一種海參生物發(fā)酵餌料的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種海參生物發(fā)酵餌料的制備方法，將海洋假交替單胞菌、混合EM菌接種到餌料中25?35℃厭氧發(fā)酵3?7天；其中混合EM菌由芽孢桿菌、光合細菌、酵母菌及乳酸菌組成。本發(fā)明方法通過微生物對刺參餌料進行固態(tài)發(fā)酵，制備發(fā)酵餌料。本發(fā)明制備的餌料和未發(fā)酵的餌料相比，其對刺參的誘食性顯著增加；且發(fā)酵后的餌料營養(yǎng)更全面，更有利于刺參生長，提高刺參的成活率；改善刺參腸道菌群，提高了刺參對餌料的消化吸收率。同時，由于海藻膠降解菌的加入，能有效的降解餌料中刺參難以消化的富含海藻膠的海帶粉，因此可以增加餌料中海帶粉的比例來替代部分價格昂貴馬尾藻，起到降低企業(yè)成本的目的。
【專利說明】
一種海參生物發(fā)酵餌料的制備方法
技術領域
[0001] 本發(fā)明涉及一種發(fā)酵餌料，特別是涉及含有海洋假交替單胞菌的混合EM菌發(fā)酵海 參餌料的制備方法。
【背景技術】
[0002] 刺參體壁富含豐富的膠原蛋白和多聚糖，并且含有鈣、鐵、錳等多種微量元素，具 有較高的食用和藥用價值，是我國北方重要的海產(chǎn)經(jīng)濟動物之一。隨著刺參養(yǎng)殖業(yè)集約化、 規(guī)模化、自動化的迅猛發(fā)展，有限的天然餌料已經(jīng)不能滿足實際市場的需要。但是，目前還 缺乏對刺參營養(yǎng)和餌料方面系統(tǒng)性的研究。餌料營養(yǎng)不全阻礙了刺參的快速生長，有的餌 料還存在衛(wèi)生問題，攜帶致病菌造成疾病的發(fā)生，甚至死亡，造成巨大的經(jīng)濟損失。刺參攝 食的餌料主要為馬尾藻、海帶、豆柏等富含褐藻膠及抗營養(yǎng)因子等不易被消化吸收的物質(zhì)。 而餌料經(jīng)過有益微生物發(fā)酵處理后，原料中的抗營養(yǎng)因子被分解或轉(zhuǎn)化，褐藻膠被完全或 部分降解，產(chǎn)生易被刺參采食、消化、吸收且無毒害作用的小分子營養(yǎng)物質(zhì)。目前，利用酵母 菌、芽孢桿菌及乳酸菌單菌發(fā)酵海參餌料已有相關報道，而利用含有具有褐藻膠降解能力 的海洋假交替單胞菌的混菌固態(tài)發(fā)酵刺參餌料罕有報道，利用此法制備的刺參餌料不僅能 夠提高刺參的生長性能，提高企業(yè)的經(jīng)濟效益，而且發(fā)酵料中的活體益生菌可以起到凈水 的作用。同時固態(tài)發(fā)酵的餌料較液體發(fā)酵餌料含水量低，便于貯存和運輸;而且固態(tài)發(fā)酵操 作簡單、成本低，對發(fā)酵餌料的大規(guī)模生產(chǎn)具有重要的經(jīng)濟價值和現(xiàn)實意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的在于提供一種利用含有海洋假交替單胞菌的混合EM菌固態(tài)發(fā)酵刺 參餌料的方法，從而提高餌料的消化利用率，提高刺參的生長性能，改善養(yǎng)殖水體環(huán)境。
[0004] 為實現(xiàn)上述目的，我們提供一種海參生物餌料的制備方法，將海洋假交替單胞菌、 混合EM菌接種到餌料中25-35 °C厭氧發(fā)酵3-7天;其中混合EM菌由芽孢桿菌(Baci 1 lus)、光 合細菌(Photosynthetic Bacteria，PSB)、酵母菌(Yeast)及乳酸菌（Lactobacillus)組成。
[0005] 所述餌料按照質(zhì)量百分數(shù)由32~40%脫膠海帶粉，16~20%馬尾藻粉，16~20% 海青粉，6 %玉米粉，5 %破壁酵母粉，4 %發(fā)酵豆柏，4 %蝦粉，3 %預混料，3 %魚粉，2 %扇貝 邊粉，1 %紅糖組成。
[0006] 進一步地，在上述技術方案中，海參生物餌料的制備方法具體包括以下步驟：
[0007] 步驟a、海洋假交替單胞菌培養(yǎng)：將斜面上保存的菌種接種到種子培養(yǎng)基中， 160rpm，28°C搖床培養(yǎng)18-20小時，取種子液，以2%-3%v/v的接種量接到發(fā)酵培養(yǎng)基中， 160rpm，28°C搖床培養(yǎng)24-30 小時。0D600值為0.8~1 · 1。
[0008] 步驟b、混合EM菌培養(yǎng):混合EM菌包括芽孢桿菌、光合細菌、酵母菌及乳酸菌。
[0009]芽孢桿菌培養(yǎng)條件:將斜面上保存的菌種取2-3環(huán)，接種到種子液中，180rpm，3(TC 搖床培養(yǎng)18-24小時，0D600值為0.8~1.1。
[0010]光合細菌培養(yǎng)條件:將斜面上保存的菌種取3-4環(huán)，接種到種子液中，30°C光照靜 置培養(yǎng)72-96小時，0D600值為0.8~1.1。
[0011]酵母菌培養(yǎng)條件:將斜面上保存的菌種取2-3環(huán)，接種到種子液中，180rpm，3(TC搖 床培養(yǎng)18-24小時，0D600值為0.8~1.1。
[0012] 乳酸菌培養(yǎng)條件:將斜面上保存的菌種取3-5環(huán)接種到種子液中，37°C靜置培養(yǎng) 72-96 小時，0D600值為0 · 8~1 · 1。
[0013] 取四種菌種的種子液，分別以0.4-0.6%、0·6-0.9%、0·4-0.6%、0·6-0.9%v/v的 接種量接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中，在150-180rpm，30°C條件下，500L發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)72小時。 [0014]步驟c、將海洋假交替單胞菌發(fā)酵液和EM菌發(fā)酵液混合，按照2-3 % (v/w)的接種量 (海洋假交替單胞菌發(fā)酵液與EM菌發(fā)酵液的接種體積比為1:1.5-3)接種到餌料中，調(diào)整水 分含量為38-50%。混合均勻后裝入25kg有單向空氣閥的塑封袋中，25-35°C厭氧發(fā)酵3-7 天。
[0015] 步驟d、當發(fā)酵館料出現(xiàn)水汽，手觸摸略帶溫熱，館料發(fā)出鮮香、有香濃的酒曲和酸 味時，發(fā)酵餌料制備完成。
[0016] 進一步地，在上述技術方案中，在步驟c中，為了保證菌種與餌料充分混合，將菌液 與水混合均勻后，再將水與餌料混合、攪拌。
[0017] 進一步地，在上述技術方案中，步驟a中海洋假交替單胞菌的種子培養(yǎng)基組成：蛋 白胨0.5g，酵母提取物O.lg，海藻酸鈉0.5g，NaCl 3g，水lOOmL，用1M NaOH或1M HC1將pH調(diào) 節(jié)至7.5;
[0018] 海洋假交替單胞菌發(fā)酵培養(yǎng)基組成:海藻酸鈉0.5g，（NH4)S〇4 0.5g，K2HP〇4 0.2g， MgS〇4,7H20 0.2g，NaCl 2.5g，水 100mL，用 1M NaOH或 1M HC1 將pH調(diào)節(jié)至7.5。
[0019] 進一步地，在上述技術方案中，步驟b中芽孢桿菌種子培養(yǎng)基組成:牛肉膏l(xiāng)g，蛋白 胨lg，葡萄糖lg，NaCl 0.5g，水 100mL，用 1M NaOH或 1M HC1 將pH調(diào)節(jié)至7.0-7.2。
[0020] 光合細菌種子培養(yǎng)基組成：氯化銨lg，KH2P〇4 0.5g，碳酸氫鈉5g，NaS2〇4 lg，NaCl lg，MgCl2 0.5g,水 100mL，用 1M NaOH或 1M HC1 將pH調(diào)節(jié)至7·5-8·5。
[0021]乳酸菌種子培養(yǎng)基組成：牛肉膏l(xiāng)g，蛋白胨lg，酵母膏0.4g，葡萄糖2g，鹿糖lg，乙 酸鈉〇.5g，檸檬酸銨0.2g，K2HP〇4 0.08g，MgS〇4*7H20 0.02g，MnS〇4 0.005g，輕質(zhì)碳酸鈣 〇.lg，吐溫80 lml，水lOOmL,用 1M NaOH或 1M HC1 將pH調(diào)節(jié)至6.2。
[0022]酵母菌種子培養(yǎng)基組成:酵母膏l(xiāng)g，蛋白胨2g，葡萄糖2g，水lOOmL，自然pH。
[0023] 混合EM菌發(fā)酵培養(yǎng)基：黃腐酸0.5g，酵母膏0.64g，尿素0.18g，味精0.09g，NaCl 0.09g，香菇粉0.125g，KH2P〇4 0.31g，輕質(zhì)CaC03 1.5g，紅糖5.6g，自然pH。
[0024] 海洋假交替單胞菌來自中國普通微生物菌種保藏管理中心，編號為 CCREMSDMCC210342。
[0025]芽孢桿菌：來自中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心，編號為CICC20037-枯草芽孢 桿菌。
[0026] 光合細菌:來自中國普通微生物菌種保藏管理中心，編號為CCREMSDMCC150016-球 形紅細菌。
[0027]酵母菌:來自中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心中國微生物菌種保藏庫，編號為 ACCC20165-釀酒酵母。
[0028]乳酸菌:來自中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心，編號為ACCC11016-植物乳桿菌。
[0029] 發(fā)明有益效果
[0030] 1.本發(fā)明采用有益菌發(fā)酵餌料，通過發(fā)酵原料中褐藻膠等抗營養(yǎng)因子被降解，粗 纖維等大分子物質(zhì)被分解，產(chǎn)生易被刺參采食、消化、吸收且無毒害作用的小分子營養(yǎng)物 質(zhì)。提高了餌料的營養(yǎng)價值，增加了餌料的利用率，從而節(jié)約企業(yè)生產(chǎn)成本，具有較大的經(jīng) 濟意義和社會價值。
[0031] 2.餌料經(jīng)益生菌發(fā)酵后含有更多的活性益生菌菌體、多種酶、維生素、代謝產(chǎn)物、 活性小肽、氨基酸、寡糖、抑菌物質(zhì)、免疫增強因子、促生長因子等，起到促進刺參生長、改善 刺參腸道菌群結構的作用，同時微生物代謝產(chǎn)生的芳香成分增加了其對刺參的誘食性。
[0032] 3.發(fā)酵餌料中富含的活性菌體還能起到凈水的作用。枯草芽孢桿菌能夠有效降低 刺參養(yǎng)殖水體中的氨氮、亞硝酸鹽及硫化氫水平。乳酸菌及光合細菌能夠把養(yǎng)殖水體和底 泥中的淀粉、多余的蛋白質(zhì)、脂肪等有機質(zhì)分解、起到降低養(yǎng)殖水體富營養(yǎng)化、減少底泥腐 敗和環(huán)境污染的作用。
[0033] 4.餌料在發(fā)酵過程中，益生菌迅速繁殖并成為優(yōu)勢菌群能夠抑制有害菌、致病菌 的生長，從而降低刺參的發(fā)病率，提高刺參的成活率。
[0034] 5.與液體發(fā)酵餌料相比，采用固態(tài)發(fā)酵的方式，在很大程度上降低了發(fā)酵餌料的 含水量，使餌料便于貯存和運輸，對發(fā)酵餌料的大規(guī)模生產(chǎn)和推廣具有重要的經(jīng)濟價值和 現(xiàn)實意義。
【具體實施方式】 [0035] 下述實施例中：
[0036]海洋假交替單胞菌來自中國普通微生物菌種保藏管理中心，編號為 CCREMSDMCC210342。
[0037]芽孢桿菌：來自中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心，編號為CICC20037-枯草芽孢 桿菌。
[0038] 光合細菌:來自中國普通微生物菌種保藏管理中心，編號為CCREMSDMCC150016-球 形紅細菌。
[0039]酵母菌:來自中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心中國微生物菌種保藏庫，編號為 ACCC20165-釀酒酵母。
[0040]乳酸菌:來自中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心，編號為ACCC11016-植物乳桿菌。 [0041 ]海洋假交替單胞菌培養(yǎng)：
[0042]將斜面上保存的菌種接種到種子培養(yǎng)基中，160rpm，28°C搖床培養(yǎng)20小時，取種子 液，以3%v/v的接種量接到發(fā)酵培養(yǎng)基中，160rpm，28°C搖床培養(yǎng)24小時。0D600值為1.0。 [0043]海洋假交替單胞菌的種子培養(yǎng)基組成：蛋白胨0.5g，酵母提取物0.1 g，海藻酸鈉 0.5g，NaCl 3g，水 100mL，用 1M NaOH或 1M HC1 將pH調(diào)節(jié)至7.5;
[0044] 海洋假交替單胞菌發(fā)酵培養(yǎng)基組成:海藻酸鈉 0.5g，（NH4)2S〇4 0.5g，K2HP〇4 0.2g， MgS〇4,7H20 0.2g，NaCl 2.5g，水 100mL，用 1M NaOH或 1M HC1 將pH調(diào)節(jié)至7.5。
[0045] 混合EM菌培養(yǎng)：
[0046] 混合EM菌包括芽孢桿菌、光合細菌、酵母菌及乳酸菌。
[0047]芽孢桿菌培養(yǎng)條件：
[0048] 將斜面上保存的菌種取2環(huán)，接種到種子培養(yǎng)基中，180rpm，30 °C搖床培養(yǎng)24小時， 0D600值為1.0。
[0049] 光合細菌培養(yǎng)條件：
[0050] 將斜面上保存的菌種取3環(huán)，接種到種子培養(yǎng)基中，30°C光照靜置培養(yǎng)72小時， 0D600值為1.0。
[0051]酵母菌培養(yǎng)條件：
[0052]將斜面上保存的菌種取2環(huán)，接種到種子培養(yǎng)基中，180rpm，30 °C搖床培養(yǎng)24小時， 0D600值為1.0。
[0053]乳酸菌培養(yǎng)條件：
[0054]將斜面上保存的菌種取3環(huán)接種到種子培養(yǎng)基中，37 °C靜置培養(yǎng)96小時，0D600值 為 1 ·0〇
[0055]芽孢桿菌種子培養(yǎng)基組成:牛肉膏l(xiāng)g，蛋白胨lg，葡萄糖lg，NaC10.5g，水100mL，用 謂恥0!1或謂！1(：1將口!1調(diào)節(jié)至7.0-7.2。
[0056] 光合細菌種子培養(yǎng)基組成：氯化銨lg，KH2P〇4 0.5g，碳酸氫鈉 5g，NaS2〇4 lg，NaCl lg，MgCl2 0.5g,水 100mL，用 1M NaOH或 1M HC1 將pH調(diào)節(jié)至7·5-8·5。
[0057]乳酸菌種子培養(yǎng)基組成：牛肉膏l(xiāng)g，蛋白胨lg，酵母膏0.4g，葡萄糖2g，鹿糖lg，乙 酸鈉〇.5g，檸檬酸銨0.2g，K2HP〇4 0.08g，MgS〇4*7H20 0.02g，MnS〇4 0.005g，輕質(zhì)碳酸鈣 〇.lg，吐溫80 lml，水lOOmL,用 1M NaOH或 1M HC1 將pH調(diào)節(jié)至6.2。
[0058]酵母菌種子培養(yǎng)基組成:酵母膏l(xiāng)g，蛋白胨2g，葡萄糖2g，水lOOmL，自然pH。
[0059] 混合EM菌發(fā)酵培養(yǎng)基：黃腐酸0.5g，酵母膏0.64g，尿素 0.18g，味精0.09g，NaCl 0.09g，香菇粉0.125g，KH2P〇4 0.31g，輕質(zhì)CaC03 1.5g，紅糖5.6g，自然pH。
[0060] 實施例1
[0061] 步驟a、海洋假交替單胞菌培養(yǎng)：
[0062]以上已將海洋假交替單胞菌的發(fā)酵液制備出。
[0063] 步驟b、混合EM菌培養(yǎng)：
[0064] 取上述制備的芽孢桿菌、光合細菌、酵母菌及乳酸菌四種菌種的種子液，分別以 0.4%、0.6%、0.4%、0.6%的v/v接種量接種到混合EM菌發(fā)酵培養(yǎng)基中，在150rpm，30°C條 件下，500L發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)72小時。
[0065] 步驟c、將海洋假交替單胞菌發(fā)酵液和EM菌發(fā)酵液混合，按照2 % v/w的接種量接種 (海洋假交替單胞菌發(fā)酵液與EM菌發(fā)酵液的接種比例為1:1.5)到餌料中（餌料配方1 )，調(diào)整 水分含量為42%?；旌暇鶆蚝笱b入25kg有單向空氣閥的塑封袋中25°C厭氧發(fā)酵7天。
[0066] 步驟d、當發(fā)酵餌料出現(xiàn)水汽，手觸摸略帶溫熱，餌料發(fā)出鮮香、有香濃的酒曲和酸 味時，發(fā)酵餌料制備完成。
[0067] 餌料配方1:
[0068]脫膠海帶粉32 %，馬尾藻粉20 %，海青粉20%，玉米粉6 %，破壁酵母粉5 %，發(fā)酵豆 柏4 %，蝦粉4 %，預混料3 %，魚粉3 %，扇貝邊粉2 %，紅糖1 %。
[0069]餌料發(fā)酵后感官指標見表1-1，理化及微生物指標見表1-2:
[0070]表1-1.實施例1餌料1發(fā)酵后感官評定結果
[0071]
[0072]
[0073]
[0074]
[0075] 實施例2
[0076] 步驟a、海洋假交替單胞菌培養(yǎng)：
[0077] 以上已將海洋假交替單胞菌的發(fā)酵液制備出。
[0078] 步驟b、混合EM菌培養(yǎng)：
[0079] 取上述制備的芽孢桿菌、光合細菌、酵母菌及乳酸菌四種菌種的種子液，分別以 0.4%、0.6%、0.4%、0.6%v/v的接種量接種到混合EM菌發(fā)酵培養(yǎng)基中，在180rpm，30°C條 件下，500L發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)80小時。
[0080] 步驟c、將海洋假交替單胞菌發(fā)酵液和EM菌發(fā)酵液混合，按照2 % v/w的接種量接種 (海洋假交替單胞菌發(fā)酵液與EM菌發(fā)酵液的比例為1:2)到餌料(餌料配方2)中，調(diào)整水分含 量為45%?；旌暇鶆蚝笱b入25kg有單向空氣閥的塑封袋中30°C厭氧發(fā)酵5天。
[0081 ]步驟d、當發(fā)酵餌料出現(xiàn)水汽，手觸摸略帶溫熱，館料發(fā)出鮮香、有香濃的酒曲和酸 味時，發(fā)酵餌料制備完成。
[0082] 餌料配方2:
[0083]脫膠海帶粉35%，馬尾藻粉17%，海青粉20%，玉米粉6%，破壁酵母粉5%，發(fā)酵豆 柏4 %，蝦粉4 %，預混料3 %，魚粉3 %，扇貝邊粉2 %，紅糖1 %。
[0084] 餌料發(fā)酵前后感官指標見表2-1，理化及微生物指標見表2-2:
[0085] 表2-1.實施例2餌料2發(fā)酵后的感官評定結果
[0086]
[0087]表2-2.實施例2餌料2發(fā)酵后理化及微生物評定結果
[0088]
[0089] 實施例3
[0090] 步驟a、海洋假交替單胞菌培養(yǎng)：
[0091 ]以上已將海洋假交替單胞菌的發(fā)酵液制備出。
[0092] 步驟b、混合EM菌培養(yǎng)：
[0093] 取上述制備的芽孢桿菌、光合細菌、酵母菌及乳酸菌四種菌種的種子液，分別以 0.6%、0.9%、0.6%、0.9% v/v的接種量接種到混合EM菌發(fā)酵培養(yǎng)基中，在180rpm，30 °C條 件下，500L發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)72小時。
[0094] 步驟c、將海洋假交替單胞菌和EM菌混合，按照3 % v/w的接種量接種(海洋假交替 單胞菌與EM菌的比例為1:2.5)到餌料(餌料配方3)中，調(diào)整水分含量為48%?；旌暇鶆蚝笱b 入25kg有單向空氣閥的塑封袋中35°C厭氧發(fā)酵3天。
[0095] 步驟d、當發(fā)酵餌料出現(xiàn)水汽，手觸摸略帶溫熱，餌料發(fā)出鮮香、有香濃的酒曲和酸 味時，發(fā)酵餌料制備完成。
[0096] 餌料配方3:
[0097]脫膠海帶粉40 %，馬尾藻粉16 %，海青粉16%，玉米粉6 %，破壁酵母粉5 %，發(fā)酵豆 柏4 %，蝦粉4 %，預混料3 %，魚粉3 %，扇貝邊粉2 %，紅糖1 %。
[0098] 餌料發(fā)酵前后感官指標見表3-1，理化及微生物指標見表3-2:
[0099] 表3-1.實施例3餌料3發(fā)酵后的感官評定結果
[0100]
[0101 ]表3-2.實施例3餌料3發(fā)酵后理化及微生物評定結果
[0102]
[0103] 對比例1
[0104] 所有的步驟與實施例1相同，唯一不同的是將海洋假交替單胞菌換為中國微生物 保藏庫中的CCREMSDMCC210291-海洋假交替單胞菌，餌料發(fā)酵前后感官指標見表4-1，理化 及微生物指標見表4-2:
[0105] 表4-1.對比例1餌料發(fā)酵前后的感官評定結果
[0106]
[0107] 表4-2.對比例1餌料發(fā)酵前后理化及微生物評定結果
[0108]
[0109]
【主權項】
1. 一種海參生物發(fā)酵餌料的制備方法，其特征在于：將海洋假交替單胞菌 (Pseudoal teromonas)、混合EM菌接種到t耳料中25-35 °C厭氧發(fā)酵3-7天;其中混合EM菌由芽 抱桿菌(Bacillus)、光合細菌(Photosynthetic Bacteria，PSB)、酵母菌(Yeast)及乳酸菌 (Lactobacillus)組成。2. 根據(jù)權利要求1所述的海參生物餌料的制備方法，其特征在于:所述餌料按照質(zhì)量百 分數(shù)由32~40 %脫膠海帶粉，16~20 %馬尾藻粉，16~20 %海青粉，6 %玉米粉，5 %破壁酵 母粉，4 %發(fā)酵豆柏，4 %蝦粉，3 %預混料，3 %魚粉，2 %扇貝邊粉，1 %紅糖組成。3. 根據(jù)權利要求1所述的海參生物餌料的制備方法，其特征在于包括以下步驟： 步驟a、海洋假交替單胞菌的培養(yǎng):將斜面上保存的菌種接種到種子培養(yǎng)基中，160rpm， 28 °C搖床培養(yǎng)18-20小時，取種子液，以2 % -3 %的接種量接到發(fā)酵培養(yǎng)基中，160rpm，28 °C 搖床培養(yǎng)24-30小時，0D600值為0.8~1.1; 步驟b、混合EM菌培養(yǎng):混合EM菌包括芽孢桿菌、光合細菌、酵母菌及乳酸菌； 芽孢桿菌培養(yǎng)后種子液中，0D600值為0.8~1.1; 光合細菌培養(yǎng)后種子液中，0D600值為0.8~1.1; 酵母菌培養(yǎng)后種子液中，0D600值為0.8~1.1; 乳酸菌培養(yǎng)后種子液中，0D600值為0.8~1.1; 取上述四種接種后的菌種的種子液，分別以0.4-0.6%、0.6-0.9%、0.4-0.6%、0.6- 0.9%的體積比接種量接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中，在150-180rpm，30°C條件下，在500L發(fā)酵罐發(fā) 酵培養(yǎng)72小時； 步驟c、將海洋假交替單胞菌發(fā)酵液和EM菌發(fā)酵液混合，按照2%-3%的接種量接種到 餌料中，加水調(diào)整水分含量為38%-50%;混合均勻后裝入25kg塑封袋中25-35°C厭氧發(fā)酵 3-7天;其中，海洋假交替單胞菌發(fā)酵液與EM菌發(fā)酵液接種體積比為1:1.5~3; 步驟d、當發(fā)酵餌料出現(xiàn)水汽，手觸摸溫熱，餌料發(fā)出鮮香、有香濃的酒曲和酸味時，發(fā) 酵餌料制備完成。4. 根據(jù)權利要求3所述的海參生物發(fā)酵餌料的制備方法，其特征在于，在步驟c中，將菌 液與水混合均勻后，再將水與餌料混合、攪拌。
【文檔編號】A23K10/18GK106036198SQ201610356459
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年5月25日
【發(fā)明人】王際輝, 肖珊, 王晗, 郭航, 張?zhí)烊?
【申請人】大連工業(yè)大學