專利名稱:改進的生產(chǎn)類鞘氨醇堿的微生物菌株的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及其類鞘氨醇堿(sphingoid base)生產(chǎn)力提高的微生物菌株和其制備方法。
權(quán)利要求
1.一種畢赤酵母屬的菌株,當在相同條件下培養(yǎng)時,其表現(xiàn)出的生產(chǎn)類鞘氨醇堿或者其衍生物的生產(chǎn)力是保藏號為CBS408.94的Pichia ciferrii Y-1031 F-60-10的生產(chǎn)力的至少2倍。
2.權(quán)利要求1的菌株,當在相同條件下培養(yǎng)時,表現(xiàn)出是保藏號為CBS408.94的Pichia ciferrii Y-1031 F-60-10的生產(chǎn)力的至少4倍,優(yōu)選至少6倍,更優(yōu)選至少8倍,最優(yōu)選至少10倍的生產(chǎn)力。
3.權(quán)利要求1或2的菌株,其屬于Pichia ciferrii種。
4.權(quán)利要求3的菌株,其是Pichia ciferrii Y-1031 F-60-10種的衍生物。
5.一種分離具有提高的類鞘氨醇堿或者其衍生物的生產(chǎn)力的微生物細胞或其衍生菌株的方法,包括下面步驟-通過測定所述系列菌株中存在的每一各菌株生產(chǎn)的類鞘氨醇堿的抗微生物活性來篩選一系列菌株的類鞘氨醇堿生產(chǎn)力,-選擇一小組菌株,用于至少一次進一步傳代細胞,-通過將一定量的所述選擇的小組中的每一各菌株轉(zhuǎn)移至下一個的培養(yǎng)基并且在有助于生產(chǎn)類鞘氨醇堿或其衍生物的條件下在所述下一個的培養(yǎng)基中培養(yǎng)所述量的細胞而進一步傳代細胞,-選擇在相同的條件下培養(yǎng)時,與參考菌株的生產(chǎn)力相比具有提高的類鞘氨醇堿或其衍生物生產(chǎn)力的菌株。
6.權(quán)利要求5的方法,其中所述系列菌株是通過使親本菌株經(jīng)誘變處理得到的。
7.權(quán)利要求5或6的方法,其中參照菌株是Pichia ciferriiY-1031 F-60-10。
8.權(quán)利要求5-7的方法,其中所述系列菌株屬于畢赤酵母屬,優(yōu)選Pichia ciferrii種,更優(yōu)選Pichia ciferrii Y-1031 F-60-10種及其衍生物。
9.一種生產(chǎn)類鞘氨醇堿或者其衍生物的方法,包括在有助于生產(chǎn)所述類鞘氨醇堿或者其衍生物的條件下發(fā)酵根據(jù)權(quán)利要求1-4的菌株,并且任選地,從發(fā)酵肉湯回收所述類鞘氨醇堿或者其衍生物。
10.一種生產(chǎn)類鞘氨醇堿或者其衍生物的方法,包括在有助于生產(chǎn)所述類鞘氨醇堿或者其衍生物的條件下發(fā)酵根據(jù)權(quán)利要求5-8的方法獲得的菌株,并且任選地,從發(fā)酵肉湯回收所述類鞘氨醇堿或者其衍生物。
11.權(quán)利要求9或10的方法,其中類鞘氨醇堿或者其衍生物是乙?;参锴拾贝肌?br>
12.權(quán)利要求11的方法,進一步包括將乙酰化植物鞘氨醇去乙?;玫街参锴拾贝肌?br>
13.一種制備神經(jīng)酰胺的方法,包括將根據(jù)權(quán)利要求9-12的方法生產(chǎn)的類鞘氨醇堿或者其衍生物N-乙?;?。
全文摘要
本發(fā)明公開了與Pichia ciferriiY-1031 F-60-10相比具有大大提高的類鞘氨醇堿生產(chǎn)力的畢赤酵母屬菌株。本發(fā)明進一步公開了獲得具有提高的類鞘氨醇堿生產(chǎn)力的微生物菌株的方法,包括以類鞘氨醇堿的抗微生物活性為基礎(chǔ)的最初的篩選步驟。
文檔編號C12Q1/02GK1309718SQ99808092
公開日2001年8月22日 申請日期1999年7月2日 優(yōu)先權(quán)日1998年7月3日
發(fā)明者R·H·魯伯爾, H·斯特里克司特拉 申請人:科斯莫弗姆有限公司