專利名稱:促黑素細(xì)胞激素抑制劑的制作方法
(技術(shù)領(lǐng)域)本發(fā)明涉及具有促黑素細(xì)胞激素抑制能力的新型肽衍生物,促黑素細(xì)胞激素抑制劑,以及含有該抑制劑的美白劑、免疫機能調(diào)節(jié)劑、食欲調(diào)節(jié)劑、化妝品和皮膚外用劑。
(背景技術(shù))促黑素細(xì)胞激素與人和動物的皮膚、毛的顏色有關(guān)。我們知道人皮膚的變黑就是與該物質(zhì)有關(guān)(例如,Nature(1961)189,176-179)。有報道認(rèn)為其作用與促黑素細(xì)胞激素促進(jìn)黑素細(xì)胞增殖、激活黑色素的生物合成酶-酪氨酸酶有關(guān)(Proc.Natl.Acad.Sci.(1995)92,1789-1793);另一方面,人們已知促黑素細(xì)胞激素促進(jìn)產(chǎn)生皮膚表皮細(xì)胞,其產(chǎn)生量隨紫外線照射而增加(ACTH Relat.Pept.(1995)6,63-68)。因此,可以認(rèn)為促黑素細(xì)胞激素是因紫外線照射導(dǎo)致日曬后色素沉積的重要原因。
促黑素細(xì)胞激素除上述作用外,已知還有抑制巨噬細(xì)胞產(chǎn)生一氧化氮作用(Immunology Today(1997)18,140-145)、抑制IL-10介導(dǎo)的免疫作用及食欲調(diào)節(jié)作用(Am.J.Physio1.274Endocrinol.Metab.37(1998)E627-E633)。
根據(jù)上述情況,如果能抑制促黑素細(xì)胞激素的生成或抑制其作用,則可以防止因紫外線作用引起的色素沉積,還可以預(yù)防、改善及治療免疫異?;蛎庖吖δ苋毕莅Y,或者通過調(diào)節(jié)食欲來控制體重。
原先,作為促黑素細(xì)胞激素抑制劑,已知有His-D-Arg-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2(Peptides(1994)15,627-632)和D-Trp-Arg-Leu-NH2(Proc.Natl.Acad.Sci.(1995)92,2894-2898)等。但是,所有這些抑制劑的肽鏈中都含有色氨酸這種不穩(wěn)定氨基酸,不利于保存。另外,人們知道爬蟲類皮膚和兩棲類動物的色素細(xì)胞會脫色;但作為人皮膚色素沉積原因的黑色素生成及酪氨酸酶的促黑素細(xì)胞激素活化是否有抑制作用,目前還未探明。
我們知道其他促黑素細(xì)胞激素抑制劑,如アグウチタンパク質(zhì)或其肽片段有抑制色素沉積作用(WO 97/00892),但存在既不易制備又不易保存的問題。
從細(xì)胞水平評價促黑素細(xì)胞激素抑制劑具有使色素細(xì)胞脫色的效果,其在實際的生物體使用時,有抑制色素沉積效果,或者,預(yù)防、改善、和治療免疫異常及免疫缺陷癥效果,或者,通過調(diào)節(jié)食欲來控制體重的功能的效果,其效果差,或效果的出現(xiàn)需要時間,這都是問題。
(發(fā)明的公開)根據(jù)上述技術(shù)背景來看,本發(fā)明的第一課題是提供容易制備、保存穩(wěn)定性優(yōu)良的具有抑制促黑素細(xì)胞激素作用,進(jìn)而防止色素沉積,或者,預(yù)防、改善或治療免疫異常癥及免疫缺陷癥,或者,通過調(diào)節(jié)食欲,控制體重,并且可以用作化妝品、皮膚外用劑的新型肽衍生物。
本發(fā)明的第二課題是提供適用于實際生物體且效果顯著的具有色素沉積抑制效果,或者,有效預(yù)防、改善或治療免疫異常癥、免疫缺陷癥,調(diào)節(jié)食欲,控制體重,并且可以用作化妝品、皮膚外用劑的促黑素細(xì)胞激素抑制劑。
本發(fā)明者們通過對第一課題的銳意研究發(fā)現(xiàn),采用以下述通式(1)表示的新型肽衍生物及其鹽,可以解決上述第一課題,根據(jù)該發(fā)現(xiàn),完成本發(fā)明。即,本發(fā)明涉及含萘基的二或三肽衍生物或其鹽,其特征是以下列通式(1)表示。 (式中,Ar為可以有取代基的萘基;R1、R2及R3分別為獨立的氫原子,或可以有取代基的碳原子數(shù)1~6的直鏈或支鏈烷基;R4是氫原子,可以有取代基的氨基酸側(cè)鏈、氨基、脒基、胍基、碳原子數(shù)1~6的直鏈或支鏈氨基烷基、碳原子數(shù)1~6的直鏈或支鏈脒烷基、碳原子數(shù)1~6個的直鏈或支鏈胍基烷基、及碳原子數(shù)6~12的脒基芳基;X1,可以不存在,也可以代表碳原子數(shù)1~6個的亞烷基,含碳原子數(shù)1~6個直鏈或支鏈烷基作為取代基的碳原子數(shù)1~6的氨基亞烷基,或碳原子數(shù)1~6個的直鏈或支鏈氧代亞烷基,X2可以不存在,也可以代表碳原子數(shù)1~6個的直鏈或支鏈亞烷基;R6為氫原子或-NHY,Y是氫原子、碳原子數(shù)2~22個的酰基、碳原子數(shù)1~22個的烷基、碳原子數(shù)1~22個的羥基烷基、或含碳原子數(shù)1~22個烷氧基的3-烷氧基-2-羥丙基。n為0或1的整數(shù),而R5為用下述通式(2)表示的基團(tuán) 式中,X3表示是-O-或-NR10-;X4表示為-O-或-NR11-;R7表示氫原子、氨基酸側(cè)鏈或碳原子數(shù)1~6個的直鏈或支鏈烷基;R8、R10及R11分別獨立為氫原子,或碳原子數(shù)1~6個的直鏈或支鏈烷基;R9表示氫原子、碳原子數(shù)1~22的羥基烷基、含有取代基是碳原子數(shù)1~22烷氧基的3-烷氧基-2-羥丙基。m為0或1的整數(shù)。)上述式(1)表示的肽衍生物是文獻(xiàn)未收載的新型化合物。
本發(fā)明者在對第二課題進(jìn)行悉心研究后發(fā)現(xiàn),在實際應(yīng)用于生物體時,具有顯著的色素沉著抑制劑等效果,得到一定的能阻礙cAMP產(chǎn)生作用的可抑制促黑素細(xì)胞激素作用的化合物,解決上述第二課題,完成本發(fā)明。這類化合物并不局限于以上述通式(1)表示的肽衍生物及其鹽。
即,本發(fā)明涉及抑制cAMP產(chǎn)生50%濃度(IC50)在100nM以下的有抑制促黑素細(xì)胞激素能力化合物作為有效成分的促黑素細(xì)胞激素抑制劑。
另外,本發(fā)明涉及一種促黑素細(xì)胞激素抑制劑,其特征在于包括選自上述通式(1)表示的肽衍生物及其鹽中的至少選一種作為有效成分。本發(fā)明涉及上述這類促黑素細(xì)胞激素抑制劑及含有至少一種抑制cAMP產(chǎn)生50%濃度在100nM以下的具有抑制促黑素細(xì)胞激素能力的化合物作為有效成分的美白劑、免疫機能調(diào)節(jié)劑、食欲調(diào)節(jié)劑、化妝品及皮膚外用劑。
以下,就本發(fā)明作詳細(xì)說明。
通式(1)表示肽衍生物及其鹽,R6的定義同前,當(dāng)其為NHY時,Y的具體例子可以舉出,例如,氫原子、乙?;⒈;?、異丙?;⒄□;?、異丁?;?、仲丁酰基、叔丁?;?、正戊酰基、仲戊酰基、叔戊酰基、異戊酰基、正己?;?、環(huán)己酰基、正庚?;⒄刘;?、2-乙基己酰基、壬?;?、異壬酰基、癸酰基、異癸?;⑹煌轷;?、月桂?;⑹轷;愂轷;⑷舛罐Ⅴ;⒆貦磅;愖貦磅;?、硬脂酰基、異硬脂?;?、油?;⒍轷;⒓谆?、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、仲戊基、叔戊基、異戊基、正己基、環(huán)己基、正庚基、正辛基、2-乙基己基、壬基、異壬基、癸基、異癸基、十一烷基、月桂烷基、十三烷基、異十三烷基、肉豆蔻烷基、十六烷基、異十六烷基、十八碳酰基、異十八碳酰基、油烯基、二十二烷基、2-羥乙基、2-羥丙基、2-羥異丙基、2-羥正丁基、2-羥異丁基、2-羥仲丁基、2-羥叔丁基、2-羥正戊基、2-羥仲戊基、2-羥叔戊基、2-羥異戊基、2-羥正己基、2-羥環(huán)己基、2-羥正庚基、2-羥正辛基、2-羥基-2-乙基己基、2-羥基壬基、2-羥基異壬基、2-羥基癸基、2-羥基異癸基、2-羥基十一烷基、2-羥基月桂烷基、2-羥基十三烷基、2-羥基異十三烷基、2-羥基肉豆蔻烷基、2-羥基十六烷基、2-羥基異十六烷基、2-羥基十八碳?;?-羥基異十八碳?;?-羥基油烯基、2-羥基二十二烷基、3-甲氧基-2-羥丙基、3-乙氧基-2-羥丙基、3-丙氧基-2-羥丙基、3-異丙氧基-2-羥丙基、3-正丁氧基-2-羥丙基、3-異丁氧基-2-羥丙基、3-仲丁氧基-2-羥丙基、3-叔丁氧基-2-羥丙基、3-正戊氧基-2-羥丙基、3-仲戊氧基-2-羥丙基、3-叔戊氧基-2-羥丙基、3-異戊氧基-2-羥丙基、3-正己氧基-2-羥丙基、3-環(huán)己氧基-2-羥丙基、3-正庚氧基-2羥丙基、3-正辛氧基-2-羥丙基、3-(2-乙基己基)氧代-2-羥丙基、3-壬氧基-2-羥丙基、3-異壬氧基-2-羥丙基、3-癸氧基-2-羥丙基、3-異癸氧基-2-羥丙基、3-十一烷氧基-2-羥丙基、3-月桂氧基-2-羥丙基、3-十三烷氧基-2-羥丙基、3-異十三烷氧基-2-羥丙基、3-十四烷氧基-2-羥丙基、3-十六烷氧基-2-羥丙基、3-異十六烷氧基-2-羥丙基、3-硬脂酰氧基-2-羥丙基、3-異硬脂酰氧基-2-羥丙基、3-油烯氧基-2-羥丙基、3-二十二烷氧基-2-羥丙基等。
前述定義的Ar與X1的結(jié)合位置沒有限定,可任意選擇。因此,與這些基的芳香環(huán)結(jié)合的氫原子可以被一個或多個鹵原子、碳原子數(shù)1~6個的烷基、羥基、碳原子數(shù)1~6的羥烷基、硝基、碳原子數(shù)1~6的烷氧基或羧基、或磺酸基取代。當(dāng)氫原子被多個基團(tuán)取代時,這多個取代基可以相同也可以不同。
作為Ar母體骨架,可以是1-萘基,或2-萘基。
對前面定義的R4具體舉例如下谷氨酸、天冬氨酸、半胱氨酸、同型半胱氨酸等酸性氨基酸丙氨酸、β-丙氨酸、2-氨基丁酸、纈氨酸、戊氨酸、亮氨酸、己氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、苯基甘氨酸、蘇氨酸、絲氨酸、高絲氨酸、酪氨酸、多巴、半胱氨酸、蛋氨酸、谷氨酸、天冬氨酸等中性氨基酸;賴氨酸、同型賴氨酸、鳥氨酸、精氨酸、同型精氨酸、組氨酸等堿性氨基酸的側(cè)鏈(從氨基酸除去C(COOH)NH2后的剩余基團(tuán));也可以是氫原子。其中,堿性氨基酸的側(cè)為更優(yōu)選的。除氨基酸側(cè)鏈外,還可以舉出含脒基的脒乙基、脒丙基、脒丁基、脒戊基、脒己基、脒苯基等。
就上述通式(2)中定義的R7具體舉例如下例如,谷氨酸、天冬氨酸、半胱氨酸、同型半胱氨酸等酸性氨基酸;丙氨酸、β-丙氨酸、2-氨基丁酸、纈氨酸、戊氨酸、亮氨酸、己氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、苯基甘氨酸、色氨酸、蘇氨酸、絲氨酸、高絲氨酸、酪氨酸、多巴、半胱氨酸、蛋氨酸、谷氨酸、天冬氨酸等中性氨基酸;賴氨酸、同型賴氨酸、鳥氨酸、精氨酸、同型精氨酸、組氨酸等堿性氨基酸的側(cè)鏈;或者氫原子。其中,含有疏水性側(cè)鏈的中性氨基酸側(cè)鏈?zhǔn)歉鼉?yōu)選的。
對前面定義的R9具體舉例如下例如,氫原子、甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、仲戊基、叔戊基、異戊基、正己基、環(huán)己基、正庚基、正辛基、2-乙基己基、壬基、異壬基、癸基、異癸基、十一烷基、月桂基、十三烷基、異十三烷基、肉豆蔻烷基、十六烷基、異十六烷基、十八碳?;愂颂减;?、油烯基、二十二烷基、2-羥乙基、2-羥丙基、2-羥異丙基、2-羥正丁基、2-羥異丁基、2-羥仲丁基、2-羥叔丁基、2-羥正戊基、2-羥仲戊基、2-羥叔戊基、2-羥異戊基、2-羥正己基、2-羥環(huán)己基、2-羥正庚基、2-羥正辛基、2-羥基-2-乙基己基、2-羥基壬基、2-羥基異壬基、2-羥基癸基、2-羥基異癸基、2-羥基十一烷基、2-羥基月桂基、2-羥基十三烷基、2-羥基異十三烷基、2-羥基肉豆蔻烷基、2-羥基十六烷基、2-羥基異十六烷基、2-羥基十八碳?;?、2-羥基異十八碳?;?-羥基油烯基、2-羥基二十二烷基、3-甲氧基-2-羥丙基、3-乙氧基-2-羥丙基、3-丙氧基-2-羥丙基、3-異丙氧基-2-羥丙基、3-正丁氧基-2-羥丙基、3-異丁氧基-2-羥丙基、3-仲丁氧基-2-羥丙基、3-叔丁氧基-2-羥丙基、3-正戊氧基-2-羥丙基、3-仲戊氧基-2-羥丙基、3-叔戊氧基-2-羥丙基、3-異戊氧基-2-羥丙基、3-正己氧基-2-羥丙基、3-環(huán)己氧基-2-羥丙基、3-正庚氧基-2羥丙基、3-正辛氧基-2-羥丙基、3-(2-乙基己基)氧代-2-羥丙基、3-壬氧基-2-羥丙基、3-異壬氧基-2-羥丙基、3-癸氧基-2-羥丙基、3-異癸氧基-2-羥丙基、3-月桂氧基-2-羥丙基、3-十三烷氧基-2-羥丙基、3-異十三烷氧基-2-羥丙基3-十四烷氧基-2-羥丙基、3-十六烷氧基-2-羥丙基、3-異十六烷氧基-2-羥丙基、3-十八酰氧基-2-羥丙基、3-異十八酰氧基-2-羥丙基、3-油烯氧基-2-羥丙基、3-二十二烷氧基-2-羥丙基等。
上述通式(1)表示的肽衍生物的各氨基酸剩余基團(tuán)可以是光學(xué)異物體也可以是消旋體。
上述通式(1)表示的化合物的鹽具體舉例如下鈉、鉀等堿金屬鹽;鎂、鈣等堿土金屬鹽;氨等無機鹽;乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、2-氨基-2-甲基-1-丙醇、2-氨基-2-甲基-1,3-丙二醇、賴氨酸、鳥氨酸、精氨酸等有機胺鹽;氯、溴、碘等鹵素鹽,鹽酸鹽,硫酸鹽,碳酸鹽,磷酸鹽等無機酸鹽;醋酸鹽,三氟醋酸鹽,檸檬酸鹽,對甲苯磺酸鹽,羥基乙酸鹽,蘋果酸鹽,乳酸鹽,脂肪酸鹽,酸性氨基酸鹽,焦谷氨酸鹽等有機酸鹽等,這些都是生理學(xué)上允許使用的鹽。這些鹽也可以兩種以上組合使用。
本發(fā)明中以上述通式(1)表示的肽衍生物可按下述方法合成。
首先,被保護(hù)的堿性氨基酸與羧基酰氨化中性氨基酸在二氯甲烷中經(jīng)水溶性碳化二亞氨縮合后,經(jīng)酸處理等僅除去主鏈保護(hù)基而得到保護(hù)二肽。其次,該保護(hù)二肽與側(cè)鏈含萘甲基等芳基的N末端保護(hù)氨基酸衍生物在二氯甲烷中經(jīng)水溶性碳化二亞氨縮合后,得到保護(hù)三肽,該保護(hù)三肽在鈀-炭催化劑下經(jīng)還原等過程除去保護(hù)基,得所需肽衍生物。另外,只脫去N末端保護(hù)的保護(hù)三肽在酸酐、酰氯、鹵代烷基、環(huán)氧鏈烴或烷烴縮水甘油醚中反應(yīng)后再于鈀-炭催化劑中還原脫保護(hù)等,即得N末端?;⑼榛?、羥烷基化及3-烷氧基-2-羥丙基化的各類衍生物。
另外,用芐基保護(hù)羧基的中性氨基酸代替羧基酰氨化的中性氨基酸,按上述操作同樣可得保護(hù)三肽,經(jīng)接觸還原,可得C末端是羧酸的三肽。其次,堿性氨基酸側(cè)鏈保護(hù)基、羧基保護(hù)基(芐基)被除去以前,同理使N末端氨基酰胺化、烷基化、羥烷基化、或3-烷氧基-2-羥丙基化后經(jīng)接觸還原可得各類衍生物。這些肽衍生物進(jìn)一步與醇在酸催化劑下脫水縮合可得各類C末端羧酸酯衍生物。
主鏈的氨基和堿性氨基酸側(cè)鏈被保護(hù)、C末端為羧酸的三肽與烷基氨脫水縮合反應(yīng),或者再與還氧鏈烴或烷縮水甘油醚發(fā)生加成反應(yīng)后,同樣地經(jīng)接觸還原,得C末端羧基被酯化或酰胺化的衍生物。
具有促黑素細(xì)胞激素抑制功能的化合物的本發(fā)明所述的抑制cAMP產(chǎn)生50%的濃度IC50,按以下方法測定和定義。
即,將B16黑色素瘤細(xì)胞在12孔平板上按每孔1×104cells接種。37℃,5%CO2下培養(yǎng)48小時。培養(yǎng)后,每孔用1ml無血清培養(yǎng)基(不含血清的D-MEM培養(yǎng)基)清洗后,再按每孔1mL分別添加1mM3-異丁基-1-甲基黃嘌呤、10nM促黑素細(xì)胞激素及含有各種濃度被檢化合物的無血清培養(yǎng)基,37℃下恒溫培養(yǎng)5分鐘。之后,將培養(yǎng)基從平板上全部除去,往里正確添加經(jīng)水冷卻的2.5%的高氯酸1ml,原樣于冰冷卻下恒溫培養(yǎng)30分鐘,萃取細(xì)胞內(nèi)的cAMP。培養(yǎng)后,每孔加入90ml 4.2M的氫氧化鉀中和萃取液。
中和后的萃取液,4℃下以12,000rpm離心10分鐘,上清夜中的cAMP量用Biotrak cAMP EIA System(アマシャムフアルマシア生物技術(shù)公司制造)用以下方法定量。全部操作在5℃以下進(jìn)行。首先,配制0~3200fM的cAMP標(biāo)準(zhǔn)品,向96孔微孔平板中分別注入100μl。然后,向NSB小杯(Non-specific Binding Well)中注入0.05M醋酸緩沖液(pH5.8、0.02%血清、含有0.01%防腐劑)200μl,向空白杯中注入100μl。樣品杯中注入樣品100μl。除NSB杯和空白杯外,其余杯中加抗血清100μl。將96孔微孔平板蓋好,輕微振蕩,3~5℃下培養(yǎng)2小時。培養(yǎng)后,除空白杯外,其余杯加cAMP過氧化物酶50μl。加蓋,于3~5℃下培養(yǎng)1小時后,所有杯用0.01M磷酸緩沖液(pH7.5,含有0.05%土溫20)400μl沖洗4次。用平板將小杯口向下,用紙扣于杯口,將杯中殘余液體除掉。
向所有杯中加入150μl的酶底物,15~30℃下振蕩1小時,振蕩后,分別向杯中加1M的硫酸100μl,于450nm處測吸光度,用cAMP標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度作成標(biāo)準(zhǔn)曲線,定量樣品的cAMP量。
用前面方法得到的10nM促黑素細(xì)胞激素,測定其抑制cAMP產(chǎn)生被檢化合物50%的濃度,并用nM單位表示,該值被定義為cAMP產(chǎn)生50%的抑制濃度。
本發(fā)明的cAMP產(chǎn)生50%的抑制濃度(IC50)在100nM以下的促黑素細(xì)胞激素抑制化合物被用作美白劑,特別是對紫外線照射產(chǎn)生的色素沉積具有較好的抑制作用。
考慮到該化合物的經(jīng)透皮吸收性、腸道吸收性、溶解性、制備的難易性,本發(fā)明的cAMP產(chǎn)生50%的抑制濃度(IC50)在100nM以下的促黑色細(xì)胞激素抑制化合物,優(yōu)選的是分子量在800以下,更優(yōu)選的分子量是200~600。
以上述通式(1)表示的肽衍生物及其鹽作為有效成分的本發(fā)明的促黑素細(xì)胞激素抑制劑、美白劑、免疫機能調(diào)節(jié)劑、食欲調(diào)節(jié)劑、化妝品、皮膚外用劑等可制成適于口服或非口服品。在這種場合,通過使用cAMP產(chǎn)生50%抑制濃度(IC50)在100nM以下的有抑制促黑素細(xì)胞激素作用的化合物,具有顯著效果。另外,在目的是用于皮膚時,可以配制直接涂抹的皮膚制劑,例如化妝品或皮膚外用劑配合本發(fā)明的肽及其鹽中至少一種或cAMP產(chǎn)生50%抑制濃度(IC50)在100nM以下的具有抑制促黑素細(xì)胞激素作用的化合物而制成。
此時,從本發(fā)明的新型肽衍生物及其鹽中選擇的至少一種或cAMP產(chǎn)生50%抑制濃度(IC50)100nM以下的具有抑制促黑素細(xì)胞激素作用化合物在化妝品中的配合量通常占化妝品總量的0.01~10重量%,優(yōu)選的是0.1~5重量%。在皮膚外用劑中該化合物的配合量通常在0.01~50重量%,優(yōu)選的是0.1~20重量%。當(dāng)不足0.1重量%時,效果發(fā)揮不好,超過50重量%時,會引起皮膚不適感。
用含有本發(fā)明肽及其鹽中至少一種或抑制cAMP產(chǎn)生50%濃度(IC50)在100nM以下化合物配制化妝品或皮膚外用劑時,一般的作為化妝品或皮膚外用劑中使用的成分,在不影響本發(fā)明效果的范圍內(nèi)還可以添加。作為一般的在化妝品或皮膚外用劑中使用的成分,可以舉出油性原料、表面活性劑、溶劑、保濕劑、高分子物質(zhì)、粉末物質(zhì)、色素類、香料及其他常用成分。
作為油性原料有動植物油等油脂類、羊毛脂等蠟類、石蠟等碳?xì)浠衔?、鯨蠟醇等高級醇、硬脂酸等高級脂肪酸、甾醇、卵磷脂等磷脂質(zhì)類、肉豆蔻酸等合成酯類、金屬皂、硅油等。
作為表面活性劑有陰離子表面活性劑、陽離子表面活性劑、兩性表面活性劑、非離子表面活性劑、乳化劑、增溶劑等。
作為溶劑有乙醇等低級醇、醚類、甘油類、液體非離子表面活性劑、液體油性原料及其他有機溶劑和水等。
作為保濕劑有甘油等多元醇、吡咯烷酮羧酸等有機酸鹽類、尿素、透明質(zhì)酸等粘多糖、脯氨酸等氨基酸鹽類等。
作為高分子物質(zhì)有膠原等天然高分子化合物、部分脫乙酰化甲殼質(zhì)等半合成高分子化合物、羧甲基纖維素等合成高分子化合物等。
作為粉末物質(zhì)有滑石等無機顏料、合成云母等功能性顏料、微粒子復(fù)合粉體(ハイブリッドフマインバウダ一)、二氧化鈦被覆云母等珍珠光澤顏料、光致變色顏料、尼龍粉末等高分子粉末、Nε-月桂酰賴氨酸等有機粉末等等。
作為色素有法定焦油色素第一種、法定焦油色素第二種、法定焦油色素第三種、染發(fā)劑、天然色素、礦物性色素等。
作為香料有麝香等動物性香料、茉莉油等植物性香料、α-茉莉醛等合成香料、調(diào)和香料等。
在化妝品、皮膚外用劑中,其他的常用成分有防腐·殺菌劑、抗氧化劑、紫外線吸收劑、螯合劑、防褪色劑、緩沖劑、痤瘡用藥劑、去皮屑止癢劑、止汗抑臭劑、熱傷用藥劑、抗虱蟲劑、角質(zhì)軟化劑、干皮癥用藥劑、抗病毒劑、經(jīng)皮吸收促進(jìn)劑、激素類、維生素類、氨基酸類·肽類、蛋白質(zhì)類、收斂劑、抗炎劑、清涼·刺激劑、動植物提取成分、黑素合成抑制劑(美白劑)、抗菌素、抗真菌劑、生發(fā)劑等。
本發(fā)明的促黑素細(xì)胞激素抑制劑、美白劑、免疫機能調(diào)節(jié)劑、食欲調(diào)節(jié)劑、化妝品、及皮膚外用劑的劑型未作特別限制,可以是溶狀、糊狀、凝膠狀、固體狀、顆粒狀、粉末狀、膠囊狀、氣霧劑等。具體的如油、洗滌劑、雪花膏、乳液、凝膠膠、洗發(fā)劑、頭發(fā)漂洗劑、頭發(fā)調(diào)節(jié)劑、釉質(zhì)、粉底、唇膏、香粉、粉底(パツク)、軟膏、片劑、注射液、顆粒劑、膠囊、香水、粉、科露香水、牙膏、肥皂、氣霧劑、潔面乳等劑型。
另外,本發(fā)明的促黑素細(xì)胞激素抑制劑、美白劑、免疫機能調(diào)節(jié)劑、食欲調(diào)節(jié)劑、化妝品及皮膚外用劑可用作皮膚防老化改善劑、防皮膚炎癥改善劑、浴用劑、護(hù)發(fā)劑、皮膚美容劑、防曬劑、色素性干皮劑·防日光尋麻疹等防光過敏癥改善劑、光變態(tài)防止改善劑、光免疫抑制的防止改善劑、或者,防外傷·凍瘡·皺裂等肌膚皺裂改善劑。
本發(fā)明的促黑素細(xì)胞激素抑制劑或美白劑不但有防止、改善紫外線引起的色素沉積,還可用于肝性黃褐斑、雀斑和老年性色斑的預(yù)防及治療。
本發(fā)明的促黑素細(xì)胞激素抑制劑可用于免疫異常、免疫缺陷等與促黑素細(xì)胞激素有關(guān)的各種疾病的預(yù)防、及治療或者通過食欲調(diào)節(jié)來控制體重的藥物。
(附圖的簡單說明)
圖1是在生物體中促黑素細(xì)胞激素抑制實驗的結(jié)果(實驗例4)(實施發(fā)明的最佳方案)下面通過實施例更具體地說明本發(fā)明,但,本發(fā)明并非僅限于這些實施例。
以下實施例中,配合量%以重量%表示,萘基丙酰氨基或萘基丙氨酸用Nal表示。合成例1D-1-Nal-Arg-LeuNH2Boc-Arg(Z2)(5g、9.22mmol)溶解于75ml二氯甲烷中,在冰冷卻下加入水溶性碳化二亞胺鹽酸鹽(1.77g、9.22mmol)HoBt(1-羥基苯并三唑,1.25g、9.22mmol)。然后,滴加LeuNH2鹽酸鹽及三乙胺(1.91g、18.9mmol)的二氯甲烷溶液75ml,10分鐘滴完。滴完后,室溫下反復(fù)攪拌一夜。將反應(yīng)液減壓濃縮后,往殘渣添加醋酸乙酯,然后依次用5%檸檬酸、5%碳酸氫鈉及飽和食鹽水洗滌。再用硫酸鎂干燥后,減壓干燥得Boc-Arg(Z2)-LeuNH2(5.8g、8.86mmol)。
將得到的Boc-Arg(Z2)-LeuNH2(2g、3.1mmol)用三氟醋酸10ml處理,得Arg(Z2)-LeuNH2(1.28g、2.3mmol)。接著,將得到的Arg(Z2)-LeuNH2(1.28g、2.3mmol)和Z-D-1-Nal(0.803g、2.3mmol)同樣操作縮合得Z-D-1-Nal-Arg(Z2)-LeuNH2(1.63g、1.84mmol)。將得到的Z-D-1-Nal-Arg(Z2)-LeuNH2(1.63g、1.84mmol)溶解在1000ml甲醇中,再用鈀-炭催化劑還原,得到D-1-Nal-Arg-LeuNH2(0.80g、1.66mmol)。合成例2D-2-Nal-Arg-LeuNH2用Z-D-2-Nal代替Z-D-1-Nal,與合成例1一樣,制得D-2-Nal-Arg-LeuNH2。合成例3L-1-Nal-Arg-LeuNH2除用Z-L-1-Nal代替Z-D-1-Nal外,與合成例1-樣,得得L-1-Nal-Arg-LeuNH2。合成例4L-2-Nal-Arg-LeuNH2除用Z-L-2-Nal代替Z-D-1-Nal外,與合成例1-樣,制得L-2-Nal-Arg-LeuNH2。
上述合成例所得化合物的質(zhì)譜(ESI-MS)的結(jié)果示于下表1。
表1ESI質(zhì)譜
試驗例1cAMP產(chǎn)生50%抑制濃度(IC50)的測定按照前面所述的cAMP產(chǎn)生50%抑制濃度(IC50)測定方法,對下面表2所記載的藥劑,即,D-1-Nal-Arg-LeuNH2、D-2-Nal-Arg-LeuNH2、L-1-Nal-Arg-LeuNH2和D-Trp-Arg-LeuNH2分別測定它們的IC50。
結(jié)果見表2,表2所示被檢藥劑具有有效抑制促黑素細(xì)胞激素的cAMP上升的作用。
表2促黑素細(xì)胞激素抑制試驗
試驗例2人黑素細(xì)胞的黑素生成抑制實驗對數(shù)期的人黑素細(xì)胞經(jīng)胰蛋白酶處理,在Medium 154s中(クラボウ制,有增殖因子(HMGS)),以1.5×105個接種到6孔平板。于37℃,5%CO2濃度的碳酸氣體下恒溫培養(yǎng)。1日后,用HBS(HepesBuffer Saline)沖洗培養(yǎng)基,并將培養(yǎng)基換成MCDB153(含有胎牛血清、胰島素、b-FGF、轉(zhuǎn)鐵蛋白和生育酚),繼續(xù)培養(yǎng)2天。將美白劑(被檢化合物),用MCDB153和促黑素細(xì)胞激素調(diào)制使達(dá)到200μM、20μM、2μM濃度。另外,同時培養(yǎng)不含美白劑,只含MCDB153和促黑素細(xì)胞激素的6孔平板以及只含有MCDB153的6孔平板。2日2回,用含有上述美白劑的MCDB153(含有胎牛血清)交換培養(yǎng)基。
第1次添加美白劑后,在第6天進(jìn)行黑素生成抑制效果的確認(rèn)。即,將6孔平板中培養(yǎng)基吸掉,用HBS沖洗,之后風(fēng)干,添加1/5M的NaOH 230μl將黑素細(xì)胞內(nèi)黑素溶解。溶解液(200μl)用微孔平板測讀器(475nm)測Abs吸光度。
被檢化合物的黑素生成抑制率,按下式計算。結(jié)果見表3。黑素生成抑制率(%)={1-(A1-A3)/(A2-A3)}×100(1)A加有被檢化合物和MSH的475nm處吸光度A不加被檢化合物,加有MSH時的475nm處吸光度A不加被檢化合物和MSH時的475nm處吸光度表3黑素生成抑制試驗
表3所示,被檢化合物通過添加促黑素細(xì)胞激素,上升的黑素細(xì)胞的黑素生成被有效抑制。因此,得知被檢化合物對促黑素細(xì)胞激素誘發(fā)黑素生成有抑制作用。試驗例3保存穩(wěn)定性試驗用本發(fā)明的D-2-Nal-Arg-LeuNH2和已知的促黑素細(xì)胞激素抑制劑D-Trp-Arg-LeuNH2,各配制0.1%水溶液,于4℃下保存6個月,著色程度用APHA(American Public Healthy Association)法的標(biāo)準(zhǔn)色進(jìn)行比較,評價其保存穩(wěn)定性。結(jié)果示于下表4。
表4保存穩(wěn)定性
如表4所示,本發(fā)明的D-2-Nal-Arg-LeuNH2,其APHA值為20,幾乎沒有著色,與此相反,已知的MSH抑制劑D-Trp-Arg-LeuNH2其APHA值為200,著色嚴(yán)重。由此表明本發(fā)明的D-2-Nal-Arg-LeuNH2具有良好的穩(wěn)定性。試驗例4在生物體中的促黑素細(xì)胞激素抑制試驗(褐色豚鼠色素沉淀抑制試驗)以下內(nèi)容是通過反復(fù)涂抹被檢物質(zhì)和紫外線照射,測定著色程度以進(jìn)行促黑素細(xì)胞激素抑制試驗。
1.被檢化合物使用D-2-Nal-Arg-LeuNH2(溶解在50mM,50%乙醇水中)和D-Trp-Arg-LeuNH2(溶解在50mM,50%乙醇水中),用50%乙醇水溶液作比較對照。
2.評價動物Weiser-Maples系褐色雄性豚鼠(4周齡),以東京實驗動物株式會社購入,預(yù)養(yǎng)7周備用。
3.褐色豚鼠的剃毛將褐色豚鼠在保定器內(nèi)進(jìn)行保定,其背部用理發(fā)推THRIVE MODEL6000AD(夏目制作所制作)、家用理發(fā)推ER722(National制)及電剃具DUALL500AC/RC(BRAUN制)剃出3cm×3cm的近似正方形的面積。剃后皮膚用沾水的脫脂棉擦拭,再用紙巾キムワイプ(クレシア制)將水分沾去。
4.膠帶(剝?nèi)?在此,把膠帶貼于皮膚表面,再將該粘膠帶剝離時,使皮膚表面一部分角質(zhì)層剝離,將此稱為膠帶剝?nèi) ?br>
剃完毛的豚鼠背部皮膚用沾有乙醇的脫脂棉擦拭,再用膠膠帶Scotch 313D(3M社制)粘取約2cm×2cm大面積的角質(zhì)層5次,進(jìn)行膠帶剝?nèi)≡囼灐?個月后再同樣操作一次。
5.被檢物質(zhì)的涂抹進(jìn)行膠帶剝?nèi)≡囼灪蟮牡?天,按下述頻率涂樣品于皮膚評價部位。使用Pipetman(GILSON制)用吸液管尖將被檢物質(zhì)和對照品成放射狀涂抹。
(1)紫外線照射期間前(膠帶剝?nèi)『螅?天后直至開始照射紫外之前的期間)樣品1天1次,在給定部位涂抹10μl,涂5天。
(2)紫外線照射期間每次紫外線照射之后,給樣品特定部位涂抹。樣品涂抹每天2次(早晚各一次),每次10μl,每周5天(星期一~星期五),涂2周。
(3)紫外線照射之后每天2次(早晚各一次),每次10μl,每周5天(星期一~星期五),涂40天。為使樣本在紫外線照射期間減少紫外線吸收,樣品在紫外線照射前和紫外線照射期間除涂有50%乙醇,還涂有被檢化合物D-2-Nal-Arg-LeuNH2或D-Trp-Arg-LeuNH2。紫外線照射結(jié)束以后,50%乙醇組涂抹50%乙醇。
6.紫外線照射紫外線照射在膠帶剝?nèi)∪掌疬M(jìn)行5天后,每天1次,每周三天(星期一、星期三、星期五),共計6次。
紫外線照射前,每次同上述方法一樣,剃去褐色豚鼠背部毛,用水清洗評價部位洗掉被檢物質(zhì),再用紙巾沾掉水分。將豚鼠固定在保定器內(nèi),眼睛用鋁箔保護(hù)后,照射UVB(紫外線照射裝置デルマレィM-DMR-80型(臨床提供)。照射條件為0.5mW×5分鐘,紫外線強度用紫外線強度計UVR-305/365 D(II)(臨床提供)測定。
7.評價評價,每周1~2次,用分光測色計CM-2002(ミノルタ制)測定L*進(jìn)行評價。其中,L*值為L*a*b*表色系統(tǒng)的一個數(shù)值,表示亮度。L*a*b*表色系統(tǒng)是用來表示物體顏色的一個系統(tǒng)。1976年由國際照明委員會(CIE)規(guī)范化,日本采用JIS(JIS Z8729)。
每次評價前,同樣將豚鼠背部毛剃去,用水洗評價部位去除被檢物質(zhì),再用紙巾沾去多余水分。
結(jié)果見后面圖1。在圖1中,縱軸是涂有被檢物質(zhì)D-2-Nal-Arg-LeuNH2(或D-Trp-Arg-LeuNH2)的評價部位的L*值與涂50%乙醇的評價部位L*值的差用ΔL*表示。橫軸表示天數(shù)。紫外線照射完之日計作0日。ΔL*值越大,表明色素沉積越少,即表明該物質(zhì)具有抑制促黑素細(xì)胞激素的作用。
結(jié)果顯示,cAMP產(chǎn)生50%的抑制濃度(LC50)在100nM以下的具有促黑素細(xì)胞激素抑制作用的化合物對實際生物體也顯示充分的促黑素細(xì)胞激素的抑制效果有效。
以上實驗結(jié)果示于下表5。
表5MSH抑制劑評價結(jié)果
表5的評價基準(zhǔn)如下(1)MSH抑制能力 本試驗中50%抑制濃度評價100nM以下 A1001~1000nM B1001nM以上C(2)黑素生成抑制能力 本試驗中顯示黑素生成評價抑制能力的最小濃度1~10μM A11~100μMB101μM以上C(3)保存穩(wěn)定性實驗本試驗中著色程度評價(APHA標(biāo)準(zhǔn)色)20以下A21~100 B101以上 C未作試驗 -(4)褐色豚鼠評價色素沉積抑制試驗有色素沉積抑制效果 ○無色素沉積抑制效果 ×未作試驗 -由上表可知,本發(fā)明的化合物綜合起來是優(yōu)良的。
以下列配合例1~11表示的配比,按通常的方法配制的促黑素細(xì)胞激素抑制劑、化妝品或皮膚外用劑。
配合例1片劑 重量%D-2-Nal-Arg-LeuNH210乳糖 50淀粉 20羧甲基纖維素 19硬脂酸鎂 1配合例2注射劑 重量%D-2-Nal-Arg-LeuNH2好 0.1葡萄糖2.0注射用水 其余部分配合例3軟膏劑 重量%N-月桂酰-D-2-Nal-Arg-LeuNH21.0尿素 20.0白色凡士林15.0輕質(zhì)液體石蠟 6.0鯨蠟醇3.0硬脂醇5.0單硬脂酸甘油酯5.0香料 適量防腐劑適量緩沖劑1精制水其余部分配合例4雪花膏 重量%D-2-Nal-Arg-LeuOEt1.0曲酸 1.0硬脂酸2.0聚氧乙烯(25)十六烷基醚3.0單硬脂酸甘油酯 2.0辛基十二烷醇10.0鯨蠟醇 6.0還原羊毛脂 4.0三十碳烷9.01,3-丁二醇 6.0聚乙二醇(1500) 4.0防腐劑 適量香料適量精制水 其余部分配合例5雪花膏 重量%D-2-Nal-Arg-LeuOEt 1.0熊果苷 1.0硬脂酸 2.0聚氧乙烯(25)十六烷基醚 3.0單硬脂酸甘油酯 2.0辛基十二烷醇10.0鯨蠟醇 6.0還原羊毛脂 4.0三十碳烷9.01,3-丁-二醇6.0聚乙二醇(1500) 4.0防腐劑 適量香料適量精制水 其余部分配合例6乳液 重量%D-1-Nal-Arg-LeuNH22.0松香油 0.1蜂蠟0.5凡士林 2.0單硬脂酸甘油酯 1.0聚乙二醇單油酸酯 1.0甲基聚硅氧烷 2.0鯨蠟醇 1.0三十碳烷 6.0聚羧乙烯制劑 0.51,3-丁二醇 4.0乙醇 5.0防腐劑 適量香料 適量精制水 其余部分配合例7明膠重量%N-乙酰-D-1-Nal-Arg-LeuNH20.1液體石蠟 12.0三(2-乙基己酸)甘油 50.0山梨糖醇 10.0聚乙二醇(400)5.0酰甲基?;撬?5.0聚氧乙烯(20)異十六烷醚 10.0防腐劑 適量香料 適量精制水 其余部分配合例8美容液 重量%D-2-Nal-Arg-LeuNH20.5一縮二丙二醇 5.0聚乙二醇(400)5.0乙醇 10.0羧乙烯聚合物 0.5褐藻酸鈉 0.5KOH 0.2單硬脂酸聚氧乙烯(20)山梨糖醇酐 1.0單油酸山梨糖醇 0.5油醇0.5胎盤提取物 0.2dl-α-生育酚乙酸酯 0.2防腐劑 適量香料適量褪色防止劑 適量精制水 其余部分配合例9粉底(バツク) 重量%L-1-Nal-Arg-LeuNH23.0聚乙烯醇15.0羧甲基纖維素5.01,3-丁二醇 5.0乙醇12.0聚氧乙烯(20)油醚0.5防腐劑 適量香料適量緩沖劑 適量精制水 其余部分配合例10粉底 重量%N-月桂酰L-1-Nal-Arg-LeuNH25.0液體石蠟10.0單油酸聚氧乙烯(20)山梨糖醇酐3.5丙二醇 3.0氧化鈦 9.0陶土24.0滑石42.0著色顏料3.0防腐劑 適量香料 適量精制水 其余部分配合例11洗臉液 重量%L-1-Nal-Arg-LeuNH20.5N-月桂酰-谷氨酸三乙醇銨鹽25.0月桂酸三乙醇胺 5.0聚氧乙烯(4)聚氧丙烯(11)丁基醚5.0乙醇 3.0防腐劑 適量香料 適量精制水 其余部分(工業(yè)上應(yīng)用的可能性)本發(fā)明的肽衍生物及促黑素細(xì)胞激素抑制劑具有抑制黑素細(xì)胞激素的作用,進(jìn)而防止色素沉積,或預(yù)防、改善或治療免疫異常癥、免疫缺陷癥,或者通過調(diào)節(jié)食欲來控制體重,可用于化妝品及皮膚外用劑,具有容易制備、容易保存的優(yōu)點。
權(quán)利要求
1.以下述通式(1)表示的含有萘基的二或三肽衍生物及其鹽,其特征是, (式中,Ar為可以有取代基的萘基;R1、R2及R3,分別獨立地為氫原子,或可以有取代基的碳原子數(shù)1~6的直鏈或支鏈烷基;R4可以是氫原子,也可以有取代基的氨基酸側(cè)鏈、氨基、脒基、胍基、碳原子數(shù)1~6的直鏈或支鏈氨基烷基、碳原子數(shù)1~6的直鏈或支鏈脒烷基、碳原子數(shù)1~6的直鏈或支鏈胍烷基、或碳原子數(shù)6~12的脒芳基;X1,可以不存在,也可以代表碳原子數(shù)1~6的亞烷基,含碳原子數(shù)1~6直鏈或支鏈烷基作為取代基的碳原子數(shù)0~6的氨基亞烷基,或碳原子數(shù)1~6的直鏈或支鏈氧代亞烷基,X2可以不存在,也可以代表碳原子數(shù)1~6的直鏈或支鏈亞烷基;R6為氫原子或-NHY,Y是氫原子、碳原子數(shù)2~22的?;⑻荚訑?shù)1~22的烷基、碳原子數(shù)1~22的羥烷基、或含碳原子數(shù)1~22烷氧基的3-烷氧基-2-羥丙基;n為0或1的整數(shù),而R5為用下述通式(2)表示的基團(tuán) 式中,X3表示是-O-或-NR10-;X4表示為-O-或-NR11-;R7表示為氫原子、氨基酸側(cè)鏈或碳原子數(shù)1~6的直鏈或支鏈烷基;R8、R10及R11分別獨立地為氫原子,或碳原子數(shù)1~6的直鏈或支鏈烷基;R9表示為氫原子、碳原子數(shù)2~22的?;?、碳原子數(shù)1~22的烷基、碳原子數(shù)1~22的羥烷基、或含有碳原子數(shù)1~22烷氧基的3-烷氧基-2-羥丙基;m為0或1的整數(shù)。)
2.權(quán)利要求1所述的肽衍生物及其鹽,其特征是,在通式(1)中,Ar為1-萘基或2-萘基,R1、R2及R3,都可以是氫原子,R4可以是氨基,也可以是帶有胍基的堿性氨基酸側(cè)鏈,X1,可以是亞烷基,X可以不存在,R6是-NHY,Y是氫原子、碳原子數(shù)2~22的?;?、碳原子數(shù)1~22的烷基、碳原子數(shù)1~22的羥烷基、或含有碳原子數(shù)1~22的烷氧基的3-烷氧基-2-羥丙基,n為1,R5為用式(2)表示的基團(tuán),通式(2)中的X3是-O-或-NH-,X4是-0-或-NH-,R7是氨基酸側(cè)鏈、氫原子、或碳原子數(shù)1~6的直鏈或支鏈烷基,R8是氫原子,R9是氫原子、碳原子數(shù)2~22的?;?、碳原子數(shù)1~22的烷基、碳原子數(shù)1~22羥烷基或含有碳原子數(shù)1~22的烷氧基的3-烷氧基-2-羥丙基,而m是0或1的整數(shù)。
3.權(quán)利要求1或2所述的肽衍生物及其鹽,其特征是,用通式(1)表示的肽衍生物是D-1-萘基丙氨酰-Arg-LeuNH2、D-2-萘基丙氨酰-Arg-LeuNH2、L-1-萘基丙氨酰-Arg-LeuNH2或L-2-萘基丙氨酰-Arg-LeuNH2。
4.促黑素細(xì)胞激素抑制劑,其特征是含有至少一種選自權(quán)利要求1~3中任一項所述的肽衍生物及其鹽作為有效成分。
5.促黑素細(xì)胞激素抑制劑,其特征是含有使cAMP產(chǎn)生50%抑制時所需濃度(IC50)在100nM以下的促黑素細(xì)胞激素抑制能力的化合物作為有效成分。
6.權(quán)利要求5所述的促黑素細(xì)胞激素抑制劑,其特征在于以抑制因紫外線照射產(chǎn)生的色素沉積為目的。
7.權(quán)利要求5或6所述的促黑素細(xì)胞激素抑制劑,其特征在于具有促黑素細(xì)胞抑制能力的化合物的分子量在800以下。
8.美白劑,其特征在于含有至少一種選自權(quán)利要求1~3中任一項的肽衍生物及其鹽或含有至少一種選自權(quán)利要求4~7中任一項的促黑素細(xì)胞激素抑制劑作為有效成分。
9.免疫機能調(diào)節(jié)劑,其特征是含有至少一種選自權(quán)利要求1~3中任一項的肽衍生物及其鹽或含有至少一種選自權(quán)利要求4~7中任一項的促黑素細(xì)胞激素抑制劑作為有效成分。
10.食欲調(diào)節(jié)劑,其特征是含有至少一種選自權(quán)利要求1~3中任一項的肽衍生物及其鹽或含有至少一種選自權(quán)利要求4~7中任一項的促黑素細(xì)胞激素抑制劑作為有效成分。
11.化妝品或皮膚外用劑,其特征是含有至少一種選自 1~3中任一項的肽衍生物及其鹽或含有至少一種選自權(quán)利要求4~7中任一項的促黑素細(xì)胞激素抑制劑作為有效成分。
全文摘要
本說明書公開了一種促黑素細(xì)胞激素抑制劑,其特征是含有特定的萘基的二或三肽衍生物及其鹽或以cAMP產(chǎn)生50%的抑制濃度(IC50)在100nM以下的促黑素細(xì)胞激素抑制化合物為有效成分。該促黑素細(xì)胞激素抑制劑有防止色素沉淀作用,或者預(yù)防、改善、或治療免疫異常癥和免疫缺陷癥,或通過調(diào)節(jié)食欲來控制體重,可以用做化妝品、皮膚外用劑,且具有容易制備,方便保存的優(yōu)點。
文檔編號A61K38/00GK1341119SQ00804210
公開日2002年3月20日 申請日期2000年4月25日 優(yōu)先權(quán)日1999年4月26日
發(fā)明者鹽尻榮二, 瀧野嘉延, 中條博美, 坂本一民, 巖崎敬治, 伊地知千織, 江藤讓 申請人:味之素株式會社