專(zhuān)利名稱(chēng)：組胺誘導(dǎo)的協(xié)同破壞腫瘤作用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及治療癌癥的方法，其中與其它癌癥療法聯(lián)合給予組胺。所述癌癥療法包括手術(shù)、放射療法、免疫療法、給予增強(qiáng)患者體液免疫應(yīng)答的藥物或者它們的任意組合。
背景技術(shù)：
盡管在過(guò)去幾年癌癥治療取得巨大的進(jìn)展，但是當(dāng)前的癌癥療法仍不能治愈許多類(lèi)型的癌癥。研究人員和臨床醫(yī)師面臨的問(wèn)題頗多。一些腫瘤為不能切除腫瘤或者放療或化療或這些方法的組合治療無(wú)效。而且，常常與這些療法有關(guān)的嚴(yán)重致病性使許多人尋找全新的破壞癌細(xì)胞的特異性更高而對(duì)正常細(xì)胞毒性更低的腫瘤療法。通過(guò)用滅活的癌細(xì)胞或癌細(xì)胞特異性抗原免疫癌癥患者從而促進(jìn)對(duì)腫瘤的免疫應(yīng)答的各種努力很不成功，而使用單克隆抗體(mAb)作為“魔彈”特異性地破壞癌細(xì)胞而不損傷正常細(xì)胞在臨床上仍受到限制。迫切需要提高已知癌癥療法有效性的方法。
手術(shù)受到很多人的青睞，是胃癌、胰腺癌、類(lèi)癌瘤以及卵巢腫瘤患者唯一可能的有效療法。(Norton，Digestion 55(suppl 3)98-103(1994))。雖然手術(shù)經(jīng)常是惡性腫瘤的必要療法，但是這種形式的癌癥療法有兩個(gè)主要缺點(diǎn)。首先，許多腫瘤因位于重要結(jié)構(gòu)或擴(kuò)散入重要結(jié)構(gòu)而不能切除。(Dvorak等，Cancer Cell 377-85(1991))。盡管減少(debulking)關(guān)鍵區(qū)域的腫瘤已成為可選擇的方法，但是許多人認(rèn)為這類(lèi)方法不能充分治療所述疾病而只是提高了患者的生活質(zhì)量。(Norton，Digestion 55(suppl 3)98-103(1994))。其次，在診斷和去除原發(fā)腫瘤時(shí)，許多腫瘤已經(jīng)轉(zhuǎn)移。(Dvorak等，Cancer Cells 377-85(1991))和(Norton，Digestion 55(suppl3)98-103(1994))。轉(zhuǎn)移瘤往往為多發(fā)并且廣泛擴(kuò)散，不容易外科手術(shù)切除，因此進(jìn)行大手術(shù)的許多患者只是發(fā)現(xiàn)術(shù)后不久疾病進(jìn)展更快。(Dvorak等，Cancer Cells 377-85(1991))。盡管手術(shù)仍是一線癌癥防御方法，但是腫瘤學(xué)家現(xiàn)在還是聯(lián)合包括放療、化療和免疫療法在內(nèi)的其它療法以獲得更好的患者生存率。(Hacker and van der Burg，Annals of Oncology 4(suppl.4)S17-S22(1993))。
對(duì)于頭頸部、子宮頸、膀胱、前列腺和皮膚的許多腫瘤的長(zhǎng)期控制，外部遠(yuǎn)距放射療法(external beam radiation)替代了手術(shù)治療，其中外部遠(yuǎn)距放射療法通常達(dá)到相當(dāng)概率的具有良好美容效果的腫瘤控制。(Basic Clinical Radiobiology第2版Steel編輯，Arnold Publishers，第1-13頁(yè)(1997))。外部遠(yuǎn)距放射療法通常有助于治療局部腫瘤，但因它對(duì)周?chē)?xì)胞產(chǎn)生明顯破壞并危害患者免疫系統(tǒng)，這種方法也存在問(wèn)題。使用放射性“種子型小管植入物(seed implant)”更集中針對(duì)腫瘤細(xì)胞而對(duì)周?chē)M織破壞較小，但是需要更特異的將輻射傳遞給腫瘤的方法。盡管放射療法為手術(shù)的良好替代療法，但是它不能治療占大多數(shù)的對(duì)放射線不敏感的癌癥，而且，由于與高劑量外部遠(yuǎn)距射線照射相關(guān)的高發(fā)病率，使用放射療法治療轉(zhuǎn)移性疾病并不理(Dvorak等，Cancer Cells377-85(1991))。
還報(bào)告了多種形式的治療癌癥的抗體療法。早期抗體療法治療幾乎全部依賴于完全活化破壞腫瘤細(xì)胞。(cellular and MolecularImmunology，編輯Abul K.Abbas，Andrew H.Lichtman和Jordan S.Pober，W.B.Saunders Co.，Philadelphia(1991))。最近使用阻斷癌細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體的抗體獲得了較大的成功。(Wong，Genetic Engineering News，第23和49頁(yè)(1988年7月)和Ashley等，J.of Neuro-Oncology35259-273(1997))。使用具有諸如毒性分子或放射性同位素的細(xì)胞毒性物質(zhì)的結(jié)合腫瘤細(xì)胞的抗體綴合物也見(jiàn)到有前景的結(jié)果。(Larson等，ACTAOncologica32709-715(1993)；Quack和van Dongen，Eur ArchDtorhinolaryngol 2511-5(1994)；Frankel等，Cancer Biology6307-317(1995)；Mach等，Curr Op in Immunol.3685-693(1991)和Recent Resultsin Cancer Research，第141卷Svstemic Radiotherapy with MonoclonalAntibodies M.L.Sautter-Bihl和M.Wannenmacher編輯，Springer-Verlag出版社(1996)。另一創(chuàng)新的癌癥抗體療法使用抗體復(fù)共軛對(duì)配位化合物-將結(jié)合的癌細(xì)胞引導(dǎo)至免疫系統(tǒng)吞噬細(xì)胞的雙功能抗體。(Wong，Genetic Engineering News，第23和49頁(yè)(1998年7月))。使用mAb復(fù)共軛對(duì)配位化合物的初步臨床試驗(yàn)證實(shí)了其在腎癌和前列腺癌治療中的前景。(同前)。
雖然可通過(guò)諸如補(bǔ)體激活或抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用的抗體依賴性機(jī)制在體外溶解各種腫瘤細(xì)胞，但是很少基于增強(qiáng)受治療者體液應(yīng)答的療法在臨床上獲得成功。(Sedlacek，Critical Reviewsin Oncogenesis 5(6)555-587(1994)。在一個(gè)研究中，對(duì)患有黑素瘤的患者給予包含三種同種異體黑素瘤細(xì)胞系混合物的疫苗，表明10年精算存活率為71％，相反，接受單個(gè)細(xì)胞系疫苗的黑素瘤患者的10年精算存活率為40％。(Slingluff和Seigler，Ann Plast Surg 28104-107(1992))。然而，在另一個(gè)研究中，用滅活的白血病細(xì)胞免疫的白血病患者沒(méi)有表現(xiàn)出任何顯著的改善。(Cellular and Molecular Immunology.編輯Abul K.Abbas，Andrew H.Lichtman和Jordan S. Pober，W.B.Saunders Co.，Philadelphia(1991))。
在改善癌癥疫苗的嘗試中，研究人員嘗試了許多方案以使癌細(xì)胞疫苗更具抗原性。(Sedlacek，Critical Reviews in Oncogenesis 5(6)555-587(1994))。例如，用編碼確定腫瘤抗原的質(zhì)粒DNA或用包含聯(lián)接致癌受體蛋白的疏水性多糖的復(fù)合物進(jìn)行免疫的研究中，可表現(xiàn)出更好的臨床效果。(Tuting等，J Mol Med75478-491(1997)和Gu等，CancerResearch 583385-3390(1998))。目前研究人員在通過(guò)給予增強(qiáng)患者體液應(yīng)答的藥物治療癌癥方面取得的成功有限，尚需改善這種形式治療的有效性的方法。
盡管最近在癌癥療法方面取得一定進(jìn)展，但是仍存在許多問(wèn)題。腫瘤常常轉(zhuǎn)移、在敏感區(qū)域生長(zhǎng)且不能通過(guò)手術(shù)或放射療法治療。(Dvorak等，Cancer Cells 377-85(1991))。腫瘤細(xì)胞還通常避開(kāi)癌癥患者的免疫監(jiān)測(cè)，而且當(dāng)前大多數(shù)疫苗不能充分地激發(fā)癌癥患者的免疫系統(tǒng)以克制這種免疫耐受狀態(tài)。(Sedlacek，Critical Reviews inOncogenesis 5(6)555-587(1994)。此外，針對(duì)性腫瘤相關(guān)抗原低水平表達(dá)、低親和力mAb、無(wú)效放射性核素、抗體綴合物非特異性毒性以及腫瘤對(duì)治療藥物吸收較差限制了使用抗體療法如免疫毒素、免疫放射性核素、免疫復(fù)共軛對(duì)配位化合物和受體特異性抗體。(Ashley等，J.of Neuro-Oncology 35259-273(1997)；Frankel等，Cancer Biology 6307-317(1995)；March等，Curr Op in Immunol.3685-693(1991)和Sedlacek，Critical Reviews in Oncogenesis 5(6)555-587(1994))。長(zhǎng)期以來(lái)需要增強(qiáng)當(dāng)前癌癥療法的藥物。
發(fā)明概述本發(fā)明提供治療癌癥的新方法，該方法中聯(lián)合常規(guī)癌癥療法給予組胺，所述常規(guī)療法例如手術(shù)、放射療法、免疫療法及促進(jìn)患者體液免疫應(yīng)答的藥物。在一個(gè)實(shí)施方案中，增強(qiáng)癌癥療法的方法包括在一定時(shí)間內(nèi)給予受治療者藥學(xué)上可接受形式的組胺，以達(dá)到足以增強(qiáng)所述癌癥療法的血液組胺濃度，并對(duì)該受治療者實(shí)施一種癌癥療法，例如手術(shù)、放療、免疫療法以及增強(qiáng)受治療者體液免疫應(yīng)答的藥物。
最好使用藥學(xué)上可接受形式的組胺如組胺、二鹽酸組胺、磷酸組胺、組胺鹽類(lèi)、組胺酯、組胺同類(lèi)物質(zhì)、組胺藥物前體、組胺受體激動(dòng)劑和diphenyleneiodonium。可使用的放射療法類(lèi)型包括外部遠(yuǎn)距放射療法、放射性核素、放射性植入物、放射性抗體、放射性脂質(zhì)、放射性蛋白質(zhì)、放射性糖脂和放射性糖蛋白?？墒褂玫拿庖忒煼?lèi)型包括給予單克隆抗體、人源化單克隆抗體、Fab、(Fab’)2、Fv、抗體綴合物、Fab綴合物、(Fab’)2綴合物、Fv綴合物及抗體復(fù)共軛對(duì)配位化合物。可使用的增強(qiáng)受治療者體液免疫應(yīng)答的幾種藥物類(lèi)型包括病毒抗原、癌細(xì)胞抗原、滅活癌細(xì)胞、疫苗及同效維生素。
組胺的給予方式使受治療者在接受所述癌癥療法期間，保持穩(wěn)定的血液組胺濃度。可通過(guò)給予一種誘導(dǎo)內(nèi)源性組胺釋放的物質(zhì)如視黃酸、視黃醛衍生物、IL-3或可食變應(yīng)原間接給予受治療者組胺?？稍谶M(jìn)行所述癌癥療法之前、之后或期間給予組胺。而且，給予組胺的劑量為每天0.1mg-10.0mg。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供篩選癌癥療法的方法，在該方法中，將組胺給予移植了人腫瘤細(xì)胞的非人類(lèi)哺乳動(dòng)物，并對(duì)其使用一種癌癥療法如放射性物質(zhì)、抗體、增強(qiáng)非人類(lèi)哺乳動(dòng)物體液免疫應(yīng)答的藥物、放射療法或手術(shù)。實(shí)施所述癌癥治療后，在各個(gè)不同的時(shí)間點(diǎn)對(duì)非人類(lèi)哺乳動(dòng)物檢測(cè)對(duì)腫瘤的破壞作用。按照這種方法，可使用單克隆抗體、綴合諸如毒素的化合物的單克隆抗體、放射性物質(zhì)、放射性核素、抗體片段或二抗、疫苗(包括滅活的癌細(xì)胞)、放射性種子形小管植入物或外部遠(yuǎn)距放射療法。
優(yōu)選實(shí)施方案的詳細(xì)描述組胺為生物源性胺，即脫羧后具有藥理學(xué)受體介導(dǎo)的生物活性的氨基酸。組胺在速發(fā)型超敏反應(yīng)中的作用已非常明確。(Plaut，M和Lichtenstein，L.M.，1982，Histamine and Immune Responses inPharmacology of Histamine Receptors，Ganellin，C.R.和M.E.Parsons，eds.John Wright&Sons，Bristol，第392-435頁(yè))。組胺還介導(dǎo)小動(dòng)脈擴(kuò)張，小動(dòng)脈擴(kuò)張可引起毛細(xì)血管和小靜脈壓升高。(Majno等，J Cell Bio42647-672(1969))。而且，組胺誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞收縮，導(dǎo)致形成細(xì)胞間隙和血管外滲。(同前)本發(fā)明基于這樣的意外發(fā)現(xiàn)當(dāng)組胺聯(lián)合手術(shù)、放射療法、抗體療法或增強(qiáng)癌癥患者體液免疫應(yīng)答的藥物給予時(shí)，它產(chǎn)生協(xié)同破壞腫瘤的作用。
“組胺”是指組胺、其二鹽酸鹽(二鹽酸組胺)、磷酸組胺、其它組胺鹽、組胺酯或組胺前體藥物，以及組胺受體(H1、H2、H3)激動(dòng)劑。還考慮五羥色胺、緩激肽、diphenyleneiodonium和5HT激動(dòng)劑。適用于本發(fā)明的其它組胺類(lèi)似物或組胺受體激動(dòng)劑公開(kāi)在美國(guó)專(zhuān)利第5,728,378號(hào)并為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所了解。給予誘導(dǎo)內(nèi)源性組胺從患者自身組織釋放的化合物也包括在本發(fā)明范疇之內(nèi)；因此本文所用術(shù)語(yǔ)“組胺”也包括這些化合物。
“癌癥療法”是指手術(shù)、放療、化療、抗體療法以及增強(qiáng)癌癥患者體液免疫應(yīng)答的藥物療法?！鞍┌Y療法”還可包括上述治療的組合。本領(lǐng)域技術(shù)人員知道數(shù)種組合的上述癌癥療法對(duì)惡性腫瘤產(chǎn)生協(xié)同作用。如下所述，優(yōu)化這種聯(lián)合組胺治療的組合治療方法應(yīng)該是常規(guī)性的。
“手術(shù)”是指從患者身體中去除癌細(xì)胞的外科學(xué)操作，包括但不限于腫瘤切除和/或腫瘤壓實(shí)(debulking of a tumor)。明確的外科腫瘤學(xué)方法依腫瘤類(lèi)型和患者具體情況而異。外科技術(shù)實(shí)例見(jiàn)SurgicalOncology，Raphael E.Pollock編輯，Kluwer Academic出版社，1997。
“放射療法”是指應(yīng)用外部遠(yuǎn)距放射療法或給予癌癥患者放射性物質(zhì)，包括但不限于放射性核素、放射性植入物、放射性抗體或放射性蛋白。本領(lǐng)域已知多種放射性療法，其實(shí)例可參見(jiàn)Basic ClinicalRadiobiology(第二版)，G.Gordon Steel編輯，Arnold出版社，1997。
“抗體療法”是指給予癌癥患者抗體、抗體綴合物或抗體復(fù)共軛對(duì)配位化合物以達(dá)到治療或預(yù)防癌癥的目的。本領(lǐng)域已知許多形式的抗體療法，包括但不限于給予單克隆抗體或人源化單克隆抗體、給予毒素或放射性核素綴合的抗體以及給予單克隆抗體復(fù)共軛對(duì)配位化合物，后者具有一個(gè)與癌抗原結(jié)合的結(jié)構(gòu)域及另一個(gè)與IgG的Fc區(qū)結(jié)合的結(jié)構(gòu)域。而且，術(shù)語(yǔ)抗體療法是指包括給予具有或不具有綴合毒素或放射性核素的(Fab’)2或Fab片段?？贵w療法的數(shù)個(gè)實(shí)例參見(jiàn)RecentResults in Cancer Research第141卷Systemic Rediotherapy withMonoclonal Antibodies，M.L.Sautter-Bihl和M.Wannenmacher編輯，Springer-Verlag出版社，1996。
“促進(jìn)體液免疫應(yīng)答的藥物”是指給予癌癥患者以增強(qiáng)其體液免疫應(yīng)答的物質(zhì)。已知許多增強(qiáng)癌癥患者體液免疫應(yīng)答的物質(zhì)，包括但不限于給予病毒抗原、癌細(xì)胞抗原、滅活的癌細(xì)胞、疫苗以及包括抗壞血酸、生育酚及β胡蘿卜素在內(nèi)的同效維生素。
組胺的給予可遵照幾種治療方案，下列方案是使用本發(fā)明的一些方法的范例，但并不是用它們限制本發(fā)明的范圍。本發(fā)明包括在進(jìn)行明確形式的癌癥療法如手術(shù)、放療、抗體療法或給予增強(qiáng)患者體液免疫應(yīng)答的藥物之前、期間或之后，給予所述癌癥患者有效量的組胺。
通過(guò)以約0.1-10.0mg/天、優(yōu)選約0.5-8.0mg/天及更優(yōu)選約1.0-5.0mg/天的劑量給予組胺，以獲得有效水平的循環(huán)血液組胺。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在1-4周的時(shí)間內(nèi)給予組胺。在一個(gè)高度優(yōu)選的實(shí)施方案中，在1-2周的時(shí)間內(nèi)給予組胺。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，保持有效穩(wěn)定的循環(huán)血液組胺濃度(即至少約0.2μM的穩(wěn)定的循環(huán)血液組胺濃度水平)。
本領(lǐng)域技術(shù)人員知道還可在治療過(guò)程中監(jiān)測(cè)患者循環(huán)血液組胺水平，并且每當(dāng)所述血液組胺水平降至有效血液組胺水平以下或接近有效血液組胺水平的低限時(shí)提高所述血液組胺水平。例如，在本實(shí)施方案中，每當(dāng)受治療者的組胺水平降至0.2μM以下時(shí)可給予組胺?；蛘?，最好可周期性間歇性地以足以達(dá)到和保持有效血液組胺水平的劑量給予組胺。
給予組胺的途徑和載體組合物已在美國(guó)專(zhuān)利第5,348,739號(hào)和第5,728,378號(hào)中公開(kāi)，所述專(zhuān)利通過(guò)引用結(jié)合到本文中?？蒯屳d體也是制藥科學(xué)技術(shù)人員所熟知的。該領(lǐng)域的技術(shù)和產(chǎn)品在不同情況下稱(chēng)為控釋、緩釋、延時(shí)作用、depro、貯庫(kù)、延遲作用、延緩釋放及定時(shí)釋放；本文所用詞語(yǔ)“控釋”用來(lái)包括前述每項(xiàng)技術(shù)。美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)第08/767,338號(hào)還公開(kāi)許多用于給予組胺的控釋載體及輸注設(shè)備。
最好是以每分鐘約0.5-0.2mg的速率將組胺注射、輸注或釋放入患者體內(nèi)。優(yōu)選速率為每分鐘約0.1mg。組胺最好在約1、3或5分鐘至約30分鐘的時(shí)間內(nèi)給予，優(yōu)選上限為約20分鐘，使得組胺的成人每日總劑量為約0.1-10.0mg，優(yōu)選約1.0-5.0mg。已發(fā)現(xiàn)在更長(zhǎng)的時(shí)間(即超過(guò)約30分鐘)內(nèi)給予組胺引起療效降低或喪失，而在少于1-3分鐘的時(shí)間內(nèi)快速給予可引起更明顯和更嚴(yán)重的副作用，包括anaphalaxis、心力衰竭、支氣管痙攣(broncospasm)、明顯的面部潮紅、不適、心率及呼吸速率增加、高血壓以及嚴(yán)重的頭痛。
各劑量組胺的給予可為每天1次至每天最多達(dá)約4次，優(yōu)選每天2次。給予途徑可為皮下、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、眼內(nèi)、口服、經(jīng)粘膜或經(jīng)皮膚，并可使用直接皮下注射或其它注射或輸液方法，或可通過(guò)以上公開(kāi)類(lèi)型的控釋機(jī)制介導(dǎo)?？墒褂萌魏文軌蛟诩s1-30分鐘的時(shí)間內(nèi)給予有效治療量組胺的控釋載體或輸液設(shè)備。
除組胺、二鹽酸組胺、磷酸組胺或其它組胺鹽類(lèi)、酯類(lèi)、同類(lèi)物質(zhì)、前體藥物和組胺受體激動(dòng)劑外，5-羥色胺、5HT激動(dòng)劑及誘導(dǎo)組胺從患者自身組織釋放的化合物也包括在本發(fā)明的范疇內(nèi)。視黃酸、諸如9-順式-視黃酸和全-反式-視黃酸的其它視黃醛衍生物、IL-3及可食變應(yīng)原是已知誘導(dǎo)內(nèi)源性組胺釋放的化合物。這些化合物可通過(guò)口服、靜脈內(nèi)、肌肉、皮下或其它批準(zhǔn)途徑給予患者。然而，給予誘導(dǎo)組胺從患者自身組織釋放的化合物應(yīng)使內(nèi)源性組胺的釋放為約0.1-10.0mg/天，優(yōu)選約0.5-8.0mg/天，更優(yōu)選約1.0-5.0mg/天。
給予各劑誘導(dǎo)組胺釋放的化合物可為每天1次至每天最多達(dá)約4次，優(yōu)選每天2次。給予途徑可為皮下、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、眼內(nèi)、口服、經(jīng)粘膜或經(jīng)皮膚，并可包括以上公開(kāi)類(lèi)型的控釋機(jī)制?？墒褂萌魏文軌蚪o予有效治療量的誘導(dǎo)組胺在約1-30分鐘時(shí)間內(nèi)釋放的化合物的控釋載體。
所述治療適用的惡性腫瘤包括但不限于原發(fā)性和轉(zhuǎn)移性惡性實(shí)體腫瘤疾病，以及血液學(xué)惡性腫瘤如急性和慢性骨髓性白血病、急性和慢性淋巴細(xì)胞性白血病、多發(fā)性骨髓瘤、Waldenstrom巨球蛋白血癥、毛細(xì)胞白血病、骨髓發(fā)育不良綜合癥、真性紅細(xì)胞增多癥(polycytaemia vera)及特發(fā)性血小板增多癥。
借助于以下實(shí)施例可更好地了解本發(fā)明，以下實(shí)施例代表更優(yōu)選的實(shí)施方案，但不應(yīng)認(rèn)為用其限制本發(fā)明的范圍。
給予組胺后可將升高血液組胺水平并保持在有效水平為實(shí)施本發(fā)明，必須提高患有惡性腫瘤的受治療者的組胺有效水平。以下實(shí)施例提供了一種在癌癥患者中建立穩(wěn)定有效的循環(huán)血液組胺水平的方法。
實(shí)施例15名急性骨髓性白血病(AML)緩解患者接受用無(wú)菌氯化鈉溶液稀釋的二鹽酸組胺進(jìn)行的治療。在連續(xù)21天的時(shí)間內(nèi)在上午和晚上于獨(dú)立皮下注射位點(diǎn)注射組胺。使用裝有0.1mg/ml組胺的1ml注射器皮下注射給予組胺。每天給予2次(上午和晚上)組胺治療，劑量為每次注射0.4-0.7mg組胺(即每日組胺的總劑量為0.8-1.4mg/天)。
開(kāi)始治療前和治療后每周用10ml肝素化試管取外周靜脈血樣品。最后一次注射組胺后至少8小時(shí)取樣品。通過(guò)使用得自Bionerica，Inc.，Newport Beach，California 92663(商品目錄號(hào)1051)的雙抗體放射免疫測(cè)定試劑盒分析全血樣品中組胺濃度。按照日期為1989年6月的試劑盒提供的生產(chǎn)廠家的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行分析。在指定的時(shí)間測(cè)定血液組胺水平。
實(shí)驗(yàn)之初患者血液組胺水平低于0.2μM。給予組胺后，循環(huán)血液組胺水平升至有效水平(即至少約0.2μM的穩(wěn)定的循環(huán)血液組胺濃度水平)。令人驚奇的是，循環(huán)血液組胺水平在持續(xù)給藥期間、甚至停止給予組胺后仍然保持高水平。本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果證明給予組胺后血液組胺水平可升高并保持在有效水平。
這種升高惡性腫瘤疾病患者循環(huán)血液組胺水平并將組胺濃度保持在有效水平的性能可與下列實(shí)施例2、3、4以及實(shí)施例5中詳述的癌癥治療方法相結(jié)合。
聯(lián)合組胺與外科手術(shù)的癌癥療法按照本發(fā)明者考慮，聯(lián)合手術(shù)切除腫瘤給予組胺以對(duì)患者達(dá)到協(xié)同破壞腫瘤的作用。一種方法是，在手術(shù)前給予組胺足夠時(shí)間以使患者穩(wěn)定的血液組胺濃度提高到至少約0.2μM。然后按照標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)手術(shù)去除腫瘤。(參見(jiàn)例如Surgical Oncology，Raphael E.Pollock編輯，Kluwer Academic出版社，1997)。去除腫瘤后，繼續(xù)進(jìn)行組胺療法足夠時(shí)間，以達(dá)到對(duì)所述腫瘤完全有效。根據(jù)惡性腫瘤的類(lèi)型，可利用幾種確定腫瘤細(xì)胞殘留情況的方法，包括通過(guò)ELISA檢測(cè)脫落的癌細(xì)胞特異性抗原或使用放射性標(biāo)記的抗體和成像技術(shù)原位檢測(cè)癌細(xì)胞。(Quak和van Dongen，Eur.Arch.Otorhinolaryngol 2511-5(1994))。
實(shí)施例2通過(guò)在手術(shù)去除前列腺腫瘤之前、期間及之后給予組胺獲得協(xié)同破壞腫瘤的作用。相應(yīng)地在手術(shù)前將溶于無(wú)菌載體溶液中的藥學(xué)上可接受形式的組胺給前列腺癌患者皮下注射一周(每天0.5-2.0mg)。治療之后，當(dāng)循環(huán)血液組胺水平提高到至少0.2μM時(shí)，手術(shù)切除腫瘤。
一旦去除所述腫瘤后，循環(huán)血液組胺水平至少保持在約0.2μM，直到觀察到完全的治療反應(yīng)。按照常規(guī)方法在不同時(shí)間檢測(cè)患者PSA抗原水平評(píng)價(jià)對(duì)腫瘤的破壞作用。通過(guò)采用本實(shí)施例公開(kāi)的方法，觀察到協(xié)同破壞腫瘤的作用并且前列腺癌得到有效治療。
聯(lián)合組胺和放射治療的癌癥療法在另一個(gè)實(shí)施方案中，聯(lián)合放射療法給予組胺以在患者達(dá)到協(xié)同破壞腫瘤的作用。一種方法是，在放療之前給予組胺足夠時(shí)間，使患者血液組胺的穩(wěn)定濃度提高到至少約0.2μM。然后按照標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)對(duì)所述腫瘤進(jìn)行外部遠(yuǎn)距射線照射。(參見(jiàn)例如Basic Clinical Radiobiology(第二版)，G.Gordon Steel編輯，Arnold出版社，1997)。組胺療法一直持續(xù)至觀察到如上檢測(cè)的完全的治療反應(yīng)。如果腫瘤消退不很明顯，還可聯(lián)合組胺療法進(jìn)一步進(jìn)行放射治療。
實(shí)施例3通過(guò)在前列腺腫瘤的放射治療之前、期間及之后給予組胺獲得協(xié)同破壞腫瘤的作用。相應(yīng)地在放射療法前將溶于無(wú)菌載體溶液中的藥學(xué)上可接受形式的組胺給前列腺癌患者皮下注射一周(每天0.5-2.0mg)。治療之后，當(dāng)循環(huán)血液組胺水平提高到至少0.2μM時(shí)，對(duì)所述腫瘤進(jìn)行外部遠(yuǎn)距射線照射(60-70Gy)。
一旦照射所述腫瘤后，循環(huán)血液組胺水平保持在至少約0.2μM，直到觀察到完全的治療反應(yīng)，按照常規(guī)方法在不同時(shí)間檢測(cè)患者PSA抗原水平評(píng)價(jià)對(duì)腫瘤的破壞作用。通過(guò)使用本實(shí)施例公開(kāi)的方法，觀察到協(xié)同破壞腫瘤的作用并且前列腺癌得到有效治療。
聯(lián)合組胺和抗體療法的癌癥療法在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，聯(lián)合抗體療法給予組胺。根據(jù)本實(shí)施方案的一個(gè)方面，聯(lián)合組胺給予放射性單克隆抗體。最好在抗體療法之前給予組胺1-2周，以使患者血液組胺的穩(wěn)定濃度提高到至少約0.2μM。達(dá)到至少約0.2μM血液組胺的穩(wěn)定水平后，聯(lián)合組胺治療給予所述患者放射性標(biāo)記的針對(duì)癌細(xì)胞抗原的mAb。(參見(jiàn)例如Recent Results in Cancer Research第141卷 Systemic Radiotherapy withMonoclonal Antibodies，M.L.Sautter-Bihl和M.Wannenmacher編輯，Springer-Verlag出版社，1996)。組胺治療可一直持續(xù)至觀察到如上檢測(cè)的完全的治療反應(yīng)。
通過(guò)用一種同位素或如131I、90Y、67Cu、186Re、188Re、212Bi或211At同位素的組合標(biāo)記抗體，制備腫瘤抗原特異性的放射性mAb。優(yōu)選放射性標(biāo)記mAb能夠向腫瘤傳送的射線高于6000rad，并對(duì)腫瘤具有足夠的親合力，使暴露于患者骨髓的射線不超過(guò)300rad。在最近的臨床試驗(yàn)中，針對(duì)表達(dá)于成熟B-細(xì)胞表面CD-20抗原的131I標(biāo)記的抗B1(Bexxar)mAb是放射性標(biāo)記mAb成功治療濾泡型非何杰金氏淋巴瘤的一個(gè)實(shí)例。(Wong，Genetic Engineering News，第23-49頁(yè)(1998年7月))。聯(lián)合組胺治療使用131I標(biāo)記的抗B1(Bexxar)mAb以及其它放射性標(biāo)記mAb在本實(shí)施方案的范疇內(nèi)。
另一方面，聯(lián)合上面詳述的組胺治療方法使用復(fù)共軛對(duì)配位化合物mAb，該mAb將所結(jié)合的癌細(xì)胞引向免疫系統(tǒng)的吞噬細(xì)胞。例如，已證實(shí)mAb MDX-210(Medarex)對(duì)腎癌及前列腺癌具有有效的治療作用，mAb MDX-210包括一個(gè)結(jié)合原癌基因HER-2/neu(C-erbB2)、與表皮生長(zhǎng)因子(EGF)受體部分同源的細(xì)胞表面生長(zhǎng)因子p185HER-2受體的結(jié)構(gòu)域，和第二個(gè)識(shí)別高親和力IgG Fc受體的結(jié)構(gòu)域，高親和力IgG激活并引導(dǎo)免疫系統(tǒng)的天然破壞傷細(xì)胞(NK)到達(dá)病灶部位。(Wong，Gnentic Engineering News，第23-49頁(yè)(1998年7月))。本發(fā)明者考慮聯(lián)合給予組胺使用該抗體及類(lèi)似設(shè)計(jì)的復(fù)共軛對(duì)配位化合物抗體以獲得協(xié)同破壞腫瘤的作用。
包括在本發(fā)明的本實(shí)施方案的另一種用法涉及給予抗癌細(xì)胞特異性受體的人源化mAb。例如已證實(shí)p185HER-2受體(Genetech)阻斷表皮生長(zhǎng)因子與受體的結(jié)合，并因此切斷了隨后的細(xì)胞增殖的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。(Wong，Genetic Engineering News，第23-49頁(yè)(1998年7月))。在使用p185HER-2抗體的臨床試驗(yàn)中，乳腺癌患者表現(xiàn)為總體腫瘤療效的明顯改善。本發(fā)明者還考慮聯(lián)合組胺治療使用人源化抗p185HER-2受體的mAb(Genetech)和其它針對(duì)癌細(xì)胞特異性受體的mAb。
實(shí)施例4通過(guò)在抗體治療之前、期間及之后將組胺給予乳腺癌患者獲得協(xié)同破壞腫瘤的作用。相應(yīng)地，在抗體療法之前將溶于無(wú)菌載體溶液的藥學(xué)上可接受形式的組胺給所述患者皮下注射一周(每次注射0.5-1.0mg，每天1-2次)。組胺治療后，給予患者人源化131I標(biāo)記的p185HER-2抗體(Genetech)并繼續(xù)進(jìn)行組胺療法。
一旦用所述抗體治療所述腫瘤，循環(huán)血液組胺水平保持在至少0.2μM，直到觀察到完全的治療反應(yīng)。按照常規(guī)方法通過(guò)測(cè)定患者不同時(shí)間的p185HER-2受體水平評(píng)價(jià)破壞腫瘤的作用。(Quak和van Dongen，Eur.Arch.Otorhinolaryngol 2511-5(1994))。通過(guò)采用本實(shí)施例公開(kāi)的方法，觀察到協(xié)同破壞腫瘤的作用并有效治療乳腺癌。
組胺和增強(qiáng)癌癥患者體液免疫應(yīng)答方法相結(jié)合的癌癥療法本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案包括聯(lián)合組胺療法給予增強(qiáng)患者體液免疫應(yīng)答的藥物。一種方法是，將所述藥物提供給患者之前給予組胺以便開(kāi)始就使患者血液組胺穩(wěn)定濃度達(dá)到至少約0.2μM。然后將增強(qiáng)體液免疫應(yīng)答藥物如病毒抗原、癌細(xì)胞抗原、滅活癌細(xì)胞、疫苗或同效維生素給予所述患者。組胺療法持續(xù)至觀察到如上檢測(cè)的完全治療反應(yīng)為止。此外，本發(fā)明者還考慮聯(lián)合組胺療法和給予已知增強(qiáng)細(xì)胞免疫應(yīng)答的細(xì)胞因子，用增強(qiáng)患者體液免疫應(yīng)答的藥物治療。
實(shí)施例5通過(guò)在用增強(qiáng)免疫應(yīng)答的藥物治療黑素瘤患者之前、期間及之后給予組胺獲得協(xié)同破壞腫瘤的作用。相應(yīng)地，在給予所述增強(qiáng)體液免疫應(yīng)答的藥物之前將溶于無(wú)菌載體溶液中的藥學(xué)上可接受形式的組胺給患者皮下注射一周(每次注射0.5-1.0mg，每天1-2次)。組胺治療后，當(dāng)循環(huán)血液組胺水平增加到至少0.2μM時(shí)，按照常規(guī)技術(shù)給予患者包含三種滅活黑素瘤細(xì)胞系混合物的疫苗。(Slingluff等，Ann.Plast.Surg.28104-107(1992))。
一旦用所述疫苗治療腫瘤后，循環(huán)血液組胺水平保持在至少0.2μM，一直到觀察到完全的治療反應(yīng)。按照常規(guī)方法通過(guò)檢測(cè)患者不同時(shí)間的黑素瘤情況評(píng)價(jià)破壞腫瘤的作用。(Quak和van Dongen，Eur.Arch.Otorhinolaryngol 2511-5(1994)。通過(guò)采用本實(shí)施例公開(kāi)的方法，觀察到協(xié)同破壞腫瘤的作用并有效治療黑素瘤。
盡管實(shí)施例2-5的方法詳述幾種依靠聯(lián)合已明確的癌癥療法給予組胺而產(chǎn)生協(xié)同破壞腫瘤的作用的治療方案，但是可通過(guò)使用篩選方法或其變通方法開(kāi)發(fā)出更多的利用組胺誘導(dǎo)的協(xié)同作用的癌癥治療方案，這些方案描述于實(shí)施例6。
篩選當(dāng)聯(lián)合給予組胺時(shí)產(chǎn)生協(xié)同破壞腫瘤作用的治療藥物篩選當(dāng)與組胺一起給予時(shí)產(chǎn)生協(xié)同破壞腫瘤作用的治療藥物的能力的方法是本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案。一般來(lái)說(shuō)，實(shí)現(xiàn)需要建立癌癥模型系統(tǒng)，然后給予受治療者組胺和治療藥物，以及測(cè)定破壞腫瘤的作用。
實(shí)施例6模型系統(tǒng)和放射性標(biāo)記mAb的制備如下。例如，將約106人SK-N-SH神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系(購(gòu)自American Type Culture Collection，Rockville MD)腫瘤細(xì)胞皮下注射入裸鼠右側(cè)腹而建立人神經(jīng)母細(xì)胞瘤異種移植。使所述腫瘤增殖直到該腫瘤直徑約1cm。mAb BW575/9(Behringwerke，Marburg，Germany)為抗神經(jīng)細(xì)胞粘附分子(NCAM)的鼠同種型IgG1，由神經(jīng)母細(xì)胞瘤、黑素瘤及其它癌癥表達(dá)。(Bosslet等，歐洲專(zhuān)利公布第EP 0443 599 A2號(hào))。已有報(bào)告BW575/9特異性地與神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系SK-N-SH結(jié)合。(Recent Results in CancerResearch，第141卷Systemic Radiotherapy with MonoclonalAntibodies，Sautter-Bihl和Wannermacher編輯，Springer-Verlag出版社，Bihl和Bihl，小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤異種移植系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，第124-135頁(yè)(1996)。作為對(duì)照，使用抗獨(dú)特型mAb B40(購(gòu)自GermanCancer Research Center，Heidelberg，Germany)。通過(guò)lodogen方法用131□I標(biāo)記所述mAb，按照明確的方法達(dá)到比活為1μCi/μg。(同上)。
為了評(píng)價(jià)聯(lián)合放射免疫療法實(shí)施組胺療法獲得的協(xié)同破壞腫瘤作用，進(jìn)行了一個(gè)實(shí)驗(yàn)。在抗體治療之前將溶于無(wú)菌載體溶液的藥學(xué)上可接受形式的組胺給荷載惡性腫瘤的裸鼠尾靜脈注射一周(每天0.5mg)。一個(gè)對(duì)照組未給予組胺以便測(cè)定組胺療法的協(xié)同破壞腫瘤作用。組胺治療之后，當(dāng)循環(huán)血液組胺水平增加到至少0.2μM時(shí)，按照常規(guī)技術(shù)經(jīng)尾靜脈注射給予小鼠10μCi131I標(biāo)記的mAb。
在實(shí)施所述抗體療法后1、4、12、24、36和48天，頸椎脫臼處死小鼠，收集小鼠的腫瘤、脾、腎、肝、肌肉和骨，在多頻道γ計(jì)數(shù)器上測(cè)量并分析131I。如上所述，在所述實(shí)驗(yàn)過(guò)程中繼續(xù)每日組胺治療，并在第24天第二次給予抗體。該實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明，當(dāng)聯(lián)合組胺給予BW575/9mAb時(shí)，比單獨(dú)給予BW575/9mAb獲得更強(qiáng)的破壞腫瘤作用。
使用變通形式的上述模型系統(tǒng)，可對(duì)新研制的治療藥物和治療方法進(jìn)行快速篩選，以確定聯(lián)合組胺治療給予這些藥物或?qū)嵤┻@些方法時(shí)，它們產(chǎn)生協(xié)同破壞腫瘤作用的能力。事實(shí)上，實(shí)施例6中使用的方法可用于或易于修改以篩選其它抗體、抗體綴合物、抗體復(fù)共軛對(duì)配位化合物、增強(qiáng)受治療者體液免疫應(yīng)答的藥物、放射療法及外科技術(shù)。
雖然參照實(shí)施方案和實(shí)施例描述了本發(fā)明，但是應(yīng)該知道在不脫離本發(fā)明宗旨的情況下可對(duì)本發(fā)明進(jìn)行各種改進(jìn)。相應(yīng)地，本發(fā)明只受到以下權(quán)利要求書(shū)的限制。本文所列舉的所有參考文獻(xiàn)通過(guò)引用特別結(jié)合到本文中。
權(quán)利要求
1.一種增強(qiáng)癌癥療法的方法，該方法包括在一定時(shí)間內(nèi)給予受治療者藥學(xué)上可接受形式的組胺，達(dá)到足以增強(qiáng)所述癌癥療法的血液組胺濃度；以及對(duì)所述受治療者實(shí)施一種癌癥療法，其中所述癌癥療法選自手術(shù)、放療、免疫療法及給予增強(qiáng)所述受治療者體液免疫應(yīng)答的藥物。
2.權(quán)利要求1的方法，其中所述藥學(xué)上可接受形式的組胺選自組胺、二鹽酸組胺、磷酸組胺、組胺鹽類(lèi)、酯類(lèi)、同類(lèi)物、前體藥物、組胺受體激動(dòng)劑及diphenvleneiodonium。
3.權(quán)利要求1的方法，其中所述癌癥療法為放射療法，它選自外部遠(yuǎn)距放射療法(extemal beam radiation)、放射性核素、放射性植入物、放射性抗體、放射性脂質(zhì)、放射性蛋白、放射性糖脂以及放射性糖蛋白。
4.權(quán)利要求1的方法，其中所述癌癥療法為免疫療法，它選自單克隆抗體、人源化單克隆抗體、Fab、(Fab’)2、Fv、抗體綴合物、Fab綴合物、(Fab’)2綴合物、Fv綴合物及抗體復(fù)共軛對(duì)配位化合物。
5.權(quán)利要求1的方法，其中所述癌癥療法為給予增強(qiáng)所述受治療者體液免疫應(yīng)答的藥物，該藥物選自病毒抗原、癌細(xì)胞抗原、滅活的癌細(xì)胞、疫苗及同效維生素。
6.權(quán)利要求1的方法，它還包括對(duì)所述受治療者實(shí)施所述癌癥療法期間保持穩(wěn)定的血液組胺濃度。
7.權(quán)利要求1的方法，其中通過(guò)給予一種誘導(dǎo)內(nèi)源性組胺釋放的物質(zhì)間接地給予所述受治療者組胺。
8.權(quán)利要求7的方法，其中所述物質(zhì)選自視黃酸、視黃醛衍生物、IL-3及可食變應(yīng)原。
9.權(quán)利要求1的方法，其中所述組胺的給予是在實(shí)施所述癌癥療法之前進(jìn)行的。
10.權(quán)利要求1的方法，其中所述組胺的給予是在實(shí)施所述癌癥療法之后進(jìn)行的。
11.權(quán)利要求1的方法，其中所述組胺的給予是在實(shí)施所述癌癥療法期間進(jìn)行的。
12.權(quán)利要求1的方法，其中所述組胺的給予還包括以每天0.1-10.0mg的劑量給予組胺。
13.組胺用于生產(chǎn)治療癌癥的藥物的用途，用于給予接受手術(shù)、放療、免疫療法或第二種增強(qiáng)所述受治療者體液應(yīng)答的藥物的患者。
14.組胺用于生產(chǎn)增強(qiáng)癌癥治療法的藥物的用途，其中所述癌癥療法選自手術(shù)、放療、免疫療法以及第二種增強(qiáng)受治療者體液應(yīng)答的藥物。
15.按照權(quán)利要求13或14的用途，其中所述組胺選自組胺、二鹽酸組胺、磷酸組胺、組胺鹽類(lèi)、酯類(lèi)、同類(lèi)物、前體藥物、組胺受體激動(dòng)劑及diphenyleneiodonium。
16.按照權(quán)利要求13或14的用途，其中所述放射療法選自外部遠(yuǎn)距放射療法、放射性核素、放射性植入物、放射性抗體、放射性脂質(zhì)、放射性蛋白、放射性糖脂以及放射性糖蛋白。
17.按照權(quán)利要求13或14的用途，其中所述免疫療法選自單克隆抗體、人源化單克隆抗體、Fab、(Fab’)2、Fv、抗體綴合物、Fab綴合物、(Fab’)2綴合物、Fv綴合物及抗體復(fù)共軛對(duì)配位化合物。
18.按照權(quán)利要求13或14的用途，其中所述第二種增強(qiáng)所述受治療者體液應(yīng)答的藥物選自病毒抗原、癌細(xì)胞抗原、滅活的癌細(xì)胞、疫苗及同效維生素。
19.按照權(quán)利要求13或14的用途，其中所述組胺在所述癌癥治療前提供。
20.按照權(quán)利要求13或14的用途，其中所述組胺在所述癌癥治療之后提供。
21.按照權(quán)利要求13或14的用途，其中所述組胺在所述癌癥治療期間提供。
22.按照權(quán)利要求13或14的用途，其中所述組胺以每天0.1-10.0mg的劑量提供。
23.一種篩選癌癥療法的方法，該方法包括提供非人類(lèi)哺乳動(dòng)物；將人腫瘤細(xì)胞移植入所述非人類(lèi)哺乳動(dòng)物；將組胺給予所述非人類(lèi)哺乳動(dòng)物；對(duì)所述非人類(lèi)哺乳動(dòng)物實(shí)施一種癌癥療法，其中所述癌癥療法選自給予放射性物質(zhì)、給予抗體、給予增強(qiáng)所述非人類(lèi)哺乳動(dòng)物體液免疫應(yīng)答的藥物、放療以及手術(shù)；和檢測(cè)對(duì)所述非人類(lèi)哺乳動(dòng)物腫瘤的破壞作用。
24.權(quán)利要求23的方法，其中所述抗體為單克隆抗體。
25.權(quán)利要求24的方法，其中所述單克隆抗體與選自以下的一種化合物綴合毒素、放射性物質(zhì)、放射性核素、抗體片斷及第二抗體。
26.權(quán)利要求23的方法，其中所述增強(qiáng)所述非人類(lèi)哺乳動(dòng)物體液免疫應(yīng)答的藥物為疫苗。
27.權(quán)利要求26的方法，其中所述疫苗包括滅活的癌細(xì)胞。
28.權(quán)利要求23的方法，其中所述放射性物質(zhì)包括種子形小管植入物(seed implant)。
29.權(quán)利要求23的方法，其中所述放射療法包括外部遠(yuǎn)距放射療法。
全文摘要
本發(fā)明涉及治療癌癥的方法,其中與其它癌癥療法聯(lián)合給予組胺。所述癌癥療法包括手術(shù)、放射療法、免疫療法、給予增強(qiáng)患者體液免疫應(yīng)答的藥物或它們的任意組合。
文檔編號(hào)A61K45/00GK1342096SQ00804524
公開(kāi)日2002年3月27日 申請(qǐng)日期2000年1月4日 優(yōu)先權(quán)日1999年1月6日
發(fā)明者K·R·格爾森, K·赫爾斯特蘭德, S·赫爾莫德松 申請(qǐng)人:馬克西姆藥品公司