專利名稱：利用谷殼粉生產(chǎn)興達(dá)酶的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生產(chǎn)纖維素酶和蛋白酶的方法。
近年來，酶制劑已廣泛應(yīng)用于畜牧業(yè)，能提高畜禽對(duì)飼料的利用率和生產(chǎn)性能。但生產(chǎn)酶制劑的底物多為昂貴的豆粕、玉米等原料，成本較高，很難被飼料行業(yè)接受，而我國南方極為豐富的稻谷副產(chǎn)品資源——稻殼，卻因粗纖維含量高而不能直接用作單胃動(dòng)物飼料。
本發(fā)明的目的在于提供一種利用稻殼等低成本原料生產(chǎn)酶制劑的方法。
本發(fā)明的任務(wù)是通過以下方式實(shí)現(xiàn)的利用谷殼粉生產(chǎn)興達(dá)酶的方法分三級(jí)培養(yǎng)而成，a、一級(jí)種培養(yǎng)(所用原料為重量單位)豆粕64～80％淀粉9～18％瓊脂9～18％ 硫酸鎂0.15～0.6％硫酸銨0.15～0.6％ 磷酸二氫鉀0.15～0.6％先將豆粕置于容器中，加入10倍(重量)的水，煮沸15～25分鐘過濾，在濾液中加入瓊脂，在微火上溶解，再加入淀粉、硫酸鎂、硫酸銨和磷酸二氫鉀混溶，加熱20～40分鐘，加熱至沸，再添加10倍(重量)豆粕量的水，攪勻后分裝試管，每支盛裝5～10毫升，在1.5Kg/cm2壓力下蒸汽滅菌30分鐘，將試管擺成與豎直方向夾15～20度角備用，在無菌條件下接入黃曲霉柱頭變種(Asperglllus flavus var coluranarls)和溫特曲霉(Asperglllus wentll)菌種，在30～37℃的溫度下培養(yǎng)5～8天，等菌種長滿全管時(shí)為止。
b、二級(jí)種培養(yǎng)(所用原料為重量單位)
麥夫60～90％餅粕粉或淀粉10～40％將上述原料按1∶0.6(重量)的比例加水拌勻，裝入三角燒瓶或罐頭瓶中，每瓶裝料15～20克，料厚0.8～1.2cm，塞上棉塞，將口扎緊，在1～1.5Kg/cm2的壓力下蒸汽滅菌30分鐘，降壓后取出搖散，冷至室溫后，每瓶加入0.3克一級(jí)培養(yǎng)物，用接種鏟拌勻，在30～35℃的溫度下培養(yǎng)24～48小時(shí)，當(dāng)菌絲充分生長形成餅狀后，扣瓶，將瓶橫放，繼續(xù)保溫培養(yǎng)3～4天至黃綠色孢子充分長滿曲料為止。
c、三級(jí)種培養(yǎng)(所用原料為重量單位)谷殼粉50～70％玉米粉20～40％豆餅粉5～15％先將上述原料粉碎過80目篩，按1∶1的重量比加水拌勻，裝在耐壓的塑料袋或布袋中，在1～1.5Kg/cm2的壓力下蒸汽滅菌30分鐘，降壓后趁熱倒在墊有紙的木盒中，冷卻至30℃以下，按0.5～1％(重量)的比例接種二級(jí)培養(yǎng)物，拌勻，蓋上紙，在30～35℃的溫度下培養(yǎng)24～48小時(shí)，當(dāng)白色菌絲充分生長，形成餅狀后，扣盤，將結(jié)塊的原料捏碎，再保溫培養(yǎng)2～5天，至開始產(chǎn)生多量的黃綠色粉狀物為止，最后將該三級(jí)培養(yǎng)物在40℃下干燥，得到成品。
本發(fā)明以稻殼為主要原料，余為玉米并加入少量豆粕，成本低廉，每公斤興達(dá)酶成本為1～1.5元人民幣。
經(jīng)檢測，興達(dá)酶的蛋白酶活性為6052單位/分·克，纖維素酶32.98單位/分·克，高于國內(nèi)同類產(chǎn)品。
用本發(fā)明的興達(dá)酶進(jìn)行飼喂肉雞試驗(yàn)，按0.2％的比例將興達(dá)酶加入基礎(chǔ)料(代誘導(dǎo)能2.9～3兆卡/公斤，粗蛋白21～19％)中，飼喂肉用仔雞，結(jié)果40目齡雞日增重35.81克，比不添加興達(dá)酶的對(duì)照組提高了7.57％，飼料增重比2∶12∶1，比對(duì)照組飼料報(bào)酬提高6.13％，成活率100％，比對(duì)照組提高2.5％，經(jīng)濟(jì)效益非常顯著。
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作更為詳細(xì)的描述。
實(shí)施例1a、一級(jí)種培養(yǎng)豆粕65克 淀粉18克瓊脂16克 硫酸鎂0.3克硫酸銨0.3克 磷酸二氫鉀0.4克先將豆粕置于容器中，加入650克水，煮沸18分鐘，過濾，在濾液中加入瓊脂，在微火上溶解，再加入淀粉、硫酸鎂、硫酸銨和磷酸二氫鉀混溶，加熱25分鐘，至沸，再添加650克水，攪勻后分裝試管，每支盛裝10毫升，在1.5Kg/cm2壓力下蒸汽滅菌30分鐘，將試管擺成與豎直方向夾15度角備用，在無菌條件下接入黃曲霉柱頭變種(Asperglllus flavus var coluranaris)和溫特曲霉(Asperglllus wentll)菌種，在32±1℃的溫度下培養(yǎng)8天，等菌種長滿全管時(shí)為止。
b、二級(jí)種培養(yǎng)麥夫170克 玉米粉30克在上述原料中加入333克水拌勻，裝入三角燒瓶中，每瓶裝15克料，料厚0.8cm，塞上棉塞，將口扎緊，在1.5Kg/cm2的壓力下蒸汽滅菌30分鐘，降壓后取出搖散，冷至室溫后，每瓶加入0.3克一級(jí)培養(yǎng)物，用接種鏟拌勻，在30℃的溫度下培養(yǎng)30小時(shí)，當(dāng)菌絲充分生長形成餅狀后，扣瓶，將瓶橫放，繼續(xù)保溫培養(yǎng)3天至黃綠色孢子充分長滿曲料為止。
c、三級(jí)種培養(yǎng)谷殼粉60公斤 玉米粉25公斤豆餅粉15公斤先將上述原料粉碎過80目篩，加入100公斤水拌勻，裝在布袋中，在1.5Kg/cm2的壓力下蒸汽滅菌30分鐘，降壓后趁熱倒在墊有紙的木盒中，冷卻至25℃，按1％(重量)的比例接種二級(jí)培養(yǎng)物，拌勻，蓋上紙，在31±1℃的溫度下培養(yǎng)36小時(shí)，當(dāng)白色菌絲充分生長，形成餅狀后，扣盤，將結(jié)塊的原料捏碎，再保溫培養(yǎng)3天，至開始產(chǎn)生大量的黃綠色粉狀物為止，最后將該三級(jí)培養(yǎng)物在35±2℃下干燥，得到成品。
實(shí)施例2該興達(dá)酚分三級(jí)培養(yǎng)而成a、一級(jí)種培養(yǎng)豆粕76克 淀粉12克瓊脂10.5克硫酸鎂0.6克硫酸銨0.5克 磷酸二氫鉀0.4克先將豆粕置于容器中，加入760克水，煮沸25分鐘，過濾，在濾液中加瓊脂，在微火上溶解，再加入淀粉、硫酸鎂、硫酸銨和磷酸二氫鉀混溶，加熱35分鐘至沸，再添加760克水，攪勻后分裝試管，每支盛裝8毫升，在1.5Kg/cm2壓力下蒸汽滅菌30分鐘，將試管擺成與豎直方向夾20度角備用，在無菌條件下接入黃曲霉柱頭變種(Aspergll1us flavus var coluranaris)和溫特曲霉(Asperglllus Wentll)菌種，在35±1℃的溫度下培養(yǎng)6天，等菌種長滿全管為止。
b、二級(jí)種培養(yǎng)麥夫130克 面粉70克將上述原料混合，加入333克水拌勻，裝入罐頭瓶中，每瓶裝20克料，料厚1.1cm，塞上棉塞，將口扎緊，在1Kg/cm2的壓力下蒸汽滅菌30分鐘，降壓后取出搖散，冷至室溫后，每瓶加入0.3克一級(jí)培養(yǎng)物，用接種鏟拌勻，在32±1℃的溫度下培養(yǎng)40小時(shí)，當(dāng)菌絲充分生長形成餅狀后，扣瓶，將瓶橫放，繼續(xù)保溫培養(yǎng)4天，至黃綠色孢子充分長滿曲料為止。
c、三級(jí)種培養(yǎng)谷殼粉70公斤玉米粉20公斤豆餅粉10公斤先將上述原料粉碎過80目篩，加入100公斤水拌勻，裝在塑料袋中，在1Kg/cm2的壓力下蒸汽滅30分鐘，降壓后趁熱倒在墊有紙的木盒中，冷卻至20℃，按1％(重量)的比例接種二級(jí)培養(yǎng)物，拌勻，蓋上紙，在33±1℃的溫度下培養(yǎng)28小時(shí)，當(dāng)白色菌絲充分生長，形成餅狀后，扣盤，將結(jié)塊的原料捏碎，再保溫培養(yǎng)5天，至開始產(chǎn)生多量的黃綠色粉狀物為止，最后將該三級(jí)培養(yǎng)物在30±2℃下干燥，得到興達(dá)酶成品。
權(quán)利要求
1.一種利用谷殼粉生產(chǎn)興達(dá)酶的方法，其特征在于，分三級(jí)培養(yǎng)而成a、一級(jí)種培養(yǎng)(所用原料為重量單位)豆粕64～80 ％ 淀粉9～18％瓊脂9～18％硫酸鎂0.15～0.6％硫酸銨0.15～0.6％ 磷酸二氫鉀0.15～0.6％先將豆粕置于容器中，加入10倍(重量)的水，煮沸15～25分鐘過濾，在濾液中加入瓊脂，在微火上溶解，再加入淀粉、硫酸鎂、硫酸銨和磷酸二氫鉀混溶，加熱20～40分鐘，加熱至沸，再添加10倍(重量)豆粕量的水，攪勻后分裝試管，每支盛裝5～10毫升，在1.5Kg/cm2壓力下蒸汽滅菌30分鐘，將試管擺成與豎直方向夾15～20度角備用，在無菌條件下接入黃曲霉柱頭變種(Asperglllus flavus var coluranarls)和溫特曲霉(Asperglllus wentll)菌種，在30～37℃的溫度下培養(yǎng)5～8天，等菌種長滿全管時(shí)為止。b、二級(jí)種培養(yǎng)(所用原料為重量單位)麥夫60～90％餅粕粉或淀粉10～40％將上述原料按1∶0.6(重量)的比例加水拌勻，裝入三角燒瓶或罐頭瓶中，每瓶裝料15～20克，料厚0.8～1.2cm，塞上棉塞，將口扎緊，在1～1.5Kg/cm2的壓力下蒸汽滅菌30分鐘，降壓后取出搖散，冷至室溫后，每瓶加入0.3克一級(jí)培養(yǎng)物，用接種鏟拌勻，在30～35℃的溫度下培養(yǎng)24～48小時(shí)，當(dāng)菌絲充分生長形成餅狀后，扣瓶，將瓶橫放，繼續(xù)保溫培養(yǎng)3～4天至黃綠色孢子充分長滿曲料為止。c、三級(jí)種培養(yǎng)(所用原料為重量單位)谷殼粉50～70％玉米粉20～40％豆餅粉5～15％先將上述原料粉碎過30目篩，按1∶1的重量比加水拌勻，裝在耐壓的塑料袋或布袋中，在1～1.5Kg/cm2的壓力下蒸汽滅菌30分鐘，降壓后趁熱倒在墊有紙的木盒中，冷卻至30℃以下，按0.5～1％(重量)的比例接種二級(jí)培養(yǎng)物，拌勻，蓋上紙，在30～35℃的溫度下培養(yǎng)24～48小時(shí)，當(dāng)白色菌絲充分生長，形成餅狀后，扣盤，將結(jié)塊的原料捏碎，再保溫培養(yǎng)2～5天，至開始產(chǎn)生多量的黃綠色粉狀物為止，最后將該三級(jí)培養(yǎng)物在40℃下干燥，得到成品。
全文摘要
一種生產(chǎn)纖維素酶和蛋白酶的方法。該方法先在豆粕、淀粉、瓊脂、硫酸鎂、硫酸銨和磷酸二氫鉀中接入黃曲霉柱頭變種和溫特曲霉菌種，得到一級(jí)種，再將一級(jí)種接入麥麩和餅粕粉中，培養(yǎng)得到二級(jí)種，將二級(jí)種接入谷殼粉玉米粉和豆餅粉中，培養(yǎng)干燥后得到成品。本發(fā)明以稻殼為主要原料，成本低廉，每公斤興達(dá)酶成本為1～1.5元人民幣。經(jīng)檢測，興達(dá)酶的蛋白酶活性為6052單位/分·克，纖維素酶32.98單位/分·克，用其飼喂雞豬，增重明顯。
文檔編號(hào)C12N1/22GK1117082SQ95100389
公開日1996年2月21日 申請日期1995年2月8日 優(yōu)先權(quán)日1995年2月8日
發(fā)明者戴榮袞 申請人:戴榮袞