用組合菌固態(tài)發(fā)酵木薯渣的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于混菌固態(tài)發(fā)酵飼料制備技術(shù)領(lǐng)域，具體是用布氏乳桿菌、黑曲霉、熱帶 假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木薯渣的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 木薯渣是生產(chǎn)木薯淀粉和酒精后的副產(chǎn)物，主要成分是纖維素，含有少量的蛋白 質(zhì)，是常用的粗飼料之一，但因木質(zhì)化程度高，適口性差，動(dòng)物消化利用率低，而且新鮮木薯 渣水分含量高，在儲(chǔ)存過(guò)程中容易變黑、發(fā)酸變質(zhì)，現(xiàn)在仍有大量的木薯渣被丟棄，既是一 種資源浪費(fèi)，也會(huì)對(duì)環(huán)境造成一定程度的污染破壞，隨著木薯渣產(chǎn)量的不斷增加，木薯渣的 處理和利用已成為一個(gè)亟需解決的問(wèn)題。微生物發(fā)酵處理木薯渣可以改善木薯渣的適口 性，提高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和飼料轉(zhuǎn)化率，同時(shí)有利于解決貯存時(shí)發(fā)霉變質(zhì)問(wèn)題。研究表明采用單一 菌種處理木薯渣，使其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值提高不多，實(shí)際應(yīng)用不理想，混合菌發(fā)酵可以利用菌種之間 的協(xié)調(diào)互作關(guān)系，擴(kuò)大對(duì)發(fā)酵底物的適應(yīng)性和生產(chǎn)菌的防雜菌能力，處理效果較為理想，混 合菌發(fā)酵木薯渣選擇菌種是關(guān)鍵，有益微生物菌種品種繁多，但是目前研究的品種及搭配 非常有限，布氏乳桿菌、植物乳桿菌、黑曲霉、熱帶假絲酵母和枯草芽孢桿菌這五種菌的組 合處理木薯渣的研究基本未見(jiàn)報(bào)道。本發(fā)明為探索最佳木薯渣發(fā)酵條件，改善木薯渣品質(zhì)， 提高其適口性，為木薯渣的開(kāi)發(fā)及利用提供參考。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的是提供用布氏乳桿菌、黑曲霉、熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物 乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木薯渣的方法。
[0004] 本發(fā)明應(yīng)用的微生物菌種來(lái)源：熱帶假絲酵母（Candida tropicalis);黑曲霉 (Aspergillus niger);枯草芽抱桿菌(Bacillus subtil is);植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum);布氏乳桿菌(Lactobasillus buchneri)均購(gòu)買(mǎi)于中國(guó)工業(yè)微生物菌種保藏管 理中心。
[0005] 本發(fā)明應(yīng)用的尿素和紅糖來(lái)源:尿素和紅糖均為市購(gòu)。
[0006] 本發(fā)明應(yīng)用的培養(yǎng)基:MRS的液體培養(yǎng)基用于植物乳桿菌、布氏乳桿菌活化和菌液 培養(yǎng)；MRS固體培養(yǎng)基用于植物乳桿菌和布氏乳桿菌涂板計(jì)數(shù);MEB液體培養(yǎng)基用于黑曲霉 和熱帶假絲酵母的活化和菌液培養(yǎng);MEB固體培養(yǎng)基用于黑曲霉和熱帶假絲酵母涂板計(jì)數(shù)； 葡萄糖營(yíng)養(yǎng)液體使用于枯草芽孢桿菌的菌種活化和菌液培養(yǎng);葡萄糖營(yíng)養(yǎng)瓊脂使用于枯草 芽孢桿菌的涂板計(jì)數(shù)。
[0007] 試驗(yàn)菌種的活化及擴(kuò)培：安瓿管凍干菌種-活化-按5 %添加量接種到相應(yīng)的液 體培養(yǎng)基中，熱帶假絲酵母、黑曲霉和枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)條件為溫度30°C，15〇rpm搖床培 養(yǎng)，植物乳桿菌和布氏乳桿菌的培養(yǎng)條件為溫度37 °C，靜態(tài)培養(yǎng)。
[0008] 接種液計(jì)數(shù):采用涂板對(duì)各菌種接種液進(jìn)行計(jì)數(shù)。
[0009] 本發(fā)明的技術(shù)方案是：用布氏乳桿菌、黑曲霉、熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植 物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木薯渣的方法，包括如下步驟：
[0010]⑴將新鮮木薯渣在65°C下烘干后作為發(fā)酵原料；
[0011]⑵向經(jīng)過(guò)步驟⑴處理過(guò)的木薯渣中按木薯渣干物質(zhì)的質(zhì)量百分比添加1 %的尿素 或者添加1%尿素+0.6%紅糖，添加尿素作為氮源，添加紅糖用于調(diào)節(jié)木薯渣的可溶性糖濃 度；
[0012] ⑶將布氏乳桿菌、黑曲霉、熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌的菌液以1: 1:1:1:1的體積比混合，以木薯渣干物質(zhì)5%的量進(jìn)行接種，使每克干木薯渣中布氏乳桿菌、 黑曲霉、熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌的活菌含量分別達(dá)到8.0X10 4cfu/g， 5.8 X102cfu/g,9.2 X105cfu/g,3.8 X104cfu/g,1.3 X105cfu/g；
[0013] ⑷將步驟⑶添加了布氏乳桿菌、黑曲霉、熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿 菌混合制劑的木薯渣，用生理鹽水調(diào)制含水量為60~65%，混合均勻，裝入聚乙烯薄膜袋 中，用真空栗抽出袋內(nèi)的空氣至真空狀態(tài)，密封，置于室溫下貯藏；
[0014] (5)將步驟⑷包裝好的木薯渣在室溫下固態(tài)發(fā)酵10天，得到木薯渣發(fā)酵產(chǎn)物。
[0015] 除另有說(shuō)明外，本發(fā)明所述的百分比均為質(zhì)量百分比，各組分含量百分?jǐn)?shù)之和為 100%〇
[0016] 本發(fā)明的有益效果：
[0017] 1.經(jīng)產(chǎn)品檢測(cè)，采用布氏乳桿菌+黑曲霉+熱帶假絲酵母+枯草芽孢桿菌+植物乳桿 菌+尿素固態(tài)發(fā)酵木薯渣后，得到木薯渣發(fā)酵產(chǎn)物中性洗滌纖維NDF含量由24.11%降低到 19.37%，酸性洗滌纖維ADF含量由20.00%降低到15.69%，粗蛋白CP含量由2.58%提高到 5.10% ;采用布氏乳桿菌+黑曲霉+熱帶假絲酵母+枯草芽孢桿菌+植物乳桿菌+尿素+紅糖固 態(tài)發(fā)酵木薯渣后，得到木薯渣發(fā)酵產(chǎn)物中性洗滌纖維NDF含量由24.11 %降低到19.26%，酸 性洗滌纖維ADF含量由20.00 %降低到15.38%，粗蛋白CP含量由2.58 %提高到5.22% ;通過(guò) 在木薯渣固體發(fā)酵過(guò)程中添加布氏乳桿菌、黑曲霉、熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳 桿菌能夠有效改善木薯渣品質(zhì)。
[0018] 2.制備方法簡(jiǎn)單，便于操作，原料豐富易得。
【具體實(shí)施方式】
[0019] 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步說(shuō)明。
[0020] 以下實(shí)施例僅為本發(fā)明示意性的【具體實(shí)施方式】，并非用以限定本發(fā)明的范圍。任 何本領(lǐng)域的技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明的構(gòu)思和原則的前提下所作的等同變化、修改與結(jié) 合，均應(yīng)屬于本發(fā)明保護(hù)范圍。
[0021] 實(shí)施例1
[0022]用布氏乳桿菌、黑曲霉、熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵 木薯渣的方法的一個(gè)實(shí)例，操作步驟如下：
[0023]⑴原料:新鮮木薯渣在65°C下烘干后作為發(fā)酵原料；
[0024]⑵向經(jīng)過(guò)步驟⑴處理過(guò)的木薯渣中按木薯渣干物質(zhì)的質(zhì)量百分比添加1 %的尿素 作為氮源；
[0025]⑶將布氏乳桿菌、黑曲霉、熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌的菌液以1: 1:1:1:1的體積比混合，以木薯渣干物質(zhì)5%的量進(jìn)行接種，使每克干木薯渣中布氏乳桿菌、 黑曲霉、熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌的活菌含量分別達(dá)到8.OX 104cfu/g， 5.8 X102cfu/g,9.2 X105cfu/g,3.8 X104cfu/g,1.3 X105cfu/g；
[0026] ⑷將步驟⑶添加了布氏乳桿菌、黑曲霉、熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿 菌混合制劑的木薯渣，用生理鹽水調(diào)制含水量為60~65%，混合均勻，裝入聚乙烯薄膜袋 中，用真空栗抽出袋內(nèi)的空氣至真空狀態(tài)，密封，置于室溫下貯藏；
[0027] (5)將步驟⑷包裝好的木薯渣在室溫下固態(tài)發(fā)酵10天，得到木薯渣發(fā)酵產(chǎn)物。
[0028] 應(yīng)用ANK0M 2000纖維測(cè)定儀測(cè)定木薯渣發(fā)酵產(chǎn)物中的DNF和ADF含量;應(yīng)用FOSS 8400凱氏定氮儀測(cè)定木薯渣發(fā)酵產(chǎn)物中的粗蛋白質(zhì)含量，產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果為：
[0029]采用布氏乳桿菌+黑曲霉+熱帶假絲酵母+枯草芽孢桿菌+植物乳桿菌+尿素固態(tài)發(fā) 酵木薯渣后，得到木薯渣發(fā)酵產(chǎn)物中性洗滌纖維NDF含量由24.11 %降低到19.37%，酸性洗 滌纖維ADF含量由20.00%降低到15.69%，粗蛋白CP含量由2.58%提高到5.10%。
[0030] 實(shí)施例2
[0031]用布氏乳桿菌、黑曲霉、熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵 木薯渣的方法，操作步驟如下：
[0032]⑴原料:新鮮木薯渣在65°C下烘干后作為發(fā)酵原料；
[0033]⑵向經(jīng)過(guò)步驟⑴處理過(guò)的木薯渣中按木薯渣干物質(zhì)的質(zhì)量百分比添加1%尿素+ 0.6 %紅糖，添加尿素作為氮源，添加紅糖用于調(diào)節(jié)木薯渣的可溶性糖濃度。
[0034] ⑶將布氏乳桿菌、黑曲霉、熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌的菌液以1: 1:1:1:1的體積比混合，以木薯渣干物質(zhì)5%的量進(jìn)行接種，使每克干木薯渣中布氏乳桿菌、 黑曲霉、熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌的活菌含量分別達(dá)到8.0X10 4cfu/g， 5.8 X102cfu/g,9.2 X105cfu/g,3.8 X104cfu/g,1.3 X105cfu/g；
[0035] ⑷將步驟⑶添加了布氏乳桿菌、黑曲霉、熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿 菌混合制劑的木薯渣，用生理鹽水調(diào)制含水量為60~65%，混合均勻，裝入聚乙烯薄膜袋 中，用真空栗抽出袋內(nèi)的空氣至真空狀態(tài)，密封，置于室溫下貯藏；
[0036] (5)將步驟⑷包裝好的木薯渣在室溫下固態(tài)發(fā)酵10天，得到木薯渣發(fā)酵產(chǎn)物。
[0037] 應(yīng)用ΑΝΚ0Μ 2000纖維測(cè)定儀測(cè)定木薯渣發(fā)酵產(chǎn)物中的DNF和ADF含量;應(yīng)用F0SS 8400凱氏定氮儀測(cè)定木薯渣發(fā)酵產(chǎn)物中的粗蛋白質(zhì)含量，產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果為：
[0038]采用布氏乳桿菌+黑曲霉+熱帶假絲酵母+枯草芽孢桿菌+植物乳桿菌+尿素+紅糖 固態(tài)發(fā)酵木薯渣后，得到木薯渣發(fā)酵產(chǎn)物中性洗滌纖維NDF含量由24.11 %降低到19.26 %， 酸性洗滌纖維ADF含量由20.00%降低到15.38%，粗蛋白CP含量由2.58%提高到5.22% ;
[0039] 不同微生物添加劑對(duì)木薯渣營(yíng)養(yǎng)成分的影響見(jiàn)表1。
[0040] 表1不同微生物添加劑對(duì)木薯渣營(yíng)養(yǎng)成分的影響(風(fēng)干基礎(chǔ)）
[0041]
[0042] 注：同列無(wú)字母或肩標(biāo)相同字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫(xiě)字母表示差 異顯著(P〈〇. 05)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.用布氏乳桿菌、黑曲霉、熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木 薯渣的方法，其特征在于，操作步驟如下： ⑴將新鮮木薯渣在65 °C下烘干后作為發(fā)酵原料； ⑵向經(jīng)過(guò)步驟⑴處理過(guò)的木薯渣中按木薯渣干物質(zhì)的質(zhì)量百分比添加1%的尿素或者 添加1 %尿素+0.6 %紅糖，添加尿素作為氮源，添加紅糖用于調(diào)節(jié)木薯渣的可溶性糖濃度； (3) 將布氏乳桿菌、黑曲霉、熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌的菌液以1:1:1: 1:1的體積比混合，以木薯渣干物質(zhì)5%的量進(jìn)行接種，使每克干木薯渣中布氏乳桿菌、黑曲 霉、熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌的活菌含量分別達(dá)到8.0 X 104cfu/g，5.8 X 102cfu/g,9.2 X105cfu/g,3.8 X104cfu/g,1.3 X105cfu/g； (4) 將步驟⑶添加了布氏乳桿菌、黑曲霉、熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌混 合制劑的木薯渣，用生理鹽水調(diào)制含水量為60~65%，混合均勻，裝入聚乙烯薄膜袋中，用 真空栗抽出袋內(nèi)的空氣至真空狀態(tài)，密封，置于室溫下貯藏； (5) 將步驟⑷包裝好的木薯渣在室溫下固態(tài)發(fā)酵10天，得到木薯渣發(fā)酵產(chǎn)物。
【專(zhuān)利摘要】用布氏乳桿菌、黑曲霉、熱帶假絲酵母、枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌組合固態(tài)發(fā)酵木薯渣的方法，以木薯渣為發(fā)酵原料，將五種菌液以1:1:1:1:1的體積比混合，以木薯渣干物質(zhì)5％的量進(jìn)行接種，按木薯渣干物質(zhì)的質(zhì)量百分比添加0.6％的紅糖調(diào)節(jié)木薯渣的可溶性糖濃度，按木薯渣干物質(zhì)的質(zhì)量百分比添加1％的尿素作為氮源，用生理鹽水調(diào)制含水量為60～65％，混合均勻，裝入聚乙烯薄膜袋中，用真空泵抽出袋內(nèi)的空氣至真空狀態(tài)，密封，置于室溫下貯藏發(fā)酵10天。經(jīng)過(guò)發(fā)酵處理后，能顯著降低木薯渣的中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量，顯著提高木薯渣的粗蛋白含量。
【IPC分類(lèi)】A23K10/18, A23K10/37
【公開(kāi)號(hào)】CN105581029
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510953555
【發(fā)明人】唐慶鳳, 鄒彩霞, 彭開(kāi)屏, 韋升菊, 梁辛, 楊炳壯, 梁賢威, 黃鋒, 李麗莉, 林波, 楊承劍, 彭麗娟
【申請(qǐng)人】廣西壯族自治區(qū)水牛研究所
【公開(kāi)日】2016年5月18日
【申請(qǐng)日】2015年12月18日