一種栘*發(fā)酵茶及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種栘發(fā)酵茶的制備方法，它包括如下步驟：a、制備栘茶粗品；b、取步驟a的栘茶粗品，先用蒸汽處理10min，然后控制茶堆的含水量為12％?20％，用45℃?55℃的溫度進行渥堆處理3hr?5hr；再次蒸汽處理20min；c、冠突散囊菌發(fā)酵：按水料比為20％?40％(mL/g)的比例加入無菌水，接種冠突散囊菌；然后在25℃?35℃條件下培養(yǎng)發(fā)酵7d?10d；d、將步驟c的發(fā)酵物滅菌，烘干，即得栘發(fā)酵茶。本發(fā)明的栘發(fā)酵茶感官品質(zhì)、口感佳，而且必需氨基酸含量高、根皮素含量高，營養(yǎng)成分豐富，應(yīng)用前景良好。
【專利說明】
_種栘|衣發(fā)酵茶及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明屬于制茶技術(shù)領(lǐng)域和微生物發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種代用茶類中的具 體產(chǎn)品一一栘棟發(fā)酵茶及其制備的方法。該技術(shù)的產(chǎn)品可用于食品、功能型食品的開發(fā)。
【背景技術(shù)】
[0002] 栘植俗稱野蘋果、楂子樹、栘衣、栘依、栘[木衣]、栘枵、栘鴛等，是薔薇科蘋果亞 科栘濃屬Docyni a植物的統(tǒng)稱，為常綠或半常綠的喬木，包括三個種：云南栘棖 (D.delavayi(Franch. )Schneid)、移植（D. indica(Wall · )Dcne)和長爪移棟. (D.longiunguis Q.Luo et J.L.Liu)，主要分布在我國西南少數(shù)民族地區(qū)及東南亞地區(qū)， 生于海拔2000-3000米的山坡、溪旁及叢林中。
[0003] 栘梭是我國西南少數(shù)民族地區(qū)常見的藥食兩用的植物資源。其莖葉、果實可入藥， 具有消炎、接骨、舒經(jīng)活血、舒肝止痛、清暑消毒等功效;嫩莖尖也是傣族日常采集的野生蔬 菜之一。另外，栘棟果實營養(yǎng)豐富且口感獨特，常作為野生水果食用，也有部分開發(fā)成果脯、 果醋、果酒等；目前市場上對栘核的開發(fā)利用多為果實銷售及加工。
[0004] 研究表明，栘棟葉中含有較高的多酚物質(zhì)，保健價值高，而且栘棟葉一年四季均 可采集，資源量大。但目前尚無開發(fā)、利用栘梭葉的報道，更未見將栘濃葉制備成代用茶類 的報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種栘核發(fā)酵茶及其制備方法。
[0006] 本發(fā)明提供了一種新型代用葉茶的制備流程與方法，豐富了代用茶的制備技術(shù)和 原料的微生物處理技術(shù)，拓展了藥食兩用物品的開發(fā)技術(shù)。
[0007] 本發(fā)明提供了 一種栘豐衣發(fā)酵茶的制備方法，它包括如下步驟：
[0008] a、制備栘糧茶粗品：取栘核鮮葉，攤放2hr_4hr，然后進行殺青、首次揉捻，再攤放 0.5hr-lhr、再二次揉捻、干燥，控制水分在8 % -11 %，得栘濃茶粗品；
[0009] 其中，殺青的溫度為200°c-300°c，殺青的時間為5min-10min，出鍋后攤放30min-60min，然后進行揉捻；
[0010]其中，揉捻采用揉捻機，首次揉捻方式為輕壓l〇min-25min;二次揉捻方式為輕壓 5min_10min;
[0011] b、取步驟a的栘祓茶粗品，先用蒸汽處理lOmin，然后控制茶堆的含水量為12%-20%，用45°C_55°C的溫度進行渥堆處理3hr-5hr;再次蒸汽處理20min;
[0012] C、冠突散囊菌發(fā)酵:按水料比為20%-40%(mL/g)的比例加入無菌水，接種冠突散 囊菌;然后在25°C_35°C條件下培養(yǎng)發(fā)酵7d-10d;
[0013] d、將步驟c的發(fā)酵物滅菌，烘干，即得栘棟發(fā)酵茶。
[0014] 渥堆溫度:45°C-55°C，是指保持茶堆環(huán)境及茶堆原料的溫度為45°C-55°C。
[0015] 其中，步驟b中，首次蒸汽處理為飽和蒸汽處理。
[0016] 飽和蒸汽：即飽和狀態(tài)下的蒸汽，當液體在有限的密閉空間中蒸發(fā)時，液體分子通 過液面進入上面空間，當單位時間內(nèi)進入空間的分子數(shù)目與返回液體中的分子數(shù)目相等 時，則蒸發(fā)與凝結(jié)處于動平衡狀態(tài)，此時的蒸汽稱為飽和蒸汽。
[0017] 其中，步驟c中，按35%水料比加入無菌水。
[0018] 其中，步驟c中，接種冠突散囊菌后，冠突散囊菌的數(shù)量為106~107個/mL。
[0019] 其中，步驟c中，28°C條件下發(fā)酵;和/或，發(fā)酵過程中翻動2-3次。
[0020] 其中，步驟d中，滅菌的方法為:60-80°C保持0.5hr-lhr，期間翻動2-3次。
[0021] 其中，步驟d中，烘干的溫度為40°C-60°C，控制水分在8-11 %。
[0022]進一步的，烘干的溫度為50°C。
[0023] 本發(fā)明還提供了上述方法制備的栘|衣發(fā)酵茶。
[0024] 本發(fā)明的栘依發(fā)酵茶感官品質(zhì)、口感佳，而且必需氨基酸含量高、根皮素含量高， 營養(yǎng)成分豐富，適合廣泛日常飲用，具有較高的開發(fā)與應(yīng)用價值。
[0025] 顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識和慣用手段，在不脫離 本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。
[0026] 以下通過實施例形式的【具體實施方式】，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進一步的詳細說 明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容 所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
【附圖說明】
[0027] 圖1各傳感器對一個茶樣的響應(yīng)信號圖
[0028] 圖2各傳感器對栘棟茶發(fā)酵前后樣品響應(yīng)值
[0029] 圖3栘核茶發(fā)酵前后主成分分析二維圖
[0030] 圖4栘棟茶發(fā)酵前后主成分分析三維圖
[0031] 圖5栘核茶發(fā)酵前后共有峰指紋圖譜
[0032] 圖6測定栘核茶中根皮苷、根皮素含量的色譜圖
【具體實施方式】
[0033] 下面以實施例作進一步說明，但本發(fā)明不局限于這些實施例。
[0034] 本發(fā)明所用的實驗材料與儀器如下：
[0035] 栘棟葉:采自云南省德宏州、攀枝花市和西昌市等地；
[0036] 冠突散囊菌(Eurotiumcristatum):購自北納創(chuàng)聯(lián)生物技術(shù)研究院，BNCC146559， 即中國普通微生物菌種保藏管理中心保藏號為CGMCC 3.448的冠突散囊菌菌種；
[0037] 6cr_25型茶葉揉捻機購自四川省井研縣飛亞機械制造有限公司；α-ASTREE電子舌 購自法國Alpha M0S公司；安捷倫1260高效液相色譜儀購自美國安捷倫有限公司；S-433D氨 基酸分析儀購自德國Sykam公司；WSL-2比較測色儀購自上海昕瑞儀器儀表有限公司； Sartorius BP211D型電子天平購自北京塞多利斯儀器系統(tǒng)有限公司；DHG-9240A電熱恒溫 鼓風(fēng)干燥箱購自上海精宏實驗設(shè)備有限公司。
[0038] 實施例1本發(fā)明栘核發(fā)酵茶的制備
[0039] 一、制備未發(fā)酵的栘梭茶粗品
[0040] 按綠茶的炒青工藝，制備成栘依茶，具體方法如下：
[0041 ]取栘核樹鮮葉，攤放2-4hr，然后進行殺青、首次揉捻，再攤放0.5-lhr后、二次揉 捻、干燥，控制水分在8-11%，得栘糧茶粗品；
[0042]殺青和揉捻是關(guān)鍵的環(huán)節(jié)：
[0043] 1)殺青溫度200°0300°(：，殺青時間51^11-1〇1^11?？捎贸村伿止⑶啵仠?00°(：- 300°C，每鍋投葉量5Kg-7Kg，葉子下鍋后能聽到清脆的如炒豆般爆聲。殺青時間5min-lOmin，殺至青味消失，略有清香溢出，此時葉色暗綠，葉梗手折不斷，殺青葉手捏成團，松手 后會慢慢彈開。出鍋后攤放30min-60min，然后進行揉捻；
[0044] 2)揉捻可用小型揉捻機(如:6cr-25型茶葉揉捻機，四川省井研縣飛亞機械制造有 限公司），投葉量15Kg-20Kg，首次揉捻用輕壓揉10min-25min。二次揉捻加輕壓揉5min-10min〇
[0045] 二、冠突散囊菌種子液的制備
[0046]取4°C保存的冠突散囊菌菌種，接種于沙氏液體培養(yǎng)基上，28°C、150r/min搖床培 養(yǎng)24h，挑取適量菌絲接種于沙氏斜面培養(yǎng)基中，培養(yǎng)7d后，向斜面試管中加入適量無菌水， 反復(fù)吹洗斜面，制成孢子懸浮液并轉(zhuǎn)移至l〇〇mL無菌三角瓶中，以血球計數(shù)板法調(diào)節(jié)其孢子 濃度為1〇 6~1〇7個/mL，即得種子液。
[0047] 三、固態(tài)發(fā)酵法制備栘核發(fā)酵茶
[0048] 技術(shù)路線：栘濃茶粗品-汽蒸10min-45°C-55°C渥堆3hr-5hr-調(diào)整水料比為 35%4滅菌4接種5%金花菌-20-30°(：發(fā)花培養(yǎng)7(1-10(1460-80°(：烘焙0.51^-11^440°(：-60 °C烘干-成品
[0049] 具體如下：
[0050] 稱取5g栘梭茶，飽和汽蒸lOmin后轉(zhuǎn)移至100mL發(fā)酵瓶中，45°C_55°C渥堆3hr-5hr (控制渥堆的含水量在12-20%)，然后飽和汽蒸處理20min，再按20%-40%(V/M)水料比加 入無菌水，3%-10%(V/M)接種量接種冠突散囊菌種子液(冠突散囊菌菌液的孢子濃度控制 到10 6~107個/mL)，25°C-35°C條件下發(fā)酵7d-10d，直到茶葉表面出現(xiàn)典型的黃色金花，發(fā)酵 過程中翻動2-3次；
[0051 ] 然后60-80°C烘焙0.5hr-lhr，烘焙期間翻動2-3次;最后40°c-60°c烘干，控制水分 在8-11 %，得栘棟發(fā)酵茶，即本發(fā)明的栘核茶。
[0052]以下用試驗例的方式，說明本發(fā)明的有益效果：
[0053]試驗例1栘依茶制備方法的對比試驗 [0054] 一、試驗材料
[0055] 本發(fā)明方法制備栘棟茶(A):按照實施例1方法制備的栘濃茶；
[0056] 傳統(tǒng)方法制備栘核茶(B):按綠茶的炒青工藝，制備成栘核茶（即實施例1中未發(fā) 酵的栘棟茶粗品）。
[0057] 統(tǒng)計與分析:所有實驗數(shù)據(jù)用SPSS 17.0軟件和Excel進行統(tǒng)計分析。
[0058] 二、感官指標的測定與評價試驗
[0059] 將栘棟茶與栘濃發(fā)酵茶磨碎并過60目篩，得茶樣粉末，按3g/袋的規(guī)格分裝于茶 包中，干燥保藏。
[0060] 分別將兩種樣品各1袋按1:50的茶水比，沸水沖泡5min后，取出茶包，得茶湯，備 用。
[0061 ] 1、茶湯色度的測定
[0062] 分別將兩種茶湯的色度用WSL-2比較測色儀進行測定(WSL-2比較測色儀），然后根 據(jù)儀器使用說明書的要求，對茶湯色澤進行命名。
[0063] 比較發(fā)酵前后栘核茶的茶湯顏色變化，結(jié)果見表1。
[0064] 表1栘棟茶發(fā)酵前后茶湯的色度變化
[0065] Table 1Chroma changes ofnative and fermented Docyniaindica tea
[0066]
[0067] 由表1可以看出，發(fā)酵前后茶湯顏色的變化較明顯，發(fā)酵后為橙黃色，茶湯色度比 色的結(jié)果為:黃14、紅3.2;發(fā)酵前為明橙黃色，茶湯色度比色的結(jié)果為:黃10、紅2、灰1。
[0068] 本發(fā)明的栘濃發(fā)酵茶茶湯顏色更加厚重濃郁，這是由于冠突散囊菌發(fā)酵產(chǎn)生了多 種活性和有色類物質(zhì)溶入茶湯中，對栘濃茶的色澤品質(zhì)有明顯的改善。
[0069] 因此，本發(fā)明獲得的栘糧發(fā)酵茶的色澤品質(zhì)更加厚重濃郁，比不發(fā)酵的栘核茶的 淡色更好。
[0070] 2、感官評價分析
[0071] 隨機選取10位感官評審人員，并對其進行簡易食品感官培訓(xùn)。并按表2評審標準對 茶湯的滋味、香氣做描述性評價和等級評分。
[0072] 表2栘依茶品評的標準
[0073] Table2The sensory evaluation criteria of D.indicatea
[0074]
[0075] 栘核茶發(fā)酵前后感官評價的變化，結(jié)果見表3。
[0076] 表3栘核茶發(fā)酵前后感官評審結(jié)果
[0077] Table3 Results for the sensory evaluation of native and fermented D.indica tea
[0079] 注:與發(fā)酵前比較，#p<0.01，差異極顯著。
[0080] 由表3可看出，栘棟茶發(fā)酵前后的感官差異極顯著(p<0.001)。其中，本發(fā)明的栘 核發(fā)酵茶總分更高，感官評價顯著優(yōu)于未發(fā)酵的栘核茶。
[0081] 具體而言，本發(fā)明的栘核發(fā)酵茶色澤品質(zhì)厚重濃郁，茶湯滋味更回甘，且具有發(fā)酵 前所不具備的醇厚感;而且本發(fā)明的栘棟發(fā)酵茶具備獨特的"菌花香"，香氣純正清高。 [0082] 3、電子舌評價分析
[0083] 分別將發(fā)酵的栘核茶與未發(fā)酵的栘核茶兩種茶湯過濾冷卻至室溫，移取80mL，置 于120mL的電子舌專用燒杯內(nèi)，靜置15min。以冷卻的沸水為校準溶液，校對儀器，然后對茶 湯進行電子舌分析。電子傳感器在每個茶湯樣品中采集120s，每秒記錄1次數(shù)據(jù)。各樣品重 復(fù)測量6次。
[0084] 3.1采樣時間的確定
[0085]根據(jù)電子舌的工作原理得知，電子舌在采集信號前會經(jīng)過自檢、診斷和矯正等步 驟，從而導(dǎo)致在檢測樣品的初期，波動較大，見圖1。
[0086]由圖1可以看出，圖中橫軸為測量時間，縱軸為采集到的響應(yīng)值，7根傳感器代號分 別為22、84、88、04、64、說、貝，這7根并不是專一性傳感器，對酸甜苦咸四種味道都有敏感 性，但敏感程度不同，這就相當于有7位評審員，都從總體風(fēng)味來評價樣品。以發(fā)酵前的栘It 茶為例，可以得知前l(fā)〇s的響應(yīng)值變化非常明顯，10s~50s范圍內(nèi)波動較明顯，50s~100s有 小范圍波動，100s~120s范圍內(nèi)響應(yīng)值基本平穩(wěn)，所以，選取120s的數(shù)據(jù)作為最終響應(yīng)值。 前3次測量數(shù)據(jù)波動較大，故選取后3次的測量數(shù)據(jù)作為原始數(shù)據(jù)進行分析。
[0087] 3.2傳感器響應(yīng)信號分析
[0088] 選取120s的測定數(shù)據(jù)為最終響應(yīng)，再進行傳感器響應(yīng)信號分析，通過對各傳感器 響應(yīng)值進行分析，得到發(fā)酵前后樣品的電子舌雷達圖，結(jié)果見圖2。
[0089]由圖2可以看出，所有傳感器響應(yīng)值在150~8500之間，其中0六』8』六、說傳感器的 響應(yīng)值在4000以上，其余傳感器響應(yīng)值較低，但是CA傳感器的檢測信號強度差異較明顯， 因此CA是對栘濃茶發(fā)酵前后樣品風(fēng)味差異敏感的傳感器。
[0090] 3.3 PCA主成分分析結(jié)果
[0091] 對電子舌采集到的信號進行主成分分析，結(jié)果見圖3和4。
[0092] 圖3和4中的每1個點代表一個樣品的信息，點與點間的距離越大，樣品間的差異也 就越大。
[0093] 從圖3可以看出栘依茶發(fā)酵前后茶湯滋味的不同，發(fā)酵前樣品主要集中在上部，發(fā) 酵后樣品集中在下部。從圖4進一步證明了樣品間的差異，與感官評審結(jié)果一致。
[0094]對數(shù)據(jù)進行分析之后，得知主成分1(PC1)的貢獻率為95.3%，主成分2斤02)的貢 獻率為3.21 %，說明主成分1和2對解釋總變量的貢獻率達98.5 %，可以充分反映樣品的整 體信息。
[0095] 電子舌分析結(jié)果表明：發(fā)酵前后的茶湯，感官品質(zhì)有明顯差異。
[0096] 三、移依茶中氨基酸含量的測定
[0097] 1、測定方法
[0098]分別稱取1.5g發(fā)酵前后樣品，加入80mL沸水，沸水浴浸提45min，抽濾后將濾液收 集于100mL容量瓶中，并用少量去離子水洗滌殘渣，冷卻后定容，搖勻得茶湯。取5mL茶湯于 離心管中，加入5mL10 %磺基水楊酸，搖勾，靜置lOmin，4000r/min離心10min，上清液經(jīng)不同 程度稀釋后，經(jīng)〇 . 22μπι微孔濾膜過濾待測。色譜柱:LCA K 07 (150mm X 4.6mm)，檢測波長： 570nm，440nm，洗脫液流量：0.45mL/min，反應(yīng)液流量：0.25mL/min，柱溫：57~74°C梯度溫 度，反應(yīng)溫度:130 °C。比較栘核茶發(fā)酵前后氨基酸含量，其中：
[0099] 1)人體必需氨基酸的含量:人體8種必需氨基酸含量為蘇氨酸、蛋氨酸、纈氨酸、異 亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸之、色氨酸含量之和。
[0100] 2)呈味氨基酸的含量:鮮味氨基酸含量為谷氨酸、天門冬氨酸含量之和;甜味氨基 酸含量為甘氨酸、丙氨酸、絲氨酸、脯氨酸含量之和;芳香族氨基酸含量為酪氨酸、苯丙氨酸 之和。
[0101] 2、測定結(jié)果
[0102] 栘核茶發(fā)酵前后氨基酸含量結(jié)果見表4。
[0103] 表4栘棟茶發(fā)酵前后氨基酸的變化
[0104]
[0106] 注：增長率=(發(fā)酵后氨基酸含量-發(fā)酵前氨基酸含量）/發(fā)酵前氨基酸含量X 100% .
[0107] "+"氨基酸含量增加；氨基酸含量降低；"0"氨基酸含量不變.
[0108] 氨基酸是重要營養(yǎng)成分，各種氨基酸含量及組成直接影響食品的營養(yǎng)價值，并與 人類味覺密切相關(guān)。
[0109] 由表4可知，兩種栘核茶均含有16種主要的氨基酸，但氨基酸含量表現(xiàn)出較大的變 化。其中，本發(fā)明的栘核發(fā)酵茶所含的必需氨基酸含量增加了40.506%，營養(yǎng)價值更高;呈 味氨基酸中鮮味氨基酸含量下降了 38.583%，而甜味氨基酸、芳香族氨基酸含量明顯增加， 分別增加了 37.838 %、42.775 %，整體上改善了 口感。
[0110]因此，本發(fā)明的栘核發(fā)酵茶所含必需氨基酸含量高、營養(yǎng)價值更高，而且甜味、香 味氨基酸大大提高，口感更好。
[0111]四、發(fā)酵前后化學(xué)成分的測定與評價
[0112] 1、供試品溶液制備
[0113] 1.1 HPLC指紋圖譜分析供試品制備
[0114] 分別將栘濃茶、栘椒發(fā)酵茶置于50°C，烘至恒重，用研缽研碎成粉末并過60目篩 (過篩率>98%)，再精密稱取粉末O.lOOg置于25mL容量瓶中，然后加入20mL甲醇，在25°C下 超聲提取30min，冷卻至室溫后以甲醇定容得提取液，樣品過0.45μπι微孔濾膜，即為指紋圖 譜測定的樣品。低溫保存，備用。
[0115] 1.2 HPLC含量測定供試品制備
[0116] 精密量取0.5mL上述1.1中經(jīng)過0.45μπι微孔濾膜過濾所得的提取液，置于10mL容量 瓶，再加入甲醇定容，樣品再過0.45μπι的微孔濾膜，即為快速測定根皮苷及根皮素的樣品。 低溫保存，備用。
[0117] 2、樣品HPLC指紋圖譜分析
[0118] 比較發(fā)酵前、后的栘核茶化學(xué)成分變化。
[0119] 色譜條件：
[0120] 色譜柱：Agilent ZORBAX Extend-C18柱（4.6X250mm，5ym)，柱溫：25°C，流動相： 乙腈(A):甲醇(B):水(C)，線性梯度洗脫:0~40min(5%-15%A:0%-35%B:95%-50%C)， 40 ~44min(15%-30%A:35%-0%B:50%-70%C)，44~55min(30%-40%A:70%-60%C)， 55 ~59min(40%-100%A:60%-0%C)，59 ~70min(100%A)體積流量：lmL/min，進樣量：10μ L，檢測波長：285nm〇
[0121] 根據(jù)HPLC指紋圖譜，比較栘概茶發(fā)酵前后化學(xué)成分的變化，結(jié)果見圖5。
[0122] 由圖5可以看出，發(fā)酵前、后的栘依茶，有多個成分發(fā)生了改變，經(jīng)過比對，最終確 定有18個共有峰，經(jīng)外標法確認6號峰為根皮苷，10號峰為根皮素。
[0123] 栘概茶發(fā)酵前后成分變化見表5。
[0124] 表5栘依茶發(fā)酵前后成分的變化
[0125]
[0127]注："+"發(fā)酵后共有峰峰面積增加；發(fā)酵后共有峰峰面積減少；"Λ"
[0128] 發(fā)酵后消失的峰；" ▲"發(fā)酵后新出現(xiàn)的峰.
[0129] 由表5可以看出，發(fā)酵前后的18個共有峰中，發(fā)酵后有6個色譜峰面積減少，有12個 色譜峰面積增加；另外，發(fā)酵后新出現(xiàn)11個色譜峰，說明有新的化合物現(xiàn)成，同時，發(fā)酵后有 3個色譜峰面積減少到零，說明有物質(zhì)發(fā)生了徹底的降解，消失了。
[0130] 因此，與發(fā)酵前相比，本發(fā)明栘濃發(fā)酵茶的化學(xué)成分發(fā)生了明顯的改變。
[0131] 3、樣品中根皮苷、根皮素的含量測定
[0132] 測定發(fā)酵前后樣品的根皮苷、根皮素含量，比較發(fā)酵前后的變化。
[0133] 3.1標準曲線的繪制
[0134] 精密稱取根皮苷標準品0.0040g，根皮素標準品0.0020g，甲醇溶解定容至50mL，配 制成根皮苷質(zhì)量濃度為SOyg/mL，根皮素質(zhì)量濃度為40yg/mL的對照品混合儲備液。分別移 取0.05、0.1、0.2、0.5、1、2、511^儲備液至101^容量瓶中，甲醇定容，配制成不同濃度的根皮 苷、根皮素混合標準溶液，按2.3.3.1色譜條件進行分析，分別以濃度X(yg/mL)為橫坐標， 色譜峰面積Y(mAUXmin)為縱坐標進行線性擬合。
[0135] 所得根皮苷回歸方程為Y= 19.77558X+4.22904，r2 = 0.99998，表明根皮苷濃度在 0.4-80yg/mL時線性關(guān)系良好；
[0136] 根皮素回歸方程為Y = 34.78806X+2.96544，r2 = 0.99999,表明根皮素濃度在 0.24-40yg/mL時線性關(guān)系良好。
[0137] 3.2樣品中根皮苷、根皮素的含量測定
[0138] 取制備的HPLC含量測定供試品，按下述色譜條件進樣，計算發(fā)酵前后栘棟茶中根 皮苷、根皮素的含量。
[0139] 色譜條件：色譜柱:Agilent ZORBAX Extend-C18柱（4.6X250mm，5ym)，柱溫：25 °C，流動相：乙腈(A):水（C)，線性梯度洗脫：0-15min(15%-50%A:85%-50%C)，15-30min (50 % -100 % A: 50 % -0 % C)，體積流量：lmL/min，進樣量：10yL，檢測波長:285nm。
[0140] 3.3根皮苷、根皮素的HPLC圖譜結(jié)果
[0141] 栘濃茶中根皮苷、根皮素的HPLC圖譜，結(jié)果見圖6。
[0142] 由圖6可知，與發(fā)酵前相比，本發(fā)明的栘棟發(fā)酵茶中根皮苷含量下降了27% (從 251 · 87mg/g下降到198 · 25mg/g)，而根皮素含量增加了6 · 87倍（從2 · 4943mg/g升高到 19.619mg/g)，根皮素大大增加。說明栘棟發(fā)酵茶的主要功效成分發(fā)生了顯著變化，根皮苷 被大量轉(zhuǎn)化為根皮素，僅發(fā)酵7天根皮素就升高到原來的7.8倍。
[0143]根皮素是根皮苷的苷元，具有極強的抗氧化活性，活性高于根皮苷，而且根皮素具 有一定的癌癥輔助治療作用，還可以作為天然的皮膚美白劑，并且具有保護心血管、抑制葡 萄糖轉(zhuǎn)運、調(diào)節(jié)自身免疫的作用。本發(fā)明的栘核發(fā)酵茶根皮素含量高，營養(yǎng)保健價值高。 [0144]綜上，本發(fā)明的栘椒發(fā)酵茶感官品質(zhì)好、口感好，而且必需氨基酸含量高、根皮素 含量高，營養(yǎng)成分豐富，具有良好的應(yīng)用前景。
【主權(quán)項】
1. 一種移極發(fā)酵茶的制備方法，其特征在于:它包括如下步驟： 曰、制備移根茶粗品：取移恢鮮葉，攤放化r-4hr，然后進行殺青、首次揉搶，再攤放 O.化r-化r、再二次揉搶、干燥，控制水分在8 %-11 %，得移轅茶粗品； 其中，殺青的溫度為200°C-300°C，殺青的時間為Smin-IOmin，出鍋后攤放30min- 60min，然后進行揉搶； 其中，揉搶采用揉搶機，首次揉搶方式為輕壓l〇min-25min;二次揉搶方式為輕壓5min- lOmin; b、取步驟a的移談茶粗品，先用蒸汽處理lOmin，然后控制茶堆的含水量為12%-20%， 用45°C-55°C的溫度進行渥堆處理化r-化。再次蒸汽處理20min; C、冠突散囊菌發(fā)酵：按水料比為20%-40%(mL/g)的比例加入無菌水，接種冠突散囊 菌;然后在25°C-35°C條件下培養(yǎng)發(fā)酵7d-10d; d、將步驟C的發(fā)酵物滅菌，烘干，即得移檢發(fā)酵茶。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于:步驟b中，首次蒸汽處理為飽和蒸汽處 理。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于:步驟C中，按35 %水料比加入無菌水。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于:步驟C中，接種冠突散囊菌后，冠突散 囊菌的數(shù)量為IO1~IO7個/mL。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于：步驟C中，28°C條件下發(fā)酵;和/或，發(fā) 酵過程中翻動2-3次。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于:步驟d中，滅菌的方法為:60-80°C保持0.化r-化r，期間翻動2-3次。7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于:步驟d中，烘干的溫度為40°C-6(rC，控 制水分在8-11 %。8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于:烘干的溫度為5(TC。9. 權(quán)利要求1-8任意一項方法制備的移糧發(fā)酵茶。
【文檔編號】A23F3/34GK105901212SQ201610234969
【公開日】2016年8月31日
【申請日】2016年4月15日
【發(fā)明人】劉剛, 張曉喻, 王戰(zhàn)國, 劉興艷
【申請人】四川師范大學(xué)