專利名稱：一種提高花粉變應(yīng)原疫苗效價的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物制藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種變應(yīng)原疫苗，特別是花粉變應(yīng)原疫苗的提取方法。
現(xiàn)有技術(shù)的花粉變應(yīng)原疫苗的提取，一般采用康氏振蕩提取法。即是將脫脂花粉按一定比例加入堿性鹽水提取液，在6～8℃冰箱內(nèi)浸泡提取72小時。提取過種中每24小時用康氏振蕩器振蕩2小時，這種提取方法由于振蕩幅度大振蕩時間長，花粉浸液在提取器內(nèi)因溫度升高而受熱，提取液水溫達18～20℃，花粉有效成份散失部分生物活性物質(zhì)失活，抗原效價降低。
本發(fā)明的任務(wù)是提供一種有效成份不易散失，生物利用率，及抗原效價高的花粉變應(yīng)原疫苗的提取方法，以彌補現(xiàn)有技術(shù)的不足。
本發(fā)明的任務(wù)是這樣實現(xiàn)的將脫脂花粉按一定比例加入堿性鹽水提取液，在6～8℃冰箱內(nèi)浸泡提取72小時，提取過程中每12小時用遠(yuǎn)紅外磁力攪拌器與玻棒交替攪拌1小時，每隔15～20分鐘交替一次。使提取液水溫控制在10±0.5℃。
本發(fā)明花粉變應(yīng)原疫苗的基本組方如下1、早春脫脂花粉取楊樹、柳樹、榆樹、柏樹花粉等重量，按重量體積比加入1∶20碳酸氫鹽—鹽水提取液；
2、晚春脫脂花粉取桑樹、臭椿、菠菜、核桃、樺樹、松樹、苔草花粉等重量，3、夏秋脫脂花粉取葎草、玉米、菠菜、核桃、樺樹、松樹、苔草花粉等重量，按重量體積比加入1∶20碳酸氫鹽——鹽水提取液；4、蒿取脫脂花粉取黃蒿、青蒿花粉等重量，按重量體積比1∶25碳酸氫鹽—鹽水提取液。
本發(fā)明的花粉變應(yīng)原疫苗提取方法簡單可行，疫苗效價高。將康氏振蕩提取法改為遠(yuǎn)紅外磁力攪拌加玻璃棒交替攪拌提取，避免了康氏振蕩提取法的振蕩時間過長，致使提取液因溫度升高而降低了花粉變應(yīng)原疫苗的效價，減弱了其生物活性，影響了脫敏治療效果。
下面將描述本發(fā)明的幾個實施例，但本發(fā)明的內(nèi)容完全不局限于此。
實施例1稱取已脫脂的楊樹、柳樹、榆樹、柏樹早春花粉各2.5g，按1∶20比例(1克花粉加入20毫升提取液)加入碳酸氫鹽——鹽水提取液置于6～8℃冰箱提取72小時，本提取過程中，每隔12小時用YJS-5型遠(yuǎn)紅外磁力攪拌器與玻璃棒交替攪拌1小時，每隔15～20分鐘交替攪拌一次，控制提取液水溫達10±0.5℃。隨后過濾所期望的產(chǎn)物并除菌純化。
實施例2花粉取桑樹、臭椿、菠菜、核桃、樺樹、松樹、苔草晚春花粉各3g，其他同實施例1。
實施例3花粉取葎草、玉米、蓖麻、蒼耳、向日葵、大麻夏秋花粉各3.5g，其他同實施例1。
實施例4花粉取黃蒿，青蒿蒿屬花粉各5g，按1∶25比例加入碳酸氫鹽—鹽水提取液，其他同實施例1。
本發(fā)明人曾選擇2000例18～55歲過敏病人其中試驗組1000人、對照組1000人，試驗組注射本發(fā)明實施例1早春花粉變應(yīng)原疫苗，對照組注射現(xiàn)有技術(shù)方法制備的早春花粉變應(yīng)原疫苗皮內(nèi)注射0.01～0.02ml濃度為1∶100，15分鐘后，根據(jù)皮試引起的風(fēng)團直徑和紅暈強度，測其風(fēng)團幾何面積，見表1、表2、表3表1受試者風(fēng)團直徑比較皮試液分類風(fēng)團直徑(cm) 皮試人數(shù)(例) 占實驗人數(shù)的％＜0.5 29914.950.5～1.022111.05傳統(tǒng)方法 1.0～1.527813.90(對照組) ＞1.5 1015.05＞1.5癢感 64 3.20＞1.5憋氣 37 1.85＜0.5 3 0.150.5～1.029 1.45發(fā)明方法 1.0～1.544022.00(實驗組) ＞1.5 28414.20＞1.5癢感 1939.65＞1.5憋氣 51 2.55Ridit分析u＝21.146，p＜0.01，R＝對0.3639，R實＝0.6365表2皮試紅暈強度比較皮試液分類 紅暈強度 皮試人數(shù)(例) 占實驗人數(shù)的％- 298 14.90± 222 11.10對照組+ 277 13.85++102 5.10+++ 633.15++++ 381.90- 2 0.10± 321.60實驗組+ 438 21.90++284 14.20+++ 193 9.65++++ 512.55Ridit分析u＝21.089，p＜0.01，R＝對0.3639，R實＝0.6361表3皮試效應(yīng)結(jié)果判定反應(yīng)級另 -±+ +++++++++R實驗組 056 488 358 89 9 0.6374對照組 260 444 176 7043 7 0.3624Ridit分析u＝9.535，p＜0.01實驗表明本發(fā)明實驗組明顯優(yōu)于對照組，花粉變應(yīng)原疫苗皮內(nèi)試驗它反映的是過敏原真正的效價強度，任何一種過敏原標(biāo)化方法都需要與生物效價相比較，以它為依據(jù)。
權(quán)利要求
1.一種提高花粉變應(yīng)原疫苗效價的方法，其特征在于脫脂花粉加入堿性鹽水在提取過程中每12小時用遠(yuǎn)紅外磁力攪拌器與玻璃棒交替攪拌1小時。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高花粉變應(yīng)原疫苗效價的方法，其特征在于所說的遠(yuǎn)紅外磁力攪拌器與玻璃棒交替攪拌，每隔15～20分鐘交替一次。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高花粉變應(yīng)原疫苗效價的方法，其特征在于所說的脫脂花粉為楊樹、柳樹、榆樹、柏樹早春花粉。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高花粉變應(yīng)原疫苗效價的方法，其特征在于所說的脫脂花粉為桑樹、臭椿、菠菜、核桃、樺樹、松樹、苔草晚春花粉。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高花粉變應(yīng)原疫苗效價的方法，其特征在于所說的脫脂花粉為葎草、玉米、蓖麻、蒼耳、向日葵、大麻夏秋花粉。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高花粉變應(yīng)疫苗效價的方法，其特征在于所說的脫脂花粉為黃蒿、青蒿蒿屬芬粉。
全文摘要
一種提高花粉變應(yīng)原疫苗效價的方法,主要涉及一種花粉變應(yīng)原疫苗的提取,將康氏振蕩提取法改為遠(yuǎn)紅外磁力攪拌加玻璃棒攪拌交替提取,避免了康氏提取法因溫度升高而降低了花粉抗原的效價。本發(fā)明方法簡單可行,花粉有效成份不易散失,生物利用率高,花粉變應(yīng)原疫苗效價明顯高于傳統(tǒng)提取法。
文檔編號A61K39/35GK1350871SQ0012983
公開日2002年5月29日 申請日期2000年10月30日 優(yōu)先權(quán)日2000年10月30日
發(fā)明者杜振彩, 張培永, 張彩芳, 董明霞, 魏秀芹 申請人:杜振彩, 張培永, 張彩芳, 董明霞, 魏秀芹