一種淀粉-多酚復(fù)合納米顆粒及其制備工藝的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種淀粉?多酚復(fù)合納米顆粒及其制備工藝，步驟如下：(1)生物酶法制備脫支納米淀粉顆粒：用普魯蘭酶酶解糊化淀粉乳，制備短直鏈淀粉溶液，酒精滴定，制備淀粉納米顆粒，凍干得到淀粉納米顆粒粉末；(2)吸附裝載多酚，制備淀粉?多酚復(fù)合納米顆粒：制備淀粉納米顆粒懸濁液，加入不同量的多酚，置于振蕩水浴鍋中，室溫吸附不同時間，超濾離心，沉淀水洗，真空冷凍干燥。本發(fā)明的淀粉?多酚復(fù)合納米顆粒，納米粒子尺寸小，能增加納米顆粒對組織的附著力，提高胃腸道對多酚的輸送效率，延長多酚在胃腸道內(nèi)的滯留時間，提高其生物利用率。保護具有生物活性的多酚，防止外界環(huán)境中的光、pH值、氧氣等對其的影響，提高多酚的穩(wěn)定性。
【專利說明】
一種淀粉-多酚復(fù)合納米顆粒及其制備工藝
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及納米顆粒制備和食品醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及生物酶法脫支納米淀粉顆粒 和納米顆粒吸附裝載多酚的制備工藝。
【背景技術(shù)】
[0002] 茶多酚(TP)是從茶葉中提取的多酚類物質(zhì)，多酚總量占茶葉干重的18%~36%， 具有廣泛的藥理作用。茶葉中多酚類包括兒茶素、黃酮及其苷類、花青素和花白素以及酚酸 和縮酚酸等，其中兒茶素占多酚總量的70%左右。其主要組分為表兒茶素(EC)、表沒食子兒 茶素(EGC)、表兒茶素沒食子酸酯(ECG)、表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)。兒茶素不僅對 茶葉的滋味具有重要影響，而且大量研究表明，兒茶素還具有重要的生物活性，在抗氧化、 清除自由基、抗茵消炎、抗病毒，預(yù)防心血管疾病、降血壓血脂和預(yù)防癌癥等方面具有重要 的功能。但是，茶多酚不穩(wěn)定，遇強堿、強酸、光照、高熱及過渡金屬易變質(zhì)。
[0003] 近年來，由于高分子材料的納米載藥體系受到越來越多的關(guān)注，尤其是天然多糖 類的納米載體。淀粉是一類重要的具有生物可降解性、可再生、良好生物相容性的天然多糖 類高分子材料，來源豐富，價格低廉，作為載體材料在藥物控制釋放領(lǐng)域已經(jīng)得到部分應(yīng) 用。通過載體包埋或鍵合活性物質(zhì)制備納米顆粒，既可以減少活性物質(zhì)在加工或貯藏過程 中的損失，提高其抗氧化活性，又能有效地將活性物質(zhì)輸送到人體的胃腸道位置。并通過控 制釋放活性物質(zhì)提高其生物利用率，同時保持活性物質(zhì)的結(jié)構(gòu)、功效以及掩蓋其口感差等。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 針對多酚在儲存、運輸、加工過程中存在的易氧化、易分解等問題，本發(fā)明的目的 在于提供一種淀粉-多酸復(fù)合納米顆粒及其制備工藝，利用納米淀粉多羥基、結(jié)構(gòu)疏松、內(nèi) 有空腔的特性，可以吸附裝載多酚，可提高茶多酚在光、熱、氧氣等敏感環(huán)境中的穩(wěn)定性，進 而提尚其抗氧化活性。
[0005] 本發(fā)明采取的技術(shù)方案為：
[0006] -種淀粉-多酸復(fù)合納米顆粒的制備工藝，步驟如下：
[0007] (1)短直鏈淀粉溶液的制備:首先配制質(zhì)量體積比為1-15%的糊化淀粉乳，向其中 加入100-500U/mL的普魯蘭酶，糊化淀粉乳與普魯蘭酶的體積比為100:2-7，40-60°C酶解6-12小時，得到短直鏈淀粉溶液；
[0008] (2)淀粉納米顆粒的制備：向短直鏈淀粉溶液中緩慢滴加乙醇，邊攪拌邊滴加，短 直鏈淀粉溶液與乙醇的體積比為1:2-5，滴加完乙醇后繼續(xù)攪拌l-5h，離心，水洗沉淀，得到 淀粉納米顆粒，凍干得到淀粉納米顆粒粉末；
[0009] (3)淀粉-多酚復(fù)合納米顆粒的制備：用磷酸或醋酸緩沖液制備質(zhì)量體積比5%-10 %的淀粉納米顆粒懸濁液，加入多酚，使多酚在懸濁液中的終濃度為l_20mM，12-30 °C吸 附0.1-24h，吸附過程中保持振蕩，吸附完成后超濾離心，水洗沉淀，凍干得到淀粉-多酚復(fù) 合納米顆粒。
[0010] 進一步的，步驟（1)中配制糊化淀粉乳所用的淀粉為錯質(zhì)玉米淀粉、懦性大米淀 粉、蠟質(zhì)馬鈴薯淀粉、蠟質(zhì)小麥淀粉或普通玉米淀粉中的任意一種或幾種，糊化淀粉乳的配 制采用pH4-6的1M磷酸緩沖液。
[0011] 進一步的，步驟（2)中多酚為兒茶素（C)、表兒茶素（EC)、表兒茶素沒食子酸酯 (ECG)、表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)或原花青素 (PAC)中的一種或幾種。
[0012] 進一步的，步驟(2)、（3)中水洗沉淀的次數(shù)為2-3次，水洗的方式為：向沉淀中加入 去離子水，將沉淀旋起，3000-6000rpm離心10-20分鐘，得到沉淀。
[0013]進一步的，步驟(3)中緩沖液為pH6.5-7.5、濃度為1M磷酸或醋酸。
[0014] 進一步的，步驟(2)、（3)中凍干工藝為:真空度5-10Pa，溫度-80-60°C，時間48-72 小時。
[0015] 進一步的，步驟(3)中的吸附在振蕩水浴鍋中完成，振蕩頻率為400-800rpm。
[0016] 進一步的，步驟(3)中超濾離心中濾膜孔徑為200-450nm。
[0017] 進一步的，步驟(2)、（3)中離心的轉(zhuǎn)速3000-6000印111，離心時間10-20分鐘。
[0018] 本發(fā)明的另一個目的是提供以上述工藝制備得到的淀粉-多酚復(fù)合納米顆粒。
[0019] 本發(fā)明的有益效果為：
[0020] (1)制備得到的淀粉-多酚復(fù)合納米顆粒，納米粒子尺寸小，能增加納米顆粒對組 織的附著力，提高胃腸道對多酚的輸送效率，并可通過減少腸道清除機制的影響以及增加 多酚的表面活性，延長多酚在胃腸道內(nèi)的滯留時間，提高其生物利用率。保護具有生物活性 的多酚，防止外界環(huán)境中的光、pH值、氧氣等對其的影響，提高多酚的穩(wěn)定性;保護活性部 位，掩蔽不良風(fēng)味的釋放;有效減少生物活性成分的添加量和毒副作用。（2)制備得到的淀 粉-多酚復(fù)合納米顆粒，具有裝載率高，成本低，多酚活性作用強等特性，而且多酚在模擬胃 腸道環(huán)境中具有緩釋的功效。
【附圖說明】
[0021] 圖1為實施例2、7-12、14、19-24、26、31-36、38、43-48中納米顆粒隨不同吸附時間 的裝載效率。
[0022] 注:圖1中，橫坐標為不同吸附時間(min)，縱坐標為裝載率（％ )
[0023] 圖2為實施例2、7-12、14、19-24、26、31-36、38、43-48中納米顆粒隨不同吸附時間 的裝載量。
[0024] 注：圖2中，橫坐標為不同吸附時間(min)，縱坐標為裝載率(yg/mg SNPs)
[0025]圖3為實施例1-6、13-18、25-30、37-42中納米顆粒隨不同多酚添加量的裝載率(質(zhì) 量基）。
[0026] 注：圖3中，橫坐標為添加多酚的量(mM)，縱坐標為裝載量(yg/mgSNPs)
[0027] 圖4為實施例1-6、13-18、25-30、37-42中納米顆粒隨不同多酚添加量的裝載率(摩 爾基）。
[0028] 注：圖4中，橫坐標為添加多酚的量(mM)，縱坐標為裝載率(wnol/mgSNPs)
[0029] 圖5為實施例1-6、13-18、25-30、37-42中1&即11111化吸附動力學(xué)模擬。
[0030] 注：圖5中，橫坐標為吸附達到平衡時多酚的濃度(mM)，縱坐標為吸附多酚的量(y g/mgSNPs)
[0031] 圖6為實施例1-6、13-18、25-30、37-42中納米顆粒隨不同多酚添加量的粒徑變化。
[0032] 注：圖6中，橫坐標為添加多酚的量(mM)，縱坐標為納米顆粒的粒徑(nm)
[0033] 圖7為實施例1-6、13-18、25-30、37-42中納米顆粒隨不同多酚添加量的26七&電位 變化。
[0034] 注：圖7中，橫坐標為添加多酚的量(mM)，縱坐標為納米顆粒的電位(mV)
[0035] 圖8為實施例2、7-12、14、19-24、26、31-36、38、43-48中納米顆粒隨不同吸附時間 的粒徑變化。
[0036] 注：圖8中，橫坐標為不同吸附時間(min)，縱坐標為納米顆粒的粒徑(nm)
[0037] 圖9為實施例2、7-12、14、19-24、26、31-36、38、43-48中納米顆粒隨不同吸附時間 的zeta電位變化。
[0038] 注:圖9中，橫坐標為不同吸附時間(min)，縱坐標為納米顆粒的電位(mV)
[0039] 圖10為實施例2淀粉-兒茶素復(fù)合納米顆粒透射電鏡圖。
[0040] 圖11為實施例14淀粉-表兒茶素復(fù)合納米顆粒透射電鏡圖。
[0041]圖12為實施例26淀粉-表沒食子兒茶素沒食子酸酯復(fù)合納米顆粒透射電鏡圖。 [0042]圖13為實施例38淀粉-原花青素復(fù)合納米顆粒透射電鏡圖。
[0043] 圖14為實施例2淀粉-兒茶素復(fù)合納米顆粒紅外光譜圖。
[0044] 圖15為實施例14淀粉-表兒茶素復(fù)合納米顆粒紅外光譜圖。
[0045] 圖16為實施例26淀粉-表沒食子兒茶素沒食子酸酯復(fù)合納米顆粒紅外光譜圖。
[0046] 圖17為實施例38淀粉-原花青素復(fù)合納米顆粒紅外光譜圖。
[0047]圖18為實施例2、14、26、38納米顆粒在模擬胃液環(huán)境中的緩釋圖。
[0048] 注:圖18中，橫坐標為釋放時間(min)，縱坐標為多酚的釋放量（％ )
[0049]圖19為實施例2、14、26、38納米顆粒在模擬腸液環(huán)境中的緩釋圖。
[0050] 注:圖19中，橫坐標為釋放時間(min)，縱坐標為多酚的釋放量（％ )
【具體實施方式】
[0051] 下面結(jié)合具體實施例及附圖對本發(fā)明做進一步詳細說明。
[0052] 實施例1-12
[0053] 按照如下步驟制備淀粉-兒茶素(C-SNPs)復(fù)合納米顆粒：
[0054] (1)短直鏈淀粉溶液的制備：首先選用糯性大米淀粉，用pH4.5的1M磷酸緩沖液配 制質(zhì)量體積比為10 %的糊化淀粉乳，向其中加入300U/mL的普魯蘭酶，糊化淀粉乳與普魯蘭 酶的體積比為100:5，55°C酶解8小時，得到短直鏈淀粉溶液；
[0055] (2)淀粉納米顆粒的制備：向短直鏈淀粉溶液中緩慢滴加乙醇，邊攪拌邊滴加，短 直鏈淀粉溶液與乙醇的體積比為1:4，滴加完乙醇后繼續(xù)攪拌2h，然后5000rpm離心10分鐘， 向沉淀中加入去離子水，將沉淀旋起，5000rpm離心10分鐘，完成一次水洗，再重復(fù)一次水洗 過程，得到淀粉納米顆粒，凍干(真空度l〇Pa，溫度-70°C，時間50小時)得到淀粉納米顆粒粉 末；
[0056] (3)C-SNPs復(fù)合納米顆粒的制備：用pH6.5、濃度為1M的磷酸緩沖液制備質(zhì)量體積 比8%的淀粉納米顆粒懸濁液，加入兒茶素，使兒茶素在懸濁液中的終濃度為lmM、2mM、6mM、 1 OmM、15mM 或 20mM，15 °C 吸附 1 Omi n、0 ? 5h、1 h、2h、6h、1 Oh 或 24h，吸附過程中保持振蕩，頻率 為500rpm，吸附完成后用孔徑為300nm的濾膜進行超濾離心，以步驟（2)的方法水洗沉淀3 次，凍干(真空度1 OPa，溫度-70°C，時間50小時)得到C-SNPs復(fù)合納米顆粒。
[0057] 表1實施例1-12變量參數(shù)設(shè)置
[0059]實施例13-24
[0060] 按照如下步驟制備淀粉-表兒茶素(EC-SNPs)復(fù)合納米顆粒：
[0061 ] (1)短直鏈淀粉溶液的制備:首先選用蠟質(zhì)玉米淀粉，用PH5的1M磷酸緩沖液配制 質(zhì)量體積比為8%的糊化淀粉乳，向其中加入250U/mL的普魯蘭酶，糊化淀粉乳與普魯蘭酶 的體積比為100:4，50°C酶解10小時，得到短直鏈淀粉溶液；
[0062] (2)淀粉納米顆粒的制備：向短直鏈淀粉溶液中緩慢滴加乙醇，邊攪拌邊滴加，短 直鏈淀粉溶液與乙醇的體積比為1:5,滴加完乙醇后繼續(xù)攪拌lh，然后3000rpm離心20分鐘， 向沉淀中加入去離子水，將沉淀旋起，3000rpm離心20分鐘，完成一次水洗，再重復(fù)兩次水洗 過程，得到淀粉納米顆粒，凍干(真空度5Pa，溫度-60°C，時間60小時)得到淀粉納米顆粒粉 末；
[0063] (3)EC-SNPs復(fù)合納米顆粒的制備：用pH7.5、濃度為1M的醋酸緩沖液制備質(zhì)量體積 比10 %的淀粉納米顆粒懸濁液，加入表兒茶素，使表兒茶素在懸濁液中的終濃度為ImM、 2mM、6mM、1 OmM、15mM 或20mM，30 °C 吸附 1 Omin、0 ? 5h、lh、2h、6h、1 Oh 或 24h，吸附過程中保持振 蕩，頻率為400rpm，吸附完成后用孔徑為400nm的濾膜進行超濾離心，以步驟(2)的方法水洗 沉淀2次，凍干(真空度5Pa，溫度-60°C，時間60小時)得到EC-SNPs復(fù)合納米顆粒。
[0064] 表2實施例13-24變量參數(shù)設(shè)置
[0066]實施例25-36
[0067]按照如下步驟制備淀粉-表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG-SNPs)復(fù)合納米顆粒： [0068] (1)短直鏈淀粉溶液的制備：首先選用蠟質(zhì)馬鈴薯淀粉，用pH6的1M磷酸緩沖液配 制質(zhì)量體積比為5%的糊化淀粉乳，向其中加入500U/mL的普魯蘭酶，糊化淀粉乳與普魯蘭 酶的體積比為100:1，45°C酶解12小時，得到短直鏈淀粉溶液；
[0069] (2)淀粉納米顆粒的制備：向短直鏈淀粉溶液中緩慢滴加乙醇，邊攪拌邊滴加，短 直鏈淀粉溶液與乙醇的體積比為1:2,滴加完乙醇后繼續(xù)攪拌3h，然后6000rpm離心10分鐘， 向沉淀中加入去離子水，將沉淀旋起，6000rpm離心10分鐘，完成一次水洗，再重復(fù)兩次水洗 過程，得到淀粉納米顆粒，凍干(真空度8Pa，溫度-80°C，時間48小時)得到淀粉納米顆粒粉 末；
[0070] (3)EGCG-SNPs復(fù)合納米顆粒的制備：用pH7、濃度為1M的醋酸緩沖液制備質(zhì)量體積 比5 %的淀粉納米顆粒懸濁液，加入表沒食子兒茶素沒食子酸酯，使表沒食子兒茶素沒食子 酸酯在懸濁液中的終濃度為 ImM、2mM、6mM、1 OmM、15mM 或 20mM，20 °C 吸附 1 Omin、0.5h、1 h、2h、 6h、10h或24h，吸附過程中保持振蕩，頻率為SOOrpm，吸附完成后用孔徑為450nm的濾膜進行 超濾離心，以步驟(2)的方法水洗沉淀2次，凍干(真空度8Pa，溫度-80°C，時間48小時)得到 EGCG-SNPs復(fù)合納米顆粒。
[0071] 表3實施例25-36變量參數(shù)設(shè)置
[0073]實施例37-48
[0074]按照如下步驟制備淀粉-原花青素(PAC-SNPs)復(fù)合納米顆粒：
[0075] (1)短直鏈淀粉溶液的制備:首先選用普通玉米淀粉，配制質(zhì)量體積比為15%的糊 化淀粉乳，向其中加入200U/mL的普魯蘭酶，糊化淀粉乳與普魯蘭酶的體積比為100:7，酶解 12小時，得到短直鏈淀粉溶液；
[0076] (2)淀粉納米顆粒的制備：向短直鏈淀粉溶液中緩慢滴加乙醇，邊攪拌邊滴加，短 直鏈淀粉溶液與乙醇的體積比為1:2,滴加完乙醇后繼續(xù)攪拌5h，然后4000rpm離心15分鐘， 向沉淀中加入去離子水，將沉淀旋起，4000rpm離心15分鐘，完成一次水洗，再重復(fù)一次水洗 過程，得到淀粉納米顆粒，凍干(真空度5Pa，溫度-70°C，時間72小時)得到淀粉納米顆粒粉 末；
[0077] (3)PAC_SNPs復(fù)合納米顆粒的制備：用pH7.0、濃度為1M的磷酸緩沖液制備質(zhì)量體 積比5%的淀粉納米顆粒懸濁液，加入原花青素，使原花青素在懸濁液中的終濃度為ImM、 2mM、6mM、1 OmM、15mM 或20mM，12 °C 吸附 1 Omin、0 ? 5h、lh、2h、6h、1 Oh 或 24h，吸附過程中保持振 蕩，頻率為400rpm，吸附完成后用孔徑為200nm的濾膜進行超濾離心，以步驟(2)的方法水洗 沉淀3次，凍干(真空度5Pa，溫度-70°C，時間72小時)得到PAC-SNPs復(fù)合納米顆粒。
[0078] 表4實施例37-48變量參數(shù)設(shè)置
[0080] 實施例1-48所制備的淀粉-多酸復(fù)合納米顆粒的性能檢測：
[0081] (1)復(fù)合納米顆粒的裝載效率測定：
[0082] 對吸附完成之后的溶液進行裝載效率測定，通過測定離心后上清液的吸光度，計 算未吸附的多酚的含量。計算公式為：（總的多酚的添加量-上清液中多酚的量)/總的多酚 添加量。
[0083]圖1-5顯示的為實施例1-48復(fù)合納米顆粒的裝載率，從圖中可以看出，淀粉裝載多 酚的吸附效率隨多酚添加量和吸附時間的增加而增加，最終的效率為原花青素 >表兒茶素 >EGCG>兒茶素。并且裝載率也隨多酚的添加量增加而增加，最終裝載量為納米顆粒質(zhì)量 的2-20倍。
[0084] (2)復(fù)合納米顆粒langmuir吸附動力學(xué)模擬：
[0085] 根據(jù)實施例1-6、13-18、25-30、37-42不同的多酚初始濃度，模擬Langmuir方程式， 方程式為
模擬曲線如圖5所示，得到的參數(shù)如表5所示，
[0086] 表5 langmuir吸附動力學(xué)模擬方程的參數(shù)。
[0088] (3)復(fù)合納米顆粒的大小及形態(tài)
[0089]圖6-9為激光動態(tài)光散射圖，可見，復(fù)合納米顆粒的粒徑大小為100-400nm，而且隨 多酚添加量的增加先增加后減小;粒徑隨吸附時間的延長呈現(xiàn)逐漸增加的趨勢。
[0090]圖10-13為分別為淀粉-兒茶素、淀粉-表兒茶素、淀粉-EGCG、淀粉-原花青素的透 射電鏡圖譜，由圖看出，不同茶多酚納米顆粒的性質(zhì)都呈表面光滑的圓球形，而不同茶多酚 的顆粒大小不同，但都在20_60nm之間。
[0091 ] (4)復(fù)合納米顆粒的傅里葉紅外光譜
[0092] 如圖14-17所示，分別為淀粉-兒茶素、淀粉-表兒茶素、淀粉-EGCG、淀粉-原花青素 的紅外光譜圖，納米顆粒的光譜圖和淀粉與茶多酚簡單混合的有明顯差異，說明淀粉與茶 多酚形成了復(fù)合物，而不是簡單的混合在一起。
[0093] (5)復(fù)合納米顆粒敏感環(huán)境(紫外線、鹽離子、高溫)測試：
[0094]①取多酚干粉及實施例2、14、26、38的復(fù)合納米顆粒干粉，用pH7的1M磷酸緩沖液 分別配制質(zhì)量體積比10%的溶液，在紫外線下處理30min，將處理后的溶液分別稀釋成 0 ? 2ppm、0 ? 4ppm、0 ? 6ppm、0 ? 8ppm、1 ? Oppm 的溶液，分別加入 DPPH，暗處放置 30min，于 517nm 測 吸光度值；
[0095]②取多酚干粉及實施例2、14、26、38的復(fù)合納米顆粒干粉，用pH7的1M磷酸緩沖液 分別配制質(zhì)量體積比10%的溶液，加入0.1M NaCl處理lOmin，將處理后的溶液分別稀釋成 0 ? 2ppm、0 ? 4ppm、0 ? 6ppm、0 ? 8ppm、1 ? Oppm 的溶液，分別加入 DPPH，暗處放置 30min，于 517nm 測 吸光度值；
[0096]③取多酚干粉及實施例2、14、26、38的復(fù)合納米顆粒干粉，用pH7的1M磷酸緩沖液 分別配制質(zhì)量體積比10 %的溶液，在80 °C處理lOmin，將處理后的溶液分別稀釋成0.2ppm、 0 ? 4ppm、0 ? 6ppm、0 ? 8ppm、1 ? Oppm的溶液，分別加入DPPH，暗處放置30min，于517nm測吸光度 值；
[0097]表6實施例2、14、26、38的復(fù)合納米顆粒干粉經(jīng)不同條件處理后清除自由基能力 為50%時多酚的需要量
[0099] 如表6所示，不同的多酚復(fù)合納米顆粒抵抗鹽、紫外和溫度的能力不同，兒茶素和 表沒食子兒茶素沒食子酸酯-淀粉納米顆?？梢杂行У挚棺贤饩€和溫度的破壞;表兒茶素-淀粉納米顆粒可以抵抗鹽、紫外線和溫度的影響;而原花青素-淀粉納米顆?？梢缘挚果}和 溫度的破壞。
[0100] (6)胃、腸道環(huán)境緩釋模擬：
[0101] 取多酚干粉及實施例2、14、26、38的復(fù)合納米顆粒干粉，分別溶解在口112(模擬胃環(huán) 境)和pH7(模擬腸道環(huán)境）的1M醋酸緩沖溶液中，制成質(zhì)量體積比10%的溶液，置于3kDa的 透析袋中，將透析袋置于50mL相同pH( 2或7)的醋酸緩沖液中，于50rpm的磁力攪拌器中攪拌 不同時間，以多酚為標準，用紫外分光光度計測定不同時間累計釋放的多酚含量。圖18和圖 19分別為模擬胃液和腸液環(huán)境中的緩釋圖，可見淀粉-多酚復(fù)合納米顆粒具有非常顯著的 緩釋效果，不同的多酚復(fù)合納米顆粒在相同的模擬環(huán)境中的釋放基本相同，在腸液中的釋 放明顯比胃液中的釋放緩慢。
【主權(quán)項】
1. 一種淀粉-多酸復(fù)合納米顆粒的制備工藝，其特征在于，步驟如下： (1) 短直鏈淀粉溶液的制備:首先配制質(zhì)量體積比為1-15%的糊化淀粉乳，向其中加入 100-500U/mL的普魯蘭酶，糊化淀粉乳與普魯蘭酶的體積比為100:2-7,40-60°C酶解6-12小 時，得到短直鏈淀粉溶液； (2) 淀粉納米顆粒的制備：向短直鏈淀粉溶液中緩慢滴加乙醇，邊攪拌邊滴加，短直鏈 淀粉溶液與乙醇的體積比為1:2-5，滴加完乙醇后繼續(xù)攪拌l-5h，離心，水洗沉淀，得到淀粉 納米顆粒，凍干得到淀粉納米顆粒粉末； (3) 淀粉-多酚復(fù)合納米顆粒的制備：用磷酸或醋酸緩沖液制備質(zhì)量體積比5%-10%的 淀粉納米顆粒懸濁液，加入多酚，使多酚在懸濁液中的終濃度為l_20mM，12-30°C吸附0.1-24h，吸附過程中保持振蕩，吸附完成后超濾離心，水洗沉淀，凍干得到淀粉-多酚復(fù)合納米 顆粒。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的淀粉-多酚復(fù)合納米顆粒的制備工藝，其特征在于，步驟(2)中 多酚為兒茶素、表兒茶素、表兒茶素沒食子酸酯、表沒食子兒茶素沒食子酸酯或原花青素中 的一種或幾種。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的淀粉-多酚復(fù)合納米顆粒的制備工藝，其特征在于，步驟 (1) 中配制糊化淀粉乳所用的淀粉為蠟質(zhì)玉米淀粉、糯性大米淀粉、蠟質(zhì)馬鈴薯淀粉、蠟質(zhì) 小麥淀粉或普通玉米淀粉中的任意一種或幾種，糊化淀粉乳的配制采用PH4-6的1M磷酸緩 沖液。4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的淀粉-多酚復(fù)合納米顆粒的制備工藝，其特征在于，步驟 (2) 、（3)中水洗沉淀的次數(shù)為2-3次，水洗的方式為：向沉淀中加入去離子水，將沉淀旋起， 3000-6000rpm離心10-20分鐘，得到沉淀。5. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的淀粉-多酚復(fù)合納米顆粒的制備工藝，其特征在于，步驟 (3) 中緩沖液為pH6.5-7.5、濃度為1M磷酸或醋酸。6. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的淀粉-多酚復(fù)合納米顆粒的制備工藝，其特征在于，步驟 (2) 、（3)中凍干工藝為:真空度5-10?&，溫度-80~-60°(：，時間48-72小時。7. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的淀粉-多酚復(fù)合納米顆粒的制備工藝，其特征在于，步驟 (3) 中的吸附在振蕩水浴鍋中完成，振蕩頻率為400-800rpm。8. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的淀粉-多酚復(fù)合納米顆粒的制備工藝，其特征在于，步驟 (3)中超濾離心中濾膜孔徑為200-450nm 〇9. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的淀粉-多酚復(fù)合納米顆粒的制備工藝，其特征在于，步驟 (2)、（3)中離心的轉(zhuǎn)速3000-6000印111，離心時間10-20分鐘。10. 根據(jù)權(quán)利要求1-9任一所述的工藝制備的淀粉-多酸復(fù)合納米顆粒，其特征在于，由 權(quán)利要求1-9任一所述的工藝制備而成。
【文檔編號】A23L33/10GK105852060SQ201610231125
【公開日】2016年8月17日
【申請日】2016年4月14日
【發(fā)明人】孫慶杰, 熊柳, 劉成珍, 葛勝菊, 楊潔, 常然然
【申請人】青島農(nóng)業(yè)大學(xué)