一種功能性復合蛋白組合物及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種功能性復合蛋白組合物及其制備方法，以大豆分離蛋白、濃縮乳清蛋白和磷脂為主要原料，將甜葉菊低溫加工成甜葉菊提取物，可最大限度地保留甜葉菊的有效成分和生物活性成分，提取率高，風味純正、色澤天然、無甘草味，與主料科學復配，并添加抗凍多肽、膳食纖維粉、蜂蛹蟲酶解物、小麥芽粉，制備一種口感適宜、溶解性好、營養(yǎng)全面、生物活性強、適宜人群廣泛的功能性復合蛋白組合物。制備方法采用非熱加工技術(shù)，工作效率高，能源消耗少，對環(huán)境友好，無污染，減少了食品添加劑和化學助劑的引入，有效提高了食品安全性，提高了產(chǎn)品質(zhì)量和降低了生產(chǎn)成本，實現(xiàn)了低碳生產(chǎn)目標，可規(guī)?；?、產(chǎn)業(yè)化發(fā)展。
【專利說明】
-種功能性復合蛋白組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設及復合蛋白，特別設及一種功能性復合蛋白組合物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 蛋白質(zhì)是人體的主要構(gòu)成物質(zhì)，又是人體生命活動的主要物質(zhì)。蛋白質(zhì)加上核酸， 是生命存在的主要形式。蛋白質(zhì)在古拉下語的原意是"首要"的意思，它雖是營養(yǎng)物質(zhì)的一 份子，但卻是處于各種營養(yǎng)物質(zhì)一個中屯、的地位，其作用主要是：1、用于制造肌肉、血液、皮 膚和各種身體器官。2、幫助身體制造新組織W替代壞掉的組織。3、向細胞輸送各種營養(yǎng)。4、 調(diào)節(jié)體內(nèi)水分的平衡。5、為免疫系統(tǒng)制造對抗細菌和感染的抗體。6、幫助傷口血液凝結(jié)及 愈合。7、在體內(nèi)制造酶，有助將食物轉(zhuǎn)化為能量。人體缺乏蛋白質(zhì)是可W致命的，人體中的 蛋白質(zhì)約占體重的16 %，一個60kg體重的人，體內(nèi)有10~11 kg的蛋白質(zhì)，人體如果丟失體內(nèi) 蛋白質(zhì)的20% W上，生命活動就會被迫停止運行。常見蛋白質(zhì)的缺乏癥狀為代謝率下降，生 命變得脆弱而易病，遠期效果在器官上的損害是肯定的，蛋白質(zhì)的缺乏，往往又與能量的缺 乏共同存在，常見的有兒童生長發(fā)育遲緩，體重下降。中老年人易產(chǎn)生淡漠、易激怒，情緒不 穩(wěn)定，貧血W及干瘦或水腫，并因為免疫力低下易感染而繼發(fā)疾病。
[0003] 乳清蛋白能對抗各種免疫挑戰(zhàn)，能促進體液免疫和細胞免疫。此外亦發(fā)現(xiàn)乳清蛋 白可對抗微生物感染，如沙口氏菌、鏈球菌性肺炎等。大豆蛋白質(zhì)約占大豆含量的40%，是 谷類食物的4~5倍。大豆蛋白質(zhì)的氨基酸組成與牛奶蛋白質(zhì)相近，除蛋氨酸略低外，其余必 需氨基酸含量均較豐富，是植物性完全蛋白質(zhì)，在營養(yǎng)價值上可與動物蛋白等同。大豆蛋白 對健康所起的積極作用主要有:大豆蛋白有助于降低血漿膽固醇水平，能阻止尿巧損失，有 助促進骨質(zhì)健康。另外大豆蛋白的攝入有促進腎功能的效果，大豆蛋白可W作為腎病患者 相對安全的蛋白質(zhì)來源。
[0004] 憐脂是含有憐脂根的類脂化合物，是生命基礎物質(zhì)。而細胞膜就由4 0%左右蛋白 質(zhì)和50%左右的脂質(zhì)（憐脂為主）構(gòu)成。它是由卵憐脂，肌醇憐脂，腦憐脂等組成。運些憐脂 分別對人體的各部位和各器官起著相應的功能。人體所有細胞中都含有憐脂，它是維持生 命活動的基礎物質(zhì)。憐脂對活化細胞，維持新陳代謝，基礎代謝及荷爾蒙的均衡分泌，增強 人體的免疫力和再生力，都能發(fā)揮重大的作用。概括來講憐脂的基本功用是:增強腦力，安 定神經(jīng)，平衡內(nèi)分泌，提高免疫力和再生力，解毒利尿，清潔血液，健美肌膚，保持年輕，延緩 衰老。
[0005] 目前，W大豆分離蛋白、乳清蛋白、憐脂為原料制備復合蛋白及蛋白組合物的較 多，有的主要W補充人體營養(yǎng)為目的：中國專利CN 104770743A公開了 一種復合蛋白粉及其 制備方法。復合蛋白粉含有大豆蛋白粉、乳清蛋白粉、青裸蛋白粉、馬鈴馨蛋白粉、甘馨蛋白 粉、膠原蛋白粉、魏豆蛋白粉、核桃粉、蛋清粉、蛋黃粉、大豆憐脂、油菜花粉、甜味劑、香精。 其制備方法是將原料烘烤、冷卻、混合、包裝，即可得成品。本發(fā)明所選取的原料配比符合現(xiàn) 代養(yǎng)生原理，配方科學合理，具有良好的補充人體所需營養(yǎng)的作用，且口感良好、風味獨特。 中國專利CN 105146043 A公開了一種瑪咖蛋白粉，由主料和輔料混合制備而成，所述主料 為瑪咖粉和大豆蛋白粉;所述輔料，包括卵憐脂、乳清蛋白粉、結(jié)晶果糖、香蘭素、植脂末、低 聚果糖、微量元素、復合維生素、二氧化娃和魔芋膠;其配料質(zhì)量比為:瑪咖粉2.2-3.8份、大 豆蛋白粉55-80份、卵憐脂1.5-2.5份、乳清蛋白粉4.9-8.5份、結(jié)晶果糖7.3-9.2份、香蘭素 0.0015-0.0035份、植脂末4.8-8.2份、低聚果糖5.1-6.7份、微量元素0.9-1.5份、復合維生 素0.08-0.22份、二氧化娃0.07-0.2份和魔芋膠0.08-0.23份，將配料粉碎后，過100-150目 篩，混合均勻，即得。本發(fā)明有效補充缺少的營養(yǎng)物質(zhì)，全面調(diào)節(jié)營養(yǎng)平衡，提高免疫力，強 健身體。中國專利CN 103005464 B公開了一種乳清蛋白組合物、方法及用途。本發(fā)明提供了 多種乳清蛋白組合物，其作為營養(yǎng)配方適合用作即用液體組合物，其膽存穩(wěn)定并且含有高 水平的完整乳清蛋白含量。
[0006] 有的W預防和治療疾病為目的：中國專利CN 103584089 A公開了一種多營養(yǎng)復合 蛋白質(zhì)粉的加工方法，是由下述重量份的原料制成:類人膠原蛋白15、牛初乳15、大豆蛋白 350、乳清蛋白550、靈芝5、金銀花5、玄參5、麥冬3、銀杏葉2、斑竹根3、丹參3、金養(yǎng)麥2、黃開 口 3、洛神花汁30;本發(fā)明提供了一種多營養(yǎng)復合蛋白質(zhì)粉的加工方法，其加工步驟簡單，原 料來源廣，安全健康;采用本發(fā)明方法生產(chǎn)的蛋白質(zhì)粉，營養(yǎng)豐富，食用方便，吸收、利用率 高，能減少腸胃負擔，并且在補充蛋白質(zhì)的同時可W避免過量脂肪和膽固醇的攝入，能有效 地減少屯、血管疾病的發(fā)病風險。中國專利CN 104839736 A公開了一種可W預防老年癡呆癥 的蛋白粉，其由下列重量的原料組成：大豆蛋白粉80-90,乳清蛋白粉20-30、野菊花凍干粉 10-12、核桃仁10-12、巧等12-15、黑芝麻6-8、華莽12-15、蓮子10-12、大要12-15、山藥10- 12、金針茹10-12、猴頭茹15-20、銀耳12-15,遠志10-12,昆布10-12,何首烏10-12、絞股藍 12-16、人參葉2-15,銀杏葉12-15、石富蒲10-12,營養(yǎng)添加劑3-5。本發(fā)明的蛋白粉，營養(yǎng)豐 富，長期食用可W起到安神健腦、補肝益腎，改善腦細胞的活力，得到健腦，預防發(fā)生老年性 癡呆癥的功效。中國專利公開了CN 103768585 B-種鹿膠原蛋白營養(yǎng)組合物，由鹿膠原蛋 白、氨基葡萄糖、透明質(zhì)酸、大豆異黃酬和茶多酪組成。所述組合物中含有70%~95% (重量 百分比）的鹿膠原蛋白、1%~10% (重量百分比）的氨基葡萄糖、1%~10% (重量百分比）的 透明質(zhì)酸、0.1%~5% (重量百分比）的大豆異黃酬和0.1%~6% (重量百分比）的茶多酪。 所述鹿膠原蛋白由鹿筋膠原蛋白、鹿骨膠原蛋白和鹿皮膠原蛋白組成，鹿筋膠原蛋白、鹿骨 膠原蛋白和鹿皮膠原蛋白的重量比為1:1:1。所述鹿膠原蛋白的分子量分布在1500道爾頓 W下。本發(fā)明W鹿膠原蛋白為主要成分，輔W氨基葡萄糖、透明質(zhì)酸、大豆異黃酬及抗氧化 作用的茶多酪形成了具有增強骨密度、能夠顯著改善骨質(zhì)疏松的營養(yǎng)組合物。
[0007] 還有主要解決溶解性問題的：中國專利CN 103271166 A公開了一種大豆乳清復合 粉及其配制方法。該大豆乳清復合粉是W非轉(zhuǎn)基因大豆蛋白粉和乳清蛋白為主要原料，添 加大豆卵憐脂、大豆異黃酬、大豆低聚糖及其它微量元素，營養(yǎng)更豐富，更全面，更均衡。含 多種天然活性成分，為高蛋白營養(yǎng)食品。具有大豆蛋白特有的香味，口感爽滑，口味純正，濃 郁，即沖即溶，補充營養(yǎng)快速全面。在溫開水中稍微攬拌能夠快速溶解，具有固有的香味和 氣味，并且長時間不分層。中國專利CN 102630947 B公開了一種低分子量營養(yǎng)蛋白質(zhì)粉的 生產(chǎn)方法，該方法包括W下步驟大豆蛋白粉與乳清蛋白粉為原料，加入70~9(TC水攬拌 成均勻的混懸液，在不低于60°C條件下趁熱通過濾膜過濾:先選用5000道爾頓的濾膜，濾液 再通過500道爾頓的濾膜;將得到的濾液噴霧干燥，加入噴霧干燥粉體重0.5~1.5 %的卵憐 脂混合均勻。本發(fā)明工藝制備得到的蛋白質(zhì)粉分子量小、氨基酸組成科學合理，易吸收;外 形潔白，美觀，無豆腥、奶腥味；易溶于水，在冷水中也可較快溶解，易于分散，特別適用于蛋 白質(zhì)缺乏人群，體弱多病W及腫瘤患者。
[0008] 上述公開的專利無論是單一蛋白粉還是復合蛋白粉、無論是動物蛋白粉還是植物 蛋白粉主要集中解決了蛋白質(zhì)粉的營養(yǎng)性、功能性(溶解性、穩(wěn)定性、泡沫性、乳化性、凝膠 性等)和預防疾病等方面，并且均或多或少存在W下缺陷：1)含有大量的過量飽和脂肪、膽 固醇、高熱量;2)在加工工藝中添加了大量的食品添加劑如色素、甜味劑、防腐劑等;3)溶解 性、穩(wěn)定性差，沖調(diào)不均勻，易出現(xiàn)結(jié)團、分層現(xiàn)象;4)氨基酸組成不夠全面，各營養(yǎng)成分組 成不夠均衡;5)消費群體設及中老年人和婦女較少，有局限性;對蛋白粉的生物活性研究的 較少，蛋白質(zhì)粉的生物活性、效價是其營養(yǎng)性、功能性等多方面性質(zhì)的綜合體現(xiàn)，在加工和 膽存過程受外界環(huán)境(溫度、濕度、光照、氧氣）的影響很大，尤其在活性微生物菌劑、酶制劑 等技術(shù)領(lǐng)域顯現(xiàn)更為突出。
[0009] 長期W來，在蛋白質(zhì)粉生物活性方面主要集中研究了高溫對蛋白質(zhì)生物活性的影 響，卻忽視了低溫冷凍的影響?？箖龅鞍祝ˋntifreeze Protein，AFP)，又稱熱滯蛋白 (Thermal Hysteresis Protein,THP)，冰結(jié)合蛋白（Ice Binding Proteins)或冰晶組織蛋 白（Ice Structuring Proteins)。抗凍蛋白能通過與特定的冰晶表面結(jié)合，非依數(shù)性地降 低溶液的冰點或者抑制冰晶生長，具有低溫保護功能?？箖龅鞍卓捎糜谌梭w或動物器官的 超低溫保存，改善其冷凍質(zhì)量;可提高特定微生物的抗凍能力，減小食品凍藏時冰晶的形成 和重結(jié)晶對食品結(jié)構(gòu)的破壞，改善食品品質(zhì)。抗凍蛋白可作為一種高級防凍劑應用，在醫(yī) 學、化妝品、生物和食品領(lǐng)域均有廣泛的應用價值。
[0010] 在蛋白質(zhì)粉的加工、運輸和儲藏過程科學復配抗凍蛋白（或相關(guān)物質(zhì)），不僅可提 高蛋白質(zhì)粉的生物活性、營養(yǎng)性、功能性，而且在同樣保質(zhì)期內(nèi)可適當提高蛋白粉的水分含 量，降低生產(chǎn)成本。現(xiàn)有技術(shù)中解決復合蛋白粉或組合物的抗凍性的相關(guān)專利文獻或技術(shù) 文獻較少，幾乎沒有。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0011] 本發(fā)明所解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有復合蛋白組合物的缺陷，W大豆分離蛋白、 濃縮乳清蛋白和憐脂為主要原料，將甜葉菊低溫加工成甜葉菊提取物，與其科學復配，并添 加抗凍多膚、膳食纖維粉、蜂蛹蟲酶解物、小麥芽粉，制備一種口感適宜、溶解性好、營養(yǎng)全 面、生物活性強、適宜人群廣泛的功能性復合蛋白組合物。
[0012]為了達至化述目的，本發(fā)明采用W下技術(shù)方案：
[0013] -種功能性復合蛋白組合物，主要由W下重量份數(shù)的主料和輔料制備：
[0014] 所述主料由W下重量份數(shù)的原料組成：大豆分離蛋白50-90份，濃縮乳清蛋白so- so 份 ，憐脂 10-30 份；
[0015] 所述輔料為甜葉菊1-3份；
[0016] 進一步地，所述輔料還包括W下重量份數(shù)的原料:膳食纖維粉20-40份，小麥芽粉 20-40份，抗凍多膚10-20份，蜂蛹蟲酶解物5-15份；
[0017] 優(yōu)選地，所述功能性復合蛋白組合物，主要由W下重量份數(shù)的主料和輔料制備：
[0018] 所述主料由W下重量份數(shù)的原料組成：大豆分離蛋白60-80份，濃縮乳清蛋白35- 45份，憐脂15-25份；
[0019] 所述輔料為甜葉菊1.5-2.5份；
[0020] 進一步地，所述輔料還包括W下重量份數(shù)的原料:膳食纖維粉25-35份，小麥芽粉 25-35份，抗凍多膚13-17份，蜂蛹蟲酶解物8-12份；
[0021] 更優(yōu)選地，所述功能性復合蛋白組合物，主要由W下重量份數(shù)的主料和輔料制備：
[0022] 所述主料由W下重量份數(shù)的原料組成:大豆分離蛋白70份，濃縮乳清蛋白40份，憐 脂20份，
[0023] 所述輔料為甜葉菊2份；
[0024] 進一步地，所述輔料還包括W下重量份數(shù)的原料:膳食纖維粉30份，小麥芽粉30 份，抗凍多膚15份，蜂蛹蟲酶解物10份。
[0025] 進一步地，所述膳食纖維粉是將膳食纖維經(jīng)物理、化學或生物的方法處理而得到 的可溶性纖維素含量高、生物活性強、對人體益生菌群有重要的、積極作用的纖維素，與普 通膳食纖維相比，其功能性、生物活性更強大；
[0026] 優(yōu)選地，所述膳食纖維粉是由菊粉、蘋果纖維、小麥纖維、燕麥纖維中的一種或多 種經(jīng)超微粉碎、擠壓膨化和生物酶酶解而得到的；
[0027] 更優(yōu)選地，所述膳食纖維粉的制備方法，包括W下步驟:將菊粉、蘋果纖維、小麥纖 維、燕麥纖維按質(zhì)量比4-6:2-4:1-3:1-2均勻混合，超微粉碎至粒徑3-6μπι，調(diào)整粉碎物水分 含量為17-19%，于螺桿轉(zhuǎn)速160-18化/min、溫度185-200°C條件擠壓膨化，加入膨化物質(zhì)量 2-4倍的水，室溫200-400W、35-40KHz條件超聲提取10-15min，然后在電場強度20-40kV/cm， 脈沖時間400-60化S，脈沖頻率200-400HZ條件下進行高壓脈沖電場處理10-15min;用乳酸 調(diào)節(jié)抑值為4.5-6.5，加入混合物質(zhì)量0.1-0.3 %的生物酶，于45-55 °C酶解20-48min;酶解 液減壓濃縮、冷凍干燥即得膳食纖維粉；
[00%]所述生物酶為纖維素酶、木聚糖酶、漆酶、果膠酶、單寧酶按質(zhì)量比2-4:1-3:1-3: 0.5-1.5:0.2-1 均勻混合。
[0029] 進一步地，所述小麥芽粉是W小麥為主要原料，依次經(jīng)超聲清洗、微波瞬時處理、 超聲輔助生物酶解浸泡、發(fā)芽、干燥、低溫粉碎等工藝而制備的；
[0030] 優(yōu)選地，所述小麥芽粉的制備方法，包括如下步驟:將小麥放在裝有0.04-0.06 % 碳酸氨鋼溶液的超聲波清洗機中于功率200-400W、頻率20-30Ifflz室溫超聲清洗3-5min，取 出、漸干，于頻率2450MHz、功率3000W、溫度38-42 °C、料層厚度2-4cm微波干燥6-8S，然后置 溫度為33-36°C、pH值為6-8的浸泡液中浸泡4-化，浸泡液含有質(zhì)量百分比濃度為0.3-0.5% 的復合酶，每隔15-20min通風一次，通風壓力0.13-0.15MPa，同時于電場強度10-lf5kV/cm， 脈沖時間100-30化S，脈沖頻率60-80HZ條件進行高壓脈沖電場處理，直至小麥水分含量為 40-45% ;浸泡后的小麥漸干，在發(fā)芽室內(nèi)進行暗發(fā)芽，暗發(fā)芽溫度保持20-24°C，暗發(fā)芽時 間為20-2地，經(jīng)發(fā)芽后的小麥干燥至水分含量為5-8%，低溫粉碎，過80-100目篩即得小麥 芽粉；
[0031] 所述復合酶為纖維素酶、β-葡聚糖酶、木聚糖酶按質(zhì)量比2-4:1-3:1-3均勻混合。
[0032] 進一步地，所述抗凍多膚是W含有豐富抗凍基質(zhì)的天然植物種子為原料制備的植 物提取物與絲膠膚科學復配而成，不僅可顯著提高功能性復合蛋白組合物抗凍性，進而大 大提高其生物活性、營養(yǎng)性、功能性，而且在同樣保質(zhì)期內(nèi)可適當提高功能性復合蛋白組合 物的水分含量，降低生產(chǎn)成本；同時又增加了功能性復合蛋白組合物的溶解性和穩(wěn)定性，產(chǎn) 生了意想不到的有益效果，特別適合作為功能性復合蛋白組合物的抗凍保護劑；
[0033] 優(yōu)選地，所述抗凍多膚的質(zhì)量組成為:植物提取物:絲膠膚=12-29:3-9;
[0034] 優(yōu)選地，所述植物提取物是W冬黑麥、沙地柏、沙冬青的種子中的一種或幾種為原 料，經(jīng)高壓靜電、高壓脈沖電場輔助水楊酸浸泡、冷藏冷凍處理后再經(jīng)混合酶分段酶解而制 得；
[0035] 更優(yōu)選地，所述植物提取物的制備方法，包括如下步驟:將冬黑麥、沙地柏、沙冬青 的種子按質(zhì)量比9-17:2-4:1-2均勻混合，裝盤，首先于電場強度5-化V/cm高壓靜電處理5- 7min;接著在濃度為10-30mg/L的水楊酸溶液中室溫浸泡2-地，同時在電場強度10-20kV/ cm,脈沖時間150-25化S，脈沖頻率150-250HZ條件下進行高壓脈沖電場處理;漂洗、漸干，于 3-5°C 靜置 18-24h，然后依次在 1-3°C 冷藏 2-4d，-3-5°C 冷凍 l-3d、-15--18°C 冷凍 10-1 化， 立即放在室外于光照強度0.5-5萬Lx自然光照5-化，使混合料半解凍后立即進行粉碎，粉碎 物粒徑0.5-1.5mm，接著加入粉碎物質(zhì)量4-6倍的水，用乳酸調(diào)節(jié)抑值為3.5-5.5;最后加入 混合料液質(zhì)量1-2%的混合酶，首先于35-50°C酶解10-30min，然后于50-60°C酶解20- 40min;酶解液過濾、濾液減壓濃縮至固形物含量為15-25 %即得植物提取物；
[0036] 所述混合酶為纖維素酶、蛋白酶、淀粉酶、果膠酶、脂肪酶按質(zhì)量比8-10:5-7:2-4: 1-3:1-2均勻混合。
[0037] 進一步地，所述蜂蛹蟲酶解物W2-3日齡的蜂王幼蟲和11-12日齡的雄蜂蛹為原 料，經(jīng)抗凍保護、冷凍破碎、真空脫氣脫星、復配酶生物酶解、生物破乳和離屯、分離而得到 的；
[0038] 優(yōu)選地，所述蜂蛹蟲酶解物的制備方法，包括如下步驟:將新鮮蜂王幼蟲與雄蜂蛹 按質(zhì)量比2-5:1-3均勻混合，加入混合物質(zhì)量1-2倍的質(zhì)量百分比為4-7%的絲膠膚溶液和 0.1-0.3倍的離子溶液，攬拌均勻，于-18-22°(：冷凍12-18111111，破碎，破碎率為98-100%，破 碎物粒徑200-300μπι，用乳酸調(diào)節(jié)破碎物抑值為5-7,升溫至40-50°C，向其中加入破碎物質(zhì) 量0.3-0.5 %的復配酶，混合均勻，于真空度-0.07-0.09M化脫氣脫腥10-15min，繼續(xù)酶解 10-15min得到酶解液;將酶解液置真空離屯、機中5000-7000r/min真空離屯、8-lOmin，自上而 下分離得到游離脂肪、乳狀液、水解液和殘渣，將得到的乳狀液控制溫度為45-55Γ，添加乳 狀液質(zhì)量0.2-0.4%的生物破乳劑破乳20-40min，破乳后于4000-6000r/min真空離屯、2次， 間隔時間1 -化，每次離屯、10-15min，合并Ξ次離屯、得到的水解液，取其質(zhì)量0.5-0.7 %的蛋 清，放入攬拌機中于轉(zhuǎn)速800-1000r/min攬拌10-12min，直至蛋清全部成為泡沫得到蛋清泡 沫，將蛋清泡沫加入合并得到的水解液中，常壓煮沸2-4min，降至室溫，于5000-700化/min 真空離屯、8-lOmin，收集水解液，依次經(jīng)娃藻±過濾、超濾、凍干即得蜂蛹蟲酶解物；
[0039] 進一步地，所述離子溶液為含有鋼離子15-20mg/L、鋒離子10-15mg/L、鐘離子8- 12mg/L、巧離子6-lOmg/L和儀離子5-8mg/L的水溶液；
[0040] 進一步地，所述復配酶質(zhì)量組成為:風味蛋白酶:酸性蛋白酶:脂肪酶=1-3:1-2: 0.1-0.3;
[0041 ] 進一步地，所述真空離屯、條件為溫度5-8°C、真空度-0.02--0.04MPa;
[0042] 進一步地，所述生物破乳劑為糖脂類、脂膚類、胞壁結(jié)合類生物破乳劑中的一種或 幾種組合；
[0043] 優(yōu)選地，所述生物破乳劑的質(zhì)量組成為:糖脂類:脂膚類:胞壁結(jié)合類=3-5:1-3: 1-2；
[0044] 優(yōu)選地，所述糖脂類生物破乳劑為鼠李糖脂、烷基糖巧中的一種或兩種組合；
[0045] 更優(yōu)選地，所述糖脂類生物破乳劑的質(zhì)量組成為：鼠李糖脂:烷基糖巧= 6-8:3-5。
[0046] 本發(fā)明功能性復合蛋白組合物可W通過如下方法制備：
[0047] 1)甜葉菊提取物的制備:按照配方，準確稱取各組份原料，首先將甜葉菊放入裝有 0.1-0.3 %碳酸氨鋼溶液的超聲波清洗機中于200-400W、20-40KHZ清洗3-5min，漸干，置微 波干燥中于功率3-5kW、料層厚度2-4cm、80-100°C、干燥2-4min，然后浸泡在質(zhì)量百分比為 4-7%的絲膠膚溶液中10-15min,取出，于-18-22°C冷凍15-25min后立即進行粉碎，冷凍料 層厚度3-5cm，粉碎物粒徑0.3-0.5mm，接著加入粉碎物質(zhì)量8-12倍的水，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為 3.5- 5.5，于室溫下在電場強度25-3化V/cm，脈沖時間300-500ys，脈沖頻率200-300HZ條件 下進行高壓脈沖電場處理l〇-15min;然后于室溫在功率150-300W條件下進行微波福照提取 8-12min，同時在功率200-300W，頻率30-40Ifflz條件下進行超聲波輔助提取;加入提取液質(zhì) 量0.2-0.6%的降解酶，于40-50°C酶解30-50min，取酶解液質(zhì)量2-4%的蛋清，放入攬拌機 中于轉(zhuǎn)速800-1000r/min攬拌10-12min，直至蛋清全部成為泡沫得到蛋清泡沫，將蛋清泡沫 加入酶解液中，常壓煮沸l(wèi)-3min，迅速降至室溫，80-100目篩網(wǎng)過濾，濾液減壓濃縮至固形 物含量至8-12 %得甜葉菊提取物；
[004引所述降解酶為纖維素酶、蛋白酶、果膠酶按質(zhì)量比1-3:1-2:1-2均勻混合；
[0049] 2)粘合劑制備:將大豆分離蛋白質(zhì)量的12-16%、濃縮乳清蛋白質(zhì)量的5-9%和抗 凍多膚、膳食纖維粉質(zhì)量的5-15%、小麥芽粉質(zhì)量的5-15%依次加入甜葉菊提取物中，均勻 混合，在功率300-500W，頻率35-45KHZ條件下進行超聲溶解10-15min，制備成質(zhì)量百分比濃 度為14-18 %的水溶液，作為粘合劑；
[0050] 3)制粒、整粒:將剩余大豆分離蛋白、剩余濃縮乳清蛋白、憐脂和剩余膳食纖維粉、 剩余小麥芽粉、蜂蛹蟲酶解物均勻混合，得混合粉，向其中加入所述粘合劑，制成軟材，用 10-20目篩制粒，凍干至水分含量為4-12 %，然后用10-20目篩快速整粒，混合均勻，即得功 能性復合蛋白組合物。
[0051] 本發(fā)明組合物的劑型為口服制劑，可W為粉劑、顆粒劑或片劑，優(yōu)選為粉劑。所述 粉劑的生物利用度高，便于吸收和利用，保證產(chǎn)品的使用效果。
[0052] 本發(fā)明還提供上述功能性復合蛋白組合物的制備方法，包括如下步驟：
[0053] 1)甜葉菊提取物的制備:按照配方，準確稱取各組份原料，首先將甜葉菊放入裝有 0.1-0.3 %碳酸氨鋼溶液的超聲波清洗機中于200-400W、20-40KHZ清洗3-5min，漸干，置微 波干燥中于功率3-5kW、料層厚度2-4cm、80-100°C、干燥2-4min，然后浸泡在質(zhì)量百分比為 4-7%的絲膠膚溶液中10-15min,取出，于-18-22°C冷凍15-25min后立即進行粉碎，冷凍料 層厚度3-5cm，粉碎物粒徑0.3-0.5mm，接著加入粉碎物質(zhì)量8-12倍的水，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為 3.5- 5.5，于室溫下在電場強度25-3化V/cm，脈沖時間300-500ys，脈沖頻率200-300HZ條件 下進行高壓脈沖電場處理l〇-15min;然后于室溫在功率150-300W條件下進行微波福照提取 8-12min，同時在功率200-300W，頻率30-40Ifflz條件下進行超聲波輔助提取;加入提取液質(zhì) 量0.2-0.6%的降解酶，于40-50°C酶解30-50min，取酶解液質(zhì)量2-4%的蛋清，放入攬拌機 中于轉(zhuǎn)速800-1000r/min攬拌10-12min，直至蛋清全部成為泡沫得到蛋清泡沫，將蛋清泡沫 加入酶解液中，常壓煮沸l(wèi)-3min，迅速降至室溫，80-100目篩網(wǎng)過濾，濾液減壓濃縮至固形 物含量至8-12 %得甜葉菊提取物；
[0054] 所述降解酶為纖維素酶、蛋白酶、果膠酶按質(zhì)量比1-3:1-2:1-2均勻混合；
[0055] 2)粘合劑制備:將大豆分離蛋白質(zhì)量的12-16%、濃縮乳清蛋白質(zhì)量的5-9%和抗 凍多膚、膳食纖維粉質(zhì)量的5-15%、小麥芽粉質(zhì)量的5-15%依次加入甜葉菊提取物中，均勻 混合，在功率300-500W，頻率35-45KHZ條件下進行超聲溶解10-15min，制備成質(zhì)量百分比濃 度為14-18 %的水溶液，作為粘合劑；
[0056] 3)制粒、整粒:將剩余大豆分離蛋白、剩余濃縮乳清蛋白、憐脂和剩余膳食纖維粉、 剩余小麥芽粉、蜂蛹蟲酶解物均勻混合，得混合粉，向其中加入所述粘合劑，制成軟材，用 10-20目篩制粒，凍干至水分含量為4-12 %，然后用10-20目篩快速整粒，混合均勻，制成粉 劑、片劑或顆粒劑。
[0化7] 有益效果：
[0058] 本發(fā)明W大豆分離蛋白、濃縮乳清蛋白和憐脂為原料，首先將甜葉菊采用超聲清 洗進行殺蟲滅卵、殺滅微生物、去除農(nóng)藥殘留和重金屬離子等，大大提高了成品的食品安全 性;采用微波干燥在使得甜葉菊短時、低溫膨化干燥的同時主要是滅酶，防止提取物褐變； 在含有絲膠膚的水溶液中浸泡復水，可最大限度地減少經(jīng)冷凍而造成的甜葉菊活性物質(zhì)及 冷敏性成分的損失，提高了甜葉菊生物活性成分的提取率，同時，為后續(xù)凍干、制粒工藝提 供了良好的冷凍保護劑，提高了抗凍效果，防止蛋白質(zhì)冷凍變性，提高其生物活性和效價； 全程采用低溫提取工藝，將超聲清洗、微波滅酶和膨化、高壓脈沖電場提取、超聲輔助微波 提取、生物酶解有機結(jié)合，得到的提取物最大限度地保留了甜葉菊的天然色澤、風味和口 感，同時使得提取物含有的生物活性物質(zhì)和營養(yǎng)保健物質(zhì)含量最大化，原料提取率和利用 率最高，降低了提取成本;采用蛋清制備的蛋清泡沫對酶解液短時凝絮，進一步去除了甜葉 菊巧的甘草味，提高了成品的溶解性和穩(wěn)定性;將部分膳食纖維粉、小麥芽粉加入提取物中 和抗凍劑均勻混合，制成粘合劑，包埋率高、粘合性好可大大延長成品的保質(zhì)期，同時還可 提高混料的固形物含量，降低水分含量，減輕了后續(xù)濕顆粒凍結(jié)過程的負擔，縮短了凍干時 間，提高了凍干效率，經(jīng)超聲溶解，進一步增強了混料的均一性、穩(wěn)定性和溶解性，進而提高 了成品的均一性、穩(wěn)定性和溶解性;濕顆粒干燥過程采用真空冷凍干燥代替現(xiàn)有的加熱方 式干燥，顯著提高了功能性蛋白組合物的蛋白質(zhì)的生物活性和效價，防止加熱造成的蛋白 質(zhì)變性，特別是濕顆粒包埋層含有采用天然植物原料制備的具有顯著抗凍效果的抗凍多 膚，進一步大大降低了凍干工藝造成的冷凍損失，有效提高了成品的生物活性和營養(yǎng)價值， 并與功能性膳食纖維粉、小麥芽粉、甜葉菊提取物科學復配，顯著增強了成品的營養(yǎng)均衡性 W及功能性、溶解性;采用本發(fā)明制備的功能性膳食纖維粉代替現(xiàn)有的抗結(jié)劑，顯著提高了 成品的崩解速度，提高了成品的溶解性和溶解后的感官質(zhì)量，同時大大延長了成品的保質(zhì) 期;最終制得一種口感適宜、溶解性好、營養(yǎng)全面、生物活性強、適宜人群廣泛的功能性復合 蛋白組合物。具體試驗效果見實施例7-10，具體技術(shù)原理如下：
[0059] 1.本發(fā)明制備的抗凍多膚是W含有豐富抗凍基質(zhì)的天然植物種子為原料制備的 植物提取物與絲膠膚科學學復配而成，不含任何化學物質(zhì)和食品添加劑，天然抗凍基質(zhì)全 面、豐富，可溶性抗凍蛋白及抗凍多膚含量高，大大提高了功能性復合蛋白組合物的食品安 全性，不僅可顯著提高功能性復合蛋白組合物抗凍性，進而大大提高其生物活性、營養(yǎng)性、 功能性，而且在同樣保質(zhì)期內(nèi)可適當提高蛋白粉的水分含量，降低生產(chǎn)成本;同時又增加了 功能性復合蛋白組合物的溶解性和穩(wěn)定性，產(chǎn)生了意想不到的有益效果，特別適合作為功 能性復合蛋白組合物的抗凍保護劑。其中的植物提取物將含有豐富抗凍基質(zhì)的天然植物種 子原料科學復配，將高壓靜電處理、高壓脈沖電場輔助水楊酸誘導、低溫分段脅迫處理和自 然光照有機結(jié)合，使得本身含有抗凍基質(zhì)的活性種子在外界環(huán)境的脅迫和誘導下，抗凍基 質(zhì)成分得到了最全面、最豐富的合成和積累，經(jīng)生物酶解后可最大化溶出，同時可使抗凍膚 含量增加，提高了植物提取物的溶解性和穩(wěn)定性，進而消除了因抗凍蛋白造成的成品溶解 性差的問題，與膳食纖維粉、小麥芽粉、蜂蛹蟲酶解物、憐脂、甜葉菊提取物科學復配，效果 更佳。
[0060] 2.本發(fā)明制備的膳食纖維粉將超微粉碎、擠壓膨化、超聲提取、高壓脈沖電場提取 和生物酶解科學結(jié)合，所得膳食纖維粉持水性、膨脹性、增稠性更強，比單一方法制備的改 性膳食纖維提高20-40%，且不受酸、堿、鹽的影響，可溶性纖維素含量高，比單一方法制備 的改性膳食纖維提高10-30%，更容易被乳酸菌利用，提高乳酸菌在人體腸道的生長及繁殖 能力，增加益生菌菌群的種類和數(shù)量，降低人體腸道pH值，改善人體腸道微生態(tài)環(huán)境;吸附 能力強，經(jīng)改性后，纖維素的比表面積增大，網(wǎng)格結(jié)構(gòu)豐富，吸附力增強，馨合、吸附膽固醇 和膽汁酸類的有機分子能力更強、抑制人體對他們的吸收；離子交換能力增強，對金屬元 素，特別是重金屬元素吸附效果更強，有效防止了人體重金屬中毒;調(diào)節(jié)和維持腸道菌群的 定植時間，增強腸道的消化和吸收能力，提高機體免疫力；有效促進胃腸蠕動，減緩并消除 胃脹、腹脹等不良反應;強大的包埋作用可防止環(huán)境(氧氣、溫度、光照、水分活度等）因素對 功能性蛋白組合物品質(zhì)的影響，進一步穩(wěn)定了功能性蛋白組合物的生物活性，延長了產(chǎn)品 的保質(zhì)期。
[0061] 3.本發(fā)明小麥芽粉的制備方法對浸泡過程的小麥進行超聲清洗、微波瞬時處理和 高壓脈沖電場處理有效防止了浸泡液污染雜菌，避免了產(chǎn)生臭味滲透到小麥芽粉產(chǎn)品中， 同時，可有效增強谷物種皮細胞壁和細胞膜的相對透性、提高全谷物種子的吸水率，促進種 子提前萌發(fā)，提高超氧陰離子自由基的產(chǎn)生速率及Ξ憐酸腺巧(ATP)含量，促進發(fā)芽前期小 麥種子多種生物酶的激活和釋放、胚乳溶解及功能性營養(yǎng)成分、生物活性成分、抗氧化成分 的合成，促進了種子的呼吸代謝作用，加快了營養(yǎng)及功能性物質(zhì)、生物活性成分、抗氧化成 分的富集進程，縮短了富集時間，提高了營養(yǎng)及功能性物質(zhì)、生物活性成分、抗氧化成分的 含量，與生物酶解有機結(jié)合，可進一步降解種皮纖維素及半纖維素結(jié)構(gòu)，增加種皮通透性， 激活各種生物活性物質(zhì)（內(nèi)源酶等)活力最強，富集量更大，可溶性纖維素含量隨之增大，為 小麥芽粉中的植物乳桿菌提供了營養(yǎng)因子，效果更佳顯著;將超聲、微波、高壓脈沖電場技 術(shù)和生物酶解有機結(jié)合，縮短了浸泡時間，提高了發(fā)芽率和發(fā)芽均一度;可最大限度保持小 麥芽粉熱敏性物質(zhì)含量，尤其是抗氧化物質(zhì)(谷脫甘膚、六憐酸肌醇、維生素 C、多酪等），最 大限度地保證小麥芽粉的天然色澤、口感和風味，同時還可起到殺菌作用;特別是經(jīng)微波瞬 時適度殺胚后，在不影響小麥芽種子的生物活性的情況下，隨著水分的吸收，小麥芽胚被抑 制但不影響各項酶及生物活性物質(zhì)的增長和胚乳的溶解，芽生長很短，呼吸作用弱，發(fā)芽損 失低，提高了小麥芽粉的產(chǎn)量和質(zhì)量，顯著提高了小麥芽粉產(chǎn)品中功能性、營養(yǎng)性、生物活 性物質(zhì)的含量，提高了小麥芽粉的保健功能（提高人體免疫力、去除人體內(nèi)氧自由基、降血 月旨、延緩衰老）、營養(yǎng)價值和食品安全性。制備的小麥芽發(fā)芽率達97% W上，芽長0.2-0.5mm， 長度均一，發(fā)芽損失僅為1.5-2.1 %，比現(xiàn)有發(fā)芽工藝損失降低4.8-7.1 %，功能性物質(zhì)含量 高，其中丫-氨基下酸含量為303.8-315.6mg/100g，谷脫甘膚16.1-18.3mg/100g，六憐酸肌 醇（IP6)460.8-484.4mg/100g，膳食纖維 3.7-4.2mg/100g。
[0062] 4.本發(fā)明制備的蜂蛹蟲酶解物W2-3日齡的蜂王幼蟲和11-12日齡的雄蜂蛹為原 料，經(jīng)抗凍保護、冷凍破碎、真空脫氣脫星、復配酶生物酶解、生物破乳和真空離屯、分離等低 溫加工技術(shù)而得到的，有效提高了蜂王幼蟲和雄蜂蛹的利用率，降低了營養(yǎng)及保健物質(zhì)的 損失，最大限度地保留了原料的生物活性成分和營養(yǎng)成物質(zhì)含量。在含有絲膠膚的水溶液 中浸泡，可最大限度地減少經(jīng)冷凍而造成的蛹蟲活性物質(zhì)的損失，提高了蛹蟲有效成分的 提取率，同時也為后續(xù)的凍干工藝提供了天然抗凍保護劑;將真空脫氣與復配酶生物酶解 有機結(jié)合，不僅降低了酶解液的溶解氧含量，有效防止生物活性成分氧化變質(zhì)，而且除去了 酶解液中蜂王幼蟲和雄蜂蛹的蟲腥味，提升了復合蛋白組合物的口感，增加了食欲，離子溶 液與蜂王蛹蟲、雄蜂蛹和復配酶的科學復配，使得復配酶活力發(fā)揮最大，催化能力更加徹 底，進而使得原料中的蛋白質(zhì)和脂肪充分降解，提高了蛋白組合物的穩(wěn)定性和澄明度;將生 物破乳劑破乳和真空離屯、有機結(jié)合，可使酶解液中的游離脂肪和水解液充分分離，得到營 養(yǎng)和生物活性物質(zhì)含量豐富、澄清透明的水解液，再加上蛋清泡沫加入和煮沸滅酶，蜂王幼 蟲和雄蜂蛹酶解物更加穩(wěn)定、透明，進一步增強了蛋白組合物的溶解性、泡沫型、穩(wěn)定性;同 時含有大量的蜂王幼蟲多膚和雄蜂蛹多膚，為蛋白組合物增添了更多的功能性生物活性物 質(zhì)，進一步增強了蛋白組合物的功能性和營養(yǎng)性。
[0063] 5.本發(fā)明功能性復合蛋白組合物的制備方法采用非熱加工技術(shù)，工作效率高，能 源消耗少，對環(huán)境友好，無污染，減少了食品添加劑和化學助劑的引入，有效提高了食品安 全性，提高了產(chǎn)品質(zhì)量和降低了生產(chǎn)成本，實現(xiàn)了低碳生產(chǎn)目標，可規(guī)?；?、產(chǎn)業(yè)化發(fā)展。
[0064] 需要說明的是該復合蛋白組合物的食用效果是各組分相互協(xié)同、相互作用的結(jié) 果，并非簡單的原料功能的疊加，各原料組分的科學復配和提取，產(chǎn)生的效果遠遠超過各單 一組份功能和效果的疊加，具有較好的先進性和實用性。
【具體實施方式】
[0065] 下面通過具體的實施方案敘述本發(fā)明。除非特別說明，本發(fā)明中所用的技術(shù)手段 均為本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的方法。另外，實施方案應理解為說明性的，而非限制本發(fā)明的 范圍，本發(fā)明的實質(zhì)和范圍僅由權(quán)利要求書所限定。對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，在不背離本 發(fā)明實質(zhì)和范圍的前提下，對運些實施方案中的物料成分和用量進行的各種改變或改動也 屬于本發(fā)明的保護范圍。
[0066] 實施例1原料制備
[0067] 1.膳食纖維粉的制備：
[0068] 所述膳食纖維粉的制備方法，包括W下步驟:將菊粉、蘋果纖維、小麥纖維、燕麥纖 維按質(zhì)量比5:3:2:1.5均勻混合，超微粉碎至粒徑如m，調(diào)整粉碎物水分含量為18%，于螺桿 轉(zhuǎn)速17化/min、溫度192 °C條件擠壓膨化，加入膨化物質(zhì)量3倍的水，室溫300W、40Ifflz條件超 聲提取12min，然后在電場強度30kV/cm，脈沖時間50化3,脈沖頻率300Hz條件下進行高壓脈 沖電場處理12min;用乳酸調(diào)節(jié)pH值為5.5，加入混合物質(zhì)量0.2%的生物酶，于50°C酶解 35min;酶解液減壓濃縮、冷凍干燥即得膳食纖維粉；
[0069] 所述生物酶為纖維素酶、木聚糖酶、漆酶、果膠酶、單寧酶按質(zhì)量比3:2:2:1:0.6均 勻混合。
[0070] 2.小麥芽粉的制備：
[0071 ]所述小麥芽粉的制備方法，包括如下步驟:將小麥放在裝有0.05 %碳酸氨鋼溶液 的超聲波清洗機中于功率300W、頻率25Ifflz室溫超聲清洗4min，取出、漸干，于頻率2450MHz、 功率3000W、溫度40°C、料層厚度3cm微波干燥7s，然后置溫度為35°C、pH值為7的浸泡液中浸 泡5h，浸泡液含有質(zhì)量百分比濃度為0.4%的復合酶，每隔18min通風一次，通風壓力 0.14MPa，同時于電場強度12kV/cm，脈沖時間20化S，脈沖頻率70化條件進行高壓脈沖電場 處理，直至小麥水分含量為42%;浸泡后的小麥漸干，在發(fā)芽室內(nèi)進行暗發(fā)芽，暗發(fā)芽溫度 保持22°C，暗發(fā)芽時間為22h，經(jīng)發(fā)芽后的小麥干燥至水分含量為6%，低溫粉碎，過90目篩 即得小麥芽粉；
[0072] 所述復合酶為纖維素酶、β-葡聚糖酶、木聚糖酶按質(zhì)量比3:2:2均勻混合。
[0073] 3.植物提取物的制備：
[0074] 所述植物提取物的制備方法，包括如下步驟:將冬黑麥、沙地柏、沙冬青的種子按 質(zhì)量比13:3:1.5均勻混合，裝盤，首先于電場強度化V/cm高壓靜電處理6min;接著在濃度為 20mg/L的水楊酸溶液中室溫浸泡化，同時在電場強度15kV/cm，脈沖時間20化S，脈沖頻率 200化條件下進行高壓脈沖電場處理;漂洗、漸干，于4°C靜置2化，然后依次在2°C冷藏3d，-4 °C冷凍2d、-16°C冷凍12h，立即放在室外于光照強度2萬Lx自然光照化，使混合料半解凍后 立即進行粉碎，粉碎物粒徑1.0mm，接著加入粉碎物質(zhì)量5倍的水，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為4.5;最 后加入混合料液質(zhì)量1.5 %的混合酶，首先于42°C酶解20min，然后于55°C酶解30min;酶解 液過濾、濾液減壓濃縮至固形物含量為20 %即得植物提取物；
[0075] 所述混合酶為纖維素酶、蛋白酶、淀粉酶、果膠酶、脂肪酶按質(zhì)量比9:6:3:2:1.5均 勻混合。
[0076] 4.蜂蛹蟲酶解物的制備：
[0077] 所述蜂蛹蟲酶解物的制備方法，包括如下步驟:將新鮮蜂王幼蟲與雄蜂蛹按質(zhì)量 比3:2均勻混合，加入混合物質(zhì)量1.5倍的質(zhì)量百分比為6%的絲膠膚溶液和0.2倍的離子溶 液，攬拌均勻，于-20 °C冷凍15min，破碎，破碎率為99 %，破碎物粒徑250μπι，用乳酸調(diào)節(jié)破碎 物pH值為6,升溫至45°C，向其中加入破碎物質(zhì)量0.4%的復配酶，混合均勻，于真空度- 0.08M化脫氣脫腥12min，繼續(xù)酶解12min得到酶解液;將酶解液置真空離屯、機中6000r/min 真空離屯、9min，自上而下分離得到游離脂肪、乳狀液、水解液和殘渣，將得到的乳狀液控制 溫度為50°C，添加乳狀液質(zhì)量0.3%的生物破乳劑破乳30min，破乳后于5000r/min真空離屯、 2次，間隔時間化，每次離屯、12min，合并Ξ次離屯、得到的水解液，取其質(zhì)量0.6%的蛋清，放 入攬拌機中于轉(zhuǎn)速9(K)r/min攬拌1 Imin，直至蛋清全部成為泡沫得到蛋清泡沫，將蛋清泡沫 加入合并得到的水解液中，常壓煮沸3min，降至室溫，于6000r/min真空離屯、9min，收集水解 液，依次經(jīng)娃藻±過濾、超濾、凍干即得蜂蛹蟲酶解物；
[0078] 所述離子溶液為含有鋼離子18mg/L、鋒離子12mg/L、鐘離子lOmg/L、巧離子8mg/L 和儀離子6mg/L的水溶液；
[0079] 所述復配酶質(zhì)量組成為:風味蛋白酶:酸性蛋白酶:脂肪酶=2:1.5:0.2;
[0080] 所述真空離屯、條件為溫度6°c、真空度-0.03MPa;
[0081 ]所述生物破乳劑的質(zhì)量組成為:糖脂類:脂膚類:胞壁結(jié)合類=4:2:1.5;
[0082] 所述糖脂類生物破乳劑的質(zhì)量組成為：鼠李糖脂:烷基糖巧= 7:4。
[0083] W下實施例3-5所使用的膳食纖維粉、小麥芽粉、植物提取物、蜂蛹蟲酶解物均為 實施例1制備。
[0084] 實施例2
[0085] -種功能性復合蛋白組合物，主要由W下重量份數(shù)的主料和輔料制備：
[0086] 所述主料由W下重量份數(shù)的原料組成:大豆分離蛋白50份，濃縮乳清蛋白30份，憐 脂10份；
[0087] 所述輔料為甜葉菊1份；
[008引制備方法，包括如下步驟：
[0089] 1)甜葉菊提取物的制備:按照配方，準確稱取各組份原料，首先將甜葉菊放入裝有 0.1%碳酸氨鋼溶液的超聲波清洗機中于200胖、201(化清洗3111^，漸干，置微波干燥中于功率 3kW、料層厚度2cm、80°C、干燥2min，然后浸泡在質(zhì)量百分比為4%的絲膠膚溶液中l(wèi)Omin，取 出，于-18°C冷凍15min后立即進行粉碎，冷凍料層厚度3cm，粉碎物粒徑0.3mm，接著加入粉 碎物質(zhì)量8倍的水，用乳酸調(diào)節(jié)抑值為3.5，于室溫下在電場強度25kV/cm，脈沖時間30化3， 脈沖頻率200Hz條件下進行高壓脈沖電場處理lOmin;然后于室溫在功率150W條件下進行微 波福照提取8min，同時在功率200W，頻率30Ifflz條件下進行超聲波輔助提取;加入提取液質(zhì) 量0.2 %的降解酶，于40°C酶解30min，取酶解液質(zhì)量2 %的蛋清，放入攬拌機中于轉(zhuǎn)速80化/ min攬拌lOmin，直至蛋清全部成為泡沫得到蛋清泡沫，將蛋清泡沫加入酶解液中，常壓煮沸 Imin，迅速降至室溫，80目篩網(wǎng)過濾，濾液減壓濃縮至固形物含量至8%得甜葉菊提取物；
[0090] 所述降解酶為纖維素酶、蛋白酶、果膠酶按質(zhì)量比1:1:1均勻混合；
[0091] 2)粘合劑制備:將大豆分離蛋白質(zhì)量的14%、濃縮乳清蛋白質(zhì)量的7%依次加入甜 葉菊提取物中，均勻混合，在功率300W，頻率35Ifflz條件下進行超聲溶解lOmin，制備成質(zhì)量 百分比濃度為14 %的水溶液，作為粘合劑；
[0092] 3)制粒、整粒:將剩余大豆分離蛋白、剩余濃縮乳清蛋白、憐脂均勻混合，得混合 粉，向其中加入所述粘合劑，制成軟材，用10目篩制粒，凍干至水分含量為4%，然后用10目 篩快速整粒，混合均勻，制成粉劑。
[0093] 實施例3
[0094] -種功能性復合蛋白組合物，主要由W下重量份數(shù)的主料和輔料制備：
[00M]所述主料由W下重量份數(shù)的原料組成:大豆分離蛋白70份，濃縮乳清蛋白40份，憐 脂20份，
[0096] 所述輔料為甜葉菊2份，膳食纖維粉30份，小麥芽粉30份，抗凍多膚15份，蜂蛹蟲酶 解物10份。
[0097] 制備方法，包括如下步驟：
[0098] 1)甜葉菊提取物的制備:按照配方，準確稱取各組份原料，首先將甜葉菊放入裝有 0.2%碳酸氨鋼溶液的超聲波清洗機中于300W、30Ifflz清洗4min，漸干，置微波干燥中于功率 4kW、料層厚度4cm、90°C、干燥3min，然后浸泡在質(zhì)量百分比為6%的絲膠膚溶液中12min，取 出，于-20°C冷凍20min后立即進行粉碎，冷凍料層厚度4cm，粉碎物粒徑0.4mm，接著加入粉 碎物質(zhì)量10倍的水，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為4.5，于室溫下在電場強度30kV/cm，脈沖時間40化3， 脈沖頻率250Hz條件下進行高壓脈沖電場處理12min;然后于室溫在功率200W條件下進行微 波福照提取lOmin，同時在功率250W，頻率35Ifflz條件下進行超聲波輔助提取;加入提取液質(zhì) 量0.4 %的降解酶，于45 °C酶解40min，取酶解液質(zhì)量3 %的蛋清，放入攬拌機中于轉(zhuǎn)速90化/ min攬拌1 Imin，直至蛋清全部成為泡沫得到蛋清泡沫，將蛋清泡沫加入酶解液中，常壓煮沸 2min，迅速降至室溫，90目篩網(wǎng)過濾，濾液減壓濃縮至固形物含量至10%得甜葉菊提取物；
[0099] 所述降解酶為纖維素酶、蛋白酶、果膠酶按質(zhì)量比2:1.5:1.5均勻混合；
[0100] 2)粘合劑制備:將大豆分離蛋白質(zhì)量的14%、濃縮乳清蛋白質(zhì)量的6%、膳食纖維 粉質(zhì)量的10 %、小麥芽粉質(zhì)量的10 %、抗凍多膚依次加入甜葉菊提取物中，均勻混合，在功 率400W，頻率40Ifflz條件下進行超聲溶解12min，制備成質(zhì)量百分比濃度為16%的水溶液，作 為粘合劑；
[0101] 3)制粒、整粒:將剩余大豆分離蛋白、剩余濃縮乳清蛋白、憐脂、剩余膳食纖維粉、 剩余小麥芽粉、蜂蛹蟲酶解物均勻混合，得混合粉，向其中加入所述粘合劑，制成軟材，用15 目篩制粒，凍干至水分含量為8%，然后用15目篩快速整粒，混合均勻，制成粉劑；
[0102] 所述抗凍多膚的質(zhì)量組成為:植物提取物:絲膠膚= 20:6。
[0103] 實施例4
[0104] -種功能性復合蛋白組合物，主要由W下重量份數(shù)的主料和輔料制備：
[0105] 所述主料由W下重量份數(shù)的原料組成:大豆分離蛋白60份，濃縮乳清蛋白35份，憐 脂15份；
[0106] 所述輔料為甜葉菊1.5份，膳食纖維粉25份，小麥芽粉25份，抗凍多膚13份，蜂蛹蟲 酶解物8份；
[0107] 制備方法，包括如下步驟：
[0108] 1)甜葉菊提取物的制備:按照配方，準確稱取各組份原料，首先將甜葉菊放入裝有 0.1%碳酸氨鋼溶液的超聲波清洗機中于200胖、201(化清洗3111^，漸干，置微波干燥中于功率 3kW、料層厚度2cm、80°C、干燥2min，然后浸泡在質(zhì)量百分比為4%的絲膠膚溶液中l(wèi)Omin，取 出，于-18°C冷凍15min后立即進行粉碎，冷凍料層厚度3cm，粉碎物粒徑0.3mm，接著加入粉 碎物質(zhì)量8倍的水，用乳酸調(diào)節(jié)抑值為3.5，于室溫下在電場強度25kV/cm，脈沖時間30化3， 脈沖頻率200Hz條件下進行高壓脈沖電場處理lOmin;然后于室溫在功率150W條件下進行微 波福照提取8min，同時在功率200W，頻率30Ifflz條件下進行超聲波輔助提取;加入提取液質(zhì) 量0.2 %的降解酶，于40°C酶解30min，取酶解液質(zhì)量2 %的蛋清，放入攬拌機中于轉(zhuǎn)速80化/ min攬拌lOmin，直至蛋清全部成為泡沫得到蛋清泡沫，將蛋清泡沫加入酶解液中，常壓煮沸 Imin，迅速降至室溫，80目篩網(wǎng)過濾，濾液減壓濃縮至固形物含量至8%得甜葉菊提取物；
[0109] 所述降解酶為纖維素酶、蛋白酶、果膠酶按質(zhì)量比1:1:1均勻混合；
[0110] 2)粘合劑制備:將大豆分離蛋白質(zhì)量的12%、濃縮乳清蛋白質(zhì)量的5%、膳食纖維 粉質(zhì)量的5%、小麥芽粉質(zhì)量的5%、抗凍多膚依次加入甜葉菊提取物中，均勻混合，在功率 300W，頻率35KHZ條件下進行超聲溶解lOmin，制備成質(zhì)量百分比濃度為14%的水溶液，作為 粘合劑；
[0111] 3)制粒、整粒:將剩余大豆分離蛋白、剩余濃縮乳清蛋白、憐脂、剩余膳食纖維粉、 剩余小麥芽粉、蜂蛹蟲酶解物均勻混合，得混合粉，向其中加入所述粘合劑，制成軟材，用10 目篩制粒，凍干至水分含量為4%，然后用10目篩快速整粒，混合均勻，制成粉劑；
[0112] 所述抗凍多膚的質(zhì)量組成為:植物提取物:絲膠膚=12: 3。
[0113] 實施例5
[0114] -種功能性復合蛋白組合物，主要由W下重量份數(shù)的主料和輔料制備：
[0115] 所述主料由W下重量份數(shù)的原料組成:大豆分離蛋白80份，濃縮乳清蛋白45份，憐 脂25份；
[0116] 所述輔料為甜葉菊2.5份，膳食纖維粉35份，小麥芽粉35份，抗凍多膚17份，蜂蛹蟲 酶解物12份；
[0117] 制備方法，包括如下步驟：
[0118] 1)甜葉菊提取物的制備:按照配方，準確稱取各組份原料，首先將甜葉菊放入裝有 0.3%碳酸氨鋼溶液的超聲波清洗機中于400W、40Ifflz清洗5min，漸干，置微波干燥中于功率 5kW、料層厚度4cm、100°C、干燥4min，然后浸泡在質(zhì)量百分比為7%的絲膠膚溶液中15min， 取出，于-22°C冷凍25min后立即進行粉碎，冷凍料層厚度5cm，粉碎物粒徑0.5mm，接著加入 粉碎物質(zhì)量2倍的水，用乳酸調(diào)節(jié)抑值為5.5，于室溫下在電場強度35kV/cm，脈沖時間50化 S，脈沖頻率300Hz條件下進行高壓脈沖電場處理15min;然后于室溫在功率300W條件下進行 微波福照提取12min，同時在功率300W，頻率40K化條件下進行超聲波輔助提取;加入提取液 質(zhì)量0.6%的降解酶，于50°C酶解50min，取酶解液質(zhì)量4%的蛋清，放入攬拌機中于轉(zhuǎn)速 100化/min攬拌12min，直至蛋清全部成為泡沫得到蛋清泡沫，將蛋清泡沫加入酶解液中，常 壓煮沸3min，迅速降至室溫，100目篩網(wǎng)過濾，濾液減壓濃縮至固形物含量至12%得甜葉菊 提取物；
[0119] 所述降解酶為纖維素酶、蛋白酶、果膠酶按質(zhì)量比3:2:2均勻混合；
[0120] 2)粘合劑制備:將大豆分離蛋白質(zhì)量的16%、濃縮乳清蛋白質(zhì)量的9%、膳食纖維 粉質(zhì)量的15 %、小麥芽粉質(zhì)量的15 %、抗凍多膚依次加入甜葉菊提取物中，均勻混合，在功 率500W，頻率45Ifflz條件下進行超聲溶解15min，制備成質(zhì)量百分比濃度為18%的水溶液，作 為粘合劑；
[0121] 3)制粒、整粒:將剩余大豆分離蛋白、剩余濃縮乳清蛋白、憐脂、剩余膳食纖維粉、 剩余小麥芽粉、蜂蛹蟲酶解物均勻混合，得混合粉，向其中加入所述粘合劑，制成軟材，用20 目篩制粒，凍干至水分含量為12 %，然后用20目篩快速整粒，混合均勻，制成片劑；
[0122] 所述抗凍多膚的質(zhì)量組成為:植物提取物:絲膠膚=29:9。
[0123] 實施例6
[0124] -種功能性復合蛋白組合物，主要由W下重量份數(shù)的主料和輔料制備：
[0125] 所述主料由W下重量份數(shù)的原料組成:大豆分離蛋白90份，濃縮乳清蛋白50份，憐 脂30份；
[0126] 所述輔料為甜葉菊3份，膳食纖維粉40份，小麥芽粉40份，抗凍多膚20份，蜂蛹蟲酶 解物15份；
[0127] 制備方法，包括如下步驟：
[0128] 1)甜葉菊提取物的制備:按照配方，準確稱取各組份原料，首先將甜葉菊放入裝有 0.1%碳酸氨鋼溶液的超聲波清洗機中于400胖、201(化清洗5111^，漸干，置微波干燥中于功率 3kW、料層厚度2cm、100°C、干燥2min，然后浸泡在質(zhì)量百分比為7%的絲膠膚溶液中l(wèi)Omin， 取出，于-22°C冷凍15min后立即進行粉碎，冷凍料層厚度5cm，粉碎物粒徑0.3mm，接著加入 粉碎物質(zhì)量12倍的水，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為3.5,于室溫下在電場強度35kV/cm，脈沖時間30化 s，脈沖頻率300Hz條件下進行高壓脈沖電場處理lOmin;然后于室溫在功率300W條件下進行 微波福照提取8min，同時在功率300W，頻率30Ifflz條件下進行超聲波輔助提取;加入提取液 質(zhì)量0.6%的降解酶，于40°C酶解50min，取酶解液質(zhì)量2%的蛋清，放入攬拌機中于轉(zhuǎn)速 100化/min攬拌lOmin，直至蛋清全部成為泡沫得到蛋清泡沫，將蛋清泡沫加入酶解液中，常 壓煮沸3min，迅速降至室溫，80目篩網(wǎng)過濾，濾液減壓濃縮至固形物含量至12%得甜葉菊提 取物；
[0129] 所述降解酶為纖維素酶、蛋白酶、果膠酶按質(zhì)量比1:2:1均勻混合；
[0130] 2)粘合劑制備:將大豆分離蛋白質(zhì)量的12%、濃縮乳清蛋白質(zhì)量的9%、膳食纖維 粉質(zhì)量的5%、小麥芽粉質(zhì)量的15%、抗凍多膚依次加入甜葉菊提取物中，均勻混合，在功率 300W，頻率45KHZ條件下進行超聲溶解lOmin，制備成質(zhì)量百分比濃度為18%的水溶液，作為 粘合劑；
[0131] 3)制粒、整粒:將剩余大豆分離蛋白、剩余濃縮乳清蛋白、憐脂、剩余膳食纖維粉、 剩余小麥芽粉、蜂蛹蟲酶解物均勻混合，得混合粉，向其中加入所述粘合劑，制成軟材，用10 目篩制粒，凍干至水分含量為12%，然后用10目篩快速整粒，混合均勻，制成顆粒劑；
[0132] 所述抗凍多膚的質(zhì)量組成為:植物提取物:絲膠膚=12: 9。
[0133] 實施例7本發(fā)明功能性復合蛋白組合物的感官品評試驗
[0134] 邀請24名人員對本發(fā)明實施例3制備的功能性復合蛋白粉與市售兩種同類相同生 產(chǎn)日期的復合蛋白粉進行品評，感官打分，其中專業(yè)和非專業(yè)人員各12名，專業(yè)人員青年、 中年、老年各4名，男女各半，非專業(yè)人員少年、青年、中年、老年各3名，男女各半;打分包括 外觀（20分）、質(zhì)地(25分）、風味（30分）、口感（25分）四個方面，打分人員獨立進行，互不影 響，W保證品評結(jié)果準確。對品評結(jié)果進行了統(tǒng)計，均分值取近似值，保留整數(shù)，具體見表1:
[0135] 表1:感官品評統(tǒng)計結(jié)果
[0136]
[0138] 注：同一行內(nèi)標不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，標不同大寫字母表示差異 極顯著(P<〇.01)，標有相同字母表示差異不顯著(P>〇.05)。
[0139] W上結(jié)果表明，本發(fā)明制備的功能性復合蛋白粉從外觀、質(zhì)地、風味和口感任何一 方面都要明顯優(yōu)于市售凍干粉，特別是外觀、風味和口感極好，最大限度地保留了食品原料 的天然色澤、口感和風味，同時也適合不同年齡段、不同消費層次的消費者食用。
[0140] 需要說明的是:本發(fā)明實施例4-6制備的功能性復合蛋白組合物同樣具有上述實 驗效果，各實施例之間及與上述實驗效果差異性不大。
[0141 ]實施例8本發(fā)明功能性復合蛋白組合物的生物活性試驗
[0142] 將本發(fā)明實施例3制備的功能性復合蛋白粉與市售相同生產(chǎn)日期的粉狀糖化酶分 另IJ于-12°C和40°C條件下儲存12個月，采用《GB8726-2006食品添加劑糖化酶制劑沖檢測方 法測定蛋白粉和粉粉狀糖化酶的酶活力，計算酶活損失率，酶活損失率是指實際檢測的酶 活力與產(chǎn)品標注酶活力的差值占標注酶活力的百分率，結(jié)果如表2
[0143] 表2儲存期酶活力損失率
[0144]
[0145] W上結(jié)果表明，在(TC和4(TC條件下儲存12個月，本發(fā)明功能性復合蛋白粉比市售 粉狀糖化酶酶活損失分別降低34%和10%，具有優(yōu)良的溫度儲存性，酶活力非常穩(wěn)定，同時 也說明本發(fā)明功能性復合蛋白分含有的其它生物活性物質(zhì)的損失率極低，具有較好的抗 凍、抗熱性能，保質(zhì)期長。
[0146] 需要說明的是:本發(fā)明實施例4-6制備的功能性復合蛋白組合物同樣具有上述實 驗效果，各實施例之間及與上述實驗效果差異性不大。
[0147] 實施例9本發(fā)明功能性復合蛋白組合物溶解性試驗
[0148] 蛋白粉作為一種食品原料制備的粉劑，參照固體飲料的穩(wěn)定性標準，將溶解時間、 溶解后均一性確定為蛋白粉的質(zhì)量穩(wěn)定性指標，它不僅直接反映了產(chǎn)品的溶解程度，亦反 映了產(chǎn)品內(nèi)在質(zhì)量及穩(wěn)定性，是蛋白粉最重要質(zhì)控指標。
[0149] 溶解時間：按質(zhì)量比1:巧日入55-65Γ溫水，充分攬拌，完全溶解的時間；
[015日]均一'性表征方法:上下均一、無分層90-100分;微分層80-89分;分層70-79分;較分 層0-69分;嚴重分層50-59分;沉淀49分W下(沉淀顆粒越大、數(shù)量越多，分數(shù)越低）。
[0151] 將本發(fā)明實施例3制備的功能性復合蛋白粉和市售同類型、同規(guī)格、同生產(chǎn)日期的 復合蛋白粉于玻璃杯中溶解后，靜置，觀察均一性，每5min觀察記錄結(jié)果一次，結(jié)果見表3:
[0152] 表3:溶解后凍干粉澄明度檢測結(jié)果
[0153]
[0154] W上結(jié)果表明：本發(fā)明復合蛋白粉和市售復合蛋白粉相比，溶解性較好，溶解時間 短，溶解后的溶液穩(wěn)定性強，均一性強，外觀質(zhì)量較好，隨著靜置時間的延長，市售復合蛋白 粉溶液液相相對不穩(wěn)定，產(chǎn)生沉淀，大大影響了飲料的外觀質(zhì)量和內(nèi)在質(zhì)量，同時也說明本 發(fā)明復合蛋白粉內(nèi)在質(zhì)量較好，食用效果安全、穩(wěn)定。
[0155] 需要說明的是:本發(fā)明實施例4-6制備的功能性復合蛋白組合物同樣具有上述實 驗效果，各實施例之間及與上述實驗效果差異性不大。
[0156] 實施例10本發(fā)明功能性復合蛋白組合物對機體免疫力的影響
[0157] 1實驗目的
[0158] 通過運動耐力測試(小鼠游泳試驗），驗證本發(fā)明功能性復合蛋白組合物的提高免 疫力、抗疲勞作用。
[0159] 2實驗材料與試劑
[0160] 2.1供試藥物：
[0161] 市售功能性復合蛋白組合物(G1);市售功能性復合蛋白組合物(G2);本發(fā)明實施 例2-6制備的功能性復合蛋白組合物(G3-G7)。
[0162] 2.2 試劑：
[0163] 肝/肌糖原測試盒，購自南京建成生物制品研究所;濃硫酸(AR)，南京化學試劑有 限公司；生理鹽水，山東長富潔晶藥業(yè)有限公司。
[0164] 3.實驗動物
[0165] ICR小鼠，方，清潔級，體重18-22g，由寧夏醫(yī)科大學比較醫(yī)學中屯、提供，實驗期間小 鼠自由飲食。
[0166] 4.主要儀器
[0167] 侶制游泳箱（50cmX 50cmX 40cm)，鉛絲，低溫高速離屯、機：5804R型，Eppen化of公 司；水浴鍋:DK-S26型，上海精宏實驗設備有限公司；電子稱:BS224S型，Sartorius公司；秒 表，溫度計
[016引 5.實驗分組
[0169] 5.1劑量分組及受試樣品給予時間隨機將小鼠分為8組，每組10只，第1組至第7組 分別給G1~G7的藥物，第8組為空白對照組，給予等體積的雙蒸水，每組每日均灌胃1次，灌 胃體積為0.2ml/10g，連續(xù)給予受試樣品30天。
[0170] 5.2樣品配制第1組至第7組:稱取2.25g藥物樣品，用蒸饋水配至150ml;空白對照 組:雙蒸水150ml。
[0171] 6.實驗方法
[0172] 6.1負重游泳實驗末次給藥30min后，置小鼠于游泳箱中，水深不少于30cm，水溫25 ±rc，鼠尾根部負荷5%體重的鉛皮，記錄小鼠游泳開始至死亡的時間，作為小鼠游泳時 間。
[0173] 6.2小鼠血清尿素測定末次給藥3〇111；[]1后，在溫度為30°(：的水中不負重游泳9〇1]1；[]1， 休息60min后摘眼球采血0.5mL (不加抗凝劑），置4°C冰箱化，血凝固后2000;r/min離屯、 15min，取血清送寧夏醫(yī)科大學附屬醫(yī)院檢驗科檢測。
[0174] 6.3肝糖原的測定末次給藥3〇111111后，在溫度為25±1°(：的水中不負重游泳9〇111111， 頸椎脫白處死小鼠，用生理鹽水洗凈，并用濾紙吸干水分后，準確稱取肝臟lOOmg，肝糖原檢 測試劑盒檢測小鼠肝糖原含量。
[01巧]6.4血乳酸的測定末次給藥30min后采血，然后不負重在溫度為30°C的水中游泳 lOmin后停止。乳酸儀測定方法:分別在游泳前、游泳后、游泳后休息20min后各采血20化加 入40化破膜液中，立即充分振蕩破碎細胞用乳酸儀測定。（血乳酸曲線下面積= 5X(游泳前 血乳酸值+3 X游泳后Omin的血乳酸值+2 X游泳后20min的血乳酸值）
[0176] 7.觀察指標負重游泳時間，血乳酸、尿素、肝糖原值
[0177] 8.統(tǒng)計方法實驗數(shù)據(jù)用占表示，采用t檢驗進行組間比較 [017引9.實驗結(jié)果
[0179] 9.1本發(fā)明功能性復合蛋白組合物對小鼠體重的影響
[0180] 各組小鼠在給予G1~G9藥物后，前、中，后期體重分別見下表所示，各組小鼠的初 始體重和增重體重與對照組比較均無統(tǒng)計學差異(P>〇.05)，表明G1~G9藥物均無明顯的 毒性。實驗結(jié)果詳見表4。
[0181] 表4負重游泳實驗小鼠的初始體重、中期體重和結(jié)束體重?±.V)
[0182]
[0183] 9.2本發(fā)明功能性復合蛋白組合物對小鼠負重游泳時間的影響
[0184] 經(jīng)口給予小鼠 G1~G7藥物后，G1~G2藥物與空白對照組比較，可W明顯延長小鼠 負重游泳時間，具有顯著性差異(Ρ<〇.05)，本發(fā)明功能性復合蛋白組合物G3~G7藥物與空 白對照組比較，可W顯著延長小鼠負重游泳時間，具有極顯著性差異(Ρ<〇.01)，且明顯優(yōu) 于G1~G2藥物。結(jié)果詳見表5。
[0185] 表5功能性復合蛋白組合物對小鼠負重游泳時間的影響(S )
[0186]
[0187] 'V'p<0.05vs 空白對照；
[018 引 ''**"f)<0.01vs 空白對照；
[0189] 9.3本發(fā)明功能性復合蛋白組合物對小鼠運動前后血乳酸的影響
[0190] 經(jīng)口給予小鼠本發(fā)明的功能性復合蛋白組合物后，本發(fā)明功能性復合蛋白組合物 G3~G7藥物對小鼠運動后血乳酸曲線下面積與對照組比較有統(tǒng)計學差異(P<0.05)，G1~ G2藥物組小鼠血乳酸曲線下面積與對照組比較雖有所降低，但并無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。 結(jié)果見表6。
[0191] 表6本發(fā)明功能性復合蛋白組合物對小鼠運動前后血乳酸水平的影響^±
[0192]
[0193] V'p<0.05vs 空白對照；
[0194] 9.4本發(fā)明功能性復合蛋白組合物對小鼠肝糖原的影響
[01M]經(jīng)口給予小鼠 G1~G7藥物后，G1~G2藥物與空白對照組比較，小鼠肝糖原含量均 有明顯的升高，具有顯著性差異(P<〇.05)，本發(fā)明功能性復合蛋白組合物G3~G7藥物與與 空白對照組比較，小鼠肝糖原含量均有明顯的升高，具有極顯著性差異(P<〇.01)，且明顯 優(yōu)于G1~G2藥物。結(jié)果詳見表7。
[0196] 表7本發(fā)明功能性復合蛋白組合物對小鼠肝糖原含量的影響(之±s)
[0197]
[0199] 'V'p<0.05vs 空白對照；
[0200] 01VS 空白對照；
[0201] 9.5本發(fā)明功能性復合蛋白組合物對小鼠血清尿素的影響
[0202] 經(jīng)口給予小鼠 G1~G7藥物后，G1~G2藥物組與空白對照組比較，小鼠運動后血清 尿素含量均有明顯的降低，具有顯著性差異(P<〇.05)，本發(fā)明功能性復合蛋白組合物G3~ G7藥物與與空白對照組比較，小鼠運動后血清尿素含量均有明顯的降低，具有極顯著性差 異(P<0.01)，且明顯優(yōu)于G1~G2藥物。結(jié)果詳見表8。
[0203] 表8本發(fā)明功能性復合蛋白組合物對小鼠血清尿素含量的影響(I±.v)
[0204]
[0205] 'V'p<0.05vs 空白對照；
[0206] ''**"f)<0.01vs 空白對照；
[0207] 10.實驗結(jié)論
[0208] 本實驗主要通過小鼠負重游泳實驗，同時檢測小鼠肝糖原的儲備來觀察本發(fā)明功 能性復合蛋白組合物提高免疫力、抗疲勞的效果。初步研究結(jié)果顯示如下：
[0209] 1、本發(fā)明G3~G7功能性復合蛋白組合物均能延長小鼠負重游泳時間（P<0.01)， 且效果明顯優(yōu)于其它G1~G2的功能性復合蛋白組合物。
[0210] 2、生化檢測方面顯示，本發(fā)明G3~G7功能性復合蛋白組合物各劑量組均能減少運 動后小鼠血清中葡萄糖無氧酵解所產(chǎn)生的乳酸含量，與對照組比較有顯著性差異（P< 0.05)，而其它G1~G2的功能性復合蛋白組合物雖然也能減少運動后小鼠血清中葡萄糖無 氧酵解所產(chǎn)生的乳酸含量，但與對照組比較，無統(tǒng)計學差異(P>〇.05);
[0211] 3、本發(fā)明G3~G7功能性復合蛋白組合物各劑量組均能顯著提高小鼠肝臟中糖原 的儲備(P<〇.01)，且效果明顯優(yōu)于其它G1~G2的功能性復合蛋白組合物；
[0212] 4、高尿酸模型發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明G3~G7功能性復合蛋白組合物能顯著降低小鼠游泳后 血清中尿素的含量(P<〇.01)，且效果明顯優(yōu)于其它G1~G2功能性復合蛋白組合物；
[021引 11.結(jié)論
[0214]上述實驗證明本發(fā)明功能性復合蛋白組合物能顯著提高機體免疫力，提高小鼠的 體力和耐力，降低小鼠運動后血清中尿素及乳酸的含量，且能顯著提高小鼠肝臟中糖原的 儲備，有助于緩解運動負荷引起的疲勞;能延長小鼠負重游泳至力竭的時間。
【主權(quán)項】
1. 一種功能性復合蛋白組合物，主要由以下重量份數(shù)的主料和輔料制備:所述主料由 以下重量份數(shù)的原料組成:大豆分離蛋白50-90份，濃縮乳清蛋白30-50份，磷脂10-30份;所 述輔料為甜葉菊1-3份。2. 如權(quán)利要求1所述的功能性復合蛋白組合物，其特征在于，所述輔料還包括以下重量 份數(shù)的原料:膳食纖維粉20-40份，小麥芽粉20-40份，抗凍多肽10-20份，蜂蛹蟲酶解物5-15 份。3. 如權(quán)利要求2所述的功能性復合蛋白組合物，其特征在于，所述膳食纖維粉的制備方 法，包括以下步驟:將菊粉、蘋果纖維、小麥纖維、燕麥纖維按質(zhì)量比4-6:2-4:1-3:1-2均勻 混合，超微粉碎至粒徑3_6μπι，調(diào)整粉碎物水分含量為17-19%，于螺桿轉(zhuǎn)速160-180r/min、 溫度185-200°C條件擠壓膨化，加入膨化物質(zhì)量2-4倍的水，室溫200-400W、35-40KHz條件超 聲提取l〇_15min，然后在電場強度20-40kV/cm，脈沖時間400-600ys,脈沖頻率200-400HZ條 件下進行高壓脈沖電場處理10-15min;用乳酸調(diào)節(jié)pH值為4.5-6.5,加入混合物質(zhì)量0. Ιο. 3% 的生物酶 ，于 45-55 °C 酶解 2〇-48min; 酶解液減壓濃縮、冷凍干燥即得膳食纖維粉； 所述生物酶為纖維素酶、木聚糖酶、漆酶、果膠酶、單寧酶按質(zhì)量比2-4:1-3:1-3:0.5_ 1.5:0.2-1均勻混合。4. 如權(quán)利要求2所述的功能性復合蛋白組合物，其特征在于，所述小麥芽粉的制備方 法，包括如下步驟:將小麥放在裝有0.04-0.06%碳酸氫鈉溶液的超聲波清洗機中于功率 200-400W、頻率20-30KHZ室溫超聲清洗3-5min，取出、瀝干，于頻率2450MHz、功率3000W、溫 度38-42°(：、料層厚度2-4〇11微波干燥6-8 8，然后置溫度為33-36°(：、？!1值為6-8的浸泡液中浸 泡4-6h，浸泡液含有質(zhì)量百分比濃度為O . 3-0.5 %的復合酶，每隔15-20min通風一次，通風 壓力0.13-0.1510^，同時于電場強度10-151^/〇11，脈沖時間100-30(^8，脈沖頻率60-80!^條 件進行高壓脈沖電場處理，直至小麥水分含量為40-45 % ;浸泡后的小麥瀝干，在發(fā)芽室內(nèi) 進行暗發(fā)芽，暗發(fā)芽溫度保持20_24°C，暗發(fā)芽時間為20-24h，經(jīng)發(fā)芽后的小麥干燥至水分 含量為5-8%，低溫粉碎，過80-100目篩即得小麥芽粉； 所述復合酶為纖維素酶、葡聚糖酶、木聚糖酶按質(zhì)量比2-4:1-3:1-3均勻混合。5. 如權(quán)利要求2所述的功能性復合蛋白組合物，其特征在于，所述抗凍多肽的質(zhì)量組成 為:植物提取物:絲膠肽=12-29:3-9; 所述植物提取物的制備方法，包括如下步驟:將冬黑麥、沙地柏、沙冬青的種子按質(zhì)量 比9-17:2-4:1-2均勻混合，裝盤，首先于電場強度5-7kV/cm高壓靜電處理5-7min;接著在濃 度為10-30mg/L的水楊酸溶液中室溫浸泡2-4h，同時在電場強度10-20kV/cm，脈沖時間150-25(^ 8，脈沖頻率150-250他條件下進行高壓脈沖電場處理；漂洗、瀝干，于3-5°(：靜置18-24h，然后依次在1-3°C冷藏2-4d，-3-5°C冷凍l-3d、-15-18°C冷凍10_15h，立即放在室外 于光照強度0.5-5萬Lx自然光照5-7h，使混合料半解凍后立即進行粉碎，粉碎物粒徑0.5-1.5mm,接著加入粉碎物質(zhì)量4-6倍的水，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為3.5-5.5;最后加入混合料液質(zhì) 量1-2 %的混合酶，首先于35-50 °C酶解10_30min，然后于50-60 °C酶解20-40min;酶解液過 濾、濾液減壓濃縮至固形物含量為15-25 %即得植物提取物； 所述混合酶為纖維素酶、蛋白酶、淀粉酶、果膠酶、脂肪酶按質(zhì)量比8-10:5-7:2-4:1-3: 1-2均勻混合。6. 如權(quán)利要求2所述的功能性復合蛋白組合物，其特征在于，所述蜂蛹蟲酶解物的制備 方法，包括如下步驟:將新鮮蜂王幼蟲與雄蜂蛹按質(zhì)量比2-5:1-3均勻混合，加入混合物質(zhì) 量1-2倍的質(zhì)量百分比為4-7%的絲膠肽溶液和0.1-0.3倍的離子溶液，攪拌均勻，于-18- 22°C冷凍12-18min，破碎，破碎率為98-100%，破碎物粒徑200-300μπι，用乳酸調(diào)節(jié)破碎物pH 值為5-7，升溫至40-50 °C，向其中加入破碎物質(zhì)量0.3-0.5 %的復配酶，混合均勻，于真空 度-0.07-0.09MPa脫氣脫腥10-15min，繼續(xù)酶解10-15min得到酶解液;將酶解液置真空離 心機中5000-7000r/min真空離心8-10min，自上而下分離得到游離脂肪、乳狀液、水解液和 殘渣，將得到的乳狀液控制溫度為45-55°C，添加乳狀液質(zhì)量0.2-0.4%的生物破乳劑破乳 20_40min，破乳后于4000-6000r/min真空離心2次，間隔時間l_3h，每次離心10_15min，合并 三次離心得到的水解液，取其質(zhì)量0.5-0.7%的蛋清，放入攪拌機中于轉(zhuǎn)速800-1000r/min 攪拌10-12min，直至蛋清全部成為泡沫得到蛋清泡沫，將蛋清泡沫加入合并得到的水解液 中，常壓煮沸2_4min，降至室溫，于5000-7000r/min真空離心8-10min，收集水解液，依次經(jīng) 硅藻土過濾、超濾、凍干即得蜂蛹蟲酶解物； 所述離子溶液為含有鈉離子15_20mg/L、鋅離子10-15mg/L、鉀離子8-12mg/L、鈣離子6-10mg/L和鎂離子5-8mg/L的水溶液； 所述復配酶質(zhì)量組成為:風味蛋白酶:酸性蛋白酶:脂肪酶=1-3:1-2:0.1-0.3; 所述真空離心條件為溫度5-8°C、真空度-0.02-0.04MPa。7. 如權(quán)利要求6所述的功能性復合蛋白組合物，其特征在于，所述生物破乳劑的質(zhì)量組 成為:糖脂類:脂肽類:胞壁結(jié)合類=3-5:1 -3:1 -2。8. 如權(quán)利要求7所述的功能性復合蛋白組合物，其特征在于，所述糖脂類生物破乳劑的 質(zhì)量組成為：鼠李糖脂:烷基糖苷=6-8:3-5。9. 如權(quán)利要求1-8任一所述功能性復合蛋白組合物的制備方法，其特征在于，包括如下 步驟： 1) 甜葉菊提取物的制備:按照配方，準確稱取各組份原料，首先將甜葉菊放入裝有0.1- 0.3 %碳酸氫鈉溶液的超聲波清洗機中于200-400W、20-40KHZ清洗3-5min，瀝干，置微波干 燥中于功率3_5kW、料層厚度2-4cm、80-100°C、干燥2-4min，然后浸泡在質(zhì)量百分比為4-7% 的絲膠肽溶液中l(wèi)〇-15min，取出，于-18-22°C冷凍15-25min后立即進行粉碎，冷凍料層厚 度3-5cm，粉碎物粒徑0.3-0.5_，接著加入粉碎物質(zhì)量8-12倍的水，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為3.5-5.5，于室溫下在電場強度25-351^/〇11，脈沖時間300-50(^8，脈沖頻率200-300他條件下進 行高壓脈沖電場處理l〇_15min;然后于室溫在功率150-300W條件下進行微波輻照提取8-12min，同時在功率200-300W，頻率30-40KHZ條件下進行超聲波輔助提取;加入提取液質(zhì)量 0.2-0.6 %的降解酶，于40-50 °C酶解30-50min，取酶解液質(zhì)量2-4 %的蛋清，放入攪拌機中 于轉(zhuǎn)速800-1000r/min攪拌10-12min，直至蛋清全部成為泡沫得到蛋清泡沫，將蛋清泡沫加 入酶解液中，常壓煮沸l(wèi)_3min，迅速降至室溫，80-100目篩網(wǎng)過濾，濾液減壓濃縮至固形物 含量至8-12 %得甜葉菊提取物； 所述降解酶為纖維素酶、蛋白酶、果膠酶按質(zhì)量比1-3:1-2:1-2均勻混合； 2) 粘合劑制備:將大豆分離蛋白質(zhì)量的12-16%、濃縮乳清蛋白質(zhì)量的5-9%和抗凍多 肽、膳食纖維粉質(zhì)量的5-15%、小麥芽粉質(zhì)量的5-15%依次加入甜葉菊提取物中，均勻混 合，在功率300-500W，頻率35-45KHZ條件下進行超聲溶解10-15min，制備成質(zhì)量百分比濃度 為14-18 %的水溶液，作為粘合劑； 3)制粒、整粒:將剩余大豆分離蛋白、剩余濃縮乳清蛋白、磷脂和剩余膳食纖維粉、剩余 小麥芽粉、蜂蛹蟲酶解物均勻混合，得混合粉，向其中加入所述粘合劑，制成軟材，用10-20 目篩制粒，凍干至水分含量為4-12%，然后用10-20目篩快速整粒，混合均勻，制成粉劑、片 劑或顆粒劑。10.如權(quán)利要求9所述功能性復合蛋白組合物的制備方法，其特征在于，所述功能性復 合蛋白組合物，主要由以下重量份數(shù)的主料和輔料制備:所述主料由以下重量份數(shù)的原料 組成：大豆分離蛋白70份，濃縮乳清蛋白40份，磷脂20份;所述輔料為甜葉菊2份，膳食纖維 粉30份，小麥芽粉30份，抗凍多肽15份，蜂蛹蟲酶解物10份； 制備方法，包括如下步驟： 1) 甜葉菊提取物的制備：按照配方，準確稱取各組份原料，首先將甜葉菊放入裝有 0.2%碳酸氫鈉溶液的超聲波清洗機中于300W、30KHz清洗4min，瀝干，置微波干燥中于功率 4kW、料層厚度4復、90°(：、干燥31^11，然后浸泡在質(zhì)量百分比為6%的絲膠肽溶液中121^11，取 出，于-20°C冷凍20min后立即進行粉碎，冷凍料層厚度4cm，粉碎物粒徑0.4mm，接著加入粉 碎物質(zhì)量10倍的水，用乳酸調(diào)節(jié)pH值為4.5，于室溫下在電場強度301^/〇]1，脈沖時間40(^8， 脈沖頻率250Hz條件下進行高壓脈沖電場處理12min;然后于室溫在功率200W條件下進行微 波輻照提取IOmin，同時在功率250W，頻率35KHz條件下進行超聲波輔助提取;加入提取液質(zhì) 量0.4 %的降解酶，于45 °C酶解40min，取酶解液質(zhì)量3 %的蛋清，放入攪拌機中于轉(zhuǎn)速900r/ min攪拌I Imin，直至蛋清全部成為泡沫得到蛋清泡沫，將蛋清泡沫加入酶解液中，常壓煮沸 2min，迅速降至室溫，90目篩網(wǎng)過濾，濾液減壓濃縮至固形物含量至10%得甜葉菊提取物； 所述降解酶為纖維素酶、蛋白酶、果膠酶按質(zhì)量比2:1.5:1.5均勻混合； 2) 粘合劑制備:將大豆分離蛋白質(zhì)量的14%、濃縮乳清蛋白質(zhì)量的6%、膳食纖維粉質(zhì) 量的10%、小麥芽粉質(zhì)量的10%、抗凍多肽依次加入甜葉菊提取物中，均勻混合，在功率 400W，頻率40KHz條件下進行超聲溶解12min，制備成質(zhì)量百分比濃度為16%的水溶液，作為 粘合劑； 3) 制粒、整粒:將剩余大豆分離蛋白、剩余濃縮乳清蛋白、磷脂、剩余膳食纖維粉、剩余 小麥芽粉、蜂蛹蟲酶解物均勻混合，得混合粉，向其中加入所述粘合劑，制成軟材，用15目篩 制粒，凍干至水分含量為8%，然后用15目篩快速整粒，混合均勻，制成粉劑； 所述抗凍多肽的質(zhì)量組成為:植物提取物:絲膠肽=20:6。
【文檔編號】A23L33/115GK105919071SQ201610251441
【公開日】2016年9月7日
【申請日】2016年4月21日
【發(fā)明人】房克敏, 趙軍, 蔣彤, 蔣峰
【申請人】北京東方興企食品工業(yè)技術(shù)有限公司