一種富含?；撬岬牡鞍追鄣闹苽浞椒?br>【專利摘要】本發(fā)明涉及生物提取技術(shù)領(lǐng)域，公開了一種富含?；撬岬牡鞍追鄣闹苽浞椒?，包括以下步驟：A、稱取干凈牡蠣肉并搗碎，然后對(duì)牡蠣肉進(jìn)行冷凍粉碎制得牡蠣凍干粉；B、將所述牡蠣凍干粉添加到蒸餾水中，用PBS緩沖溶液將pH調(diào)節(jié)至6-7，然后加入蛋白酶500-1500U/g，在30-40℃下進(jìn)行酶解，3-10h后得到酶解液；C、將所述酶解液噴霧干燥后制得牡蠣蛋白粉。本發(fā)明方法工藝較為簡單，成本低，提取效率高，制備的蛋白粉中牛磺酸的含量高。
【專利說明】
一種富含牛磺酸的蛋白粉的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及生物提取技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種富含牛磺酸的蛋白粉的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]?；撬崾且环N非蛋白氨基酸，對(duì)動(dòng)物心臟、大腦及免疫系統(tǒng)的發(fā)育有至關(guān)重要的作用，然而人類自身不能合成，只能靠食物攝取才能滿足機(jī)體需求。海洋生物中牛磺酸的含量十分豐富，其中牡蠣中?；撬岬暮靠蛇_(dá)4-8 g/kg，可從牡蠣經(jīng)過酶解后制備蛋白份，但是現(xiàn)有技術(shù)中?；撬岬奶崛⌒实停鞍追壑械呐；撬岬暮坎桓摺?br>[0003]申請(qǐng)?zhí)枮镃N200710066707.2的中國發(fā)明專利公開了一種從牡蠣中提取天然?；撬岬姆椒?，該方法依次設(shè)置了制備漿液、超聲波-酶解破碎、滅酶過濾、濃縮、二級(jí)分離、活性炭處理、樹脂吸附純化、沉淀和結(jié)晶和干燥步驟;通過超聲波-酶解破碎牡蠣肉的細(xì)胞膜的過程，由于超聲波和蛋白酶的協(xié)同作用，使牡蠣肉的細(xì)胞膜在短時(shí)間內(nèi)就能得到充分破碎，牛磺酸能從細(xì)胞內(nèi)充分釋放出來，所用破碎細(xì)胞的時(shí)間比單用蛋白酶破碎細(xì)胞縮短了 5倍多，得到的?；撬峤Y(jié)晶體超過單用蛋白酶破碎得到的牛磺酸結(jié)晶體二成多，這樣就在工業(yè)化生產(chǎn)中就大大縮短了提取?；撬岬臅r(shí)間，并且進(jìn)一步提高了?；撬岬漠a(chǎn)量，增進(jìn)了工業(yè)化提取?；撬岬男б妗?br>[0004]上述技術(shù)方案在一定程度上提高了?；撬岬奶崛÷室约凹兌?，但是其技術(shù)方案的工藝步驟繁多，成本較高，而且只適用于提取高純度的?；撬?。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種富含?；撬岬牡鞍追鄣闹苽浞椒ā１景l(fā)明方法工藝較為簡單，成本低，提取效率高，制備的蛋白粉中?；撬岬暮扛?。
[0006]本發(fā)明的具體技術(shù)方案為:一種富含?；撬岬牡鞍追鄣闹苽浞椒ǎㄒ韵虏襟E: A、稱取干凈牡■肉并搗碎，然后對(duì)牡■肉進(jìn)行冷凍粉碎制得牡■凍干粉。
[0007]在本技術(shù)方案中，對(duì)牡蠣肉在酶解前進(jìn)行冷凍粉碎，在冷凍粉碎過程中，由于瞬間降溫使得牡蠣肉的細(xì)胞膜脆性急劇增加，在進(jìn)行粉碎時(shí)，細(xì)胞膜容易破裂，給后續(xù)的酶解過程提供了便利。
[0008]B、將所述牡蠣凍干粉添加到蒸餾水中，用PBS緩沖溶液將pH調(diào)節(jié)至6-7，然后加入蛋白酶500-1500 U/g，在30-40°C下進(jìn)行酶解，3_1 Oh后得到酶解液。
[0009]在經(jīng)過冷凍粉碎之后，由于牡蠣肉細(xì)胞的部分細(xì)胞膜破裂，在酶解過程中，細(xì)胞內(nèi)的有效成分被大量地釋放出來，從而加速了酶解的過程，提高了酶解效率以及產(chǎn)率。
[0010]C、將所述酶解液噴霧干燥后制得牡蠣蛋白粉。
[0011]作為優(yōu)選，步驟B中所述蛋白酶為木瓜蛋白酶和中性蛋白酶。
[0012]作為優(yōu)選，步驟B中牡蠣凍干粉與蒸餾水的質(zhì)量比為1:(8-10)。
[0013]作為優(yōu)選，在步驟A將牡蠣肉搗碎后并冷凍粉碎前，對(duì)牡蠣肉進(jìn)行預(yù)處理:將牡蠣肉添加到濃度為0.5-1.5wt%的氯化鈉水溶液中，接著向氯化鈉水溶液中添加磷脂酶并在20-40°C下酶解10-20min，然后將牡蠣肉取出瀝干轉(zhuǎn)移至蒸餾水中浸泡20-40min。
[0014]在冷凍粉碎前用磷脂酶對(duì)牡蠣肉進(jìn)行預(yù)酶解，磷脂酶能夠?qū)?dòng)物細(xì)胞膜進(jìn)行部分分解，但是需要控制預(yù)酶解的酶解程度，酶解程度過高會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞膜過度破壞，從而細(xì)胞液泄露，氯化鈉作為溶液，能夠平衡細(xì)胞內(nèi)外的濃度差，防止細(xì)胞過度脹破。在預(yù)酶解后將牡蠣肉浸泡在蒸餾水中，使得細(xì)胞由于內(nèi)外滲透壓發(fā)生微程度的溶脹，細(xì)胞膜被撐開，有利于后續(xù)冷凍干燥時(shí)細(xì)胞膜急劇降溫而破裂。
[0015]作為優(yōu)選，牡■肉與氯化鈉水溶液的質(zhì)量比為1:(12-14)。
[0016]作為優(yōu)選，所述磷脂酶的添加量為50_200U/g。
[0017]作為優(yōu)選，所述磷脂酶選自磷脂酶A1、磷脂酶A2、磷脂酶B、磷脂酶C、磷脂酶D中的一種或多種。
[0018]與現(xiàn)有技術(shù)對(duì)比，本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明方法工藝較為簡單，成本低，提取效率高，制備的蛋白粉中?；撬岬暮扛摺?br>【具體實(shí)施方式】
[0019]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的描述。
[0020]實(shí)施例1
一種富含?；撬岬牡鞍追鄣闹苽浞椒?，包括以下步驟:
A、稱取干凈牡■肉并搗碎，然后對(duì)牡■肉進(jìn)行冷凍粉碎制得牡■凍干粉。
[0021 ] B、將所述牡蠣凍干粉添加到9倍質(zhì)量的蒸餾水中，用PBS緩沖溶液將pH調(diào)節(jié)至6.5，然后加入總量為1000 U/g的木瓜蛋白酶和中性蛋白酶，在35°C下進(jìn)行酶解，6.5h后得到酶解液。
[0022 ] C、將所述酶解液噴霧干燥后制得牡蠣蛋白粉。
[0023]本實(shí)施例的牡蠣蛋白粉中?；撬岬暮窟_(dá)6_12mg/g。
[0024]實(shí)施例2
一種富含?；撬岬牡鞍追鄣闹苽浞椒?，包括以下步驟:
A、稱取干凈牡蠣肉并搗碎，將牡蠣肉添加到13倍質(zhì)量的濃度為1^%的氯化鈉水溶液中，接著向氯化鈉水溶液中添加125U/g的磷脂酶六!并在30°C下酶解15min，然后將牡蠣肉取出瀝干轉(zhuǎn)移至蒸餾水中浸泡30min，瀝干后對(duì)牡蠣肉進(jìn)行冷凍粉碎制得牡蠣凍干粉。
[0025]B、將所述牡蠣凍干粉添加到9倍質(zhì)量的蒸餾水中，用PBS緩沖溶液將pH調(diào)節(jié)至6.5，然后加入總量為1000 U/g的木瓜蛋白酶和中性蛋白酶，在35°C下進(jìn)行酶解，6.5h后得到酶解液。
[0026]C、將所述酶解液噴霧干燥后制得牡蠣蛋白粉。
[0027]本實(shí)施例的牡蠣蛋白粉中?；撬岬暮窟_(dá)9_13mg/g。
[0028]實(shí)施例3
一種富含牛磺酸的蛋白粉的制備方法，包括以下步驟:
A、稱取干凈牡蠣肉并搗碎，將牡蠣肉添加到12倍質(zhì)量的濃度為0.5被%的氯化鈉水溶液中，接著向氯化鈉水溶液中添加50U/g的磷脂酶六2并在20°C下酶解lOmin，然后將牡蠣肉取出瀝干轉(zhuǎn)移至蒸餾水中浸泡20min，瀝干后對(duì)牡蠣肉進(jìn)行冷凍粉碎制得牡蠣凍干粉。
[0029]B、將所述牡蠣凍干粉添加到8倍質(zhì)量的蒸餾水中，用PBS緩沖溶液將pH調(diào)節(jié)至7，然后加入總量為500 U/g的木瓜蛋白酶和中性蛋白酶，在30°C下進(jìn)行酶解，1h后得到酶解液。
[0030]C、將所述酶解液噴霧干燥后制得牡蠣蛋白粉。
[0031]本實(shí)施例的牡蠣蛋白粉中?；撬岬暮窟_(dá)10_15mg/g。
[0032]實(shí)施例4
一種富含?；撬岬牡鞍追鄣闹苽浞椒ǎㄒ韵虏襟E:
A、稱取干凈牡蠣肉并搗碎，將牡蠣肉添加到14倍質(zhì)量的濃度為1.5被%的氯化鈉水溶液中，接著向氯化鈉水溶液中添加總量200U/g的磷脂酶B和磷脂酶C并在40°C下酶解20min，然后將牡蠣肉取出瀝干轉(zhuǎn)移至蒸餾水中浸泡40min，瀝干后對(duì)牡蠣肉進(jìn)行冷凍粉碎制得牡蠣凍干粉。
[0033]B、將所述牡蠣凍干粉添加到10倍質(zhì)量的蒸餾水中，用PBS緩沖溶液將pH調(diào)節(jié)至6，然后加入總量為1500 U/g的木瓜蛋白酶和中性蛋白酶，在40°C下進(jìn)行酶解，3h后得到酶解液。
[0034]C、將所述酶解液噴霧干燥后制得牡蠣蛋白粉。
[0035]本實(shí)施例的牡蠣蛋白粉中?；撬岬暮窟_(dá)7-llmg/g。
[0036]實(shí)施例5
一種富含?；撬岬牡鞍追鄣闹苽浞椒?，包括以下步驟:
A、稱取干凈牡蠣肉并搗碎，將牡蠣肉添加到12倍質(zhì)量的濃度為0.9被%的氯化鈉水溶液中，接著向氯化鈉水溶液中添加150U/g的磷脂酶D并在25°C下酶解15min，然后將牡蠣肉取出瀝干轉(zhuǎn)移至蒸餾水中浸泡25min，瀝干后對(duì)牡蠣肉進(jìn)行冷凍粉碎制得牡蠣凍干粉。
[0037]B、將所述牡蠣凍干粉添加到8倍質(zhì)量的蒸餾水中，用PBS緩沖溶液將pH調(diào)節(jié)至7，然后加入總量為800 U/g的木瓜蛋白酶和中性蛋白酶，在30°C下進(jìn)行酶解，Sh后得到酶解液。
[0038]C、將所述酶解液噴霧干燥后制得牡蠣蛋白粉。
[0039]本實(shí)施例的牡蠣蛋白粉中?；撬岬暮窟_(dá)8_12mg/g。
[0040]本發(fā)明中所用原料、設(shè)備，若無特別說明，均為本領(lǐng)域的常用原料、設(shè)備;本發(fā)明中所用方法，若無特別說明，均為本領(lǐng)域的常規(guī)方法。
[0041]以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實(shí)施例，并非對(duì)本發(fā)明作任何限制，凡是根據(jù)本發(fā)明技術(shù)實(shí)質(zhì)對(duì)以上實(shí)施例所作的任何簡單修改、變更以及等效變換，均仍屬于本發(fā)明技術(shù)方案的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種富含?；撬岬牡鞍追鄣闹苽浞椒?，其特征在于包括以下步驟: A、稱取干凈牡■肉并搗碎，然后對(duì)牡■肉進(jìn)行冷凍粉碎制得牡■凍干粉； B、將所述牡蠣凍干粉添加到蒸餾水中，用PBS緩沖溶液將pH調(diào)節(jié)至6-7，然后加入蛋白酶500-1500 U/g，在30-40°C下進(jìn)行酶解，3_10h后得到酶解液； C、將所述酶解液噴霧干燥后制得牡蠣蛋白粉。2.如權(quán)利要求1所述的一種富含?；撬岬牡鞍追鄣闹苽浞椒?，其特征在于，步驟B中所述蛋白酶為木瓜蛋白酶和中性蛋白酶。3.如權(quán)利要求1或2所述的一種富含牛磺酸的蛋白粉的制備方法，其特征在于，步驟B中牡.凍干粉與蒸饋水的質(zhì)量比為I: (8-10)。4.如權(quán)利要求1所述的一種富含?；撬岬牡鞍追鄣闹苽浞椒?，其特征在于，在步驟A將牡蠣肉搗碎后并冷凍粉碎前，對(duì)牡蠣肉進(jìn)行預(yù)處理:將牡蠣肉添加到濃度為0.5-1.5^%的氯化鈉水溶液中，接著向氯化鈉水溶液中添加磷脂酶并在20-40°C下酶解10-20min，然后將牡蠣肉取出瀝干轉(zhuǎn)移至蒸餾水中浸泡20-40min。5.如權(quán)利要求4所述的一種富含?；撬岬牡鞍追鄣闹苽浞椒ǎ涮卣髟谟?，牡蠣肉與氯化鈉水溶液的質(zhì)量比為1: (12-14)。6.如權(quán)利要求5所述的一種富含?；撬岬牡鞍追鄣闹苽浞椒ǎ涮卣髟谟?，所述磷脂酶的添加量為50-200U/g。7.如權(quán)利要求4-6之一所述的一種富含?；撬岬牡鞍追鄣闹苽浞椒?，其特征在于，所述磷脂酶選自磷脂酶A1、磷脂酶A2、磷脂酶B、磷脂酶C、磷脂酶D中的一種或多種。
【文檔編號(hào)】A23J1/04GK105831388SQ201510935546
【公開日】2016年8月10日
【申請(qǐng)日】2015年12月15日
【發(fā)明人】金火喜, 楊立業(yè), 歐陽小琨
【申請(qǐng)人】浙江海洋學(xué)院