Comprehensive bibliography on Korean Useful plant Resource, theKorea Research Institute of Chemical Technology pp.480-482(1988)])。
7jC飛薊(Silybum marianum L. Gaertn.)屬于菊禾斗(Genus SilybumAdans.),是一 年或二年生植物，源產(chǎn)地為歐洲地中海地區(qū)、北非和中東，一直被廣泛地用作藥用植物。該 植物可用于治療肝疾病肝中毒、慢性炎性肝病、病毒性肝炎和肝硬化。該植物的有效提取 物為水飛薊素(silymarin)。另一提取物水飛薊賓(silybin)可用于治療肝中毒。此外，水 飛薊的提取物還具有各種生理活性，包括可以增進(jìn)蛋白質(zhì)合成促進(jìn)肝的再生、可以抑制肝 損傷時(shí)生成的白細(xì)胞三烯(leukotriene)和引起炎癥反應(yīng)的前列腺素的生成，具有抗氧化 作用、可以預(yù)防過(guò)度飲酒酒后用于解毒的必要成分谷胱甘肽的缺乏等。
本發(fā)明所采用的生豆-米糠發(fā)酵提取物是利用咖啡原豆(green coffeebeans)和 米糠的混合物，在微生物的作用下發(fā)酵，并從發(fā)酵后的混合物中提取得到的。提取物包含了 具有抗氧化作用并能清除反應(yīng)性氧(ROS)的肌醇磷酸(inositol phosphate)和多酚，以及 氨基酸和肽。由于具有抗氧化作用以及清除毒性氧的功能，該發(fā)酵提取物有助于防止DNA 受損(致癌原因)、防止不飽和脂肪酸的過(guò)氧化、避免ACE的抑制而引起的高血壓等。
蘿卜(Brassica campestris L. var. rapifera)含有含硫化合物，含硫化合物包括 異硫氰酸鹽 / 酯(isothiocyanate)、二硫化物(disulfide)及蘿葡硫素(sulforaphane)等。蘿卜的辣味素異氰酸鹽/酯(isocyanate)在很久以前就被視為抗癌成分，在動(dòng)物試驗(yàn) 中驗(yàn)證了對(duì)食道癌、肝癌、肺癌及大腸癌的預(yù)防效果。最近在韓國(guó)進(jìn)行的動(dòng)物試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)蘿 卜汁了可以減輕肝癌和肝硬化癥狀。
有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物中所包含的 西紅柿提取物、花椰菜提取物及菠蘿提取物可以構(gòu)成抗氧化的組合物(韓國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)?10-2005-0009441)，它們的性能描述如下。
西紅棉(Lycopersicon esculentum Mill)屬于爺禾斗(Solanaceae ornightshade family)的一種植物。源產(chǎn)地是南美西部高原地帶，果實(shí)可以食用，民間用于治療高血壓、 夜盲癥及糖尿病等疾病。果實(shí)主要由95重量％的水組成，其余成分為蛋白質(zhì)0. 7重量％、 脂肪脂質(zhì)0. 1重量％、碳水化合物3.3重量％、纖維素0.4重量％及灰分0.5重量％。每 100g西紅柿果實(shí)含有胡羅卜素390 ii g、維生素C20mg、維生素B^. 05mg、維生素B20. 03mg 和維生素 、鉀、磷、錳、蘆丁及煙酸等。此外還含有蕃茄紅素、槲皮素(quercetin)、八氫蕃 茄紅素(phytoene)、六氫番茄烴(phytofluene)、環(huán)蕃茄紅素(cyclolycopene)、水楊酸鹽 (salicylates)及番茄素(tomatine)之類的生理活性物質(zhì)。尤其是，蕃茄紅素(lycopene) 的抗氧化能力大于類胡蘿卜素和維生素E，而且還具有很好的抗癌活性，西紅柿又是蕃茄紅 素的主要來(lái)源。據(jù)報(bào)道，美國(guó)人所攝取的蕃茄紅素中多達(dá)80%來(lái)自西紅柿或西紅柿加工食 品。槲皮素是一種黃酮類物質(zhì)，可以阻止雄激素受體的表達(dá)，進(jìn)而預(yù)防了前列腺癌。
花椰菜(Brass. ica oleracea var. italica Plenck) ^ cabbage family
植物，也被稱為白花菜(cauliflower)。嫩芽和嫩莖可以食用?；ㄒ耸蔷G黃色蔬菜中營(yíng) 養(yǎng)最高的作物，每100g的花椰菜含有維生素C114mg、胡羅卜素1. 9mg、鉀164mg及鈣150mg 等。鐵含量是其它蔬菜的兩倍或兩倍以上?；ㄒ烁缓S生素C，其維生素C含量是檸檬 的2倍，比土豆多7倍。此外，維生素A、維生素Bp B2和鉀、磷及鈣等礦物質(zhì)含量與菠菜差 不多?；ㄒ藘?nèi)豐富的硫配醣體(glucosinolate)具有抗癌效果活性，根據(jù)報(bào)道，對(duì)于結(jié)腸 癌的抑制效果優(yōu)于卷心菜(cabbage)。最近的研究結(jié)果揭示花椰菜硫配醣體的酶解產(chǎn)物之 一的蘿葡硫素(sulforaphane)可以選擇性地促進(jìn)體內(nèi)谷胱甘肽S_轉(zhuǎn)移酶的活性，發(fā)揮抗 癌作用。
菠蘿(Ananas comosus)是雙子葉植物，屬于order Farinales的鳳梨科多年生植 物，菠蘿之意為“和松球相似的果實(shí)”。源產(chǎn)地是中美和南美北部，果實(shí)汁多，味道酸甜，蔗糖 含量為1%、檸檬酸含量為左右。維生素A、B、C含量豐富，維生素C含量是所有果實(shí)中 最多的一個(gè)，每100g中含有60mg維生素C。菠蘿還含有稱為菠蘿蛋白酶的蛋白質(zhì)酶，可以 幫助肉類消化。菠蘿蛋白酶可以分解血液凝結(jié)蛋白纖維蛋白和纖維蛋白原，而作為抗凝血 劑。
有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物內(nèi)的甜菜堿 所發(fā)揮的作用和膽堿(choline)、葉酸及維生素B12相似。這些化合物在肝臟內(nèi)起著“甲基 供體”的作用，攜帶并提供甲基(_CH3)，幫助人體的生化作用。其中，甜菜堿的甲基供給作用 在發(fā)揮正常肝功能、肝細(xì)胞增殖和清除毒素反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。攝取酒精會(huì)降低肝細(xì)胞 臟內(nèi)甲硫氨酸合成酶的活性，無(wú)法使甲硫氨酸代謝產(chǎn)物高半胱胺氨酸甲基化。因此，導(dǎo)致肝 毒性物質(zhì)高半胱胺氨酸的積累。甜菜堿可以降低血中高半胱胺氨酸的水平，尤其對(duì)飲酒所 引起的脂肪肝癥狀的改善有效。甜菜堿含量豐富的食品有魚類、甜菜及豆科植物等。
11[0052]本發(fā)明組合物中的對(duì)于A型肝炎病毒感染具有抑制效果的初乳粉末是把通過(guò)干 燥乳牛初乳而制得，其含有大量的A型肝炎病毒抗體的免疫球蛋白(韓國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)?10-2004-0072212)。
有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物所含維生素 B 族中的硫胺素(thiamin、BD、核黃素(riboflavin、B2)、煙酸(niacin、B3)、葉酸(folic acid、B9)及鈷胺素(cobalamin、B12)等在能量代謝中起著重要作用，能把食品中的營(yíng)養(yǎng)物 質(zhì)轉(zhuǎn)化成生物能量。維生素B族有抗壓維生素的美稱，當(dāng)身體或精神疲勞時(shí)，它也是消耗最 快的營(yíng)養(yǎng)素。人類的身體為了抵抗外在壓力而需要這些維生素，當(dāng)為了抵抗外在壓力而消 耗完這些維生素時(shí)，還需要立即補(bǔ)充它們。缺乏維生素B族時(shí)，很容易引起疲勞、不安、脫發(fā) 及指甲損傷等癥狀。其中維生素B6、維生素B12及葉酸等可以發(fā)揮出近似于甜菜堿的作用， 降低血液中的毒性物質(zhì)高半胱胺酸的含量，起到保肝作用。
有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物中所包含的 維生素C是一種抗氧化的水溶性維生素，缺乏它時(shí)會(huì)引起壞血病。此外，還可以防止癌癥、 精神分裂癥、AIDS及紫癜等疾病。作為抗氧化劑，維生素C易于失去電子，可以為被氧化的 酶或化合物提供電子。很多水果和蔬菜中都含有豐富的維生素C。
有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物中所包 含的維生素E是一種脂溶性維生素，它是一種重要的抗氧化劑。通常認(rèn)為a-生育酚 (a-tocopherol)是人體內(nèi)維生素E最具活性的形式，是一種極有效的生物抗氧化劑。缺 乏維生素E時(shí)將引起生殖能力減弱、肌肉無(wú)力、中樞及末稍神經(jīng)的退化、心臟疾病的發(fā)生 心腫瘤(heart tumor)及紅血球膜脆化等疾病?；加心野岳w維癥和吸收障礙疾病諸如 Crohn’ s病的患者的脂肪吸收存在障礙，需要補(bǔ)充維生素E。不能吸收脂肪的人會(huì)將油質(zhì)隨 糞便排泄或患有慢性腹瀉癥?；加幸倚椭鞍兹睋p的患者需要補(bǔ)充維生素E。此外，當(dāng)缺乏 維生素E時(shí)，會(huì)染患異常3 -脂蛋白血癥、慢性膽汁郁積性肝病和小兒脂痢病等。
本發(fā)明中具有前述特性的短乳桿菌HY7401、發(fā)酵乳桿菌CS332、嗜酸性乳桿菌 CSG、長(zhǎng)雙歧桿菌HY8001、赤楊提取物、夏枯草提取物、水飛薊提取物、生豆-米糠發(fā)酵提取 物、蘿卜汁、西紅柿提取物、花椰菜提取物、菠蘿提取物、初乳粉末、甜菜堿、維生素Bi、B2、B3、 B6、B9、B12及維生素C和E可以各種比例混合，但是考慮到改善肝功能、降低血液酒精濃度并 以及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的藥理作用及生產(chǎn)成本等因素后，在100重量％的總組合物中， 短乳桿菌HY7401為0. 001重量％ -0. 1重量％，以0. 01重量％為較佳；發(fā)酵乳桿菌CS332為 0. 001重量％-0.1重量％，以0.01重量％為較佳；嗜酸性乳桿菌CSG為0. 001重量1 重量％，以0. 01重量％為較佳；長(zhǎng)雙歧桿菌HY8001為0. 001重量％ -0. 1重量％，以0. 01重 量％為較佳；赤楊提取物為32重量％ -36重量％，以35重量％為較佳；夏枯草提取物為38 重量％ -42重量％，以40重量％為較佳；水飛薊提取物為0. 1重量％ -0. 8重量％，以0. 5重 量％為較佳；生豆-米糠發(fā)酵提取物為1重量％ -2. 5重量％，以2重量％為較佳；蘿卜汁為 0. 1重量％ -0.2重量％，以0. 16重量％為較佳；西紅柿提取物為0.8重量％ _1.5重量％， 以1重量％為較佳；花椰菜提取物為0. 1重量％ -0. 5重量％，以0. 3重量％為較佳；菠蘿 提取物為0. 15重量％ -0. 25重量％，以0. 2重量％為較佳；初乳粉末為3. 0重量％ -4. 0 重量％，以3. 5重量％為較佳；甜菜堿為4. 5重量％ -5. 0重量％，以4. 8重量％為較佳； 復(fù)合維生素預(yù)混料為2. 0重量％ -3. 0重量％，以2. 35重量％為較佳％，以及水為3. 85重量％ -18. 24重量％，以10重量％為較佳。
此時(shí)，在100重量％的總組合物中，如果短乳桿菌HY7401、發(fā)酵乳桿菌CS332、嗜酸 性乳桿菌CSG及長(zhǎng)雙歧桿菌HY8001中每一種的含量低于0. 001重量％，就難以在人體腸內(nèi) 繁殖；如超過(guò)了 0. 1重量％，就會(huì)增加生產(chǎn)成本。因此，短乳桿菌HY7401、發(fā)酵乳桿菌CS332、 嗜酸性乳桿菌CSG及長(zhǎng)雙歧桿菌HY8001的每一種含量?jī)?yōu)選維持在 0. 001重量％ -0. 1重 量％的范圍內(nèi)。
在100重量％的總組合物中，赤楊提取物的優(yōu)選含量為32重量％ -36重量％。 如果赤楊提取物含量低于32重量％，降低血液酒精濃度的效果就會(huì)降低；如超過(guò)了 36重 量％，就會(huì)影響口味，且顏色變黑，還會(huì)增加生產(chǎn)成本。
在100重量％的總組合物中，如果夏枯草提取物含量低于38重量％，抗氧化效果 會(huì)降低；如果超過(guò)了 42重量％，就會(huì)影響口味，且顏色變黑，還會(huì)增加生產(chǎn)成本，因此夏枯 草提取物的含量?jī)?yōu)選維持在38重量％ -42重量％的范圍內(nèi)。
在100重量％的總組合物中，如果水飛薊提取物低于0. 1重量％，則肝功能改善效 果和抗氧化效果就會(huì)降低；如果超過(guò)了 0.8重量％，就會(huì)影響口味，還會(huì)增加生產(chǎn)成本，因 此水飛薊提取物含量?jī)?yōu)選維持在0. 1重量％ -0. 8重量％的范圍內(nèi)。
在100重量％的總組合物中，如果生豆_米糠發(fā)酵提取物含量低于1. 0重量％，抗 氧化效果就會(huì)降低；如果超過(guò)了 2. 5重量％，就會(huì)增加生產(chǎn)成本。因此，生豆-米糠發(fā)酵提 取物含量?jī)?yōu)選維持在1. 0重量％ -2. 5重量％的范圍內(nèi)。
在100重量％的總組合物中，蘿卜汁含量?jī)?yōu)選維持在0. 1重量％ -0. 2重量％的范 圍內(nèi)。如果蘿卜汁含量太低，就不會(huì)產(chǎn)生肝細(xì)胞的再生作用；如果太高，就會(huì)影響口味，還就 會(huì)增加生產(chǎn)成本。
在100重量％的總組合物中，如果西紅柿提取物含量低于0. 8重量％，抗氧化效果 就會(huì)降低；超過(guò)了 1.5重量％，就會(huì)增加生產(chǎn)成本。因此，西紅柿提取物的含量?jī)?yōu)選維持在 0.8重量％ -1.5重量％的范圍內(nèi)。
在100重量％的總組合物中，如果花椰菜提取物含量低于0. 1重量％，抗氧化效果 就會(huì)降低；如果超過(guò)了 0. 5重量％，就會(huì)增加生產(chǎn)成本。因此，花椰菜提取物的含量?jī)?yōu)選維 持在0. 1重量％ -0.5重量％的范圍內(nèi)。
在100重量％的總組合物中，如果菠蘿提取物的含量低于0. 15重量％，抗氧化效 果就會(huì)降低；如果超過(guò)了 0. 25重量％，就會(huì)增加生產(chǎn)成本。因此，菠蘿提取物的含量?jī)?yōu)選維 持在0. 15重量％到-0. 25重量％的范圍內(nèi)。
在100重量％的總組合物中，如果初乳粉末含量低于3. 0重量％，就會(huì)難以抑制A 型肝炎病毒的感染；如果超過(guò)了 4. 0重量％，就會(huì)增加生產(chǎn)成本。因此，初乳粉末的含量?jī)?yōu) 選維持在3. 0重量％ -4. 0重量％的范圍內(nèi)。
在100重量％的總組合物中，如果甜菜堿含量低于4. 5重量％，則損傷肝細(xì)胞的再 生能力降低；如果超過(guò)了 5. 0重量％，就會(huì)增加生產(chǎn)成本。因此，甜菜堿的含量?jī)?yōu)選維持在 4. 5重量％ -5.0重量％的范圍內(nèi)。
在100重量％的總組合物中，如果復(fù)合維生素預(yù)混料含量低于2. 0重量％，則肝細(xì) 胞毒性物質(zhì)的清除能力和抗氧化活性就會(huì)降低；如果超過(guò)了 3. 0重量％，就會(huì)影響其口味， 還會(huì)增加生產(chǎn)成本。因此，復(fù)合維生素預(yù)混料含量?jī)?yōu)選維持在2. 0重量％ -3. 0重量％的范圍內(nèi)。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明，下列實(shí)施例只是舉例說(shuō)明本發(fā)明，并 不能因此限制本發(fā)明的權(quán)利要求
范圍。
實(shí)施例1
有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物的制備
于37°C下，在含有示蛋白胨(Proteose p印tone)#3、酵母膏、牛肉膏和葡萄糖的肉 湯中培養(yǎng)短乳桿菌HY7401，培養(yǎng)約16個(gè)小時(shí)，離心培養(yǎng)基，收集細(xì)菌，用滅菌后的生理鹽水 洗滌細(xì)菌后懸浮到滅菌乳中，然后冷凍干燥，每克(g)冷凍干燥粉末可以得到約10"CfU的菌量。
發(fā)酵乳桿菌CS332的培養(yǎng)方法和前述短乳桿菌HY7401相同，每克(g)冷凍干燥粉 末可以得到約10"CfU的菌量。
嗜酸性乳桿菌CSG的培養(yǎng)方法和前述短乳桿菌HY7401相同，每公克(g)冷凍干燥 粉末可以得到約10"CfU的菌量。
在含有示蛋白胨#3、酵母膏、牛肉膏、葡萄糖和L-半胱氨酸的肉湯中培養(yǎng)長(zhǎng)雙歧 桿菌HY8001，每克(g)冷凍干燥粉末可以得到約lO^cfu的菌量。
將干燥赤楊的木質(zhì)部及樹皮100g投入1000g水中，在100°C下煎煮1-5小時(shí)，用 5 U m濾器過(guò)濾提取液，得到赤楊提取物500g。
將干燥的夏枯草50g投入1000g水中，在100°C下煎煮1_5小時(shí)，再用400目濾器 過(guò)濾提取液，得到夏枯草提取物600g。
粉末狀的水飛薊提取物是市售品(TGS，Japan)，類黃酮總含量為80重量％ -95 重量％，水飛薊賓含量為28重量％ -32重量％ ；液態(tài)的生豆-米糠發(fā)酵提取物也是市售 品(Toyo Hakko，Japan)；液態(tài)的蘿卜汁(34Brixo° 至 36Brixo° )也是市售品[KangHwa Product. Co. Ltd.((株)江華名品)]。
將西紅柿果實(shí)100g和100g水混合，用攪拌機(jī)攪碎，用棉布過(guò)濾后得到西紅柿液 125g，經(jīng)噴霧干燥后，得到西紅柿提取物4. 5g。
將半熟的花椰菜100g和水100g混合后，用攪拌機(jī)攪碎后靜置2小時(shí)，然后用棉布 過(guò)濾，得到花椰菜濾液100g，冷凍干燥后得到1. 8g的花椰菜提取物。
將冷水清洗后的菠蘿100g切成片，然后與100g水混合，再用攪拌機(jī)攪碎，用棉布 過(guò)濾后得到菠蘿提取物100g，經(jīng)噴霧干燥后，最后得到菠蘿提取物4. 5g。
初乳粉末是購(gòu)自Culture system korea公司。當(dāng)用蒸餾水稀釋50，000倍時(shí)，初 乳粉顯示的HAV(A型肝炎病毒)特異性IgG的滴度為在490nm處的光密度1-1. 7。
本發(fā)明組合物采用的市售無(wú)水甜菜堿(DANISC0，芬蘭)的純度為99重量％到100 重量％。
本發(fā)明組合物所采用的維生素是市售的復(fù)合維生素預(yù)混料(DSM，新加坡)。復(fù) 合維生素預(yù)混料包含鹽酸硫胺素諷)0.6933重量％、核黃素(B2)0. 6312重量％、煙酰 胺(B3)6. 1265重量％、吡多醇鹽酸鹽(B6)0. 9982重量％、葉酸(B9)0. 1461重量％、維生素 B120. 5065重量％、抗壞血酸鈉(維生素C)56. 4972重量％、維生素E25. 1558重量％、麥芽糊精9. 2452重量％。
按照以下含量混合組合物中的各組分，所述含量是基于有效改善肝功能、降低血 液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物的總重量而混合短乳桿菌HY7401為0. 01重 量％、發(fā)酵乳桿菌CS332為0.01重量％、嗜酸性乳桿菌CSG為0.01重量％、長(zhǎng)雙歧桿菌 HY8001為0.01重量％、赤楊提取物為35重量％、夏枯草提取物為40重量％、水飛薊提取物 為0. 5重量％、生豆-米糠發(fā)酵提取物為2重量％、蘿卜汁為0. 16重量％、西紅柿提取物為 1重量％、花椰菜提取物為0. 3重量％、菠蘿提取物為0. 2重量％、初乳粉末為3. 5重量％、 甜菜堿為4. 8重量％、復(fù)合維生素預(yù)混料為2. 5重量％以及純凈水為10重量％。
通過(guò)與常用載體或賦形劑相混合，本發(fā)明的組合物可用于制備各種功能飲料、發(fā) 酵食品及保健食品等。
實(shí)施例2
基于有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物的發(fā)酵 乳食品的制備
包括有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物以及混 合果汁露的發(fā)酵乳食品的制備如下。
首先，制備乳酸菌培養(yǎng)液。將原料奶95.36重量％和脫脂乳粉(或混合的干乳 粉)4. 6重量％混合，攪拌，得到混合物，該混合物在15°C時(shí)的比重為1. 0473 1. 0475，可 滴定酸度為 0. 200 0. 220%、pH 為 6. 65 6. 70，在 20°C下 Brix° 為 16. 3 16.5%。然 后將該混合物進(jìn)行UHT處理(在135°C下處理2秒鐘)，再冷卻到40°C。隨后接種分別為 0. 02重量％的嗜熱鏈球菌和乳糖分解酶(Valley laboratory, USA)，培養(yǎng)6小時(shí)。在BCP 培養(yǎng)基中，所獲得的乳酸菌總量為1. OX 109cfu/ml或更多，可滴定酸度為0. 89 0. 91%， pH 為 4. 55 4. 65。
混合果汁露的制造方法是在30 35°C下，攪拌中混合如下組分果糖玉米糖漿 10 15重量％、白糖3 5重量％、紅糖3 5重量％、混合果汁濃縮液(56Brix° ) 10 15重量％、果膠0. 1 1. 0重量％、鮮果混合香精(freshfruit mix essence) 0. 05 0. 15 重量％以及純凈水58. 85 73. 85重量％，對(duì)得到的混合物進(jìn)行UHT處理(在135°C下處理 2秒鐘)，然后冷卻。
將乳酸菌培養(yǎng)液35 50重量％、有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi) 抗氧化能力的組合物5. 5 7. 0重量％、以及混合果汁露43. 0 59. 5重量％進(jìn)行混合，在 150bar的壓力下進(jìn)行均質(zhì)化，然后冷卻到10°C或10°C以下，就制成了有效改善肝功能、降 低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的發(fā)酵乳食品。
實(shí)施例3
基于有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物的功能 飲料的制備
包括有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物以及混 合果汁露的功能飲料的制備如下。
混合果汁露的制造方法是在30 35°C下，攪拌中混合如下組分果糖玉米糖漿 10 15重量％、白糖3 5重量％、紅糖3 5重量％、混合果汁濃縮液(56Brix° ) 10 15重量％、果膠0. 1 1. 0重量％、鮮果混合香精0. 05 0. 15重量％以及純凈水58. 85 73. 85重量％，對(duì)得到的混合物進(jìn)行UHT處理(在135°C下處理2秒鐘)，然后冷卻。
將混合果汁露43. 0 59. 5重量％、有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體 內(nèi)抗氧化能力的組合物5. 5 7. 0重量％、以及純凈水33. 5 51. 5重量％混合，并且在 150bar的壓力下進(jìn)行均質(zhì)化，然后冷卻到10°C或10°C以下。將所得溶液用玻璃瓶及塑料瓶 等容器進(jìn)行包裝。
實(shí)施例4
基于有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物的保健 食品的制備
本發(fā)明的有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物可 以單獨(dú)制成制劑或與藥學(xué)上可接受的賦形劑或載體聯(lián)合制成片劑、膠囊等制劑。
以前述組合物為基礎(chǔ)，如下制備有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi) 抗氧化能力的保健食品。
在65°C下對(duì)本發(fā)明的有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力 的組合物進(jìn)行巴氏滅菌15分鐘，之后冷卻，然后分成預(yù)定數(shù)量后，立即凍干、粉碎成粉，封 裝成銷售產(chǎn)品。
試驗(yàn)例1 血液酒精含量的降低
本發(fā)明試驗(yàn)例所使用的試驗(yàn)動(dòng)物是出生5周的Sprague-DawleyGD)系雄性大鼠 (Daehan Biolink Co.，Ltd.)。進(jìn)行試驗(yàn)之前，先在室溫25士 1°C、相對(duì)濕度50士5%的條件 下，用固形飼料(CJ Co.)飼養(yǎng)該大鼠一周。
通過(guò)給予本發(fā)明有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組 合物，利用以下動(dòng)物試驗(yàn)確定血液酒精含量下降的效果。
本發(fā)明的有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物以 5ml/kg B.W. 口服給藥2周，對(duì)照組給予磷酸鹽緩沖生理鹽水(PBS) 5ml/kg B.W.，口服給 藥2周。各組分別有5只試驗(yàn)動(dòng)物。在試驗(yàn)的第15天，分別為對(duì)照組投入磷酸緩沖鹽溶 液5ml/kg B.W.，為組合物組投入本發(fā)明的有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi) 抗氧化能力的組合物5ml/kg B. ff.，30分鐘后，以4g/kg B. ff.的劑量，分別對(duì)試驗(yàn)組和對(duì) 照組口服給予22%酒精溶液。給予酒精一定時(shí)間后，用類肝素處理的毛細(xì)管從尾靜脈抽取 100 u L的血液。向血液中加入1ml 二氯甲烷(Sigma)，并強(qiáng)烈攪拌。處理少量無(wú)水硫酸鈉 處理以除去水分，過(guò)濾，分析血液中的酒精含量。以固定的時(shí)間間隔，采集給予酒精后的血 液。通過(guò)氣相色譜法(Hewlett Packard HP6890, GC)測(cè)量血液中的酒精含量。氣相色譜 儀上配有氫火焰離子化檢測(cè)器(FID)，利用自動(dòng)進(jìn)樣器(HP G1512A)注入血樣，流動(dòng)相為氮 氣，氣相色譜柱是DB-Wax(30mX0. 25mmX0. 15 u m ;Agilent) 定量分析時(shí)的條件為注射 器溫度為200°C，柱溫采取程序升溫，以10°C /min的速度從55°C升至70°C，在55°C時(shí)保持 2分鐘，在70°C保持4分鐘。內(nèi)標(biāo)物為乙酸乙酯。
圖1示出了試驗(yàn)結(jié)果。如圖1所示，本發(fā)明的有效改善肝功能、降低血液酒精濃度 及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物與對(duì)照組相比具有優(yōu)異的降低血液酒精的能力。
試驗(yàn)例2 組合物對(duì)慢性酒精攝取時(shí)的護(hù)肝效果
將之前飼養(yǎng)了 1周的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分成對(duì)照組、酒精組、以及組合物組，每組有6只大 鼠。對(duì)照組和酒精組都口服給予PBS (5ml/kg B. W.) 2周，組合物組則口服給予本發(fā)明的有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物(5ml/kg B. W.)，同時(shí)對(duì)酒 精組和組合物組都給予22%的酒精溶液(3g/kg B. W.)。在試驗(yàn)的第14天最后給藥后，所 有組的試驗(yàn)動(dòng)物都禁食24小時(shí)。在乙醚麻醉下沿腹部正中線切腹后，從腹部大動(dòng)脈抽血， 直至出血死亡。通過(guò)血液分析儀(Prime，BioSED)測(cè)量血樣中的AST (天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶)和 ALT (丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶)水平，測(cè)量結(jié)果分別示于圖2a和圖2b中。
圖2a和圖2b清楚地顯示，給予了有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi) 抗氧化能力的組合物的組合物組與酒精組相比，AST及ALT水平明顯降低，說(shuō)明有效改善肝 功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物具有對(duì)抗酒精的護(hù)肝效果。
試驗(yàn)例3 通過(guò)肝組織內(nèi)GSH S-轉(zhuǎn)移酶活性的增加以及SOD活性的降低表示抗氧 化能力增強(qiáng)的組合物的抗氧化效果試驗(yàn)依照前述試驗(yàn)例2的方式給藥后，然后使大鼠流血致死。使用4°C生理鹽水灌注死 亡的試驗(yàn)動(dòng)物的肝臟，以清除殘余血液，然后摘除肝臟。將預(yù)定尺寸的肝組織加入4倍體積 的0. 25M蔗糖溶液(含0. 5mM EDTA)中，然后在冰浴中，用玻璃和聚四氟乙烯勻質(zhì)器進(jìn)行均 化。在600Xg下離心均質(zhì)液10分鐘，去除核及未磨碎的細(xì)胞器官。然后在10，OOOXg下離心 20分鐘，去除線粒體部分。然后，在105，OOOXg下超離心1小時(shí)，得到上清液(胞質(zhì)部分)。 利用該胞質(zhì)部分檢測(cè)谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GSH S-轉(zhuǎn)移酶)和超氧化物歧化酶(SOD)的活 性。利用蛋白檢測(cè)試劑盒(Protein assay kit, Bio-rad)檢測(cè)胞質(zhì)部分的蛋白質(zhì)含量，來(lái) 檢測(cè)酶的活性。
GSH S-轉(zhuǎn)移酶的活性檢測(cè)如下將10 μ L胞質(zhì)部分和0. IM PBS (ρΗ6. 5)2. 935ml、 0. 12M2-4CNDB (1-氯-2，4- 二硝基苯)25 μ L及0. IM還原型谷胱甘肽30 μ L加以混合，在 25°C溫度下，以20秒為間隔，在340nm監(jiān)測(cè)一個(gè)3分鐘反應(yīng)。用2，4- 二硝基苯-谷胱甘 肽的分子吸光系數(shù)(E mM/340nm = 9. emM^cm"1)表示每毫克(mg)酶蛋白在1分鐘內(nèi)所生 成的2，4_ 二硝基苯-谷胱甘肽的量，依此定義酶活性[Habig et al. J. Biol. Chem. 249 7130-7139(1985)]。比較對(duì)照組和組合物的GSH S-轉(zhuǎn)移酶活性，得出酶活性增加的百分率 (%)，結(jié)果示于圖3a中。
如圖3a所示，給予酒精時(shí)，與肝的解毒作用有關(guān)的谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶(GSH S-轉(zhuǎn)移 酶)活性增加了，酒精組增加到113%，組合物組增加到122%，因此，給予組合物進(jìn)一步增 強(qiáng)了肝組織內(nèi)抗氧化酶的活性。
超氧化物歧化酶(SOD)的活性測(cè)量如下將50mM的Tris鹽酸緩沖液(IOmM EDTA, PH8. 6) 2. 8ml和15mM的焦掊酸0. Iml的混合物在5°C下預(yù)培養(yǎng)5分鐘，然后向其中加入胞質(zhì) 部分0. Iml0使所得的3. Oml溶液在25°C下反應(yīng)10分鐘，然后加入IN鹽酸0. Iml結(jié)束反 應(yīng)。在440nm測(cè)量吸光率的變化。一個(gè)單位(unit)的酶活性定義為能夠抑制不存在SOD 時(shí)15mM焦掊酸溶液發(fā)生自動(dòng)氧化的50%的SOD的量(U/mg蛋白)[Marklund andMarklund. Eur. J. Biochem. 47 :469_474 (1974)]。將對(duì)照組、酒精組以及組合物組的測(cè)量結(jié)果進(jìn)行比 較，結(jié)果顯示于圖3b。
如圖3b所示，對(duì)照組的酶活性為3. 6U/mg,組合物組為3. 9U/mg,都遠(yuǎn)低于酒精組 (5. 2U/mg)。表明組合物促進(jìn)了肝組織內(nèi)的抗氧化能力，降低了肝細(xì)胞內(nèi)過(guò)氧化物的水平。
肝組織內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化物減少的試驗(yàn)
在肝均質(zhì)液0. Iml中加入8. 十二烷基硫酸鈉(SDS) 0. 2ml、20 %醋酸緩沖液(pH3. 5) 1. 5ml及0. 8%硫代巴比妥酸溶液1. 5ml，再加入蒸餾水至溶液為4ml。使所得溶液 在95°C下反應(yīng)1小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后冷卻到室溫，然后加入蒸餾水Iml和丁醇吡啶(15 1) 混合液5ml。在4，OOOrpm離心10分鐘后，在532nm處測(cè)量吸光率。以1，1，3，3-四乙氧基 丙烷作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)該標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算丙二醛(MDA)的濃度(nmol MDA/g 肝臟)[Okawa et al.，Anal. Biochemistry. 95 :35_41 (1979)]。圖 3c 顯示了對(duì)照組、酒精 組以及組合物組的MDA濃度(nmol/g)。如圖3c所示，組合物組的MDA濃度(nmol/g)低于酒精組，這表示組合物組中肝組 織內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化物的生成得到了比酒精組更好的抑制。
試驗(yàn)例4 組合物對(duì)體內(nèi)酒精代謝的促進(jìn)
對(duì)前述試驗(yàn)例3中所制鼠肝的胞質(zhì)部分中的醇脫氫酶活性進(jìn)行測(cè)定。在含有 2. 5mM煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)的0. IM甘氨酸緩沖液(pH9. 6)中加入乙醇使最終濃 度成為25mM后，加入100 μ L的胞質(zhì)部分，然后在25V的溫育水浴中開始反應(yīng)。反應(yīng)結(jié)束 后，使用分光光度儀在25°C、340nm處測(cè)量吸光率，對(duì)還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH) 進(jìn)行定量分析。醇脫氫酶活性則根據(jù)胞質(zhì)部分的蛋白質(zhì)(mg)及每反應(yīng)時(shí)間生成的還原型 煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的量進(jìn)行計(jì)算[Nosova et al.，Alcohol&Alcoholism. 35 561-568(2000)]。圖4顯示了對(duì)照組、酒精組以及組合物組的醇脫氫酶活性。
如圖4所示，組合物組的醇脫氫酶活性高于酒精組，證實(shí)了組合物組可以增進(jìn)肝 的酒精代謝功能。
試驗(yàn)例5 組合物對(duì)人體肝功能的改善效果
對(duì)18歲至60歲的志愿者進(jìn)行身體功能測(cè)試，以選擇身體條件滿足并接受本試驗(yàn) 的個(gè)體。
經(jīng)過(guò)醫(yī)療檢查和詳細(xì)的肝功能檢驗(yàn)，在AST為50或高于50(IU/L)，ALT為45或高 于45(IU/L)或Y-GTP為80或高于80 (IU/L)，感染了肝炎病毒(B或C)或沒(méi)有感染的人群 中最終選擇了 60名受試者進(jìn)行改善肝功能的實(shí)驗(yàn)。
肝功能改善效果的試驗(yàn)如下。
將進(jìn)行肝功能改善效果試驗(yàn)的60名受試者分成安慰劑組、陽(yáng)性對(duì)照組及組合 物組。安慰劑組、陽(yáng)性對(duì)照組及組合物組分別在8星期內(nèi)每天服用兩次(早、晚)各自 的試料(150ml)。將選擇最終受試者時(shí)檢查的肝功能指標(biāo)(0星期)、給藥4周后及8周 后分別空腹抽取血液后檢查的肝功能指標(biāo)進(jìn)行比較，確定肝功能的改善效果。2，500rpm 下，將3ml全血離心10分鐘，分離出血清后，使用生化自動(dòng)分析儀(Hitachi7600-110， 7170automaticanalyzer)測(cè)量血清中的肝功能指標(biāo)，指標(biāo)包括AST、ALT及γ -GTP ( Y -谷 氨酸轉(zhuǎn)肽酶)。
適用于試驗(yàn)例5的試料如下提供給各試驗(yàn)組的所有試料一律包裝在完全相同的 容器中，冷藏，然后送達(dá)各研究實(shí)驗(yàn)室。每個(gè)試驗(yàn)組試料都在研究負(fù)責(zé)人的管理下直接提 供給受試者。試料外表相同，受試者無(wú)法區(qū)別它們。在制備安慰劑時(shí)，將前述組合物所包 含的相同混合果汁濃縮液和高果糖玉米糖漿添加到純凈水中，在135°C下殺菌2秒鐘，以 使安慰劑與組合物的口味相近。至于陽(yáng)性對(duì)照(肝功能改善劑)，是通過(guò)將一瓶安慰劑與 18.9ml Carduus marinus ext.懸浮液混合而制得(100ml 混懸液中含有 Carduus marinus ext. 1. 38g) 0[0129]使用SPSS/WIN12. 0程序?qū)υ囼?yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。利用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)比較 胃yMitiI的f衣頁(yè)的肖· (the mean scores on a dependentvariable) (寸t 檢驗(yàn)比較兩個(gè)變量的平均值。計(jì)算每例的兩個(gè)變量的差異。用單因素方差分析(One-way AN0VA)檢驗(yàn)一次采用的變量表示的三個(gè)或多個(gè)均數(shù)是否相等。Bonferroni調(diào)整是用于統(tǒng) 計(jì)后的分析。對(duì)于重復(fù)測(cè)試的數(shù)據(jù)，重復(fù)使用AN0VA，用Bonferroni法調(diào)整分析后的組間差
已 升。
本發(fā)明組合物的人體肝功能改善效果的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析數(shù)據(jù)示于圖5a、5b和5c中。其 中，圖5a中，a，b 表示各組內(nèi)不同字母之間有顯著差異(p<0.05)；圖5b中，a，b，c 表示各 組內(nèi)不同字母之間有顯著差異(P<0. 05)；圖5c中，a，b 表示各組內(nèi)不同字母之間有顯著差 異(ρ<0· 05)。
如圖5a、5b及5c所示，組合物組的肝功能指標(biāo)(AST，ALT，y -GTP)的水平降低了。 尤其是AST水平(O周至8周的AST水平)被降低至市售肝臟藥所達(dá)到的80%左右。
試驗(yàn)例6 組合物對(duì)人體血液酒精濃度的降低效果
測(cè)試人體內(nèi)酒精代謝能力的受試者是沒(méi)有先天性或慢性疾病，內(nèi)科檢查結(jié)果無(wú)疾 病癥狀，且血清學(xué)檢驗(yàn)、血清化學(xué)檢驗(yàn)及尿檢驗(yàn)等臨床檢查結(jié)果被認(rèn)為合格的人。體內(nèi)酒精 代謝試驗(yàn)采取交叉試驗(yàn)方式，以隨機(jī)方式把受試者26人分成安慰劑組-組合物組和組合物 組_安慰劑組。在安慰劑組_組合物組中，13名受試者服用安慰劑2周，間歇3周后，再服 用可以有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物2周；在組合 物組_安慰劑組中，13名受試者服用組合物2周，間歇3周后，再服用安慰劑2周。
安慰劑組_組合物組、組合物組_安慰劑組分別在2周內(nèi)每天服用兩次(早、晚) 各自的試料(150ml)。為了比較分析服用了安慰劑或組合物后的降低血液酒精濃度的效 果差異，在服用試料之前和服用2周之后立刻分別空腹抽取血液一次并分析血液酒精濃 度。第一次試驗(yàn)后，讓受試者休息3周，然后用同一方法但更換角色的方式進(jìn)行了第二次試 驗(yàn)。在第一和第二次試驗(yàn)過(guò)程中，為了比較酒精代謝的效果，在第一次及第二次試驗(yàn)的最 后一天，所有的受試者在一分鐘內(nèi)服用成分相同的酒精飲料(50ml，40% vol)，為了查看每 個(gè)人的血液酒精濃度變化，在臨服用酒精之前至服用4小時(shí)的期間抽血8次(O分鐘、20分 鐘、40分鐘、60分鐘、90分鐘、120分鐘、180分鐘、240分鐘)，然后使用比色法分析比較了 血液里的酒精濃度。為了使血液酒精濃度分析時(shí)抽血方便，采取導(dǎo)管導(dǎo)入肝素進(jìn)行肝素化 (heparinizedangio-catheter)白勺方式。
血液酒精濃度的分析步驟如下血液酒精濃度的測(cè)量和計(jì)算使用了 COBAS INTEGRA system(Integra400, Roche, Germany)。將 2 μ L 分離出來(lái)的血清樣品在 120 μ L Rl緩沖液(緩沖試劑300mmol/L 1，3-二氨基-2-羥基丙烷緩沖劑pH9. 0)中的懸浮液與 40 μ L的R2緩沖液(酶試劑50mmol/L檸檬酸鈉，36mmol/L NAD,和彡2000 μ kat/L醇脫 氫酶)混合，然后加蒸餾水使總量達(dá)到245 μ L。在378/409nm測(cè)量吸光率，并計(jì)算血液酒精 濃度(% )o
利用SPSS/WIN12. 0程序?qū)ρ壕凭珴舛鹊臄?shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，利用處理結(jié)果 繪制圖6a Γ :ρ<0. 05，用成對(duì)t-檢驗(yàn)分析組內(nèi)差異)和圖6b Γ :ρ<0. 05，用成對(duì)t_檢驗(yàn)分 析組內(nèi)差異)。
圖6a和6b所示，在第一次和第二次試驗(yàn)中，有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物組的血液酒精濃度都比對(duì)照組的明顯低。
試驗(yàn)例7 組合物對(duì)人體抗氧化能力的增進(jìn)效果
組合物的人體抗氧化能力增進(jìn)效果試驗(yàn)以試驗(yàn)例6的酒精代謝測(cè)試的受試者為 受試者進(jìn)行試驗(yàn)。安慰劑組_組合物組、組合物組_安慰劑組分別在2周內(nèi)每天服用兩次 (早、晚)各自的試料(150ml)。為了比較分析服用了安慰劑或組合物后的抗氧化效果差異， 在服用試料之前和服用2周之后立即分別空腹采取血樣，然后分析其總抗氧化水平(TAS ； total antioxidantstatus)和TBARS (硫代巴比妥酸反應(yīng)性物質(zhì))。第一次試驗(yàn)后，讓受試 者間歇3周，然后用同一方法但更換角色的方式進(jìn)行了第二次試驗(yàn)。 總抗氧化水平的分析如下本分析使用了總抗氧化水平檢測(cè)試劑盒(Randox Lab. Ltd. ， UK), ABTS [2, 2' -Azino-di-(3-ethylbenzthiazolinesulphonate) ] ^ilfi^Slif 激活的過(guò)氧化物酶(正鐵肌紅蛋白，metmyoglobin)而產(chǎn)生的正鐵肌紅蛋白自由基(ferryl myoglobin radical species)發(fā)生反應(yīng)，生成了 ABTS自由基陽(yáng)離子，基于該ABTS自由基陽(yáng) 離子的吸光率測(cè)量值進(jìn)行分析。使2 μ L血清樣品在Iml色原體(chromogen)中的懸浮液在 室溫下反應(yīng)1分鐘，然后在600nm測(cè)量其吸光率(Al)。向該溶液中加入基質(zhì)(substrate) 溶液200 μ L，3分鐘后在同一波長(zhǎng)處再次測(cè)量吸光率(Α2)。TAS濃度(mmol/L)的計(jì)算式如 下
A2-A1 = ΔΑ(樣品/標(biāo)準(zhǔn)/空白)
總抗氧化水平；
因子=標(biāo)準(zhǔn)品濃度/(ΔΑ空白-ΔΑ標(biāo)準(zhǔn)品)mmol/L
因此，TAS濃度=因子X(jué) (ΔΑ空白-ΔΑ樣品)
脂質(zhì)過(guò)氧化抑制能力的分析步驟如下使用1，1，3，3_四甲氧基丙烷(TMOP)作為 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的脂質(zhì)過(guò)氧化檢測(cè)試劑盒(CALBIOCHEM，CA, USA)。將來(lái)自受試者的分離得到血 漿200 μ L懸浮在650 μ L的Rl (含N-甲基-2-苯基吲哚的乙腈溶液)中，振蕩3_4秒鐘， 然后與150yL的R2(甲基磺酸)緩沖液混合。在45°C下使懸浮液反應(yīng)60分鐘，然后測(cè)量 586nm處的吸光率。將OD測(cè)量值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中計(jì)算MDA水平。
如同試驗(yàn)例5，利用SPSS/WIN12. O程序以同一方法對(duì)體內(nèi)抗氧化能力測(cè)試數(shù)據(jù)和 脂質(zhì)過(guò)氧化抑制能力的測(cè)量數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果示于圖7ar:p<0. 05，用成對(duì)t-檢 驗(yàn)分析組內(nèi)差異)和圖7br:p<0.05，用成對(duì)t-檢驗(yàn)分析組內(nèi)差異)中。
如圖7a和7b所示，在第一次和第二次試驗(yàn)中，有效改善肝功能、降低血液酒精濃 度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物組都能增加TAS并降低TBARS水平。
如上所述，包括短乳桿菌HY7401、發(fā)酵乳桿菌CS332、嗜酸性乳桿菌CSG、長(zhǎng)雙歧桿 菌HY8001、赤楊提取物、夏枯草提取物、水飛薊提取物、生豆-米糠發(fā)酵提取物、蘿卜汁、西 紅柿提取物、花椰菜提取物、鳳梨提取物、初乳粉末、甜菜堿、維生素B1, B2, B3, B6, B9, B12、C和 E的本發(fā)明組合物，可改善已降低的肝功能，并顯示了優(yōu)良的保護(hù)及治愈因過(guò)飲或慢性酒精 攝取而引起的肝損傷，并具有降低血液酒精水平的能力。該組合物還具有優(yōu)越的加強(qiáng)體內(nèi) 抗氧化的能力，從而在肝疾病的預(yù)防及肝功能的改善中發(fā)揮作用。
以上實(shí)施例只是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例。應(yīng)該理解，這些公開內(nèi)容并不是對(duì)本發(fā)明 的限制。本發(fā)明的說(shuō)明書和權(quán)利要求
書應(yīng)該理解為包括了本發(fā)明真正范圍內(nèi)的所有變化和 調(diào)整形式。
權(quán)利要求
一種有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物，其包括短乳桿菌HY7401、發(fā)酵乳桿菌CS332、嗜酸性乳桿菌CSG、長(zhǎng)雙歧桿菌HY8001、赤楊提取物、夏枯草提取物、水飛薊提取物、生豆-米糠發(fā)酵提取物、蘿卜汁、西紅柿提取物、花椰菜提取物、菠蘿提取物、初乳粉末、甜菜堿、維生素B1，B2，B3，B6，B9，B12、C和E；其中，所述短乳桿菌HY7401的每克冷凍干燥粉末中含菌量為1011cfu；所述發(fā)酵乳桿菌CS332的每克冷凍干燥粉末中含菌量為1011cfu；所述嗜酸性乳桿菌CSG的每克冷凍干燥粉末中含菌量為1011cfu；所述長(zhǎng)雙歧桿菌HY8001的每克冷凍干燥粉末中含菌量為1011cfu；所述赤楊提取物是通過(guò)在水中煎煮干燥赤楊的木質(zhì)及樹皮1-5小時(shí)而獲得的提取物；所述夏枯草提取物是在水中煎煮干燥夏枯草1-5小時(shí)而獲得的提取物；所述水飛薊提取物的類黃酮總含量為80重量％-95重量％，水飛薊賓含量為28重量％-32重量％；所述生豆-米糠發(fā)酵提取物是液態(tài)的市售生豆-米糠發(fā)酵提取物；所述蘿卜汁為34Brix0到36Brix0；所述西紅柿提取物是通過(guò)將西紅柿果實(shí)和水混合，攪碎并過(guò)濾后，噴霧干燥濾液而獲得的提取物；所述花椰菜提取物是通過(guò)將半熟的花椰菜和水混合，攪碎并過(guò)濾后，噴霧干燥濾液而獲得的提取物；所述菠蘿提取物是通過(guò)菠蘿片和水混合，攪碎并過(guò)濾后，噴霧干燥濾液而獲得的提取物；所述初乳粉末以50,000倍蒸餾水稀釋時(shí)，HAV的特異性IgG的滴度在490nm處的OD值為1至1.7；所述甜菜堿為無(wú)水形式，其純度為為99重量％至100重量％；所述維生素B1，B2，B3，B6，B9，B12、C和E為復(fù)合預(yù)混料形式；其中，在100重量％的所述組合物中，短乳桿菌HY7401為0.001重量％-0.1重量％、發(fā)酵乳桿菌CS332為0.001重量％-0.1重量％、嗜酸性乳桿菌CSG為0.001重量％-0.1重量％、長(zhǎng)雙歧桿菌HY8001為0.001重量％-0.1重量％、赤楊提取物為32重量％-36重量％、夏枯草提取物為38重量％-42重量％、水飛薊提取物為0.1重量％-0.8重量％、生豆-米糠發(fā)酵提取物為1.0重量％-2.5重量％、蘿卜汁為0.1重量％-0.2重量％、西紅柿提取物為0.8重量％-1.5重量％、花椰菜提取物為0.1重量％-0.5重量％、菠蘿提取物為0.15重量％-0.25重量％、初乳粉末為3.0重量％-4.0重量％、甜菜堿為4.5重量％-5.0重量％、復(fù)合維生素預(yù)混料為2.0重量％-3.0重量％及添加的水3.85重量％-18.24重量％。
2.一種發(fā)酵乳食品，其包含有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能 力的組合物為有效成分，所述組合物包括短乳桿菌HY7401、發(fā)酵乳桿菌CS332、嗜酸性乳桿 菌CSG、長(zhǎng)雙歧桿菌HY8001、赤楊提取物、夏枯草提取物、水飛薊提取物、生豆-米糠發(fā)酵提 取物、蘿卜汁、西紅柿提取物、花椰菜提取物、菠蘿提取物、初乳粉末、甜菜堿、維生素B” B2, 83，86，89，812、(和￡;其中，所述短乳桿菌HY7401的每克冷凍干燥粉末中含菌量為lO^cfu ；所述發(fā)酵乳桿菌CS332的每克冷凍干燥粉末中含菌量為lO^cfu ； 所述嗜酸性乳桿菌CSG的每克冷凍干燥粉末中含菌量為lO^cfu ； 所述長(zhǎng)雙歧桿菌HY8001的每克冷凍干燥粉末中含菌量為lO^cfu ； 所述赤楊提取物是通過(guò)在水中煎煮干燥赤楊的木質(zhì)及樹皮1-5小時(shí)而獲得的提取物； 所述夏枯草提取物是在水中煎煮干燥夏枯草1-5小時(shí)而獲得的提取物； 所述水飛薊提取物的類黃酮總含量為80重量％ -95重量％，水飛薊賓含量為28重 量％ -32重量％ ；所述生豆_米糠發(fā)酵提取物是液態(tài)的市售生豆_米糠發(fā)酵提取物； 所述蘿卜汁為34Brix°到36Brix° ；所述西紅柿提取物是通過(guò)將西紅柿果實(shí)和水混合，攪碎并過(guò)濾后，噴霧干燥濾液而獲 得的提取物；所述花椰菜提取物是通過(guò)將半熟的花椰菜和水混合，攪碎并過(guò)濾后，噴霧干燥濾液而 獲得的提取物；所述菠蘿提取物是通過(guò)菠蘿片和水混合，攪碎并過(guò)濾后，噴霧干燥濾液而獲得的提取物；所述初乳粉末以50，000倍蒸餾水稀釋時(shí)，HAV的特異性IgG的滴度在490nm處的0D值 為1至1.7 ；所述甜菜堿為無(wú)水形式，其純度為為99重量％至100重量％ ； 所述維生素B” B2，B3，B6，B9，B12、C和E為復(fù)合預(yù)混料形式；其中，在100重量％的所述組合物中，短乳桿菌HY7401為0. 001重量％ -0. 1重量％、 發(fā)酵乳桿菌CS332為0. 001重量％ -0. 1重量％、嗜酸性乳桿菌CSG為0. 001重量％ -0. 1 重量％、長(zhǎng)雙歧桿菌HY8001為0. 001重量％ -0. 1重量％、赤楊提取物為32重量％ -36重 量％、夏枯草提取物為38重量％ -42重量％、水飛薊提取物為0. 1重量％ -0. 8重量％、生 豆-米糠發(fā)酵提取物為1.0重量％-2.5重量％、蘿卜汁為0. 1重量％ -0.2重量％、西紅柿 提取物為0. 8重量％ -1. 5重量％、花椰菜提取物為0. 1重量％ -0. 5重量％、菠蘿提取物為 0. 15重量％ -0. 25重量％、初乳粉末為3. 0重量％ -4. 0重量％、甜菜堿為4. 5重量％ -5. 0 重量％、復(fù)合維生素預(yù)混料為2. 0重量％ -3. 0重量％及添加的水3. 85重量％ -18. 24重 量％。
3. 一種功能性飲料，其包括有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能 力的組合物為有效成分，其中，所述組合物包括短乳桿菌HY7401、發(fā)酵乳桿菌CS332、嗜酸 性乳桿菌CSG、長(zhǎng)雙歧桿菌HY8001、赤楊提取物、夏枯草提取物、水飛薊提取物、生豆-米糠 發(fā)酵提取物、蘿卜汁、西紅柿提取物、花椰菜提取物、菠蘿提取物、初乳粉末、甜菜堿、維生素 B1 B2，B3，B6，B9，B12、C 禾口 E ；其中，所述短乳桿菌HY7401的每克冷凍干燥粉末中含菌量為lO^cfu ； 所述發(fā)酵乳桿菌CS332的每克冷凍干燥粉末中含菌量為lO^cfu ； 所述嗜酸性乳桿菌CSG的每克冷凍干燥粉末中含菌量為lO^cfu ； 所述長(zhǎng)雙歧桿菌HY8001的每克冷凍干燥粉末中含菌量為lO^cfu ； 所述赤楊提取物是通過(guò)在水中煎煮干燥赤楊的木質(zhì)及樹皮1-5小時(shí)而獲得的提取物； 所述夏枯草提取物是在水中煎煮干燥夏枯草1-5小時(shí)而獲得的提取物；所述水飛薊提取物的類黃酮總含量為80重量％ -95重量％，水飛薊賓含量為28重 量％ -32重量％ ；所述生豆_米糠發(fā)酵提取物是液態(tài)的市售生豆_米糠發(fā)酵提取物； 所述蘿卜汁為34Brix°到36Brix° ；所述西紅柿提取物是通過(guò)將西紅柿果實(shí)和水混合，攪碎并過(guò)濾后，噴霧干燥濾液而獲 得的提取物；所述花椰菜提取物是通過(guò)將半熟的花椰菜和水混合，攪碎并過(guò)濾后，噴霧干燥濾液而 獲得的提取物；所述菠蘿提取物是通過(guò)菠蘿片和水混合，攪碎并過(guò)濾后，噴霧干燥濾液而獲得的提取物；所述初乳粉末以50，000倍蒸餾水稀釋時(shí)，HAV的特異性IgG的滴度在490nm處的0D值 為1至1.7 ；所述甜菜堿為無(wú)水形式，其純度為為99重量％至100重量％ ； 所述維生素B” B2，B3，B6，B9，B12、C和E為復(fù)合預(yù)混料形式；其中，在100重量％的所述組合物中，短乳桿菌HY7401為0. 001重量％ -0. 1重量％、 發(fā)酵乳桿菌CS332為0. 001重量％ -0. 1重量％、嗜酸性乳桿菌CSG為0. 001重量％ -0. 1 重量％、長(zhǎng)雙歧桿菌HY8001為0. 001重量％ -0. 1重量％、赤楊提取物為32重量％ -36重 量％、夏枯草提取物為38重量％ -42重量％、水飛薊提取物為0. 1重量％ -0. 8重量％、生 豆-米糠發(fā)酵提取物為1.0重量％-2.5重量％、蘿卜汁為0. 1重量％ -0.2重量％、西紅柿 提取物為0. 8重量％ -1. 5重量％、花椰菜提取物為0. 1重量％ -0. 5重量％、菠蘿提取物為 0. 15重量％ -0. 25重量％、初乳粉末為3. 0重量％ -4. 0重量％、甜菜堿為4. 5重量％ -5. 0 重量％、復(fù)合維生素預(yù)混料為2.0重量％ -3.0重量％及添加的水3. 85重量％ -18. 24重 量％。
4. 一種保健食品，其包括有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力 的組合物為有效成分，其中，所述組合物包括短乳桿菌HY7401、發(fā)酵乳桿菌CS332、嗜酸性 乳桿菌CSG、長(zhǎng)雙歧桿菌HY8001、赤楊提取物、夏枯草提取物、水飛薊提取物、生豆-米糠發(fā) 酵提取物、蘿卜汁、西紅柿提取物、花椰菜提取物、菠蘿提取物、初乳粉末、甜菜堿、維生素 B1 B2，B3，B6，B9，B12、C 禾口 E ；其中，所述短乳桿菌HY7401的每克冷凍干燥粉末中含菌量為lO^cfu ； 所述發(fā)酵乳桿菌CS332的每克冷凍干燥粉末中含菌量為lO^cfu ； 所述嗜酸性乳桿菌CSG的每克冷凍干燥粉末中含菌量為lO^cfu ； 所述長(zhǎng)雙歧桿菌HY8001的每克冷凍干燥粉末中含菌量為lO^cfu ； 所述赤楊提取物是通過(guò)在水中煎煮干燥赤楊的木質(zhì)及樹皮1-5小時(shí)而獲得的提取物； 所述夏枯草提取物是在水中煎煮干燥夏枯草1-5小時(shí)而獲得的提取物； 所述水飛薊提取物的類黃酮總含量為80重量％ -95重量％，水飛薊賓含量為28重 量％ -32重量％ ；所述生豆_米糠發(fā)酵提取物是液態(tài)的市售生豆_米糠發(fā)酵提取物； 所述蘿卜汁為34Brix°到36Brix° ；所述西紅柿提取物是通過(guò)將西紅柿果實(shí)和水混合，攪碎并過(guò)濾后，噴霧干燥濾液而獲得的提取物；所述花椰菜提取物是通過(guò)將半熟的花椰菜和水混合，攪碎并過(guò)濾后，噴霧干燥濾液而獲得的提取物；所述菠蘿提取物是通過(guò)菠蘿片和水混合，攪碎并過(guò)濾后，噴霧干燥濾液而獲得的提取物；所述初乳粉末以50，000倍蒸餾水稀釋時(shí)，HAV的特異性IgG的滴度在490nm處的0D值 為1至1.7;所述甜菜堿為無(wú)水形式，其純度為為99重量％至100重量％ ； 所述維生素B” B2，B3，B6，B9，B12、C和E為復(fù)合預(yù)混料形式；其中，在100重量％的所述組合物中，短乳桿菌HY7401為0. 001重量％ -0. 1重量％、 發(fā)酵乳桿菌CS332為0. 001重量％ -0. 1重量％、嗜酸性乳桿菌CSG為0. 001重量％ -0. 1 重量％、長(zhǎng)雙歧桿菌HY8001為0. 001重量％ -0. 1重量％、赤楊提取物為32重量％ -36重 量％、夏枯草提取物為38重量％ -42重量％、水飛薊提取物為0. 1重量％ -0. 8重量％、生 豆-米糠發(fā)酵提取物為1.0重量％-2.5重量％、蘿卜汁為0. 1重量2重量％、西紅柿 提取物為0. 8重量％ -1. 5重量％、花椰菜提取物為0. 1重量％ -0. 5重量％、菠蘿提取物為 0. 15重量％ -0. 25重量％、初乳粉末為3. 0重量％ -4. 0重量％、甜菜堿為4. 5重量％ -5. 0 重量％、復(fù)合維生素預(yù)混料為2. 0重量％ -3. 0重量％及添加的水3. 85重量％ -18. 24重 量％。
專利摘要
本發(fā)明涉及一種可以有效改善肝功能、降低血液酒精濃度及加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力的組合物，其包括短乳桿菌HY7401、發(fā)酵乳桿菌CS332、嗜酸性乳桿菌CSG、長(zhǎng)雙歧桿菌HY8001、赤楊提取物、夏枯草提取物、水飛薊提取物、生豆-米糠發(fā)酵提取物、蘿卜汁、西紅柿提取物、花椰菜提取物、菠蘿提取物、初乳粉末、甜菜堿、維生素B1、B2、B3、B6、B9、B12、C和E。所述組合物可以有效改善受到損傷的肝功能、保護(hù)和治療因過(guò)飲或慢性酒精攝取而引起的肝損傷、促進(jìn)酒后酒精代謝并降低血液酒精濃度、加強(qiáng)體內(nèi)抗氧化能力。本發(fā)明還涉及以所述組合物作為有效成分的發(fā)酵乳食品、飲料和保健食品。
文檔編號(hào)A23L1/30GKCN1853508 B發(fā)布類型授權(quán) 專利申請(qǐng)?zhí)朇N 200610075257
公開日2010年11月3日 申請(qǐng)日期2006年4月17日
發(fā)明者吳鎬卿, 安榮泰, 林光世, 裴真晟, 許哲成, 金龍熙 申請(qǐng)人:韓國(guó)養(yǎng)藥多股份有限公司導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan專利引用 (3),