專利名稱：革蘭氏陰性球形細(xì)菌的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種分離的細(xì)菌和該細(xì)菌在診斷由該細(xì)菌引起的腸胃疾病中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
腸胃疾病是動物和人中的常見疾病。雖然已經(jīng)認(rèn)識到包括病毒，細(xì)菌和原生動物的許多病原學(xué)因子能夠引起該疾病，仍然存在許多未能鑒別出致病因子的臨床現(xiàn)象。另外，許多病例不應(yīng)答標(biāo)準(zhǔn)的醫(yī)學(xué)治療方案，表明包括了一些未知的致病因子。
最近已經(jīng)鑒定的幾個(gè)表明在動物包括人中引起腸胃疾病的新微生物。在1984年，Marshall和Warren(Lancet1984；1312-1314)敘述了在患有胃炎和消化道潰瘍病的病人中2.5微米長，0.5微米直徑的彎曲桿菌狀螺旋形革蘭氏陰性細(xì)菌，現(xiàn)在已知為幽門螺桿菌。在1987年，Dent等人(Lancet，1987ii96)報(bào)道了在患有胃炎的病人中長度3.5-7.5微米和直徑0.9微米的革蘭氏陰性螺旋形細(xì)菌，命名為Gastrospirillum hominis。這一生物體現(xiàn)在稱為Helicobacter helimanii。
本發(fā)明人已經(jīng)分離和鑒定了涉及人的腸胃疾病的新細(xì)菌。
本發(fā)明的公開從患有胃瘺病癥狀并且發(fā)現(xiàn)遭受與侵蝕性胃十二指腸炎和多發(fā)性的表層潰瘍相關(guān)的擴(kuò)散性胃炎的病人鑒定和分離了可以寄居人胃的與幽門螺桿菌的球形形式不同的新球形形式的細(xì)菌。該細(xì)菌抵抗常用的四環(huán)素，滅滴靈和H2拮抗物組成的三聯(lián)抗生素治療。在質(zhì)子泵抑制劑之后癥狀的緩解和胃十二指腸病理學(xué)的組織學(xué)和電子顯微鏡分辨提示其在侵蝕性胃十二指腸炎和多發(fā)性表層潰瘍的發(fā)病機(jī)理中可能起作用。該生物體是球形形式的，直徑大小為0.2-0.75微米，大多數(shù)在0.3-0.5微米直徑大小并且具有外膜菌毛。本發(fā)明人已經(jīng)命名該細(xì)菌為Okadaella gastrococcis Gen.nov.Sp.nov。
在第一方面，本發(fā)明包括在動物中能夠引起腸胃疾病并且具有本文定義的Okadaella gastrococcus的特征的分離的細(xì)菌。
優(yōu)選地，該細(xì)菌具有下面的特征革蘭氏陰性；球形；在微有氧和厭氧條件下可培養(yǎng)；在培養(yǎng)2星期時(shí)脲酶陰性；過氧化氫酶陰性；氧化酶陰性；不含有鞭毛；在紫外光(360納米)下細(xì)菌菌落沒有熒光；在Warthin-Starry銀染中觀察到菌落是許多圓“點(diǎn)”；非幽門螺桿菌和非Helicobacter helimanii。
在1998年9月22日，在澳大利亞政府分析實(shí)驗(yàn)室(AGAL)按照布達(dá)佩斯條約的規(guī)定保藏Okadaella gastrococcus的樣品，給出的保藏號為NM98/08610。
在第二方面，本發(fā)明包括診斷動物中由Okadaella gastrococcus引起的腸胃疾病的方法。該方法包括根據(jù)本發(fā)明的第一方面鑒定來自動物的腸胃道或臨床樣品中該細(xì)菌的存在。
通過培養(yǎng)來自臨床樣品的細(xì)菌，經(jīng)顯微鏡鑒定細(xì)菌可以直接檢測該細(xì)菌，或可以利用細(xì)菌的抗體間接鑒定細(xì)菌。臨床樣品可以是生物活檢樣品，糞便樣品，血液樣品等。應(yīng)理解的是該細(xì)菌的發(fā)現(xiàn)和它與腸胃疾病的關(guān)系允許通過任何本領(lǐng)域的已知方法檢測。同樣將會認(rèn)識到的是分子檢測方法象聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)也可以用于鑒定臨床樣品中細(xì)菌的存在。
不具有腸胃病臨床特征的動物中細(xì)菌的存在也可以是動物的腸胃疾病的預(yù)后指示。所以，本發(fā)明的第二方面也包括在動物中篩選細(xì)菌的存在作為檢測可能對這一細(xì)菌引起的腸胃疾病敏感的動物的手段。
優(yōu)選地，動物是人。
在第三方面，本發(fā)明包括利用本發(fā)明的第一方面的細(xì)菌開發(fā)診斷工具或輔助手段，以檢測或診斷該細(xì)菌引起的疾病。這樣的診斷工具或輔助手段包括從細(xì)菌的基因組和抗體設(shè)計(jì)的分子探針。
整個(gè)說明書，除非文章另外要求，詞匯“包括”應(yīng)理解為指包括所述的元素，整體或步驟，或元素，整體或步驟的組合，但不排除任何其它的元素，整體或步驟，或元素，整體或步驟的組合。
為了可以更清楚地理解本發(fā)明，參考附圖敘述優(yōu)選的形式。
附圖的簡要說明

圖1是胃活體樣品的掃描電子顯微鏡圖，在損害的粘膜層中顯示有球形細(xì)菌，與紅細(xì)胞和白細(xì)胞比較大小，×2,640，標(biāo)尺＝10微米。
圖2是圖1顯示的掃描顯微圖的放大。
圖3是所述球形細(xì)菌的負(fù)染色電子顯微鏡圖，×37,500，標(biāo)尺＝1微米。
圖4顯示了本發(fā)明的細(xì)菌的透射電子顯微鏡圖。
發(fā)明描述在1983年，Warren和Marshall敘述了在患有胃炎和消化道潰瘍的病人中長度2.5微米和直徑0.5微米的彎曲桿菌狀革蘭氏陰性的S形桿菌，現(xiàn)在已知為幽門螺桿菌。在1987年，Dent等人，報(bào)道了在患有胃炎的病人中的長度3.5-7.5微米，直徑0.9微米的革蘭氏陰性螺旋細(xì)菌，命名為Gastrospirillum hominis，現(xiàn)在稱為Helicobacterhelimannii。
盡管消化不良是世界范圍的最普通的醫(yī)學(xué)問題，但是關(guān)于來自患有消化不良的病人的其它微生物的鑒定和分離還沒有可得的公開資料。本發(fā)明人已經(jīng)嘗試從患有消化不良的病人培養(yǎng)，分離和鑒定新的微生物。一個(gè)年輕日本人患有病理未知的伴有多發(fā)性表層潰瘍的侵蝕性胃十二指腸潰瘍。本發(fā)明人成功地從該病人分離出非幽門螺桿菌的球形形式的生物體。Chan等人報(bào)道了幽門螺桿菌的球形形式的存在是胃的腺癌的主要特征。但是，國際爭論在于是否球形形式的幽門螺桿菌是該曲線形微生物的存活的主要形式或非存活的退化形式。所以，非常重要的是從可以寄居人腸胃道的螺桿菌種類區(qū)別球形形式的微生物。下面提供了該新微生物的內(nèi)窺鏡學(xué)，微生物學(xué)，組織學(xué)和超微結(jié)構(gòu)和分子生物學(xué)發(fā)現(xiàn)。
病例報(bào)道一個(gè)20歲的男性出現(xiàn)了消化不良，不消化，燒心和偶發(fā)的胃食管回流。他訴述了偶然的“打嗝”能夠緩解進(jìn)食前后的疼痛。他還否認(rèn)有腫脹，惡心或嘔吐。他也否認(rèn)有黑糞癥或大便習(xí)慣有最新的變化，除了當(dāng)發(fā)現(xiàn)他患有十二指腸潰瘍和多發(fā)性十二指腸侵蝕和表層潰瘍時(shí)，患有每天3-4次腹瀉。他否認(rèn)使用NSAID，他的吸煙習(xí)慣是每天3-10支，飲酒是每天375毫升啤酒直到這一現(xiàn)象發(fā)生。消化道潰瘍疾病和腸胃惡性腫瘤的家族歷史是陰性。因?yàn)樗陌Y狀不應(yīng)答利用H2拮抗物每天處理共一個(gè)月，他的幽門螺桿菌血清學(xué)測試(HEL-pTESTTMII，AMRAD)是陽性的，因此對他進(jìn)行了圖象內(nèi)窺鏡檢測(Olympus GIF XQ230)和生物活體檢測。正如常規(guī)方法，從胃和幽門竇收集至少6-10個(gè)生物活體樣品用于組織學(xué)和微生物學(xué)檢測。在35℃微有氧和厭氧條件下培養(yǎng)生物活體樣品和胃吸出的物質(zhì)。在Christensen脲培養(yǎng)液中測試活體樣品的脲酶產(chǎn)生并用革蘭氏染色在顯微鏡下檢測。雖然組織學(xué)和微生物檢測沒有揭示螺桿菌狀微生學(xué)物的存在，但是每天以分開的劑量利用四環(huán)素1.5克，滅滴靈600毫克和雷尼替丁300毫克的三聯(lián)治療對其治療2星期(能成功地去除98％的幽門螺桿菌)，接著進(jìn)行內(nèi)窺鏡檢測。在所有的情況中，胃內(nèi)窺境的表現(xiàn)是具有大量胃侵蝕和多發(fā)性表面潰瘍的廣泛性胃炎。同時(shí)也看到了侵蝕性十二指腸炎和多發(fā)性表面潰瘍。在所有的情況中，對從胃和幽門竇收集的樣品進(jìn)行組織學(xué)檢測，其中都顯示了具有灶性表皮潰瘍和固有層嗜中性粒細(xì)胞和慢性炎癥細(xì)胞數(shù)的灶性增加的侵蝕性胃炎。利用組織學(xué)檢測不能鑒定胃十二指腸炎的病理。只在奧美拉唑20毫克b.d.治療一個(gè)月后在第三次內(nèi)窺鏡檢測時(shí)收集的樣品中看到一些表皮的再生。所以，利用奧美拉唑20毫克b.d.治療4個(gè)月，進(jìn)行第四次內(nèi)窺鏡檢測。內(nèi)窺鏡表現(xiàn)是充血紅斑性充血性胃，和沒有胃十二指腸侵蝕和潰瘍的幽門竇和十二指腸。組織學(xué)檢測表明完全分辨了侵蝕性胃十二指腸炎和多發(fā)性表層潰瘍。掃描電子顯微鏡檢測鑒定了在胃表皮表面的一些區(qū)域的稍大和腫脹的分散的單個(gè)球形微生物。在胃或十二指腸沒有電子顯微鏡可鑒定的表面侵蝕或潰瘍。在胃和十二指腸觀察到合適的再生微絨毛。當(dāng)檢測革蘭氏染色樣品時(shí)，本發(fā)明人注意到革蘭氏陰性球形細(xì)菌并成功地培養(yǎng)了該微生物。微生物學(xué)和電子顯微鏡檢測也證實(shí)了在胃吸出物中存在該球形生物體。掃描和透射電子顯微鏡檢測在胃粘膜層下，在胃表皮細(xì)胞上鑒定了豐富的球形形式的細(xì)菌，并且在胃粘膜的侵蝕性損傷和表層潰瘍中鑒定了球形形式的細(xì)菌簇。在進(jìn)行評價(jià)所有的組織學(xué)樣品之前，經(jīng)革蘭氏染色(G)，蘇木精和曙紅(H&E)染色，和Warthin-Starry銀(WSS)染色后研究培養(yǎng)的微生物的特征。在H&E染色的組織學(xué)切片中難于看到細(xì)菌。當(dāng)可以看到它們時(shí)，認(rèn)為微生物是嗜堿性團(tuán)塊。在WSS中觀察到生物體是許多圓“點(diǎn)”。在胃粘膜的表層中該細(xì)菌是豐富的，并且在胃粘膜和胃窩的侵蝕性損傷中可以鑒定出該細(xì)菌。該微生物是脲酶，過氧化氫酶和氧化酶陰性的。它們將精氨酸β-萘胺轉(zhuǎn)化成精氨酸。這表明該生物體具有精氨酸二氫水解酶/水解酶。該細(xì)菌不具有鞭毛但圍繞了象纖毛結(jié)構(gòu)的細(xì)微絲狀毛發(fā)。16S rRNA的測序研究證實(shí)了該細(xì)菌的球形形式在系統(tǒng)發(fā)生上與幽門螺桿菌的球形不相關(guān)，但更接近溶血性嗜血桿菌。球形形式和溶血性嗜血桿菌的DNA比較研究證明該兩種微生物是不相同的。同時(shí)測試了確定為嗜血桿菌屬所需的對因子X和V的應(yīng)答，結(jié)果兩個(gè)都是陰性。嗜血桿菌的生長條件和環(huán)境不適于該球形形式的微生物。生長速度完全不同于嗜血桿菌，后者在溫育24小時(shí)后可以檢測生長，但是，該球形微生物需要至少7天才有一點(diǎn)菌落形成的痕跡，菌落的表觀和形態(tài)學(xué)也不同。生物化學(xué)測試的結(jié)果完全不同于嗜血桿菌并且用商業(yè)可得的鑒定試劑盒，奈瑟氏球菌/嗜血桿菌鑒定卡(biomerieux，Vitek)或經(jīng)用于鑒定厭氧微生物的Rapid ANA II系統(tǒng)(革新的診斷系統(tǒng))不能鑒定。巧克力瓊脂是用作培養(yǎng)嗜血桿菌的標(biāo)準(zhǔn)，但它對該新的微生物不是最佳的。
在石蠟塊切片上進(jìn)行了免疫過氧化物酶染色研究，排除了幽門螺桿菌寄居的球形形式的可能性。沒有鑒定出幽門螺桿菌血清反應(yīng)。
討論先前還沒有培養(yǎng)出寄居人胃粘膜的微好氧和厭氧革蘭氏陰性球形形式細(xì)菌，也沒有描述它們與侵蝕性胃十二指腸炎和多發(fā)性表層潰瘍的相關(guān)性。先前還沒有檢測到該新的細(xì)菌的主要原因可能是由于它們的大小和形狀類似于細(xì)胞碎片，如細(xì)胞質(zhì)顆粒特別是從炎癥侵蝕性和潰瘍胃粘膜細(xì)胞的細(xì)胞核逐出的染色質(zhì)?？赡芤呀?jīng)看到該微生物但可能認(rèn)為是口咽污染，或?yàn)橛拈T螺桿菌的存在所替代，并認(rèn)為是共生的。細(xì)菌被錯認(rèn)為是幽門螺桿菌的球形形式的可能性也存在。首先，即使是訓(xùn)練有素的有經(jīng)驗(yàn)的病理學(xué)家在組織學(xué)樣品中也難于檢測該生物體的存在，直到認(rèn)識了利用G.H&E和WSS染色的分離的生物體的特性和特征。其次，因?yàn)樗鼈兎浅Ｐ。?星期培養(yǎng)后直徑約0.5-1毫米，所以十分容易丟棄和忽略培養(yǎng)的菌落。革蘭氏染色的培養(yǎng)的樣品經(jīng)常看起來為革蘭氏陰性的人工假象，而不是明顯的微生物，因?yàn)樗鼈兪敲芗某纱氐募?xì)菌并類似象“沙”狀。其它原因可能是由于忽略了胃微生物學(xué)并如Warren鑒定患有胃炎的病人中S-形狀的桿菌時(shí)陳述的，胃是無菌器官的概念。
如果與細(xì)菌寄居如幽門螺桿菌，H.helimonnii，Okadaella感染(Okada等人，1998)或其它細(xì)菌感染，念珠菌屬(Ralogeropoulos等人，1988)，隱孢子蟲屬(Cersosimo等人，1992)相關(guān)，作出準(zhǔn)確的胃十二指腸病理診斷是重要的，因?yàn)橹委煹倪x擇將不同?？梢赃x擇包括四環(huán)素和滅滴靈的三聯(lián)治療，這比其它明顯可達(dá)到更高的去除幽門螺桿菌的成功率(Chiba等人，1992)。Okadaella gastrococci能夠抵抗雷尼替丁，四環(huán)素和滅滴靈的結(jié)合治療2星期。考慮了這一病人在奧美拉唑處理4個(gè)月后該微生物從組織學(xué)和微生物學(xué)上的消失與這一病人的組織學(xué)和癥狀改善一致，與質(zhì)子泵抑制劑的結(jié)合治療在控制由于螺桿菌和Okadaella感染導(dǎo)致的侵蝕性胃十二指腸炎和消化道潰瘍疾病中產(chǎn)生了比其它酸抑制劑類更高的效率。
雖然該新的微生物與溶血性嗜血桿菌具有密切的生理關(guān)系，但從菌落，細(xì)胞形態(tài)學(xué)，生長特征，抗生素敏感性，生物化學(xué)測試，和DNA分析判斷，本發(fā)明分離的生物體不符合已知的嗜血桿菌屬。建議本發(fā)明微生物命名為Okadaella Gen.nov(以鑒定細(xì)菌的T Okada博士命名為Oka.da-ellaJap，n.Okada；N.L.masc.n.Okadella)，gastrococcus Sp.nov(Gr.n.gastr與胃有關(guān)，Gr.n.coccisgrain)?？乖撋矬w的抗體，和免疫組織熒光的表現(xiàn)和間接免疫組織化學(xué)研究用于表明分離的細(xì)菌與在胃粘膜表皮的表面上生物體是相同的。
Okadaella gastrococcus的生物化學(xué)特征生長培養(yǎng)基-馬血瓊脂(例如Colombia瓊脂)最佳生長條件35-37℃生長條件微好氧和厭氧(CO210％，O24.86％，N285.14％)菌落大小達(dá)到0.5-1.0毫米7-14天菌落形態(tài)學(xué)凸起，光滑，半透明細(xì)胞直徑0.3-0.5微米細(xì)胞長度0.2-0.75微米G+C的摩爾百分?jǐn)?shù)未測定X因子的需要否Y因子的需要否過氧化氫酶陰性氧化酶；陰性脲酶陰性吲哚陰性鳥氨酸脫羧酶陰性溶血陰性堿性磷酸酶未測定葡萄糖陰性從下面的糖類產(chǎn)生酸L—阿拉伯糖陰性D—半乳糖陰性麥芽糖陰性蔗糖陰性半乳糖苷酶(ONPG)陰性(ONPGo-硝基苯基-D-半乳糖苷酶)果糖苷酶陰性葡萄糖苷酶陰性精氨酸二氫水解酶/水解酶陽性硝酸鹽還原陰性亞硝酸鹽還原陰性
H2S產(chǎn)生未測定G—谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶沒有確定與馬紅血細(xì)胞或馬血清一起在-70℃保藏。
(陽性90％或更多菌株是陽性)(陰性10％或更少菌株是陰性)參考文獻(xiàn)Noach L.A.，Rolf T.M.，Mytgat G.N.，電子顯微鏡研究幽門螺桿菌和未和十二指腸粘膜之間的關(guān)系，臨床病理雜志，199447699-704。
Ogata T.和Araki K.，在人胃潰瘍中電子顯微鏡研究幽門螺桿菌誘導(dǎo)的胃粘膜細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化，亞顯微病理學(xué)T.28(2)255-264，1996。
Bode G.，Malfertheiner P.和Ditschuneit H.在Compylobacter pylori相關(guān)的胃十二指腸疾病中超結(jié)構(gòu)的發(fā)現(xiàn)的病理學(xué)含義，Scand JGastroenterol.1998，23(增刊142)25-39。
本領(lǐng)域技術(shù)人員將會認(rèn)識到正如不脫離廣泛敘述的本發(fā)明的精神或范圍的特異的實(shí)施方案所示，本發(fā)明可以進(jìn)行許多變化和/或修飾。所以，本發(fā)明的實(shí)施方案在所有方面可以認(rèn)為是說明性的，不是限制性的。
Okadaella(O)和嗜血桿菌(H)微生物的生物化學(xué)特征Gc，gastrococcus；GE，gastrofilamenti；inf，流感；par，副流感；haem，溶血特征 OGc OGfH.infH.parH.haemHP生長培養(yǎng)基H.B.A. H.B.A C.A. C.A. C.A. H.B.A.最適生長溫度 35-37 35-37 35-3735-3735-37 35-37生長條件 MA&An MA&An A/FAnA/FAnA/FAn MA&An菌落大小達(dá)到0.5-1.0mm 7-14天 7-14天 24小時(shí) 24小時(shí) 24小時(shí)3-4天菌落形態(tài) 凸起凸起 凸起 凸起 凸起 凸起TL TL G/TL G/Y TLTL光滑光滑 光滑 光滑 光滑 光滑細(xì)胞直徑μm 0.3-0.5 0.50.3-0.5 0.5細(xì)胞長度μm 0.2-0.75＞20 0.5-3.0 2.5-4.0摩爾％G+C(Tm) ？ ？ 37-4440.413935-44X因子需要 否 否 是 是 是否V因子需要 否 否 是 否 是否過氧化氫酶 - (-)++/d + +氧化酶 - (-)+++ +脲酶 - (-)+/- +/- + +吲哚 - (-)+/- -d -鳥氨酸脫羧酶 - (-)+/- +/- - ？溶血作用 - (-)--+ -堿性磷酸酶 ？ ？ +++ +AMP反應(yīng)葡萄糖 - (-)+++ ？從下述糖的酸產(chǎn)生L—阿拉伯糖- (-)--- ？D—半乳糖 - (-)+++麥芽糖 - (-)+++蔗糖 - (-)-+-
Okadaella(O)和嗜血桿菌(H)微生物的生物化學(xué)特征Gc.gastrococcus；GE.gastrofilamentiinf，流感；par.副流感haem.溶血特性 OGcOGfH.infH.parH.haem HP-半乳糖苷酶(ONPG)- (-)-+/d --果糖苷酶- (-)----葡萄糖苷酶 - (-)-？ ---葡萄糖苷酶 - (-)---精氨酸水解酶 + (+)---硝酸鹽還原 - (-)+++ -硝酸鹽還原 - (-)-+dH2S產(chǎn)生 ？ ？ -++ -+，90％或更多的菌株是陽性；d，11-89％的菌株是陽性。ONPG，o-硝基苯基-D-半乳糖苷。H.B.A.馬血瓊脂；CA，巧克力瓊脂。MA&A，微有氧和厭氧條件；A/FAn，有氧/兼性厭氧。
權(quán)利要求
1.在動物中能夠引起腸胃疾病并且具有本文定義的Okadaellagastrococcus的特征的分離的細(xì)菌。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)菌，它是Okadaella gastrococcus。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的細(xì)菌，具有保藏號NM98/08610。
4.根據(jù)權(quán)利要求1到3的任何一項(xiàng)所述的細(xì)菌，具有下面的特征革蘭氏陰性；球形；在微有氧和厭氧條件下可培養(yǎng)；在培養(yǎng)2星期時(shí)是脲酶陰性；過氧化氫酶陰性；氧化酶陰性；不含有鞭毛；在紫外光(360納米)下細(xì)菌菌落沒有熒光；在Warthin-Starry銀染中觀察到的菌落是許多圓“點(diǎn)”；以及非幽門螺桿菌和非Helicobacter helimanii
5.在動物中診斷細(xì)菌Okadaella gastrococcus引起的腸胃疾病的方法，包括在來自動物的臨床樣品或腸胃道中檢測該細(xì)菌的存在。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中從臨床樣品培養(yǎng)細(xì)菌，通過顯微鏡鑒定細(xì)菌而直接檢測細(xì)菌，或利用抗細(xì)菌的抗體或細(xì)菌的部分基因組的聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增而間接鑒定。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的方法，其中臨床樣品是活檢樣品，糞便樣品，或血液樣品。
8.根據(jù)權(quán)利要求5到7的任何一項(xiàng)所述的方法，其中動物是人。
9.具有本文定義的Okadaella gastrococcus的特征的細(xì)菌在開發(fā)診斷工具或輔助手段以檢測或診斷細(xì)菌引起的疾病中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及在動物中能夠引起腸胃疾病并且具有Okadaella gastrococcus的特征的分離的細(xì)菌,以及診斷由Okadaella gastrococcus細(xì)菌引起的動物的腸胃疾病的方法,所述方法包括在動物的腸胃道或來自動物的臨床樣品中檢測該細(xì)菌的存在。
文檔編號C12N1/20GK1272876SQ98809403
公開日2000年11月8日 申請日期1998年9月22日 優(yōu)先權(quán)日1997年9月22日
發(fā)明者岡田隆幸, 喬納森·方 申請人:岡田隆幸