一種促消化葡萄復(fù)合粉及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種促消化葡萄復(fù)合粉及其制備方法，將具有天然色澤、風(fēng)味和口感的葡萄粉與植物乳桿菌粉、小麥芽粉、改性膳食纖維、酵素粉、木瓜粉等功能性產(chǎn)品科學(xué)復(fù)配，不僅有效提高了葡萄復(fù)合粉的營養(yǎng)性、食品安全性和保健功能，而且顯著提高了葡萄復(fù)合粉的益生性和質(zhì)量穩(wěn)定性，與現(xiàn)有葡萄復(fù)合粉相比：其組分簡單，色澤、風(fēng)味和口感天然，營養(yǎng)價值高，保健功能強，生物活性物質(zhì)含量高，益生菌活菌數(shù)量高、益生性強，益生菌功能性代謝物種類全、含量高，食品安全性高，保質(zhì)期長。CGMCC NO.1176320151130
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ]本發(fā)明涉及葡萄深加工產(chǎn)品，具體涉及一種促消化葡萄復(fù)合粉及其制備方法。 一種促消化葡萄復(fù)合粉及其制備方法
【背景技術(shù)】
[0002] 固體飲料是水分含量在5%以內(nèi)，具有一定形狀，例如顆粒狀、片狀、塊狀、粉末狀 等，需經(jīng)沖溶才可以飲用的飲料。固體飲料是由液體飲料除去水分而制成的，去除水分的目 的：一是防止飲料本身的酶或微生物引起的變質(zhì)或腐敗，以利儲藏;二是便于儲存和運輸。 與液體飲料相比，固體飲料具有如下特點：質(zhì)量顯著減輕，體積顯著變小，攜帶方便;風(fēng)味 好，速溶性好，應(yīng)用范圍廣，飲用方便;易于保持衛(wèi)生;包裝簡易，運輸方便。固體飲料以某種 原料為主，配以其它輔料加工而成的，按其主要原料的類別，可將固體飲料分為果香型、蛋 白型和其它型三種。它們中都要加入糖或甜味劑?，F(xiàn)有技術(shù)常以某些甜味劑代替部分或者 全部蔗糖。然而隨著營養(yǎng)型疾病的增多，固體飲料，如：固體奶茶、咖啡伴侶、豆?jié){粉、芝麻 糊、核桃粉等中，開始需要加入低熱量的復(fù)合甜味劑以解決能量與營養(yǎng)過剩的問題。
[0003] 白藜蘆醇是多酚類化合物，主要來源于葡萄(紅葡萄酒）、虎杖、花生、桑椹等植物。 白藜蘆醇是一種生物性很強的天然多酚類物質(zhì)，又稱為芪三酚，是腫瘤的化學(xué)預(yù)防劑，也是 對降低血小板聚集，預(yù)防和治療動脈粥樣硬化、心腦血管疾病的化學(xué)預(yù)防劑。美國農(nóng)業(yè)部的 研究結(jié)果表明，花生紅衣與仁中也含有相當(dāng)多的白藜蘆醇。白藜蘆醇的實驗研究已經(jīng)證實 具有對心血管疾病和癌癥的有益作用。白藜蘆醇對激素依賴性腫瘤有明顯的預(yù)防作用。還 可對骨質(zhì)疏松、痤瘡及老年癡呆癥有預(yù)防作用，具有抗病毒及免疫調(diào)節(jié)作用。對人體內(nèi)部一 種單體抗衰老酶起作用，進(jìn)而發(fā)揮預(yù)防各種年齡相關(guān)疾病、延長預(yù)期壽命的潛在作用。白藜 蘆醇有著很廣泛的保健作用，例如法國人常飲高脂肪物中含有白藜蘆醇，所以法國人的冠 心病發(fā)病率低于其它西方國家，正因為白藜蘆醇因為可以有效地壓制高脂肪的防治作用， 已有部分國家和地區(qū)把白藜蘆醇及其制品作為膳食補充劑開發(fā)白藜蘆醇。
[0004] 目前以葡萄為原料，制備純葡萄粉的較少：
[0005] 中國專利CN 102885265A公開了一種葡萄粉的制作方法。本發(fā)明以新鮮的葡萄為 原料，進(jìn)行篩選后，加熱進(jìn)行滅酶處理，然后在醋酸鋅溶液和抗壞血酸溶液中進(jìn)行護色，再 烘干，最后將處理后的葡萄粉碎過篩、真空包裝、滅菌，得到葡萄粉成品，該產(chǎn)品色澤鮮艷， 營養(yǎng)豐富，保質(zhì)期長。本發(fā)明具有工藝簡單、操作方便、生產(chǎn)成本低等優(yōu)點，適合工業(yè)化生 產(chǎn)。上述公開的專利護色工藝傳統(tǒng)，效果差，引入化學(xué)護色劑，食品安全性差，采用加熱滅酶 和烘干，生物活性物質(zhì)和熱敏性成分損失大。
[0006] 以葡萄為主要原料，制備葡萄復(fù)合粉的較多：
[0007] 中國專利CN 104172005A公開了一種益生元葡萄藍(lán)莓復(fù)合果粉及其制作方法，主 要由以下原料組成：葡萄鮮果50~80份，藍(lán)莓鮮果20~50份，低聚果糖2~5份。制作方法如 下：（1)取葡萄鮮果和藍(lán)莓鮮果洗凈；（2)破碎并在破碎過程中加入食用亞硫酸得果漿；（3) 取步驟(2)的果漿，加入果膠酶；（4)取酶解后的果漿壓榨得混合果汁；（5)添加低聚果糖； (6)將可溶性固形物含量濃縮至25%; (7)過濾；（8)冷凍干燥；（9)過篩得果粉成品。本發(fā)明 涉及的產(chǎn)品富含花青素、有機酸、維生素等成分，具有很高的營養(yǎng)價值，可速溶，可用于飲 料、糕點等食品的原料。上述公開的專利采用傳統(tǒng)的果汁制備方法營養(yǎng)成分損失大，收得率 低，保健功效不理想。
[0008] 中國專利CN 104970419A公開了一種葡萄固體飲料，包括以下質(zhì)量百分含量的各 個組分:葡萄籽粉末20~25 %，櫻桃干粉末18~22%，藍(lán)莓干粉末15~18%，番石榴干粉末 15~17%，雙歧桿菌3~5 %，綜合植物酵素4~6 %，大豆膳食纖維粉5~10 %，維生素2~4% 和復(fù)合甜味劑2~5%。本發(fā)明所提供的葡萄固體飲料具有如下優(yōu)點：提升機體的新陳代謝， 強健體質(zhì)；清理腸道垃圾、排毒凈化;綠色天然減脂瘦身等。飲料中添加的復(fù)合甜味劑降低 了葡萄汁固體飲本身所存在的不良味道，使得固體飲料甜度柔和，不會導(dǎo)致齲齒，也不會引 起血糖膽固醇升高。上述公開的專利功能性物質(zhì)為葡萄籽，原料利用率低、成本高，食品添 加劑多，安全性低。
[0009] 以葡萄為輔料制備果蔬復(fù)合粉的也較多：
[0010] 中國專利CN 102940214B公開了一種蔬果纖維營養(yǎng)粉產(chǎn)品，所述蔬果粉加工方法 如下：（1)前處理:取果蔬原料，清洗、去皮、打漿，獲得果蔬漿液；（2)干燥處理:取濃縮液噴 霧干燥，得到所述果蔬粉；（3)調(diào)配:按照比例添加；（4):包裝。所述果蔬粉由以下重量分?jǐn)?shù) 的原料復(fù)配制成:植物纖維:20份，植物膠質(zhì)：15份，益生因子：10份，復(fù)合氨基酸5份，核糖核 酸:0.6份，小麥芽粉:6份，酵素:3份，麥精：10份，不飽和脂肪酸：1份，瓜拉那提取物：1份，蛋 白粉:8份，調(diào)味劑:0.03份，復(fù)合維生素及礦物質(zhì)：0.6份，蔬果粉10份。本發(fā)明蔬果粉口味 好，水分含量低易于儲存，高營養(yǎng)低熱量，具有很好的排毒養(yǎng)顏功效，同時具有提升睡眠質(zhì) 量，減弱焦慮情緒的作用。上述公開的專利組分復(fù)雜，原料處理工藝簡單，活性物質(zhì)損失大， 保健效果仍不理想。
[0011] 中國專利CN 104286756A公開了一種減肥果蔬粉，以具有減肥作用的天然植物為 原料，采用低溫萃取和生物酶解技術(shù)，最大限度地保留了其中的有效成分，在現(xiàn)有果蔬營養(yǎng) 粉的基礎(chǔ)上科學(xué)復(fù)配膳食纖維、植物提取物、茶葉提取物、香辛料提取物、中草藥提取物、益 生菌粉劑、益生因子和竹炭粉等減肥效果較佳的減肥因子，同時還復(fù)配了蛋白粉、麥精、小 麥芽粉等具有減肥作用的營養(yǎng)物質(zhì)，并添加了復(fù)合氨基酸、維生素及礦物質(zhì)等營養(yǎng)素，主要 從滿足飽腹感、調(diào)節(jié)胃腸菌群、中藥養(yǎng)生、吸脂排脂等多角度出發(fā)，維持和提高了人體自我 調(diào)節(jié)消化和吸收的水平和能力，減少了人體脂肪的攝取和二次合成途徑，不會影響人體正 常的營養(yǎng)物質(zhì)攝取和代謝水平，實現(xiàn)養(yǎng)生減肥的良性循環(huán)。上述公開的專利組分復(fù)雜，益生 菌采用傳統(tǒng)菌種，功能性保健效果仍不理想。
[0012] 綜上，以葡萄為主要原料，制備一種口感和色澤天然，營養(yǎng)成分和生物活性物質(zhì)含 量高，組分簡單、功能性強保健效果顯著的促消化葡萄復(fù)合粉仍是一種必要。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0013] 本發(fā)明所解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有葡萄復(fù)合粉及其制備的缺陷，以葡萄粉為主 要原料，添加益生性強大的植物乳桿菌粉、酵素粉，并科學(xué)復(fù)配小麥芽粉、改性膳食纖維等 功能性原料制備一種口感和色澤天然，營養(yǎng)成分和生物活性物質(zhì)含量高，組分簡單、功能性 強、保健效果顯著的促消化葡萄復(fù)合粉。
[0014] 為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：
[0015] -種促消化葡萄復(fù)合粉，主要由以下重量份數(shù)的原料制備：
[0016] 葡萄粉30-50份，小麥芽粉20-30份，改性膳食纖維8-15份，木瓜粉6-12份，植物乳 桿菌粉6-12份，酵素粉11 -17份，檸檬粉2-6份；
[0017]優(yōu)選地，所述促消化葡萄復(fù)合粉，主要由以下重量份數(shù)的原料制備：
[0018]葡萄粉35-45份，小麥芽粉23-27份，改性膳食纖維11-13份，木瓜粉8-10份，植物乳 桿菌粉8-10份，酵素粉13_15份，梓檬粉3-5份；
[0019]更優(yōu)選地，所述促消化葡萄復(fù)合粉，主要由以下重量份數(shù)的原料制備：
[0020] 葡萄粉40份，小麥芽粉25份，改性膳食纖維12份，木瓜粉9份，植物乳桿菌粉9份，酵 素粉14份，檸檬粉4份；
[0021] 進(jìn)一步地，所述葡萄粉是經(jīng)微波高溫瞬時滅酶、固色和超聲波清洗、絲膠肽冷凍保 護、高壓脈沖電場提取、超聲波輔助微波提取、生物酶解等低溫提取技術(shù)而制得，最大限度 地保留了葡萄的天然色澤、口感及其生物活性成分；
[0022] 優(yōu)選地，所述葡萄粉的制備方法，包括以下步驟，將葡萄放入盛有0.1-0.3 %碳酸 氫鈉溶液的超聲波清洗機中，于室溫下200-400W、35-45KHZ清洗5-10min，瀝干，每個葡萄果 任意切分成四份，單層平鋪在微波干燥機中于功率3-5kW、溫度120-130°C、干燥3-5s，然后 浸泡在質(zhì)量百分比濃度為8-12%的絲膠肽溶液中8-1〇1^11，取出，于-18--22°(：冷凍3〇-50min后立即進(jìn)行粉碎，粉碎物粒徑0.3-0.5mm,接著加入粉碎物質(zhì)量1-3倍的水，用乳酸調(diào) 節(jié)pH值為3.5-5.5，于室溫下在電場強度25-35kV/cm，脈沖時間300-500ys，脈沖頻率200-300Hz條件下進(jìn)行高壓脈沖電場處理20-30min;然后于室溫在功率150-300W條件下進(jìn)行微 波輻照提取15_20min，同時在功率200-300W，頻率30-40KHZ條件下進(jìn)行超聲波輔助提取;加 入提取液質(zhì)量1.5-2.5 %的混合酶，于40-50 °C酶解30-50min，酶解液過濾，濾液減壓濃縮、 冷凍干燥至水分含量為5-8%即得葡萄粉；
[0023] 所述混合酶為纖維素酶、蛋白酶、果膠酶、單寧酶按質(zhì)量比2-4:1-3:1-3:1-2均勻 混合。
[0024]進(jìn)一步地，所述小麥芽粉是以小麥為主要原料，依次經(jīng)超聲清洗、微波瞬時處理、 超聲輔助生物酶解浸泡、發(fā)芽、干燥、低溫粉碎等工藝而制備的；
[0025] 優(yōu)選地，所述小麥芽粉的制備方法，包括如下步驟:將小麥放在裝有0.01-0.03 % 碳酸氫鈉溶液的超聲波清洗機中于功率200-400W、頻率20-30KHZ室溫超聲清洗3-5min，取 出、瀝干，于頻率2450MHz、功率3000W、溫度38-42°C、料層厚度2-4cm微波干燥10-15s，然后 置溫度為33-36°C、pH值為6-8的浸泡液中浸泡4-6h，浸泡液含有質(zhì)量百分比濃度為0.15-0.25%的復(fù)合酶，每隔15_20min通風(fēng)一次，通風(fēng)壓力0.13-0.15MPa，同時于電場強度10-15kV/cm，脈沖時間100-300ys，脈沖頻率60-80HZ條件進(jìn)行高壓脈沖電場處理，直至小麥水 分含量為40-45% ;浸泡后的小麥瀝干，在發(fā)芽室內(nèi)進(jìn)行暗發(fā)芽，暗發(fā)芽溫度保持20-24°C， 暗發(fā)芽時間為20_24h，經(jīng)發(fā)芽后的小麥干燥至水分含量為5-8%，低溫粉碎、過60-80目篩即 得小麥芽粉；
[0026] 所述復(fù)合酶為纖維素酶、葡聚糖酶、木聚糖酶按質(zhì)量比2-4:2-4:1-3均勻混合。 [0027]進(jìn)一步地，所述改性膳食纖維是將膳食纖維經(jīng)物理、化學(xué)或生物的方法處理而得 到的具有強持水性、膨脹性、增稠性、吸附性且網(wǎng)格結(jié)構(gòu)豐富的可溶性纖維素含量高、生物 活性強、對人體益生菌群有重要的、積極作用的纖維素，與普通膳食纖維相比，其生物活性 作用更強大，還可大大延長葡萄粉的保質(zhì)期；
[0028]優(yōu)選地，所述改性纖維是由菊粉、蘋果纖維、燕麥纖維、小麥纖維中的一種或多種 經(jīng)生物酶酶解而得到的；
[0029]更優(yōu)選地，所述改性膳食纖維的制備方法，包括以下步驟:將菊粉、小麥纖維、燕麥 纖維按質(zhì)量比5-7:2-4:1-3均勻混合，加入其質(zhì)量3-7倍的水，室溫100-3001、35-401(抱條件 超聲提取l〇_15min，然后在電場強度20-40kV/cm，脈沖時間300-500ys,脈沖頻率200-400HZ 條件下進(jìn)行高壓脈沖電場處理10-15min;用乳酸調(diào)節(jié)pH值為4.5-6.5，加入混合物質(zhì)量0.1-0.3 %的生物酶，于45-55 °C酶解20-48min;酶解液過濾，濾液減壓濃縮、冷凍干燥至水分含 量為5-8 %即得改性膳食纖維；
[0030]所述生物酶為纖維素酶、木聚糖酶、漆酶、果膠酶按質(zhì)量比1-3:1-3:1-2:1-2均勻 混合。
[0031]進(jìn)一步地，所述植物乳桿菌粉是以植物乳桿菌CGMCC N0.11763為出發(fā)菌株按常規(guī) 方法制備的，其活菌含量為:7X1012-9X1012cfu/g;其中冷凍干燥工藝采用的冷凍保護劑 以含有抗凍蛋白的動物或植物為原料，經(jīng)高壓脈沖電場提取、超聲波輔助微波提取和復(fù)配 酶酶解而制得的，可有效提高植物乳桿菌粉在冷凍干燥過程活菌存活率；
[0032] 優(yōu)選地，所述保護劑的制備方法，包括如下步驟:將冬黑麥、沙冬青、鯊魚皮膠原蛋 白分別清洗、瀝干，按質(zhì)量比8-10: 3-5: 2-4均勻混合，加入混合物料質(zhì)量0.1-1倍的pH值為 3.8-4.5的乳酸潤濕3-811，于-18-22°(：冷凍1-211后立即進(jìn)行粉碎，冷凍料層厚度3-5〇11，粉 碎物粒徑0.5-3mm，接著加入粉碎物質(zhì)量10-20倍的水，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為3.5-5.5，于室溫 下在電場強度25-35kV/cm，脈沖時間300-500ys，脈沖頻率200-300HZ條件下進(jìn)行高壓脈沖 電場處理20-30min;然后于室溫在功率150-300W條件下進(jìn)行微波輻照提取15-20min，同時 在功率200-300W，頻率30-40KHZ條件下進(jìn)行超聲波輔助提取;加入提取液質(zhì)量1-2%的復(fù)配 酶，于45-55 °C酶解30-50min;酶解液過濾、濾液濃縮、低溫粉碎至粒徑為0.1-0.3mm即得保 護劑；
[0033] 所述復(fù)配酶為纖維素酶、蛋白酶、淀粉酶、果膠酶、單寧酶按質(zhì)量比2-4:1-3:1-3: 1-2:1-2均勻混合；
[0034]更優(yōu)選地，所述微波輻照提取為間歇式提取，即微波輻照10s，間隔20s。
[0035] 進(jìn)一步地，所述酵素粉制備方法如下：采用泡菜發(fā)酵生產(chǎn)末期排放的發(fā)酵液為原 料，過濾除去發(fā)酵液中的菜葉等大粒物質(zhì)得到發(fā)酵液體，發(fā)酵液體采用冷凍干燥等干燥方 法制備獲得酵素粉。冷凍干燥的條件是:-30-40度預(yù)凍6小時；然后凍干直到含水量小于 5%。泡菜生產(chǎn)方法參照中國專利201110421967.3或201210310308.7制備。
[0036] 本發(fā)明另一目的是提供上述促消化葡萄復(fù)合粉的制備方法，包括如下步驟:按照 配方比例，稱取各原料，依次將酵素粉、植物乳桿菌粉、葡萄粉、檸檬粉、小麥芽粉、木瓜粉加 入V型混合罐均勻混合25-35min，攪拌轉(zhuǎn)速20-40r/min，然后加入改性膳食纖維均勻混12-18min，攪拌轉(zhuǎn)速40-60r/min，無菌灌裝、密封、包裝即得促消化葡萄復(fù)合粉；
[0037] 優(yōu)選地，所述無菌灌裝采用自動粉狀灌裝機灌裝，同時采用6()C〇輻照滅菌，輻照劑 量4kGy;
[0038]優(yōu)選地，所述葡萄復(fù)合粉采用鋁塑復(fù)合袋灌裝;所述鋁塑復(fù)合袋灌裝前采用紫外 線或臭氧消毒20_40min。
[0039] 經(jīng)上述方法制備的葡萄復(fù)合粉植物乳桿菌活菌含量為6.84 X 10n-9.49 X lOUcfu/go
[0040] 本發(fā)明植物乳桿菌(1^〇1：(^&(3；[11118口1&1^&1'11111)乂11于2015年11月30日保藏于中國 微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC)，保藏號為CGMCC NO. 11763,保藏 地址為：中國北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學(xué)院微生物研究所，郵編：100101。 [0041 ] 植物乳桿菌益生特性如下：
[0042]本發(fā)明所提供的植物乳桿菌CGMCC N0.11763經(jīng)實驗發(fā)現(xiàn)能夠在pH為1.50的條件 下存活，在1%膽鹽培養(yǎng)4小時后仍處于存活狀態(tài);植物乳桿菌CGMCC N0.11763降解亞硝酸 鹽速度快，分解能力達(dá)到10.9mg/h/kg，該菌種在生產(chǎn)泡菜時，整個發(fā)酵過程中亞硝酸鹽濃 度在4.8mg/kg以下；CGMCC N0.11763在發(fā)酵60h小時后，對膽固醇降解率可達(dá)到64.76%。 CGMCC N0 ? 11763黏附能力測定的自凝集率為95 ? 71 %。
[0043] 植物乳桿菌CGMCC N0.11763對膽固醇降解能力研究和測定：
[0044] 取lml CGMCC N0.11763母液接種于10mL的MRS膽固醇液體培養(yǎng)基（膽固醇含量 0. 1mg/ml，pH 6.2)中，37°C的恒溫靜置分別培養(yǎng)20h、40h、60h備用，以接入lmL無菌水的MRS 膽固醇培養(yǎng)基為對照，取以上培養(yǎng)不同時間的菌液樣品及對照液各lml，9000r/min，4°C下 離心10min，得到發(fā)酵上清液，鄰苯二甲醛法測定上清液中膽固醇含量(具體為:取各上清液 0 . lml于相應(yīng)的試管中，加冰醋酸0.3ml，lmg/ml的鄰苯二甲醛0.15ml，緩緩加入濃硫酸 1. 〇ml，混合均勻。室溫靜置10min，于550nm下測吸光值）。每一處理3個重復(fù)，以同樣方法制 作膽固醇標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算上清液中膽固醇含量及降解率，結(jié)果見表1?？芍?，CGMCCN0.11763 對膽固醇有很好的降解作用，在發(fā)酵60h小時后，降解率可達(dá)到64.76%。
[0045]表1對膽固醇的降解情況。
[0047] 植物乳桿菌CGMCC NO. 11763菌株的耐膽鹽試驗：
[0048] 取CGMCCN0.11763菌液lmL接種菌種于含有不同膽鹽（含量梯度為0.0%、0.2%、 0.4%、0.6%、0.8%、1%)的1011^]\?5液體培養(yǎng)基(？11=6.4)，置于37°(：下分別培養(yǎng)0、2、411， 每個處理3個重復(fù)。各取lml樣品菌液于9ml生理鹽水中混勻，制備稀釋度溶液，取0.1ml稀釋 液于MRS中涂布，于37°C生化培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)48小時(每個稀釋度做3個平行)記錄計算平 板上的菌數(shù)個數(shù)。結(jié)果見表2。可知該菌在膽鹽濃度為1 %處理4h后菌的生長量依然達(dá)到 0? 59±0? 92 X 107(cfu/ml)，有很好的耐膽鹽能力。
[0049] 表2耐膽鹽能力檢測[(土s) X 107cfu/ml]
[0051]
[0052] 植物乳桿菌CGMCC NO. 11763菌株的耐酸試驗
[0053] 取HLX37母液按lml接種菌種于不同pH值(pH梯度為1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0)的 lOmLMRS液體培養(yǎng)基，置于37°C下分別培養(yǎng)0、2、4h，每一處理3個重復(fù)。各取lml樣品菌液于 9ml生理鹽水中混勻，制備稀釋溶液，取0 . lml稀釋液于MRS中涂布，于37 °C生化培養(yǎng)箱中倒 置培養(yǎng)48小時(每個稀釋度做3個平行)記錄平板上的菌落個數(shù)。結(jié)果見表3。說明該菌具有 很強的耐酸能力。
[0054] 表3耐酸能力檢測[(土s) X 107cfu/ml]
[0056] 植物乳桿菌CGMCC NO. 11763的黏附能力測定
[0057] 培養(yǎng)CGMCC NO. 11763(MRS液體培養(yǎng)基）、大腸桿菌DH5a(LB液體培養(yǎng)基)24h得發(fā)酵 液，分別置于3000r/min、4°C下離心10min，收集菌泥，分別用pH = 7.0的無菌磷酸鹽緩沖液 (PBS)洗滌菌泥2次（即在菌落中加入PBS，震蕩混合均勻后，置于3000r/min、4°C下離心 10min，收集菌體）。自凝集率（％ :用無菌的roS將菌泥CGMCC NO. 11763制成在波長600nm處 的吸光值為0.4 ±0.1 (A 0)的懸浮菌液及菌懸液，靜置24h后測定吸光值A(chǔ) 24,自凝集率 (%)公式為(A 0-A 24)/A 0。；他凝集率（％):將CGMCC如.11763和大腸桿菌0耶€[的懸菌 液調(diào)節(jié)成在波長600nm處的吸光值為0.6±0.1 (A 0)的混合懸浮菌液。靜置24H后測定吸光 值A(chǔ) 24,他凝集率（％)公式為(A 0 -A 24)/A 0。測定結(jié)果見表5,可知CGMCC N0.11763的自 凝集率為95.71 %，有很強的黏附能力。
[0058]表4黏附能力表
[0060] 植物乳桿菌CGMCC N0.11763的菌株生理特性
[0061 ] 所述植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)XH于2015年11月30日保藏于中國微 生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC)，保藏號為CGMCC N0.11763,保藏地 址為：中國北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學(xué)院微生物研究所，郵編：100101。 [0062]該菌株特點如下:在顯微鏡下觀察，該菌株為短桿狀，革蘭氏染色呈陽性，無鞭毛， 不產(chǎn)芽孢;在固體培養(yǎng)基上，該菌菌落為白色，表面光滑，致密，形態(tài)為圓形，邊緣較整齊。 [0063]理化特征為:過氧化氫酶(-)，明膠液化(-)，吲哚實驗( + )，運動性(-)，發(fā)酵產(chǎn)氣 (_)，亞硝酸鹽還原(_)，發(fā)酵產(chǎn)氣(_)，產(chǎn)硫化氫氣體(_)，pH4.0MRS培養(yǎng)基中生長(+ )。經(jīng)過 生理生化鑒定為為植物乳桿菌（Lactobacillus plan tarum)，命名為植物乳桿菌 (Lactobacillus plantarum)XH〇
[0064]菌株能夠在57°C下生長良好，葡萄糖耐受能力為275g/L。
[0065]本發(fā)明植物乳桿菌由采集人李建樹，從新疆維吾爾族老鄉(xiāng)家中酸奶中分離得到， 采集時間2015年6月2日。
[0066]本發(fā)明植物乳桿菌CGMCC N0.11763經(jīng)實驗發(fā)現(xiàn)能夠在pH為1.50的條件下存活，在 1 %膽鹽培養(yǎng)4小時后仍處于存活狀態(tài);植物乳桿菌CGMCC N0.11763降解亞硝酸鹽速度快， 分解能力達(dá)到10.9mg/h/kg，該菌種在生產(chǎn)泡菜時，整個發(fā)酵過程中亞硝酸鹽濃度在4.8mg/ kg以下；CGMCCN0.11763在發(fā)酵60h小時后，對膽固醇降解率可達(dá)到64.76 %。CGMCC NO. 11763黏附能力測定的自凝集率為95.71 %，菌株能夠在57°C下生長良好，葡萄糖耐受能 力為 275g/L。
[0067] 有益效果：
[0068]本發(fā)明促消化葡萄復(fù)合粉將具有天然色澤、風(fēng)味和口感的葡萄粉與植物乳桿菌 粉、小麥芽粉、改性膳食纖維、酵素粉、木瓜粉等功能性產(chǎn)品科學(xué)復(fù)配，不僅有效提高了葡萄 復(fù)合粉的營養(yǎng)性、食品安全性和保健功能，而且顯著提高了葡萄復(fù)合粉的益生性和質(zhì)量穩(wěn) 定性，與現(xiàn)有葡萄復(fù)合粉相比：其組分簡單，色澤、風(fēng)味和口感天然，營養(yǎng)價值高，保健功能 強，生物活性物質(zhì)含量高，益生菌活菌數(shù)量高、益生性強，益生菌功能性代謝物種類全、含量 高，食品安全性高，保質(zhì)期長。具體試驗效果見實施例七-十二，具體組分效果如下：
[0069] 1.本發(fā)明的植物乳桿菌CGMCC N0.11763經(jīng)實驗發(fā)現(xiàn)能夠在pH為1.50的條件下存 活，在1 %膽鹽培養(yǎng)4小時后仍處于存活狀態(tài);植物乳桿菌CGMCC N0.11763降解亞硝酸鹽速 度快，分解能力達(dá)到10.9mg/h/kg，該菌種在生產(chǎn)泡菜時，整個發(fā)酵過程中亞硝酸鹽濃度在 4.8mg/kg以下;CGMCC NO. 11763在發(fā)酵60h小時后，對膽固醇降解率可達(dá)到64.76% 〇CGMCC NO ? 11763黏附能力測定的自凝集率為95 ? 71 %。
[0070] 2.本發(fā)明在制備植物乳桿菌粉劑時采用的冷凍保護劑將含有抗凍蛋白較高的冬 黑麥、沙冬青和鯊魚皮膠原蛋白科學(xué)復(fù)配，經(jīng)高壓脈沖電場提取、超聲波輔助微波提取和生 物酶解而制得，全程低溫提取，抗凍蛋白提取率高，損失少，得到的保護劑抗凍多肽含量高、 種類全、功能性強、抗凍效果好，提高了植物乳桿菌粉劑中的活菌含量。
[0071] 3.本發(fā)明制備的葡萄粉采用超聲清洗對葡萄進(jìn)行殺蟲滅卵、殺滅微生物、去除農(nóng) 藥殘留和重金屬離子等，大大提高了葡萄粉的食品安全性;采用微波高溫瞬時干燥，在使得 葡萄切片膨化干燥的同時主要是滅酶、固色，最大限度地保留了葡萄的天然色澤，經(jīng)微波固 色后的葡萄天然色澤在后續(xù)的加工過程中非常穩(wěn)定，不會變色、褪色，色澤非常鮮艷;在含 有絲膠肽的水溶液中浸泡復(fù)水，可最大限度地減少經(jīng)冷凍而造成的葡萄活性物質(zhì)的損失， 提高了葡萄有效成分的提取率，同時也為葡萄復(fù)合粉在貯藏過程抗冷凍性奠定了基礎(chǔ);將 高壓脈沖電場、微波、超聲、生物酶解等低溫提取技術(shù)有機結(jié)合，可最大限度地保留葡萄的 生物活性物質(zhì)和香味成分。
[0072] 4.本發(fā)明制備的改性膳食纖維是將膳食纖維經(jīng)物理、化學(xué)或生物的方法處理而得 到的，可溶性纖維素含量高、生物活性強、對腸道益生菌群有重要的、積極作用的纖維素，與 普通膳食纖維相比，其生物活性作用更強大：1)可溶性纖維素含量高，更容易被益生菌利 用，可提高益生菌在腸道的生長及繁殖能力，增加益生菌菌群的種類和數(shù)量，降低大腸pH 值，改善腸道微生態(tài)環(huán)境;2)強大的吸附能力，經(jīng)改性后，纖維素的比表面積增大，網(wǎng)格結(jié)構(gòu) 豐富，吸附力增強，螯合、吸附膽固醇和膽汁酸類的有機分子能力更強、抑制人體對它們的 吸收;3)離子交換能力增強，對金屬元素，特別是重金屬元素吸附效果更強;4)持水性、膨脹 性、增稠性更強且不受酸、堿、鹽的影響，5)調(diào)節(jié)和維持腸道菌群的定植時間，增強腸道的消 化和吸收能力，提高人體免疫力，最終顯著提高葡萄復(fù)合粉有效成分的消化和吸收率;6)促 進(jìn)胃腸蠕動，減緩并消除胃脹、腹脹等不良反應(yīng);7)包埋作用強，可有效防止外界環(huán)境(氧 氣、溫度、光照、濕度等）因素對產(chǎn)品品質(zhì)的影響，穩(wěn)定了產(chǎn)品的生物活性，延長了產(chǎn)品的保 質(zhì)期。
[0073] 5.本發(fā)明小麥芽粉的制備方法對浸泡過程的小麥進(jìn)行超聲清洗、微波瞬時處理和 高壓脈沖電場處理有效防止了浸泡液污染雜菌，避免了產(chǎn)生臭味滲透到小麥芽粉產(chǎn)品中， 同時，可有效增強谷物種皮細(xì)胞壁和細(xì)胞膜的相對透性、提高全谷物種子的吸水率，促進(jìn)種 子提前萌發(fā)，提高超氧陰離子自由基的產(chǎn)生速率及三磷酸腺苷(ATP)含量，促進(jìn)發(fā)芽前期小 麥種子多種生物酶的激活和釋放、胚乳溶解及功能性營養(yǎng)成分、生物活性成分、抗氧化成分 的合成，促進(jìn)了種子的呼吸代謝作用，加快了營養(yǎng)及功能性物質(zhì)、生物活性成分、抗氧化成 分的富集進(jìn)程，縮短了富集時間，提高了營養(yǎng)及功能性物質(zhì)、生物活性成分、抗氧化成分的 含量，與生物酶解有機結(jié)合，可進(jìn)一步降解種皮纖維素及半纖維素結(jié)構(gòu)，增加種皮通透性， 激活各種生物活性物質(zhì)（內(nèi)源酶等)活力最強，富集量更大，可溶性纖維素含量隨之增大，為 葡萄復(fù)合粉中的植物乳桿菌提供了營養(yǎng)因子，效果更佳顯著;將超聲、微波、高壓脈沖電場 技術(shù)和生物酶解有機結(jié)合，縮短了浸泡時間，提高了發(fā)芽率和發(fā)芽均一度;可最大限度保持 小麥芽粉熱敏性物質(zhì)含量，尤其是抗氧化物質(zhì)(谷胱甘肽、六磷酸肌醇、維生素C、多酚等）， 最大限度地保證小麥芽粉的天然色澤、口感和風(fēng)味，同時還可起到殺菌作用;特別是經(jīng)微波 瞬時適度殺胚后，在不影響小麥芽種子的生物活性的情況下，隨著水分的吸收，的小麥芽胚 被抑制但不影響各項酶及生物活性物質(zhì)的增長和胚乳的溶解，芽生長很短，呼吸作用弱，發(fā) 芽損失低，提高了小麥芽粉的產(chǎn)量和質(zhì)量，顯著提高了小麥芽粉產(chǎn)品中功能性、營養(yǎng)性、生 物活性物質(zhì)的含量，提高了小麥芽粉的保健功能（提高人體免疫力、去除人體內(nèi)氧自由基、 降血脂、延緩衰老）、營養(yǎng)價值和食品安全性。
[0074] 6.本發(fā)明制備的酵素粉不僅含有醋酸桿菌、雙歧桿菌、酵母菌和鼠李糖乳桿菌等 純種益生菌，而且含有更多、更有益的在泡菜發(fā)酵過程中參與和產(chǎn)生的多種野生微生物菌 株，其生物活性和益生性更加全面和強大，與本發(fā)明制備的植物乳桿菌粉科學(xué)復(fù)配，其效果 更加顯著。
[0075] 7.本發(fā)明葡萄復(fù)合粉的制備方法工藝簡單，操作方便，對設(shè)備要求低，可工業(yè)化和 規(guī)?；a(chǎn)，將改性膳食纖維最后混合，發(fā)揮了其強大的包埋作用，使得產(chǎn)品的性狀更穩(wěn) 定、保質(zhì)期更長。
[0076]需要說明的是本發(fā)明促消化葡萄復(fù)合粉的技術(shù)效果是各組分技術(shù)特征和方法特 征相互協(xié)同、相互作用的結(jié)果，并非簡單的技術(shù)特征(組分功能）的疊加，各組分技術(shù)特征的 有機結(jié)合和協(xié)同產(chǎn)生的效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過各單一技術(shù)特征功能和效果的疊加，具有較好的先進(jìn) 性和實用性。
【具體實施方式】
[0077]下面通過具體的實施方案敘述本發(fā)明。除非特別說明，本發(fā)明中所用的技術(shù)手段 均為本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的方法。另外，實施方案應(yīng)理解為說明性的，而非限制本發(fā)明的 范圍，本發(fā)明的實質(zhì)和范圍僅由權(quán)利要求書所限定。對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，在不背離本 發(fā)明實質(zhì)和范圍的前提下，對這些實施方案中的物料成分和用量進(jìn)行的各種改變或改動也 屬于本發(fā)明的保護范圍。
[0078] 實施例一：
[0079] 原料制備
[0080] 1、小麥芽粉的制備
[0081] 其制備方法包括如下步驟：
[0082] 將小麥放在裝有0.02%碳酸氫鈉溶液的超聲波清洗機中于功率300W、頻率25KHz 室溫超聲清洗4min，取出、瀝干，于頻率2450MHz、功率3000W、溫度40 °C、料層厚度3cm微波干 燥13s，然后置溫度為35 °C、pH值為7的浸泡液中浸泡5h，浸泡液含有質(zhì)量百分比濃度為 0.20%的復(fù)合酶，每隔18111；[11通風(fēng)一次，通風(fēng)壓力0.14MPa，同時于電場強度13kV/cm，脈沖時 間200沾，脈沖頻率70Hz條件進(jìn)行高壓脈沖電場處理，直至小麥水分含量為43%;浸泡后的 小麥瀝干，在發(fā)芽室內(nèi)進(jìn)行暗發(fā)芽，暗發(fā)芽溫度保持22°C，暗發(fā)芽時間為22h，經(jīng)發(fā)芽后的小 麥干燥至水分含量為6.5 %，低溫粉碎、過70目篩即得小麥芽粉；
[0083]上述復(fù)合酶為纖維素酶、葡聚糖酶、木聚糖酶按質(zhì)量比3:3:2均勻混合。
[0084] 2、改性膳食纖維的制備
[0085]其制備方法包括以下步驟：
[0086]將菊粉、小麥纖維、燕麥纖維按質(zhì)量比6: 3: 2均勾混合，加入其質(zhì)量5倍的水，室溫 200W、38KHz條件超聲提取13min，然后在電場強度30kV/cm，脈沖時間400ys，脈沖頻率300Hz 條件下進(jìn)行高壓脈沖電場處理13min;用乳酸調(diào)節(jié)pH值為5.5，加入混合物質(zhì)量0.2%的生物 酶，于50°C酶解34min;酶解液過濾，濾液減壓濃縮、冷凍干燥至水分含量為6.5%即得改性 膳食纖維；
[0087]上述生物酶為纖維素酶、木聚糖酶、漆酶、果膠酶按質(zhì)量比2:2:1.5:1.5均勻混合。 [0088] 3、植物乳桿菌粉的制備
[0089]植物乳桿菌粉是以植物乳桿菌CGMCC N0.11763為出發(fā)菌株按常規(guī)方法制備的，其 活菌含量為:8X1012cfu/g;其中冷凍干燥工藝采用的冷凍保護劑以含有抗凍蛋白的動物或 植物為原料，經(jīng)高壓脈沖電場提取、超聲波輔助微波提取和復(fù)配酶酶解而制得的，可有效提 高植物乳桿菌粉在冷凍干燥過程活菌存活率；
[0090] 上述保護劑的制備方法包括如下步驟：
[0091] 將冬黑麥、沙冬青、鯊魚皮膠原蛋白分別清洗、瀝干，按質(zhì)量比9:4:3均勻混合，加 入混合物料質(zhì)量〇. 5倍的pH值為4.1的乳酸潤濕5h，于-20 °C冷凍1.5h后立即進(jìn)行粉碎，冷凍 料層厚度4cm，粉碎物粒徑2mm，接著加入粉碎物質(zhì)量15倍的水，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為4.5，于室 溫下在電場強度30kV/cm，脈沖時間400iis，脈沖頻率250Hz條件下進(jìn)行高壓脈沖電場處理 25min;然后于室溫在功率225W條件下進(jìn)行微波輻照提取18min，其微波輻照10s，間隔20s， 同時在功率250W，頻率35KHz條件下進(jìn)行超聲波輔助提取;加入提取液質(zhì)量1.5 %的復(fù)配酶， 于50°C酶解40min;酶解液過濾、濾液濃縮、低溫粉碎至粒徑為0.2mm即得保護劑；
[0092] 上述復(fù)配酶為纖維素酶、蛋白酶、淀粉酶、果膠酶、單寧酶按質(zhì)量比3:2:2:1.5:1.5 均勻混合；
[0093] 4、酵素粉的制備
[0094]其制備方法如下：
[0095] 采用泡菜發(fā)酵生產(chǎn)末期排放的發(fā)酵液為原料，過濾除去發(fā)酵液中的菜葉等大粒物 質(zhì)得到發(fā)酵液體，發(fā)酵液體采用冷凍干燥等干燥方法制備獲得酵素粉。冷凍干燥的條件 是：-35度預(yù)凍6小時；然后凍干直到含水量為3 %。泡菜生產(chǎn)方法參照中國專利 201110421967.3 制備。
[0096] 以下實施例二至六所使用的小麥芽粉、改性膳食纖維、植物乳桿菌粉、酵素粉均由 實施例一制備。
[0097] 實施例二：
[0098] -種促消化葡萄復(fù)合粉，主要由以下重量份數(shù)的原料制備：
[0099] 葡萄粉40份，小麥芽粉25份，改性膳食纖維12份，木瓜粉9份，植物乳桿菌粉9份，酵 素粉14份，檸檬粉4份；
[0100] 其中葡萄粉的制備方法，包括以下步驟：
[0101]將葡萄放入盛有0.2%碳酸氫鈉溶液的超聲波清洗機中，于室溫下300W、30KHz清 洗8min，瀝干，每個葡萄果任意切分成四份，單層平鋪在微波干燥機中于功率4kW、溫度125 °C、干燥4s，然后浸泡在質(zhì)量百分比濃度為10%的絲膠肽溶液中9min，取出，于-20°C冷凍 40min后立即進(jìn)行粉碎，粉碎物粒徑0.4mm,接著加入粉碎物質(zhì)量2倍的水，用乳酸調(diào)節(jié)pH值 為4.5，于室溫下在電場強度301^/〇11，脈沖時間400此，脈沖頻率250他條件下進(jìn)行高壓脈沖 電場處理25min;然后于室溫在功率225W條件下進(jìn)行微波輻照提取18min，同時在功率250W， 頻率35KHz條件下進(jìn)行超聲波輔助提??；加入提取液質(zhì)量2.0%的混合酶，于45°C酶解 40min，酶解液過濾，濾液減壓濃縮、冷凍干燥至水分含量為6.5 %即得葡萄粉；
[0102] 上述混合酶為纖維素酶、蛋白酶、果膠酶、單寧酶按質(zhì)量比3:2:2:1.5均勻混合。
[0103] 促消化葡萄復(fù)合粉的制備方法，包括如下步驟：
[0104]按照配方比例，稱取各原料，依次將酵素粉、植物乳桿菌粉、葡萄粉、檸檬粉、小麥 芽粉、木瓜粉加入V型混合罐均勻混合30min，攪拌轉(zhuǎn)速30r/min，然后加入改性膳食纖維均 勻混15min，攪拌轉(zhuǎn)速50r/min，無菌灌裝、密封、包裝即得促消化葡萄復(fù)合粉；
[0105]上述無菌灌裝采用自動粉狀灌裝機灌裝，同時采用6()C〇輻照滅菌，輻照劑量4kGy; [0106]上述葡萄復(fù)合粉采用鋁塑復(fù)合袋灌裝；所述鋁塑復(fù)合袋灌裝前采用紫外線消毒 30min〇
[0107]經(jīng)上述方法制備的葡萄復(fù)合粉植物乳桿菌活菌含量為9.49 X 10ncfU/g。
[0108] 實施例三：
[0109] -種促消化葡萄復(fù)合粉，主要由以下重量份數(shù)的原料制備：
[0110] 葡萄粉35份，小麥芽粉23份，改性膳食纖維11份，木瓜粉8份，植物乳桿菌粉8份，酵 素粉13份，檸檬粉3份；
[0111] 其中葡萄粉的制備方法，包括以下步驟：
[0112] 將葡萄放入盛有0.1 %碳酸氫鈉溶液的超聲波清洗機中，于室溫下200W、35KHz清 洗5min，瀝干，每個葡萄果任意切分成四份，單層平鋪在微波干燥機中于功率3kW、溫度120 °C、干燥3s，然后浸泡在質(zhì)量百分比濃度為8%的絲膠肽溶液中8min，取出，于-18°C冷凍 30min后立即進(jìn)行粉碎，粉碎物粒徑0.3mm，接著加入粉碎物質(zhì)量1倍的水，用乳酸調(diào)節(jié)pH值 為3.5，于室溫下在電場強度25kV/cm，脈沖時間300此，脈沖頻率200Hz條件下進(jìn)行高壓脈沖 電場處理20min;然后于室溫在功率150W條件下進(jìn)行微波輻照提取15min，同時在功率200W， 頻率30KHz條件下進(jìn)行超聲波輔助提?。患尤胩崛∫嘿|(zhì)量1.5%的混合酶，于40°C酶解 30min，酶解液過濾，濾液減壓濃縮、冷凍干燥至水分含量為5%即得葡萄粉；
[0113] 上述混合酶為纖維素酶、蛋白酶、果膠酶、單寧酶按質(zhì)量比均勻混合。
[0114] 促消化葡萄復(fù)合粉的制備方法，包括如下步驟：
[0115] 按照配方比例，稱取各原料，依次將酵素粉、植物乳桿菌粉、葡萄粉、檸檬粉、小麥 芽粉、木瓜粉加入V型混合罐均勻混合25min，攪拌轉(zhuǎn)速20r/min，然后加入改性膳食纖維均 勻混12min，攪拌轉(zhuǎn)速40r/min，無菌灌裝、密封、包裝即得促消化葡萄復(fù)合粉；
[0116] 上述無菌灌裝采用自動粉狀灌裝機灌裝，同時采用6()C〇輻照滅菌，輻照劑量4kGy;
[0117] 上述葡萄復(fù)合粉采用鋁塑復(fù)合袋灌裝；所述鋁塑復(fù)合袋灌裝前采用紫外線消毒 20min〇
[0118] 經(jīng)上述方法制備的葡萄復(fù)合粉植物乳桿菌活菌含量為8.13X 10ncfU/g。
[0119]實施例四：
[0120] -種促消化葡萄復(fù)合粉，主要由以下重量份數(shù)的原料制備：
[0121]葡萄粉45份，小麥芽粉27份，改性膳食纖維13份，木瓜粉10份，植物乳桿菌粉10份， 酵素粉15份，檸檬粉5份；
[0122] 其中葡萄粉的制備方法，包括以下步驟：
[0123] 將葡萄放入盛有0.3%碳酸氫鈉溶液的超聲波清洗機中，于室溫下400W、45KHz清 洗lOmin，瀝干，每個葡萄果任意切分成四份，單層平鋪在微波干燥機中于功率5kW、溫度130 °C、干燥5s，然后浸泡在質(zhì)量百分比濃度為12%的絲膠肽溶液中l(wèi)Omin，取出，于-22°C冷凍 50min后立即進(jìn)行粉碎，粉碎物粒徑0.5mm,接著加入粉碎物質(zhì)量3倍的水，用乳酸調(diào)節(jié)pH值 為5.5，于室溫下在電場強度35kV/cm，脈沖時間500ys，脈沖頻率300Hz條件下進(jìn)行高壓脈沖 電場處理30min;然后于室溫在功率300W條件下進(jìn)行微波輻照提取20min，同時在功率300W， 頻率40KHz條件下進(jìn)行超聲波輔助提??；加入提取液質(zhì)量2.5%的混合酶，于50°C酶解 50min，酶解液過濾，濾液減壓濃縮、冷凍干燥至水分含量為8 %即得葡萄粉；
[0124] 上述混合酶為纖維素酶、蛋白酶、果膠酶、單寧酶按質(zhì)量比4:3:3:2均勻混合。
[0125] 促消化葡萄復(fù)合粉的制備方法，包括如下步驟：
[0126] 按照配方比例，稱取各原料，依次將酵素粉、植物乳桿菌粉、葡萄粉、檸檬粉、小麥 芽粉、木瓜粉加入V型混合罐均勻混合35min，攪拌轉(zhuǎn)速40r/min，然后加入改性膳食纖維均 勻混18min，攪拌轉(zhuǎn)速60r/min，無菌灌裝、密封、包裝即得促消化葡萄復(fù)合粉；
[0127] 上述無菌灌裝采用自動粉狀灌裝機灌裝，同時采用6()C〇輻照滅菌，輻照劑量4kGy;
[0128] 上述葡萄復(fù)合粉采用鋁塑復(fù)合袋灌裝；所述鋁塑復(fù)合袋灌裝前采用紫外線消毒 40min〇
[0129] 經(jīng)上述方法制備的葡萄復(fù)合粉植物乳桿菌活菌含量為6.84 X 10ncfU/g。
[0130] 實施例五：
[0131] -種促消化葡萄復(fù)合粉，主要由以下重量份數(shù)的原料制備：
[0132] 葡萄粉30份，小麥芽粉20份，改性膳食纖維8份，木瓜粉6份，植物乳桿菌粉6份，酵 素粉11份，檸檬粉2份；
[0133] 其中葡萄粉的制備方法，包括以下步驟：
[0134] 將葡萄放入盛有0.1%碳酸氫鈉溶液的超聲波清洗機中，于室溫下400W、35KHz清 洗lOmin，瀝干，每個葡萄果任意切分成四份，單層平鋪在微波干燥機中于功率3kW、溫度130 °C、干燥3s，然后浸泡在質(zhì)量百分比濃度為12%的絲膠肽溶液中8min，取出，于-22°C冷凍 30min后立即進(jìn)行粉碎，粉碎物粒徑0.5mm，接著加入粉碎物質(zhì)量1倍的水，用乳酸調(diào)節(jié)pH值 為5.5，于室溫下在電場強度25kV/cm，脈沖時間500ys，脈沖頻率200Hz條件下進(jìn)行高壓脈沖 電場處理30min;然后于室溫在功率150W條件下進(jìn)行微波輻照提取20min，同時在功率200W， 頻率40KHz條件下進(jìn)行超聲波輔助提??；加入提取液質(zhì)量1.5%的混合酶，于50°C酶解 30min，酶解液過濾，濾液減壓濃縮、冷凍干燥至水分含量為8 %即得葡萄粉；
[0135] 上述混合酶為纖維素酶、蛋白酶、果膠酶、單寧酶按質(zhì)量比2:3:1:2均勻混合。
[0136] 促消化葡萄復(fù)合粉的制備方法，包括如下步驟：
[0137] 按照配方比例，稱取各原料，依次將酵素粉、植物乳桿菌粉、葡萄粉、檸檬粉、小麥 芽粉、木瓜粉加入V型混合罐均勻混合28min，攪拌轉(zhuǎn)速25r/min，然后加入改性膳食纖維均 勻混13min，攪拌轉(zhuǎn)速45r/min，無菌灌裝、密封、包裝即得促消化葡萄復(fù)合粉；
[0138] 上述無菌灌裝采用自動粉狀灌裝機灌裝，同時采用6()C〇輻照滅菌，輻照劑量4kGy;
[0139] 上述葡萄復(fù)合粉采用鋁塑復(fù)合袋灌裝；所述鋁塑復(fù)合袋灌裝前采用臭氧消毒 20min〇
[0140]經(jīng)上述方法制備的葡萄復(fù)合粉植物乳桿菌活菌含量為7.26 X 10ncfU/g。
[0141] 實施例六：
[0142] -種促消化葡萄復(fù)合粉，主要由以下重量份數(shù)的原料制備：
[0143] 葡萄粉50份，小麥芽粉30份，改性膳食纖維15份，木瓜粉12份，植物乳桿菌粉12份， 酵素粉17份，檸檬粉6份；
[0144] 其中葡萄粉的制備方法，包括以下步驟：
[0145] 將葡萄放入盛有0.3%碳酸氫鈉溶液的超聲波清洗機中，于室溫下200W、45KHz清 洗5min，瀝干，每個葡萄果任意切分成四份，單層平鋪在微波干燥機中于功率5kW、溫度120 °C、干燥5s，然后浸泡在質(zhì)量百分比濃度為8 %的絲膠肽溶液中l(wèi)Omin，取出，于-18°C冷凍 50min后立即進(jìn)行粉碎，粉碎物粒徑0.3mm,接著加入粉碎物質(zhì)量3倍的水，用乳酸調(diào)節(jié)pH值 為3.5，于室溫下在電場強度35kV/cm，脈沖時間300此，脈沖頻率300Hz條件下進(jìn)行高壓脈沖 電場處理20min;然后于室溫在功率300W條件下進(jìn)行微波輻照提取15min，同時在功率300W， 頻率30KHz條件下進(jìn)行超聲波輔助提??；加入提取液質(zhì)量2.5%的混合酶，于40°C酶解 50min，酶解液過濾，濾液減壓濃縮、冷凍干燥至水分含量為5%即得葡萄粉；
[0146] 上述混合酶為纖維素酶、蛋白酶、果膠酶、單寧酶按質(zhì)量比4:1:3:1均勻混合。
[0147] 促消化葡萄復(fù)合粉的制備方法，包括如下步驟：
[0148] 按照配方比例，稱取各原料，依次將酵素粉、植物乳桿菌粉、葡萄粉、檸檬粉、小麥 芽粉、木瓜粉加入V型混合罐均勻混合33min，攪拌轉(zhuǎn)速35r/min，然后加入改性膳食纖維均 勻混16min，攪拌轉(zhuǎn)速55r/min，無菌灌裝、密封、包裝即得促消化葡萄復(fù)合粉；
[0149] 上述無菌灌裝采用自動粉狀灌裝機灌裝，同時采用6()C〇輻照滅菌，輻照劑量4kGy;
[0150] 上述葡萄復(fù)合粉采用鋁塑復(fù)合袋灌裝；所述鋁塑復(fù)合袋灌裝前采用臭氧消毒 40min〇
[0151]經(jīng)上述方法制備的葡萄復(fù)合粉植物乳桿菌活菌含量為6.99 X10ncfU/g。
[0152]實驗例七食用促消化葡萄復(fù)合粉后總膽固醇的變化
[0153] 選總膽固醇180mg/dl-250mg/dl的成年人48名，男女各半，隨機分成三組；第一組 每天晚餐飲用150毫升礦泉水;第二組每天晚餐沖飲普通市售葡萄復(fù)合粉150g，第三組每天 晚餐沖飲本發(fā)明實施例2的葡萄復(fù)合粉150g，期間每天食用同樣的食物，食物包括肉、蛋、蔬 菜和水果。分別在實驗開始的前一天和第20、40、60天采集試驗者的血液，測定血液中的總 膽固醇含量，結(jié)果如表1:
[0154]表1:血液中總膽固醇含量檢測結(jié)果
[0156] 由上表可知沖飲本發(fā)明實施例2的葡萄復(fù)合粉后，成年人血液中的總膽固醇的含 量發(fā)生明顯變化。與普通市售葡萄復(fù)合粉相比，本發(fā)明葡萄復(fù)合粉對成年人血液中的總膽 固醇的含量明顯的降低，而礦泉水組成年人血液中的總膽固醇的含量明顯的增加，市售葡 萄復(fù)合粉雖然有所降低，但與本發(fā)明產(chǎn)品相比，效果不顯著，由此可知，本發(fā)明采用具有降 低膽固醇特性的特定菌株制備的葡萄復(fù)合粉具有很好的降低膽固醇的保健效果。
[0157] 需要說明的是:本發(fā)明實施例3-6所制備的促消化葡萄復(fù)合粉同樣具有上述技術(shù) 效果，各實施例之間差異性不顯著。
[0158] 實施例八本發(fā)明促消化葡萄復(fù)合粉保質(zhì)期內(nèi)植物乳桿菌活菌含量穩(wěn)定性試驗
[0159] 取本發(fā)明實施例2制備的葡萄復(fù)合粉于室溫22_25°C、通風(fēng)條件下分別儲藏3個月、 6個月、12個月、24個月、36個月并測定植物乳桿菌活菌含量，結(jié)果如表2:
[0160] 表2:保質(zhì)期內(nèi)植物乳桿菌活菌含量檢測結(jié)果
[0162] 以上結(jié)果表明：本發(fā)明葡萄復(fù)合粉的儲存穩(wěn)定性較好，抗環(huán)境(溫度、適度、氧氣、 光照、水分等)影響因素能力大，保質(zhì)期植物乳桿菌活菌含量損失率最大(36個月）為15%， 比現(xiàn)有的同類產(chǎn)品活菌含量高、損失率低、保質(zhì)期長，同時反映出葡萄復(fù)合粉的其它生物活 性成分具有同樣的儲存穩(wěn)定性。
[0163] 需要說明的是:本發(fā)明實施例3-6制備的促消化葡萄復(fù)合粉同樣具有上述實驗效 果，各實施例之間及與上述實驗效果差異性不大。
[0164] 實施例九本發(fā)明促消化葡萄復(fù)合粉的感官品評試驗
[0165] 邀請24名人員對本發(fā)明實施例2制備的葡萄復(fù)合粉與市售兩種同類相同生產(chǎn)日期 的葡萄復(fù)合粉進(jìn)行品評，感官打分，其中專業(yè)和非專業(yè)人員各12名，專業(yè)人員青年、中年、老 年各4名，男女各半，非專業(yè)人員少年、青年、中年、老年各3名，男女各半;打分包括外觀(20 分）、質(zhì)地(25分）、風(fēng)味(30分）、口感(25分）四個方面，打分人員獨立進(jìn)行，互不影響，以保證 品評結(jié)果準(zhǔn)確。對品評結(jié)果進(jìn)行了統(tǒng)計，均分值取近似值，保留整數(shù)，具體見表3:
[0166]表3:感官品評統(tǒng)計結(jié)果
[0169] 注：同一行內(nèi)標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，標(biāo)不同大寫字母表示差異 極顯著(P<〇.01)，標(biāo)有相同字母表示差異不顯著(P>〇.05)。
[0170]以上結(jié)果表明，本發(fā)明制備的葡萄復(fù)合粉從外觀、質(zhì)地、風(fēng)味和口感任何一方面都 要明顯優(yōu)于市售葡萄復(fù)合粉，特別是外觀、風(fēng)味和口感極好，同時也適合不同年齡段、不同 消費層次的消費者食用。
[0171] 需要說明的是:本發(fā)明實施例3-6制備的促消化葡萄復(fù)合粉同樣具有上述實驗效 果，各實施例之間及與上述實驗效果差異性不大。
[0172] 實施例十本發(fā)明促消化葡萄復(fù)合粉益生性試驗
[0173] 將本發(fā)明實施例2制備的葡萄復(fù)合粉，用無菌水制備成活菌數(shù)為2X101()CFU/mL的 植物乳桿菌溶液，于4°C保存?zhèn)溆茫?br>[0174] 1、取保存好的10mL植物乳桿菌溶液注入到試管1中，采用十倍逐級稀釋至1(T8,取 lmL稀釋液在平板上，將滅菌后冷卻至45°C的MRS瓊脂培養(yǎng)基傾注在平板(滅菌)上，迅速搖 勻。再將裝有10mL植物乳桿菌溶液的試管2置于80-90°C水浴鍋中加熱15-25min，取加熱后 的植物乳桿菌溶液進(jìn)行十倍逐級稀釋至1(T 8,取lmL稀釋液在平板上，將滅菌后冷卻至45°C 的MRS瓊脂培養(yǎng)基傾注在平板(滅菌）上并迅速搖勻。最后將加熱前和加熱后的平板均在35 °C條件下培養(yǎng)24h，計算加熱前后的數(shù)量。
[0175] 結(jié)果表明，活菌存活率達(dá)到了88%以上。
[0176] 2、模擬胃液及腸液的耐受試驗：取100g/L的鹽酸16.4mL加蒸餾水稀釋，使pH值分 別為1.5、2.5和3.5，取10〇!^稀鹽酸溶液，分別加入4胃蛋白酶，使其充分溶解，得模擬胃 液，微孔濾膜除菌(0 ? 22wn)備用。取磷酸二氫鉀6 ? 8g，加水500mL使溶解，用0 ? ImoL/L氫氧化 鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至6.8;另取胰蛋白酶10g，加水100mL使溶解，將兩液混合后，加水稀釋至 1000ml，得模擬腸液，微孔濾膜除菌(0.22m)備用。取lmL保存好的植物乳桿菌溶液加入到 9mL的模擬胃液中（即十倍逐級稀釋），并迅速在振蕩器上充分混勻，然后置于30-45°C靜置 培養(yǎng)2-4h。分別在111、211、311、411的時候取出培養(yǎng)液并立即計數(shù)殘存活菌數(shù)，與原活菌數(shù)進(jìn)行 比較，結(jié)果表明，活菌存活率為98 %。然后取在人工胃液中消化不同時間的培養(yǎng)液各lmL，分 別接種于9mL pH值為6.8的人工腸液中，置于30-45°(：靜置培養(yǎng)2-411，并分別在0、3、6、2411取 樣，測定其活菌數(shù)，與原活菌數(shù)進(jìn)行比較，結(jié)果表明活菌存活率為99%。
[0177] 3、模擬膽鹽的耐受試驗:用胰液素制成lg/L的溶液，并在溶液中加入0.8%的豬膽 鹽，用10 %的NaOH調(diào)整pH為8.0，然后用0.45mi微濾膜過濾并除菌。將0.5mL保存好的植物乳 桿菌溶液接種到4.5mL模擬膽鹽中，培養(yǎng)24h后得到培養(yǎng)液，計數(shù)殘存的活菌數(shù)。將培養(yǎng)液在 滅菌生理鹽水中十倍逐級稀釋至1(T 8,并用MRS傾注，然后置于35°C靜置培養(yǎng)24h。結(jié)果表明 活菌存活率為99 %。
[0178] 以上試驗結(jié)果表明，本發(fā)明葡萄復(fù)合粉中的植物乳桿菌益生性(耐熱性、耐pH性、 耐膽鹽)較強，非常適合人體胃腸環(huán)境，在模擬胃腸環(huán)境中存活率大，可有效改善胃腸功能。 [0179]需要說明的是:本發(fā)明實施例3-6制備的促消化葡萄復(fù)合粉同樣具有上述實驗效 果，各實施例之間及與上述實驗效果差異性不大。
[0180]實施例十一本發(fā)明促消化葡萄復(fù)合粉小鼠腸道性能試驗
[0181] 將本發(fā)明實施例2制備的葡萄復(fù)合粉，用無菌水制備成活菌數(shù)為2X101()CFU/mL的 植物乳桿菌溶液，于4°C保存?zhèn)溆茫?br>[0182] 選取普通昆明小白鼠60只，雌雄各半，18_20g，常規(guī)詞養(yǎng)。從中隨機挑選40只，每天 早晨9:00灌胃鹽酸林可霉素0.2mL(20mg)/只，其它作為對照組，每天同一時間灌胃等量滅 菌生理鹽水，連續(xù)一周，制備腸道菌群失調(diào)的小鼠模型。模型組小鼠飲食下降，未出現(xiàn)死亡 和明顯的腹瀉現(xiàn)象，排軟糞，外形正常含水分較多，墊料潮濕。將40只腸道菌群失調(diào)小鼠，隨 機分為2組，一組20只作為治療組，每天灌胃保存好的植物乳桿菌溶液0.5ml (2 X lOhcfu/ ml)/只，另20只作為自然恢復(fù)組，每天同一時間灌胃等量滅菌生理鹽水，連續(xù)兩周。整個試 驗期21天，每天觀察小白鼠的生長和排便情況，于第8、21天對葡萄復(fù)合粉治療組和自然恢 復(fù)組的小鼠進(jìn)行稱重，計算各組體重平均增長率，結(jié)果如表4;每5天測各組小鼠糞便大腸桿 菌數(shù)量，計算平均數(shù)，結(jié)果如表5。取小鼠糞便約O.lg，于無菌操作臺內(nèi)加入3粒玻璃珠（以 〇. lg糞樣加〇. 5mL稀釋液），稀釋并接種麥康凱瓊脂培養(yǎng)基，計算每克濕便中的大腸桿菌數(shù)。
[0183] 表4:小鼠增重情況
[0185]表5:小鼠糞便中大腸桿菌數(shù)的情況
[0188]葡萄復(fù)合粉治療組小鼠體重平均增長率（67.96 % )顯著高于自然恢復(fù)組 (32.14%);飼喂溶液后腸道大腸桿菌數(shù)量顯著下降，降低97.07%，顯著低于自然恢復(fù)組 (24.78% )，表明本發(fā)明葡萄復(fù)合粉中的植物乳桿菌在小白鼠腸道內(nèi)迅速定植，形成優(yōu)勢菌 群，并有效抑制大腸桿菌等病原菌的生長繁殖，并且定植時間長，持續(xù)、有效改善了腸道性 能。
[0189] 需要說明的是:本發(fā)明實施例3-6制備的促消化葡萄復(fù)合粉同樣具有上述實驗效 果，各實施例之間及與上述實驗效果差異性不大。
[0190] 實施例十二本發(fā)明促消化葡萄復(fù)合粉對機體免疫力的影響
[0191] 1實驗?zāi)康?br>[0192] 通過運動耐力測試(小鼠游泳試驗），驗證本發(fā)明葡萄復(fù)合粉的提高免疫力、抗疲 勞作用。
[0193] 2實驗材料與試劑
[0194] 2.1供試藥物：
[0195] 市售葡萄復(fù)合粉(G1);市售葡萄復(fù)合粉(G2);本發(fā)明實施例2-6制備的葡萄復(fù)合粉 (G3-G7)。
[0196] 2.2 試劑：
[0197] 肝/肌糖原測試盒，購自南京建成生物制品研究所;濃硫酸(AR)，南京化學(xué)試劑有 限公司；生理鹽水，山東長富潔晶藥業(yè)有限公司。
[0198] 3.實驗動物
[0199] ICR小鼠，d，清潔級，體重18-22g，由寧夏醫(yī)科大學(xué)比較醫(yī)學(xué)中心提供，實驗期間小 鼠自由飲食。
[0200] 4 ?主要儀器
[0201 ] 錯制游泳箱（50cmX 50cmX 40cm)，鉛絲，低溫高速離心機：5804R型，Eppendrof公 司；水浴鍋:DK-S26型，上海精宏實驗設(shè)備有限公司；電子稱:BS224S型，Sartorius公司；秒 表，溫度計 [0202] 5 ?實驗分組
[0203] 5.1劑量分組及受試樣品給予時間隨機將小鼠分為8組，每組10只，第1組至第7組 分別給G1~G7的藥物，第8組為空白對照組，給予等體積的雙蒸水，每組每日均灌胃1次，灌 胃體積為0.2ml/10g，連續(xù)給予受試樣品30天。
[0204] 5.2樣品配制第1組至第7組:稱取2.25g藥物樣品，用蒸餾水配至150ml;空白對照 組:雙蒸水150ml。
[0205] 6.實驗方法
[0206] 6.1負(fù)重游泳實驗?zāi)┐谓o藥30min后，置小鼠于游泳箱中，水深不少于30cm，水溫25 ±rc，鼠尾根部負(fù)荷5%體重的鉛皮，記錄小鼠游泳開始至死亡的時間，作為小鼠游泳時 間。
[0207] 6.2小鼠血清尿素測定末次給藥3〇111111后，在溫度為30°(：的水中不負(fù)重游泳9〇1]1111， 休息60min后摘眼球采血0.5mL (不加抗凝劑），置4°C冰箱3h，血凝固后2000r/min離心 15min，取血清送寧夏醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗科檢測。
[0208] 6.3肝糖原的測定末次給藥3〇1^11后，在溫度為25±1°(：的水中不負(fù)重游泳9〇111111， 頸椎脫臼處死小鼠，用生理鹽水洗凈，并用濾紙吸干水分后，準(zhǔn)確稱取肝臟l〇〇mg，肝糖原檢 測試劑盒檢測小鼠肝糖原含量。
[0209] 6.4血乳酸的測定末次給藥30min后采血，然后不負(fù)重在溫度為30 °C的水中游泳 lOmin后停止。乳酸儀測定方法:分別在游泳前、游泳后、游泳后休息20min后各采血20yL加 入40此破膜液中，立即充分振蕩破碎細(xì)胞用乳酸儀測定。（血乳酸曲線下面積= 5X(游泳前 血乳酸值+3 X游泳后Omin的血乳酸值+2 X游泳后20min的血乳酸值）
[0210] 7.觀察指標(biāo)負(fù)重游泳時間，血乳酸、尿素、肝糖原值
[0211] 8.統(tǒng)計方法實驗數(shù)據(jù)用表示，采用t檢驗進(jìn)行組間比較 [0212] 9.實驗結(jié)果
[0213] 9.1本發(fā)明葡萄復(fù)合粉對小鼠體重的影響
[0214]各組小鼠在給予G1~G9藥物后，前、中，后期體重分別見下表所示，各組小鼠的初 始體重和增重體重與對照組比較均無統(tǒng)計學(xué)差異(P>〇.05)，表明G1~G9藥物均無明顯的 毒性。實驗結(jié)果詳見表6。
[0215] 表6負(fù)重游泳實驗小鼠的初始體重、中期體重和結(jié)束體重(f ± a )
[0218] 9.2本發(fā)明葡萄復(fù)合粉對小鼠負(fù)重游泳時間的影響
[0219] 經(jīng)口給予小鼠G1~G7藥物后，G1~G2藥物與空白對照組比較，可以明顯延長小鼠 負(fù)重游泳時間，具有顯著性差異(P<〇.05)，本發(fā)明葡萄復(fù)合粉G3~G7藥物與空白對照組比 較，可以顯著延長小鼠負(fù)重游泳時間，具有極顯著性差異(P<〇.01)，且明顯優(yōu)于G1~G2藥 物。結(jié)果詳見表7。
[0220] 表7葡萄復(fù)合粉對小鼠負(fù)重游泳時間的影響土、；
[0222] "*"p〈0.05vs 空白對照；
[0223] "**"口〈0.01￥8空白對照；
[0224] 9.3本發(fā)明葡萄復(fù)合粉對小鼠運動前后血乳酸的影響
[0225] 經(jīng)口給予小鼠本發(fā)明的葡萄復(fù)合粉后，本發(fā)明葡萄復(fù)合粉G3~G7藥物對小鼠運動 后血乳酸曲線下面積與對照組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P<〇.05)，G1~G2藥物組小鼠血乳酸曲 線下面積與對照組比較雖有所降低，但并無統(tǒng)計學(xué)差異(P>〇.05)。結(jié)果見表8。
[0226] 表8本發(fā)明葡萄復(fù)合粉對小鼠運動前后血乳酸水平的影響(1±入）
[0229] "*"p〈0.05vs 空白對照；
[0230] 9.4本發(fā)明葡萄復(fù)合粉對小鼠肝糖原的影響
[0231 ]經(jīng)口給予小鼠G1~G7藥物后，G1~G2藥物與空白對照組比較，小鼠肝糖原含量均 有明顯的升高，具有顯著性差異(P<〇.05)，本發(fā)明葡萄復(fù)合粉G3~G7藥物與與空白對照組 比較，小鼠肝糖原含量均有明顯的升高，具有極顯著性差異(P<〇.01)，且明顯優(yōu)于G1~G2 藥物。結(jié)果詳見表9。
[0232]表9本發(fā)明葡萄復(fù)合粉對小鼠肝糖原含量的影響(Lb )
[0234] "*"p〈0.05vs 空白對照；
[0235] "**"p〈0.01vs 空白對照；
[0236] 9.5本發(fā)明葡萄復(fù)合粉對小鼠血清尿素的影響
[0237] 經(jīng)口給予小鼠G1~G7藥物后，G1~G2藥物組與空白對照組比較，小鼠運動后血清 尿素含量均有明顯的降低，具有顯著性差異(P<〇.05)，本發(fā)明葡萄復(fù)合粉G3~G7藥物與與 空白對照組比較，小鼠運動后血清尿素含量均有明顯的降低，具有極顯著性差異（P< 0.01)，且明顯優(yōu)于G1~G2藥物。結(jié)果詳見表10。
[0238] 表10本發(fā)明葡萄復(fù)合粉對小鼠血清尿素含量的影響)
[0241] "*"p〈0.05vs 空白對照；
[0242] "**"p〈0.01vs 空白對照；
[0243] 10 ?實驗結(jié)論
[0244] 本實驗主要通過小鼠負(fù)重游泳實驗，同時檢測小鼠肝糖原的儲備來觀察本發(fā)明促 消化葡萄復(fù)合粉提高免疫力、抗疲勞的效果。初步研究結(jié)果顯示如下：
[0245] 1、本發(fā)明G3~G7葡萄復(fù)合粉均能延長小鼠負(fù)重游泳時間（P<0.01)，且效果明顯 優(yōu)于其它G1~G2的葡萄復(fù)合粉。
[0246] 2、生化檢測方面顯示，本發(fā)明G3~G7葡萄復(fù)合粉各劑量組均能減少運動后小鼠血 清中葡萄糖無氧酵解所產(chǎn)生的乳酸含量，與對照組比較有顯著性差異(P<〇.05)，而其它G1 ~G2的葡萄復(fù)合粉雖然也能減少運動后小鼠血清中葡萄糖無氧酵解所產(chǎn)生的乳酸含量，但 與對照組比較，無統(tǒng)計學(xué)差異(P>〇.05);
[0247] 3、本發(fā)明G3~G7葡萄復(fù)合粉各劑量組均能顯著提高小鼠肝臟中糖原的儲備(P< 0.01)，且效果明顯優(yōu)于其它G1~G2的葡萄復(fù)合粉；
[0248] 4、高尿酸模型發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明G3~G7葡萄復(fù)合粉能顯著降低小鼠游泳后血清中尿素 的含量(P<〇.01)，且效果明顯優(yōu)于其它G1~G2葡萄復(fù)合粉；
[0249] 11 ?結(jié)論
[0250]上述實驗證明本發(fā)明促消化葡萄復(fù)合粉能顯著提高機體免疫力，提高小鼠的體力 和耐力，降低小鼠運動后血清中尿素及乳酸的含量，且能顯著提高小鼠肝臟中糖原的儲備， 有助于緩解運動負(fù)荷引起的疲勞;能延長小鼠負(fù)重游泳至力竭的時間。
【主權(quán)項】
1. 一種促消化葡萄復(fù)合粉，主要由以下重量份數(shù)的原料制備：葡萄粉30-50份，小麥芽 粉20-30份，改性膳食纖維8-15份，木瓜粉6-12份，植物乳桿菌粉6-12份，酵素粉11-17份，檸 檬粉2_6份； 所述植物乳桿菌粉是以植物乳桿菌CGMCC NO. 11763為出發(fā)菌株按常規(guī)方法制備。2. 如權(quán)利要求1所述的促消化葡萄復(fù)合粉，其特征在于，主要由以下重量份數(shù)的原料制 備:葡萄粉35-45份，小麥芽粉23-27份，改性膳食纖維11-13份，木瓜粉8-10份，植物乳桿菌 粉8-10份，酵素粉13-15份，梓檬粉3-5份。3. 如權(quán)利要求1所述的促消化葡萄復(fù)合粉，其特征在于，主要由以下重量份數(shù)的原料制 備:葡萄粉40份，小麥芽粉25份，改性膳食纖維12份，木瓜粉9份，植物乳桿菌粉9份，酵素粉 14份，檸檬粉4份。4. 如權(quán)利要求1-3任一所述的促消化葡萄復(fù)合粉，其特征在于，所述葡萄粉的制備方 法，包括以下步驟，將葡萄放入盛有0.1-0.3%碳酸氫鈉溶液的超聲波清洗機中，于室溫下 200-400W、35-45KHZ清洗5-10min，瀝干，每個葡萄果任意切分成四份，單層平鋪在微波干燥 機中于功率3-5kW、溫度120-130 °C、干燥3-5s，然后浸泡在質(zhì)量百分比濃度為8-12%的絲膠 肽溶液中8-10min，取出，于-18-22°C冷凍30-50min后立即進(jìn)行粉碎，粉碎物粒徑0.3-0.5mm，接著加入粉碎物質(zhì)量1-3倍的水，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為3.5-5.5，于室溫下在電場強度 25-35kV/cm，脈沖時間300-500ys,脈沖頻率200-300HZ條件下進(jìn)行高壓脈沖電場處理20-30min;然后于室溫在功率150-300W條件下進(jìn)行微波輻照提取15-20min，同時在功率200-300W，頻率30-40KHZ條件下進(jìn)行超聲波輔助提取;加入提取液質(zhì)量1.5-2.5 %的混合酶，于 40-50 °C酶解30-50min，酶解液過濾，濾液減壓濃縮、冷凍干燥至水分含量為5-8 %即得葡萄 粉； 所述混合酶為纖維素酶、蛋白酶、果膠酶、單寧酶按質(zhì)量比2-4:1-3:1-3:1-2均勻混合。5. 如權(quán)利要求1-3任一所述的促消化葡萄復(fù)合粉，其特征在于，所述小麥芽粉的制備方 法，包括如下步驟:將小麥放在裝有0.01-0.03%碳酸氫鈉溶液的超聲波清洗機中于功率 200-400W、頻率20-30KHZ室溫超聲清洗3-5min，取出、瀝干，于頻率2450MHz、功率3000W、溫 度38-42°C、料層厚度2-4cm微波干燥10-15s，然后置溫度為33-36°C、pH值為6-8的浸泡液中 浸泡4-6h，浸泡液含有質(zhì)量百分比濃度為0.15-0.25 %的復(fù)合酶，每隔15-20min通風(fēng)一次， 通風(fēng)壓力0.13-0.1510^，同時于電場強度10-151^/〇11，脈沖時間100-30(^8，脈沖頻率60-80Hz條件進(jìn)行高壓脈沖電場處理，直至小麥水分含量為40-45 % ;浸泡后的小麥瀝干，在發(fā) 芽室內(nèi)進(jìn)行暗發(fā)芽，暗發(fā)芽溫度保持20-24°C，暗發(fā)芽時間為20-24h，經(jīng)發(fā)芽后的小麥干燥 至水分含量為5-8 %，低溫粉碎、過60-80目篩即得小麥芽粉； 所述復(fù)合酶為纖維素酶、葡聚糖酶、木聚糖酶按質(zhì)量比2-4:2-4:1-3均勻混合。6. 如權(quán)利要求1所述的促消化葡萄復(fù)合粉，其特征在于，植物乳桿菌粉活菌含量為:7 X 1012-9X1012cfu/g〇7. 如權(quán)利要求1所述的促消化葡萄復(fù)合粉，其特征在于，制備植物乳桿菌粉時冷凍保護 劑的制備方法，包括如下步驟:將冬黑麥、沙冬青、鯊魚皮膠原蛋白分別清洗、瀝干，按質(zhì)量 比8-10:3-5: 2-4均勻混合，加入混合物料質(zhì)量0.1-1倍的pH值為3.8-4.5的乳酸潤濕3-8h， 于-18-22°C冷凍l_2h后立即進(jìn)行粉碎，冷凍料層厚度3-5cm，粉碎物粒徑0.5-3mm，接著加 入粉碎物質(zhì)量10-20倍的水，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為3.5-5.5，于室溫下在電場強度25-35kV/cm， 脈沖時間300-500ys，脈沖頻率200-300Hz條件下進(jìn)行高壓脈沖電場處理20-30min;然后于 室溫在功率150-300W條件下進(jìn)行微波輻照提取15-20min，同時在功率200-300W，頻率30-40KHz條件下進(jìn)行超聲波輔助提取；加入提取液質(zhì)量1-2%的復(fù)配酶，于45-55Γ酶解30-50min;酶解液過濾、濾液濃縮、低溫粉碎至粒徑為0.1-0.3_即得保護劑； 所述復(fù)配酶為纖維素酶、蛋白酶、淀粉酶、果膠酶、單寧酶按質(zhì)量比2-4:1-3:1-3:1-2: 1-2均勻混合。8. 如權(quán)利要求1-3任一所述的促消化葡萄復(fù)合粉，其特征在于，所述酵素粉制備方法如 下:采用泡菜發(fā)酵生產(chǎn)末期排放的發(fā)酵液為原料，過濾除去發(fā)酵液中的菜葉等大粒物質(zhì)得 到發(fā)酵液體，發(fā)酵液體采用冷凍干燥獲得酵素粉;冷凍干燥的條件是：-30--40度預(yù)凍6小 時;然后凍干直到含水量小于5%。9. 如權(quán)利要求1-8任一所述促消化葡萄復(fù)合粉的制備方法，其特征在于，包括如下步 驟:按照配方比例，稱取各原料，依次將酵素粉、植物乳桿菌粉、葡萄粉、檸檬粉、小麥芽粉、 木瓜粉加入V型混合罐均勻混合25-35min，攪拌轉(zhuǎn)速20-40r/min，然后加入改性膳食纖維均 勾混12-18min,攪拌轉(zhuǎn)速40-60r/min,無菌灌裝、密封、包裝即得促消化葡萄復(fù)合粉。10. 如權(quán)利要求9所述促消化葡萄復(fù)合粉的制備方法，其特征在于，所述改性膳食纖維 的制備方法，包括以下步驟:將菊粉、小麥纖維、燕麥纖維按質(zhì)量比5-7:2-4:1-3均勻混合， 加入其質(zhì)量3-7倍的水，室溫100-300W、35-40KHz條件超聲提取10-15min，然后在電場強度 20-40kV/cm，脈沖時間300-500ys,脈沖頻率200-400HZ條件下進(jìn)行高壓脈沖電場處理10-15min;用乳酸調(diào)節(jié)pH值為4.5-6.5，加入混合物質(zhì)量0.1-0.3%的生物酶，于45-55°C酶解 20-48min;酶解液過濾，濾液減壓濃縮、冷凍干燥至水分含量為5-8 %即得改性膳食纖維； 所述生物酶為纖維素酶、木聚糖酶、漆酶、果膠酶按質(zhì)量比1-3:1-3:1-2:1-2均勻混合。
【文檔編號】A23L19/00GK105852085SQ201610202248
【公開日】2016年8月17日
【申請日】2016年4月1日
【發(fā)明人】邵素英
【申請人】邵素英