物和處理:
[0132] 使用 HuskyXPointer 雜交犬（Ν = 38 ;2 至 9 歲；平均 4. 7 歲 +/-2. 2SD ;平均 BW : 23.7kg+/-3.3SD)進(jìn)行運(yùn)動試驗(yàn)。選擇犬只參與該試驗(yàn)，根據(jù)年齡、體重和運(yùn)動能力平均分 配到3個處理組。
[0133] 在處理階段前，使所有犬運(yùn)動調(diào)節(jié)3周。調(diào)節(jié)包括使用運(yùn)動輪以7-8英里每小時 的速度每周運(yùn)動2或3次，持續(xù)3周。在3周調(diào)節(jié)期內(nèi)，運(yùn)動持續(xù)時間逐漸增加，以確保所 有犬可在處理階段中完成持續(xù)2小時的運(yùn)動。
[0134] 實(shí)驗(yàn)處理包括一個不接受運(yùn)動前食物的對照組（N = 13)和兩個測試食物組，這 兩個測試食物組在運(yùn)動開始前30分鐘接受類似于雞肉和米主食配方的干法擠出粗磨食物 (I. 6g/kg BW ;N = 13)或測試配方（ProPlan Prime 棒；I. 6g/kg BW ;N = 13)。所有犬每天 定時飼喂一次，可自由飲水。
[0135] 運(yùn)動期間周圍環(huán)境的溫度范圍在從50至65 °F的范圍內(nèi)。
[0136] 運(yùn)動處理階段:
[0137] 處理階段包括第1、4、7、10、13、17、18和19天進(jìn)行一次2小時的運(yùn)動。在第7天 采集血樣，評估單日運(yùn)動（Ι-d)的效果。在第19天采集血樣，評估3日運(yùn)動（3-d)的效果。 除一點(diǎn)不同之外，所有運(yùn)動是使用運(yùn)動輪以7-8英里每小時的速度運(yùn)動2小時。這一點(diǎn)不 同是，在3日運(yùn)動的測試過程中的第18天，犬以13英里每小時運(yùn)動25min，并作為一組一起 測試。將所有犬只分為4個運(yùn)動組，每組9或10只，其中每個運(yùn)動組中都含有所有的3種 處理。在采血當(dāng)天（第7天和第19天），犬在運(yùn)動開始后60min暫時停止以獲取血樣，然后 以相反的方向完成剩余運(yùn)動。
[0138] 在第7天和第19天采集四個血樣：1.)馬上攝取運(yùn)動前處理食物前（運(yùn)動前 30min)，2.)攝取運(yùn)動前食物后30min (馬上開始運(yùn)動前），3.)運(yùn)動后60min，和4.)運(yùn)動后 120min (運(yùn)動結(jié)束時）。
[0139] 測試畬物:
[0140] 食物概述如下：
[0141] ?對照食物一表示商業(yè)主食，包含雞肉和米。期望包含：
[0142] ?基于一次飼喂量計(jì)，31 % -33. 5%粗蛋白（基于干物質(zhì)計(jì)，33.7% )
[0143] ?基于一次飼喂量計(jì)，28% -35%碳水化合物（基于干物質(zhì)計(jì)，34. 4% )
[0144] ?基于一次飼喂量計(jì)，20% -23%粗脂肪（基于干物質(zhì)計(jì)，23. 3% )
[0145] ?測試食物一配制成含有：
[0146] ?基于一次飼喂量計(jì)，32%粗蛋白（基于干物質(zhì)計(jì)，42% )
[0147] ?基于一次飼喂量計(jì)，23 % -25 %粗脂肪（基于干物質(zhì)計(jì)，30 % -32% )
[0148] 測試畬物和蛋白質(zhì)攝取:
[0149] 各處理組的平均食物攝取量列于下面。
[0150] 基于一次飼喂量基于干物質(zhì)量
[0151] ?對照食物 I. 6g/kg BW I. 5g/kg Bff
[0152] ?測試配方 I. 6g/kg BW I. 2g/kg Bff
[0153] 各處理組的平均粗蛋白攝取量/體重列于下面。
[0154] ?對照食物-0· 49g/kg BW
[0155] ?測試配方-0· 51g/kg BW
[0156] 各處理組的平均L-亮氨酸（基于一次飼喂量和干物質(zhì)量）攝取量列于下面。
[0157] ?對照食物-56. 8mg/kg BW
[0158] ?測試配方-68. Omg/kg BW
[0159] 試驗(yàn)結(jié)果
[0160] 該試驗(yàn)評價了犬血清中3-甲基組氨酸（3MH)和肌酸激酶的表現(xiàn)，分別作為肌肉蛋 白質(zhì)分解和運(yùn)動引起的肌細(xì)胞破裂的生物標(biāo)志物。天冬酰胺轉(zhuǎn)氨酶（AST)的存在通常是起 源于肌肉和肝臟的生物標(biāo)志物，并與細(xì)胞破裂和損傷相關(guān)（Banf i等人，2012年）。運(yùn)動自 然會帶來更大的氧化負(fù)荷，其中部分會導(dǎo)致細(xì)胞膜破裂和滲漏（細(xì)胞應(yīng)激），這些通過觀察 血液中各種肌特異性酶、代謝物和/或電解質(zhì)的增加來證實(shí)；其中一些則成為運(yùn)動性肌纖 維損傷和膜完整性破壞的標(biāo)志指示物，例如乳酸脫氫酶（LDH)和肌酸激酶（CK ;Banfi等人， 2012年）。進(jìn)行長期耐力相關(guān)運(yùn)動的犬（Strasser等人，1997年；Davenport等人，2001年； Wakshlag等人，2004年；McKenzie等人，2007年）、短時間（小于2min)快跑的犬（Lassen 等人，1986 ;Snow 等人，1988 年；Rose 等人，1989 年；Ilkiw 等人，1989 年；Rovira 等人，2007 年），或重復(fù)巡回的犬（持續(xù)大約IOmin ;Matwichuk等人，1999年；Steiss等人，2004年； Steiss等人，2008年）的各種血液分析物存在運(yùn)動相關(guān)的變化。這些運(yùn)動引起的變化大部 分被報道為在臨床"正常"范圍內(nèi)，但很多與靜止水平有顯著差異，并且可與氧化應(yīng)激升高 相關(guān)。因此，監(jiān)測這些血液標(biāo)志物可為評估膳食干預(yù)可如何抵消自然代謝及運(yùn)動相關(guān)的生 理應(yīng)激提供基礎(chǔ)。
[0161] 蛋白質(zhì)分解代謝：數(shù)據(jù)表明，相較于對照配方，測試食物配方具有更強(qiáng)的減弱蛋白 質(zhì)分解代謝的能力，如運(yùn)動開始前血清3MH濃度比其低7% -10%，在單日運(yùn)動過程中血清 3MH濃度比其低10% (圖4)所表明。相較于運(yùn)動開始前禁食的犬，測試食物配方的蛋白質(zhì) 分解代謝也比其低5%。相較于飼喂測試食物的犬和禁食對照犬，飼喂對照食物作為運(yùn)動前 補(bǔ)充劑看起來增強(qiáng)了運(yùn)動過程中的蛋白質(zhì)分解代謝。
[0162] 此外，將各組犬只分別在飼喂運(yùn)動前補(bǔ)充劑或不飼喂運(yùn)動前補(bǔ)充劑的情況下連續(xù) 運(yùn)動調(diào)節(jié)3周后，接著進(jìn)行3日運(yùn)動測試，相較于飼喂對照食物的犬，飼喂測試食物的犬在 第3天的運(yùn)動前血清3MH濃度比其低9%，并在運(yùn)動后60min保持比其低12%。相較于禁 食犬只，測試食物配方使得蛋白質(zhì)分解代謝減弱更多，運(yùn)動開始前3MH比其低約15%，運(yùn)動 過程中保持至少比其低7%。
[0163] 肌細(xì)胞破碎/肌肉損傷標(biāo)志物：相較于對照配方，測試食物配方具有更強(qiáng)的在運(yùn) 動中支持降低的肌肉損傷的能力，如在1日運(yùn)動開始前血清CK濃度比其低26%，在單個2 小時運(yùn)動回合過程中血清CK濃度比其低29% (表4)所表明。相較于禁食犬只，飼喂對照 食物作為運(yùn)動前補(bǔ)充劑看起來使得運(yùn)動開始前CK濃度輕微上升，并且在運(yùn)動過程中和運(yùn) 動后都高于禁食犬只。
[0164] 將各組犬只分別在飼喂運(yùn)動前補(bǔ)充劑或不飼喂運(yùn)動前補(bǔ)充劑的情況下連續(xù)運(yùn)動 調(diào)節(jié)3周后，接著進(jìn)行3日運(yùn)動測試，相較于運(yùn)動前禁食的犬只，第3天運(yùn)動前血清CK濃度 與其基本相似，但運(yùn)動2小時后，攝取任一處理食物都可導(dǎo)致CK濃度降低約40%。
[0165] 在單日運(yùn)動前和單日運(yùn)動過程中的所有取樣時間點(diǎn)，相較于禁食犬或飼喂對照食 物的犬，飼喂測試食物的犬的血清AST濃度低8% -15%。在3日運(yùn)動測試的第3天，AST 濃度遵循與CK類似的響應(yīng)，2小時運(yùn)動結(jié)束時，飼喂任一處理組食物的犬只具有低32%的 AST。
[0166] 氨基酸氣化和尿素牛成:
[0167] 來源于膳食蛋白質(zhì)消化的氨基酸形成高活性的細(xì)胞內(nèi)氨基酸池，該氨基酸池不能 擴(kuò)展。來自膳食蛋白質(zhì)和/或內(nèi)源性蛋白分解的過量氨基酸使該氨基酸池增大。因此，過 量氨基酸遵循3種不同路徑：1.新的蛋白質(zhì)合成，2.氧化供能，進(jìn)行尿素合成以處置氮（尿 素生成），和/或3.轉(zhuǎn)化成其他化合物（Schutz綜述，2011年）。存在這樣一種關(guān)系，其中 膳食蛋白質(zhì)越多，使得過量氨基酸氧化，尿素產(chǎn)量越多。
[0168] 在1日運(yùn)動測試中，相較于禁食對照犬相比，飼喂任一種運(yùn)動前補(bǔ)充劑棒的犬在 運(yùn)動前的血清尿素濃度與其相似，但在運(yùn)動后60分鐘開始上升。2小時運(yùn)動結(jié)束時，相較于 禁食對照犬，飼喂對照食物的犬具有比其高10%的尿素濃度，而飼喂測試食物的犬僅比其 高6%。這表明相較于測試食物，在運(yùn)動過程中，對照食物中的蛋白質(zhì)氧化程度更高，這與 觀察到的飼喂對照食物的犬中3mH升高的現(xiàn)象相符，從而對減弱蛋白質(zhì)分解代謝的影響更 小。
[0169] 將各組犬只分別在飼喂運(yùn)動前補(bǔ)充劑或不飼喂運(yùn)動前補(bǔ)充劑的情況下連續(xù)運(yùn)動 調(diào)節(jié)3周后，接著進(jìn)行3日運(yùn)動測試，第3天運(yùn)動前和運(yùn)動過程中，對照食物組的血清中平 均尿素濃度最高。具體地講，相較于測試食物組或禁食對照，飼喂對照食物的犬具有比前兩 者高5%的血清尿素。在運(yùn)動后60分鐘，相較于飼喂測試食物的犬只或禁食犬只，飼喂對照 食物的犬只的尿素濃度比前述二者高8%和11%。因此，在運(yùn)動前飼喂對照食物的犬只代 謝氨基酸的水平更高，但由于3-mH的水平也升高，表明攝取對照食物中的蛋白質(zhì)組合物不 會減弱運(yùn)動過程中的蛋白質(zhì)分解代謝。
[0170] 轟1
[0173] 表中數(shù)據(jù)為各處理組在不同運(yùn)動時間的犬類血清3-甲基組氨酸、肌酸激酶、天冬 酰胺轉(zhuǎn)氨酶和尿素濃度的平均值（+/-SD)。
[0174] 表 4 (續(xù)）
[0175]
[0177] 肝細(xì)胞破裂：該試驗(yàn)評價了丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT)的表現(xiàn)，大部分ALT是來源于肝臟 的生物標(biāo)志物，但在腎臟、心臟、肌肉中也有少量存在，它還與細(xì)胞破裂和損傷相關(guān)（Banf i 等人，2012年）。數(shù)據(jù)表明，相較于對照配方或禁食對照犬只，測試食物配方具有更強(qiáng)的減 少肝細(xì)胞破裂的能力，如在單個運(yùn)動時段開始之前，飼喂測試食物的犬只血清中的ALT濃 度比飼喂對照食物的犬只和禁食犬只分別低至少7%和9%所表明。在運(yùn)動后60分鐘及120 分鐘，飼喂測試食物的犬只的ALT濃度一直較低，而飼喂對照食物的犬只和禁食犬只的ALT 濃度均提高了 11% (表5)。將各組犬只分別在飼喂運(yùn)動前補(bǔ)充劑或不飼喂運(yùn)動前補(bǔ)充劑 的情況下連續(xù)運(yùn)動調(diào)節(jié)3周，接著進(jìn)行三日運(yùn)動測試，所有組的犬只的運(yùn)動前血清ALT濃度 均升高。然而，在運(yùn)動開始前，飼喂測試食物的犬只的ALT濃度略低（3%-5%)。在運(yùn)動后 60分鐘和120分鐘，飼喂測試食物的犬只的ALT濃度分別比飼喂對照食物的犬只低3. 5% 和4. 5%。相比禁食犬只，測試食物配方顯現(xiàn)出更大的差異，在運(yùn)動后60分鐘和120分鐘， 飼喂測試食物的犬只的ALT濃度分別比禁食犬只低10%和12%。
[0178] 表 5

[0180] 表中數(shù)據(jù)為各處理組在不同運(yùn)動時間的犬類