專利名稱：一種飼用復(fù)合酶及其生產(chǎn)技術(shù)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種飼用復(fù)合酶及其生產(chǎn)技術(shù)。
目前，飼用復(fù)合酶均有單一菌種，采用液體深層培養(yǎng)或固體發(fā)酵單獨(dú)培養(yǎng)工藝生成，即先生產(chǎn)出單一的酶制品，然后，再將二種以上的酶制品加入載體混配成復(fù)合酶，這樣，勢必使工藝流程復(fù)雜，投資費(fèi)用和日常操作、維護(hù)費(fèi)用增大，并且操作復(fù)雜，不易控制。
本發(fā)明的目的在于提供一種飼用復(fù)合酶及其生產(chǎn)技術(shù)，具體說，涉及一利采用多菌種混合同步培養(yǎng)工藝以生產(chǎn)飼用復(fù)合酶。
本發(fā)明的一種飼用復(fù)合酶的生產(chǎn)技術(shù)，依次按照下述過程生產(chǎn)將二種或二種以上的微生物菌種分別接種到培養(yǎng)基(PDA)中，在PH5-6，40-45℃下培養(yǎng)68-74小時，再分別轉(zhuǎn)接入新鮮培養(yǎng)基(一級)中，于40-45℃下培養(yǎng)36-48小時，然后，再分別轉(zhuǎn)接入新鮮培養(yǎng)基(二級)中，于40-45℃下培養(yǎng)36-48小時，之后，將二種或二種以上的二級按比例混合的菌種投入發(fā)酵培養(yǎng)基中，在40-45℃發(fā)酵45-50小時，再在低于60-70℃下干燥，粉碎得到本發(fā)明的飼用復(fù)合酶制劑。
所述的微生物菌種優(yōu)選米曲霉(Aspergllus Oryzae)和黑曲霉(AspergllusNiger)，由北京農(nóng)牧特生物工程研究所菌種保藏部提供飼料專用菌株。保藏號米曲霉為BAS-306和BAS-308；黑曲霉為BAS-356和BAS-359。
所述的混合微生物菌種的比例為米曲霉黑曲霉＝6-8∶4-2。
所述的接種菌種的培養(yǎng)基(PDA)的制備過程依次如卜取去皮馬鈴薯200克，切成小塊，加水1000毫升，煮沸30分鐘，過濾，取濾液，加水至1000毫升，混勻，加葡萄糖20克，瓊脂15克，溶解后，在1.1公斤/厘米2壓力下滅菌30分鐘，得到上述的培養(yǎng)基(PDA)。
所述的培養(yǎng)基(一級)或培養(yǎng)基(二級)制備過程依次如下(重量分?jǐn)?shù))取麩皮100，加入水80，混勻。
所述的發(fā)酵培養(yǎng)基(重量分?jǐn)?shù))依次按下述過程制備
取麩皮10、玉米面10，豆餅80、混勻，加入水100，混勻，再加入無機(jī)鹽1，混勻，在1.1公斤/厘米2壓力下滅菌1小時，得到上述的發(fā)酵培養(yǎng)基。
所述的麩皮優(yōu)選新鮮小麥麩皮，標(biāo)準(zhǔn)如卜粗蛋白＞13％，粗纖維＜10％，粗灰分＜6.0％，水分＜13％。
所述的玉米面優(yōu)選新鮮玉米面，標(biāo)準(zhǔn)如下(重量百分比)粗蛋白＞8％，粗纖維＜5.0％，粗灰分＜2.6％，水分＜14.0％。
所述的豆餅優(yōu)選新鮮豆餅，標(biāo)準(zhǔn)如下(重量百分比)粗蛋白＞40.0％，粗脂肪＜8.0％，粗纖維＜6.0％，粗灰分＜7.0％，水分＜13.0％。
所述的復(fù)合酶含有中性蛋白酶，酸性蛋白酶，α-淀粉酶，糖化酶，纖維素酶，果膠酶和脂肪酶。
本發(fā)明的一種復(fù)合酶及其生產(chǎn)技術(shù)具有下列優(yōu)點(diǎn)1，設(shè)備投資只是液體深層培養(yǎng)工藝的10％。
2，原料廣、價格低、減少投資。
3，培養(yǎng)周期短，省工、節(jié)能。
4，操作簡便，容易推廣。
5，產(chǎn)品酶系多，同時富含多種維生素、氨基酸和促生長的活性物質(zhì)。
6，產(chǎn)品成本低，市場前景好。
下面結(jié)合實(shí)施例描述本發(fā)明，它是本發(fā)明的優(yōu)選方案，不限制本發(fā)明，本發(fā)明的范圍由權(quán)利要求限定。實(shí)施例1將在低溫保藏的米曲霉和黑曲霉斜面菌種各1株取出分別轉(zhuǎn)接到裝有10ml培養(yǎng)基(PDA)的φ20×200mm的玻璃試管內(nèi)，胃于恒溫培養(yǎng)箱中，溫度控制在35-40℃，經(jīng)過72小時待菌絲長滿斜面成熟后轉(zhuǎn)接到培養(yǎng)基(一級)50克的容積為500ml的三角玻璃器皿中，置于恒溫培養(yǎng)箱中，溫度控制在35-40℃，經(jīng)過48小時待白色菌絲布滿培養(yǎng)基表面，備用；將上述培養(yǎng)的米曲霉1.05公斤和黑曲霉0.45公斤一級菌種混合轉(zhuǎn)接到裝有150公斤發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵機(jī)中，在35-40℃下培養(yǎng)16小時，第一次翻曲，繼續(xù)在35-40℃下培養(yǎng)24小時，第二次翻曲后，繼續(xù)培養(yǎng)8小時，待在培養(yǎng)基上長出的白色菌絲變化成黃綠色孢子，然后將其送入干燥箱中，在65℃于燥50分鐘，輸入粉碎機(jī)中粉碎成40目粉狀物，質(zhì)檢合格后用雙層塑料袋真空包裝成1公斤裝本發(fā)明飼用復(fù)合酶制品150袋。實(shí)施例2將在低溫保藏的米曲霉和黑曲霉斜面菌種各1株取出分別轉(zhuǎn)接到裝有5ml培養(yǎng)基(PDA)的φ5×150mm的玻璃試管內(nèi)，置于恒溫培養(yǎng)箱中，溫度控制在40-45℃，經(jīng)過68小時待菌絲長滿斜面成熟后轉(zhuǎn)接到培養(yǎng)基(一級)30克的容積為500ml的三角玻璃器皿中，置于恒溫培養(yǎng)箱中，溫度控制在40-45℃，經(jīng)過40小時待白色菌絲布滿培養(yǎng)墓表面，備用；將上述培養(yǎng)的米曲霉0.7公斤和黑曲霉0.3公斤一級菌種混合轉(zhuǎn)接到裝有100公斤發(fā)酵培養(yǎng)墓的發(fā)酵機(jī)中，在40-45℃下培養(yǎng)14小時，第一次翻曲，繼續(xù)在40-45℃下培養(yǎng)20小時，第二次翻曲后，繼續(xù)培養(yǎng)6小時，待在培養(yǎng)基上長出的白色菌絲變化成黃綠色孢子，然后將其送入干燥箱中，在60℃干燥50分鐘，輸入粉碎機(jī)中粉碎成40目粉狀物，質(zhì)檢合格后用雙層塑料袋真空包裝成1公斤裝本發(fā)明飼用復(fù)合酶制品100袋。
本發(fā)明的飼用復(fù)合酶適用于豬、雞、鵝、牛、羊、兔和魚類飼用。
本發(fā)明的飼用復(fù)合酶的使用量應(yīng)為飼料的0.2-0.8％。
本發(fā)明的飼用復(fù)合酶的使用方法分為(1)干混法；(2)濕混法(將本品混入半干或溫粥狀飼料中)。
下面列出本發(fā)明的飼用復(fù)合酶(篩稱復(fù)合酶)對肓成豬飼喂效果；1996年×月××日-×月××日選擇杜長北三元雜交豬，體重平均9公斤，共試80頭，20頭為1組，共四組；試驗(yàn)細(xì)添加量1％，0.5％，0.2％；對照組飼料不加復(fù)合酶；表1復(fù)合酶對育成豬增重效果
表2復(fù)合酶對育成豬肉比
從上述試驗(yàn)可以認(rèn)為，本發(fā)明的飼用復(fù)合酶飼喂動物安全，無副作用，使用方便，對提高飼料利用率，增重具有顯著的經(jīng)濟(jì)效益。
權(quán)利要求
1，一種飼用復(fù)合酶的生產(chǎn)技術(shù)，依次按照下述過程生產(chǎn)將二種或二種以上的微生物菌種分別接種到培養(yǎng)基(PDA)中，在PH5-6，40-45℃下培養(yǎng)68-74小時，再分別轉(zhuǎn)接入新鮮培養(yǎng)基(一級)中，于40-45℃下培養(yǎng)36-48小時，然后，再分別轉(zhuǎn)接入新鮮培養(yǎng)基(二級)中，于40-45℃下培養(yǎng)36-48小時，之后，將二種或二種以上的二級按比例混合的菌種投入發(fā)酵培養(yǎng)基中，在40-45℃發(fā)酵45-50小時，再在低于60-80℃下干燥，粉碎得到本發(fā)明的飼用復(fù)合酶制劑。
2，按照權(quán)利要求1的制備方法，具特征在于所述的微生物菌種優(yōu)選米曲霉(Aspergllus Oryzae)和黑曲霉(Aspergllus Niger)。
3，按照權(quán)利要求1的制備方法，其特征在于所述的混合微生物菌種的比例為米曲霉黑曲霉＝6-8∶4-2。
4，按照權(quán)利要求1的制備方法，其特征在于所述的接種菌種的培養(yǎng)基(PDA)的制備過程依次如下取去皮馬鈴薯200克，切成小塊，加水1000毫升，煮沸30分鐘，過濾，取濾液，加水至1000毫升，混勻，加葡萄糖20克，瓊脂15克，溶解后，在1.1公斤/厘米2壓力下滅菌30分鐘，得到上述的培養(yǎng)基(PDA)。
5，按照權(quán)利要求1的制備方法，其特征在于所述的培養(yǎng)基(一級)或培養(yǎng)基(制備過程依次如下(重量分?jǐn)?shù))取麩皮100，加入水80，混勻。
6，按照權(quán)利要求1的制備方法，其特征在于所述的發(fā)酵培養(yǎng)基(重量分?jǐn)?shù))依次按下述過程制備取麩皮10、玉米面10，豆餅80、混勻，加入水100，混勻，再加入無機(jī)鹽1，混勻，在1.1公斤/厘米2壓力下滅菌1小時，得到上述的發(fā)酵培養(yǎng)基。
7，按照權(quán)利要求5-6之1的制備方法，其特征在于所述的麩皮優(yōu)選新鮮小麥麩皮，標(biāo)準(zhǔn)如下粗蛋白＞13％，粗纖維＜10％，粗灰分＜6.0％，水分＜13％。
8，按照權(quán)利要求6的制備方法，其特征在于所述的玉米面優(yōu)選新鮮玉米面，標(biāo)準(zhǔn)如下(重量百分比)粗蛋白＞8％，粗纖維＜5.0％，粗灰分＜26％，水分＜14.0％。
9，按照權(quán)利要求1的制備方法，其特征在于所述的豆餅優(yōu)選新鮮豆餅，標(biāo)準(zhǔn)如下(重量百分比)粗蛋白＞40.0％，粗脂肪＜8.0％，粗纖維＜6.0％，粗灰分＜7.0％，水分＜13.0％。
10，按照權(quán)利要求1-6之1的制備方法制備的飼用復(fù)合酶。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種飼用復(fù)合酶及其生產(chǎn)技術(shù)，用多菌種混合同步培養(yǎng)工藝以生產(chǎn)飼用復(fù)合酶。將二種或二種以上的微生物菌種分別接種到培養(yǎng)基(PDA)中，在pH5—6,40—45℃下培養(yǎng)68—74小時,再分別轉(zhuǎn)接入新鮮培養(yǎng)基(×級)中,于40—45℃下培養(yǎng)38—50小時,之后,將二種或二種以上的按比例混合的菌種投入發(fā)酵培養(yǎng)基中,在40—45℃發(fā)酵45—50小時,再在低于60—70℃下干燥,粉碎得到本發(fā)明的飼用復(fù)合酶制劑。
文檔編號C12N1/14GK1175361SQ97100760
公開日1998年3月11日 申請日期1997年2月21日 優(yōu)先權(quán)日1997年2月21日
發(fā)明者聶桂蘭 申請人:聶桂蘭