專利名稱：磷酸二酯酶抑制劑及其用途的制作方法
本申請請求保護(hù)1999年4月30日提交的臨時專利申請第60／132，036號的利益。
本發(fā)明涉及高選擇性的磷酸二酯酶(PDE)抑制劑及其在藥物制品中的應(yīng)用。具體地說，本發(fā)明涉及環(huán)鳥苷3’，5’-一磷酸特異性磷酸二酯酶5型(PDE5)的強(qiáng)抑制劑，當(dāng)它們被加入到藥物產(chǎn)品中時，可以用于治療性機(jī)能障礙。本文所述制品的特征在于選擇性PDE5抑制，并由此提供了在需要抑制PDE5的醫(yī)療領(lǐng)域的益處，同時最大限度地減小或消除了因其他磷酸二酯酶的抑制而引起的副作用。
環(huán)鳥苷3’，5’-一磷酸特異性磷酸二酯酶(cGMP-特異性PDE)抑制劑的生化、生理和臨床作用提示了它們在需要對平滑肌、腎臟、止血、炎癥、和／或內(nèi)分泌功能進(jìn)行調(diào)節(jié)的各種疾病狀態(tài)中的功用．5型cGMP-特異性磷酸二酯酶(PDE5)是血管平滑肌中的主要cGMP水解酶，并已報道了其在陰莖海綿體中的表達(dá)(Taher等，泌尿?qū)W雜志149285A(1993))。因此，PDE5在性機(jī)能障礙的治療中是一個引人注意的目標(biāo)(Murray，DN&P 6(3)150-56(1993))。
提供PDE5抑制劑的藥物產(chǎn)品是目前可得到的，并以商標(biāo)VIAGRA_在市場上出售。VIAGRA_中的活性成分是sildenafil。該產(chǎn)品是作為一個包括25、50和100mg sildenafil的片劑和包裝插件的制品出售的。該包裝插件使得sildenafil是比其他已知磷酸二酯酶更強(qiáng)的PDE5抑制劑(對PDE1的抑制強(qiáng)80倍，對PDE2、PDE3和PDE4的抑制強(qiáng)1000倍)。已報道sildenafil對抗PDE5的IC50為3nM(未來藥物22(2)，128-143頁(1997))，和3．9 nM(Boolell等，國際陽痿研究雜志8，47-52頁(1996))。據(jù)記載，sildenafil對PDE5的選擇性是PDE3的4000倍，而僅是PDE6的10倍。其對PDE6相對缺乏選擇性，從理論上說是與色覺有關(guān)的異常的基礎(chǔ)。
盡管sildenafil已取得了很大的商業(yè)成功，但其商業(yè)壽命已因其明顯的副作用，包括面頰潮紅(10％發(fā)生率)而變短了。副作用限制了患有視覺異常、高血壓的患者使用sildenafil，最顯著的是，限制了使用有機(jī)硝酸酯的個體(Welds等，美國心臟病學(xué)雜志83(5A)，21(C)-28(C)頁(1999))。
人們相信，服用有機(jī)硝酸酯的病人使用sildenafil會導(dǎo)致臨床血壓的顯著下降，這可能使病人處于危險之中。因此，sildenafil的包裝標(biāo)簽上列出了絕對禁忌癥，禁止其與有機(jī)硝酸酯(例如，硝酸甘油、單硝酸異山梨酯、二硝酸異山梨酯、赤蘚醇四硝酸酯)和其他任何形式的一氧化氮供體聯(lián)合使用，無論是有規(guī)律的還是間歇的，因為sildenafil加強(qiáng)了硝酸酯的降血壓作用。參見C．R．Conti等，美國心臟病學(xué)雜志83(5A)，29C-34C頁(1999)。因此，即使有sildenafil的有效性，也仍然需要尋找用于治療性機(jī)能障礙的改進(jìn)藥物產(chǎn)品。
本發(fā)明提供了一種作為人用藥物的制品，它包含一個包裝插件、一個容器和一種含有選擇性PDE5抑制劑的口服劑型，該選擇性PDE5抑制劑的單位劑量為約1至約20mg／劑型之間。本發(fā)明的有益作用在臨床研究中進(jìn)行了觀察，并發(fā)現(xiàn)符合下列標(biāo)準(zhǔn)的選擇性PDE5抑制劑允許有效地口服給藥約1至約20mg／劑型，而沒有PDE5抑制劑產(chǎn)品通常所需的禁忌癥，諸如對視覺異常的警告。本發(fā)明的選擇性PDE5抑制劑顯示1)對PDE5的抑制比對PDE6的抑制來說，特定PDE5抑制劑的IC50值之間的差異至少是100倍(即，對PDE5的IC50值比對PDE6的IC50值至少小100倍)；2)對PDE5的抑制比對PDE1c的抑制來說，IC50值之間的差異至少是1000倍；和3)IC50值小于10nM。
臨床研究還明顯地揭示可以提供使易感個體出現(xiàn)潮紅的趨勢減小的有效產(chǎn)品。最意想不到的是，該產(chǎn)品給藥后，臨床上只有低微的、與PDE5抑制劑與有機(jī)硝酸酯的合并效用有關(guān)的副作用。因此，當(dāng)如本文中所述，使用如上定義的選擇性PDE5抑制劑時，從前認(rèn)為含有PDE5抑制劑的產(chǎn)品必然有的禁忌癥就不再是必需的了。于是，本發(fā)明對于以前不能治療的或者苦于不可接受的副作用的、患有性機(jī)能障礙的個體提供了有效的治療，包括患有心血管疾病的個體諸如需要硝酸酯治療的個體，性機(jī)能障礙治療開始前已患心肌梗塞3個月以上的個體，和患有紐約心臟協(xié)會(NYHA)定義的1類充血性心力衰竭的個體，或者患有視覺異常的個體。
本發(fā)明提供了一種作為人用藥物的制品，它包含一個包裝插件、一個容器和一種含有約1至約20mg選擇性PDE5抑制劑／劑型的口服劑型。
本發(fā)明還提供了對需要抑制PDE5的疾病的治療方法，該方法包含給予需要這種治療的患者含有約1至約20mg選擇性PDE5抑制劑的口服劑型，根據(jù)需要，每天的總劑量不超過20mg。本發(fā)明還提供了包含劑量為約1至約20mg的選擇性PDE5抑制劑的口服劑型在治療性機(jī)能障礙中的用途。
可以用本發(fā)明的方法和制品進(jìn)行治療的具體疾病包括，但不限于男性勃起機(jī)能障礙和女性性機(jī)能障礙，特別是女性覺醒障礙，也稱為女性性喚起障礙。
具體而言，本發(fā)明提供一種人類藥用制品，它包含(a)包含約1至約20mg選擇性PDE5抑制劑的口服劑型，所述選擇性PDE5抑制劑具有(ⅰ)對PDE5的抑制比對PDE6的抑制來說，IC50值的差異至少是100倍；(ⅱ)對PDE5的抑制比對PDE1c的抑制來說，IC50值的差異至少是1000倍；(ⅲ)IC50值小于10nM，和(ⅳ)足夠的生物有效性以在約1至約20mg單位口服劑量時是有效的；(b)一個包裝插件，它提供了該P(yáng)DE5抑制劑可用于治療需要這種治療的患者的性機(jī)能障礙，并且沒有與有機(jī)硝酸酯給藥相關(guān)的矛盾；和(c)一個容器。
本發(fā)明還提供一種人類藥用制品，它包含(a)包含約1至約20mg選擇性PDE5抑制劑的口服劑型，所述選擇性PDE5抑制劑具有(ⅰ)對PDE5的抑制比對PDE6的抑制來說，IC50值的差異至少是100倍；(ⅱ)對PDE5的抑制比對PDE1c的抑制來說，IC50值的差異至少是1000倍；(ⅲ)IC50值小于10nM，和(ⅳ)足夠的生物有效性以在約1至約20mg單位口服劑量時是有效的；(b)一個包裝插件，它提供了該P(yáng)DE5抑制劑可用于治療需要這種治療的患者的性機(jī)能障礙，并且該患者正使用有機(jī)硝酸酯；和(c)一個容器。
本發(fā)明還提供一種人類藥用制品，它包含(a)包含約1至約20mg選擇性PDE5抑制劑的口服劑型，所述選擇性PDE5抑制劑具有(ⅰ)對PDE5的抑制比對PDE6的抑制來說，IC50值的差異至少是100倍；(ⅱ)對PDE5的抑制比對PDE1c的抑制來說，IC50值的差異至少是1000倍；(ⅲ)IC50值小于10nM，和(ⅳ)足夠的生物有效性以在約1至約20mg單位口服劑量時是有效的；(b)一個包裝插件，它提供了該P(yáng)DE5抑制劑可用于治療需要這種治療的患者的性機(jī)能障礙，并且該患者還患有選自下列的疾病視網(wǎng)膜疾病、傾向潮紅、傾向視覺異常、1類充血性心力衰竭、性機(jī)能障礙治療開始前患有心肌梗塞90天或更久、以及它們的組合；(c)一個容器。
為了本文中所公開和描述的本發(fā)明的目的，如下定義下列術(shù)語和簡寫。
術(shù)語“容器”是指適于儲存、裝運(yùn)、分裝、和／或處理藥物產(chǎn)品的任何容器和其封閉物。
術(shù)語“IC50”是化合物抑制特定PDE酶(例如PDE1c，PDE5或PDE6)的效能的量度。IC50是在單一劑量應(yīng)答實驗中，產(chǎn)生50％酶抑制的化合物的濃度。確定化合物的IC50值可以容易地用已知的體外方法進(jìn)行，該方法具體描述在Y．Cheng等，生化藥物學(xué)22，3099-3108頁(1973)中。
術(shù)語“包裝插件”是指產(chǎn)品隨附的信息，它提供了怎樣給藥該產(chǎn)品的說明，以及允許醫(yī)師、藥劑師和病人作出有關(guān)使用該產(chǎn)品的有依據(jù)的決定所必需的安全和效能資料。包裝插件一般視作藥物產(chǎn)品的“標(biāo)簽”。
術(shù)語“口服劑型”在一般含義上是指口服給藥的藥物產(chǎn)品。本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的口服劑型包括諸如液體制劑、片劑、膠囊和凝膠膠囊劑(gelcaps)。
術(shù)語“選擇性PDE5抑制劑”定義為具有下列特點的PDE5抑制劑1)對PDE5抑制的IC50值比對PDE6抑制的IC50值小至少100倍；2)對PDE5抑制的IC50值比對PDE1c抑制的IC50值小至少1000倍；和3)PDE5抑制的IC50值小于10nM。選擇性PDE5抑制劑的化學(xué)結(jié)構(gòu)有多種變化，而它們在本發(fā)明中的用途并不依賴于化學(xué)結(jié)構(gòu)，而是依賴于本文中公開的選擇性和效能參數(shù)。
術(shù)語“視覺異?！笔侵覆徽５囊曈X，其特征是被認(rèn)為由PDE6抑制引起的藍(lán)-綠幻視。
術(shù)語“潮紅”是指因攝取藥物而引起的血管舒張導(dǎo)致的面部和頸部發(fā)作式發(fā)紅，通常伴隨有整個面部和頸部的發(fā)熱感，有時還伴隨出汗。
術(shù)語“游離藥物”是指沒有緊密地嵌入高分子共沉淀中的藥物的固體顆粒。
如前所述，本發(fā)明涉及一種作為人用藥物的制品，它包含一個包裝插件、一個容器和一種含有約1至約20mg選擇性PDE5抑制劑／單位劑型的劑型。用于本發(fā)明的選擇性PDE5抑制劑是具有下列特點的PDE5抑制劑1)對PDE5的抑制比對PDE6的抑制來說，IC50值之間的差異至少是100倍；
2)對PDE5的抑制比對PDE1c的抑制來說，IC50值之間的差異至少是1000倍；和3)IC50值小于10nM；并且在約1至約20mg單位劑量時是足夠生物學(xué)有效的。
差異表示為IC50值的PDE6／PDE5比值，即，對PDE6的IC50值與對PDE5的IC50值的比值(PDE6／PDE5)大于100，更優(yōu)選大于300，最優(yōu)選大于500。
與此類似，對PDE1c的IC50值與對PDE5的IC50值的比值(PDE1c／PDE5)大于1000。優(yōu)選的PDE5抑制劑在對PDE5和PDE1c的抑制之間的差異大于3000倍，更優(yōu)選對PDE5和PDE1c的IC50值之間的差異大于5000倍。用對PDE5的IC50值表示的抑制劑的效能小于10nM，優(yōu)選小于5nM，更優(yōu)選小于2nM，最優(yōu)選小于1nM。
包裝插件提供了怎樣給藥藥物產(chǎn)品的說明，以及允許醫(yī)師、藥劑師和病人作出有關(guān)使用該產(chǎn)品的有依據(jù)的決定所必需的安全和效能資料。包裝插件一般視作藥物產(chǎn)品的標(biāo)簽。加入到本發(fā)明制品中的包裝插件指示該選擇性PDE5抑制劑是用于治療需要抑制PDE5的疾病。該包裝插件還提供了說明，允許根據(jù)需要給藥一個或多個約1至約20mg的單位劑型，直到每天的最大總劑量為20mg。根據(jù)需要，優(yōu)選給藥劑量為約5至約20mg／天，更優(yōu)選為約5至約15mg／天，最優(yōu)選為約5mg或約10mg劑型，每天給藥一次。
優(yōu)選的治療疾病包括性機(jī)能障礙(包括男性勃起機(jī)能障礙和女性女性性機(jī)能障礙，更優(yōu)選女性覺醒障礙(FAD))。優(yōu)選的治療疾病是男性勃起機(jī)能障礙。
值得注意的是，該包裝插件支持該產(chǎn)品用于治療患有視網(wǎng)膜疾病、例如糖尿病性視網(wǎng)膜病或色素性視網(wǎng)膜炎的患者，和正使用有機(jī)硝酸酯的患者的性機(jī)能障礙。因此，該包裝插件優(yōu)選沒有與這些疾病有關(guān)的、特別是與有機(jī)硝酸酯一起給藥該劑型有關(guān)的禁忌癥。更優(yōu)選的是，該包裝插件也沒有與視網(wǎng)膜疾病、特別是色素性視網(wǎng)膜炎有關(guān)的，和與有視覺異常傾向的個體有關(guān)的任何警示或警告。優(yōu)選該包裝插件還報道了給藥該劑型的病人出現(xiàn)潮紅的發(fā)生率低于2％，優(yōu)選低于1％，最優(yōu)選低于0．5％。潮紅的發(fā)生率證明了其比先前的含有PDE5抑制劑的藥物產(chǎn)品有顯著改善。
本發(fā)明制品中所用的容器是制藥領(lǐng)域中常用的。一般說來，該容器是一種泡面包裝、箔包、玻璃或塑料瓶以及相伴的蓋子或封閉物，或者其他適于病人或藥劑師使用的這種用品。優(yōu)選的是，該容器的大小可容納1至1000個固體劑型，優(yōu)選可容納1至500個固體劑型，最優(yōu)選可容納5至30個固體劑型。
口服劑型是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的，包括例如液體制劑、片劑、膠囊和凝膠膠囊劑。優(yōu)選該劑型為固體劑型，特別是含有約1至約20mg選擇性PDE5抑制劑的片劑。任何用于口服使用的藥學(xué)上可接受的賦形劑均適于制備這樣的劑型。合適的藥物劑型包括例如在Butler的美國專利5，985，326中描述的共沉淀劑型，該專利結(jié)合在此引為參考。在優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明的單位劑型是不含共沉淀形式的PDE5抑制劑的固體，而是含有作為游離藥物的固體PDE5抑制劑。
優(yōu)選的是，片劑包含通常認(rèn)為是安全的藥物賦形劑，諸如乳糖、微晶纖維素、淀粉、碳酸鈣、硬脂酸鎂、硬脂酸、滑石、和膠體二氧化硅，并用如Remington’s藥物科學(xué)，第十八版，Mack出版公司，Easton，PA(1990)中描述的標(biāo)準(zhǔn)藥物制造技術(shù)制備。這樣的技術(shù)包括，例如濕法制粒，然后干燥、研磨，壓縮成有或沒有包衣膜的片劑；干法制粒，然后研磨，壓縮成有或沒有包衣膜的片劑；干燥混合，然后壓縮成有或沒有包衣膜的片劑；模制片劑；濕法制粒、干燥并填充到明膠膠囊中；干燥混合，填充到明膠膠囊中；或者將懸液和溶液填充到明膠膠囊中。一般說來，固體劑型的表面上有凹凸或銘刻的識別標(biāo)記。
本發(fā)明是基于詳細(xì)的實驗和臨床試驗，以及意想不到的觀察結(jié)果以前被認(rèn)為指示PDE5抑制的副作用可以通過選擇本文中描述的具有特異性特性的選擇性PDE5抑制劑而臨床上顯著水平地降低。所述選擇性PDE5抑制劑的特異性特性就是1)對PDE5的抑制比對PDE6的抑制來說，IC50值之間的差異至少是100倍；2)對PDE5的抑制比對PDE1c的抑制來說，IC50值之間的差異至少是1000倍；和3)PDE5抑制的IC50值小于10nM。
該意想不到的觀察結(jié)果使得能夠開發(fā)一些加入了約1至約20mg單位劑型的選擇性PDE5抑制劑的制品，當(dāng)它們口服給藥時，以前認(rèn)為是不可避免的、不期望的副作用最小。這些副作用包括當(dāng)PDE5抑制劑單獨給藥或與有機(jī)硝酸酯聯(lián)合給藥時，出現(xiàn)面頰潮紅、視覺異常、和血壓顯著下降。本發(fā)明的PDE5抑制劑以約1至約20mg單位劑型給藥，其對PDE6的輕微作用也允許將選擇性PDE5抑制劑給予患有視網(wǎng)膜疾病如糖尿病性視網(wǎng)膜病或色素性視網(wǎng)膜炎的病人。
在Daugan的美國專利5，859，006中公開了一種這樣的選擇性PDE5抑制劑，即，(6R-反式)-6-(1，3-苯并二氧雜環(huán)戊烯-5-基)-2，3，6，7，12，12a-六氫-2-甲基吡嗪并[1’，2’∶1，6]吡啶并[3，4-b]吲哚-1，4-二酮，也命名為(6R，12aR)-2，3，6，7，12，12a-六氫-2-甲基-6-(3，4-亞甲二氧基苯基)吡嗪并[2’，1’∶6，1]吡啶并[3，4-b]吲哚-1，4-二酮，它由結(jié)構(gòu)式(Ⅰ)表示 在人的臨床研究中證明式(Ⅰ)化合物與有機(jī)硝酸酯聯(lián)合給藥時，對收縮血壓產(chǎn)生的影響非常小。與之相比，sildenafil與硝酸酯一起給藥時，與安慰劑相比，其使收縮血壓降低了4倍，這導(dǎo)致了VIAGRA_插件中的禁忌癥，和對某些病人的警告。
選擇性PDE5抑制劑的化學(xué)結(jié)構(gòu)有很多變化，如本發(fā)明中定義的選擇性PDE5抑制劑的用途并不依賴于特定化學(xué)結(jié)構(gòu)，而是依賴于本文中公開的決定性參數(shù)。不過，優(yōu)選的具有所需效能和選擇性的化合物可以容易地用本文中描述的試驗來確定，所述試驗來自Daugan的美國專利5，859，006、Daugan等的美國專利5，981，527和Daugan等的美國專利6，001，847中的記載，這幾篇文獻(xiàn)均引入在此作為參考。
Daugan的美國專利5，859，006和Daugan等的美國專利5，981，527中的優(yōu)選化合物是由結(jié)構(gòu)式(Ⅱ)表示的 其中R0選自氫、鹵素和C1-6烷基；R1選自氫，C1-6烷基，C2-6鏈烯基，C2-6炔基，鹵代C1-6烷基，C3 -8環(huán)烷基，C3-8環(huán)烷基C1-3烷基，芳基C1-3烷基，其中芳基是苯基或被選自鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、亞甲二氧基、及其混合物的1-3個取代基取代的苯基，和雜芳基C1-3烷基，其中雜芳基是噻吩基、呋喃基、或吡啶基，各自可選地被選自鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基及其混合物的1-3個取代基取代；R2代表選自苯、噻吩、呋喃和吡啶的可選地取代的單環(huán)芳環(huán)，或者可選地取代的雙環(huán) 該雙環(huán)經(jīng)一個苯環(huán)上的碳原子與分子的其余部分相連，且其中稠環(huán)A是一個5元或6元環(huán)、飽和或部分不飽和或完全不飽和、包含碳原子和可選的1或2個雜原子，所述雜原子選自氧、硫和氮；R3代表氫或C1-3烷基，或者R1和R3一起表示一個3或4個成員的烷基或鏈烯基鏈；及其鹽和溶劑化物。
其他優(yōu)選的化合物是式(Ⅱ)表示的、符合下列條件的那些，其中R0是氫、鹵素或C1-6烷基；R1是氫或C1-6烷基；R2是雙環(huán) 該雙環(huán)可以可選地被選自鹵素和C1-3烷基的一個或多個基團(tuán)取代；和R3是氫或C1-3烷基。
下表1說明了美國專利5，859，006中公開的典型選擇性PDE5抑制劑的PDE5和PDE6 IC50值，是用本文中描述的方法測定的。 表1中的化合物5具有結(jié)構(gòu)式(Ⅰ)，并且另外還證明了其對PDE1c的IC50為10000，PDE1c／PDE5的比值為4000。
表1中的化合物1-5的結(jié)構(gòu)如結(jié)構(gòu)式(Ⅱ)所表示，其中R0、R1、R2和R3如下 表1中的數(shù)據(jù)表明，其中R1是氫或C1-6烷基、R2是 R3是氫的結(jié)構(gòu)式(Ⅰ)化合物是尤為優(yōu)選的。優(yōu)選的是，A為 優(yōu)選的化合物是(6R，12aR)-2，3，6，7，12，12a-六氫-2-甲基-6-(3，4-亞甲二氧基苯基)吡嗪并[2’，1’∶6，1]吡啶并[3，4-b]吲哚-1，4-二酮；和(3S，6R，12aR)-2，3，6，7，12，12a-六氫-2，3-二甲基-6-(3，4-亞甲二氧基苯基)吡嗪并[2’，1’∶6，1]吡啶并[3，4-b]吲哚-1，4-二酮；及其生理學(xué)上可接受的鹽和溶劑化物(例如水合物)。
用于本發(fā)明的其他示范性化合物是Daugan等的美國專利6，001，847和WO 97／43287中公開的那些，該文獻(xiàn)引入在此作為參考。
PCT申請PCT／EP98／06050中公開了用于本發(fā)明的其他示范性化合物，該申請指定了美國，名稱為“化合物”，發(fā)明人是A．Bombrun和F．Gellibert，其公開內(nèi)容具體地引入在此作為參考。這類化合物具有結(jié)構(gòu)式(Ⅲ) 及其鹽和溶劑化物(例如水合物)，其中C代表一個5元或6元雜芳基，它含有至少一個選自氧、氮和硫的雜原子；R12代表氫或鹵素；R13選自下列基團(tuán)氫；硝基(NO2)；三氟甲基；三氟甲氧基；鹵素；氰基(CN)；一個5元或6元雜環(huán)基團(tuán)，它含有至少一個選自氧、氮和硫的雜原子，可選地被C(=O)ORa或C1-4烷基取代；可選地被ORh取代的C1-6烷基；C1-3烷氧基；C(=O)Rh；OC(=O)ORh；C(=O)ORh；C1-4亞烷基Het；C1-4亞烷基C(=O)ORh；OC1-4亞烷基C(=O)ORh；C1-4亞烷基OC1-4亞烷基C(=O)ORh；C(=O)NR1SO2Rj；C(=O)C1-4亞烷基Het；C1 -4亞烷基NRhRi；C2-6亞烯基NRhRi；C(=O)NRhRi；C(=O)NRhC1-4亞烷基ORi；C(=O)NRhC1-4亞烷基Het；ORi；OC2-4亞烷基NRhRi；OC1-4亞烷基CH(ORh)CH2NRhRi；OC1-4亞烷基Het；OC2-4亞烷基ORh；OC2-4亞烷基NRhC(=O)ORh；NRhRi；NRhC1-4亞烷基NRhRi；NRhC(=O)Ri；NRhC(=O)NRhRi；N(SO2C1-4烷基)2；NRh(SO2C1-4烷基)；SO2NRhRi；和OSO2三氟甲基；R14選自氫、鹵素、ORh、C1-6烷基、NO2和NRhRi；或者R13和R14一起形成一個5元或6元環(huán)上的一個3碳或4碳亞烷基或亞烯基鏈組分，所述5元或6元環(huán)可選地含有至少一個雜原子；R15選自氫、鹵素、NO2、三氟甲氧基、C1-6烷基、OC1-6烷基、和C(=O)ORh；R16是氫；或者R15和R16一起形成一個5元或6元環(huán)上的一個3碳或4碳亞烷基或亞烯基鏈組分，所述5元或6元環(huán)可選地含有至少一個雜原子；Het代表5元或6元雜環(huán)基，它含有至少一個選自氧、氮和硫的雜原子，并可選地被C1-4烷基取代；Rh和Ri可以是相同或不同的，獨立地選自氫和C1-6烷基；Rj代表苯基或C4-6環(huán)烷基，其中該苯基或C4-6環(huán)烷基可以可選地被一個或多個鹵原子、一個或多個C(=O)ORh、或者一個或多個ORh取代；n是整數(shù)1、2或3；和m是整數(shù)1或2。
制劑人PDE5制劑人PDE5的重組生產(chǎn)基本上按照美國專利5，702，936中的實施例7所述進(jìn)行，該專利引入在此作為參考，只是所用的、從V．Price等，酶學(xué)方法學(xué)，1985，308-318頁(1990)中描述的堿性ADH2質(zhì)粒衍生的酵母轉(zhuǎn)化載體中摻入酵母ADH2啟動子和終止序列而不是ADH1啟動子和終止序列，并且釀酒酵母宿主是1998年8月31日在美國典型培養(yǎng)物保藏中心，Manassas，Vriginia保藏的蛋白酶缺損菌株BJ2-54，其保藏號為ATCC 74465。轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞在2X SCleu培養(yǎng)基，pH6．2，中生長，該培養(yǎng)基中加有痕量金屬和維生素。24小時后，加入含有甘油的YEP培養(yǎng)基，使終濃度為2X YEP／3％甘油。大約24小時后，收獲細(xì)胞、洗滌、并儲存于-70℃下。
細(xì)胞顆粒(29g)用等體積的裂解緩沖液(25mM Tris-C1，pH8，5mMMgCl2，0．25mM二硫蘇糖醇，1mM苯甲脒，和10μM ZnSO4)在冰上融解。這些細(xì)胞在帶有N2的微量流化器(microfluidizer)中在20，000psi下裂解。裂解液離心并通過0．45μm一次性濾紙過濾。將濾液加入到150mL Q瓊脂糖快速流動柱(Pharmacia)上。該柱用1．5體積的緩沖液A(20mM Bis-Tris丙烷，pH6．8，1mM MgCl2，0．25mM二硫蘇糖醇，10μM ZnSO4)洗滌，并用存在于緩沖液A中的125mM NaCl進(jìn)行分級梯度洗脫，接著用存在于緩沖液A中的125-1000mM NaCl進(jìn)行線性梯度洗脫。
從線性梯度洗脫的活性級分加入到在緩沖液B(20mM Bis-Tris丙烷(pH6．8)，1mM MgCl2，0．25mM二硫蘇糖醇，10μM ZnSO4和250mMKCl)中的180mL羥基磷灰石柱上。加載完后，該柱用2體積的緩沖液B洗滌，并用存在于緩沖液B中的0-125mM磷酸鉀線性梯度洗脫。將活性級分合并，用60％硫酸銨沉淀，并再懸浮于緩沖液C(20mMBis-Tris丙烷，pH6．8，125mM NaCl，0．5mM二硫蘇糖醇，和10μMZnSO4)中。將該合并液加入到140mL Sephacryl S-300 HR柱上，用緩沖液C洗脫。將活性級分稀釋到50％甘油并在-20℃下儲存。用SDS-PAGE檢驗，所得制劑純度約為85％。
PDE活性測定PDE5的活性可以用本領(lǐng)域中的標(biāo)準(zhǔn)測試法測定。例如，可以如下確定任何PDE的比活性。利用木炭分離技術(shù)的PDE測定基本上按照Loughney等，(1996)，生物化學(xué)雜志271796-806中的描述進(jìn)行。在該測定中，PDE5活性將[32P]cGMP轉(zhuǎn)換為[32P]5’GMP，這種轉(zhuǎn)換與所存在的PDE5活性的量成比例。然后利用蛇毒5’-核苷酸酶的作用將[32P]5’GMP定量地轉(zhuǎn)換為游離[32P]磷酸鹽和未標(biāo)記的腺苷。于是，游離的[32P]磷酸鹽與酶活性成比例。該測定在30℃下，在含有(終濃度)40mM Tris-Cl(pH8．0)，1μM ZnSO4，5mM MgCl2和0．1mg／mL牛血清白蛋白的100μL反應(yīng)混合物中進(jìn)行。PDE5大量存在，使得底物的水解小于總量的30％(線性測定條件)．該測定通過加入底物(1mM[32P]cGMP)引發(fā)，且該混合物培養(yǎng)12分鐘。然后加入75μg大響尾蛇毒液，并繼續(xù)再培養(yǎng)3分鐘(總共15分鐘)。加入200mL活性炭(25mg／mL懸浮于0．1M NaH2PO4，pH4)使反應(yīng)終止。離心(750×g，3分鐘)沉淀出炭后，上清液樣品在閃爍計數(shù)器中進(jìn)行放射性測定，并計算PDE5活性。這些制劑具有約3μmol水解的cGMP／分鐘／mg蛋白質(zhì)的比活性。
牛PDE6制劑牛PDE6由Dr．N．Virmaux，INSERM U338，Strasbourg提供。如Virmaux等，歐洲生化學(xué)會聯(lián)合會通訊12(6)，325-328頁(1971)中所述處理牛視網(wǎng)膜，同時參考A．Sitaramayya等，實驗眼研究25，163-169頁(1977)。簡言之，除非另有說明，否則所有操作均在寒冷條件下，在暗淡的紅燈下進(jìn)行。使眼睛保持在寒冷和黑暗中，直到動物處死后4個小時。
牛視網(wǎng)膜外節(jié)段(ROS)的制備基本上按照Schichi等，生物化學(xué)雜志224529(1969)中描述的方法進(jìn)行。在一個典型的實驗中，35個牛視網(wǎng)膜在乳缽中用35mL 0．066M磷酸鹽緩沖液，pH7．0研磨，該磷酸鹽緩沖液用蔗糖制成40％，接著在波特氏勻漿器中勻化(上下沖打20次)。該懸浮液以25000×g離心20分鐘。顆粒用7．5mL 0．006M磷酸鹽緩沖液(40％蔗糖溶液)勻化，并在7．5mL磷酸鹽緩沖液(不含蔗糖)下小心地分層。在一個旋出式轉(zhuǎn)頭中以45000×g離心20分鐘，并生成顆粒，該顆粒在底部是黑色的，在0．066M磷酸鹽--40％蔗糖／0．066M磷酸鹽的界面上還有一個紅色的帶(粗ROS)。將該界面處的紅色物質(zhì)移開，用磷酸鹽緩沖液稀釋，離心形成沉淀，并重新分配到如上所述的緩沖的40％蔗糖中。該過程重復(fù)2或3次，直到不再形成沉淀。該純化的ROS用磷酸鹽緩沖液洗滌，最后在25000×g下離心20分鐘形成沉淀。然后將所有物質(zhì)冷凍直到使用。
按下述過程制備低滲提取物將分離的ROS懸浮于10mMTris-Cl pH7．5，1mM EDTA和1mM二硫赤蘚糖醇中，然后以100000×g離心30分鐘。
據(jù)報道，該制劑具有約35nmol水解的cGMP／分鐘／mg蛋白質(zhì)的比活性。
從草地夜蛾細(xì)胞(Sf9)制備PDE1c制劑細(xì)胞沉淀(5g)用20ml裂解緩沖液(50mM MOPS pH7．4，10μM ZnSO4，0．1mM CaCl2，1mM DTT，2mM苯甲脒HCl，各5μg／ml的胃蛋白酶抑制劑、亮抑蛋白酶肽和抑蛋白酶肽)在冰上融解。使細(xì)胞通過弗氏壓碎器(SLM-Aminco)而裂解，同時溫度保持10℃以下。所得細(xì)胞勻漿在貝克曼氏超速離心機(jī)中利用T145型轉(zhuǎn)頭以36000rpm在4℃下離心45分鐘。將上清液拋棄，所得沉淀利用帶有微量尖端的VibraCell調(diào)節(jié)器通過超聲處理3×30秒而再懸浮于40ml增溶緩沖液(含有1MNaCl，0．1M MgCl2，1mM CaCl2，20μg／ml鈣調(diào)蛋白和1％磺基甜菜堿SB12(Z3-12)的裂解緩沖液)。該步驟在碎冰／鹽混合物冷卻下進(jìn)行。超聲處理后，該混合物在4℃下緩慢混合30分鐘以增溶膜結(jié)合蛋白質(zhì)。該混合物在貝克曼氏超速離心機(jī)中利用T145型轉(zhuǎn)頭以36000rpm離心45分鐘。上清液用含有10μg／ml鈣蛋白酶抑制劑Ⅰ和Ⅱ的裂解緩沖液稀釋。沉淀的蛋白質(zhì)在貝克曼氏JA-10轉(zhuǎn)頭中以9000rpm離心20分鐘。然后將回收的上清液用于模擬藍(lán)(MimeticBlue)AP瓊脂糖色譜法。
為了流出模擬藍(lán)AP瓊脂糖柱，首先通過應(yīng)用10倍床體積的1％聚乙烯吡咯烷酮(即MW為40000)來阻斷非特異性結(jié)合位點，從而將樹脂保護(hù)起來。通過用10倍床體積的2M NaCl和10mM檸檬酸鈉pH3．4洗滌，除去松散結(jié)合的PVP-40。就在加入增溶的PDE1c樣品之前，該柱用5倍床體積的柱緩沖液A(50mM MOPS pH7．4，10μM ZnSO4，5mMMgCl2，0．1mM CaCl2，1mM DTT，2mM苯甲脒HCl)平衡。
將增溶的樣品以2ml／分鐘的流速加入到柱上，同時再循環(huán)，以使總樣品在12小時內(nèi)加入4-5次。加載完成后，該柱用10倍柱體積的柱緩沖液A洗滌，然后用5倍柱體積的柱緩沖液B(含有20mM5’-AMP的柱緩沖液A)洗滌，接著用5倍柱體積的柱緩沖液C(50mM MOPS pH7．4，10μM ZnSO4，0．1mM CaCl2，1mM二硫蘇糖醇和2mM苯甲脒HCl)洗滌。酶被洗脫成3個連續(xù)的樣品。第一個樣品由以5倍床體積含有1mMcAMP的柱緩沖液C洗脫的酶組成。第二個樣品由以10倍床體積含有1M NaCl的柱緩沖液C洗脫的酶組成。最后一個酶樣品由5倍床體積含有1M NaCl和20mM cAPP的柱緩沖液C的洗出物組成。
將活性酶樣品合并，經(jīng)常規(guī)凝膠過濾色譜法或羥基磷灰石樹脂色譜法除去環(huán)核苷酸。將環(huán)核苷酸除去后，酶樣品用含有25mM MOPSpH7．4，10μM ZnSO4，500mM o，1mM CaCl2，1mM二硫蘇糖醇，1mM苯甲脒HCl的透析緩沖液透析，接著用含有50％甘油的透析緩沖液透析。酶籍助于干冰迅速冷凍，并在-70℃下儲存。
用SDS-PAGE檢驗，所得制劑的純度約大于90％。這些制劑具有約0．1-1．0μmol水解的cAMP／分鐘／mg蛋白質(zhì)的比活性。
IC50值測定在PDE5和／或PDE1c和PDE6的競爭性酶抑制劑效能的評估中，令人感興趣的參數(shù)是抑制常數(shù)，即Ki。該參數(shù)可以通過測定IC50進(jìn)行粗略估計，IC50是在下列條件下進(jìn)行的單一劑量應(yīng)答實驗中，產(chǎn)生50％酶抑制時的抑制劑濃度。
抑制劑的濃度總是遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于酶的濃度，所以用總抑制劑濃度(已知的)近似估計游離抑制劑濃度(是未知的)。
選擇合適的抑制劑濃度的范圍(即，實驗中存在至少數(shù)倍大于和數(shù)倍小于Ki的抑制劑濃度)。典型地，抑制劑濃度范圍從10nM到10μM。
選擇酶和底物的濃度，使沒有抑制劑時小于20％的底物被耗盡(條件是，例如，最大底物水解為10-15％)，于是在整個測定中，酶活性近似恒定。
底物的濃度小于米氏常數(shù)(Km)的十分之一。在這些條件下，IC50將更接近Ki。這是因為與這兩種參數(shù)有關(guān)的Cheng-Prusoff公式IC50=Ki(1+S／Km)，當(dāng)S／Km值低時，(1+S／Km)近似為1。
通過使數(shù)據(jù)符合酶抑制劑相互作用的適宜模型而從數(shù)據(jù)點估計IC50值。當(dāng)已知該相互作用涉及單純的抑制劑與底物的競爭時，可以使用一個二參數(shù)模型Y=A／(1+x／B)其中Y是在抑制劑濃度為x時測得的酶活性，A是沒有抑制劑時的活性，B是IC50。參見Y．Cheng等，生化藥物學(xué)223099-3108(1973)。
本發(fā)明抑制劑對上述PDE5和PDE6制劑的酶活性的作用可以用兩種測試法之一來評估，這兩種測試法之間主要是在所基于的規(guī)模上有不同，但會得到實質(zhì)上相同的IC50值結(jié)果。這兩種測試法均涉及Wells等，生物化學(xué)與生物物理學(xué)學(xué)報384430(1975)所述方法的改進(jìn)。第一種測試是在含有50mM Tris pH7．5，3mM醋酸鎂，1mM EDTA，50μg／mL蛇毒核苷酸酶和50nM[3H]-cGMP(Amersham)的200μl總體積進(jìn)行。將本發(fā)明化合物溶解于DMSO，使其在該測試中最終以2％存在。測試物在30℃下培養(yǎng)30分鐘，并通過加入800μl 10mM Tris pH7．5，10mM EDTA，10mM茶堿，0．1mM腺苷和0．1mM鳥苷使反應(yīng)終止。將該混合物加載到0．5mL QAE交聯(lián)葡聚糖柱上，用2mL 0．1M甲酸鹽(pH7．4)洗脫。洗脫的放射性利用閃爍計數(shù)器在Optiphase Hisafe 3測定。
第二種“微量平板”PDE測試是利用多層篩板和真空歧管進(jìn)行。測試液(100μl)含有50mM Tris pH7．5，5mM醋酸鎂，1mM EDTA和250μg／mL蛇毒核苷酸酶。該反應(yīng)混合物的其他組分如上所述。在培養(yǎng)結(jié)束后，將全部體積的測試液通過過濾加載到QAE交聯(lián)葡聚糖微量柱平板上。游離放射性用200μl水洗脫，洗脫后的50μl等分試樣如上所述利用閃爍計數(shù)器進(jìn)行分析。
下列實施例是為了進(jìn)一步說明本發(fā)明請求保護(hù)的制劑。本發(fā)明的范圍不應(yīng)理解為僅包括下列實施例。
實施例1如美國專利5，959，006中所述制備結(jié)構(gòu)式(Ⅰ)化合物，并利用濕制粒法將其配制成片劑。將聚維酮溶解于水制得10％溶液。將活性化合物、微晶纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉和月桂基硫酸鈉加入到高剪切混合器中，混合2分鐘。粉末用聚維酮溶液和所需的額外的水濕法完全制成顆粒。所得混合物在流化床干燥器中干燥，入口空氣為70℃±5℃，直到干燥損失低于2．5％。將這些顆粒通過一個帶有適宜篩網(wǎng)的Comil并加入到合適的混合器中。將顆粒外的交聯(lián)羧甲基纖維素鈉和月桂基硫酸鈉，以及膠態(tài)無水二氧化硅通過一個合適的篩網(wǎng)(例如500微米)并加入到該混合器中，混合5分鐘。加入硬脂酸鎂并混合2分鐘。該混合物利用9mm圓形標(biāo)準(zhǔn)凹面機(jī)床壓縮至目標(biāo)壓縮程度／重250mg。
該片劑核芯利用Accelacota(或類似的包衣盤)用Opadry OY-S-7322的含水懸液包覆，入口空氣為50℃-70℃，直到片重增加了大約8mg。Opadry OY-S-7322含有甲基羥基丙基纖維素(歐洲藥典標(biāo)準(zhǔn))，二氧化鈦(歐洲藥典)，甘油三乙酸酯USP。Opadry使每片的重量增加至約258mg。每片所用的包衣膜的量可以小于此規(guī)定，這取決于加工的效率。
將這些片劑填充到泡面包裝中，并隨附說明該化合物的安全性和效能的包裝插件。 1)結(jié)構(gòu)式(Ⅰ)化合物。
實施例2用下列配方制備含有10mg結(jié)構(gòu)式(Ⅰ)化合物的成品劑型。 用凈化水，USP制備這些片劑。在加工過程中除去水并使其在成品中保持最小含量。
利用濕制粒法制備片劑。該方法逐步描述如下。將要制粒的藥物和賦形劑安全過篩。選擇性PDE5抑制劑與一水合乳糖(噴霧干燥)、羥丙基纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉和一水合乳糖干態(tài)混合。所得粉末混合物利用Powrex或其他合適的高剪切制粒機(jī)，用羥丙基纖維素和月桂基硫酸鈉的水溶液制粒。可以加入另外的水以達(dá)到預(yù)期終點?？梢允褂媚肽C(jī)去除結(jié)塊的濕顆粒并促進(jìn)干燥。該濕顆粒利用流化床干燥器或干燥箱干燥。該物質(zhì)一旦干燥后，就可進(jìn)行整粒，以去除任何大的團(tuán)塊。將微晶纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉和硬脂酸鎂安全過篩并加入到該干燥的、大小一致的顆粒中。這些賦形劑和干燥顆粒利用翻斗箱、螺條混合機(jī)或其他合適的混合設(shè)備混合均勻。該混合過程可以分成兩個階段。在第一階段，將微晶纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉和干燥顆粒加入該混合機(jī)并進(jìn)行混合，接著向該顆粒中加入硬脂酸鎂進(jìn)行第二階段混合。
然后利用回轉(zhuǎn)式壓縮機(jī)將混合后的顆粒壓縮成片劑。該片劑核芯在包衣盤(例如Accela Cora)中用適宜的彩色混合物的含水懸液包衣。該包衣片劑上可以輕輕地撒上滑石，以改善片劑的加工性能。
將這些片劑填充到塑料容器中(30片／容器)，并隨附說明該化合物的安全性和效能的包裝插件。
實施例3用下列配方制備5mg結(jié)構(gòu)式(Ⅰ)化合物的成品劑型。
實施例3劑型用與實施例2劑型完全相同的方式制備。
實施例4
通過將精確填充體積的預(yù)溶解藥物制劑泵壓到部分密封的膠囊腔中而精確填充明膠膠囊。當(dāng)藥物溶液制劑注入填充完后，立即將膠囊完全加熱密封。
將這些膠囊填充到塑料容器中并隨附包裝插件。
實施例5該研究是一個隨機(jī)的、雙盲的、安慰劑對照的、雙向交叉設(shè)計的臨床藥理學(xué)藥物相互作用研究，它是為了評估選擇性PDE5抑制劑研究藥物(即，結(jié)構(gòu)式(Ⅰ)化合物)和短期作用的硝酸酯共同給藥時對健康男性志愿者的血流動力學(xué)影響。在該研究中，受試者以10mg的劑量接受研究藥物或安慰劑，每天給藥，連續(xù)7天。在第六天或第七天，受試者接受舌下硝酸甘油(0．4mg)，同時仰臥在傾斜手術(shù)臺上。在給予研究藥物后，硝酸甘油給藥3小時，所有受試者將硝酸甘油片劑保持在舌下，直到其完全溶解。每5分鐘，所有受試者頭朝上傾斜70度，共進(jìn)行30分鐘，同時測量血壓和心率。在參加該項研究的22名男性健康受試者(年齡從19到60歲)中沒有中止現(xiàn)象。
在該研究的初步分析中，研究藥物是良好耐受的，并且沒有嚴(yán)重的副反應(yīng)。在實驗室安全評估或12-lead ECGs中，沒有與研究藥物相關(guān)的變化。最常見的副反應(yīng)是頭痛、消化不良和背痛。該研究顯示在所有患者中，對收縮血壓中的平均收縮血壓和硝酸甘油誘導(dǎo)的收縮血壓的平均最大降低值以及硝酸甘油誘導(dǎo)的收縮血壓的最大降低值的影響輕微。
實施例6在兩個隨機(jī)的、雙盲的、安慰劑對照的研究中，在家庭環(huán)境中，結(jié)構(gòu)式(Ⅰ)化合物以一定劑量范圍對需要其的病人給藥，用于性遭遇(sexual encounters)和性交的一日量和即期治療。5-20mg結(jié)構(gòu)式(Ⅰ)化合物是有效的，并證明沒有引起潮紅，也沒有視覺異常的報道。我們發(fā)現(xiàn)，10mg劑量的結(jié)構(gòu)式(Ⅰ)化合物是完全有效的，并證明副作用最小(沒有潮紅，也沒有藍(lán)視癥的報道)。
利用國際勃起功能指數(shù)(IIEF)(Rosen等，泌尿?qū)W49，822-830頁(1997))、性嘗試的每日記錄、和綜合滿意問答來評價勃起功能。結(jié)構(gòu)式(Ⅰ)化合物顯著地改善了所有終點評價的勃起功能。在“即期”和一日量方案中，劑量為1到20mg的結(jié)構(gòu)式(Ⅰ)化合物均顯著改進(jìn)勃起功能。
實施例7第三個臨床研究是利用結(jié)構(gòu)式(Ⅰ)化合物(研究藥物)對患有勃起機(jī)能障礙的男性患者“即期”給藥而進(jìn)行的一個隨機(jī)的、雙盲的、安慰劑對照的研究。在8周內(nèi)給藥研究藥物，治療男性勃起機(jī)能障礙(ED)。勃起機(jī)能障礙(ED)定義為持續(xù)地?zé)o能力達(dá)到和／或保持充分的勃起以獲得令人滿意的性行為。“即期”給藥定義為在預(yù)期性活動之前間斷給藥研究藥物。
研究人數(shù)為212名男性，至少18歲，患有輕度到重度的勃起機(jī)能障礙。研究藥物作為按照Butler的美國專利5，985，326制備的共沉淀片劑口服給藥。研究藥物以2mg、5mg、10mg和25mg劑量“即期”給藥，且每24小時至多給藥一次。在研究過程中的任何時候都不允許用所有硝酸酯類藥、吡咯抗真菌劑(例如，酮康唑或伊曲康唑)、丙酮芐羥香豆素、紅霉素或抗雄激素藥進(jìn)行治療。也不允許用于治療ED的其他核準(zhǔn)或?qū)嶒炈幬?、治療方法或設(shè)備。41名受試者給藥安慰劑。
兩個主要的效能變量是受試者進(jìn)入其伴侶的能力和其在性交過程中保持勃起的能力，這是利用國際勃起功能指數(shù)(IIEF)測量的。IIEF調(diào)查表包括15個問題，它是對勃起功能的簡短、可靠的測定。參見R．C．Rosen等，泌尿?qū)W49，822-830頁(1997)。
次要效能變量是對勃起功能、性欲高潮功能、性要求、性交滿意度、和綜合滿意度的IIEF范圍評分；患者達(dá)到勃起的能力，將陰莖插入其伴侶陰道的能力，有射精的性交的完成，對其勃起硬度的滿意程度，和綜合滿意度，所有均利用性遭遇曲線(SEP)日記測量；和在治療期結(jié)束時的綜合評估問答。SEP是在研究過程中患者對于每次性遭遇的日記式記錄文件。
該研究的安全性分析包括所有登記的受試者，并通過評估所有報道的副反應(yīng)和臨床實驗室值、生活征、體檢結(jié)果和心電圖結(jié)果的變化來進(jìn)行評定。
在終點時，認(rèn)為其“幾乎總是或總是”能插入(IIEF問題3)的患者如下安慰劑組中為17．5％，2mg組中為38．1％，5mg組中為48．8％，10mg組中為51．2％，25mg組中為83．7％。通過對比顯示，在安慰劑和所有劑量濃度的研究藥物之間，進(jìn)入能力的變化有統(tǒng)計學(xué)顯著差異。
在終點時，認(rèn)為其性交過程中“幾乎總是或總是”能維持勃起(IIEF問題3)的患者如下安慰劑組中為17．5％，2mg組中為38．1％，5mg組中為48．8％，10mg組中為51．2％，25mg組中為83．7％。通過對比顯示，在安慰劑和所有劑量濃度的研究藥物之間，進(jìn)入能力的變化有統(tǒng)計學(xué)顯著差異。
總之，該研究證明，所有四種劑量、即2mg、5mg、10mg和25mg的研究藥物，利用IIEF、利用患者的有關(guān)成功性交的頻率和性交滿意度的評定日記、和利用綜合評定進(jìn)行評估，在患有勃起機(jī)能障礙的男性的性行為方面，相對于安慰劑來說，“即期”給藥產(chǎn)生了顯著的改善。這種改善在寬范圍的研究人群中得到證明，所述研究人群包括顯示出所有嚴(yán)重勃起機(jī)能障礙的患者。在嚴(yán)重性方面，大多數(shù)副反應(yīng)是輕度或中度的。值得注意的是，任何患者都未報道有與色覺障礙相關(guān)的副反應(yīng)。
將臨床研究的結(jié)果綜合后顯示，給藥結(jié)構(gòu)式(Ⅰ)化合物有效地治療了男性勃起機(jī)能障礙，如下表所示。 n為受試者數(shù)目，SD是標(biāo)準(zhǔn)誤差。
不過，從綜合的臨床研究結(jié)果也可看到，治療產(chǎn)生的副反應(yīng)的百分比隨著結(jié)構(gòu)式(Ⅰ)化合物單位劑量的增加而增加，正如下表所顯示的 上表顯示，25mg到100mg單位劑量時，副反應(yīng)增加。因此，即使在25mg到100mg劑量時觀察到了治療ED的效能，但必須考慮到25mg到100mg劑量時觀察到的副反應(yīng)。
根據(jù)本發(fā)明，約1至約20mg單位劑量，優(yōu)選約2至約20mg單位劑量，更優(yōu)選約5至約20mg單位劑量，最優(yōu)選約5至約15mg單位劑量，每24小時給藥不超過最多20mg，可有效地治療ED并減小或消除副反應(yīng)的發(fā)生。重要的是，再沒有視覺異常的報道，且實質(zhì)上消除了潮紅。令人驚奇地，除了用約1至約20mg單位劑量的結(jié)構(gòu)式(Ⅰ)化合物、產(chǎn)生最小的副作用下治療正常個體的ED以外，用硝酸酯治療的個體也可以用本發(fā)明的方法和組合物治療ED。
本發(fā)明的原理、優(yōu)選實施方案和操作模式已在上述說明書中進(jìn)行了描述。本發(fā)明打算在此獲得保護(hù)，不過，不應(yīng)將其理解為限制于所公開的特定形式，因為它們是說明性的，而不是限制性的。本領(lǐng)域技術(shù)人員在不背離本發(fā)明實質(zhì)的情況下可以對其進(jìn)行改變和變化。
權(quán)利要求
1.一種人類藥用制品，它包含(a)包含約1至約20mg選擇性PDE5抑制劑的口服劑型，所述選擇性PDE5抑制劑具有(ⅰ)對PDE5的抑制比對PDE6的抑制來說，IC50值的差異至少是100倍；(ⅱ)對PDE5的抑制比對PDE1c的抑制來說，IC50值的差異至少是1000倍；(ⅲ)PDE5抑制的IC50值小于10nM，和(ⅳ)足夠的生物有效性以在約1至約20mg單位口服劑量時是有效的；(b)一個包裝插件，它提供了該P(yáng)DE5抑制劑可用于治療需要這種治療的患者的性機(jī)能障礙，并且沒有與有機(jī)硝酸酯給藥相關(guān)的矛盾；和(c)一個容器。
2.一種人類藥用制品，它包含(a)包含約1至約20mg選擇性PDE5抑制劑的口服劑型，所述選擇性PDE5抑制劑具有(ⅰ)對PDE5的抑制比對PDE6的抑制來說，IC50值的差異至少是100倍；(ⅱ)對PDE5的抑制比對PDE1c的抑制來說，IC50值的差異至少是1000倍；(ⅲ)IC50值小于10nM，和(ⅳ)足夠的生物有效性以在約1至約20mg單位口服劑量時是有效的；(b)一個包裝插件，它提供了該P(yáng)DE5抑制劑可用于治療需要這種治療的患者的性機(jī)能障礙，并且該患者正使用有機(jī)硝酸酯；和(c)一個容器。
3.一種人類藥用制品，它包含(a)包含約1至約20mg選擇性PDE5抑制劑的口服劑型，所述選擇性PDE5抑制劑具有(ⅰ)對PDE5的抑制比對PDE6的抑制來說，IC50值的差異至少是100倍；(ⅱ)對PDE5的抑制比對PDE1c的抑制來說，IC50值的差異至少是1000倍；(ⅲ)IC50值小于10nM，和(ⅳ)足夠的生物有效性以在約1至約20mg單位口服劑量時是有效的；(b)一個包裝插件，它提供了該P(yáng)DE5抑制劑可用于治療需要這種治療的患者的性機(jī)能障礙，并且該患者還患有選自下列的疾病視網(wǎng)膜疾病、傾向潮紅、傾向視覺異常、1類充血性心力衰竭、性機(jī)能障礙治療開始前患有心肌梗塞90天或更久、以及它們的組合；和(c)一個容器。
4.權(quán)利要求3所述的制品，其中視網(wǎng)膜疾病是糖尿病性視網(wǎng)膜病或色素性視網(wǎng)膜炎。
5.權(quán)利要求3所述的制品，其中所述包裝插件報道受治療的患者潮紅的發(fā)生率小于2％。
6.權(quán)利要求1-5任一項所述的制品，其中口服劑型包含約5mg、約10mg、或約20mg選擇性PDE5抑制劑。
7.權(quán)利要求1-6任一項所述的制品，其中包裝插件提供了每24小時內(nèi)，該選擇性PDE5抑制劑的最大劑量約為20mg。
8.權(quán)利要求1-7任一項所述的制品，其中選擇性PDE5抑制劑具有下列結(jié)構(gòu)
9.實質(zhì)上如上文說明書中所描述的制品。
10.選擇性PDE5抑制劑在制備用于治療正用有機(jī)硝酸酯進(jìn)行治療的患者的性機(jī)能障礙的藥物中的用途。
11.選擇性PDE5抑制劑在制備用于治療以下患者的性機(jī)能障礙的藥物中的用途，所治療的患者有視覺異常的傾向、有潮紅的傾向、患有視網(wǎng)膜疾病、患有1類充血性心力衰竭、或者在開始該性機(jī)能障礙治療之前患有心肌梗塞90天或更久。
12.一種適用于治療正用有機(jī)硝酸酯進(jìn)行治療的患者的性機(jī)能障礙的藥物制劑，它包含如上文所述的、作為活性成分的選擇性PDE5抑制劑。
13.一種適用于治療有潮紅傾向的患者的性機(jī)能障礙的藥物制劑，它包含如上文所述的、作為活性成分的選擇性PDE5抑制劑。
14.一種適用于治療患有視網(wǎng)膜疾病的患者的性機(jī)能障礙的藥物制劑，它包含如上文所述的、作為活性成分的選擇性PDE5抑制劑。
15.一種適用于治療患有1類充血性心力衰竭或在開始性機(jī)能障礙治療前患有心肌梗塞90天或更久的患者的性機(jī)能障礙的藥物制劑，它包含如上文所述的、作為活性成分的選擇性PDE5抑制劑。
16.一種治療性機(jī)能障礙的方法，它包含使用權(quán)利要求1-8的制品。
全文摘要
本發(fā)明涉及高選擇性的磷酸二酯酶(PDE)抑制劑及其在藥物制品中的應(yīng)用。具體地說,本發(fā)明涉及環(huán)鳥苷3’,5’－一磷酸特異性磷酸二酯酶5型(PDE5)的強(qiáng)抑制劑,當(dāng)它們以約1至約20mg單位劑量加入到藥物產(chǎn)品中時,可以用于治療性機(jī)能障礙。本文所述制品的特征在于選擇性PDE5抑制劑,并由此提供了在需要抑制PDE5的醫(yī)療領(lǐng)域的益處,同時最大限度地減小或消除了因其他磷酸二酯酶的抑制而引起的副作用。
文檔編號A61K31/00GK1292264SQ0010698
公開日2001年4月25日 申請日期2000年4月26日 優(yōu)先權(quán)日1999年4月30日
發(fā)明者J·T·埃米克, K·M·菲爾古森, W·E·普利曼, J·S·懷塔克 申請人:利利艾科斯有限公司