專利名稱：一種竹蓀多糖的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物化工領(lǐng)域，提供了一種制備高純度的竹蓀系列多糖的方法。
竹蓀多糖具有明顯的抗腫瘤活性及消炎作用，已引起人們越來越多的關(guān)注。目前其它真菌多糖的分離制備已有許多研究報(bào)道，主要是利用其改善和刺激人體免疫系統(tǒng)，對腫瘤細(xì)胞具有抑制作用。國內(nèi)外已制成肌肉及靜脈注射針劑用于臨床腫瘤癌癥的治療，如利用香菇加工過程中的下角料和等外品為原料，或采用工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)的香菇菌絲體為原料，分離、提取并制成香菇多糖注射針劑。而竹蓀多糖對鼠腹腔癌增殖的抑制率達(dá)70％，對肉瘤180的抑制率達(dá)60％，顯示了較高的抗癌活性，已引起了醫(yī)學(xué)界重視。但由于竹蓀多糖制備原料—竹蓀子實(shí)體的價(jià)格較高，目前尚無關(guān)于純竹蓀多糖產(chǎn)品制備方法的報(bào)導(dǎo)。
本發(fā)明的目的是提供一種制備高純度竹蓀多糖的方法，利用該方法所制備的竹蓀多糖可制成含純竹蓀多糖的各種有價(jià)值的生物制品。
本發(fā)明的竹蓀多糖的制備方法是利用竹蓀菌，特別可以利用竹蓀加工中產(chǎn)生的下角料(包括菌蓋、菌托)或采用深層發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)的竹蓀營養(yǎng)菌絲體為原料，采用柱層析等生化提取分離手段而得到高純度的竹蓀多糖。具體地說將竹蓀菌原料經(jīng)預(yù)處理后，進(jìn)行熱水抽提，抽提工序在80～100℃下進(jìn)行1～10小時(shí)，抽提過程可重復(fù)2～5次，合并抽提液經(jīng)過濾或離心分離除去沉淀物，對上清液進(jìn)行濃縮后進(jìn)行醇析，醇析可用乙醇，處理5～30小時(shí)，醇析液過濾后回收乙醇，經(jīng)濃縮后可再用于醇析，收集沉淀物用水透析1～3日，再醇析得分離出沉淀，依次用無水乙醇，丙酮和乙醚洗滌即可得到粗多糖。為得到高純多糖，可將粗多糖用水溶解后上柱層析分離，采用DEAE-纖維素柱，如DE-52型或B4O72-型，并分別用蒸餾水或去離子水及硼砂溶液洗脫，收集濃縮層析分離物的含糖部分，再經(jīng)醇析，真空干燥即可得到高純竹蓀多糖。上述醇析，過濾或離心分離，回收醇，透析和真空干燥各工序的操作可按常規(guī)技術(shù)進(jìn)行，由高純竹蓀多糖可制得各種制品。
下面通過實(shí)例對本發(fā)明的技術(shù)給予進(jìn)一步地說明。
實(shí)例1取竹蓀下角料(包括菌蓋、菌托)及菌絲體干品200g，熱水抽提三次，合并抽提液，過濾后濃縮到200ml，加入三倍95％乙醇沉淀低溫過夜，過濾收集沉淀，回收乙醇，濃縮后再醇析，合并沉淀物對自來水透析2天，再醇析沉淀，依次用無水乙醇、丙酮和乙醚洗滌后可得60克粗多糖。溶解到一定體積后上柱，DEAE-纖維素(B4O72-型)柱層析分離，分別用二次蒸餾水、收集含糖部分，經(jīng)濃縮、醇析、真空干燥，得竹蓀多糖白色純品28克。經(jīng)配制、滅菌可制成竹蓀純多糖的注射針劑。
由上述實(shí)例，本發(fā)明提供了一種可供生產(chǎn)中采用的制備竹蓀多糖技術(shù)，特別是可以制備高純度竹蓀多糖，可用于制備竹蓀多糖的注射針劑。
權(quán)利要求
1.一種采用生化提取技術(shù)制備竹蓀多糖的方法，其特征是包括竹蓀菌的預(yù)處理，熱水抽提，醇析，透析和洗滌工序，其中熱水抽提工序是在80～100℃下用水進(jìn)行浸泡原料1～10小時(shí)，抽提過程可反復(fù)進(jìn)行2～5次。
2.按照權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于經(jīng)洗滌后的粗竹蓀多糖用柱層析分離法，分離柱用DEAE-纖維素柱，收集多糖部分得到高純度竹蓀多糖。
3.按照權(quán)利要求1，2所述的方法，其特征在于竹蓀菌原料利用竹蓀的菌蓋、菌托、竹蓀加工的下角料。
4.按照權(quán)利要求1，2所述的方法，其特征在于竹蓀菌原料用深層發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)的竹蓀營養(yǎng)菌絲體。
全文摘要
一種竹蓀多糖的制備方法是利用竹蓀的菌蓋、菌托和竹蓀加工的下角料或深層發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)的竹蓀營養(yǎng)菌絲體為原料，經(jīng)預(yù)處理，熱水抽提，醇析，透析和洗滌等主要工序制成粗多糖，其中熱水抽提工序是在80～100℃下用水進(jìn)行浸泡原料1～10小時(shí)，抽提過程可反復(fù)進(jìn)行2～5次，為得到高純度產(chǎn)品可將粗多糖制成溶液用DEAE-纖維素柱進(jìn)行層析分離，收集含多糖部分即可得到高純竹蓀多糖，該多糖可用來制備竹蓀純多糖的注射針劑。
文檔編號C12P19/04GK1165148SQ96115300
公開日1997年11月19日 申請日期1996年5月10日 優(yōu)先權(quán)日1996年5月10日
發(fā)明者杜昱光, 趙國良, 卜宗式, 林炳承, 白雪芳, 馬小軍 申請人:中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所