專利名稱:一種注射型大豆分離蛋白及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及大豆蛋白及其加工技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種注射型大豆分離蛋白及其制備方法。
背景技術(shù)：
大豆分離蛋白具有很高的營養(yǎng)價值和良好的功能性質(zhì)，廣泛應(yīng)用于食品的多個領(lǐng)域，作為多種食品的基礎(chǔ)原料，應(yīng)用于香腸、火腿、罐頭等凝膠型產(chǎn)品加工中，不僅可以起到與動物蛋白的互補作用，提高肉制品的營養(yǎng)價值，還可以使肉制品的脂肪降低、組織細(xì)膩、 富有彈性、增加肉香味及保水性，延長保質(zhì)期。
與凝膠型分離蛋白相比較，高檔肉制品生產(chǎn)中使用的注射型分離蛋白更為重要， 對分離蛋白產(chǎn)品功能性的要求更為全面。在肉制品生產(chǎn)過程中需要將分離蛋白利用專用針頭注射到大塊肉中，要求分離蛋白具有良好的吸水性、保水性、吸油性和凝膠性的同時，具有較高的溶解性。
申請?zhí)枮?00610045807. 2的發(fā)明專利申請公開說明書(公開號CN1840680A)公開了一種雙酶法改性生產(chǎn)注射型大豆分離蛋白工藝，該發(fā)明采用低溫脫脂豆粕為原料，在生產(chǎn)大豆分離蛋白過程中采用蛋白酶和酰基轉(zhuǎn)移酶對大豆分離蛋白進(jìn)行復(fù)合改性，提高產(chǎn)品的吸水性、保水性、吸油性和凝膠性。但該方法存在三個缺陷首先，酰基轉(zhuǎn)移酶的價格很昂貴，在國內(nèi)市場進(jìn)口的酰基轉(zhuǎn)移酶價格在1800元/kg以上，大大地提高了大豆分離蛋白的成本，很難被市場接受；其次，?；D(zhuǎn)移酶的酶解時間要求2 3個小時，生產(chǎn)流程過于緩慢，降低了工業(yè)生產(chǎn)中的生產(chǎn)效率；最后，在此發(fā)明中，必須兩次離心分離大豆分離蛋白凝塊，兩次分離蛋白凝塊，將大大增加大豆分離蛋白的流失率，降低產(chǎn)品的得率。該發(fā)明難以滿足工業(yè)化生產(chǎn)的需求。
因此，需要這樣一種注射型大豆分離蛋白，其分散性、吸水性、保水性、吸油性和凝膠性都較好，同時又可以實現(xiàn)大規(guī)模的工業(yè)化生產(chǎn)，以更大范圍應(yīng)用于食品工業(yè)中。

發(fā)明內(nèi)容
鑒于以上現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺陷，本發(fā)明旨在提供一種注射型大豆分離蛋白及其制備方法。
本發(fā)明的一個方面提供一種制備注射型大豆分離蛋白的方法，所述方法包括如下步驟
(1)以低溫脫脂豆粕為原料，經(jīng)過堿提、脫氣、酸沉制備分離蛋白凝乳；
(2)將所述分離蛋白凝乳與水形成濃度8-15%的范圍內(nèi)的底物；
(3)以與所述底物的重量比為0.01 100-0. 2 100的量在所述底物中加入中性蛋白酶，在PH值6. 5-7. 5，溫度45-55°C的范圍內(nèi)酶解10-60分鐘，得到中性蛋白酶酶解產(chǎn)物；
(4)對所述酶解產(chǎn)物進(jìn)行滅酶、殺菌、均質(zhì)、噴霧干燥，得到干粉；[0012](5)在所述干粉上噴涂
(i)由HLB值為7-13的大豆粉末磷脂、大豆卵磷脂或粉末狀羥基化改性大豆磷脂與水形成的濃度為15-50%的水溶液，所述水溶液溫度為50-60°C，所述大豆粉末磷脂、大豆卵磷脂或粉末狀羥基化改性大豆磷脂與所述干粉的重量比為0.01 100-0.65 100，混拌；或
(ii)與所述干粉的重量比為0. 01 100-0. 65 100的HLB值范圍為7_13的液體狀羥基化改性大豆磷脂，所述液體狀羥基化改性大豆磷脂溫度為50-60°C，混拌。
本發(fā)明的再一個方面是提供以上所述的方法制備的注射型大豆分離蛋白。
發(fā)明的詳細(xì)描述
本發(fā)明的主要原料采用低溫脫脂豆粕。低溫脫脂豆粕NSI (氮溶解指數(shù))高，有利于蛋白的溶出，同時低溫豆粕顏色呈淡黃色，有利于保證最終產(chǎn)品的色澤。
本發(fā)明的關(guān)鍵在于注射型大豆分離蛋白的制備方法的步驟C3)和步驟(5)。
本發(fā)明中酶解反應(yīng)的目的是通過酶解反應(yīng)有效地降低大豆分離蛋白的分子量，從而適當(dāng)降低大豆分離蛋白的凝膠性，增強其分散性，同時要合理控制酶解反應(yīng)的進(jìn)程，使大豆分離蛋白的分散性與凝膠性處于均衡狀態(tài)。
步驟C3)酶解反應(yīng)的關(guān)鍵是酶的選擇和酶的加入量。本發(fā)明中步驟(3)中所使用的酶是中性蛋白酶，選擇中性蛋白酶作為酶解反應(yīng)的酶可以有效的防止由于PH值的調(diào)節(jié)所帶來的不必要的鹽量的增加。市場上可以購買到的各種品牌的中性蛋白酶均可使用在本發(fā)明的步驟(3)中。
在本發(fā)明制備注射型大豆分離蛋白的方法的優(yōu)選實施方案中，中性蛋白酶的加入量為該中性蛋白酶與該底物的重量比的0.08 100-0. 16 100。
磷脂分子中含親油的脂肪酸基團(tuán)和親水的磷酸基團(tuán)，可以以薄膜狀包裹在油脂的表面，與水分子結(jié)合，形成乳濁液，具有優(yōu)良的乳化特性，是天然的乳化劑。在本發(fā)明的步驟 (4)所得的干粉上噴涂一定量的磷脂，可以有效增加大豆分離蛋白在水中的乳化性，增強大豆分離蛋白的吸水性、吸油性
《中華人民共和國行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)磷脂通用技術(shù)條件LS/T3219-1994(SB/T 10206-1994)》將磷脂劃分為三類濃縮磷脂、粉末磷脂和卵磷脂。粉末磷脂和卵磷脂的親水性較好，易溶于水；濃縮磷脂的親油性較好(HLB值在3左右)，易溶于油，難溶于水。在本發(fā)明的步驟(4)所得的干粉上噴涂一定量的大豆粉末磷脂和大豆卵磷脂的水溶液可以有效地增加大豆分離蛋白在水中的乳化性，增強大豆分離蛋白的吸水性、吸油性，而噴涂濃縮磷脂則不會增加上述的特性。
《中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑改性大豆磷脂GB12486-90》規(guī)定了粉末狀羥基化改性大豆磷脂的理化指標(biāo)。在實際的工業(yè)化產(chǎn)品中，羥基化改性大豆磷脂有粉末狀和液態(tài)兩種，都具有親水性好的特點，在本發(fā)明的步驟(4)所得的干粉上噴涂一定量的粉末狀羥基化改性大豆磷脂的水溶液和液態(tài)羥基化改性大豆磷脂可以有效的增加大豆分離蛋白在水中的乳化性，增強大豆分離蛋白的吸水性、吸油性。
HLB 值是 Hydrophile-Lipophile Balance Number 的縮寫，稱親水疏水平衡值，親水親油平衡值(HLB值)是用來表示表面活性劑親水或親油能力大小的值。
在本發(fā)明制備注射型大豆分離蛋白的方法的優(yōu)選實施方案中，在步驟(5)中所述大豆粉末磷脂、大豆卵磷脂或粉末狀羥基化改性大豆磷脂與所述干粉的重量比為 0.3 100-0.6 100。
在本發(fā)明制備注射型大豆分離蛋白的方法的另一優(yōu)選實施方案中，在步驟(5)中所述液體狀羥基化改性大豆磷脂的HLB值范圍為9-11。
在本發(fā)明制備注射型大豆分離蛋白的方法的又一優(yōu)選實施方案中，在步驟(5)中所述液體狀羥基化改性大豆磷脂與所述干粉的重量比為0.3 100-0.6 100。
本發(fā)明所述的注射型大豆分離蛋白的制備方法中步驟⑴以低溫脫脂豆粕為原料，經(jīng)過堿提、脫氣、酸沉制備分離蛋白凝乳所述制備分離蛋白凝乳的操作包括步驟
(Ia)將所述低溫脫脂豆粕原料與48°C -—52°C的水按水與所述原料的重量比為9 1-7 1在浸出罐中配制成第一混合物，并用濃度為25%-30%的氫氧化鈉將所述第一混合物的PH值調(diào)至7. 2-8. 0，對經(jīng)pH調(diào)整的所述第一混合物進(jìn)行勻速攪拌，保持 20-30分鐘，分離機分離，分離所述第一混合物得到液相的一次浸出的蛋白液和固相的一次浸出豆渣，液相的主要成分為可溶性蛋白、碳水化合物和鹽，一次浸出的蛋白液蛋白濃度為 5-15% ；
(Ib)將所述一次浸出豆渣與48°C _52°C的水按水與所述一次浸出豆渣的重量比為7 1—5 1在浸出罐中配制成第二混合物，pH值保持自然，對第二混合物進(jìn)行勻速攪拌，保持5-—15分鐘，分離機分離，分離所述第二混合物，得到液相的二次浸出蛋白液， 液相的主要成分為可溶性蛋白、碳水化合物和鹽，二次浸出的蛋白液蛋白濃度為3-10% ；
(Ic)合并所述一次浸出蛋白液和所述二次浸出蛋白液得到合并浸出蛋白液，將對所述合并浸出蛋白液打入脫氣罐中，加入適量消泡劑進(jìn)行脫氣；
(Id)經(jīng)一個在線混拌器加濃度為29-30%的食品級鹽酸調(diào)節(jié)所述經(jīng)脫氣的蛋白液的PH值至4. 2-4.6，經(jīng)酸沉后的蛋白液由分離機以3000-400011)111分離，出的輕相為乳清， 重相為凝乳，乳清要求離心沉淀物彡0. 05ml/15ml，凝乳的固形物彡35% ；
(Ie)將凝乳在解碎機中加水稀釋。
本發(fā)明所述的注射型大豆分離蛋白的制備方法中步驟(4)操作包括如下步驟
(4a)加熱所述酶解產(chǎn)物至120_170°C，作用4-1 進(jìn)行滅酶和滅菌，得到無菌酶解產(chǎn)物；
(4b)均質(zhì)所述無菌酶解產(chǎn)物，均質(zhì)的壓力為8_15MPa ；
(4c)噴霧干燥所述均質(zhì)后的無菌酶解產(chǎn)物高壓泵出口壓力20_40MPa，進(jìn)料量為5-7T/h，出口溫度為60-80°C，噴嘴壓力20-40MPa，得到干粉。加熱所述酶解產(chǎn)物至 120-170°C，可以有效的提高大豆分離蛋白的凝膠性。
在本發(fā)明制備注射型大豆分離蛋白的方法的優(yōu)選實施方案中，在步驟Ga)之后， 步驟Gb)之前對所述無菌酶解產(chǎn)物進(jìn)行閃蒸，真空度-0. 04-0. 09MPao閃蒸的目的是以快速降低經(jīng)殺菌過程的大豆蛋白水解物的溫度，保持蛋白的活性，同時去除大豆蛋白水解物的腥味。
按照本發(fā)明方法制備的所述的注射型分離蛋白的制備方法制備的注射型大豆分離蛋白的感官指標(biāo)、理化指標(biāo)、微生物指標(biāo)如下
感官要求應(yīng)符合表1的規(guī)定
表1感官要求[0043]
項目要求色澤乳白色或淡黃色(色澤均勻一致)組織形態(tài)粉狀，無結(jié)塊，有少量微粒滋、氣味具有本品固有的滋、氣味，無異味雜質(zhì)無肉眼可見雜質(zhì)
理化指標(biāo)應(yīng)符合表2的規(guī)定
表2理化指標(biāo)
項目指標(biāo)粗蛋白(以干基計，NX 6. 25)，% ^88. 5灰分(以干基計)，%6. 5水分，％7. 0鉛(以而計)，mg/kg0. 2銅(以 Cu 計)，mg/kg20. 0無機砷(以As計)，mg/kg0. 1黃曲霉毒素B1, ug/kg5. 0六六六，mg/kg0. 05滴滴涕，mg/kg0. 05
微生物指標(biāo)應(yīng)符合表3的規(guī)定
表3微生物指標(biāo)
項目指標(biāo)菌落總數(shù)，cfu/g sS30000大腸菌群，MPN/100g sS30致病菌不得檢出
本發(fā)明創(chuàng)造的優(yōu)點[0051]1、本方法生產(chǎn)的產(chǎn)品在水中迅速分散并溶解，無團(tuán)粒，在肉制品加工中不堵塞注射針頭。
2、本方法生產(chǎn)的產(chǎn)品使其在低溫肉制品的加工中應(yīng)用更方便，具有良好的保水性，防止離水，提高出品率；具有良好的凝膠性，彈力加強，添加后制成的產(chǎn)品營養(yǎng)價值高， 口感好，色澤鮮。
3、本方法生產(chǎn)工藝簡單，產(chǎn)品功能性良好，產(chǎn)品不揚塵，溶解性好，使用方便。
本發(fā)明的用途或應(yīng)用領(lǐng)域注射型肉制品、低溫肉制品、固體飲料、面制品、調(diào)味品等行業(yè)。


圖1為制備注射型大豆分離蛋白的方法的一種實施方案的流程圖。 實施例
本實施例中所采用的低溫脫脂豆粕購自哈高科油脂公司，所使用的ft~iteX7L 酶購自無錫杰能科生物工程有限公司；NeutraseO. 8L酶購自諾維信生物技術(shù)有限公司； Corolase7089、CorolaseLAP購自德國AB酶制劑公司；龐博中性蛋白酶、東恒華道中性蛋白酶、日成中性蛋白酶購自廣西南寧龐博生物工程有限公司、南寧東恒華道生物科技有限公司、肇東市日成酶制劑有限公司；其他試劑來自市售。
本實施例中所采用的ADM大豆粉末磷脂、九三大豆粉末磷脂、美亞斯大豆粉末磷脂、美亞斯大豆卵磷脂、粉末狀美亞斯羥基化改性大豆磷脂、羥基化改性大豆磷脂 hlkinlOSO、羥基化改性大豆磷脂Centromix E磷脂購自美國ADM公司、九三油脂有限責(zé)任公司、北京美亞斯磷脂技術(shù)有限公司、美國中央大豆公司；
所采用的設(shè)備浸出罐、中和罐自制，市場上銷售的浸出罐、中和罐可以滿足本發(fā)明的實施要求；分離機500、分離機601購自阿法拉伐公司；分離機CC458購自維斯伐利亞公司，流化床購自美國勞力公司。
實施例一
將1600公斤低溫脫脂豆粕原料與48°C的水按水與原料重量比為9 1在浸出罐中配制成第一混合物，并用濃度為-30%的氫氧化鈉將第一混合物的pH調(diào)至7. 2-7.6， 對經(jīng)PH調(diào)整的第一混合物進(jìn)行勻速攪拌，保持20分鐘，分離機分離第一混合物，得到液相的一次浸出的蛋白液10300公斤和固相的一次浸出豆渣3020公斤，液相的主要成分為可溶性蛋白、碳水化合物和鹽，一次浸出蛋白液中蛋白的濃度為7-8% (重量比)；將一次浸出豆渣與48°C的水按水與一次浸出豆渣的重量比為7 1在浸出罐中配制成第二混合物，PH保持自然，保持5分鐘，分離機分離第二混合物，得到液相的二次浸出蛋白液19070 公斤，液相的主要成分為可溶性蛋白、碳水化合物和鹽，二次浸出蛋白液中蛋白的濃度為 3-4% (重量比)；合并一次浸出蛋白液和二次浸出蛋白液得到合并浸出蛋白液，在脫氣罐中對所述合并浸出蛋白液加消泡劑乳化硅油(購自湖北棗陽四?；?進(jìn)行脫氣；經(jīng)脫氣的蛋白液經(jīng)泵進(jìn)入酸沉罐前，經(jīng)一個在線混拌器加濃度為四-30%的食品級鹽酸調(diào)PH， 將PH控制在4. 2-4. 6，經(jīng)酸沉的蛋白液由分離機以3500rpm分離，分離出的輕相為乳清， 重相為凝乳1870公斤，乳清要求離心沉淀物彡0. 05ml/15ml，凝乳的固形物彡35%。將凝乳在解碎機中加水稀釋，凝乳與水形成濃度為8%的底物。底物進(jìn)入中和罐中進(jìn)行酶解， 在底物中加入NeutraseO. 8L酶，NeutraseO. 8L酶加入量為與底物的重量比為0. 1 %，pH 控制在7. 0-7. 2之間，溫度控制在45-480C的范圍內(nèi)，酶解40分鐘，得到NeutraseO. 8L酶酶解產(chǎn)物；該酶解產(chǎn)物經(jīng)泵進(jìn)入殺菌管中，加熱至150°C，作用9s進(jìn)行滅酶和滅菌，得到無菌大豆蛋白水解物；將無菌大豆蛋白水解物經(jīng)泵通過殺菌管進(jìn)入閃蒸罐閃蒸，閃蒸罐的真空度為-0. 06MPa,閃蒸的氣體為廢氣，液相進(jìn)入均質(zhì)機中均質(zhì)，均質(zhì)的壓力為IOMPa ；經(jīng)均質(zhì)后的無菌大豆蛋白水解物進(jìn)入噴霧干燥塔進(jìn)行噴霧干燥高壓泵出口壓力20-40MPa，進(jìn)料量為5-7T/h，出口溫度為75-80°C，噴嘴壓力20-40MPa，得到干粉700公斤；噴霧干燥后的干粉在流化床內(nèi)噴涂由HLB值為7的美亞斯大豆粉末磷脂與水形成的濃度為25-30% 的水溶液，水溶液溫度為50-60°C，所噴涂的美亞斯大豆粉末磷脂與干粉的重量比為 0.4 100-0. 45 100，即噴涂美亞斯大豆粉末磷脂2. 8-3. 15公斤，經(jīng)混拌器混拌后，進(jìn)行包裝。
實施例二
將1600公斤低溫脫脂豆粕原料與48°C的水按水與原料重量比為8 1在浸出罐中配制成第一混合物，并用濃度為-30%的氫氧化鈉將第一混合物的pH調(diào)至7. 2-7.6， 對經(jīng)pH調(diào)整的第一混合物進(jìn)行勻速攪拌，保持25分鐘，分離機分離第一混合物，得到液相的一次浸出的蛋白液10270公斤和固相的一次浸出豆渣3060公斤，液相的主要成分為可溶性蛋白、碳水化合物和鹽，一次浸出蛋白液中蛋白的濃度為8-9% (重量比)；將一次浸出豆渣與48°C的水按水與一次浸出豆渣的重量比為6 1在浸出罐中配制成第二混合物，pH 保持自然，保持6分鐘，分離機分離第二混合物，得到液相的二次浸出蛋白液19000公斤，液相的主要成分為可溶性蛋白、碳水化合物和鹽，二次浸出蛋白液中蛋白的濃度為3. 5-4. 5% (重量比)；合并一次浸出蛋白液和二次浸出蛋白液得到合并浸出蛋白液，在脫氣罐中對所述合并浸出蛋白液加消泡劑乳化硅油(購自湖北棗陽四?；?進(jìn)行脫氣；經(jīng)脫氣的蛋白液經(jīng)泵進(jìn)入酸沉罐前，經(jīng)一個在線混拌器加濃度為四-30%的食品級鹽酸調(diào)PHJf pH控制在4. 2-4. 6，經(jīng)酸沉的蛋白液由分離機以3600rpm分離，分離出的輕相為乳清，重相為凝乳 1940公斤，乳清要求離心沉淀物彡0. 05ml/15ml，凝乳的固形物彡35%。將凝乳在解碎機中加水稀釋，凝乳與水形成濃度為9%的底物。底物進(jìn)入中和罐中進(jìn)行酶解，在底物中加入龐博中性蛋白酶，龐博中性蛋白酶加入量為與底物的重量比為0. 14%, pH控制在7. 0-7.2 之間，溫度控制在45-48°C的范圍內(nèi)，酶解30分鐘，得到龐博中性蛋白酶酶解產(chǎn)物；酶解產(chǎn)物經(jīng)泵進(jìn)入殺菌管中，加熱至145°C，作用IOs進(jìn)行滅酶和滅菌，得到無菌大豆蛋白水解物； 將無菌大豆蛋白水解物經(jīng)泵通過殺菌管進(jìn)入閃蒸罐閃蒸，閃蒸罐的真空度為-0. 065MPa,閃蒸的氣體為廢氣，液相進(jìn)入均質(zhì)機中均質(zhì)，均質(zhì)的壓力為9MPa;經(jīng)均質(zhì)后的無菌大豆蛋白水解物進(jìn)入噴霧干燥塔進(jìn)行噴霧干燥高壓泵出口壓力20-40MPa，進(jìn)料量為5_7T/h，出口溫度為75-80°C，噴嘴壓力20-40MPa，得到干粉720公斤。噴霧干燥后的干粉在流化床內(nèi)噴涂由HLB值為9的九三大豆粉末磷脂與水形成的濃度為30-35%的水溶液，水溶液溫度為50-60°C，所噴涂的九三大豆粉末磷脂與干粉的重量比為0.35 100-0. 4 100，即噴涂九三大豆粉末磷脂2. 52-2. 88公斤，經(jīng)混拌器混拌后，進(jìn)行包裝。
實施例三
將1600公斤低溫脫脂豆粕原料與48°C的水按水與原料重量比為7 1在浸出罐中配制成第一混合物，并用濃度為-30%的氫氧化鈉將第一混合物的pH調(diào)至7. 2-7.6， 對經(jīng)PH調(diào)整的第一混合物進(jìn)行勻速攪拌，保持觀分鐘，分離機分離第一混合物，得到液相的一次浸出的蛋白液10230公斤和固相的一次浸出豆渣3120公斤，液相的主要成分為可溶性蛋白、碳水化合物和鹽，一次浸出蛋白液中蛋白的濃度為7. 5-8. 5% (重量比)；將一次浸出豆渣與48°C的水按水與一次浸出豆渣的重量比為5 1在浸出罐中配制成第二混合物，PH保持自然，保持5. 5分鐘，分離機分離第二混合物，得到液相的二次浸出蛋白液 18900公斤，液相的主要成分為可溶性蛋白、碳水化合物和鹽，二次浸出蛋白液中蛋白的濃度為3-3. 5% (重量比)；合并一次浸出蛋白液和二次浸出蛋白液得到合并浸出蛋白液，在脫氣罐中對所述合并浸出蛋白液加消泡劑乳化硅油(購自湖北棗陽四?；?進(jìn)行脫氣； 經(jīng)脫氣的蛋白液經(jīng)泵進(jìn)入酸沉罐前，經(jīng)一個在線混拌器加濃度為四-30%的食品級鹽酸調(diào) PH值，將pH控制在4. 2-4. 6，經(jīng)酸沉的蛋白液由分離機以3700rpm分離，分離出的輕相為乳清，重相為凝乳1885公斤，乳清要求離心沉淀物彡0. 05ml/15ml，凝乳的固形物彡35%。將凝乳在解碎機中加水稀釋，凝乳與水形成濃度為10%的底物。底物進(jìn)入中和罐中進(jìn)行酶解， 首先在底物中加入Corolase7089酶，Corolase7089酶加入量為與底物的重量比為0. 06%， PH控制在7. 0-7. 2之間，溫度控制在45-48°C的范圍內(nèi)，酶解18分鐘，得到Corolase7089 酶酶解產(chǎn)物，然后在Corolase7089酶酶解產(chǎn)物中加入CorolaseLAP酶，CorolaseLAP酶加入量為與底物的重量比為0. 06%，pH控制在7. 0-7. 2之間，溫度控制在45-48°C的范圍內(nèi)，酶解18分鐘，得到CorolaseLAP酶酶解產(chǎn)物，酶解產(chǎn)物經(jīng)泵進(jìn)入殺菌管中，加熱至155°C，作用 6s進(jìn)行滅酶和滅菌，得到無菌大豆蛋白水解物；將無菌大豆蛋白水解物經(jīng)泵通過殺菌管進(jìn)入閃蒸罐閃蒸，閃蒸罐的真空度為-0. 07MPa,閃蒸的氣體為廢氣，液相進(jìn)入均質(zhì)機中均質(zhì)， 均質(zhì)的壓力為SMPa ；經(jīng)均質(zhì)后的無菌大豆蛋白水解物進(jìn)入噴霧干燥塔進(jìn)行噴霧干燥高壓泵出口壓力20-40MPa，進(jìn)料量為5_7T/h，出口溫度為75-80°C，噴嘴壓力20_40MPa，得到干粉702公斤。噴霧干燥后的干粉在流化床內(nèi)噴涂由HLB值為7的美亞斯大豆卵磷脂與水形成的濃度為30-35%的水溶液，水溶液溫度為50-60°C，所噴涂的美亞斯大豆卵磷脂與干粉的重量比為0.45 100-0. 5 100，即噴涂美亞斯大豆卵磷脂3. 16-3. 51公斤，經(jīng)混拌器混拌后，進(jìn)行包裝。
實施例四
將1600公斤低溫脫脂豆粕原料與48°C的水按水與原料重量比為9 1在浸出罐中配制成第一混合物，并用濃度為-30%的氫氧化鈉將第一混合物的pH調(diào)至7. 2-7.6， 對經(jīng)pH調(diào)整的第一混合物進(jìn)行勻速攪拌，保持20分鐘，分離機分離第一混合物，得到液相的一次浸出的蛋白液10300公斤和固相的一次浸出豆渣3020公斤，液相的主要成分為可溶性蛋白、碳水化合物和鹽，一次浸出蛋白液中蛋白的濃度為7-8% (重量比)；將一次浸出豆渣與48°C的水按水與一次浸出豆渣的重量比為7 1在浸出罐中配制成第二混合物，pH 保持自然，保持5分鐘，分離機分離第二混合物，得到液相的二次浸出蛋白液19070公斤， 液相的主要成分為可溶性蛋白、碳水化合物和鹽，二次浸出蛋白液中蛋白的濃度為3-4% (重量比)；合并一次浸出蛋白液和二次浸出蛋白液得到合并浸出蛋白液，在脫氣罐中對所述合并浸出蛋白液加消泡劑乳化硅油(購自湖北棗陽四?；?進(jìn)行脫氣；經(jīng)脫氣的蛋白液經(jīng)泵進(jìn)入酸沉罐前，經(jīng)一個在線混拌器加濃度為四-30 %的食品級鹽酸調(diào)PH，將pH控制在4. 2-4. 6，經(jīng)酸沉的蛋白液由分離機以3500rpm分離，分離出的輕相為乳清，重相為凝乳1870公斤，乳清要求離心沉淀物< 0. 05ml/15ml，凝乳的固形物> 35%。將凝乳在解碎機中加水稀釋，凝乳與水形成濃度為8%的底物。底物進(jìn)入中和罐中進(jìn)行酶解，在底物中加入日成中性蛋白酶，日成中性蛋白酶加入量為與底物的重量比為0. 08%, pH控制在7. 0-7. 2之間，溫度控制在45-48°C的范圍內(nèi)，酶解45分鐘，得到日成中性蛋白酶酶解產(chǎn)物；該酶解產(chǎn)物經(jīng)泵進(jìn)入殺菌管中，加熱至150°C，作用9s進(jìn)行滅酶和滅菌，得到無菌大豆蛋白水解物； 將無菌大豆蛋白水解物經(jīng)泵通過殺菌管進(jìn)入閃蒸罐閃蒸，閃蒸罐的真空度為-0. 06MPa,閃蒸的氣體為廢氣，液相進(jìn)入均質(zhì)機中均質(zhì)，均質(zhì)的壓力為IOMPa ；經(jīng)均質(zhì)后的無菌大豆蛋白水解物進(jìn)入噴霧干燥塔進(jìn)行噴霧干燥高壓泵出口壓力20-40MPa，進(jìn)料量為5_7T/h，出口溫度為75-80°C，噴嘴壓力20-40MPa，得到干粉700公斤；噴霧干燥后的干粉在流化床內(nèi)噴涂由HLB值為10的粉末狀美亞斯羥基化改性大豆磷脂與水形成的濃度為25-30%的水溶液，水溶液溫度為50-60°C，所噴涂的粉末狀美亞斯羥基化改性大豆磷脂與干粉的重量比為 0.3 100-0. 35 100，即噴涂粉末狀美亞斯羥基化改性大豆磷脂2. 1-2. 45公斤，經(jīng)混拌器混拌后，進(jìn)行包裝。
實施例五
將1600公斤低溫脫脂豆粕原料與48°C的水按水與原料重量比為8 1在浸出罐中配制成第一混合物，并用濃度為-30%的氫氧化鈉將第一混合物的pH調(diào)至7. 2-7.6， 對經(jīng)pH調(diào)整的第一混合物進(jìn)行勻速攪拌，保持25分鐘，分離機分離第一混合物，得到液相的一次浸出的蛋白液10270公斤和固相的一次浸出豆渣3060公斤，液相的主要成分為可溶性蛋白、碳水化合物和鹽，一次浸出蛋白液中蛋白的濃度為8-9% (重量比)；將一次浸出豆渣與48°C的水按水與一次浸出豆渣的重量比為6 1在浸出罐中配制成第二混合物，pH 保持自然，保持6分鐘，分離機分離第二混合物，得到液相的二次浸出蛋白液19000公斤，液相的主要成分為可溶性蛋白、碳水化合物和鹽，二次浸出蛋白液中蛋白的濃度為3. 5-4. 5% (重量比)；合并一次浸出蛋白液和二次浸出蛋白液得到合并浸出蛋白液，在脫氣罐中對所述合并浸出蛋白液加消泡劑乳化硅油(購自湖北棗陽四?；?進(jìn)行脫氣；經(jīng)脫氣的蛋白液經(jīng)泵進(jìn)入酸沉罐前，經(jīng)一個在線混拌器加濃度為四-30%的食品級鹽酸調(diào)PHJf pH控制在4. 2-4. 6，經(jīng)酸沉的蛋白液由分離機以3600rpm分離，分離出的輕相為乳清，重相為凝乳 1940公斤，乳清要求離心沉淀物彡0. 05ml/15ml，凝乳的固形物彡35%。將凝乳在解碎機中加水稀釋，凝乳與水形成濃度為9%的底物。底物進(jìn)入中和罐中進(jìn)行酶解，在底物中加入東恒華道中性蛋白酶，東恒華道中性蛋白酶加入量為與底物的重量比為0. 06%, pH控制在7. 0-7. 2之間，溫度控制在45-48°C的范圍內(nèi)，酶解50分鐘，得到東恒華道中性酶酶解產(chǎn)物；酶解產(chǎn)物經(jīng)泵進(jìn)入殺菌管中，加熱至145°C，作用IOs進(jìn)行滅酶和滅菌，得到無菌大豆蛋白水解物；將無菌大豆蛋白水解物經(jīng)泵通過殺菌管進(jìn)入閃蒸罐閃蒸，閃蒸罐的真空度為-0. 065MPa,閃蒸的氣體為廢氣，液相進(jìn)入均質(zhì)機中均質(zhì)，均質(zhì)的壓力為9MPa ；經(jīng)均質(zhì)后的無菌大豆蛋白水解物進(jìn)入噴霧干燥塔進(jìn)行噴霧干燥高壓泵出口壓力20-40MPa，進(jìn)料量為5-7T/h，出口溫度為75-80°C，噴嘴壓力20-40MPa，得到干粉720公斤。噴霧干燥后的干粉在流化床內(nèi)噴涂由HLB值為9的羥基化改性大豆磷脂^lkinlOSO與水形成的濃度為 30-35%的水溶液，水溶液溫度為50-60°C，所噴涂的羥基化改性大豆磷脂^lkinlOSO與干粉的重量比為0.35 100-0.4 100，即噴涂羥基化改性大豆磷脂hlkinl0802. 52-2. 88 公斤，經(jīng)混拌器混拌后，進(jìn)行包裝。[0069]實施例六
將1600公斤低溫脫脂豆粕原料與48°C的水按水與原料重量比為7 1在浸出罐中配制成第一混合物，并用濃度為-30%的氫氧化鈉將第一混合物的pH調(diào)至7. 2-7.6， 對經(jīng)PH調(diào)整的第一混合物進(jìn)行勻速攪拌，保持觀分鐘，分離機分離第一混合物，得到液相的一次浸出的蛋白液10230公斤和固相的一次浸出豆渣3120公斤，液相的主要成分為可溶性蛋白、碳水化合物和鹽，一次浸出蛋白液中蛋白的濃度為7. 5-8. 5% (重量比)；將一次浸出豆渣與48°C的水按水與一次浸出豆渣的重量比為5 1在浸出罐中配制成第二混合物，PH保持自然，保持5. 5分鐘，分離機分離第二混合物，得到液相的二次浸出蛋白液 18900公斤，液相的主要成分為可溶性蛋白、碳水化合物和鹽，二次浸出蛋白液中蛋白的濃度為3-3. 5% (重量比)；合并一次浸出蛋白液和二次浸出蛋白液得到合并浸出蛋白液，在脫氣罐中對所述合并浸出蛋白液加消泡劑乳化硅油(購自湖北棗陽四?；?進(jìn)行脫氣 經(jīng)脫氣的蛋白液經(jīng)泵進(jìn)入酸沉罐前，經(jīng)一個在線混拌器加濃度為四-30%的食品級鹽酸調(diào) PH值，將pH控制在4. 2-4. 6，經(jīng)酸沉的蛋白液由分離機以3700rpm分離，分離出的輕相為乳清，重相為凝乳1885公斤，乳清要求離心沉淀物彡0. 05ml/15ml，凝乳的固形物彡35%。將凝乳在解碎機中加水稀釋，凝乳與水形成濃度為10%的底物。底物進(jìn)入中和罐中進(jìn)行酶解， 首先在底物中加入Corolase7089酶，Corolase7089酶加入量為與底物的重量比為0. 08%， PH控制在7. 0-7. 2之間，溫度控制在45-48°C的范圍內(nèi)，酶解12分鐘，得到Corolase7089 酶酶解產(chǎn)物，然后在Corolase7089酶酶解產(chǎn)物中加入CorolaseLAP酶，CorolaseLAP酶加入量為與底物的重量比為0. 08%,pH控制在7. 0-7. 2之間，溫度控制在45_48°C的范圍內(nèi)， 酶解12分鐘，得到CorolaseLAP酶酶解產(chǎn)物，酶解產(chǎn)物經(jīng)泵進(jìn)入殺菌管中，加熱至155°C， 作用6s進(jìn)行滅酶和滅菌，得到無菌大豆蛋白水解物；將無菌大豆蛋白水解物經(jīng)泵通過殺菌管進(jìn)入閃蒸罐閃蒸，閃蒸罐的真空度為-0. 07MPa,閃蒸的氣體為廢氣，液相進(jìn)入均質(zhì)機中均質(zhì)，均質(zhì)的壓力為SMPa ；經(jīng)均質(zhì)后的無菌大豆蛋白水解物進(jìn)入噴霧干燥塔進(jìn)行噴霧干燥 高壓泵出口壓力20-40MPa，進(jìn)料量為5_7T/h，出口溫度為75-80°C，噴嘴壓力20_40MPa，得到干粉702公斤。噴霧干燥后的干粉在流化床內(nèi)噴涂由HLB值為10的羥基化改性大豆磷脂Centromix E與水形成的濃度為30-35%的水溶液，水溶液溫度為50_60°C，所噴涂的羥基化改性大豆磷脂Centromix E與干粉的重量比為0.45 100-0. 5 100，即噴涂羥基化改性大豆磷脂Centromix E 3. 16-3. 51公斤，經(jīng)混拌器混拌后，進(jìn)行包裝。
試驗例高分散型分離蛋白的分散性、分散穩(wěn)定性、粘度、保水性、凝膠的實驗和相關(guān)數(shù)據(jù)
測定方法
1、分散性的測定
1. 1、實驗儀器
十分之一天平(感量0. 1的天平)一臺
500ml干燥燒杯一個
250ml 量筒一個
玻璃棒一支
秒表一塊
1.2、實驗方法[0081]首先稱取12g樣品放于500ml干燥燒杯中，再量取188ml冰水(0°C的水)放入燒杯中，用玻璃棒充分?jǐn)嚢?，觀察產(chǎn)品完全分散的時間及泡沫情況。
1.3、實驗結(jié)果
產(chǎn)品在30秒內(nèi)完全分散，且無泡沫。
2、分散穩(wěn)定性的測定
2. 1 試劑
蒸餾水(16_25°C)
2. 2 儀器
天平(感量為0. Ig)、離心機、磁力攪拌器、玻璃棒、燒杯(250ml)、離心管(IOml)、 量筒(IOOml)
2. 3測試步驟
用天平稱取5. Og分離蛋白，置于燒杯中，用IOOml量筒量取95ml蒸餾水，倒入燒杯中
用玻璃棒攪拌均勻后。在室溫下，用磁力攪拌器攪拌60min。用離心管量取IOml 蛋白液，1500轉(zhuǎn)/分離心5min。讀出未分散到水中的樣品的體積數(shù)X。
2. 4分析結(jié)果
分散穩(wěn)定性％= ^^ χ 100%
10——倒入離心管中的IOml蛋白液
X——未分散到水中的樣品的體積數(shù)
3、粘度測定
3. 1 試劑
蒸餾水(16_25°C )、消泡劑
3. 2 儀器
3.2. 1 天平(感量 0. Olg)
3. 2. 2 燒杯(500ml)
3. 2. 3 溫度計(0°C -IOO0C )
3. 2. 4 玻璃棒
3. 2. 5 量筒 Q50ml)
3. 2. 6 洗瓶
3. 2. 7 數(shù)顯粘度計(NDJ-8S)
3. 2. 8 鋼勺
3. 2. 9 離心筒 O50ml)
3. 2. 10手持高速攪拌器
3. 3測定方法
稱取試樣30. OOg于500ml塑料燒杯中，倒入170ml蒸餾水，加10滴消泡劑(消泡劑水=2 1)，用玻璃棒攪拌30秒，將掛于燒杯壁上的試樣全部溶于水中，用手持高速攪拌器低速檔攪拌30秒后，在2分鐘內(nèi)，用數(shù)顯粘度計測定其粘度，直接讀取并記錄。[0112]粘度計選取的參數(shù)
權(quán)利要求
1.一種制備注射型大豆分離蛋白的方法，其特征在于包括如下步驟(1)以低溫脫脂豆粕為原料，經(jīng)過堿提、脫氣、酸沉制備分離蛋白凝乳；(2)將所述分離蛋白凝乳與水形成濃度8-15%的范圍內(nèi)的底物；(3)以與所述底物的重量比為0.01 100-0. 2 100的量在所述底物中加入中性蛋白酶，在PH值6. 5-7. 5，溫度45-55°C的范圍內(nèi)酶解10-60分鐘，得到中性蛋白酶酶解產(chǎn)物；(4)對所述中性蛋白酶酶解產(chǎn)物進(jìn)行滅酶、殺菌、均質(zhì)、噴霧干燥，得到干粉；(5)在所述干粉上噴涂(i)由HLB值為7-13的大豆粉末磷脂、大豆卵磷脂或粉末狀羥基化改性大豆磷脂與水形成的濃度為15-50%的水溶液，所述水溶液溫度為50-60°C，所述大豆粉末磷脂、大豆卵磷脂或粉末狀羥基化改性大豆磷脂與所述干粉的重量比為0.01 100-0.65 100，混拌； 或(ii)與所述干粉的重量比為0.01 100-0. 65 100的HLB值范圍為7_13的液體狀羥基化改性大豆磷脂，所述液體狀羥基化改性大豆磷脂溫度為50-60°C，混拌。
2.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的方法，其特征在于，在步驟C3)所述中性蛋白酶與所述底物的重量比為 0.08 100-0.16 100。
3.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的方法，其特征在于，在步驟(1)所述制備分離蛋白凝乳的操作包括步驟(Ia)將低溫脫脂豆粕原料與48°C-52°C的水按水與原料的重量比為9 1-7 1配制成第一混合物，并用濃度為25% -30%的氫氧化鈉將所述第一混合物的pH調(diào)至7. 2-8. 0，對經(jīng)PH調(diào)整的第一混合物進(jìn)行勻速攪拌，保持20-30分鐘，分離第一混合物得到液相的一次浸出蛋白液和固相的一次浸出豆渣；(Ib)將所述一次浸出豆渣與48°C _52°C的水按水與所述一次浸出豆渣的重量比為 7:1-5: 1配制成第二混合物，保持5-15分鐘，分離所述第二混合物，得到液相的二次浸出蛋白液；(Ic)合并所述一次浸出蛋白液和所述二次浸出蛋白液得到合并浸出蛋白液，對所述合并浸出蛋白液進(jìn)行脫氣；(Id)調(diào)節(jié)經(jīng)脫氣的蛋白液的pH至4. 2-4. 6，以3000-4000rpm分離出的輕相為乳清，重相為凝乳；(Ie)將凝乳加水稀釋。
4.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的方法，其特征在于，在步驟(4)操作包括如下步驟(4a)加熱所述中性蛋白酶酶解產(chǎn)物至120-170°C，作用4-1 進(jìn)行滅酶和滅菌，得到無菌酶解產(chǎn)物；(4b)均質(zhì)無菌酶解產(chǎn)物，均質(zhì)的壓力為8-15MPa ；(4c)噴霧干燥均質(zhì)后的無菌酶解產(chǎn)物高壓泵出口壓力20-40MPa，進(jìn)料量為5_7T/h， 出口溫度為60-80°C，噴嘴壓力20-40MPa，得到干粉。
5.根據(jù)權(quán)利要求
4所述的方法，其特征在于，在步驟Ga)之后，步驟Gb)之前對所述無菌酶解產(chǎn)物進(jìn)行閃蒸，真空度-0. 04-0. 09MPao
6.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的方法，其特征在于，在步驟(5)中的所述大豆粉末磷脂、大豆卵磷脂或粉末狀羥基化改性大豆磷脂與所述干粉的重量比為0.3 100-0.6 100。
7.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的方法，其特征在于，在步驟( 中的所述液體狀羥基化改性大豆磷脂的HLB值范圍為9-11。
8.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的方法，其特征在于，在步驟(5)中的所述液體狀羥基化改性大豆磷脂與所述干粉的重量比為0.3 100-0.6 100。
專利摘要
一種注射型大豆分離蛋白及其制備方法，屬于大豆蛋白及其加工技術(shù)領(lǐng)域：
。本發(fā)明采用低溫豆粕為原料，經(jīng)過堿提、脫氣、酸沉制備分離蛋白凝乳，然后使用中性蛋白酶對分離蛋白凝乳進(jìn)行酶解，反應(yīng)結(jié)束后進(jìn)過加熱滅酶、滅菌、閃蒸、均質(zhì)、噴霧干燥，最后在噴霧干燥所得的干粉上噴涂大豆粉末磷脂、大豆卵磷脂或粉末狀羥基化改性大豆磷脂的水溶液或液體狀羥基化改性大豆磷脂，得到分散性、吸水性、保水性、吸油性和凝膠性都較好的大豆蛋白。該大豆分離蛋白可以用在注射型肉制品、低溫肉制品、固體飲料、面制品、調(diào)味品等行業(yè)。
文檔編號A23J3/34GKCN101642185 B發(fā)布類型授權(quán) 專利申請?zhí)朇N 200910169859
公開日2012年5月2日 申請日期2009年9月7日
發(fā)明者張毅方 申請人:哈高科大豆食品有限責(zé)任公司導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan