專利名稱：新的粘膜遞送系統(tǒng)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于經(jīng)粘膜遞送生物學(xué)活性物質(zhì)的組合物、疫苗、和制劑，以及包括含氧金屬鹽的粘膜遞送系統(tǒng)。在其它方面，本發(fā)明涉及產(chǎn)生脊椎動(dòng)物(包括人類)的免疫應(yīng)答、疫苗接種、和治療的方法，以及治療、預(yù)防、或減輕變態(tài)反應(yīng)的方法。此外，本發(fā)明涉及含氧金屬鹽用于制備粘膜遞送系統(tǒng)的用途，和通過(guò)施用本發(fā)明疫苗產(chǎn)生的抗體的用途。此外，本發(fā)明涉及制備組合物、疫苗、或制劑的方法，以及由該方法獲得的產(chǎn)物。
有時(shí)藥物的活性化合物只能配制成注射劑，或者除非胃腸外施用，活性化合物具有很小效果或沒(méi)有效果。在許多疫苗抗原的情況中，事實(shí)正如此。
胃腸外治療必須由內(nèi)科醫(yī)師進(jìn)行?；颊咝枰A(yù)約的經(jīng)歷是不方便的，而且給自己注射的經(jīng)歷常常是不愉快的，所有這些一起導(dǎo)致患者不愿服從。
本領(lǐng)域已知幾種胃腸外遞送系統(tǒng)。在大量的教科書(shū)中對(duì)它們進(jìn)行了很好的描述。
進(jìn)行了幾種嘗試以制備包括不能夠穿過(guò)粘膜的活性化合物之粘膜制劑，由此避免胃腸外途徑。然而，市場(chǎng)上這些產(chǎn)品的數(shù)目很有限，說(shuō)明這些努力并不成功。這尤其是這由于生物粘膜處的生物利用度差。
發(fā)明目的本發(fā)明的目的是提供用于經(jīng)脊椎動(dòng)物粘膜遞送生物學(xué)活性物質(zhì)的遞送系統(tǒng)。粘膜遞送系統(tǒng)可用于配制用于經(jīng)粘膜遞送生物學(xué)活性物質(zhì)的組合物。設(shè)想了利用粘膜遞送系統(tǒng)和組合物的廣泛的其它應(yīng)用。尤其是粘膜遞送系統(tǒng)可以摻入疫苗中，由此避免傳統(tǒng)的胃腸外疫苗接種。
由此，根據(jù)本發(fā)明，以所有患者可接受的、容易的、有效的方式，經(jīng)粘膜遞送生物學(xué)活性物質(zhì)是可能的。
由WO 94/21288(文獻(xiàn)1)，了解了包含膠體金屬與免疫學(xué)毒性生物學(xué)活性因子的混和物的組合物。有毒生物學(xué)因子選自傳染性生物體的細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子、和糖蛋白，如IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、葡萄球菌腸毒素B、和巨噬細(xì)胞集落刺激因子(CSF)。組合物還可以包括佐劑，諸如弗氏完全或不完全佐劑、脂質(zhì)體、胞壁酸二肽、或明礬。文獻(xiàn)還描述了施用有毒生物學(xué)活性因子產(chǎn)生針對(duì)生物學(xué)活性因子的免疫學(xué)應(yīng)答、同時(shí)降低由生物學(xué)活性因子產(chǎn)生的有毒副作用的方法。組合物優(yōu)選靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、或皮下施用。
在WO 95/05194(文獻(xiàn)2)中，描述了將甲肝病毒衣殼或其粘膜免疫原性片段或表位用于制造粘膜疫苗組合物的使用。將粘膜疫苗組合物施用于患者粘膜表面，以誘導(dǎo)針對(duì)甲肝的血清免疫球蛋白G抗體的產(chǎn)生。組合物配制用于鼻或支氣管粘膜遞送。
由JP 65008152 B(文獻(xiàn)3)知曉口服疫苗?？诜呙缬杉?xì)菌、細(xì)菌毒素、病毒、立克次氏體、等等，通過(guò)(1)滅活，(2)加入收斂劑沉淀，(3)將沉淀物干燥并制成片劑來(lái)制備。由此，目的是提供干燥的片劑，胃液不會(huì)將產(chǎn)物滅活。在摘要中，沒(méi)有提及確保經(jīng)生物粘膜遞送免疫原性化合物的遞送系統(tǒng)。
由GB 2 195 996(文獻(xiàn)4)，了解了包括有機(jī)化合物(-)-表沒(méi)食子兒茶精沒(méi)食子酸作為主要成分的茶葉提取物與活性氫氧化鋁的復(fù)合物。復(fù)合物據(jù)說(shuō)具有抗?jié)兓钚浴⒖瓜院涂顾釀┗钚?。配制成組合物的復(fù)合物可能適合于口服。雖然組合物意欲口服使用，但是目的并非是經(jīng)粘膜遞送物質(zhì)。作用靶是胃的內(nèi)部。由此，沒(méi)有公開(kāi)或涵蓋粘膜遞送。
由GB 1 078 879(文獻(xiàn)5)，了解了包括氫氧化鋁的膠體水性可攝取懸浮液和至少一種吸附在氫氧化鋁上的消化酶的抗酸劑組合物。組合物意欲口服使用，但是目的并非是經(jīng)粘膜遞送物質(zhì)。作用靶是胃的內(nèi)部。由此，沒(méi)有公開(kāi)或涵蓋粘膜遞送。
由FR 2 143 588(文獻(xiàn)6)，了解了用于免疫水禽免于鵝肝炎的疫苗。疫苗可以包括氫氧化鋁作為佐劑。疫苗通過(guò)注射施用。沒(méi)有公開(kāi)或涵蓋經(jīng)粘膜的遞送。
圖的簡(jiǎn)述
圖1顯示了用鋁膠(Amydrogel)懸浮的破傷風(fēng)類毒素(Tetanustoxoid)口服(p.o.)免疫的小鼠第35天的IgG1應(yīng)答。
圖2顯示了用不包括鋁膠載體的破傷風(fēng)類毒素口服免疫的小鼠第35天的IgG1應(yīng)答。
圖3顯示了用破傷風(fēng)類毒素腹膜內(nèi)(i.p.)免疫的小鼠(對(duì)照組)第35天的IgG1應(yīng)答。
圖4顯示了用鋁膠懸浮的破傷風(fēng)類毒素口服免疫的小鼠第35天的IgG2a應(yīng)答。
圖5顯示了用不包括鋁膠載體的破傷風(fēng)類毒素口服免疫的小鼠第35天的IgG2a應(yīng)答。
圖6顯示了用破傷風(fēng)類毒素腹膜內(nèi)免疫的小鼠(對(duì)照組)第35天的IgG2a應(yīng)答。
圖7顯示了用鋁膠懸浮的破傷風(fēng)類毒素口服免疫的小鼠第56天的IgG1應(yīng)答。
圖8顯示了用不包括鋁膠載體的破傷風(fēng)類毒素口服免疫的小鼠第56天的IgG1應(yīng)答。
圖9顯示了用破傷風(fēng)類毒素腹膜內(nèi)免疫的小鼠(對(duì)照組)第56天的IgG1應(yīng)答。
圖10顯示了用鋁膠懸浮的破傷風(fēng)類毒素口服免疫的小鼠第56天的IgG2a應(yīng)答。
圖11顯示了用不包括鋁膠載體的破傷風(fēng)類毒素口服免疫的小鼠第56天的IgG2a應(yīng)答。
圖12顯示了用破傷風(fēng)類毒素腹膜內(nèi)免疫的小鼠(對(duì)照組)第56天的IgG2a應(yīng)答。
圖13顯示了用鋁膠懸浮的破傷風(fēng)類毒素口服免疫的小鼠第70天的IgG1應(yīng)答。
圖14顯示了用不包括鋁膠載體的破傷風(fēng)類毒素口服免疫的小鼠第70天的IgG1應(yīng)答。
圖15顯示了用破傷風(fēng)類毒素腹膜內(nèi)免疫的小鼠(對(duì)照組)第70天的IgG1應(yīng)答。
圖16顯示了用鋁膠懸浮的破傷風(fēng)類毒素口服免疫的小鼠第70天的IgG2a應(yīng)答。
圖17顯示了用不包括鋁膠載體的破傷風(fēng)類毒素口服免疫的小鼠第70天的IgG2a應(yīng)答。
圖18顯示了用破傷風(fēng)類毒素腹膜內(nèi)免疫的小鼠(對(duì)照組)第70天的IgG2a應(yīng)答。
圖19顯示了用鋁膠懸浮的梯牧草(Phleum pratense)口服免疫的小鼠第70天的IgG1應(yīng)答。
圖20顯示了用不包括鋁膠載體的梯牧草口服免疫的小鼠第70天的IgG1應(yīng)答。
圖21顯示了用梯牧草腹膜內(nèi)免疫的小鼠(對(duì)照組)第70天的IgG1應(yīng)答。
圖22顯示了用鋁膠懸浮的梯牧草口服免疫的小鼠第70天的IgG2a應(yīng)答。
圖23顯示了用不包括鋁膠載體的梯牧草口服免疫的小鼠第70天的IgG2a應(yīng)答。
圖24顯示了用梯牧草腹膜內(nèi)免疫的小鼠(對(duì)照組)第70天的IgG2a應(yīng)答。
圖25顯示了第0、21、22、23天用梯牧草皮下(s.c.)免疫的小鼠第106天的特異性Ig應(yīng)答。
圖26顯示了第0天用梯牧草皮下免疫和第21、22、23天口服免疫的小鼠第106天的特異性Ig應(yīng)答。
圖27顯示了第0天用梯牧草皮下免疫和第21、22、23天用安慰劑口服免疫的小鼠第106天的特異性Ig應(yīng)答。
發(fā)明詳述如上所述，已經(jīng)進(jìn)行了多種嘗試，以制備適合于經(jīng)粘膜遞送物質(zhì)的制劑。這些嘗試并未取得很大成功。制劑也不怎么有效，或者與其它途徑相比，有效性降低。由此，市場(chǎng)上出售的粘膜遞送系統(tǒng)種類非常有限，表明這種藥學(xué)組合物遇到的困難?，F(xiàn)在令人驚訝的發(fā)現(xiàn)，使用此處要求的粘膜遞送系統(tǒng)，經(jīng)粘膜遞送事實(shí)上是可能的。
由此，一方面，本發(fā)明涉及用于經(jīng)脊椎動(dòng)物粘膜遞送生物學(xué)活性物質(zhì)的組合物，包括(1)至少一種生物學(xué)活性物質(zhì)，和(2)包括含氧金屬鹽的粘膜遞送系統(tǒng)。
術(shù)語(yǔ)“生物學(xué)活性物質(zhì)”指其自身具有生物學(xué)效應(yīng)的任何物質(zhì)，或者影響或與其它物質(zhì)、體內(nèi)反應(yīng)、和/或器官相互作用導(dǎo)致生物學(xué)效應(yīng)的任何物質(zhì)。它還可以是這樣一種物質(zhì)，當(dāng)存在于一個(gè)區(qū)室中時(shí)，在不同或相同生物學(xué)區(qū)室中產(chǎn)生生物學(xué)效應(yīng)。
在本發(fā)明中可以采用廣泛的生物學(xué)活性物質(zhì)。這些物質(zhì)的實(shí)例是免疫原性物質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)物、藥物、和遺傳物質(zhì)，及其類似物或衍生物。
免疫原性物質(zhì)的實(shí)例是抗原、變應(yīng)原、類變應(yīng)原、肽、半抗原、碳水化合物、肽核酸(PNA，一類合成的遺傳模擬物)、和病毒或細(xì)菌物質(zhì)，及其類似物或衍生物。營(yíng)養(yǎng)物的實(shí)例是維生素、酶、微量元素、和微量礦物質(zhì)，及其類似物或衍生物。藥物的實(shí)例是抗體、抗生素、肽、鹽、激素、溶血?jiǎng)?hemolytics)、止血?jiǎng)?haemostatics)、酶、酶抑制劑、精神作用藥物、麻醉劑、和巴比妥鹽，及其類似物或衍生物。遺傳物質(zhì)的實(shí)例是DNA、RNA、和PNA。
在本文中，術(shù)語(yǔ)“類似物或衍生物”意欲包括生物學(xué)活性物質(zhì)的經(jīng)修飾形式。修飾可以通過(guò)化學(xué)修飾或合成修飾進(jìn)行，如通過(guò)生物素化、脫氨基、馬來(lái)酸化、一個(gè)或多個(gè)氨基酸的替代，通過(guò)交聯(lián)，通過(guò)糖基化，或者通過(guò)其它重組技術(shù)。術(shù)語(yǔ)還意欲包括天然存在的突變體、同工型、和反逆(retroinverse)類似物。
本發(fā)明的組合物、制劑、和疫苗的功效與包括至少一種含氧金屬鹽的粘膜遞送系統(tǒng)相關(guān)聯(lián)。
含氧金屬鹽的特征可以由多種理化參數(shù)描述，像吸附、溶解度和溶解特性、以等電點(diǎn)pI(可解離化合物的凈電荷為零時(shí)的pH)測(cè)量的離子電荷、解離常數(shù)、復(fù)合物配位、電子構(gòu)型、效價(jià)、成鍵軌道和反鍵軌道、貯存作用、粘附特性、表面特性、顆粒特性、和佐劑活性。
認(rèn)為金屬鹽的幾種特性對(duì)于此處所述粘膜遞送系統(tǒng)觀察到的有益效果是重要的。應(yīng)當(dāng)理解，下文的假設(shè)不應(yīng)當(dāng)限制本發(fā)明的范圍。
遞送系統(tǒng)的共同特性是它們保全、保留、遞送、和/或增強(qiáng)以可用于經(jīng)粘膜遞送的形式可得的生物學(xué)活性物質(zhì)的作用。
認(rèn)為具有生物學(xué)價(jià)值的物質(zhì)(生物學(xué)活性物質(zhì))被含氧金屬鹽吸附(或偶聯(lián))，這種吸附作用有助于粘膜遞送系統(tǒng)、組合物、制劑、和疫苗的功效。數(shù)種因素可能是重要的，或者影響生物學(xué)活性物質(zhì)與含氧金屬鹽之間的吸附(參閱如P.M.Callahan等人，制藥學(xué)研究(PharmaceuticalResearch)8(7)851-858，1991，文獻(xiàn)7；和疫苗設(shè)計(jì)，亞基和佐劑研究(Vaccine Design.The Subunit and adjuvant Approach)，文獻(xiàn)8，此處引入作為參考文獻(xiàn))。
這些因素包括pH、吸附反應(yīng)進(jìn)行的時(shí)長(zhǎng)，混和條件，制劑、組合物、和疫苗中各種成分的濃度，容器、溫度、保存、緩沖液、和賦形劑。
在本發(fā)明的一些方面發(fā)現(xiàn)，生物學(xué)活性物質(zhì)的吸附受金屬鹽的凈/總電荷和生物學(xué)活性物質(zhì)的電荷的影響，二者都依賴pH。
金屬鹽的pI隨種類不同一般可以在2-11之間變化，導(dǎo)致不同的最佳偶聯(lián)pH區(qū)間?？梢圆捎盟嵝浴A性、和中性條件，如對(duì)于氫氧化鋁的常用形式，使用pH6-10；更酸的區(qū)間用于醋酸鋁，更堿的區(qū)間用于氫氧化鎂。
當(dāng)相關(guān)時(shí)，可解離的生物學(xué)活性物質(zhì)的pI可能同樣在2-11的范圍內(nèi)變化，如對(duì)于蛋白質(zhì)抗原，pI值通常在4-9的范圍內(nèi)。
因此，可以在寬范圍的pH進(jìn)行吸附，但是選擇的優(yōu)選條件是位于含氧金屬鹽的pI與將要吸附的生物學(xué)活性物質(zhì)的平均pI之間的pH，如含氧金屬鹽——?dú)溲趸X的某種形式的pI是9.2，生物學(xué)活性物質(zhì)——含梯牧草的蛋白質(zhì)混和物的pI位于4-9的范圍內(nèi)(對(duì)于蛋白質(zhì))，在pH8.3獲得了有效的吸附。
對(duì)于幾種含氧金屬鹽(如Al(OH)3、AlPO4)，表面積大，導(dǎo)致對(duì)生物學(xué)活性物質(zhì)的吸附容量大。
吸附程度同樣隨所用金屬鹽及其工作濃度而變化，如Al3+的工作濃度可以變化，優(yōu)選以氫氧化鋁配制成0.035-1000mg/ml，最優(yōu)選0.35-100mg/ml。
生物學(xué)活性物質(zhì)的工作濃度可以進(jìn)一步影響對(duì)金屬鹽的吸附，而且取決于物質(zhì)，可以變化很大。對(duì)于蛋白質(zhì)的工作濃度范圍，優(yōu)選0.01-100mg/ml，最優(yōu)選0.01-10mg/ml。
遞送系統(tǒng)與生物學(xué)活性物質(zhì)之間的相互作用還受吸附步驟過(guò)程中及最終制劑中的比率的影響。比率(生物學(xué)活性物質(zhì)的量/粘膜遞送系統(tǒng)的量，以重量計(jì))應(yīng)當(dāng)在上文的范圍內(nèi)找到。這些范圍可能相應(yīng)的在0.01-100,000內(nèi)變化，優(yōu)選0.01-100，最優(yōu)選1-20。
最終制劑應(yīng)當(dāng)是這樣一種組合物，含氧金屬鹽吸附的生物學(xué)活性物質(zhì)的量在5-99％的范圍內(nèi)，更優(yōu)選加入量的10-99％。
還發(fā)現(xiàn)吸附受所選緩沖體系的類型(如NaCl、NaHCO3、胺類)、緩沖鹽濃度(如0-40％NaCl)、和賦形劑的存在(如甘油0-70％)的影響。
偶聯(lián)效率依賴反應(yīng)進(jìn)行的時(shí)長(zhǎng)和溫度。優(yōu)選4-45℃，更優(yōu)選4-20℃，在此溫度進(jìn)行吸附。偶聯(lián)的優(yōu)選時(shí)長(zhǎng)是0.1-48小時(shí)，更優(yōu)選12-24小時(shí)。
用于偶聯(lián)和產(chǎn)物保存的容器可以是玻璃和不同的聚合材料。重要的是選擇不吸附產(chǎn)物的容器，如用于蛋白質(zhì)的制藥級(jí)玻璃。
認(rèn)為重要的另一種特性是含氧金屬鹽的溶解度。優(yōu)選不溶于水的含氧金屬鹽，以及25℃的水溶解度不高于0.01mol/L的含氧金屬鹽。更優(yōu)選不溶性含氧金屬鹽，或25℃的水溶解度不高于0.05mol/L的含氧金屬鹽。
含氧金屬鹽還可以具有貯存作用。貯存作用指制劑、組合物、疫苗、或粘膜遞送系統(tǒng)將逐漸釋放生物學(xué)活性物質(zhì)。生物學(xué)交互性活性物質(zhì)將由此與含氧金屬鹽一起保留，即與粘膜遞送系統(tǒng)一起，并由其逐漸釋放。認(rèn)為這具有大量的有益效果，如延長(zhǎng)刺激、有益藥物釋放、和保護(hù)生物學(xué)活性物質(zhì)免受環(huán)境條件作用。還認(rèn)為遞送系統(tǒng)的含氧金屬鹽可能具有某些包載特性，由此保留物質(zhì)能夠經(jīng)粘膜遞送。
本發(fā)明的另一種特性是對(duì)生物學(xué)活性物質(zhì)的保護(hù)。通過(guò)在微環(huán)境中維持生物學(xué)活性物質(zhì)的理想pH，由此預(yù)防酸降解或保護(hù)免受酶降解，從而使得物質(zhì)能夠經(jīng)粘膜遞送。
此外，一些含氧金屬鹽具有緩沖能力。這可以在遞送系統(tǒng)中產(chǎn)生體內(nèi)微環(huán)境，保護(hù)生物學(xué)活性物質(zhì)免受可降解環(huán)境作用。在分別有酸和酶降解風(fēng)險(xiǎn)的胃或腸中，這可能是有利的。
粘膜遞送系統(tǒng)的含氧金屬鹽的另一種特性可以是它們粘附在粘膜上的能力，或它們可能施加于胃腸運(yùn)動(dòng)的影響，如使之放慢。由于增加了延長(zhǎng)生物學(xué)活性物質(zhì)與靶組織(粘膜)相互作用的時(shí)間的可能性，由此導(dǎo)致生物學(xué)活性物質(zhì)經(jīng)粘膜的轉(zhuǎn)運(yùn)增加，所以通過(guò)腸的時(shí)間延長(zhǎng)可能是有利的。同樣，含氧金屬鹽/粘膜遞送系統(tǒng)的粘膜粘附特性可能能夠影響其它功能，如能夠?qū)е赂爝M(jìn)行和期望應(yīng)答效果的粘膜佐劑特性。具有佐劑特性的不同化合物描述于如文獻(xiàn)8，第7章。
還認(rèn)為本發(fā)明的粘膜遞送系統(tǒng)/含氧金屬鹽能夠設(shè)計(jì)具有對(duì)特異粘膜組織的特異偏愛(ài)，如腸相關(guān)淋巴組織(GALT)和派伊爾氏淋巴集結(jié)(Peyerspatch)，進(jìn)一步增強(qiáng)活性物質(zhì)在相關(guān)靶位點(diǎn)(粘膜組織)的遞送，參照EP 266 119(文獻(xiàn)9)。對(duì)于幾種含氧金屬鹽(如Al(OH)3、AlPO4、Ca3PO4)，顆粒大小的范圍在0.5-15μm之間。
觀察到生物學(xué)活性物質(zhì)與胃腸道免疫活性組織之間能夠進(jìn)行相互作用，導(dǎo)致細(xì)胞和最終的體液系統(tǒng)應(yīng)答。
本發(fā)明的粘膜遞送系統(tǒng)用于經(jīng)粘膜遞送生物學(xué)活性物質(zhì)。優(yōu)選的粘膜包括鼻粘膜、胃腸粘膜、和舌下粘膜。
合適的含氧金屬鹽的實(shí)例是如陽(yáng)離子選自Al、K、Ca、Mg、Zn、Ba、Na、Li、B、Be、Fe、Si、Co、Cu、Ni、Ag、Au、和Cr的含氧金屬鹽。
含氧金屬鹽化合物的陰離子可以是有機(jī)或無(wú)機(jī)陰離子，或者有機(jī)和無(wú)機(jī)陰離子的組合。合適的含氧金屬鹽的實(shí)例是如陰離子選自硫酸鹽、氫氧化物、磷酸鹽、硝酸鹽、碘酸氧、溴酸鹽、碳酸鹽、水合物、醋酸鹽、檸檬酸鹽、草酸鹽、和酒石酸鹽，及其混和形式的含氧金屬鹽。含氧金屬鹽還包括配位復(fù)合物。配位復(fù)合物的定義在如《化學(xué)和物理學(xué)手冊(cè)》(The Handbook of Chemistry and Physics，第56版，B部分，第7章，1975-76，文獻(xiàn)10)中給出。
在本文中，表述“混和形式”意欲包括各種陰離子的組合，以及與如氯化物和硫化物的組合。雖然遞送系統(tǒng)包括含氧金屬鹽，但是也涵蓋可以用另一組VIA原子(諸如S、Se、或Te)代替氧。
根據(jù)本發(fā)明使用的含氧金屬鹽可以是配制成粘膜遞送系統(tǒng)后提供期望效果的任何含氧金屬鹽。這種含氧物質(zhì)的實(shí)例是氫氧化鋁、磷酸鋁、硫酸鋁、醋酸鋁、硫酸鋁鉀、磷酸鈣、酒石酸鈣、Maalox(氫氧化鋁與氫氧化鎂的混和物)、氫氧化鈹、氫氧化鋅、碳酸鋅、硫酸鋅、和硫酸鋇。
最優(yōu)選氫氧化鋁、磷酸鋁、醋酸鋁、磷酸鈣、酒石酸鈣、和硫酸鋅。
生物學(xué)活性物質(zhì)可以優(yōu)選選自營(yíng)養(yǎng)物，像維生素，諸如維生素B12、維生素B6、維生素A、維生素E、維生素D、維生素D3，鐵，和葉酸；酶，諸如尿激酶、TPA(組織型纖溶酶原激活劑)、凝集因子VIII、和鏈激酶；免疫原性物質(zhì)，諸如天然的、重組的、或經(jīng)修飾的蛋白質(zhì)或其片段、抗原、變應(yīng)原(參照下文)、類變應(yīng)原、肽、與適當(dāng)載體(像KLH即鑰孔嘁血藍(lán)蛋白或破傷風(fēng)類毒素)綴合的半抗原、碳水化合物、任選經(jīng)滅活或減毒的細(xì)菌或病毒及其成分、RNA、DNA、PNA、寄生蟲(chóng)或逆轉(zhuǎn)錄病毒、寄生物、支原體、或毒素，如破傷風(fēng)類毒素、白喉類毒素、霍亂毒素A和B亞基、風(fēng)疹、彈狀病毒(狂犬病)、肌病毒、副肌病毒(像副流感病毒、腮腺炎、和麻疹)、小核糖核酸病毒(像脊髓灰質(zhì)炎病毒、柯薩奇病毒、?？刹《?、和鼻病毒)、呼腸孤病毒、痘病毒(像小痘病毒、痘苗病毒、和牛痘病毒)、乳頭多瘤空泡病毒(像多瘤病毒、乳頭瘤病毒、和SV40)、腺病毒、EBV(像單核細(xì)胞增多癥病毒)、細(xì)小病毒(像HPV B19)、皰疹病毒(像單純皰疹病毒和帶狀皰疹病毒即水痘病毒)、巨細(xì)胞病毒(CMV)、蟲(chóng)媒病毒(像黃熱病和登革熱)、逆轉(zhuǎn)錄病毒(像HIV)、肝炎病毒(像甲肝、乙肝、和丙肝)、B型流感嗜血菌、分支桿菌(Mycobacterium)(像肺結(jié)核分支桿菌(M.tuberculosis)、牛型分支桿菌(M.bovis)、非洲分支桿菌(M.africanum)、田鼠分支桿菌(M.microti)、鳥(niǎo)分支桿菌(M.avium)、胞內(nèi)分支桿菌(M.intracellulare)、堪薩斯分支桿菌(M.kansasii)、戈登氏分支桿菌(M.gordonae)、副結(jié)核分支桿菌(M.paratuberculosis)、和鼠麻風(fēng)分支桿菌(M.lepramurium))、疏螺旋體屬的種(Borrelia spp.)(像布氏疏螺旋體(B.burgdorferi，特別是B.burgdorferi sensu lato和B.burgdorferisensu stricto)、嘎氏疏螺旋體(B.grainii)、阿氏疏螺旋體(B.afzelii)、達(dá)氏疏螺旋體(B.duttoni)、和回歸熱疏螺旋體(B.recurrentis))、百日咳博德特氏菌(Pordetella pertussis)(百日咳)、沙門(mén)氏菌屬的種(Salmonella spp.)(像鼠傷寒沙門(mén)菌(S.typhimurium)和傷寒沙門(mén)菌(S.typhi))、密螺旋體屬的種(Treponemaspp.)(像蒼白密螺旋體(T.pallidum))、細(xì)螺旋體屬的種(Leptospira spp.)、彎曲桿菌屬的種(Campylobacter spp.)(像空腸彎曲桿菌(C.jejuni))、螺桿菌屬的種(Helicobacter spp.)(像幽門(mén)螺桿菌(H.pylori))、假單胞菌屬的種(Pseudomonas spp.)、軍團(tuán)菌屬的種(Legionella spp.)、奈瑟菌屬的種(Neisseria spp.)(像淋病奈瑟菌(N.gonorrhoea)和腦膜炎奈瑟菌(N.menigitidis))、衣原體屬的種(Chlamydia spp.)(像沙眼衣原體(C.trachomatis)、肺炎衣原體(C.pneumonia)、和鸚鵡熱衣原體(C.psittae)、腸桿菌屬的種(Enterobacter spp.)、克雷白菌屬的種(Klebsiellaspp.)、耶爾森菌屬的種(Yersiniaspp.)、弧菌屬的種(Vibriospp.)(像霍亂弧菌(V.cholerae))、加德納菌屬的種(Gardnerella spp.)、立克次氏體屬的種(Rickettsia spp.)、梭菌屬的種(Clostridium spp.)(像艱難梭菌(C.difficile)、肉毒梭菌(C.botulinum)、和破傷風(fēng)梭菌(C.tetani))、乳酸桿菌屬的種(Lactobacillus spp.)、李斯特桿菌屬的種(Listeria spp.)、和支原體屬的種(Mycoplasma spp.)(像肺炎支原體(M.pneumoniae)、人型支原體(M.hominis)、惡性瘧原蟲(chóng)(Plasmodiumfalciparum)、和杜氏利什曼原蟲(chóng)(Leishmania donovani))、霉菌、和真菌(諸如芽枝霉屬(Cladosporium)、鏈格孢屬(Alternaria)、曲霉屬(Aspergillus)、擔(dān)子菌綱(Basidiomycetes)、白色假絲酵母(Candidaalbicans)、和青霉屬(Penicillinum))的衍生物；類變應(yīng)原，諸如經(jīng)戊二醛修飾的變應(yīng)原復(fù)合物；藥物，諸如β-內(nèi)酰胺類(如青霉素)、含磺胺制劑類、酶類、酶抑制劑類(如乙酰膽堿酯酶抑制劑)、激素類(如LHRH、雌激素、胰島素、和人類生長(zhǎng)激素)、溶血?jiǎng)╊?止血?jiǎng)╊?如肝素和促紅細(xì)胞生成素α或β)、精神作用藥物(如鋰)、麻醉劑類(如嗎啡)、和巴比妥酸鹽類；遺傳物質(zhì)，諸如DNA、RNA、和PNA；其它藥物，像癌癥相關(guān)化合物，諸如TNFα、LHRH類似物、和細(xì)胞抑制劑；其它化合物，諸如糖類、甘露聚糖類、和凝集素類；及其類似物或衍生物。
本發(fā)明的組合物有助于經(jīng)體內(nèi)任何部位粘膜的遞送。因此，組合物可以經(jīng)口服、鼻、陰道、舌下、眼、直腸、尿道、乳房?jī)?nèi)、肺、耳(即經(jīng)耳)、或口腔(頰)途徑施用。
組合物可以適當(dāng)?shù)囊試婌F劑、氣霧劑、合劑、片劑(有或無(wú)腸衣包裹)、膠囊(硬的或軟的，有或無(wú)腸衣包裹)、懸浮液、分散劑、顆粒、粉劑、溶液、乳劑、咀嚼片、水溶片、滴劑、凝膠、糊劑、糖漿、乳膏劑、菱錠(粉劑、顆粒、片劑)、滴注液、氣體、吸入劑、軟膏、條狀、植入物(耳、眼、皮膚、鼻、直腸、或陰道)、乳房?jī)?nèi)藥劑、陰道藥劑(vagitories)、栓劑、或子宮藥劑(uteritories)的形式存在。
另一方面，本發(fā)明涉及用于經(jīng)脊椎動(dòng)物粘膜遞送免疫原性物質(zhì)的疫苗，包括(1)至少一種免疫原性物質(zhì)和(2)包括含氧金屬鹽的粘膜遞送系統(tǒng)。疫苗的免疫原性物質(zhì)可以優(yōu)選選自天然的、重組的、或經(jīng)修飾的蛋白質(zhì)或其片段、抗原類、變應(yīng)原類、類變應(yīng)原類、肽類、半抗原類、肽類、碳水化合物類、任選經(jīng)滅活或減毒的病毒、任選經(jīng)滅活或減毒的細(xì)菌、RNA、DNA、PNA、逆轉(zhuǎn)錄病毒類、寄生蟲(chóng)類或寄生物、支原體、和毒素，及其類似物或衍生物。疫苗可以以噴霧劑、氣霧劑、合劑、片劑(有或無(wú)腸衣包裹)、膠囊(硬的或軟的，有或無(wú)腸衣包裹)、懸浮液、分散劑、顆粒、粉劑、溶液、乳劑、咀嚼片、水溶片、滴劑、凝膠、糊劑、糖漿、乳膏劑、菱錠(粉劑、顆粒、片劑)、滴注液、氣體、吸入劑、軟膏、條狀、植入物(耳、眼、皮膚、鼻、直腸、或陰道)、乳房?jī)?nèi)藥劑、陰道藥劑、栓劑、或子宮藥劑的形式存在，適合于經(jīng)口服、鼻、陰道、舌下、眼、直腸、尿道、乳房?jī)?nèi)、肺、耳、或口腔途徑的遞送。疫苗可以適合于如疫苗接種或過(guò)敏接種(脫敏)，預(yù)防或減輕過(guò)敏狀態(tài)。
本發(fā)明還涉及用于經(jīng)脊椎動(dòng)物粘膜遞送營(yíng)養(yǎng)物的制劑，包括(1)至少一種營(yíng)養(yǎng)物和(2)包括含氧金屬鹽的粘膜遞送系統(tǒng)。營(yíng)養(yǎng)物優(yōu)選選自維生素、鹽、酶、微量元素、和微量礦物質(zhì)。制劑可以優(yōu)選以噴霧劑、氣霧劑、合劑、片劑(有或無(wú)腸衣包裹)、膠囊(硬的或軟的，有或無(wú)腸衣包裹)、懸浮液、分散劑、顆粒、粉劑、溶液、乳劑、咀嚼片、水溶片、滴劑、凝膠、糊劑、糖漿、乳膏劑、菱錠(粉劑、顆粒、片劑)、滴注液、氣體、吸入劑、軟膏、條狀、植入物(耳、眼、皮膚、鼻、直腸、或陰道)、乳房?jī)?nèi)藥劑、陰道藥劑、栓劑、或子宮藥劑的形式存在，適合于經(jīng)口服、鼻、陰道、舌下、眼、直腸、尿道、乳房?jī)?nèi)、肺、耳(經(jīng)耳)、或口腔途徑遞送。
另一方面，本發(fā)明涉及用于經(jīng)脊椎動(dòng)物粘膜遞送藥物的制劑，包括(1)至少一種藥物和(2)包括含氧金屬鹽的粘膜遞送系統(tǒng)。藥物可以優(yōu)選選自抗體類、抗生素類、肽類及其衍生物、鹽類、激素類、溶血?jiǎng)╊?、和止血?jiǎng)╊?。在?yōu)選的實(shí)施方案中，藥物選自β-內(nèi)酰胺類(如青霉素)、含磺胺制劑類、酶抑制劑類(如乙酰膽堿酯酶抑制劑)、激素類(如LHRH、雌激素、胰島素、和人類生長(zhǎng)激素)、溶血?jiǎng)╊?止血?jiǎng)╊?如肝素和促紅細(xì)胞生成素α或β)、精神作用藥物(如鋰)、麻醉劑類(如嗎啡)、和巴比妥酸鹽類。制劑可以適當(dāng)?shù)囊試婌F劑、氣霧劑、合劑、片劑(有或無(wú)腸衣包裹)、膠囊(硬的或軟的，有或無(wú)腸衣包裹)、懸浮液、分散劑、顆粒、粉劑、溶液、乳劑、咀嚼片、水溶片、滴劑、凝膠、糊劑、糖漿、乳膏劑、菱錠(粉劑、顆粒、片劑)、滴注液、氣體、吸入劑、軟膏、條狀、植入物(耳、眼、皮膚、鼻、直腸、或陰道)、乳房?jī)?nèi)藥劑、陰道藥劑、栓劑、或子宮藥劑的形式存在，適合于經(jīng)口服、鼻、陰道、舌下、眼、直腸、尿道、乳房?jī)?nèi)、肺、耳(經(jīng)耳)、或口腔途徑施用。
還有一個(gè)方面，本發(fā)明涉及用于經(jīng)脊椎動(dòng)物粘膜遞送遺傳物質(zhì)的制劑，包括(1)遺傳物質(zhì)、病毒物質(zhì)、或細(xì)菌物質(zhì)，和(2)包括含氧金屬鹽的粘膜遞送系統(tǒng)。遺傳物質(zhì)可以優(yōu)選選自RNA、DNA、和PNA，及其類似物或衍生物。制劑可以適當(dāng)?shù)囊試婌F劑、氣霧劑、合劑、片劑(有或無(wú)腸衣包裹)、膠囊(硬的或軟的，有或無(wú)腸衣包裹)、懸浮液、分散劑、顆粒、粉劑、溶液、乳劑、咀嚼片、水溶片、滴劑、凝膠、糊劑、糖漿、乳膏劑、菱錠(粉劑、顆粒、片劑)、滴注液、氣體、吸入劑、軟膏、條狀、植入物(耳、眼、皮膚、鼻、直腸、或陰道)、乳房?jī)?nèi)藥劑、陰道藥劑、栓劑、或子宮藥劑的形式存在，適合于經(jīng)口服、鼻、陰道、舌下、眼、直腸、尿道、乳房?jī)?nèi)、肺、耳(經(jīng)耳)、或口腔途徑施用。
用于經(jīng)脊椎動(dòng)物粘膜遞送生物學(xué)活性物質(zhì)的粘膜遞送系統(tǒng)同樣形成本發(fā)明的一部分。這種遞送系統(tǒng)包括至少一種含氧金屬鹽。金屬鹽可以是配制成遞送系統(tǒng)后提供期望效果的任何含氧金屬鹽。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，含氧金屬鹽的陽(yáng)離子選自Al、K、Ca、Mg、Zn、Ba、Na、Li、B、Be、Fe、Si、Co、Cu、Ni、Ag、Au、和Cr。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，含氧金屬鹽的陰離子選自硫酸鹽、氫氧化物、磷酸鹽、硝酸鹽、碘酸鹽、溴酸鹽、碳酸鹽、水合物、醋酸鹽、檸檬酸鹽、草酸鹽、和酒石酸鹽，及其混和形式。這種含氧物質(zhì)的實(shí)例是氫氧化鋁、磷酸鋁、硫酸鋁、醋酸鋁、硫酸鋁鉀、磷酸鈣、酒石酸鈣、Maalox(氫氧化鋁與氫氧化鎂的混和物)、氫氧化鈹、氫氧化鋅、碳酸鋅、硫酸鋇、和硫酸鋅。
粘膜遞送系統(tǒng)可以優(yōu)選以噴霧劑、氣霧劑、合劑、片劑(有或無(wú)腸衣包裹)、膠囊(硬的或軟的，有或無(wú)腸衣包裹)、懸浮液、分散劑、顆粒、粉劑、溶液、乳劑、咀嚼片、水溶片、滴劑、凝膠、糊劑、糖漿、乳膏劑、菱錠(粉劑、顆粒、片劑)、滴注液、氣體、吸入劑、軟膏、條狀、植入物(耳、眼、皮膚、鼻、直腸、或陰道)、乳房?jī)?nèi)藥劑、陰道藥劑、栓劑、或子宮藥劑的形式存在，適合于經(jīng)口服、鼻、陰道、舌下、眼、直腸、尿道、乳房?jī)?nèi)、肺、耳(經(jīng)耳)、或口腔途徑施用。
本發(fā)明還涉及用于經(jīng)脊椎動(dòng)物粘膜遞送生物學(xué)活性物質(zhì)的方法，包括對(duì)脊椎動(dòng)物(包括哺乳動(dòng)物，特別是人)施用上述組合物。
本發(fā)明具有大量的重要應(yīng)用。
重要應(yīng)用領(lǐng)域的一個(gè)實(shí)例是疫苗領(lǐng)域?？茖W(xué)家的一項(xiàng)主要成就是開(kāi)發(fā)了用于預(yù)防危及生命的疾病(如破傷風(fēng)或肺結(jié)核)的疫苗。疫苗接種傳統(tǒng)的是通過(guò)皮下或肌肉內(nèi)途徑進(jìn)行。通過(guò)本發(fā)明，經(jīng)粘膜途徑的疫苗接種事實(shí)上是可能的。據(jù)此，本發(fā)明涉及產(chǎn)生或改變脊椎動(dòng)物(包括人)體內(nèi)免疫應(yīng)答的方法，包括對(duì)脊椎動(dòng)物施用此處定義的疫苗。此外，本發(fā)明涉及脊椎動(dòng)物(包括人)的疫苗接種或治療，包括對(duì)脊椎動(dòng)物施用此處定義的疫苗、制劑、或組合物。
在本文中，術(shù)語(yǔ)“免疫應(yīng)答”包括特異性抗體和/或B和T細(xì)胞活性，抗體來(lái)自IgA、IgD、IgE、IgG、和IgM類及其亞類。術(shù)語(yǔ)還意欲包括其它血清或組織成分。由于佐劑活性，應(yīng)答可能稱為關(guān)于混和的或傾斜的Th1或Th2型的T細(xì)胞活性(文獻(xiàn)8，第7章)。在體液中，可能產(chǎn)生血清學(xué)和/或分泌型抗體。
疫苗接種的概念是基于免疫系統(tǒng)的兩個(gè)基本特征，即特異性和記憶效應(yīng)。疫苗接種將引發(fā)接受者的免疫系統(tǒng)，而且通過(guò)重復(fù)接觸相同蛋白質(zhì)，免疫系統(tǒng)將處于更強(qiáng)烈應(yīng)答攻擊(例如微生物感染)的狀態(tài)。疫苗是意欲在接受者體內(nèi)產(chǎn)生這種保護(hù)性免疫應(yīng)答的免疫接種中使用的蛋白質(zhì)混和物。保護(hù)將只包括疫苗中存在的成分和同源抗原。
具體而言，可能對(duì)流感嗜血菌B疫苗、流感疫苗、麻疹疫苗、甲肝和乙肝疫苗、BCG(肺結(jié)核)疫苗、白喉疫苗、破傷風(fēng)疫苗、腦膜炎疫苗、日本腦炎疫苗、霍亂疫苗、風(fēng)疹疫苗、腮腺炎疫苗、肺炎疫苗、脊髓灰質(zhì)炎疫苗、狂犬病疫苗、黃熱病疫苗、甲狀腺(Thyphoid)疫苗、HIV疫苗、瘧疾疫苗及針對(duì)寄生蟲(chóng)的其它疫苗、皰疹I(lǐng)和II疫苗、血吸蟲(chóng)疫苗感興趣。同樣，可能對(duì)組合疫苗特別感興趣。這種組合疫苗的實(shí)例是白喉-破傷風(fēng)-百日咳-脊髓灰質(zhì)炎疫苗、麻疹-腮腺炎-風(fēng)疹疫苗、甲肝和乙肝疫苗。
本發(fā)明的重要應(yīng)用領(lǐng)域的另一個(gè)實(shí)例是過(guò)敏反應(yīng)治療領(lǐng)域，包括預(yù)防和減輕過(guò)敏反應(yīng)。
眾所周知，遺傳學(xué)易感個(gè)體變得對(duì)個(gè)體所接觸到的由各種環(huán)境來(lái)源產(chǎn)生的抗原敏感(過(guò)敏)。當(dāng)先前過(guò)敏的個(gè)體再次接觸相同或同源變應(yīng)原時(shí)，發(fā)生過(guò)敏反應(yīng)。過(guò)敏應(yīng)答的范圍從花粉熱、鼻傳導(dǎo)病(rhinoconductivitis)、鼻炎、和哮喘到應(yīng)答如蜜蜂或大黃蜂刺或者昆蟲(chóng)咬的全身過(guò)敏和死亡。反應(yīng)是立即的，而且可以由多種過(guò)敏性變應(yīng)原引起，諸如由草、樹(shù)、雜草、昆蟲(chóng)、(室塵)螨蟲(chóng)、食物、藥物、化學(xué)藥品、和香水來(lái)源的化合物。
為了消除強(qiáng)烈的過(guò)敏反應(yīng)，通常通過(guò)小心的控制和重復(fù)注射變應(yīng)原，來(lái)使患者脫敏。過(guò)敏患者接觸侵犯性變應(yīng)原直至達(dá)到維持劑量的這種療法一旦達(dá)到維持水平常常持續(xù)很長(zhǎng)時(shí)間。也就是說(shuō)，特異性變應(yīng)原接種包括比健康人傳統(tǒng)疫苗接種方案次數(shù)更多的注射。
傳統(tǒng)的疫苗接種由引發(fā)劑量及一段時(shí)間后的加強(qiáng)免疫來(lái)進(jìn)行。對(duì)于大多數(shù)疫苗，每5-10年必須重復(fù)加強(qiáng)接種，從而使免疫學(xué)記憶維持完整。
由于過(guò)敏患者體內(nèi)正在發(fā)生免疫應(yīng)答，因此與其它類型的接種相比，變應(yīng)原接種是復(fù)雜的。這種免疫應(yīng)答的特征是存在變應(yīng)原特異性IgE，其主要作用是在接觸變應(yīng)原后釋放變應(yīng)性癥狀。因此，使用來(lái)自天然來(lái)源變應(yīng)原的變應(yīng)原接種具有固有的風(fēng)險(xiǎn)，即極度危及患者生命的副作用。
根據(jù)本發(fā)明，設(shè)計(jì)了用于治療、預(yù)防、或減輕過(guò)敏反應(yīng)的方法，包括對(duì)脊椎動(dòng)物(包括人)施用此處定義的疫苗。
免疫原性物質(zhì)可以適當(dāng)?shù)难苌杂绕涫怯蓸?shù)、草、藥草、真菌、室塵螨蟲(chóng)、蟑螂、和動(dòng)物毛發(fā)及頭皮屑產(chǎn)生的吸入性變應(yīng)原。來(lái)自樹(shù)、草、和藥草的重要花粉變應(yīng)原是由分類學(xué)上的目山毛櫸目(Fagales)、木犀目(Oleales)、和松目(Pinales)，包括尤其是樺屬(Betula)、榿木屬(Alnus)、榛屬(Corylus)、鵝耳櫪屬(Carpinus)、和橄欖屬(Olea)，早熟禾目(Poales)，包括尤其是黑麥草屬(Lolium)、梯牧草屬(Phelum)、早熟禾屬(Poa)、狗牙根屬(Cynodon)、鴨茅屬(Dactylis)、和黑麥屬(Secale)的草，菊目(Asterales)和蕁麻目(Urticales)，包括尤其是豚草屬(Ambrosia)和艾屬(Artemisia)的藥草。來(lái)自真菌的重要的吸入變應(yīng)原是尤其是諸如由鏈格孢屬(Alternaria)和支孢霉屬(Cladosporium)產(chǎn)生。其它重要的吸入變應(yīng)原來(lái)自室塵螨蟲(chóng)的塵螨屬(Dermatophagoides)、蟑螂、和哺乳動(dòng)物，諸如貓、狗、和馬。此外，本發(fā)明的重組變應(yīng)原可以衍生自毒液變應(yīng)原，包括由諸如來(lái)自膜翅目(Hymenoptera)昆蟲(chóng)(包括蜜蜂、黃蜂、和螞蟻)刺或咬產(chǎn)生的變應(yīng)原。
需要理解，術(shù)語(yǔ)“衍生自”包括天然存在的物質(zhì)及其異構(gòu)體。此外，物質(zhì)可以通過(guò)重組或合成技術(shù)的方法制備。特異性變應(yīng)原成分對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員是知道的，包括如山毛櫸目的Betv1(疣皮樺(Betulaverrucosa)，樺樹(shù))、Alng1(歐洲榿木(Alnus glutinosa)，榿木)、Cora1(Corylus avelana，榛樹(shù))、和Carb1(歐洲鵝耳櫪Carpinusbetulus，鵝耳櫪)。其它是Cryj1(松目)、Amba1和2、Artv1(菊目)、Parj1(蕁麻目)、Olee1(木犀目)、Avee1、Cynd1、Dacg1、Fesp1、Holl1、Lolp1和5、Pasn1、Phlp1和5、Poap1、2、和5、Secc1和5、和Sorh1(各種草的花粉)、Alta1和Clah1(真菌)、Derf1和2、Derp1和2(室塵螨蟲(chóng)，分別是法氏皮螨(D.farinae)和特嗜皮螨(D.pteronyssinus))、Blag1和2、Pera1(蟑螂，分別是德國(guó)小蠊(Blatella germanica)和美洲大蠊(Periplaneta americana))、Feld1(貓)、Canf1(狗)、Equc1、2、和3(馬)、Apism1和2(蜜蜂)、Vesg1、2、和5、Pola1、2、和5(所有黃蜂)、和Soli1、2、3、和4(火螞蟻)。
此外，本發(fā)明可以用于獸醫(yī)應(yīng)用。實(shí)例是如促黃體激素釋放激素(LHRH)(治療或疫苗接種)的遞送、變應(yīng)原接種或治療(如跳蚤、室塵螨蟲(chóng))、健康蠕蟲(chóng)疾病、口蹄疫、寄生蟲(chóng)、腳跟(foot root)、噴嚏疾病、狂犬病、豬瘟、和維生素缺乏的治療。接受本發(fā)明組合物/制劑的動(dòng)物包括貓、狗、鳥(niǎo)、家禽、牛、羊、馬、其它產(chǎn)毛皮家畜、和魚(yú)。
需要理解，本發(fā)明的組合物、制劑、疫苗、和粘膜遞送系統(tǒng)還可以包括佐劑、賦形劑、或者適合于制劑的其它添加劑或成分。這些佐劑、賦形劑、和其它添加劑或成分對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員是知道的，包括尤其是溶劑、乳化劑、濕潤(rùn)劑、增塑劑、著色物質(zhì)、填料、防腐劑、粘度調(diào)節(jié)劑、緩沖劑、粘膜粘附和生物粘附物質(zhì)、等等。制劑策略的實(shí)例對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員是眾所周知的。粘膜粘附和生物粘附物質(zhì)的實(shí)例是凝集素、纖維素或丙烯酸聚合物、殼聚糖及其衍生物、天然樹(shù)膠、和聚丙烯酸酯。
在本發(fā)明的各種產(chǎn)品中尤其可以使用下列佐劑白細(xì)胞介素(如IL-1β、IL-2、IL-7、IL-12、INFγ)、Adju-Phos、葡聚糖、抗原制劑、霍亂全毒素、脂質(zhì)體、DDE、DHEA、DMPC、DMPG、DOC/Alum復(fù)合物、弗氏不完全佐劑、ISCOMs、LT口服佐劑、胞壁酰二肽、單磷酰脂質(zhì)A、胞壁酰三肽、和磷脂酰乙醇胺(參閱《疫苗設(shè)計(jì)，亞基和佐劑研究》(Vaccine Design.The Subunit and Adjuvant Approach)，第7章，文獻(xiàn)8)。
同樣，本發(fā)明的遞送系統(tǒng)、疫苗、或制劑的施用可以與其它步驟或途徑(即通過(guò)胃腸外或其它途徑施用物質(zhì))組合。施用的次序、順序、或間隔可以任意變化。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，遞送系統(tǒng)可以用于加強(qiáng)對(duì)先前胃腸外施用的疫苗接種的應(yīng)答。加強(qiáng)劑量可以優(yōu)選經(jīng)口服、口腔、舌下、或鼻途徑施用(至鼻、口、喉、或腸中的免疫活性組織)。
認(rèn)為患者最愿意接受經(jīng)口服途徑的施藥。鼻途徑提供了施用的最小體積，而口腔/舌下途徑和直腸途徑具有中間特性。因此，這些途徑，即口服、鼻、口腔、舌下、和胃腸，是優(yōu)選的。
將要施用的生物學(xué)活性物質(zhì)的合適量取決于討論的物質(zhì)、需要治療的疾病或狀態(tài)，進(jìn)一步取決于討論的脊椎動(dòng)物的年齡、體重、和狀態(tài)。找到最佳劑量?jī)H僅是本領(lǐng)域技術(shù)人員常規(guī)實(shí)驗(yàn)的問(wèn)題。
本領(lǐng)域技術(shù)人員還知道，經(jīng)粘膜施用的藥物通常需要包含超過(guò)100倍的大劑量。為了接種目的口服施用樺樹(shù)變應(yīng)原顯示，為了獲得臨床免疫治療效果所使用的量是胃腸外治療的3個(gè)數(shù)量級(jí)(Taudorf，1992，文獻(xiàn)11)。與其它報(bào)告一致，關(guān)于局部(如舌下)免疫治療的EAACI意見(jiàn)書(shū)同樣顯示使用了很大劑量(文獻(xiàn)12)。眾所周知的肽藥物也是這種情況，如肽去氨加壓素的生物利用度，經(jīng)口施用和經(jīng)鼻施用分別相當(dāng)于胃腸外施用的1％和10％。
通過(guò)口服施用低于先前實(shí)驗(yàn)預(yù)期的量的生物學(xué)活性物質(zhì)，此處提供的遞送系統(tǒng)就能夠獲得有效應(yīng)答。
粘膜與胃腸外途徑服藥的差異可以隨物質(zhì)和途徑變化很大。優(yōu)選的劑量是胃腸外生物相當(dāng)劑量的0.1-100倍，最優(yōu)選1-10倍。
在其它方面，本發(fā)明涉及通過(guò)此處所述粘膜遞送系統(tǒng)與生物學(xué)活性物質(zhì)，任選包括一種或多種制藥學(xué)可接受的賦形劑混和，用于制備此處所述組合物、疫苗、或制劑的方法。因此，本發(fā)明還涉及可以通過(guò)此處所述方法獲得的此處所述組合物、疫苗、或制劑。
含生物學(xué)活性物質(zhì)的(水)相通過(guò)將此物質(zhì)溶解，或者將此物質(zhì)的濃縮液用水(任選包含緩沖液、鹽、溶劑、或賦形劑)稀釋而形成。
含氧金屬鹽的(水)懸浮液或凝膠通過(guò)向干燥形式的含氧金屬鹽中加入水(任選包含緩沖液、鹽、溶劑、或賦形劑)，或者向預(yù)先平衡的預(yù)先形成的凝膠中加入水(任選含緩沖液、鹽、賦形劑)而形成。
制劑任選通過(guò)這些混和物中的一種與適當(dāng)量的緩沖相(任選包含鹽、溶劑、或賦形劑)混和，并在攪拌或混和條件下以受控速度逐步加入其它混和物，從而獲得含固相的濃縮制劑。
將濃縮制劑靜置，任選進(jìn)行適當(dāng)時(shí)間的攪拌。
然后可以進(jìn)行過(guò)濾、沉淀，或者任選地用水稀釋，所述水任選含緩沖液、鹽、溶劑、或賦形劑，從而產(chǎn)生最終的藥制劑。
合適的緩沖液、鹽、溶劑、或賦形劑優(yōu)選生物學(xué)可接受的，如制藥學(xué)可接受的，且是惰性的或者對(duì)于破壞生物學(xué)活性物質(zhì)的結(jié)構(gòu)或含氧金屬鹽固相(如凝膠或這些物質(zhì)間的復(fù)合物)的結(jié)構(gòu)完整性是惰性量的。
本發(fā)明由下文的非限制性實(shí)施例進(jìn)一步例示。通過(guò)實(shí)施例，觀察到了免疫應(yīng)答，從而進(jìn)一步明確了生物學(xué)活性物質(zhì)是經(jīng)粘膜轉(zhuǎn)運(yùn)的。細(xì)胞免疫應(yīng)答一方面依賴經(jīng)粘膜的遞送，另一方面依賴巨噬細(xì)胞和/或其它抗原呈遞細(xì)胞對(duì)物質(zhì)的可獲得性。因此，本發(fā)明的功效已經(jīng)被證明。
實(shí)施例下面是一些關(guān)于實(shí)驗(yàn)的一般性描述。動(dòng)物小鼠是來(lái)自Bomholtgrd(DK-8920 Ry，丹麥)的雌性BALB/c A小鼠，在服藥期開(kāi)始時(shí)是6-8周齡。將它們關(guān)在聚碳酸酯籠中，每只籠子8只小鼠。鋪墊軟木屑。所有動(dòng)物可以隨意接觸食物和水。食物是來(lái)自Chr.Petersen A/S(DK-4100 Ringsted，丹麥)的完全嚙齒類飲食。動(dòng)物對(duì)照組陽(yáng)性對(duì)照組通過(guò)腹膜內(nèi)(i.p.)途徑的免疫被用于陽(yáng)性對(duì)照組，已知這種方法在幾次注射后誘導(dǎo)強(qiáng)烈的免疫應(yīng)答。生物學(xué)活性物質(zhì)(免疫原)
在實(shí)施例3中，氫氧化鋁Al(OH)3，0.045-0.05M Al3+(1.25mgAl3+/ml)或0.04-0.045M Al3+(1.13mg Al3+/ml)。由1.3％鋁膠(Superfos，DK-2950 Vedbk，丹麥)配制。
磷酸鈣Ca3(PO4)2，0.034M Ca2+。由磷酸鈣佐劑(Superfos，DK-2950Vedbk，丹麥)配制。
磷酸鋁AlPO4，0.05M Al3+。由Adju-phos(Superfos，DK-2950Vedbk，丹麥)配制。
醋酸鋁C4H7O5Al，0.05M Al3+。由堿性醋酸鋁(Sigma，美國(guó))配制。
酒石酸鈣CaC4H4O6，0.05M Ca2+。由L-(+)-酒石酸鈣水合物(Sigma，美國(guó))配制。
硫酸鋅ZnSO4，0.01M Zn2+。由硫酸鋅七水合物(Sigma，美國(guó))配制。組合物/制劑/疫苗的制備如下配制測(cè)試制劑/組合物/疫苗根據(jù)本發(fā)明，用于遞送生物學(xué)活性物質(zhì)、包括含氧金屬鹽的粘膜遞送系統(tǒng)如下文所述形成。
這些制劑的保存時(shí)間不得超過(guò)3周。將包括含氧金屬鹽和破傷風(fēng)類毒素的制劑保存于4℃。所有其它制劑保存于-22℃。
在用于對(duì)照組的制劑中，接受不含免疫原的金屬鹽，免疫原用古柯0.0緩沖液代替。
在用于對(duì)照組的制劑中，接受不含金屬鹽的免疫原，金屬鹽用古柯0.0緩沖液代替。
這些制劑的保存時(shí)間不得超過(guò)3周。將包括含氧金屬鹽和破傷風(fēng)類毒素的制劑保存于4℃。所有其它制劑保存于-22℃。服藥腹膜內(nèi)施用動(dòng)物間隔14天接受3劑(腹膜內(nèi))，0.25ml/劑。服藥時(shí)，不麻醉小鼠。實(shí)施例4根據(jù)表4，對(duì)動(dòng)物皮下(s.c.)，或者皮下或口服施用0.25ml制劑/疫苗/組合物。血液取樣由眼窩靜脈采集血樣，并通過(guò)ELISA單個(gè)分析血清。ELISA實(shí)施例1、2、和5進(jìn)行直接包被ELISA。實(shí)施例3和4進(jìn)行夾層ELISA。平板實(shí)施例1、2、3、4、和5MaxiSorpF96，NUNC，丹麥。
加入下文所述所有試劑至總體積100μl/孔?？乖诙犹菽敛萏崛∥?0μg/ml，(由ALK-AbellóA/S( 丹麥)蛋白質(zhì)含量85.7％(w/w)的批次獲得)。陽(yáng)性對(duì)照對(duì)實(shí)施例1和2的所有樣品分析IgG1和IgG2a的存在。這些實(shí)驗(yàn)的ELISA稀釋曲線顯示于圖1-24。
通過(guò)特異性抗Ig測(cè)定特異性Ig。
發(fā)現(xiàn)進(jìn)一步例示于表3-5和圖25-27。實(shí)施例1用破傷風(fēng)類毒素免疫如上文所述進(jìn)行破傷風(fēng)類毒素的口服和腹膜內(nèi)(對(duì)照動(dòng)物)免疫。使用3個(gè)測(cè)試組，每組8只動(dòng)物。一組接受口服劑量的如上文所述制備的抗原-氫氧化鋁(0.045-0.05M)制劑/組合物/疫苗。一組接受口服劑量的不包括含氧金屬鹽粘膜遞送系統(tǒng)的抗原。一組(對(duì)照動(dòng)物)如上文所述用抗原-氫氧化鋁(0.045-0.05M)制劑/組合物/疫苗腹膜內(nèi)免疫。獲得的結(jié)果顯示于下文的表1。
結(jié)果以“陽(yáng)性應(yīng)答小鼠數(shù)目/組中小鼠總數(shù)”表述?！翱侷g”表示特異性Ig。陽(yáng)性應(yīng)答如果至少在兩個(gè)連續(xù)稀釋度血清的OD值大于陰性對(duì)照血清的OD值，則認(rèn)為應(yīng)答是陽(yáng)性的。
結(jié)果描述于圖1-18。
表1
如表1和圖1-18所示，口服免疫、具有所見(jiàn)特異性Ig水平的陽(yáng)性應(yīng)答小鼠的數(shù)目(第70天)與觀察到的腹膜內(nèi)免疫的陽(yáng)性應(yīng)答小鼠的數(shù)目相當(dāng)。
此外，應(yīng)答表型(IgG1和IgG2a)顯示均有Th1和Th2應(yīng)答。
總之，實(shí)施例1顯示了使用口服免疫的發(fā)明的可行性，免疫原性物質(zhì)由破傷風(fēng)類毒素例示，粘膜遞送系統(tǒng)由氫氧化鋁例示。
此外，觀察到免疫應(yīng)答的發(fā)現(xiàn)顯示使用本發(fā)明經(jīng)粘膜遞送生物學(xué)活性物質(zhì)是可能的。
結(jié)果描述于圖19-24。
表2
表2顯示了使用或不用含氫氧化鋁的粘膜遞送系統(tǒng)，用梯牧草口服免疫后，在血清中具有特異性Ig水平的小鼠數(shù)目(第70天)。陽(yáng)性應(yīng)答小鼠的數(shù)目與腹膜內(nèi)免疫后觀察到的陽(yáng)性應(yīng)答小鼠的數(shù)目可比。
此外，應(yīng)答類型(IgG1和IgG2a)符合腹膜內(nèi)免疫的觀察結(jié)果。由此可見(jiàn)根據(jù)本發(fā)明的免疫產(chǎn)生與腹膜內(nèi)免疫相似的免疫狀態(tài)。
總之，實(shí)施例2顯示了使用變應(yīng)原免疫接種的本發(fā)明的可行性，免疫原性物質(zhì)由梯牧草例示，含氧金屬鹽由氫氧化鋁例示。
此外，表2所示結(jié)果顯示了完整免疫原經(jīng)粘膜的攝取和隨后以保留其三維結(jié)構(gòu)的形式向相關(guān)細(xì)胞(B細(xì)胞)的展示。具有基本上保守的三維結(jié)構(gòu)的生物學(xué)活性物質(zhì)的遞送據(jù)信對(duì)依賴B細(xì)胞的抗體應(yīng)答是必需的。使用其它遞送系統(tǒng)、經(jīng)胃腸道的遞送，常常誘導(dǎo)大蛋白質(zhì)和肽的變性，隨后破壞三維結(jié)構(gòu)和B細(xì)胞表位，眾所周知的草變應(yīng)原現(xiàn)象(參照文獻(xiàn)11)。
表3
總之，實(shí)施例3顯示了可以應(yīng)用含不同濃度含氧金屬鹽的各種制劑。金屬鹽濃度可以進(jìn)行最優(yōu)化。在這個(gè)實(shí)施例中，免疫原性物質(zhì)由梯牧草例示，含氧金屬鹽由氫氧化鋁例示，使用兩種不同的濃度。
根據(jù)表4和上文“服藥”所述，免疫3個(gè)測(cè)試組，每組8只動(dòng)物。陽(yáng)性應(yīng)答單個(gè)分析各組小鼠的血清，并通過(guò)各個(gè)稀釋度的OD讀數(shù)(圖25-27)顯示獲得的稀釋曲線。在測(cè)量點(diǎn)的頂部，應(yīng)用了顯示該組幾何學(xué)平均值的一條線。由于1組8只小鼠是在兩塊ELISA板上進(jìn)行分析的，在每張圖上顯示由陽(yáng)性對(duì)照獲得的兩條線。如果不同服藥的小鼠組的血清的相同稀釋度的OD應(yīng)答存在顯著差異，則認(rèn)為應(yīng)答是陽(yáng)性的。
結(jié)果進(jìn)一步形象化于圖25-27。
表4
由圖25-27的比較可見(jiàn)，第2組的陽(yáng)性應(yīng)答小鼠數(shù)目顯著高于第3組。第1組作為陽(yáng)性對(duì)照，因此陽(yáng)性應(yīng)答小鼠數(shù)目顯著高于第2組和第3組。
總之，實(shí)施例4顯示了通過(guò)不同施用途徑的組合，用有活性的而非安慰劑制劑誘導(dǎo)強(qiáng)烈的免疫應(yīng)答是可能的。此外，誘導(dǎo)出現(xiàn)更早、診斷性水平更高的應(yīng)答是可能的，且/或是很一致的。
當(dāng)與傳統(tǒng)免疫方案組合應(yīng)用時(shí)，本發(fā)明可以用于產(chǎn)生加強(qiáng)免疫?；蛘?，不同的施用途徑可以有利的用于改善免疫。
在這個(gè)實(shí)施例中，生物學(xué)活性物質(zhì)由梯牧草例示，含氧金屬鹽由氫氧化鋁例示。
表5
MDS表示粘膜遞送系統(tǒng)。
由表5可見(jiàn)，用與含氧金屬鹽配制的抗原制劑免疫的所有組誘導(dǎo)免疫應(yīng)答的小鼠數(shù)目比用不包括含氧金屬鹽的抗原或不包括抗原的含氧金屬鹽免疫的對(duì)照組大。當(dāng)腹膜內(nèi)使用時(shí)，所有組合物/制劑/疫苗誘導(dǎo)一致的免疫應(yīng)答。
總之，實(shí)施例5顯示了當(dāng)用于本發(fā)明的粘膜遞送系統(tǒng)時(shí)，廣泛的含氧金屬鹽抗原有效誘導(dǎo)免疫應(yīng)答。在這個(gè)實(shí)施例中，免疫原性物質(zhì)由破傷風(fēng)類毒素例示，金屬鹽分別由氫氧化鋁、磷酸鈣、磷酸鋁、硫酸鋅、酒石酸鈣、和醋酸鋁例示。
參考文獻(xiàn)1.WO 94/21288(Assay Research公司)2.WO 95/05194(Medeva Holdings B.V.)3.JP 65008152 B(摘要)(Yaoi，H.)4.GB 2 195 996(Mitsui Norin有限公司)5.GB 1 078 879(Parke.Davis & Company)6.FR 2 143 588(Herman Schettler)7.P.M.Callahan等人，制藥學(xué)研究(Pharmaceiutical Research)8(7)851-858，19918.“疫苗設(shè)計(jì)。亞基和佐劑研究”，第7、8、和9章，M.F.Powell和M.J.Newman編，1995，Plenum Press9.EP 266 119(南方研究所和UAB研究基地)10.化學(xué)和物理學(xué)手冊(cè)，第56版，B部分，第7章，1975-197611.E.Taudorf“口的免疫治療”，博士論文，1992，LgeforeningensForlag，哥本哈根，丹麥12.EAACI意見(jiàn)書(shū)“局部免疫治療”，1998，EAACI免疫治療小組委員會(huì)和ESPACI免疫治療委員會(huì)13.Ipsen和 變應(yīng)性和臨床免疫學(xué)雜志(The Journal ofAllergy and Clinical Immunology)72(2)150-159，198權(quán)利要求
1.用于經(jīng)脊椎動(dòng)物粘膜遞送生物學(xué)活性物質(zhì)的組合物，包括(1)至少一種生物學(xué)活性物質(zhì)，和(2)包括含氧金屬鹽的粘膜遞送系統(tǒng)。
2.權(quán)利要求1的組合物，其中生物學(xué)活性物質(zhì)選自免疫原性物質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)物、藥物、和遺傳物質(zhì)，及其類似物或衍生物。
3.權(quán)利要求2的組合物，其中免疫原性物質(zhì)選自天然的、重組的、或經(jīng)修飾的蛋白質(zhì)或其片段、抗原類、變應(yīng)原類、類變應(yīng)原類、肽類、半抗原類、碳水化合物類、任選經(jīng)滅活或減毒的細(xì)菌或病毒及其成分、RNA、DNA、PNA、寄生蟲(chóng)類或逆轉(zhuǎn)錄病毒類、寄生物類、支原體類、或毒素類，及其類似物或衍生物；其中營(yíng)養(yǎng)物選自維生素類、酶類、微量元素類、和微量礦物質(zhì)類，及其類似物或衍生物；其中藥物選自抗體類、抗生素類、肽類、鹽類、激素類、溶血?jiǎng)╊?、止血?jiǎng)╊?、和酶抑制劑類，及其類似物或衍生物；其中遺傳物質(zhì)選自RNA、DNA、和PNA，及其類似物或衍生物；或其中酶選自尿激酶、TPA(組織型纖溶酶原激活劑)、凝集因子VIII、和鏈激酶，及其類似物或衍生物。
4.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)的組合物，其中含氧金屬鹽的陽(yáng)離子選自Al、K、Ca、Mg、Zn、Ba、Na、Li、B、Be、Fe、Si、Co、Cu、Ni、Ag、Au、和Cr。
5.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)的組合物，其中含氧金屬鹽的陰離子選自硫酸鹽、氫氧化物、磷酸鹽、硝酸鹽、碘酸鹽、溴酸鹽、碳酸鹽、水合物、醋酸鹽、檸檬酸鹽、草酸鹽、和酒石酸鹽，及其混和形式。
6.權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)的組合物，其中含氧金屬鹽選自氫氧化鋁、磷酸鋁、硫酸鋁、醋酸鋁、硫酸鋁鉀、磷酸鈣、酒石酸鈣、Maalox(氫氧化鋁與氫氧化鎂的混和物)、氫氧化鈹、氫氧化鋅、碳酸鋅、硫酸鋇、和硫酸鋅。
7.權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)的組合物，還包括生物膠粘劑。
8.權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)的組合物，還包括制藥學(xué)可接受的佐劑，諸如白細(xì)胞介素(如IL-1β、IL-2、IL-7、IL-12、和INFγ)、Adju-Phos、葡聚糖、抗原制劑、霍亂全毒素、脂質(zhì)體、DDE、DHEA、DMPC、DMPG、DOC/Alum復(fù)合物、弗氏不完全佐劑、ISCOMs、LT口服佐劑、胞壁酰二肽、單磷酰脂質(zhì)A、胞壁酰三肽、和磷脂酰乙醇胺。
9.權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)的組合物，形式為噴霧劑、氣霧劑、合劑、片劑(有或無(wú)腸衣包裹)、膠囊(硬的或軟的，有或無(wú)腸衣包裹)、懸浮液、分散劑、咀嚼片、水溶片、滴劑、凝膠、糊劑、糖漿、乳膏劑、菱錠(粉劑、顆粒、片劑)、滴注液、氣體、吸入劑、軟膏、條狀、植入物(耳、眼、皮膚、鼻、直腸、或陰道)、乳房?jī)?nèi)藥劑、陰道藥劑、栓劑、或子宮藥劑。
10.權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)的組合物，用于口服、鼻、陰道、舌下、眼、直腸、尿道、乳房?jī)?nèi)、肺、耳(經(jīng)耳)、或口腔施用。
11.權(quán)利要求1-10任一項(xiàng)的組合物，此處粘膜是鼻粘膜、口腔粘膜、舌下粘膜、或胃腸粘膜。
12.用于經(jīng)脊椎動(dòng)物粘膜遞送免疫原性物質(zhì)的疫苗，包括(1)至少一種免疫原性物質(zhì)，和(2)包括含氧金屬鹽的粘膜遞送系統(tǒng)。
13.權(quán)利要求12的疫苗，其中免疫原性物質(zhì)選自天然的、重組的、或經(jīng)修飾的蛋白質(zhì)或其片段、抗原類、變應(yīng)原類、類變應(yīng)原類、肽類、半抗原類、碳水化合物類、任選經(jīng)滅活或減毒的細(xì)菌或病毒及其成分、RNA、DNA、PNA、寄生蟲(chóng)或逆轉(zhuǎn)錄病毒類、寄生物類、支原體類、或毒素類，及其類似物或衍生物。
14.權(quán)利要求12或13的疫苗用于治療、預(yù)防、或減輕過(guò)敏狀態(tài)或傳染疾病。
15.權(quán)利要求12-14任一項(xiàng)的疫苗，其中含氧金屬鹽的陽(yáng)離子選自Al、K、Ca、Mg、Zn、Ba、Na、Li、B、Be、Fe、Si、Co、Cu、Ni、Ag、Au、和Cr。
16.權(quán)利要求12-15任一項(xiàng)的疫苗，其中含氧金屬鹽的陰離子選自硫酸鹽、氫氧化物、磷酸鹽、硝酸鹽、碘酸鹽、溴酸鹽、碳酸鹽、水合物、醋酸鹽、檸檬酸鹽、草酸鹽、和酒石酸鹽，及其混和形式。
17.權(quán)利要求12-16任一項(xiàng)的疫苗，其中含氧金屬鹽選自氫氧化鋁、磷酸鋁、硫酸鋁、醋酸鋁、硫酸鋁鉀、磷酸鈣、酒石酸鈣、Maalox(氫氧化鋁與氫氧化鎂的混和物)、氫氧化鈹、氫氧化鋅、碳酸鋅、硫酸鋇、和硫酸鋅。
18.權(quán)利要求12-17任一項(xiàng)的疫苗，還包括生物膠粘劑。
19.權(quán)利要求12-18任一項(xiàng)的疫苗，還包括制藥學(xué)可接受的佐劑，諸如白細(xì)胞介素(如IL-1β、IL-2、IL-7、IL-12、和INFγ)、Adju-Phos、葡聚糖、抗原制劑、霍亂全毒素、脂質(zhì)體、DDE、DHEA、DMPC、DMPG、DOC/Alum復(fù)合物、弗氏完全佐劑、ISCOMs、LT口服佐劑、胞壁酰二肽、單磷酰脂質(zhì)A、胞壁酰三肽、和磷脂酰乙醇胺。
20.權(quán)利要求12-19任一項(xiàng)的疫苗，形式為噴霧劑、氣霧劑、合劑、片劑(有或無(wú)腸衣包裹)、膠囊(硬的或軟的，有或無(wú)腸衣包裹)、懸浮液、分散劑、顆粒、粉劑、溶液、乳劑、咀嚼片、水溶片、滴劑、凝膠、糊劑、糖漿、乳膏劑、菱錠(粉劑、顆粒、片劑)、滴注液、氣體、吸入劑、軟膏、條狀、植入物(耳、眼、皮膚、鼻、直腸、或陰道)、乳房?jī)?nèi)藥劑、陰道藥劑、栓劑、或子宮藥劑。
21.權(quán)利要求12-20任一項(xiàng)的疫苗，用于口服、鼻、陰道、舌下、眼、直腸、尿道、乳房?jī)?nèi)、肺、耳、或口腔施用。
22.權(quán)利要求12-21任一項(xiàng)的疫苗，其中粘膜是鼻粘膜、口腔粘膜、舌下粘膜、或胃腸粘膜。
23.用于經(jīng)脊椎動(dòng)物粘膜遞送營(yíng)養(yǎng)物的制劑，包括(1)至少一種營(yíng)養(yǎng)物，和(2)包括含氧金屬鹽的粘膜遞送系統(tǒng)。
24.權(quán)利要求23的制劑，其中營(yíng)養(yǎng)物選自維生素類、鹽類、酶類、微量元素類、和微量礦物質(zhì)類。
25.權(quán)利要求23-24任一項(xiàng)的制劑，其中含氧金屬鹽的陽(yáng)離子選自Al、K、Ca、Mg、Zn、Ba、Na、Li、B、Be、Fe、Si、Co、Cu、Ni、Ag、Au、和Cr。
26.權(quán)利要求23-24任一項(xiàng)的制劑，其中含氧金屬鹽的陰離子選自硫酸鹽、氫氧化物、磷酸鹽、硝酸鹽、碘酸鹽、溴酸鹽、碳酸鹽、水合物、醋酸鹽、檸檬酸鹽、草酸鹽、和酒石酸鹽，及其混和形式。
27.權(quán)利要求23-26任一項(xiàng)的制劑，其中含氧金屬鹽選自氫氧化鋁、磷酸鋁、硫酸鋁、醋酸鋁、硫酸鋁鉀、磷酸鈣、酒石酸鈣、Maalox(氫氧化鋁與氫氧化鎂的混和物)、氫氧化鈹、氫氧化鋅、碳酸鋅、硫酸鋇、和硫酸鋅。
28.權(quán)利要求23-27任一項(xiàng)的制劑，還包括制藥學(xué)可接受的佐劑和/或生物膠粘劑。
29.權(quán)利要求23-28任一項(xiàng)的制劑，形式為噴霧劑、氣霧劑、合劑、片劑(有或無(wú)腸衣包裹)、膠囊(硬的或軟的，有或無(wú)腸衣包裹)、懸浮液、分散劑、顆粒、粉劑、溶液、乳劑、咀嚼片、水溶片、滴劑、凝膠、糊劑、糖漿、乳膏劑、菱錠(粉劑、顆粒、片劑)、滴注液、氣體、吸入劑、軟膏、條狀、植入物(耳、眼、皮膚、鼻、直腸、或陰道)、乳房?jī)?nèi)藥劑、陰道藥劑、栓劑、或子宮藥劑。
30.權(quán)利要求23-29任一項(xiàng)的制劑，用于口服、鼻、陰道、舌下、眼、直腸、尿道、乳房?jī)?nèi)、肺、耳(經(jīng)耳)、或口腔施用。
31.權(quán)利要求23-30任一項(xiàng)的制劑，其中粘膜是鼻粘膜、口腔粘膜、舌下粘膜、或胃腸粘膜。
32.用于經(jīng)脊椎動(dòng)物粘膜遞送藥物的制劑，包括(1)至少一種藥物，和(2)包括含氧金屬鹽的粘膜遞送系統(tǒng)。
33.權(quán)利要求32的制劑，其中藥物選自β-內(nèi)酰胺類、含磺胺制劑類、酶抑制劑類、激素類、溶血?jiǎng)╊?止血?jiǎng)╊?、精神作用藥物類、麻醉劑類、巴比妥酸鹽類、酶類、和癌癥相關(guān)化合物類。
34.權(quán)利要求32-33任一項(xiàng)的制劑，其中含氧金屬鹽的陽(yáng)離子選自Al、K、Ca、Mg、Zn、Ba、Na、Li、B、Be、Fe、Si、Co、Cu、Ni、Ag、Au、和Cr。
35.權(quán)利要求32-35任一項(xiàng)的制劑，其中含氧金屬鹽的陰離子選自硫酸鹽、氫氧化物、磷酸鹽、硝酸鹽、碘酸鹽、溴酸鹽、碳酸鹽、水合物、醋酸鹽、檸檬酸鹽、草酸鹽、和酒石酸鹽，及其混和形式。
36.權(quán)利要求32-35任一項(xiàng)的制劑，其中含氧金屬鹽選自氫氧化鋁、磷酸鋁、硫酸鋁、醋酸鋁、硫酸鋁鉀、磷酸鈣、酒石酸鈣、Maalox(氫氧化鋁與氫氧化鎂的混和物)、氫氧化鈹、氫氧化鋅、碳酸鋅、硫酸鋇、和硫酸鋅。
37.權(quán)利要求32-36任一項(xiàng)的制劑，還包括生物膠粘劑。
38.權(quán)利要求32-36任一項(xiàng)的制劑，還包括制藥學(xué)可接受的佐劑，諸如白細(xì)胞介素(如IL-1β、IL-2、IL-7、IL-12、和INFγ)、Adju-Phos、葡聚糖、抗原制劑、霍亂全毒素、脂質(zhì)體、DDE、DHEA、DMPC、DMPG、DOC/Alum復(fù)合物、弗氏不完全佐劑、ISCOMs、LT口服佐劑、胞壁酰二肽、單磷酰脂質(zhì)A、胞壁酰三肽、和磷脂酰乙醇胺。
39.權(quán)利要求32-38任一項(xiàng)的制劑，形式為噴霧劑、氣霧劑、合劑、片劑(有或無(wú)腸衣包裹)、膠囊(硬的或軟的，有或無(wú)腸衣包裹)、懸浮液、分散劑、顆粒、粉劑、溶液、乳劑、咀嚼片、水溶片、滴劑、凝膠、糊劑、糖漿、乳膏劑、菱錠(粉劑、顆粒、片劑)、滴注液、氣體、吸入劑、軟膏、條狀、植入物(耳、眼、皮膚、鼻、直腸、或陰道)、乳房?jī)?nèi)藥劑、陰道藥劑、栓劑、或子宮藥劑。
40.權(quán)利要求32-39任一項(xiàng)的制劑，用于口服、鼻、陰道、舌下、眼、直腸、尿道、乳房?jī)?nèi)、肺、耳(經(jīng)耳)、或口腔施用。
41.權(quán)利要求32-40任一項(xiàng)的制劑，其中粘膜是鼻粘膜、口腔粘膜、舌下粘膜、或胃腸粘膜。
42.用于經(jīng)脊椎動(dòng)物粘膜遞送遺傳物質(zhì)的制劑，包括(1)遺傳物質(zhì)，和(2)包括含氧金屬鹽的粘膜遞送系統(tǒng)。
43.權(quán)利要求42的制劑，其中遺傳物質(zhì)選自RNA、DNA、和PNA，或其類似物和衍生物。
44.權(quán)利要求42-43任一項(xiàng)的制劑，其中含氧金屬鹽的陽(yáng)離子選自Al、K、Ca、Mg、Zn、Ba、Na、Li、B、Be、Fe、Si、Co、Cu、Ni、Ag、Au、和Cr。
45.權(quán)利要求42-43任一項(xiàng)的制劑，其中含氧金屬鹽的陰離子選自硫酸鹽、氫氧化物、磷酸鹽、硝酸鹽、碘酸鹽、溴酸鹽、碳酸鹽、水合物、醋酸鹽、檸檬酸鹽、草酸鹽、和酒石酸鹽，及其混和形式。
46.權(quán)利要求42-45任一項(xiàng)的制劑，其中含氧金屬鹽選自氫氧化鋁、磷酸鋁、硫酸鋁、醋酸鋁、硫酸鋁鉀、磷酸鈣、酒石酸鈣、Maalox(氫氧化鋁與氫氧化鎂的混和物)、氫氧化鈹、氫氧化鋅、碳酸鋅、硫酸鋇、和硫酸鋅。
47.權(quán)利要求42-46任一項(xiàng)的制劑，還包括生物膠粘劑。
48.權(quán)利要求42-47任一項(xiàng)的制劑，還包括制藥學(xué)可接受的佐劑，諸如白細(xì)胞介素(如IL-1β、IL-2、IL-7、IL-12、和INFγ)、Adju-Phos、葡聚糖、抗原制劑、霍亂全毒素、脂質(zhì)體、DDE、DHEA、DMPC、DMPG、DOC/Alum復(fù)合物、弗氏不完全佐劑、ISCOMs、LT口服佐劑、胞壁酰二肽、單磷酰脂質(zhì)A、胞壁酰三肽、和磷脂酰乙醇胺。
49.權(quán)利要求42-48任一項(xiàng)的制劑，形式為噴霧劑、氣霧劑、合劑、片劑(有或無(wú)腸衣包裹)、膠囊(硬的或軟的，有或無(wú)腸衣包裹)、懸浮液、分散劑、顆粒、粉劑、溶液、乳劑、咀嚼片、水溶片、滴劑、凝膠、糊劑、糖漿、乳膏劑、菱錠(粉劑、顆粒、片劑)、滴注液、氣體、吸入劑、軟膏、條狀、植入物(耳、眼、皮膚、鼻、直腸、或陰道)、乳房?jī)?nèi)藥劑、陰道藥劑、栓劑、或子宮藥劑。
50.權(quán)利要求42-49任一項(xiàng)的制劑，用于口服、鼻、陰道、舌下、眼、直腸、尿道、乳房?jī)?nèi)、肺、耳(經(jīng)耳)、或口腔施用。
51.權(quán)利要求42-49任一項(xiàng)的制劑，其中粘膜是鼻粘膜、口腔粘膜、舌下粘膜、或胃腸粘膜。
52.用于經(jīng)脊椎動(dòng)物粘膜遞送生物學(xué)活性物質(zhì)的粘膜系統(tǒng)，包括含氧金屬鹽。
53.權(quán)利要求52的粘膜遞送系統(tǒng)，其中含氧金屬鹽的陽(yáng)離子選自Al、K、Ca、Mg、Zn、Ba、Na、Li、B、Be、Fe、Si、Co、Cu、Ni、Ag、Au、和Cr。
54.權(quán)利要求52的粘膜遞送系統(tǒng)，其中含氧金屬鹽的陰離子選自硫酸鹽、氫氧化物、磷酸鹽、硝酸鹽、碘酸鹽、溴酸鹽、碳酸鹽、水合物、醋酸鹽、檸檬酸鹽、草酸鹽、和酒石酸鹽，及其混和形式。
55.權(quán)利要求52-54任一項(xiàng)的粘膜遞送系統(tǒng)，其中含氧金屬鹽選自氫氧化鋁、磷酸鋁、硫酸鋁、醋酸鋁、硫酸鋁鉀、磷酸鈣、酒石酸鈣、Maalox(氫氧化鋁與氫氧化鎂的混和物)、氫氧化鈹、氫氧化鋅、碳酸鋅、硫酸鋇、和硫酸鋅。
56.權(quán)利要求52-55任一項(xiàng)的粘膜遞送系統(tǒng)，還包括生物膠粘劑。
57.權(quán)利要求52-56任一項(xiàng)的粘膜遞送系統(tǒng)，還包括制藥學(xué)可接受的佐劑，諸如白細(xì)胞介素(如IL-1β、IL-2、IL-7、IL-12、和INFγ)、Adju-Phos、葡聚糖、抗原制劑、霍亂全毒素、脂質(zhì)體、DDE、DHEA、DMPC、DMPG、DOC/Alum復(fù)合物、弗氏不完全佐劑、ISCOMs、LT口服佐劑、胞壁酰二肽、單磷酰脂質(zhì)A、胞壁酰三肽、和磷脂酰乙醇胺。
58.權(quán)利要求52-57任一項(xiàng)的粘膜遞送系統(tǒng)，形式為噴霧劑、氣霧劑、合劑、片劑(有或無(wú)腸衣包裹)、膠囊(硬的或軟的，有或無(wú)腸衣包裹)、懸浮液、分散劑、顆粒、粉劑、溶液、乳劑、咀嚼片、水溶片、滴劑、凝膠、糊劑、糖漿、乳膏劑、菱錠(粉劑、顆粒、片劑)、滴注液、氣體、吸入劑、軟膏、條狀、植入物(耳、眼、皮膚、鼻、直腸、或陰道)、乳房?jī)?nèi)藥劑、陰道藥劑、栓劑、或子宮藥劑。
59.權(quán)利要求52-58任一項(xiàng)的粘膜遞送系統(tǒng)，用于口服、鼻、陰道、舌下、眼、直腸、尿道、乳房?jī)?nèi)、肺、耳(經(jīng)耳)、或口腔施用。
60.權(quán)利要求52-59任一項(xiàng)的制劑，其中粘膜是鼻粘膜、口腔粘膜、舌下粘膜、或胃腸粘膜。
61.一種用于經(jīng)脊椎動(dòng)物粘膜遞送生物學(xué)活性物質(zhì)的方法，包括對(duì)脊椎動(dòng)物(包括人類)施用權(quán)利要求1-11任一項(xiàng)的組合物。
62.權(quán)利要求61的方法，其中生物學(xué)活性物質(zhì)是免疫原性物質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)物、藥物、或遺傳物質(zhì)。
63.一種在脊椎動(dòng)物(包括人類)體內(nèi)產(chǎn)生免疫應(yīng)答的方法，包括對(duì)脊椎動(dòng)物(包括人類)施用權(quán)利要求12-22任一項(xiàng)的疫苗。
64.脊椎動(dòng)物(包括人類)的疫苗接種或治療，包括對(duì)脊椎動(dòng)物(包括人類)施用權(quán)利要求12-22任一項(xiàng)的疫苗、權(quán)利要求23-51任一項(xiàng)的制劑、或權(quán)利要求1-11任一項(xiàng)的組合物。
65.一種用于治療、預(yù)防、或減輕過(guò)敏反應(yīng)或傳染疾病的方法，包括對(duì)脊椎動(dòng)物(包括人類)施用權(quán)利要求12-22任一項(xiàng)的疫苗。
66.含氧金屬鹽用于制備權(quán)利要求52-60任一項(xiàng)的粘膜遞送系統(tǒng)的用途。
67.通過(guò)施用權(quán)利要求12-22任一項(xiàng)的疫苗產(chǎn)生的抗體的用途。
68.通過(guò)權(quán)利要求51-59的粘膜遞送系統(tǒng)與生物學(xué)活性物質(zhì)和任選的制藥學(xué)可接受的賦形劑的混合，用于制備權(quán)利要求1-11的組合物、權(quán)利要求12-22的疫苗、或權(quán)利要求23-51的制劑的方法。
69.可以通過(guò)權(quán)利要求68的方法獲得的組合物、疫苗、或制劑。
全文摘要
此處描述了用于經(jīng)粘膜遞送生物學(xué)活性物質(zhì)的組合物、疫苗、和制劑,以及包括含氧金屬鹽的粘膜遞送系統(tǒng)。此外,還描述了產(chǎn)生脊椎動(dòng)物(包括人類)的免疫應(yīng)答、疫苗接種和治療的方法,以及治療、預(yù)防、或減輕變態(tài)反應(yīng)的方法。公開(kāi)了制備組合物、疫苗、和制劑的方法。組合物和遞送系統(tǒng)具有廣泛應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61K9/20GK1338947SQ00803452
公開(kāi)日2002年3月6日 申請(qǐng)日期2000年2月4日 優(yōu)先權(quán)日1999年2月5日
發(fā)明者H·H·伊普森, J·尤耳達(dá)爾拉貝克 申請(qǐng)人:阿爾克-阿貝洛有限公司