專利名稱：抗真菌的醚類的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及作為廣譜抗真菌藥的水溶性含吡咯醚類和它們的制備；它還涉及包含它們的組合物以及它們作為藥物的用途。
人全身性真菌感染在溫帶國(guó)家相對(duì)罕見且許多能夠成為病原性的真菌在體內(nèi)正常共生生存或在環(huán)境中是普遍的。過去幾十年已證實(shí)世界范圍內(nèi)多種威脅生命的全身性真菌感染發(fā)病率增加且目前這些疾病對(duì)許多敏感患者特別是那些已經(jīng)住院的患者顯示出主要威脅。大多數(shù)增加能夠歸因于免疫損害的患者改善的生存和抗微生物藥物的長(zhǎng)期使用。此外，許多常見的真菌感染的代表性菌叢也在不斷變化中并且這表示對(duì)上皮學(xué)的挑戰(zhàn)增加的重要性。處于最大風(fēng)險(xiǎn)下的患者包括那些損傷免疫功能的患者，直接作為細(xì)胞毒藥物或HIV感染結(jié)果的免疫抑制，或者間接作為其它的虛弱疾病例如癌癥、急性白血病、侵染性手術(shù)技術(shù)或延長(zhǎng)暴露于抗微生物藥物的結(jié)果。最常見的人全身性真菌感染為念珠菌病、曲霉病、組織胞漿菌病、球孢子菌病、類球孢子菌病、酵母病和隱球菌病。
抗真菌藥例如酮康唑、伊曲康唑和氟康唑用于治療和預(yù)防免疫受損害的患者的全身性真菌感染。然而，關(guān)于這些藥物中的一些藥物的真菌抗性的關(guān)注正在增長(zhǎng)，特別是那些具有相對(duì)窄譜的藥物，例如氟康唑。更糟糕的是在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中人們意識(shí)到大約40％患有嚴(yán)重全身性真菌感染的人們很難甚或沒有借助口服給藥接受醫(yī)療。這種困難是由于這樣的患者處于昏迷狀態(tài)或患有嚴(yán)重的胃輕癱的原因。因此，使用難于靜脈給予不溶性或難溶性抗真菌藥例如伊曲康唑嚴(yán)重阻礙了這樣群體的患者。
用強(qiáng)力水溶性抗真菌藥可很好地用于甲癬的治療，即指甲的真菌感染。長(zhǎng)期以來(lái)人們要求借助透指甲途徑治療甲癬。那么出現(xiàn)的問題就是確?？拐婢帉B透進(jìn)去并滲透到指甲的下方。Mertin和Lippold(J.Pharm.Pharmacol.(1997)，49，30-34)宣稱為篩選局部應(yīng)用于指甲板的藥物，注意力不得不主要放在水溶性化合物上。通過增加抗真菌藥的水溶性有效影響經(jīng)過指甲的最大流入。當(dāng)然，借助透指甲途徑治療甲癬的效力也依抗真菌藥的效力而定。
結(jié)果，需要新的抗真菌藥，優(yōu)選為廣譜抗真菌藥，對(duì)該藥不存在抗性且能夠靜脈或透指甲給藥?？拐婢巸?yōu)選也應(yīng)在適宜于口服給藥的藥用組合物中是可能的。這使得在患者已從需靜脈或透指甲給予所述藥物的疾病中恢復(fù)過來(lái)后，醫(yī)師用相同的藥物繼續(xù)治療。
US-4,267,179公開用作抗真菌藥的(4-苯基哌嗪-1-基-芳氧基-甲基-1，3-二氧戊環(huán)-2-基)-甲基-1H-咪唑和1H-1，2，4-三唑雜環(huán)衍生物。所述專利包括伊曲康唑，其在世界范圍基礎(chǔ)上作為廣譜抗真菌藥是可得到的。
EP-A-0,118,138和EP-A-0,228,125公開作為抗真菌藥的4-[4-[4-[4-[[2-芳基-2-吡咯基(azolyl)-1，3-二氧戊環(huán)-4-基]甲氧基]苯基]-1-哌嗪基]苯基]-2，4-二氫-2-烷氧基烷基]-3H-1，2，4-三唑-3-酮衍生物。
WO 95/17407公開四氫呋喃抗真菌藥以及WO 96/38443和WO97/00255。后兩個(gè)公布公開四氫呋喃抗真菌藥，據(jù)講授其為可溶的和/或在適宜于靜脈給藥的水介質(zhì)為可懸浮的，包含易于體內(nèi)轉(zhuǎn)化為羥基的取代基。
意想不到的是本發(fā)明化合物為具有良好水溶性的有效廣譜抗真菌藥。
本發(fā)明涉及下式化合物、其N-氧化物形式、鹽、季銨和立體化學(xué)異構(gòu)體形式，
其中D表示下式的基團(tuán)， 其中虛線表示連接D與式(I)化合物的剩余部分的鍵；X為N或CH；R3為氫或鹵素；R4為鹵素；-A-B-表示下式的二價(jià)基團(tuán)-N＝CH- (i)，-CH＝N- (ii)，-CH＝CH-(iii)，-CH2-CH2(iv)，其中基團(tuán)(i)和(ii)的一個(gè)氫原子可由C1-4烷基取代且基團(tuán)(iii)而(iv)中的一或多個(gè)氫原子可由C1-4烷基取代；Alk表示C1-6鏈烷二基；Y表示由一或兩個(gè)選自以下的取代基任選取代的C1-6鏈烷二基，包括鹵素、羥基、巰基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、芳氧基、芳硫基、芳基C1-4烷氧基、芳基C1-4烷硫基、氰基、氨基、單-或二(C1-4烷基)氨基、單-或二(芳基)氨基、單-或二(芳基C1-4烷基)氨基、C1-4烷氧基羰基氨基、芐氧基羰基氨基、氨基羰基、羧基、C1-4烷氧基羰基、胍基、芳基和Het；R1表示氫、C1-6烷基或芳基C1-6烷基；
R2表示氫、C1-6烷基或芳基C1-6烷基；或者R1和R2可一起形成選自以下的雜環(huán)，包括嗎啉基、吡咯烷基、哌啶基、高哌啶基、哌嗪基或苯鄰二甲酰亞胺-1-基；所述雜環(huán)基團(tuán)可由以下基團(tuán)任選取代，包括C1-4烷基、芳基、Het、芳基C1-4烷基、Het C1-4烷基、羥基C1-4烷基、氨基、單-或二(C1-4烷基)氨基、氨基C1-4烷基、單-或二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、羧基、氨基羰基、C1-4烷氧基羰基、C1-4烷氧基羰基氨基或單-或二(C1-4烷基)氨基羰基；芳基表示苯基、萘基、1，2，3，4-四氫-萘基、茚基或2，3-二氫化茚基；所述芳基每一個(gè)可由一或多個(gè)選自以下的取代基任選取代，包括鹵、C1-4烷基、羥基、C1-4烷氧基、硝基、氨基、三氟甲基、羥基C1-4烷基、C1-4烷氧基C1-4烷基、氨基C1-4烷基、單-或二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基；Het表示單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)基團(tuán)；所述單環(huán)雜環(huán)基團(tuán)選自哌嗪基、高哌嗪基、1，4-二氧雜環(huán)己烷基、嗎啉基、硫代嗎啉基、吡啶基、哌啶基、高哌啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、三嗪基、三唑基、吡喃基、四氫吡喃基、咪唑基、咪唑啉基、咪唑烷基、吡唑基、吡唑啉基、吡唑烷基、噻唑基、噻唑烷基、異噻唑基、噁唑基、噁唑烷基、異噁唑基、吡咯基、吡咯啉基、吡咯烷基、呋喃基、四氫呋喃基、噻吩基、thiolanyl、二氧戊環(huán)基；所述二環(huán)雜環(huán)基團(tuán)選自喹啉基、1，2，3，4-四氫喹啉基、異喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、2，3-二氮雜萘基、噌啉基、苯并二氫吡喃基、硫代苯并二氫吡喃基、2H-苯并吡喃基、1，4-苯并二氧雜環(huán)己烷基、吲哚基、異吲哚基、二氫吲哚基、吲唑基、嘌呤基、吡咯并吡啶基、呋喃并吡啶基、噻吩并吡啶基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并異噻唑基、苯并異噁唑基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基；其中所述單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)每一個(gè)可由一個(gè)或多個(gè)(可能的話)選自以下的取代基任選取代，包括鹵、C1-4烷基、羥基、C1-4烷氧基、硝基、氨基、三氟甲基、羥基C1-4烷基、C1-4烷氧基-C1-4烷基、氨基C1-4烷基、單-或二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、芳基或芳基C1-4烷基。
如在以上定義和下文中使用的那樣，鹵素定義為氟、氯、溴和碘；C1-4烷基作為基團(tuán)或基團(tuán)的一部分包括具有1至4個(gè)碳原子的直鏈和支鏈的飽和烴基，例如甲基、乙基、丙基、丁基等；C1-6烷基作為基團(tuán)或基團(tuán)的一部分包括如在C1-4烷基中定義的直鏈和支鏈的飽和烴基以及它們的含有5或6個(gè)碳原子的更高級(jí)的同類物，例如戊基或己基；C1-6鏈烷二基包括具有1至6個(gè)碳原子的直鏈和支鏈的飽和二價(jià)烴基，例如亞甲基、1，2-乙烷二基、1，3-丙烷二基、1，4-丁烷二基、1，5-戊烷二基、1，6-己烷二基、1，2-丙烷二基、1，2-丁烷二基、2，3-丁烷二基等；C2-3鏈烷二基包括具有2或3個(gè)碳原子的直鏈和支鏈的飽和二價(jià)烴基，例如1，2-乙烷二基、1，2-丙烷二基和1，3-丙烷二基。
為治療用途，式(I)化合物的鹽為那些其中相反離子為藥學(xué)上可接受的鹽。然而，也可發(fā)現(xiàn)使用為非藥學(xué)上可接受的酸和堿的鹽，例如在制備或純化藥學(xué)上可接受的化合物中。所有的鹽，無(wú)論是否藥學(xué)上可接受的，均包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。
如在上文中提到的藥學(xué)上可接受的加成鹽意指包括式(I)化合物能夠形成的治療活性的非毒性酸加成鹽形式。通過用以下這樣適宜的酸處理堿形式，能夠便利得到后者，包括例如無(wú)機(jī)酸如氫鹵酸，如鹽酸、氫溴酸等、硫酸、硝酸、磷酸等；或有機(jī)酸，例如乙酸、丙酸、羥基乙酸、2-羥基丙酸、2-氧代丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、馬來(lái)酸、富馬酸、蘋果酸、酒石酸、2-羥基-1，2，3-丙烷三羧酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、4-甲基苯磺酸、環(huán)己烷氨基磺酸、2-羥基苯甲酸、4-氨基-2-羥基苯甲酸等。反之，通過用堿處理能夠?qū)Ⅺ}形式轉(zhuǎn)化為游離堿形式。
通過用適宜的有機(jī)和無(wú)機(jī)堿處理，含有酸性質(zhì)子的式(I)化合物可轉(zhuǎn)化為它們的治療活性的非毒性金屬或胺加成鹽形式。適宜的堿鹽形式包括例如銨鹽、堿金屬和堿土金屬鹽，例如鋰、鈉、鉀、鎂、鈣鹽等，與有機(jī)堿所成的鹽，例如伯、仲和叔脂肪胺和芳族胺如甲胺、乙胺、丙胺、異丙胺、四丁基胺異構(gòu)體、二甲胺、二乙胺、二乙醇胺、二丙胺、二異丙胺、二正丁胺、吡咯烷、哌啶、嗎啉、三甲胺、三乙胺、三丙胺、奎寧環(huán)、吡啶、喹啉和并喹啉、二芐基乙二胺、N-甲基-D-葡糖胺、2-氨基-2-(羥基甲基)-1，3-丙二醇、哈胺鹽和與氨基酸例如精氨酸、賴氨酸等形成的鹽。反之，通過用酸處理，能夠?qū)Ⅺ}形式轉(zhuǎn)化為游離酸形式。
術(shù)語(yǔ)加成鹽也包括式(I)化合物能夠形成的水合物和溶劑加成形式。這樣形式的實(shí)例為例如水合物、醇化物等。
如在上文中使用的術(shù)語(yǔ)“季銨”定義為通過式(I)化合物的堿性氮與適宜的季銨化劑例如任選取代的烷基鹵化物、芳基鹵化物或芳基烷基鹵化物如碘甲烷或芐基碘反應(yīng)，式(I)化合物能夠形成的季銨鹽。也可使用其它具有良好離去基團(tuán)的反應(yīng)物，例如三氟甲磺酸烷基酯、甲磺酸烷基酯和對(duì)-甲苯磺酸烷基酯。季銨具有荷正電的氮。藥學(xué)上可接受的相反離子包括氯、溴、碘、三氟乙酸酯和乙酸酯。使用離子交換樹脂柱，能夠進(jìn)行相反離子的選擇。
如在上文中使用的術(shù)語(yǔ)“立體化學(xué)異構(gòu)體形式”定義為其中式(I)化合物存在的所有可能的立體異構(gòu)體形式，因此，也包括所有對(duì)映體、對(duì)映體混合物和非對(duì)映體混合物。除非另外提及或指明，化合物的化學(xué)名稱指的是所有可能的立體異構(gòu)體形式的混合物，所述混合物包括堿性分子結(jié)構(gòu)的所有非對(duì)映體和對(duì)映體。相同定義應(yīng)用于如在此描述的中間體，它們用來(lái)制備式(I)的最終產(chǎn)物。
如在此提及的化合物和中間體的純的立體異構(gòu)體形式定義為基本上不含有所述化合物或中間體的相同堿性分子結(jié)構(gòu)的其它對(duì)映體或非對(duì)映體形式的異構(gòu)體。具體地講，術(shù)語(yǔ)“立體異構(gòu)體純”等價(jià)于“手性純”，涉及具有至少80％(即最小90％的一個(gè)異構(gòu)體和最大10％的其它的可能的異構(gòu)體)立體異構(gòu)體過量最多至100％(即100％一個(gè)異構(gòu)體且無(wú)其它的異構(gòu)體)立體異構(gòu)體過量的化合物或中間體，更具體地講，具有90％至最多100％立體異構(gòu)體過量的化合物或中間體，甚至更具體地講具有94％至最多100％立體異構(gòu)體過量且最具體地講具有97％至最多100％立體異構(gòu)體過量。應(yīng)以相似的方式理解術(shù)語(yǔ)“對(duì)映體純”和“非對(duì)映體純”，但是則分別看作正被談?wù)摰幕旌衔锏膶?duì)映體過量、非對(duì)映體過量。
如在此使用的術(shù)語(yǔ)順式和反式與化學(xué)文摘命名原則相一致且指的是在環(huán)部分上取代基的位置，更具體地講是式(I)化合物中的四氫呋喃環(huán)或二氧戊環(huán)。例如，當(dāng)建立式(D1)、(D2)、(D3)或(D4)基團(tuán)中的四氫呋喃或二氧戊環(huán)的順式或反式構(gòu)型時(shí)，在四氫呋喃環(huán)或二氧戊環(huán)的2位碳原子上具有最高優(yōu)先權(quán)的取代基，和在式(D1)、(D2)或(D4)基團(tuán)中的四氫呋喃或二氧戊環(huán)的4位或式(D3)基團(tuán)中的四氫呋喃環(huán)的5位碳原子上具有最高優(yōu)先權(quán)的取代基被考慮(按照Cahn-Ingold-Prelog順序規(guī)則確定的取代基優(yōu)先權(quán))。當(dāng)所述兩個(gè)具有最高優(yōu)先權(quán)的取代基處于環(huán)的相同一側(cè)時(shí)，那么構(gòu)型指明為順式，否則，構(gòu)型指明為反式。
式(I)化合物都含有至少2個(gè)可具有R-或S-構(gòu)型的不對(duì)稱中心。如在此使用的那樣，指明2個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱中心的每一個(gè)立體化學(xué)構(gòu)型的立體化學(xué)說(shuō)明也與化學(xué)文摘命名原則相一致。在一些式(I)化合物和在它們的制備中使用中間體當(dāng)中，并不實(shí)驗(yàn)測(cè)定絕對(duì)立體化學(xué)構(gòu)型。在這些情況中，首先分離得到的立體異構(gòu)體形式指明為“A”且第二個(gè)指明為“B”，而不須進(jìn)一步指出實(shí)際的立體化學(xué)構(gòu)型。然而，假使“A”和“B”具有對(duì)映體關(guān)系，所述“A”和“B”立體異構(gòu)體形式能夠通過例如它們的旋光性明確定性。使用本領(lǐng)域已知的方法，例如X-射線衍射，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠測(cè)定這樣化合物的絕對(duì)構(gòu)型。假使“A”和“B”為立體異構(gòu)體混合物，能夠進(jìn)一步將它們分離，借此分別將分離的第一部分指明為“A1”和“B1”且將第二部分指明為“A2”和“B2”，而不須進(jìn)一步說(shuō)明實(shí)際的立體化學(xué)構(gòu)型。
本發(fā)明化合物的N-氧化物形式意指包括其中一或幾個(gè)氮原子氧化為所謂N-氧化物的式(I)化合物。
一些式(I)化合物也可以它們的互變異構(gòu)形式存在。盡管不在以上式中詳細(xì)指明，這樣的形式打算包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。
當(dāng)在下文中使用時(shí)，術(shù)語(yǔ)“式(I)化合物”意指也包括它們的N-氧化物形式、它們的鹽、它們的季銨和它們的立體化學(xué)異構(gòu)體形式。特別重要的是那些為立體化學(xué)純的式(I)化合物。
重要的一組化合物為那些其中-Alk-為下式二價(jià)基團(tuán)的式(I)化合物， 其中用一個(gè)星號(hào)標(biāo)記的碳原子連接于氮原子而用兩個(gè)星號(hào)標(biāo)記的碳原子連接于氧原子。
那些其中D為式D1或D2尤其是D1基團(tuán)的式(I)化合物也是令人感興趣的。R3和R4兩者適宜為鹵素，更具體地說(shuō)為氯或氟原子，且X為氮原子。
另外-A-B-適宜為式(ii)基團(tuán)。
特別的一組化合物為那些其中Y為由芳基任選取代的C1-6鏈烷二基，更具體地講，任選由芳基取代的C2-3鏈烷二基的式(I)化合物。
優(yōu)選的一組化合物為那些其中D為式D1基團(tuán)，X為氮原子，R3和R4兩者為鹵素，-Alk-為下式二價(jià)基團(tuán)的式(I)化合物， 其中用一個(gè)星號(hào)標(biāo)記的碳原子連接于氮原子而用兩個(gè)星號(hào)標(biāo)記的碳原子連接于氧原子，且Y為由芳基任選取代的C2-3鏈烷二基。
在反應(yīng)惰性溶劑如N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、1-甲基-2-吡咯啉酮(pyrrolidinone)、1，3-二甲基-2-咪唑啉酮、砜等中，且在適宜的堿例如氫氧化鈉或氫化鈉存在下，通過使其中W1為以下適宜的離去基團(tuán)的式(II)中間體與式(III)中間體反應(yīng)，包括例如鹵素如碘、芳基磺酰氧基或烷磺酰氧基如對(duì)甲苯磺酰氧基、萘磺酰氧基或甲磺酰氧基，能夠制備本發(fā)明化合物。 在這個(gè)和以下的制備中，可將反應(yīng)產(chǎn)物從反應(yīng)介質(zhì)中分離，且如果必要，按照本領(lǐng)域熟知的方法學(xué)進(jìn)一步純化，例如提取、結(jié)晶、研磨和層析法。特別是使用手性固定相，例如從日本Daicel化學(xué)工業(yè)公司購(gòu)買的Chiralpak AD(直鏈淀粉3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)或Chiralpak AS，能夠?qū)游龇蛛x立體異構(gòu)體。
在反應(yīng)惰性溶劑如二甲基亞砜中，且在適宜的堿例如氫氧化鉀存在下，通過用式(V)中間體使式(IV)中間體N-烷基化，其中W2為適宜的離去基團(tuán)例如鹵素，且假使R1和/或R2為氫時(shí)，用保護(hù)性基團(tuán)P例如C1-4烷氧基羰基或芐基保護(hù)伯胺或仲胺基團(tuán)，也可制備式(I)化合物。假使胺被保護(hù)，N-烷基化反應(yīng)后能夠使用本領(lǐng)域已知的去保護(hù)技術(shù)得到式(I)化合物。 任選在適宜的堿例如氫氧化鈉存在下，且任選在反應(yīng)惰性溶劑如N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、甲苯、1-甲基-2-吡咯烷酮、1，3-二甲基-2-咪唑烷酮、砜等中，通過使式(VI)中間體與式(VII)中間體反應(yīng)，其中W3為適宜的離去基團(tuán)，例如鹵素、芳基磺酰氧基或烷磺酰氧基如對(duì)甲苯磺酰氧基、萘磺酰氧基或甲磺酰氧基，也可制備式(I)化合物。假使R1和/或R2為氫，伯胺或仲胺基團(tuán)可用保護(hù)性基團(tuán)P例如C1-4烷氧基羰基或芐基保護(hù)，且O-烷基化反應(yīng)后，能夠使用本領(lǐng)域已知的去保護(hù)技術(shù)得到式(I)化合物。 按照本領(lǐng)域已知的轉(zhuǎn)化方法，式(I)化合物也可相互轉(zhuǎn)化。
使用本領(lǐng)域已知的技術(shù)，例如在二氯甲烷中和在三氟乙酸存在下反應(yīng)，可將含有C1-4烷氧基羰基氨基部分的式(I)化合物轉(zhuǎn)化為含有相應(yīng)的氨基部分的式(I)化合物。
通過首先用適宜的保護(hù)基團(tuán)例如芳基烷基如芐基保護(hù)伯胺，可使含有伯胺的式(I)化合物單-甲基化，且接著使用本領(lǐng)域已知的甲基化技術(shù)，例如與多聚甲醛反應(yīng)，將仲胺甲基化。使用本領(lǐng)域已知的脫除保護(hù)技術(shù)，例如在四氫呋喃或甲醇中且在催化劑如鈀炭存在下與氫反應(yīng)，可將由此得到的叔胺去保護(hù)，因此得到要求的甲基化的仲胺。
按照本領(lǐng)域已知的用于把三價(jià)氮轉(zhuǎn)化為其N-氧化物形式的方法，也可將式(I)化合物轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的N-氧化物形式。通過使式(I)的起始原料與適宜的有機(jī)或無(wú)機(jī)過氧化物反應(yīng)，通?？蛇M(jìn)行所述N-氧化反應(yīng)。適宜的無(wú)機(jī)過氧化物包括例如過氧化氫、堿金屬或堿土金屬過氧化物，例如過氧化鈉、過氧化鉀；適宜的有機(jī)過氧化物可包括過氧酸例如過氧苯甲酸(benzenecarboperoxoic acid)或鹵代過氧苯甲酸如3-氯過氧苯甲酸、過氧鏈烷酸如過氧乙酸、烷基過氧化氫如叔丁基過氧化氫。適宜的溶劑為例如水、低級(jí)鏈烷醇如乙醇等、烴類如甲苯、酮類如2-丁酮、鹵代烴類如二氯甲烷和這些溶劑的混合物。
在以上反應(yīng)方法中使用的一些中間體和起始原料為市場(chǎng)上可得到的，或者可按照在別處例如US-4,619,931、US-4,791,111、US-4,931,444、US-4,267,179和WO98/34934中描述的方法合成。
通過應(yīng)用本領(lǐng)域已知方法，可得到本發(fā)明化合物和中間體的純的立體異構(gòu)體形式。通過物理分離方法例如選擇性結(jié)晶和層析技術(shù)如使用手性固定相的液相層析法，可分離非對(duì)映體。通過用光學(xué)活性酸使它們的非對(duì)映體鹽選擇性結(jié)晶，可使對(duì)映體相互分離。或者，通過使用手性固定相的層析技術(shù)，可分離對(duì)映體。從適宜的起始原料的相應(yīng)的純的立體異構(gòu)體形式也可衍生所述純的立體異構(gòu)體形式，條件是反應(yīng)立體選擇性或立體特異性地發(fā)生。優(yōu)選如果要求特異性立體異構(gòu)體時(shí)，將通過立體選擇性或立體特異性的制備方法合成所述化合物。這些方法將優(yōu)先使用手性純起始原料。式(I)化合物的立體異構(gòu)體形式顯然打算包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。
式(I)化合物的手性純形式形成優(yōu)選的一組化合物。因此式(II)、(III)和(VI)中間體、它們的N-氧化物形式、它們的鹽形式和它們的季銨的手性純形式在制備式(I)的手性純化合物中是特別有用的。式(II)、(III)和(VI)中間體的對(duì)映體混合物和非對(duì)映體混合物在制備具有相應(yīng)構(gòu)型的式(I)化合物中也是有用的。
式(I)化合物、它們的鹽、季銨和立體化學(xué)異構(gòu)體形式為體內(nèi)抵御真菌有用的藥物。本發(fā)明化合物為廣譜抗真菌藥。它們對(duì)寬范圍的真菌具有活性，例如假絲酵母屬(Candida spp.)，如白假絲酵母(Candida albicans)、光滑假絲酵母(Candida glabrara)、Candida krusei、近平滑假絲酵母(Candida parapsilosis)、乳酒假絲酵母(Candidakefyr)、熱帶假絲酵母(Candida tropicalis)；曲霉屬(Aspergillus spp.)，如煙曲霉(Aspergillus fumigatus)、黑曲霉(Aspergillus niger)、黃曲霉(Aspergillus flavus)；新型隱球菌(Cryptococcus neoformans)、分支絲菌(Sporothrix schenckii)、產(chǎn)色芽生菌屬(Fonsecaea spp.)、絮狀表皮癬菌(Epidermophyton floccosum)、犬小孢霉屬(Microsporum canis)、發(fā)癬菌屬(Trichophyton spp.)、新月菌屬(Fusarium spp.)和幾種暗色孢科的絲孢菌類(dematiaceous hyphomycetes)。特別重要的是一些本發(fā)明化合物對(duì)新月孢子菌屬具有改善的活性。
如在下文的藥理實(shí)施例中描述的那樣，體外實(shí)驗(yàn)，包括本發(fā)明化合物的真菌敏感性的測(cè)定，表明式(I)化合物在例如白色念珠菌的真菌生長(zhǎng)上具有良好的內(nèi)在抑制能力。其它的體外實(shí)驗(yàn)，例如本發(fā)明化合物在例如白色念珠菌的甾醇合成的作用的測(cè)定，也證實(shí)它們的抗真菌效力。在幾種小鼠、豚鼠和大鼠模型的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，也顯示口服和靜脈兩者給藥后，本發(fā)明化合物為有效的抗真菌藥。
一些本發(fā)明化合物的另外的優(yōu)點(diǎn)是它們不僅抑制真菌，如大多數(shù)已知的吡咯抗真菌藥那樣，而且在可接受的治療劑量下對(duì)許多真菌菌株也具有殺真菌作用。
本發(fā)明化合物在化學(xué)上是穩(wěn)定的且具有良好的口服利用度。
式(I)化合物在水溶液中的溶解度分布使它們適宜于靜脈給藥。特別重要的化合物為那些在至少為4的pH下具有至少0.1mg/ml的水-溶解度的式(I)化合物，優(yōu)選在至少為4的pH下具有至少1mg/ml的水-溶解度，且更優(yōu)選在至少為4的pH下具有至少5mg/ml的水-溶解度。
鑒于式(I)化合物的用途，提供治療患有真菌感染的溫血?jiǎng)游锇ㄈ说姆椒āＫ龇椒òㄈ砘蚓植拷o予溫血?jiǎng)游锇ㄈ擞行Я康氖?I)化合物、其N-氧化物形式、鹽、季銨或可能的立體異構(gòu)體形式。因此，式(I)化合物被提供用作藥物，尤其提供式(I)化合物在制備用于治療真菌感染的藥物中的用途。
本發(fā)明也提供用于治療或預(yù)防真菌感染的組合物，組合物包含治療有效量的式(I)化合物和藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑。
鑒于它們的有用的藥理性質(zhì)，目的化合物可配制為多種用于給藥目的的藥用形式。為制備本發(fā)明的藥用組合物，使治療有效量的以堿或加成鹽形式存在的具體化合物作為活性成分與藥學(xué)上可接受的載體緊密聯(lián)合，其中載體可采用廣泛多種形式，依要求給藥劑型而定。這些藥用組合物以適宜的劑型存在是合乎需要的，優(yōu)選用于口服、直腸、局部、皮下、透指甲給藥或經(jīng)非腸道給藥。例如，在制備以口服劑型存在的組合物中，可使用任何常見的藥用介質(zhì)，例如在口服液體制劑如混懸劑、糖漿劑、乳劑、酏劑和溶液劑情況下，使用水、乙二醇類、油類、醇類等；或者在粉劑、丸劑、膠囊劑和片劑情況下，使用固體載體例如淀粉、糖類、高嶺土、潤(rùn)滑劑、粘合劑、崩解劑等。由于它們易于給藥，片劑和膠囊劑代表最有利的口服單位劑型，其中明顯使用固體藥用載體。局部應(yīng)用的適宜的組合物可引用所有通常用于局部給予藥物的組合物，例如霜?jiǎng)?、凝膠劑、敷料、洗發(fā)劑、酊劑、貼劑、膏劑、油膏劑、粉劑等。在適宜于皮下給藥的組合物中，載體任選包括滲透促進(jìn)劑和/或適宜的潤(rùn)濕劑，任選與適宜的任何性質(zhì)的添加劑以微小比例混合，其中添加劑對(duì)皮膚不引起明顯的有害作用。所述添加劑可有助于皮膚給藥和/或可有助于制備要求的組合物。可以多種方式，例如經(jīng)皮貼劑、滴劑、膏劑，給予這些組合物。
透指甲組合物以溶液形式存在且載體任選包括滲透促進(jìn)劑，其有利于抗真菌藥滲透進(jìn)入和穿透指甲的角質(zhì)化的指甲層。溶劑介質(zhì)包括與共溶劑例如具有2至6個(gè)碳原子的醇如乙醇混合的水。
對(duì)非腸道組合物，載體將通常包括滅菌水，至少是大部分。例如，可制備注射溶液劑，其中載體包括生理鹽水溶液、葡萄糖溶液或生理鹽水和葡萄糖溶液的混合物。也可制備注射混懸劑，其中可使用適宜的液體載體、懸浮劑等。對(duì)非腸道組合物，也可包括其它的輔助溶解的成分，例如環(huán)糊精。適宜的環(huán)糊精為α-、β-、γ-環(huán)糊精或醚類和它們的混合醚，其中環(huán)糊精的葡糖酐的一或多個(gè)羥基由C1-6烷基取代，具體為甲基、乙基或異丙基，例如任選甲基化的β-CD；羥基C1-6烷基，具體為羥基乙基、羥基丙基或羥基丁基；羧基C1-6烷基，具體為羧基甲基或羧基乙基；C1-6烷基羰基，具體為乙?；Ｗ鳛榻j(luò)合劑和/或助溶劑特別值得一提的是β-CD、任選甲基化的β-CD、2，6-二甲基-β-CD、2-羥基乙基-β-CD、2-羥基乙基-γ-CD、2-羥基丙基-γ-CD和(2-羧基-甲氧基)丙基-β-CD，且特別是2-羥基丙基-β-CD(2-HP-β-CD)。
術(shù)語(yǔ)混合醚指的是環(huán)糊精衍生物，其中至少兩個(gè)環(huán)糊精羥基由不同的基團(tuán)醚化，例如羥基-丙基和羥基乙基。
平均摩爾取代值(M.S.)用作測(cè)量每摩爾葡糖酐的烷氧基單位的平均摩爾數(shù)。平均取代度(D.S.)指的是每葡糖酐的取代的羥基平均數(shù)目。通過多種分析技術(shù)例如核磁共振譜(NMR)、質(zhì)譜(MS)和紅外光譜(IR)，能夠測(cè)定M.S.和D.S.值。依使用的技術(shù)而定，對(duì)一種給出的環(huán)糊精衍生物可得到稍微不同的值。如經(jīng)質(zhì)譜測(cè)量的那樣，M.S.范圍優(yōu)選介于0.125至10之間且D.S.范圍優(yōu)選介于0.125至3之間。
其它的適宜于口服或直腸給藥的組合物包含由固體分散物組成的顆粒，顆粒包含式(I)化合物和一或多種適宜的藥學(xué)上可接受的水溶性聚合物。
在下文使用的術(shù)語(yǔ)“固體分散物”定義為以固體狀態(tài)(與液體或氣體狀態(tài)相反)存在的包含至少兩種成分的系統(tǒng)，即式(I)化合物和水溶性聚合物，其中一種成分或多或少均勻徹底分散在其它的一種或多種-成分(在這樣的情況下，包括另外的在本領(lǐng)域中普遍已知的藥學(xué)上可接受的配制試劑，例如增塑劑、防腐劑等)中。當(dāng)所述成分的分散液如此以致于系統(tǒng)為化學(xué)上和物理上徹底均勻或均質(zhì)的或由如在熱力學(xué)中定義的一相組成，這樣的固體分散物將稱作“固體溶液”。固體溶液為優(yōu)選的物理系統(tǒng)，因?yàn)槠渲械某煞謱?duì)它們所給予的有機(jī)體通常為可易于生物利用的。這個(gè)有利條件可用以下事實(shí)易于解釋，當(dāng)與液體介質(zhì)例如胃腸汁接觸時(shí)，所述固體溶液能夠形成液體溶液。易于溶出可至少部分歸因于以下事實(shí)，成分從固體溶液中溶出所需要的能量要小于成分從結(jié)晶或微晶固相溶出所需要的能量。
術(shù)語(yǔ)“固體分散物”也包括其比固體溶液具有較少的均勻性的分散物。這樣的分散物不是化學(xué)上和物理上徹底均勻的或包含一相以上。例如，術(shù)語(yǔ)“固體分散物”也涉及具有結(jié)構(gòu)域(domains)或小的區(qū)域的系統(tǒng)，其中式(I)的無(wú)定形、微晶或結(jié)晶化合物、或無(wú)定形、微晶或結(jié)晶水溶性聚合物，或者兩者皆而有之，或多或少的均勻分散在另一相中，該相包含水溶性聚合物、或式(I)化合物、或包含式(I)化合物和水溶性聚合物的固體溶液。所述結(jié)構(gòu)域?yàn)楣腆w分散物中的區(qū)域，其明顯的標(biāo)志為具有一些物理特征的，體積小，且均勻和隨機(jī)充分分布的固體分散物。
存在多種用于制備固體分散物的技術(shù)，包括熔體-擠出、噴霧干燥和溶液蒸發(fā)。
溶液蒸發(fā)方法包括以下步驟a)任選在升高的溫度下，將式(I)化合物和水溶性聚合物溶解于適宜的溶劑中；b)任選在真空下，加熱在a)點(diǎn)下生成的溶液，直到溶劑蒸發(fā)。也可將溶液傾入到大的表面上以便于形成薄膜，并從那上面蒸發(fā)溶劑。
在噴霧干燥技術(shù)中，也將兩種成分溶解于適宜的溶劑中并然后經(jīng)噴霧干燥器的噴嘴噴霧生成的溶液隨后在升高的溫度下從生成的液滴蒸發(fā)溶劑。
用于制備固體分散物的優(yōu)選技術(shù)為熔體-擠出方法，該方法包括以下步驟
a)使式(I)化合物與適宜的水溶性聚合物混合，b)任選粘合添加劑，如此得到混合物，c)加熱并混合如此得到的粘合物直到得到均勻的熔化物，d)壓迫由此得到的熔化物，使其通過一或多個(gè)噴嘴；和e)冷卻熔化物直到其固化。
應(yīng)廣泛理解術(shù)語(yǔ)“熔化”和“熔化的”。這些術(shù)語(yǔ)不僅意指從固體狀態(tài)到液體狀態(tài)的變化，而且也可指玻璃狀態(tài)或橡膠狀態(tài)的轉(zhuǎn)化，且其中可能有混合物中的一種成分或多或少的均勻包埋在其它的成分當(dāng)中。在具體情況下，一種成分將熔化而其它的成分將溶解于熔化物中，如此形成溶液，其冷卻下可形成具有有利溶出性質(zhì)的固體溶液。
如在上文中描述的那樣，制備固體分散物后，所得到的產(chǎn)物能夠任選研磨和篩分。
固體分散物產(chǎn)物能夠研磨或粉碎為具有小于600μm的粒徑的顆粒，優(yōu)選為小于400μm且最優(yōu)選小于125μm。
然后，經(jīng)常規(guī)技術(shù)能夠把如在上文中描述的那樣制備的顆粒配制為藥用劑型例如片劑和膠囊劑。
人們將意識(shí)到本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠優(yōu)化以上描述的固體分散物制備技術(shù)的參數(shù)，例如最適宜的溶劑、操作溫度、所使用裝置的類型、噴霧干燥的速率、熔體-擠出中的物料通過速率。
顆粒中的水溶性聚合物為具有表觀粘度的聚合物，當(dāng)在20℃下以2％(w/v)溶解于水溶液中時(shí)，表觀粘度為1至5000 mPa.s，更優(yōu)選為1至700 mPa.s，且最優(yōu)選為1至100 mPa.s。例如，適宜的水溶性聚合物包括烷基纖維素、羥基烷基纖維素、羥基烷基烷基纖維素、羧基烷基纖維素、羧基烷基纖維素的堿金屬鹽、羧基烷基烷基纖維素、羧基烷基纖維素酯、淀粉、果膠、甲殼質(zhì)衍生物、二、寡-和多糖，例如海藻糖、藻酸或它們的堿金屬和銨鹽、角叉菜膠、半乳甘露聚糖、黃蓍膠、瓊脂、阿拉伯膠、瓜爾膠和黃原膠、聚丙烯酸和它們的鹽、聚甲基丙烯酸酯和它們的鹽、甲基丙烯酸聚合物、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯吡咯烷酮與乙烯基乙酸酯的共聚物、聚乙二醇與聚乙烯吡咯烷酮的組合、聚環(huán)氧烷和環(huán)氧乙烷與環(huán)氧丙烷的共聚物。優(yōu)選水溶性聚合物為羥基丙基甲基纖維素。
在制備如在WO 97/18839中公開的以上提及的顆粒中，一或多種環(huán)糊精也能用作水溶性聚合物。所述環(huán)糊精包括本領(lǐng)域已知的藥學(xué)上可接受的未取代的和取代的環(huán)糊精，更特別為α、β或γ環(huán)糊精或它們的藥學(xué)上可接受的衍生物。
能夠使用的取代的環(huán)糊精包括在U.S.專利3,459,731中描述的聚醚類中，另外的取代的環(huán)糊精為其中一或多個(gè)環(huán)糊精羥基上的氫由以下基團(tuán)取代的醚類或它們的混合醚類，包括C1-6烷基、羥基C1-6烷基、羧基C1-6烷基或C1-6烷氧基羰基C1-6烷基。這樣取代的環(huán)糊精特別為其中一或多個(gè)環(huán)糊精羥基上的氫由以下基團(tuán)取代的醚類，包括C1-3烷基、羥基C2-4烷基或羧基C1-2烷基，或者更特別是由甲基、乙基、羥基乙基、羥基丙基、羥基丁基、羧基-甲基或羧基乙基取代的醚類。
如在上文中使用的那樣，C1-2烷基表示具有1或2個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的飽和烴基，例如甲基或乙基；C1-3烷基包括如在C1-2烷基中定義的直鏈和支鏈的飽和烴基團(tuán)以及它們的含有3個(gè)碳原子的更高的同源物，例如丙基；C2-4烷基表示具有2至4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的飽和烴基團(tuán)，例如乙基、丙基、丁基、1-甲基-丙基等。
特別有用的是β-環(huán)糊精醚，例如在Drugs of the Future，第9卷，第8期，第577-578頁(yè)中由M.Nogradi(1984)描述的二甲基-β-環(huán)糊精醚和聚醚類，例如羥基丙基β-環(huán)糊精和羥基乙基β-環(huán)糊精就是實(shí)例。這樣的烷基醚可為具有大約0.125至3例如大約0.3至2的取代度的甲基醚。例如，這樣的羥基丙基環(huán)糊精可例如從β-環(huán)糊精與環(huán)氧丙烷之間的反應(yīng)形成且可具有大約0.125至10，例如大約0.3至3的MS值。
另一種適宜類型的取代環(huán)糊精為硫代丁基環(huán)糊精。
活性成分與環(huán)糊精的比例可在寬范圍內(nèi)變化。例如可應(yīng)用1/100至100/1的比例?；钚猿煞峙c環(huán)糊精的重要比例范圍在大約1/10至10/1中?；钚猿煞峙c環(huán)糊精的更重要的比例范圍在大約1/5至5/1中。
另外，可便利配制以納米粒子形式存在的本發(fā)明的吡咯抗真菌藥，納米粒子具有以足夠維持小于1000nm的有效平均離子體積的量吸附在它們的表面上的表面改性劑。人們確信有用的表面改性劑包括那些物理粘合于抗真菌藥表面而不是化學(xué)結(jié)合于抗真菌藥的物質(zhì)。
適宜的表面改性劑能優(yōu)選選自已知的有機(jī)和無(wú)機(jī)藥用賦形劑。這樣的賦形劑包括多種聚合物、低分子量低聚物、天然產(chǎn)物和表面活性劑。優(yōu)選表面改性劑包括非離子和陰離子表面活性劑。
配制本發(fā)明化合物的另一種重要的方法包括藥用組合物，借此本發(fā)明抗真菌藥混合到親水聚合物中并應(yīng)用該混合物作為覆蓋于許多小球上面的包衣薄膜，由此得到能夠便利制備和適宜于制備用于口服給藥的藥用劑型的組合物。
所述小球包含中心的、圓的或球形的芯、親水聚合物和抗真菌藥物的包衣薄膜和密封包衣層。
適宜于用作小球的芯的材料是多種多樣的，條件是所述材料為藥學(xué)上可接受的且具有適宜的尺寸和緊密性。這樣的材料的實(shí)例為聚合物、無(wú)機(jī)物質(zhì)、有機(jī)物質(zhì)、及糖精和它們的衍生物。
以上提及的藥用組合物也可包含殺真菌有效量的其它的抗真菌化合物，例如細(xì)胞壁活性化合物。如在此使用那樣，術(shù)語(yǔ)“細(xì)胞壁活性化合物”意指干擾真菌細(xì)胞壁的任何化合物。用于與本發(fā)明化合物聯(lián)合的適宜的抗真菌化合物包括(但不局限于)已知吡咯類例如氟康唑、voriconazole、伊曲康唑、酮康唑、咪康唑、ER 30346、SCH 56592、多烯類例如兩性菌素B、制霉菌素或脂質(zhì)體和它們的類脂形式，例如Abelcet、AmBisome和Amphocil；嘌呤或嘧啶核苷酸抑制劑例如5-氟胞嘧啶、多氧菌素和三國(guó)霉素，尤其是三國(guó)霉素Z或三國(guó)霉素K和在US-5,006,513中描述的其它的藥物或其它的殼多糖抑制劑、延伸因子抑制劑例如糞殼菌素和它的類似物、甘露聚糖抑制劑例如predamycin、殺菌/通透性-介導(dǎo)(BPI)蛋白產(chǎn)物例如XMP.97或XMP.127、復(fù)合糖抗真菌藥物例如CAN-296、(1，3)-β-葡聚糖合酶抑制劑包括阜孢殺酵素、棘孢曲菌素和棘白菌素。
特別有利的是把以上提及的藥用組合物配制成易于給藥和劑量均勻性的劑型。如在說(shuō)明書和權(quán)利要求中使用的劑型在此指的是適宜作為單位劑型的物理分散單位，每單位劑型含有與需要的藥用載體一起的經(jīng)計(jì)算產(chǎn)生要求的治療作用的預(yù)先確定量的活性成分。這樣單位劑型的實(shí)例為片劑(包括刻痕或包衣片劑)、膠囊劑、丸劑、栓劑、粉袋劑、扁囊劑、注射液或混懸劑、茶匙劑、大湯匙劑等和它們的分開的多單位劑型。
從在此給出的試驗(yàn)結(jié)果中，那些治療患有由真菌引起的疾病的溫血?jiǎng)游锏募夹g(shù)人員能夠易于確定每天治療有效量。通常設(shè)計(jì)每天治療有效量將為0.05mg/kg至20mg/kg體重。
實(shí)驗(yàn)部分在下文，“DMF”定義為N，N-二甲基甲酰胺，“DIPE”定義為二異丙基醚。A.中間體的制備
b)將在HBr(48％)(250ml)中的NaHSO3(1g)和乙酸/HBr混合溶液(250ml)的混合物攪拌15分鐘。加入中間體1(0.022mol)。將混合物攪拌且回流90分鐘。蒸發(fā)溶劑。加入甲苯并蒸發(fā)。將殘余物溶于CH3OH中。在冰浴上攪拌混合物。滴加入SOCl2(24g)。將混合物攪拌過夜。蒸發(fā)溶劑。將殘余物溶解于CH2Cl2中。用NaHCO3溶液洗滌有機(jī)溶液，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。在DIPE中研磨殘余物，濾出并干燥，得到6.6g的(±)-α-乙基-4，5-二氫-4-[4-[4-(4-羥基苯基)-1-哌嗪基]苯基]-5-氧代-1H-1，2，4-三唑-1-乙酸甲酯(中間體2)。
c)在50℃下，于N2流下將(-)-(2S-順式)-2-(2，4-二氟苯基)-2-(1H-1，2，4-三唑-1-基甲基)-1，3-二氧戊環(huán)-4-甲醇甲磺酸(酯)(0.007mol)、中間體2(0.0068mol)和NaOH(0.008mol)在DMF(100ml)中的混合物攪拌過夜，然后傾入到H2O中并攪拌1小時(shí)。濾出沉淀并溶解于CH2Cl2中。分離有機(jī)層，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。經(jīng)硅膠柱層析法(洗脫液CH2Cl2/CH3OH/己烷/乙酸乙酯48/2/20/30)純化殘余物。收集純的部分并蒸發(fā)溶劑。在乙酸乙酯中研磨殘余物，濾出并干燥，得到1.4g(29％)的(2S-順式)-4-[4-[4-[4-[[2-(2，4-二氟苯基)-2-(1H-1，2，4-三唑-1-基甲基)-1，3-二氧戊環(huán)-4-基]甲氧基]苯基]-1-哌嗪基]苯基]-α-乙基-4，5-二氫-5-氧代-1H-1，2，4-三唑-1-乙酸甲酯(中間體3a)。
以類似方法制備中間體3b。 d)在室溫下，將中間體(3a)(0.009mol)和NaBH4(0.045mol)在二噁烷(300ml)和H2O(100ml)中的混合物攪拌過夜。加入飽和NH4Cl溶液(100ml)。把混合攪拌3小時(shí)。加入HCl(10ml)。將混合攪拌48小時(shí)，然后用Na2CO3溶液中和且用CH2Cl2提取。分離有機(jī)層，洗滌，干燥，過濾并蒸發(fā)溶劑。經(jīng)硅膠柱層析法(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 96/4)純化殘余物。收集純的部分并蒸發(fā)溶劑。在DIPE中研磨殘余物，濾出并干燥，得到4.2g(68％)的(2S-順式)-4-[4-[4-[4[[2-(2，4-二氟苯基)-2-(1H-1，2，4-三唑-1-基甲基)-1，3-二氧戊環(huán)-4-基]甲氧基]苯基]-1-哌嗪基]苯基]-2，4-二氫-2-[1-(羥基甲基)丙基]-3H-1，2，4-三唑-3-酮(中間體4)。B.最終化合物的制備表1列出類似實(shí)施例B1或B2制備的化合物。
表1 C.物理化學(xué)實(shí)施例表2
D.藥理實(shí)施例實(shí)施例D1真菌敏感性的測(cè)定一組念珠菌屬菌株加上皮膚真菌犬小孢霉、紅色發(fā)癬菌(Trichophyton rubrum)和須發(fā)癬菌(Trichophyton mentagrophytes)、煙曲霉和新型隱球菌的單一菌株用于評(píng)價(jià)受試化合物的體外活性。將接種體制備為肉湯培養(yǎng)基(酵母)或制備為從瓊脂斜面培養(yǎng)基(霉菌)制備的真菌材料的懸浮液。將受試化合物從二甲基亞砜?jī)?chǔ)備液移液到水中，得到一系列10-倍稀釋液。在每ml大約50,000個(gè)菌落形成單位(CFU)下，將真菌接種體懸浮于生長(zhǎng)培養(yǎng)基CYG(F.C.Odds，Journalof Clinical Microbiology，29，2735-2740，1991)中并加入到受試藥物的水溶液中。
將培養(yǎng)物放置在96孔塑料微稀釋板上并在37℃(念珠菌屬)下將它們孵育2天或在30℃(其它的真菌)下孵育5天。
通過在405nm的波長(zhǎng)下測(cè)量它們的光密度(OD)，測(cè)量微量培養(yǎng)的生長(zhǎng)。計(jì)算含有受試化合物的培養(yǎng)基的OD相對(duì)于對(duì)照組培養(yǎng)基的OD即未含有受試化合物的培養(yǎng)基的OD的百分比。生長(zhǎng)抑制至對(duì)照組的35％或更小記錄為明顯抑制。
一些式(I)化合物對(duì)以下真菌的最小抑制濃度(MIC；10-6M)列于表3中，真菌包括光滑假絲酵母、Candida krusei、近平滑念珠菌、白色念珠菌、乳酒假絲酵母、熱帶念珠菌、犬小孢霉、紅色發(fā)癬菌和須發(fā)癬菌、新型隱球菌和煙曲霉。
表3
E.組合物實(shí)施例如貫穿這些實(shí)施例使用的“活性成分(A.I.)”涉及式(I)化合物、其N-氧化物、鹽、季銨或立體化學(xué)異構(gòu)體形式。
權(quán)利要求
1.一種下式化合物、其N-氧化物形式、鹽、季銨或立體化學(xué)異構(gòu)體形式， 其中D表示下式的基團(tuán)， 其中虛線表示連接D與式(I)化合物的剩余部分的鍵；X為N或CH；R3為氫或鹵素；R4為鹵素；-A-B-表示下式的二價(jià)基團(tuán)-N＝CH-(i)，-CH＝N-(ii)，-CH＝CH- (iii)，-CH2-CH2(iv)，其中基團(tuán)(i)和(ii)的一個(gè)氫原子可由C1-4烷基取代且基團(tuán)(iii)和(iv)中的一或多個(gè)氫原子可由C1-4烷基取代；Alk表示C1-6鏈烷二基；Y表示由一或兩個(gè)選自以下的取代基任選取代的C1-6鏈烷二基，包括鹵素、羥基、巰基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、芳氧基、芳硫基、芳基C1-4烷氧基、芳基C1-4烷硫基、氰基、氨基、單-或二(C1-4烷基)氨基、單-或二(芳基)氨基、單-或二(芳基C1-4烷基)氨基、C1-4烷氧基羰基氨基、芐氧基羰基氨基、氨基羰基、羧基、C1-4烷氧基羰基、胍基、芳基和Het；R1表示氫、C1-6烷基或芳基C1-6烷基；R2表示氫、C1-6烷基或芳基C1-6烷基；或者R1和R2可一起形成選自以下的雜環(huán)基；嗎啉基、吡咯烷基、哌啶基、高哌啶基、哌嗪基或苯鄰二甲酰亞胺-1-基；所述雜環(huán)基團(tuán)可由以下基團(tuán)任選取代C1-4烷基、芳基、Het、芳基C1-4烷基、Het C1-4烷基、羥基C1-4烷基、氨基、一-或二(C1-4烷基)氨基、氨基C1-4烷基、一-或二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、羧基、氨基羰基、C1-4烷氧基羰基、C1-4烷氧基羰基氨基或一-或二(C1-4烷基)氨基羰基；芳基表示苯基、萘基、1，2，3，4-四氫-萘基、茚基或2，3-二氫化茚基；所述芳基的每一個(gè)可由一或多個(gè)選自以下的取代基任選取代鹵素、C1-4烷基、羥基、C1-4烷氧基、硝基、氨基、三氟甲基、羥基C1-4烷基、C1-4烷氧基C1-4烷基、氨基C1-4烷基、一-或二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基；Het表示單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)基團(tuán)；所述單環(huán)雜環(huán)基團(tuán)選自哌嗪基、高哌嗪基、1，4-二氧雜環(huán)己烷基、嗎啉基、硫代嗎啉基、吡啶基、哌啶基、高哌啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、三嗪基、三唑基、吡喃基、四氫吡喃基、咪唑基、咪唑啉基、咪唑烷基、吡唑基、吡唑啉基、吡唑烷基、噻唑基、噻唑烷基、異噻唑基、噁唑基、噁唑烷基、異噁唑基、吡咯基、吡咯啉基、吡咯烷基、呋喃基、四氫呋喃基、噻吩基、thiolanyl、二氧戊環(huán)基；所述二環(huán)雜環(huán)基團(tuán)選自喹啉基、1，2，3，4-四氫喹啉基、異喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、2，3-二氮雜萘基、噌啉基、苯并二氫吡喃基、硫代苯并二氫吡喃基、2H-苯并吡喃基、1，4-苯并二氧雜環(huán)己烷基、吲哚基、異吲哚基、二氫吲哚基、吲唑基、嘌呤基、吡咯并吡啶基、呋喃并吡啶基、噻吩并吡啶基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并異噻唑基、苯并異噁唑基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基；其中所述單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)每一個(gè)可由一個(gè)或可能的多個(gè)選自以下的取代基任選取代鹵素、C1-4烷基、羥基、C1-4烷氧基、硝基、氨基、三氟甲基、羥基C1-4烷基、C1-4烷氧基-C1-4烷基、氨基C1-4烷基、一-或二(C1-4烷基)氨基C1-4烷基、芳基或芳基C1-4烷基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中-Alk-為下式的二價(jià)基團(tuán)， 其中用一個(gè)星號(hào)標(biāo)記的碳原子連接于氮原子而用兩個(gè)星號(hào)標(biāo)記的碳原子連接于氧原子。
3.權(quán)利要求1或2的化合物，其中D為式D1或D2的基團(tuán)。
4.權(quán)利要求1至3中任何一項(xiàng)的化合物，其中Y為由芳基任選取代的C1-6鏈烷二基。
5.權(quán)利要求1至4中任何一項(xiàng)的化合物，其中-A-B-為式(ii)基團(tuán)。
6.權(quán)利要求1至5中任何一項(xiàng)的化合物，其為立體異構(gòu)純的。
7.用作藥物的權(quán)利要求1至6中任何一項(xiàng)的化合物。
8.權(quán)利要求1至6中任何一項(xiàng)的化合物在制備治療真菌感染的藥物中的用途。
9.一種藥用組合物，其包含藥學(xué)上可接受的載體和作為活性成分的治療有效量的權(quán)利要求1至6中任何一項(xiàng)要求的化合物。
10.一種制備權(quán)利要求9要求的組合物的方法，其特征在于藥學(xué)上可接受的載體與治療有效量的權(quán)利要求1至6中任何一項(xiàng)要求的化合物緊密混合。
11.一種制備式(I)化合物的方法，其特征在于a)在反應(yīng)惰性溶劑中且在適宜的堿存在下，使式(II)中間體與式(III)中間體反應(yīng)， 其中W1為適宜的離去基團(tuán)且D、-A-B-、Alk、Y、R1和R2如在權(quán)利要求1中那樣定義；b)在反應(yīng)惰性溶劑中且在堿存在下，用式(V)中間體使式(IV)中間體N-烷基化， 其中W2為適宜的離去基團(tuán)且D、-A-B-、Alk、Y、R1和R2如在權(quán)利要求1中那樣定義；且假使R1和/或R2為氫時(shí)，用合適的保護(hù)性基團(tuán)P保護(hù)在中間體(V)中的伯胺或仲胺基團(tuán)，并在N-烷基化反應(yīng)后，能夠使用本領(lǐng)域已知的去保護(hù)技術(shù)，得到式(I)化合物；c)任選在適宜的堿存在下且任選在反應(yīng)惰性溶劑中，使式(VI)中間體與式(VII)中間體反應(yīng)， 其中W3為適宜的離去基團(tuán)且D、-A-B-、Alk、Y、R1和R2如在權(quán)利要求1中那樣定義；且假使R1和/或R2為氫時(shí)，用合適的保護(hù)性基團(tuán)P保護(hù)在中間體(VII)中的伯胺或仲胺基團(tuán)，并在O-烷基化反應(yīng)后，可使用本領(lǐng)域已知的去保護(hù)技術(shù)，得到式(I)化合物；并且，如果需要，按照本領(lǐng)域已知的轉(zhuǎn)化方法，將式(I)化合物相互轉(zhuǎn)化；并且另外，如果需要，通過用酸處理將式(I)化合物轉(zhuǎn)化為治療活性的非毒性酸加成鹽，或者反之，通過用堿處理將酸加成鹽形式轉(zhuǎn)化為游離堿；并且，如果需要，制備它們的立體化學(xué)異構(gòu)體形式或N-氧化物形式。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有廣譜抗真菌活性的式(I)化合物、其N－氧化物形式、鹽、季銨和立體化學(xué)異構(gòu)體形式,它們的制備、含有它們的組合物和它們用作藥物的用途,其中D表示用芳基和吡咯甲基取代的四氫呋喃或二氧戊環(huán);－A－B－表示任選取代的式－N=CH－、－CH=N－、－CH=CH－、－CH
文檔編號(hào)A61K31/496GK1349540SQ00807061
公開日2002年5月15日 申請(qǐng)日期2000年4月20日 優(yōu)先權(quán)日1999年5月4日
發(fā)明者L·梅爾佩, L·J·J·巴克斯 申請(qǐng)人:詹森藥業(yè)有限公司