專(zhuān)利名稱(chēng)：結(jié)核菌快速培養(yǎng)基及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明提供一種結(jié)核菌快速培養(yǎng)基及其制備方法，它屬于結(jié)核菌存在測(cè)定的特殊培養(yǎng)基技術(shù)領(lǐng)域。
目前我國(guó)普遍使用一種被稱(chēng)之為“改良羅氏培養(yǎng)基”的固體結(jié)核菌培養(yǎng)基來(lái)對(duì)結(jié)核菌進(jìn)行體外人工分離培養(yǎng)，其成分為“天門(mén)冬酰胺0.72克、磷酸二氫鉀0.96克、枸櫞酸鎂0.12克、硫酸鎂(MgSO4·7H2O)0.048克、中性甘油2.4毫升、水120毫升、馬鈴薯粉6克、新鮮雞蛋6-8只、1％孔雀綠水溶液8毫升”；其制法為“將天門(mén)冬酰胺、磷酸二氫鉀、枸櫞酸鎂及甘油加水后，置于沸水浴中加熱溶解。再加入馬鈴薯粉，繼續(xù)在沸水浴中加熱30分鐘，時(shí)加攪拌，使成均勻糊狀。待冷至65℃時(shí)，加入新鮮全蛋液200毫升及1％孔雀綠8毫升，充分?jǐn)噭蚝笥秒p層紗布過(guò)濾，然后分裝于大試管中，每管10毫升，用橡皮塞塞緊，置成長(zhǎng)斜面。用85℃、150分鐘流動(dòng)蒸氣滅菌即成”。這些內(nèi)容記載在福州部隊(duì)總醫(yī)院編、朱忠勇陳之航主編、上?？茖W(xué)技術(shù)出版社1978年4月出版的《臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)》第454頁(yè)上。由于現(xiàn)有的固體結(jié)核菌培養(yǎng)基均是靠各醫(yī)院去配制而無(wú)現(xiàn)成產(chǎn)品可購(gòu)，這就需要院方單獨(dú)為此添置一套相應(yīng)的生產(chǎn)設(shè)備，既加大了醫(yī)院的設(shè)備開(kāi)支，又相應(yīng)增加了配制工作量，由以上所述可知，固體結(jié)核菌培養(yǎng)基的現(xiàn)有配制過(guò)程較為復(fù)雜和麻煩，故醫(yī)院只能根據(jù)近期內(nèi)固體結(jié)核菌培養(yǎng)基的大致用量予先配制一些備用，但是，全國(guó)幾千家醫(yī)院各自分散配制的固體結(jié)核菌培養(yǎng)基，均存在著質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)不一致、成品率不高、不易長(zhǎng)期貯存及貯存期稍長(zhǎng)因水份散失、藥物分解而使檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)的缺陷。臨床檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)現(xiàn)有的固體結(jié)核菌培養(yǎng)基存在以下缺陷1、由于現(xiàn)有的固體結(jié)核菌培養(yǎng)基保藏在大試管中，管口用橡皮塞塞緊，故該培養(yǎng)基貯存時(shí)被密封的程度較差，其內(nèi)的水份易散失，以至該培養(yǎng)基的貯存期很短(僅3個(gè)月)，這樣便不能通過(guò)工業(yè)化生產(chǎn)手段進(jìn)行大批量生產(chǎn)，而只能由醫(yī)院自行配制，因此，目前在我國(guó)固體結(jié)核菌培養(yǎng)基僅有醫(yī)院配制品而并無(wú)工業(yè)化產(chǎn)品。2、眾所周知，結(jié)核菌的生長(zhǎng)繁殖所需條件較高，其培養(yǎng)基中需有多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，而如上所述可知，現(xiàn)有的固體結(jié)核菌培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的種類(lèi)少，另外其內(nèi)也沒(méi)有能加快結(jié)核菌新陳代謝活動(dòng)以提高結(jié)核菌生長(zhǎng)繁殖速度的能量物質(zhì)和植物生長(zhǎng)刺激物質(zhì)，這樣使得結(jié)核菌在現(xiàn)有的固體結(jié)核菌培養(yǎng)基中不能進(jìn)行很好地生長(zhǎng)繁殖，分裂周期長(zhǎng)達(dá)12-16小時(shí)，要4-6周方能看到菌落，因此，使用現(xiàn)有的固體結(jié)核菌培養(yǎng)基來(lái)對(duì)結(jié)核菌進(jìn)行體外人工分離培養(yǎng)時(shí)，其檢測(cè)速度相當(dāng)慢，陽(yáng)性檢出率低，不利于結(jié)核病的早期診斷和治療。
本發(fā)明的目的在于提供一種結(jié)核菌快速培養(yǎng)基及其制備方法，它是采用基礎(chǔ)物質(zhì)、能量物質(zhì)、植物生長(zhǎng)刺激物質(zhì)混合配制而成，具有貯存期長(zhǎng)，易于標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)，檢測(cè)快速，陽(yáng)性檢出率高的優(yōu)越性。
本發(fā)明所提供的結(jié)核菌快速培養(yǎng)基，它是由基礎(chǔ)物質(zhì)、能量物質(zhì)、植物生長(zhǎng)刺激物質(zhì)混合配制而成，基礎(chǔ)物質(zhì)中有磷酸二氫鉀、硫酸鎂(MgSO4·7H2O)、枸櫞酸鎂、檸檬酸鐵銨、天門(mén)冬酰胺、中性甘油、馬鈴薯粉、新鮮雞蛋液、2％孔雀綠水溶液、水、動(dòng)物血清，能量物質(zhì)中有輔酶A、三磷酸腺苷、細(xì)胞色素丙，植物生長(zhǎng)刺激物質(zhì)中有α-萘乙酸，每1000克結(jié)核菌快速培養(yǎng)基中各組分的含量為磷酸二氫鉀1.36-1.4克新鮮雞蛋液 560-600克硫酸鎂 0.136-0.14克2％孔雀綠水溶液11-13克枸櫞酸鎂 0.3-0.4克水 300-340克檸檬酸鐵銨 0.028-0.03克動(dòng)物血清 56-60克天門(mén)冬酰胺2.06-2.1克輔酶A0.4-0.8克中性甘油 6-8克三磷酸腺苷 0.04-0.08克馬鈴薯粉 17-17.5克細(xì)胞色素丙 0.045-0.075克α-萘乙酸0.05-0.1毫克。所述的動(dòng)物血清可為羊血清、牛血清、豬血清、人血清中的任意一種。
所述水可用同等重量的牛肉或牛、豬心消化液代替，所述能量物質(zhì)中還可有長(zhǎng)效維生素B12，所述植物生長(zhǎng)刺激物質(zhì)中還可有2,4-二氯苯乙酸和6-糠基氯基嘌呤，每1000克結(jié)核菌快速培養(yǎng)基中上述組分的含量為長(zhǎng)效維生素B12 0.25-0.75克2,4-二氯苯乙酸 0.05-0.15克6-糠基氯基嘌呤 5-15毫克。
制備每1000克結(jié)核菌快速培養(yǎng)基的方法，它依次包括如下步驟(a)、制糊將17-17.5克的馬鈴薯粉加150-170克水后，置于沸水浴中加熱，時(shí)加攪拌，使成均勻糊狀，自然降至室溫后備用；(b)、混合調(diào)配將1.36-1.4克的磷酸二氫鉀、0.136-0.14克的硫酸鎂、0.3-0.4克的枸櫞酸鎂、0.028-0.03克的檸檬酸鐵銨、2.06-2.1克的天門(mén)冬酰胺、6-8克的中性甘油加150-170克水后，置于沸水浴中加熱溶解，待冷至50℃以下時(shí)，加入560-600克的新鮮雞蛋液、56-60克的動(dòng)物血清、0.4-0.8克的輔酶A、0.04-0.08克的三磷酸腺苷、0.045-0.075克的細(xì)胞色素丙、0.05-0.1毫克的α-萘乙酸，充分?jǐn)噭蚝螅偌尤?67-187.5克的馬鈴薯糊及11-13克的2％孔雀綠水溶液，并經(jīng)充分?jǐn)噭蚝蟮?000克混合物；(c)、分裝及密封將混合物分裝于大試管中，每管分裝5克，置成長(zhǎng)斜面后，熔封；(d)、滅菌采用血清凝固器對(duì)大試管進(jìn)行滅菌，滅菌條件為頭日，85℃,30分鐘；次日，80℃,30分鐘；第三日，80℃,30分鐘。
上述(a)、(b)兩步驟還可同時(shí)用(e)、(f)兩步驟代替(e)、制糊將17-17.5克的馬鈴著粉加150-170克牛肉或牛、豬心消化液后，置于沸水浴中加熱，時(shí)加攪拌，使成均勻糊狀，自然降至室溫后備用
(f)、混合調(diào)配將1.36-1.4克的磷酸二氫鉀、0.136-0.14克的硫酸鎂、0.3-0.4克的枸櫞酸鎂、0.028-0.03克的檸檬酸鐵銨、2.06-2.1克的天門(mén)冬酰胺、6-8克的中性甘油加150-170克牛肉或牛、豬心消化液后，置于沸水浴中加熱溶解，待冷至50℃以下時(shí)，加入560-600克的新鮮雞蛋液、56-60克的動(dòng)物血清、0.4-0.8克的輔酶A、0.04-0.08克的三磷酸腺苷、0.045-0.075克的細(xì)胞色素丙、0.25-0.75克的長(zhǎng)效維生素B12、0.05-0.1毫克的α-萘乙酸、0.05-0.15克的2,4-二氯苯乙酸、5-15毫克的6-糠基氯基嘌呤，充分?jǐn)噭蚝螅偌尤?67-187.5克的馬鈴薯糊及11-13克的2％孔雀綠水溶液，并經(jīng)充分?jǐn)噭蚝蟮?000克混合物。
所述的動(dòng)物血清可為羊血清、牛血清、豬血清、人血清中的任意一種。
制備本發(fā)明所述的結(jié)核菌快速培養(yǎng)基時(shí)，所用器皿、試管須經(jīng)高壓蒸氣滅菌后使用。
打制新鮮雞蛋液時(shí)所用雞蛋先用清水洗凈蛋殼，用75％乙醇浸泡30分鐘，以滅菌紗布擦干后打入滅菌容器內(nèi)。
牛內(nèi)或牛、豬心消化液的成分及制法記載在福州部隊(duì)總醫(yī)院編、朱忠勇陳之航主編、上?？茖W(xué)技術(shù)出版社1978年4月出版的《臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)》第440頁(yè)上。
由檢驗(yàn)師本人取本發(fā)明方法制備的結(jié)核菌快速培養(yǎng)基即可對(duì)病人實(shí)施結(jié)核菌檢測(cè)，根本無(wú)須依賴(lài)各醫(yī)院制劑室予先去配制，也無(wú)須去專(zhuān)門(mén)準(zhǔn)備一套用以配制結(jié)核菌快速培養(yǎng)基的設(shè)備，故減少了醫(yī)院的設(shè)備開(kāi)支，又目應(yīng)減輕了配制工作量；另外，本發(fā)明方法制備的結(jié)核菌快速培養(yǎng)基可現(xiàn)開(kāi)現(xiàn)用，故不會(huì)出現(xiàn)浪費(fèi)現(xiàn)象，不會(huì)出現(xiàn)貯存期稍長(zhǎng)因水份散失、藥物分解而使檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)的現(xiàn)象，因此，在一定程度上保證了檢測(cè)的準(zhǔn)確有效，提高了醫(yī)療質(zhì)量。
本發(fā)明所述的結(jié)核菌快速培養(yǎng)基及其制備方法，具有如下優(yōu)點(diǎn)
(1)、本發(fā)明所述的結(jié)核菌快速培養(yǎng)基是采用基礎(chǔ)物質(zhì)、能量物質(zhì)、植物生長(zhǎng)刺激物質(zhì)，通過(guò)大規(guī)模混合生產(chǎn)技術(shù)，經(jīng)制糊、混合調(diào)配、分裝及熔封、滅菌步驟配制而成，這樣，本發(fā)明提供了一種采用工業(yè)化生產(chǎn)手段制備結(jié)核菌快速培養(yǎng)基的方法，使得結(jié)核菌快速培養(yǎng)基易于標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)，填補(bǔ)了我國(guó)醫(yī)藥工業(yè)的一項(xiàng)空白；如上所述本發(fā)明所述的結(jié)核菌快速培養(yǎng)基是采用熔封方法保藏在大試管中，該培養(yǎng)基貯存時(shí)被密封的程度相當(dāng)好，使得該培養(yǎng)基內(nèi)的水份不易散失，故大大延長(zhǎng)了該培養(yǎng)基的貯存期限。
(2)、如上所述，本發(fā)明所述的結(jié)核菌快速培養(yǎng)基中含有基礎(chǔ)物質(zhì)，基礎(chǔ)物質(zhì)中包含現(xiàn)有固體結(jié)核菌培養(yǎng)基中所有的9種組分，它們?yōu)榱姿岫肉洝⒘蛩徭V(MgSO4·7H2O)、枸櫞酸鎂、天門(mén)冬酰胺、中性甘油、馬鈴薯粉、新鮮雞蛋液、2％孔雀綠水溶液、水，前8種組分所起的作用分別為馬鈴薯粉、新鮮雞蛋液為營(yíng)養(yǎng)物，蛋黃中含有磷、磷脂和一些鹽類(lèi)，雞蛋白能中和脂肪酸的毒性并有緩沖作用，枸櫞酸鎂、中性甘油補(bǔ)充碳源，硫酸鎂等鹽類(lèi)供給鎂、鉀等元素，有調(diào)節(jié)滲透壓的作用，使結(jié)核菌的細(xì)胞膜有良好的通透性，天門(mén)冬酰胺為氮源，可促進(jìn)結(jié)核菌的生長(zhǎng)和繁殖，磷酸二氫鉀為緩沖劑，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基PH值，2％孔雀綠水溶液可抑制標(biāo)本中部分雜菌的生長(zhǎng)，另外，基礎(chǔ)物質(zhì)中還有檸檬酸鐵銨和動(dòng)物血清，且基礎(chǔ)物質(zhì)中的水還可用同等重量的牛肉或牛、豬心消化液代替，檸檬酸鐵銨可提供一定的鐵質(zhì)以滿(mǎn)足結(jié)核菌生長(zhǎng)繁殖所需，動(dòng)物血清中有X生長(zhǎng)因子、V生長(zhǎng)因子及大量的高蛋白營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，牛肉或牛、豬心消化液可作結(jié)核菌增菌培養(yǎng)用，因此，本發(fā)明所述的結(jié)核菌快速培養(yǎng)基與現(xiàn)有的固體結(jié)核菌培養(yǎng)基相比，其內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的種類(lèi)多，它可為結(jié)核菌的生長(zhǎng)繁殖提供充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；本發(fā)明所述的結(jié)核菌快速培養(yǎng)基中還含有能量物質(zhì)和植物生長(zhǎng)刺激物質(zhì)，能量物質(zhì)可加速結(jié)核菌的新陳代謝活動(dòng)，能提高結(jié)核菌的生長(zhǎng)繁殖速度，植物生長(zhǎng)刺激物質(zhì)能促進(jìn)植物的生長(zhǎng)，而結(jié)核菌與植物細(xì)胞一樣，均有細(xì)胞壁，故植物生長(zhǎng)刺激物質(zhì)同樣能提高結(jié)核菌的生長(zhǎng)繁殖速度；綜上所述，本發(fā)明所述的結(jié)核菌快速培養(yǎng)基中既有可滿(mǎn)足結(jié)核菌生長(zhǎng)繁殖所需的多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，又有能加快結(jié)核菌新陳代謝活動(dòng)以提高其生長(zhǎng)繁殖速度的能量物質(zhì)和植物生長(zhǎng)刺激物質(zhì)，這樣使得結(jié)構(gòu)菌在本發(fā)明所述的結(jié)核菌快速培養(yǎng)基中能夠進(jìn)行很好地生長(zhǎng)繁殖，且分裂周期大為縮短，因此，使用本發(fā)明所述的結(jié)核菌快速培養(yǎng)基來(lái)對(duì)結(jié)核菌進(jìn)行體外人工分離培養(yǎng)時(shí)，其檢測(cè)速度相當(dāng)快，陽(yáng)性檢出率高，有利于結(jié)核病的早期診斷和治療。
經(jīng)對(duì)本發(fā)明方法制備的結(jié)核菌快速培養(yǎng)基進(jìn)行檢測(cè)，其質(zhì)量穩(wěn)定可靠，保存期可長(zhǎng)達(dá)一年以上，易于標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)，便于流通、貯存和臨床使用；從臨床上使用本結(jié)核菌快速培養(yǎng)基的初步統(tǒng)計(jì)來(lái)看，用本結(jié)核菌快速培養(yǎng)基檢測(cè)結(jié)核菌的檢測(cè)速度為1-2周，且陽(yáng)性檢出率高。
以下結(jié)合本發(fā)明的三個(gè)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明實(shí)施例一制備每1000克結(jié)核菌快速培養(yǎng)基的方法，它依次包括如下步驟制糊將17克的馬鈴薯粉加167.5克牛肉或牛、豬心消化液后，置于沸水浴中加熱，時(shí)加攪拌，使成均勻糊狀，自然降至室溫后備用；混合調(diào)配將1.36克的磷酸二氫鉀、0.136克的硫酸鎂、0.3克的枸櫞酸鎂、0.028克的檸檬酸鐵銨、2.06克的天門(mén)冬酰胺、6克的中性甘油加167.5克牛肉或牛、豬心消化液后，置于沸水浴中加熱溶解，待冷至40℃時(shí)，加入570.32595克的新鮮雞蛋液、56克的羊血清、0.4克的輔酶A、0.04克的三磷酸腺苷、0.045克的細(xì)胞色素丙、0.25克的長(zhǎng)效維生素B12、0.05毫克的α-萘乙酸、0.05克的2,4-二氯苯乙酸、5毫克的6-糠基氯基嘌呤，充分?jǐn)噭蚝?，再加?84.5克的馬鈴薯糊及11克的2％孔雀綠水溶液，并經(jīng)充分?jǐn)噭蚝蟮?000克混合物。
分裝及密封
將混合物分裝于大試管中，每管分裝5克，置成長(zhǎng)斜面后，熔封；滅菌采用血清凝固器對(duì)大試管進(jìn)行滅菌，滅菌條件為頭日，85℃,30分鐘；次日，80℃,30分鐘；第三日，80℃,30分鐘，即得成品。
實(shí)施例二制備每1000克結(jié)核菌快速培養(yǎng)基的方法，它依次包括如下步驟制糊將17.25克的馬鈴薯粉加155克水后，置于沸水浴中加熱，時(shí)加攪拌，使成均勻糊狀，自然降至室溫后備用；混合調(diào)配將1.38克的磷酸二氫鉀、0.138克的硫酸鎂、0.35克的枸櫞酸鎂、0.029克的檸檬酸鐵銨、2.08克的天門(mén)冬酰胺、7克的中性甘油加155克水后，置于沸水浴中加熱溶解，待冷至45℃時(shí)，加入591.052925克的新鮮雞蛋液、58克的牛血清、0.6克的輔酶A、0.06克的三磷酸腺苷、0.06克的細(xì)胞色素丙、0.075毫克的α-萘乙酸，充分?jǐn)噭蚝?，再加?72.25克的馬鈴薯糊及12克的2％孔雀綠水溶液，并經(jīng)充分?jǐn)噭蚝蟮?000克混合物；分裝及密封(略)；滅菌(略)。
分裝及密封、滅菌的工藝步驟及其工藝條件與實(shí)施例一相同。
實(shí)施例三制備每1000克結(jié)核菌快速培養(yǎng)基的方法，它依次包括如下步驟制糊將17.5克的馬鈴薯粉加150克水后，置于沸水浴中加熱，時(shí)加攪拌，使成均勻糊狀，自然降至室溫后備用；混合調(diào)配將1.4克的磷酸二氫鉀、0.14克的硫酸鎂、0.4克的枸櫞酸鎂、0.03克的檸檬酸鐵銨、2.1克的天門(mén)冬酰胺、8克的中性甘油加150克水后，置于沸水浴中加熱溶解，待冷至48℃時(shí)，加入596.4749克的新鮮雞蛋液、60克的豬血清、0.8克的輔酶A、0.08克的三磷酸腺苷、0.075克的細(xì)胞色素丙、0.1毫克的α-萘乙酸，充分?jǐn)噭蚝?，再加?67.5克的馬鈴薯糊及13克的2％孔雀綠水溶液，并經(jīng)充分?jǐn)噭蚝蟮?000克混合物；分裝及密封(略)；滅菌(略)。
分裝及密封、滅菌的工藝步驟及其工藝條件與實(shí)施例一相同。
權(quán)利要求
1.結(jié)核菌快速培養(yǎng)基，其特征在于它是由基礎(chǔ)物質(zhì)、能量物質(zhì)、植物生長(zhǎng)刺激物質(zhì)混合配制而成，基礎(chǔ)物質(zhì)中有磷酸二氫鉀、硫酸鎂(MgSO4·7H2O)、枸櫞酸鎂、檸檬酸鐵銨、天門(mén)冬酰胺、中性甘油、馬鈴薯粉、新鮮雞蛋液、2％孔雀綠水溶液、水、動(dòng)物血清，能量物質(zhì)中有輔酶A、三磷酸腺苷、細(xì)胞色素丙，植物生長(zhǎng)刺激物質(zhì)中有α-萘乙酸，每1000克結(jié)核菌快速培養(yǎng)基中各組分的含量為磷酸二氫鉀 1.36-1.4克 新鮮雞蛋液 560-600克硫酸鎂 0.136-0.14克 2％孔雀綠水溶液11-13克枸櫞酸鎂 0.3-0.4克 水 300-340克檸檬酸鐵銨 0.028-0.03克 動(dòng)物血清 56-60克天門(mén)冬酰胺 2.06-2.1克 輔酶A0.4-0.8克中性甘油 6-8克 三磷酸腺苷 0.04-0.08克馬鈴薯粉 17-17.5克 細(xì)胞色素丙 0.045-0.075克α-萘乙酸 0.05-0.1毫克。
2.一種制備結(jié)核菌快速培養(yǎng)基的方法，其特征在于制備每1000克結(jié)核菌快速培養(yǎng)基的方法，它依次包括如下步驟(a)、制糊將17-17.5克的馬鈴薯粉加150-170克水后，置于沸水浴中加熱，時(shí)加攪拌，使成均勻糊狀，自然降至室溫后備用；(b)、混合調(diào)配將1.36-1.4克的磷酸二氫鉀、0.136-0.14克的硫酸鎂、0.3-0.4克的枸櫞酸鎂、0.028-0.03克的檸檬酸鐵銨、2.06-2.1克的天門(mén)冬酰胺、6-8克的中性甘油加150-170克水后，置于沸水浴中加熱溶解，待冷至50℃以下時(shí)，加入560-600克的新鮮雞蛋液、56-60克的動(dòng)物血清、0.4-0.8克的輔酶A、0.04-0.08克的三磷酸腺苷、0.045-0.075克的細(xì)胞色素丙、0.05-0.1毫克的α-萘乙酸，充分?jǐn)噭蚝?，再加?67-187.5克的馬鈴薯糊及11-13克的2％孔雀綠水溶液，并經(jīng)充分?jǐn)噭蚝蟮?000克混合物；(c)、分裝及密封將混合物分裝于大試管中，每管分裝5克，置成長(zhǎng)斜面后，熔封；(d)、滅菌采用血清凝固器對(duì)大試管進(jìn)行滅菌，滅菌條件為頭日，85℃,30分鐘；次日，80℃,30分鐘；第三日，80℃,30分鐘。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)核菌快速培養(yǎng)基，其特征在于所述水用同等重量的牛肉或牛、豬心消化液代替，所述能量物質(zhì)中有長(zhǎng)效維生素B12，所述植物生長(zhǎng)刺激物質(zhì)中有2,4-二氯苯乙酸和6-糠基氯基嘌呤，每1000克結(jié)核菌快速培養(yǎng)基中上述組分的含量為長(zhǎng)效維生素B12 0.25-0.75克 2,4-二氯苯乙酸 0.05-0.15克6-糠基氯基嘌呤 5-15毫克。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種制備結(jié)核菌快速培養(yǎng)基的方法，其特征在于2中(a)、(b)同時(shí)用(e)、(f)代替(e)、制糊將17-17.5克的馬鈴薯粉加150-170克牛肉或牛、豬心消化液后，置于沸水浴中加熱，時(shí)加攪拌，使成均勻糊狀，自然降至室溫后備用(f)、混合調(diào)配將1.36-1.4克的磷酸二氫鉀、0.136-0.14克的硫酸鎂、0.3-0.4克的枸櫞酸鎂、0.028-0.03克的檸檬酸鐵銨、2.06-2.1克的天門(mén)冬酰胺、6-8克的中性甘油加150-170克牛肉或牛、豬心消化液后，置于沸水浴中加熱溶解，待冷至50℃以下時(shí)，加入560-600克的新鮮雞蛋液、56-60克的動(dòng)物血清、0.4-0.8克的輔酶A、0.04-0.08克的三磷酸腺苷、0.045-0.075克的細(xì)胞色素丙、0.25-0.75克的長(zhǎng)效維生素B12、0.05-0.1毫克的α-萘乙酸、0.05-0.15克的2,4-二氯苯乙酸、5-15毫克的6-糠基氯基嘌呤，充分?jǐn)噭蚝?，再加?67-187.5克的馬鈴薯糊及11-13克的2％孔雀綠水溶液，并經(jīng)充分?jǐn)噭蚝蟮?000克混合物。
全文摘要
本發(fā)明提供一種結(jié)核菌快速培養(yǎng)基及其制備方法,它屬于結(jié)核菌存在測(cè)定的特殊培養(yǎng)基技術(shù)領(lǐng)域,主要由磷酸二氫鉀、硫酸鎂、枸櫞酸鎂、檸檬酸鐵銨、天門(mén)冬酰胺、中性甘油、馬鈴薯粉、新鮮雞蛋液、2%孔雀綠水溶液、水、動(dòng)物血清、輔酶A、三磷酸腺苷、細(xì)胞色素丙和α－萘乙酸,通過(guò)大規(guī)模混合生產(chǎn)技術(shù),經(jīng)制糊、混合調(diào)配、分裝及熔封、滅菌步驟配制而成,具有貯存期長(zhǎng),易于標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn),檢測(cè)快速,陽(yáng)性檢出率高的優(yōu)越性。
文檔編號(hào)C12Q1/04GK1226602SQ98110068
公開(kāi)日1999年8月25日 申請(qǐng)日期1998年2月20日 優(yōu)先權(quán)日1998年2月20日
發(fā)明者劉照云 申請(qǐng)人:劉照云