專(zhuān)利名稱(chēng)：使用環(huán)脲和環(huán)酰胺衍生物的循環(huán)療法的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及作為黃體酮受體拮抗劑的化合物與孕激素、雌激素或兩者聯(lián)用的給藥方案。
背景技術(shù)：
細(xì)胞內(nèi)受體(IR)形成一類(lèi)結(jié)構(gòu)相關(guān)的基因調(diào)節(jié)劑，稱(chēng)為“配體依賴(lài)性轉(zhuǎn)錄因子”(R.M.Evans，Science，240，889，1988)。類(lèi)固醇受體家族是IR家族的一個(gè)亞類(lèi)，包括黃體酮受體(PR)、雌激素受體(ER)、雄激素受體(AR)、糖皮質(zhì)激素受體(GR)和鹽皮質(zhì)激素受體(MR)。
對(duì)PR而言，天然激素或配體是類(lèi)固醇黃體酮，但也制備了合成化合物如甲羥孕酮醋酸酯或左炔諾孕酮，它們可作為配體。一旦細(xì)胞周?chē)囊后w中存在配體，配體就通過(guò)被動(dòng)擴(kuò)散穿過(guò)膜，并與IR結(jié)合產(chǎn)生受體/配體復(fù)合物。這種復(fù)合物與細(xì)胞DNA中存在的特異性基因啟動(dòng)子結(jié)合。一旦結(jié)合于DNA，復(fù)合物就調(diào)節(jié)mRNA和該基因編碼的蛋白質(zhì)的產(chǎn)生。
將結(jié)合于IR且模擬天然激素作用的化合物稱(chēng)為促效劑，而抑制激素作用的化合物稱(chēng)為拮抗劑。
已知，PR促效劑(天然的和合成的)在婦女健康中起重要作用。PR促效劑可用于生育控制制劑，通常在存在ER促效劑時(shí)。ER促效劑可用于治療絕經(jīng)期綜合癥，但是伴有子宮增生的作用，這會(huì)導(dǎo)致患子宮癌危險(xiǎn)的上升。同時(shí)施用PR促效劑可降低或消除這種危險(xiǎn)。PR拮抗劑可用于避孕。在這種情況下，它們可以單獨(dú)給予(Ulmann等人，Ann.N.Y.Acad.Sci.，261，248，1995)，與可與PR促效劑聯(lián)用(Kekkonen等人，F(xiàn)ertility and Sterility，60，610，1993)或與部分ER拮抗劑(如他莫昔芬)聯(lián)用(WO96/19997 A1，1996年7月4日)。
PR拮抗劑可以用于治療激素依賴(lài)性乳腺癌(Horwitz等人，Horm.Cancer，283，出版商Birkhaeuser，Boston，Mass.，編者Vedeckis)，以及子宮癌和卵巢癌。PR拮抗劑還可用于治療非惡性慢性病如纖維瘤(Murphy等人，J.Clin.Endo.Metab.，76，513，1993)和子宮內(nèi)膜異位(Kettel等人，F(xiàn)ertilityand Sterility，56，402，1991)。
PR拮抗劑還可用于激素替代治療，與部分ER拮抗劑(如他莫昔芬)聯(lián)用治療絕經(jīng)后的患者(美國(guó)專(zhuān)利5719136)。
已顯示，在激素依賴(lài)性前列腺癌模型中，PR拮抗劑(如米非司酮和奧那司酮(onapristone))是有效的，表明它們可用于治療男性的這類(lèi)疾病(Michna等人，Ann.N.Y.Acad.Sci.，761，224，1995)。
Jones等人(美國(guó)專(zhuān)利No.5,688,810)描述了PR拮抗劑二氫喹啉1。 Jones等人描述了作為PR配體的烯醇醚2(美國(guó)專(zhuān)利No.5,693,646)。 Jones等人描述了作為PR配體的化合物3(美國(guó)專(zhuān)利No.5,696,127)。
Zhi等人描述了作為PR拮抗劑的內(nèi)酯4，5和6(J.Med.Chem.，41，291，1998)。 Zhi等人描述了作為PR拮抗劑的醚7(J.Med.Chem.，41，291，1998)。 Combs等人公開(kāi)了作為PR配體的酰胺8(J.Med.Chem.，38，4880，1995)。 Perlman等人描述了作為PR配體的維生素D類(lèi)似物9(Tet.Letters，35，2295，1994)。 Hamann等人描述了PR拮抗劑10(Ann.N.Y.Acad.Sci.，761，383，1995)。 Chen等人描述了PR拮抗劑11(Chen等人，POI-37，16thInt.Cong.Het.Chem.，Montana，1997)。 Kurihari等人描述了PR配體12(J.Antibiotics，50，360，1997)。
Christ等人的專(zhuān)利(WO9814436)要求保護(hù)化合物A等環(huán)酰胺(cyclo amide)，它們可作為HIV逆轉(zhuǎn)錄酶的抑制劑。其他現(xiàn)有技術(shù)包括Turck等人(Tetrahedron，49(3)，599-606(1993).)的噠嗪環(huán)酰胺，如化合物B，以及Canonne等人(J.heterocyclic Chem.26，113(1989).)的化合物C。在Turck和Canonne的出版物中沒(méi)有報(bào)道活性數(shù)據(jù)。 對(duì)于環(huán)酰胺，Singh等人和Kumar等人(Singh等人J.Med.Chem.37(2)，248-254(1994)；Kumar等人J.Org.Chem.57(25)，6995-6998(1992).)公開(kāi)了諸如D和E之類(lèi)的化合物，它們被聲稱(chēng)是cAMP PDE III抑制劑。 美國(guó)專(zhuān)利5,521,166(Grubb)講授了包括抗孕激素和孕激素的循環(huán)激素療法(cyclophasic hormonal regimens)，其中在抗孕激素交替地存在或不存在時(shí)，施用孕激素。還提供了使用雌激素2-4日來(lái)預(yù)防穿破性出血的公開(kāi)療法。
發(fā)明詳述本發(fā)明提供了利用抗孕藥聯(lián)合一種或多種促孕藥的組合治療和劑量方案。本發(fā)明還提供了將這些抗孕藥和促孕藥與雌激素(如乙炔雌二醇)聯(lián)用的治療方法和劑量方案。
可將這些療法和組合給予哺乳動(dòng)物，以引起避孕或治療和/或預(yù)防繼發(fā)性閉經(jīng)、功能失調(diào)性出血、子宮平滑肌瘤、子宮內(nèi)膜異位；多囊性卵巢綜合征，子宮粘膜、卵巢、乳腺、結(jié)腸、前列腺的癌和腺癌。本發(fā)明的其他用途包括刺激食物攝取。本文用于治療和/或預(yù)防上述情況或疾病的用途包括，根據(jù)本發(fā)明連續(xù)施用或定期不連續(xù)施用，使得有效劑量最小或副作用或周期性經(jīng)血最少。
本發(fā)明的避孕用途包括，將抗孕素與雌激素或孕激素或兩者聯(lián)用，一起施給(優(yōu)選口服)育齡婦女。這些給藥方案宜連續(xù)進(jìn)行28天，在該周期的最終期間不施用孕激素、雌激素或抗孕素。
在周期頭14-24日，這些組合中的孕激素可單獨(dú)給予或聯(lián)合雌激素給予，給予的孕激素劑量范圍在促孕活性上相當(dāng)于每日約35-150微克左炔諾孕酮，較佳的相當(dāng)于每日約35-100微克左炔諾孕酮。然后在第14-24日之間的周期日開(kāi)始單獨(dú)給予抗孕素或聯(lián)合雌激素給予抗孕激素，持續(xù)1-11日。這些組合中的抗孕激素可以每日約2-50微克的劑量給予，雌激素可以每日約10-35微克的劑量給予。在口服給藥中，含有28片片劑的包裝或藥盒將包括在不給予抗孕激素或孕激素或雌激素的那些日子所給予的安慰劑片劑。
在本發(fā)明的一個(gè)較佳實(shí)施方案中，可在28日周期的頭18-21日單獨(dú)或聯(lián)合雌激素給予本發(fā)明的孕激素，然后單獨(dú)或聯(lián)合雌激素給予抗孕激素，持續(xù)1-7日。
本發(fā)明的組合物和制劑中使用的雌激素優(yōu)選是乙炔雌二醇。
本發(fā)明中有用的促孕藥包括，但不限于左炔諾孕酮、炔諾孕酮、去氧孕烯、3-酮去氧孕烯、炔諾酮、孕二烯酮、乙酸炔諾酮、諾孕酯、奧沙孕酮(osaterone)、乙酸環(huán)丙孕酮、曲美孕酮(trimegestone)、地諾孕素、屈螺利酮(drospirenone)、諾美孕酮或(17-脫乙?；?諾孕酯。用于本發(fā)明組合中的較佳孕激素是左炔諾孕酮、孕二烯酮和曲美孕酮。
本發(fā)明的在28日周期內(nèi)經(jīng)口給藥的方案例子包括，在前21日單獨(dú)給予促孕藥，其日劑量在促孕活性上相當(dāng)于約35-100微克的左炔諾孕酮。然后在第22-24日以日劑量約為2-50毫克給予本發(fā)明的抗孕激素化合物，然后在第25-28日不給藥或給予安慰劑。最佳的是，將日劑量的各有關(guān)活性組分合并成組合的單個(gè)日劑量單位中，28日周期每日一個(gè)單位，共28個(gè)日單位。
在另一方案中，前21日可共同給予促孕藥(日劑量在促孕活性上相當(dāng)于約35-150微克左炔諾孕酮，較佳的是相當(dāng)于約35-100微克左炔諾孕酮)和雌激素(如乙炔雌二醇，日劑量范圍約10-35微克)。在這之后可如上所述在第22-24日給予日劑量約2-50毫克的抗孕激素，然后在第25-28日不給藥或給予安慰劑。
本發(fā)明范圍中的其他方案包括在第1-21日聯(lián)合給予促孕藥和雌激素，所述促孕藥宜為左炔諾孕酮，其日劑量的促孕活性相當(dāng)于約35-100微克左炔諾孕酮，所述雌激素(如乙炔雌二醇)的日劑量范圍約為10-35微克。然后，在第22-24日聯(lián)合給予抗孕激素(2-50毫克/日)和雌激素(如乙炔雌二醇，其日劑量是約10-35微克)。在第25-28日，不給藥或給予安慰劑。
本發(fā)明還包括設(shè)計(jì)用于本發(fā)明所述方案的藥物制劑的藥盒或包裝。這些藥盒宜設(shè)計(jì)成用于在28日周期內(nèi)每日經(jīng)口給藥，較佳的是每日經(jīng)口給藥一次，并組織起來(lái)，以表明在28日周期的每日要服用的單份口服制劑或口服制劑的組合。較佳的是，各藥盒包括在指定的每日要服用的口服片劑，較佳的是一片口服片劑將含有標(biāo)明的各種組合的日劑量。
根據(jù)上述方案，一種28日藥盒可含有a)用于第一階段的14-21個(gè)日劑量單位的促孕藥，其促孕活性相當(dāng)于約35-150微克左炔諾孕酮，較佳的是促孕活性相當(dāng)于約35-100微克左炔諾孕酮；b)用于第二階段的1-11個(gè)日劑量單位的本發(fā)明抗孕激素化合物，各日劑量單位含有日劑量約為2-50毫克的抗孕激素化合物；和c)可任選的，用于第三階段的周期剩余日的藥學(xué)上可接受的口服安慰劑，其中未給予抗孕激素、孕激素或雌激素。
該藥盒的較佳實(shí)施方案可包括a)用于第一階段的21個(gè)日劑量單位的促孕藥，其促孕活性相當(dāng)于約35-150微克左炔諾孕酮，較佳的是促孕活性相當(dāng)于約35-100微克左炔諾孕酮；b)用于第二階段第22-24日的3個(gè)日劑量的本發(fā)明抗孕激素化合物，各日劑量單位含有日劑量約2-50毫克的抗孕激素化合物；和c)可任選的用于第三階段的4個(gè)日劑量單位的藥學(xué)上可接受的口服安慰劑，用于第25-28日。
本發(fā)明另一種28日周期包裝方案或藥盒包含a)用于第一階段的18-21個(gè)含促孕藥和雌激素的日劑量單位，促孕藥的促孕活性相當(dāng)于約35-150微克左炔諾孕酮，較佳的是促孕活性相當(dāng)于約35-100微克左炔諾孕酮，作為雌激素的乙炔雌二醇的日劑量范圍約為10-35微克；和b)用于第二階段的有1-7個(gè)日劑量約為2-50毫克的本發(fā)明抗孕激素化合物的日劑量單位；和c)可任選的，用于28日周期剩余0-9日中每日的藥學(xué)上可接受的口服安慰劑，其中未給予抗孕激素、孕激素或雌激素。
上述藥盒的一個(gè)較佳實(shí)施方案可包括a)用于第一階段的21個(gè)日劑量單位的促孕藥和雌激素，促孕藥的促孕活性相當(dāng)于約35-150微克左炔諾孕酮，較佳的是相當(dāng)于約35-100微克左炔諾孕酮，作為雌激素的乙炔雌二醇日劑量范圍約為10-35微克；和b)用于第二階段第22-24日的3個(gè)日劑量單位的抗孕激素，其每日給予劑量約為2-50毫克；和c)可任選的，用于第三階段第25-28日中每日的4個(gè)日劑量單位的藥學(xué)上可接受的口服安慰劑。
本發(fā)明另一種28日包裝方案或藥盒包含a)用于第一階段的18-21個(gè)日劑量單位，各單位含有本發(fā)明的促孕藥和乙炔雌二醇，促孕藥的日劑量在促孕活性上相當(dāng)于約35-150微克左炔諾孕酮，較佳的是相當(dāng)于約35-100微克左炔諾孕酮，乙炔雌二醇日劑量范圍約為10-35微克；和b)用于第二階段的1-7個(gè)日劑量單位，各日劑量單位含有濃度約2-50毫克的本發(fā)明抗孕激素化合物和濃度約為10-35微克的乙炔雌二醇；和c)可任選的，用于28日周期剩余0-9日中每日的藥學(xué)上可接受的口服安慰劑，其中未給予促孕激素、雌激素或抗孕激素。
上述包裝或藥盒的一個(gè)較佳實(shí)施方案包含a)用于第一階段的21個(gè)日劑量單位，各單位含有本發(fā)明的促孕藥和乙炔雌二醇，促孕藥的日劑量相當(dāng)于約35-150微克，優(yōu)選約35-100微克左炔諾孕酮的促孕活性，乙炔雌二醇的日劑量范圍是約10-35微克；和b)用于第二階段第22-24日的3個(gè)日劑量單位，各劑量單位含有濃度約2-50毫克的本發(fā)明抗孕激素以及濃度約10-35微克的乙炔雌二醇；和c)可任選的，用于第三階段第25-28日中每日的4個(gè)日劑量單位的藥學(xué)上可接受的口服安慰劑。
在上述各方案和藥盒中，較佳的是，各方案中藥物活性成分的日劑量在每個(gè)特定給藥階段中是固定的。還應(yīng)理解，所述的日劑量單位以所述順序給予，第一階段后依次是第二和第三階段。為了與各方案一致，另外較佳的是藥盒還含有在周期最后幾日使用的所述安慰劑。另外，每個(gè)包裝或藥盒宜有藥學(xué)上可接受的包裝，它具有對(duì)應(yīng)于28日周期每日的標(biāo)志，如本領(lǐng)域內(nèi)已知的帶標(biāo)記的泡罩包裝或帶刻度的給藥器包裝。
在該文中，術(shù)語(yǔ)抗孕藥、抗孕激素和黃體酮受體拮抗劑應(yīng)理解成同義詞。類(lèi)似的，孕激素、促孕藥和黃體酮受體促效劑理解成具有相同活性的化合物。
這些劑量方案可作調(diào)節(jié)，以提供最佳的治療反應(yīng)。例如，根據(jù)治療情況，可每日以幾個(gè)分開(kāi)的劑量給予每種成分，或按比例增加或減少劑量。在本文的描述中，所謂“日劑量單位”還可包括在周期每日過(guò)程中分開(kāi)給予的劑量單位。
可用作本文所述藥盒、方法和方案中的抗孕藥的本發(fā)明的化合物，是具有式1的那些化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 式中A，B和D是N或CH，條件是A，B和D不能都是CH；R1和R2是選自下組的獨(dú)立取代基H，C1-C6烷基，取代的C1-C6烷基，C2-C6鏈烯基，取代的C2-C6鏈烯基，C2-C6炔基，取代的C2-C6炔基，C3-C8環(huán)烷基，取代的C3-C8環(huán)烷基，芳基，取代的芳基，雜環(huán)，取代的雜環(huán)，CORA，或NRBCORA；或R1和R2稠合形成選自a)，b)或c)的螺環(huán)，每個(gè)螺環(huán)可任選地被1-3個(gè)C1-C3烷基取代a)3-8元螺環(huán)烷基環(huán)；b)3-8元螺環(huán)鏈烯基環(huán)；或c)任選取代的3-8元雜環(huán)，它含有1-3個(gè)選自下組的雜原子O、S和N；a)，b)和c)的螺環(huán)可任選地被選自下組的1-4個(gè)基團(tuán)取代氟，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，C1-C6烷硫基，-CF3，-OH，-CN，NH2，-NH(C1-C6烷基)，或-N(C1-C6烷基)2；RA是H，C1-C3烷基，取代的C1-C3烷基，芳基，取代的芳基，C1-C3烷氧基，取代的C1-C3烷氧基，C1-C3氨烷基，或取代的C1-C3氨烷基，RB是H，C1-C3烷基，或取代的C1-C3烷基，R3是H，OH，NH2，C1-C6烷基，取代的C1-C6烷基，C3-C6鏈烯基，取代的C1-C6鏈烯基，或CORC，RC是H，C1-C3烷基，取代的C1-C3烷基，芳基，取代的芳基，C1-C3烷氧基，取代的C1-C3烷氧基，C1-C3氨烷基，或取代的C1-C3氨烷基，R4是如下所示含有取代基X、Y、和Z的三取代苯環(huán) X選自下組鹵素，CN，C1-C3烷基，取代的C1-C3烷基，C1-C3烷氧基，取代的C1-C3烷氧基，C1-C3硫代烷氧基，取代的C1-C3硫代烷氧基，氨基，C1-C3氨烷基，取代的C1-C3氨烷基，NO2，C1-C3全氟烷基，含1-3個(gè)雜原子的5或6元環(huán)，CORD，OCORD，或NRECORD；RD是H，C1-C3烷基，取代的C1-C3烷基，芳基，取代的芳基，C1-C3烷氧基，取代的C1-C3烷氧基，C1-C3氨烷基，或取代的C1-C3氨烷基；RE是H，C1-C3烷基，或取代的C1-C3烷基；Y和Z是選自下組的獨(dú)立取代基H，鹵素，CN，NO2，C1-C3烷氧基，C1-C3烷基，或C1-C3硫代烷氧基；或者R4是含1、2或3個(gè)選自下組的雜原子的5或6元環(huán)O，S，SO，SO2或NR5，并且含1-2個(gè)選自下組的獨(dú)立取代基H，鹵素，CN，NO2，和C1-C3烷基，C1-C3烷氧基，C1-C3氨烷基，CORF，或NRGCORF；RF是H，C1-C3烷基，取代的C1-C3烷基，芳基，取代的芳基，C1-C3烷氧基，取代的C1-C3烷氧基，C1-C3氨烷基，或取代的C1-C3氨烷基；RG是H，C1-C3烷基，或取代的C1-C3烷基；R5是H或C1-C3烷基；W是O或化學(xué)鍵。
當(dāng)W是化學(xué)鍵時(shí)，應(yīng)理解，式I以如下形式存在 優(yōu)選抗孕激素化合物是那些下式化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽 式中A，B和D是N或CH，條件是A，B和D不能都是CH；R1是H，C1-C6烷基，取代的C1-C6烷基，C3-C8環(huán)烷基，取代的C3-C8環(huán)烷基，芳基，取代的芳基，雜環(huán)，取代的雜環(huán)，CORA，或NRBCORA；R2是H，C1-C6烷基，取代的C1-C6烷基，C2-C6鏈烯基，取代的C2-C6鏈烯基，C3-C8環(huán)烷基，取代的C3-C8環(huán)烷基，芳基，取代的芳基，雜環(huán)，取代的雜環(huán)，CORA，或NRBCORA；或者R1和R2稠合形成如上所述的任選取代的3-8元螺環(huán)烷基，鏈烯基或雜環(huán)；RA是H，C1-C3烷基，取代的C1-C3烷基，芳基，取代的芳基，C1-C3烷氧基，取代的C1-C3烷氧基，C1-C3氨烷基，或取代的C1-C3氨烷基；RB是H，C1-C3烷基，或取代的C1-C3烷基，R3是H，OH，NH2，C1-C6烷基，取代的C1-C6烷基，C3-C6鏈烯基，取代的C1-C6鏈烯基，或CORC；RC是H，C1-C4烷基，取代的C1-C4烷基，芳基，取代的芳基，C1-C4烷氧基，取代的C1-C4烷氧基，C1-C4氨烷基，或取代的C1-C4氨烷基；R4是如下所示的含取代基X、Y和Z的三取代苯環(huán) X選自鹵素，CN，C1-C3烷基，取代的C1-C3烷基，C1-C3烷氧基，取代的C1-C3烷氧基，C1-C3硫代烷氧基，取代的C1-C3硫代烷氧基，C1-C3氨烷基，取代的C1-C3氨烷基，NO2，C1-C3全氟烷基，含1-3個(gè)雜原子的5元雜環(huán)，CORD，OCORD，或NRECORD；RD是H，C1-C3烷基，取代的C1-C3烷基，芳基，取代的芳基，C1-C3烷氧基，取代的C1-C3烷氧基，C1-C3氨烷基，或取代的C1-C3氨烷基；
RE是H，C1-C3烷基，或取代的C1-C3烷基；Y和Z是選自下組的獨(dú)立取代基H，鹵素，CN，NO2，C1-C3烷氧基，C1-C3烷基，或C1-C3硫代烷氧基；或者R4是含1、2或3個(gè)選自下組的雜原子的5或6元環(huán)O，S，SO，SO2或NR5，并且含1-2個(gè)選自下組的獨(dú)立取代基H，鹵素，CN，NO2，和C1-C3烷基，或C1-C3烷氧基；R5是H或C1-C3烷基；W是O或化學(xué)鍵。
另外，更優(yōu)選的抗孕激素化合物是那些下式化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 式中A，B和D是N或CH，條件是A，B和D不能都是CH；R1＝R2并選自下組C1-C3烷基，取代的C1-C3烷基，或通過(guò)稠合R1和R2形成3-6元螺環(huán)所構(gòu)成的螺環(huán)烷基；R3是H，OH，NH2，C1-C6烷基，取代的C1-C6烷基，或CORC；RC是H，C1-C4烷基，或C1-C4烷氧基；R4是如下所示含取代基X和Y的二取代苯環(huán) X選自下組鹵素，CN，C1-C3烷氧基，C1-C3烷基，NO2，C1-C3全氟烷基，含1-3個(gè)雜原子的5元雜環(huán)，或C1-C3硫代烷氧基；Y是在4’或5’位上的選自下組的取代基H，鹵素，CN，NO2，C1-C3烷氧基，C1-C4烷基，或C1-C3硫代烷氧基；或者R4是具有如下結(jié)構(gòu)的5元環(huán) U是O，S，或NR5；R5是H，或C1-C3烷基，或C1-C4CO2烷基；X’選自鹵素，CN，NO2，C1-C3烷基，或C1-C3烷氧基；Y’選自H和C1-C4烷基；或者R4是具有如下結(jié)構(gòu)的6元環(huán) X1是N或CX2；X2是鹵素，CN或NO2。更優(yōu)選的抗孕激素化合物包括那些下式化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽 式中，A，B和D是N或CH，條件是A，B和D不能都是CH；R1＝R2并選自CH3和通過(guò)稠合R1和R2形成6元螺環(huán)所構(gòu)成的螺環(huán)烷基；R3是H，OH，NH2，CH3，取代的甲基，或CORC；RC是H，C1-C3烷基，或C1-C4烷氧基；R4是如下所示含取代基X和Y的二取代苯環(huán) X是鹵素，CN，甲氧基，NO2，或2-噻唑；Y是在4’或5’位且選自下組的取代基H和F；或者R4是具有如下結(jié)構(gòu)的5元環(huán) U是O，S，或NH；X’是鹵素，CN，或NO2；Y’是H或C1-C4烷基；W是O或化學(xué)鍵。
本發(fā)明的抗孕激素化合物可含有不對(duì)稱(chēng)碳原子，且本發(fā)明的一些化合物可含有一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱(chēng)中心，并因此可以有光學(xué)異構(gòu)體和非對(duì)映體。雖然式I并未以立體化學(xué)顯示，但本發(fā)明包括這些光學(xué)異構(gòu)體和非對(duì)映體；以及外消旋的和拆解的對(duì)映體純R和S的立體異構(gòu)體；以及R和S立體異構(gòu)體的其他混合物和它們藥學(xué)上可接受的鹽。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“烷基”指直鏈或支鏈飽和的、含有1-8個(gè)碳原子(較佳地1-6個(gè)碳原子)的脂族烴類(lèi)基團(tuán)；“鏈烯基”包括含有至少一個(gè)碳碳雙鍵和2-8個(gè)碳原子(較佳地2-6個(gè)碳原子)的直鏈和支鏈烴基；“炔基”包括含有至少一個(gè)碳碳三鍵和2-8個(gè)碳原子(較佳地2-6個(gè)碳原子)的直鏈和支鏈烴基。
術(shù)語(yǔ)“取代的烷基”、“取代的鏈烯基”和“取代的炔基”指被一個(gè)或多個(gè)選自下組的取代基所取代的上述烷基、鏈烯基和炔基鹵素、CN、OH、NO2、氨基、芳基、雜環(huán)、取代的芳基、取代的雜環(huán)、烷氧基、芳氧基、取代的烷氧基、烷基羰基、烷基羧基、烷基氨基、芳硫基。這些取代基可連接于烷基、鏈烯基或炔基基團(tuán)的任何碳原子上，但條件是這種連接構(gòu)成穩(wěn)定的化學(xué)結(jié)構(gòu)部分。
本文的術(shù)語(yǔ)“芳基”指芳族體系，可以是單環(huán)或原本稠合的或連接在一起的多芳環(huán)，從而使至少一部分稠合或連接的環(huán)形成共軛的芳系。芳基基團(tuán)包括(但不限制于)苯基、萘基、聯(lián)苯基、蒽基、四氫萘基、菲基。
術(shù)語(yǔ)“取代的芳基”指被1-4個(gè)選自下組的基團(tuán)所取代的上述芳基鹵素、CN、OH、NO2、氨基、烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、炔基、烷氧基、芳氧基、取代的烷氧基、烷基羰基、烷基羧基、烷基氨基或芳硫基。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)”指穩(wěn)定的4-7元單環(huán)或穩(wěn)定的多環(huán)雜環(huán)，該雜環(huán)可以是飽和的、部分不飽和的或不飽和的，且由碳原子和選自以下的1-4個(gè)雜原子構(gòu)成N、O和S原子。N和S原子可以被氧化。雜環(huán)還可包括任何多環(huán)，其中任一上述雜環(huán)可稠合于芳環(huán)。該雜環(huán)還可連接于任何雜原子或碳原子，但條件是所生成的結(jié)構(gòu)必須是化學(xué)穩(wěn)定的。這些雜環(huán)基團(tuán)包括例如，四氫呋喃、哌啶基、哌嗪基、2-氧代哌啶基、吖庚因基、吡咯烷基、咪唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、噁唑基、異噁唑基、嗎啉基、吲哚基、喹啉基、噻吩基、呋喃基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、硫代嗎啉基、硫代嗎啉基亞砜和異喹啉基。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“取代的雜環(huán)”指被以下1-4個(gè)取代基所取代的上述雜環(huán)鹵素、CN、OH、NO2、氨基、烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、取代的鏈烯基、炔基、烷氧基、芳氧基、取代的烷氧基、烷基羰基、烷基羧基、烷基氨基、或芳硫基。本文所用的術(shù)語(yǔ)“烷氧基”指OR基團(tuán)，其中R是烷基或取代的烷基。本文所用的術(shù)語(yǔ)“芳氧基”指OR基團(tuán)，其中R是芳基或取代的芳基。本文所用的術(shù)語(yǔ)“烷基羰基”指RCO基團(tuán)，其中R是烷基或取代的烷基。本文所用的術(shù)語(yǔ)“烷基羧基”指COOR基團(tuán)，其中R是烷基或取代的烷基。術(shù)語(yǔ)“氨烷基”指仲胺或叔胺，其中含有1-8個(gè)碳原子的烷基或取代的烷基可以是相同或不同的，且連接點(diǎn)是在氮原子上?！胞u素”指Cl、Br、F或I。
本發(fā)明的抗孕激素化合物可以以由藥學(xué)上或生理學(xué)可接受的酸或堿衍生的鹽形式使用。這些鹽包括(但不限于)與如下無(wú)機(jī)酸形成的鹽如鹽酸、硫酸、硝酸、磷酸，以及與有機(jī)酸形成的鹽，而有機(jī)酸則指乙酸、草酸、丁二酸和馬來(lái)酸。其他鹽包括與堿金屬或堿土金屬(如鈉、鉀、鈣或鎂)形成的鹽，以酯、氨基甲酸酯或其他常規(guī)的“前體藥物”的形式(當(dāng)以這種形式給藥時(shí)，在體內(nèi)可轉(zhuǎn)化成活性部分)。
這些方法可用于避孕，或者治療或預(yù)防繼發(fā)閉經(jīng)，功能失調(diào)性出血、子宮平滑肌瘤、子宮內(nèi)膜異位；多囊性卵巢綜合癥，子宮粘膜、卵巢、乳腺、結(jié)腸、前列腺的癌和腺癌，或者減少周期性經(jīng)血的副作用。本發(fā)明的其他用途包括促進(jìn)攝食。
當(dāng)化合物用于上述用途時(shí)，它們可與一種或多種藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑混合，如溶劑、稀釋劑等，而且可以用如下形式口服給藥片劑、膠囊、可分散的粉末、顆?；驊腋∫?含有如約0.05-5％懸浮劑)、糖漿(含有如約10-50％糖)、和酏劑(含有約20-50％乙醇)，或者以無(wú)菌可注射溶液或懸浮液形式(在等滲介質(zhì)中含有約0.05-5％懸浮劑)進(jìn)行非腸胃給藥。例如，這些藥物制劑可含有與載體混合的約25-90％，通常約為5％-60％(重量)的活性成分。
本方法和方案中這些活性成分可通過(guò)口服以及靜脈內(nèi)、肌內(nèi)或皮下途徑給藥。固態(tài)載體包括淀粉、乳糖、磷酸二鈣、微晶纖維素、蔗糖和白陶土，而液態(tài)載體包括無(wú)菌水、聚乙二醇、非離子型表面活性劑和食用油(如玉米油、花生油和芝麻油)，只要適合活性成分的特性和所需的特定給藥方式。在制備藥物組合物中通常使用的佐劑也可有利地被包括，例如調(diào)味劑、色素、防腐劑和抗氧化劑，如維生素E、維生素C、BHT和BHA。
從易于制備和給藥的立場(chǎng)看，優(yōu)選的藥物組合物是固態(tài)組合物，尤其是片劑和固體填充或液體填充的膠囊?；衔锏目诜o藥是優(yōu)選的。
這些活性化合物也可腸胃外或腹腔內(nèi)給藥。也可在適當(dāng)混合有表面活性劑(如羥丙基纖維素)的水中制備這些活性化合物(作為游離堿或藥學(xué)上可接受的鹽)的溶液或懸浮液。還可在甘油、液體、聚乙二醇及其在油中的混合物中制備分散液。在常規(guī)儲(chǔ)存和使用條件下，這些制劑中含有防腐劑以防止微生物生長(zhǎng)。
適應(yīng)于注射的藥物形式包括無(wú)菌水溶液或分散液和無(wú)菌粉(用于臨時(shí)制備無(wú)菌注射溶液或分散液)。在所有情況中，這些形式必須是無(wú)菌的且必須是流體以易于注射器排出流體。在制造和儲(chǔ)存條件下必須是穩(wěn)定的，且必須能防止微生物(如細(xì)菌和真菌)的污染影響。載體可以是溶劑或分散介質(zhì)，其中含有如水、醇(如甘油、丙二醇和液態(tài)聚乙二醇)、它們的適當(dāng)混合物和植物油。
本發(fā)明的抗孕激素化合物可用下列所示流程進(jìn)行制備如流程I所示，通?？赏ㄟ^(guò)利用合適的偶聯(lián)反應(yīng)作為最后步驟來(lái)制備本發(fā)明的抗孕激素化合物。在惰性氣氛如氬氣或氮?dú)庵校?78至室溫下，適當(dāng)取代的鄰-氨基酸或其衍生物，如乙酯(x＝Br，I，Cl，或潛在的偶聯(lián)前體，如烷氧基，它能轉(zhuǎn)化為偶聯(lián)反應(yīng)中合適的OTf基團(tuán))，用合適的有機(jī)金屬試劑(如Grignard試劑)，在合適的非質(zhì)子性溶劑(nonprotic solvents)(包括但并不限于THF或乙醚)中進(jìn)行處理，形成鄰-氨基甲醇2。使甲醇2閉環(huán)以形成噁嗪-2-酮3通常是用縮合劑如羰二咪唑、光氣、碳酸二甲酯或碳酸二乙酯，在合適的非質(zhì)子性溶劑(如THF)，在室溫至65℃下實(shí)現(xiàn)。用各種偶聯(lián)反應(yīng)(包括Suzuki反應(yīng)和Stille反應(yīng)等)，可實(shí)現(xiàn)噁嗪-2-酮3的芳基化，從而形成化合物4。這些反應(yīng)通常在過(guò)渡金屬催化劑存在下進(jìn)行，例如，通常與膦配基(如Ph3P，1，1’-雙(二苯膦基)二茂鐵，1，2-雙(二苯膦基)乙烷)形成的鈀和鎳復(fù)合物，或諸如乙酸鈀之類(lèi)的鈀鹽。在這種催化條件下，適當(dāng)取代的親核試劑(如芳基硼酸、芳基錫烷或芳基鋅化合物)與噁嗪酮3偶聯(lián)，生成化合物4。如果反應(yīng)中需要堿，通常使用的堿包括(但不限制于)碳酸氫鈉、碳酸鈉、磷酸鉀、碳酸鋇、乙酸鉀或氟化銫。在這些反應(yīng)中最常用的溶劑包括苯、DMF、異丙醇、乙醇、DME、乙醚、丙酮或任一上述溶劑與水的混合物。通常在惰性氣氛(如氮?dú)饣驓鍤?中，在從室溫到95℃的溫度下，進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng)。噁嗪酮3可被轉(zhuǎn)變成親核試劑如硼酸(boronicacid)，后者與合適的親電試劑(如芳基溴或芳基碘)采用上述的偶聯(lián)反應(yīng)條件偶聯(lián)可得到6。 在-78℃至室溫，在惰性氣氛(如氬氣或氮?dú)?下，通過(guò)在非質(zhì)子性溶劑(如THF或乙醚)中用有機(jī)金屬試劑(如正丁基鋰)處理3，然后用合適的親電試劑(如硼酸三甲酯、硼酸三異丙酯、雙六烷基錫(bishexalkyl tin)試劑或氯化鋅)淬滅反應(yīng)溶液，可將3轉(zhuǎn)變?yōu)?。在惰性氣氛(如氬氣或氮?dú)?下，在溶劑沸點(diǎn)溫度下，通過(guò)用在合適非質(zhì)子性溶劑(如甲苯、氯苯、苯或二甲苯)中的合適硫試劑如P2S5或Lawesson試劑處理6，可以輕易地將氨基甲酸酯6轉(zhuǎn)變?yōu)榱虼被姿狨?。
流程II描述了在4位具有兩個(gè)不同取代基的噁嗪酮的制備程序。當(dāng)在質(zhì)子性溶劑(如乙醇或異丙醇)中，在惰性氣氛(如氬氣或氮?dú)?和回流溫度下，用N-，O-二甲基羥基胺鹽酸鹽處理時(shí)，可從合適取代的N-羧氨基苯甲酸酐制得Weinreb酰胺9。將酰胺9與芳基親電子試劑如芳基硼酸或芳基錫烷偶聯(lián)以形成10，可以通過(guò)采用典型的偶聯(lián)反應(yīng)(如Suzuki，Stille偶聯(lián)程序)，按與制備噁嗪酮4中所述的類(lèi)似方式進(jìn)行。在惰性氣氛(如氬氣或氮?dú)?下，在-78℃到室溫的溫度范圍，用有機(jī)金屬化合物(如烷基鋰、炔基鋰、芳基鋰，或它們的Grignard對(duì)應(yīng)物)，在非質(zhì)子性溶劑(如THF或乙醚)中處理Weinreb酰胺10，生成氨基酮11。在惰性氣氛(如氬氣或氮?dú)?下，-78℃至室溫的溫度范圍，在非質(zhì)子性溶劑(如THF或乙醚)中，用有機(jī)金屬試劑(如烷基、炔基或芳基Grignard化合物)處理10，可將酮11轉(zhuǎn)化成甲醇12。也可在惰性氣氛下，0℃至溶劑沸點(diǎn)的溫度范圍，在合適的溶劑(如THF、乙醚或無(wú)水乙醇)中，用適當(dāng)?shù)倪€原劑(如氫化鋁鋰、硼氫化鈉)將11的酮基團(tuán)還原成12的甲醇部分，從而將酮11轉(zhuǎn)化成甲醇12。可用縮合劑如羰二咪唑、光氣、碳酸二甲酯或碳酸二乙酯，在合適的非質(zhì)子性溶劑(如THF)，在室溫至65℃下，使甲醇12閉環(huán)以形成本發(fā)明化合物13。在惰性氣氛(如氬氣或氮?dú)?下，在溶劑沸點(diǎn)溫度下，通過(guò)用在合適非質(zhì)子性溶劑(如甲苯、氯苯、苯或二甲苯)中的合適硫試劑如P2S5或Lawesson試劑處理13，可以輕易地將氨基甲酸酯13轉(zhuǎn)變?yōu)榱虼被姿狨?4。
流程II 或者，如流程III所示，還可在惰性氣氛(如氬氣或氮?dú)?下，-78℃至室溫的溫度范圍，在合適溶劑(THF或乙醚)中，用有機(jī)金屬化合物(如有機(jī)鋰試劑或Gringard試劑)處理鄰-氨基腈16，從而制得鄰氨基酮11。按與制備Weinreb酰胺10相似的方式，用合適的偶聯(lián)反應(yīng)(如Stille或Suzuki流程)，從適當(dāng)取代的腈(如溴代芐腈15)可輕易制得腈16。 下列不起限定作用的實(shí)施例闡述了用于本發(fā)明的化合物的制備。
實(shí)施例12-氨基-5-溴-3-吡啶羧酸在氮?dú)夂褪覝叵?，?-氨基-煙酸(10g，72.5mmol)的乙酸(70mL)溶液滴加溴(9.8mL，79.8mmol)。反應(yīng)結(jié)束后，真空去除溶劑，殘留物與乙醚一起研磨，過(guò)濾收集，得到2-氨基-5-溴-3-吡啶羧酸為黃色固體(15.7g，99％)mp 272℃，(分解的)；1H-NMR(DMSO-d6)δ8.8-7.8(bs，2H)，8.44(d，1H，J＝2.48Hz)，8.34(d，1H，J＝2.48Hz)；MS(EI)m/z 216/218([M+]+，100％)實(shí)施例22-(2-氨基-5-溴-吡啶-3-基)-丙-2-醇在氮?dú)庀拢?℃，向2-氨基-5-溴-3-吡啶羧酸(5g，23mmol)的THF(70mL)溶液，加入溴化甲基鎂(13.7g，115mmol)。加入后，在65℃加熱反應(yīng)混合物12小時(shí)，冷卻至室溫，用飽和氯化銨水溶液淬滅。加入乙酸乙酯，分離有機(jī)層，用硫酸鈉干燥并濃縮，殘留物通過(guò)快速色譜法純化，得到2-(2-氨基-5-溴-吡啶-3-基)-丙-2-醇為黃色固體(1.2g，23％)mp107-108℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ7.89(d，1H，J＝2.3Hz)，7.40(d，1H，J＝2.3Hz)，6.28(bs，2H)，5.51(s，1H)，1.4(s，6H)；MS(APCI)m/z 231([M+H]+，100％)。
實(shí)施例36-溴-4，4’-二甲基-1，4-二氫-3-氧雜-1，8-二氮雜-萘-2-酮將2-(2-氨基-5-溴-吡啶-3-基)-丙-2-醇(0.86g，3.7mmol)和1，1’-羰基二咪唑(過(guò)量)在THF(10mL)中的混合物，在35℃加熱過(guò)夜。將反應(yīng)溶液冷卻至室溫，倒入乙酸乙酯(200mL)，用1 N HCl(2×50mL)洗滌，用硫酸鈉干燥，并濃縮。殘留物通過(guò)快速色譜法(硅膠，25％乙酸乙酯/己烷)純化，得到6-溴-4，4’-二甲基-1，4-二氫-3-氧雜-1，8-二氮雜-萘-2-酮(0.9g，94％)，為白色固體mp 251-252℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ10.9(s，1H)，8.32(d，1H，J＝2.19Hz)，8.0(d，1H，J＝2.22Hz)，1.6(s，6H)；MS(EI)m/z 256([M]+，80％)；C9H9BrN2O2的分析值C，42.05，H，3.53，N，10.90.實(shí)測(cè)值C，42.15，H，3.65，N，10.80.
實(shí)施例46-(3-氯-苯基)-4，4-二甲基-1，4-二氫-3-氧雜-1，8-二氮雜-萘-2-酮將6-溴-4，4’-二甲基-1，4-二氫-3-氧雜-1，8-二氮雜-萘-2-酮(0.1g，0.39mmol)，3-氯苯基硼酸(0.075g，0.47mmol)，四(三苯基膦)合鈀(O)(0.023g，0.02mmol)，和碳酸鈉(0.1g，0.94mmol)在DME(8mL)和水(5mL)中的混合物，在氮?dú)飧采w層下，于50℃放置15分鐘，然后在85℃加熱30分鐘。反應(yīng)冷卻至室溫，加入乙酸乙酯(100mL)。有機(jī)層用氯化銨溶液(2×50mL)和鹽水(50mL)洗滌，用硫酸鎂干燥并濃縮。將產(chǎn)物溶解在二氯甲烷，然后通過(guò)酸式硅酸鎂(magnesol)塞。除去溶劑，將獲得的透明油與乙醚(25mL)一起研磨，得到6-(3-氯-苯基)-4，4-二甲基-1，4-二氫-3-氧雜-1，8-二氮雜-萘-2-酮，為白色固體(0.087g，80％)mp 214-215℃；1H-NMR(DMSO-d6)δ10.9(s，1H)，8.56(d，1H，J＝2.35Hz)，8.06(d，1H，J＝2.35Hz)，7.86(t，1H，J＝2.35Hz)，7.72(td，1H，J＝9.4，2.35Hz)，7.54-7.44(m，2H)，1.69(s，6H)；MS(ESI)m/z 289([M+H]+，100％)；C17H17NO3的分析值C，62.40，H，4.54，N，9.70.實(shí)測(cè)值C，60.53，H，4.40，N，9.21。
實(shí)施例56-氯-3-硝基-吡啶-2-甲腈將2，6-二氯-3-硝基吡啶和氰化亞銅在1-甲基-2-吡咯烷酮(pyrrolidinone)中的混合物快速加熱至180℃，并在該溫度下強(qiáng)力攪拌維持15分鐘。將混合物冷卻至-10℃，將深棕色溶液倒入冰水(3.5L)，攪拌30分鐘。收集絨毛狀的棕色沉淀物，用水洗滌。干燥1.5小時(shí)后，用沸騰的甲苯(3×300mL)萃取潮濕的固體。合并的甲苯提取物用水和鹽水洗滌，并干燥(MgSO4)，濃縮。粗產(chǎn)物用乙酸乙酯/己烷結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物mp115-117℃；1H NMR(DMSO-d6)δ8.16(dd，1H，J＝8.7，3.0Hz)，8.82(d，1H，J＝9.0Hz)；MS(EI)m/z183/185(M+H)+；C6H2ClN3O2的分析值C，39.26，H，1.10，N，22.89實(shí)測(cè)值C，39.47，H，1.38，N，22.77。
實(shí)施例63-氨基-6-氯-吡啶-2-甲腈向2，6-二氯-3-硝基吡啶(4.8g，26.15mmol)在甲醇(60mL)和濃鹽酸(25mL)中的溶液，緩慢加入鐵粉(5.12g，91.53mmol)。添加結(jié)束后，混合物回流45分鐘，然后倒入700mL H2O。對(duì)形成的漿料進(jìn)行過(guò)濾，得到暗黃色固體。用濃氨水使濾液成為堿性，過(guò)濾形成的漿料，用乙醚萃取固體和濾液。合并的萃取物被干燥(MgSO4)并蒸發(fā)，得到標(biāo)題化合物，為奶油色固體(2.8g，58％)熔點(diǎn)162-165℃，它不經(jīng)進(jìn)一步純化而直接用于下一步驟。
實(shí)施例71-(3-氨基-6-氯-吡啶-2-基)-乙酮在氮?dú)庀?，?-氨基-6-氯-吡啶-2-甲腈(0.75g，4.88mmol)的無(wú)水THF(25mL)溶液中加入溴化甲基鎂(3M乙醚溶液，8.1mL，24.3mmol)。攪拌反應(yīng)混合物30分鐘，然后用水緩慢地淬滅，用5N HCl溶液進(jìn)行處理。混合物用乙酸乙酯(3×100mL)萃取，有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，并干燥(MgSO4)。在去除溶劑后，殘留物通過(guò)色譜法進(jìn)行純化，其中用乙酸乙酯/己烷混合物(1∶3)作為洗脫液，得到標(biāo)題化合物，為綠色結(jié)晶固體(0.71g，85％)mp108-110℃.1H NMR(DMSO-d6)δ2.51(s，3H)，7.28-7.39(m，4H)；MS(ESI)m/z 171/173(M+H)+；C7H7ClN2O的分析值C，49.28，H，4.14，N，16.14.實(shí)測(cè)值C，49.70，H，4.03，N，16.41.
實(shí)施例81-(3-氨基-6-氯-吡啶-2-基)-丙-2-醇在氮?dú)庀?，?-(3-氨基-6-氯-吡啶-2-基)-乙酮的無(wú)水THF溶液中，加入溴化甲基鎂溶液(3N乙醚溶液)。形成的反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4小時(shí)，用水緩慢地淬滅，用0.5N HCl處理，然后攪拌30分鐘，用乙酸乙酯稀釋?zhuān)名}水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮并層析(使用乙酸乙酯/己烷(3.5∶6.5)混合物)，得到標(biāo)題化合物，為白色晶體(0.45g，82％)mp118-121℃.1H NMR(DMSO-d6)δ1.45(s，6H)，3.35(s，1H)，5.51(s，1H)，5.68(s，1H)，7.02(s，1H)；MS((+)APCI)m/z187/189(M+H)+；C8H11ClN2O的分析值C，51.48，H，5.94，N，15.01.實(shí)測(cè)值C，51.22，H，5.99，N，14.47.
實(shí)施例96-氯-4，4-二甲基-1，4-二氫-3-氧雜-1，5-二氮雜-萘-2-酮向1-(3-氨基-6-氯-3-硝基-吡啶-2-基)-丙-2-醇(0.3g，1.67mmol)的無(wú)水THF(20mL)溶液中，加入1，1’-羰基二咪唑(0.68g，4.12mmol)的無(wú)水THF(10mL)溶液?；亓骷訜岱磻?yīng)混合物3小時(shí)。用0.5N HCl處理，用鹽水和水洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮和用乙酸乙酯/己烷結(jié)晶，獲得標(biāo)題化合物，為白色晶狀固體(0.2g，56％)mp175-178℃.1H NMR(DMSO-d6)δ1.60(s，6H)，7.30(d，1H，J＝8.41Hz)，7.41(d，1H，J＝8.41Hz)，10.47(s，1H)；MS((+)APCI)m/z 213(M+H)+；C9H9ClN2O2的分析值C，50.84，H，4.27，N，13.17.實(shí)測(cè)值C，50.99，H，4.28，N，12.98。
實(shí)施例10將本發(fā)明的化合物用如下所述的相關(guān)試驗(yàn)進(jìn)行測(cè)試，在體外試驗(yàn)中它們的效力范圍為0.01nM到5μM，在體內(nèi)試驗(yàn)中為0.001-300mg/kg。選定的例子是實(shí)施例4。 實(shí)施例4，hPR CV-1，IC50＝0.8μMA.體外生物學(xué)通過(guò)以下方法測(cè)定體外生物學(xué)(1)競(jìng)爭(zhēng)性放射性配體結(jié)合用帶有黃體酮作為放射性配體的A型人黃體酮受體；(2)共轉(zhuǎn)染試驗(yàn)，可提供以促效劑EC50和拮抗劑IC50值表達(dá)的功能性活力；(3)T47D細(xì)胞增殖，這是提供促效劑和拮抗劑數(shù)據(jù)的另一種功能性試驗(yàn)；和(4)T47D細(xì)胞堿性磷酸酯酶試驗(yàn)，這也是一種提供促效劑和拮抗劑數(shù)據(jù)的功能性試驗(yàn)。
1.hPR結(jié)合試驗(yàn)參考Pathirana，C.；Stein，R.B.；Berger，T.S.；Fenical，W.；Ianiro，T.；Mais，D.E.；Torres，A.；Glodman，M.E.，“來(lái)自海藻cymoplia barbata的非甾類(lèi)人黃體酮受體調(diào)制劑”，J.SteroidBiochem.Mol.Biol.，1992，41，733-738進(jìn)行。
2.CV-1細(xì)胞中的PRE-熒光素酶試驗(yàn)本試驗(yàn)的目的是基于化合物在用人PR和PRE-熒光素酶質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的CV-1細(xì)胞中對(duì)PRE-熒光素酶報(bào)道分子活性的影響，確定化合物的促孕或抗孕效果。本試驗(yàn)中所用的材料如下a.培養(yǎng)基生長(zhǎng)培養(yǎng)基如下含有10％(v/v)胎牛血清(熱失活)、0.1mM MEM非必需氨基酸、100U/ml青霉素、100mg/ml鏈霉素和2mM GlutaMax(GIBCO，BRL)的DMEM(BioWhittaker)。試驗(yàn)培養(yǎng)基如下含有10％(v/v)活性碳解吸的胎牛血清(熱滅活)、0.1mM MEM非必需氨基酸、100U/ml青霉素、100mg/ml鏈霉素和2mM GlutaMax(GIBCO，BRL)的無(wú)酚紅DMEM(BioWhittaker)。
b.細(xì)胞的培養(yǎng)、轉(zhuǎn)染、處理和熒光素酶試驗(yàn)將CV-1細(xì)胞原液維持在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。用1.2×107個(gè)細(xì)胞、5mg pLEM質(zhì)粒(在Sph1和BamH1位點(diǎn)插入hPR-B)、10mgpGL3質(zhì)粒(在熒光素酶序列上游有兩個(gè)PRE)，和50mg超聲處理過(guò)的小牛胸腺DNA作為載體DNA(250ml)，進(jìn)行共轉(zhuǎn)染。
用Biorad Gene Pulser II在260V和1,000mF進(jìn)行電穿孔。電穿孔后，將細(xì)胞重懸浮于生長(zhǎng)培養(yǎng)基，并在96孔板上以40,000個(gè)細(xì)胞/孔(200μl)接種。培養(yǎng)過(guò)夜后，將培養(yǎng)基換成試驗(yàn)培養(yǎng)基。然后在試驗(yàn)培養(yǎng)基中用對(duì)照或測(cè)試化合物處理這些細(xì)胞。在3nM黃體酮時(shí)測(cè)定化合物的避孕活性。處理24小時(shí)后，棄去培養(yǎng)基，用D-PBS(GIBCO，BRL)洗滌這些細(xì)胞3次。各孔加入50μl細(xì)胞裂解緩沖液(Promega，Madison，WI)，平板在滴定平板振蕩器(Lab Line Instrument，Inc)上振蕩15分鐘。用Promega的熒光素酶試劑測(cè)定熒光素酶的活性。
c.結(jié)果分析各種處理重復(fù)至少4次。用對(duì)數(shù)換算的數(shù)據(jù)分析匹配于促效劑和拮抗劑模式的方差和非線性劑量應(yīng)答曲線。用Huber加權(quán)法降低非正常值(outlier)的影響。用重新?lián)Q算的數(shù)值計(jì)算EC50或IC50。在方差和非線性應(yīng)答分析的兩個(gè)單向分析中，使用JMP軟件(SAS Institute，Inc.)。
d.對(duì)照化合物黃體酮和曲美孕酮(trimegestone)作為對(duì)照孕激素，RU486作為對(duì)照抗孕激素。所有對(duì)照化合物都在全劑量應(yīng)答曲線中進(jìn)行試驗(yàn)，并計(jì)算EC50或IC50值。表1.三個(gè)獨(dú)立研究中對(duì)照孕激素的預(yù)計(jì)EC50、標(biāo)準(zhǔn)偏差(SE)和95％置信區(qū)間(CI)EC5095％CI化合物實(shí)驗(yàn)(nM)SE下限上限黃體酮 1 0.616 0.026 0.509 0.7462 0.402 0.019 0.323 0.5013 0.486 0.028 0.371 0.637曲美孕酮 1 0.0075 0.0002 0.0066 0.00852 0.0081 0.0003 0.0070 0.00943 0.0067 0.0003 0.0055 0.0082表2.三個(gè)獨(dú)立研究中抗孕激素RU486的預(yù)計(jì)IC50、標(biāo)準(zhǔn)偏差(SE)和95％置信區(qū)間(CI)IC5095％CI化合物實(shí)驗(yàn)(nM)SE下限上限RU486 10.028 0.002 0.019 0.04220.037 0.002 0.029 0.04830.019 0.001 0.013 0.027促孕活性與對(duì)照載體相比，使PRE-熒光素酶活性顯著增加(p＜0.05)的化合物認(rèn)為是有活性的。
抗孕活性顯著降低3nM黃體酮誘導(dǎo)的PRE-熒光素酶的活性(p＜0.05)的化合物。
EC50能增加PRE-熒光素酶活性最大值一半時(shí)，化合物的濃度(默認(rèn)為“nM”)及標(biāo)準(zhǔn)偏差。
IC50能降低3nM黃體酮誘導(dǎo)的PRE-熒光素酶活性最大值一半時(shí)，化合物的濃度(默認(rèn)為“nM”)及標(biāo)準(zhǔn)偏差。
3.T47D細(xì)胞的增殖實(shí)驗(yàn)本實(shí)驗(yàn)的目的是用T47D細(xì)胞的細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)來(lái)測(cè)定促孕和抗孕的效力。測(cè)定化合物對(duì)T47D細(xì)胞中DNA合成的作用。以下為本實(shí)驗(yàn)所用的材料和方法a.生長(zhǎng)培養(yǎng)基補(bǔ)充有10％(v/v)胎牛血清(未加熱失活)、100U/ml青霉素、100mg/ml鏈霉素和2mM GlutaMax(GIBCO，BRL)的DEME∶F12(1∶1)(GIBCO，BRL)。
b.處理培養(yǎng)基補(bǔ)充有0.5％活性碳解吸的胎牛血清、100U/ml青霉素、200mg/ml鏈霉素和2mM GlutaMax(GIBCO，BRL)的無(wú)酚紅的極限必需培養(yǎng)基(MEM)(#51200-038 GIBCO，BRL)。
c.細(xì)胞培養(yǎng)將T47D細(xì)胞原液維持在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。對(duì)BrdU摻入實(shí)驗(yàn)而言，將細(xì)胞以10,000個(gè)細(xì)胞/孔的量(在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中)將細(xì)胞置于96孔板(Falcon，BectonDickinson Labware)中。培養(yǎng)過(guò)夜后，將培養(yǎng)基換成處理培養(yǎng)基，在處理前再培養(yǎng)這些細(xì)胞24小時(shí)。將化合物原液溶解于適當(dāng)?shù)妮d體(100％乙醇或50％乙醇/50％DMSO)中，然后用處理培養(yǎng)基稀釋?zhuān)咏o細(xì)胞。孕激素和抗孕激素對(duì)照化合物均以全劑量-響應(yīng)曲線方式進(jìn)行試驗(yàn)。載體的終濃度為0.1％。在對(duì)照孔中，細(xì)胞僅接受載體。在0.03nM曲美孕酮(對(duì)照孕激素促效劑)存在下測(cè)定抗孕激素。處理24小時(shí)后，棄去培養(yǎng)基，用10mM BrdU(Amersham Life Science，ArlingtonHeights，IL)在處理培養(yǎng)基中標(biāo)記細(xì)胞4小時(shí)。
d.細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)當(dāng)BrdU標(biāo)記結(jié)束時(shí)，棄去培養(yǎng)基，按供應(yīng)商的說(shuō)明，用細(xì)胞增殖ELISA試劑盒(#RPN 250，Amersham Life Science)測(cè)定BrdU的摻入。簡(jiǎn)而言之，將細(xì)胞在含有固定劑的乙醇中固定30分鐘，然后在封阻緩沖液中培養(yǎng)30分鐘以降低背景。將過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗BrdU抗體加到孔中，培養(yǎng)60分鐘。用PBS漂洗細(xì)胞3次，用3，3’，5，5’-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)底物培養(yǎng)10-20分鐘(取決于所測(cè)試的化合物的效力)。然后在各孔中加入25μl 1M硫酸以終止顯色反應(yīng)，5分鐘內(nèi)在450nm處用平板讀數(shù)儀讀取光密度。
e.結(jié)果分析用平方根換算的數(shù)據(jù)，分析匹配于促效劑和拮抗劑模式的方差和非線性劑量應(yīng)答曲線。用Huber加權(quán)法降低非正常值的影響。由重新?lián)Q算的數(shù)值計(jì)算EC50或IC50。在單向的方差和非線性劑量應(yīng)答分析的單劑量和劑量應(yīng)答分析中，使用JMP軟件(SAS Institute，Inc.)。
f.對(duì)照化合物曲美孕酮和甲羥孕酮醋酸酯(MPA)作為對(duì)照孕激素，RU486作為對(duì)照抗孕激素。所有對(duì)照化合物以全劑量應(yīng)答曲線方式進(jìn)行試驗(yàn)，并計(jì)算EC50或IC50值。
表3.各研究中的預(yù)計(jì)EC50、標(biāo)準(zhǔn)偏差(SE)和95％置信區(qū)間(CI)EC5095％CI化合物實(shí)驗(yàn)(nM) SE 下限 上限曲美孕酮10.0170.0030.0070.04020.0140.0010.0110.01730.0190.0010.0160.024MPA 10.0190.0010.0130.02720.0170.0010.0110.024表4.抗孕激素RU486的預(yù)計(jì)IC50、標(biāo)準(zhǔn)偏差(SE)和95％置信區(qū)間(CI)IC5095％CI化合物 實(shí)驗(yàn)(nM) SE下限 上限RU4861 0.0110.001 0.008 0.0142 0.0160.001 0.014 0.0203 0.0180.001 0.014 0.022EC50能增加BrdU摻入量最大值一半時(shí)化合物的濃度和標(biāo)準(zhǔn)偏差；IC50能使0.1曲美孕酮誘導(dǎo)的BrdU摻入量減少最大值一半時(shí)化合物的濃度和標(biāo)準(zhǔn)偏差。
4.T47D細(xì)胞堿性磷酸酶實(shí)驗(yàn)本實(shí)驗(yàn)的目的是通過(guò)測(cè)定化合物對(duì)T47D細(xì)胞中堿性磷酸酶酶活性的作用，來(lái)鑒定孕激素或抗孕激素。以下為本實(shí)驗(yàn)所用的材料和方法。
a.培養(yǎng)基補(bǔ)充有5％(v/v)活性碳解吸的胎牛血清(未加熱失活)、100U/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素和2mM GlutaMax(GIBCO，BRL)的DMEM∶F12(1∶1)(GIBCO，BRL)。
b.堿性磷酸酶實(shí)驗(yàn)緩沖液I.0.1M Tris-HCl，pH 9.8，含有0.2％Triton X-100II.0.1M Tris-HCl，pH 9.8，含有4mM磷酸對(duì)-硝基苯酯(Sigma)c.細(xì)胞培養(yǎng)和處理將冷凍的T47D細(xì)胞在37℃水浴中解凍，并用培養(yǎng)基稀釋至280,000個(gè)細(xì)胞/ml。在96孔板(Falcon，Becton Dickinson Labware)的各孔中加入180μl稀釋的細(xì)胞懸浮液。然后在各孔中加入20μl以培養(yǎng)基稀釋的對(duì)照或測(cè)試化合物。當(dāng)測(cè)試孕激素拮抗劑活性時(shí)，在1nM黃體酮存在下加入對(duì)照抗孕激素或測(cè)試化合物。在37℃，5％CO2/濕潤(rùn)氣氛中培養(yǎng)這些細(xì)胞24小時(shí)。
d.堿性磷酸酶酶實(shí)驗(yàn)在處理結(jié)束時(shí)，棄去平板中的培養(yǎng)基，在各孔中加入50μl實(shí)驗(yàn)緩沖液I。將這些平板在滴定板振蕩器上振蕩15分鐘。然后將150μl實(shí)驗(yàn)緩沖液II加到各孔中。在405nM測(cè)試波長(zhǎng)，以5分鐘為間隔測(cè)定光密度共30分鐘。
e.結(jié)果分析分析劑量應(yīng)答數(shù)據(jù)對(duì)參考和測(cè)試化合物，以劑量(X-軸)對(duì)酶反應(yīng)的速度(斜率)(Y-軸)繪制劑量應(yīng)答曲線。平方根換算的數(shù)據(jù)，用于分析匹配于促效劑和拮抗劑模式的方差和非線性劑量應(yīng)答曲線。用Huber加權(quán)法降低非正常值的影響。由重新?lián)Q算的數(shù)值計(jì)算EC50或IC50。在單向的方差和非線性應(yīng)答分析的單劑量和劑量應(yīng)答分析中，使用JMP軟件(SAS Institute，Inc.)。
f.對(duì)照化合物黃體酮和曲美孕酮作為對(duì)照孕激素，RU486作為對(duì)照抗孕激素。所有對(duì)照化合物都以全劑量應(yīng)答曲線方式進(jìn)行試驗(yàn)，并計(jì)算EC50或IC50值。表5.三次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)中對(duì)照孕激素的預(yù)計(jì)EC50、標(biāo)準(zhǔn)偏差(SE)和95％置信區(qū)間(CI)EC5095％CI化合物實(shí)驗(yàn)(nM)SE下限上限黃體酮 1 0.839 0.030 0.706 0.9962 0.639 0.006 0.611 0.6693 1.286 0.029 1.158 1.429曲美孕酮 1 0.084 0.002 0.076 0.0912 0.076 0.001 0.072 0.0803 0.160 0.004 0.141 0.181
表6.三次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)中對(duì)照抗孕激素RU486的預(yù)計(jì)IC50、標(biāo)準(zhǔn)偏差(SE)和95％置信區(qū)間(CI)IC5095％CI化合物實(shí)驗(yàn)(nM) SE 下限 上限RU486 1 0.1030.0020.0920.1152 0.1200.0010.1150.1263 0.0940.0070.0660.134B.體內(nèi)生物學(xué)用大鼠蛻膜化模型進(jìn)行最初的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，它可用于測(cè)定促效劑和拮抗劑的促孕作用。二級(jí)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)是用大鼠排卵抑制模型，由于該模型尚還處于開(kāi)發(fā)階段因此未能獲得詳細(xì)報(bào)告。
1.大鼠蛻膜化實(shí)驗(yàn)本流程的目的是評(píng)估孕激素和抗孕激素對(duì)大鼠子宮蛻膜化的作用，并對(duì)各種測(cè)試化合物的相對(duì)效力進(jìn)行比較。以下為所用的材料和方法a.方法將測(cè)試化合物溶解于100％乙醇中，并與玉米油(載體)混合。然后通過(guò)加熱(～80℃)此混合物以蒸發(fā)掉乙醇，從而制備在油(MazolaTM)中的測(cè)試化合物原液。隨后在處理動(dòng)物之前，用100％玉米油或10％乙醇(在玉米油中)稀釋測(cè)試化合物。當(dāng)這兩種載體相比較時(shí)，未發(fā)現(xiàn)蛻膜應(yīng)答間的差異。
b.動(dòng)物(RACUC流程#5002)在手術(shù)后，從Taconic(Taconic Farms，NY)得到切除卵巢的成年雌性Sprague-Dawley大鼠(～60天齡和230g)。在處理前至少10天進(jìn)行卵巢切除以降低循環(huán)系統(tǒng)中的性類(lèi)固醇。將這些動(dòng)物關(guān)養(yǎng)在12小時(shí)光亮/黑暗循環(huán)的房間內(nèi)，并喂以標(biāo)準(zhǔn)大鼠飼料并任意給水。
c.處理在處理前將大鼠稱(chēng)重并隨機(jī)分組，每組4或5只。用含有測(cè)試化合物的0.2ml載體皮下注射大鼠的頸背，或以管飼法用0.5ml載體進(jìn)行。每天處理這些動(dòng)物1次，共7天。在測(cè)試抗孕激素時(shí)，在處理的前3天動(dòng)物接受測(cè)試化合物和EC50劑量的黃體酮(5.6mg/kg)。在蛻膜刺激后，動(dòng)物依舊接受黃體酮直至4天后解剖尸體。
d.劑量按基于mg/kg平均組體重制備劑量。在所有研究中，包括僅接受載體的對(duì)照組。用半對(duì)數(shù)增加值確定劑量應(yīng)答曲線(如0.1、0.3、1.0、3.0mg/kg...)。
e.蛻膜誘發(fā)第三次注射后約24小時(shí)，通過(guò)用21G針刮擦反子宮膜(antimesometrial)腔內(nèi)皮，從而在子宮的一個(gè)角誘發(fā)蛻膜。對(duì)角不進(jìn)行刮擦從而作為未受刺激的對(duì)照。在最終處理約24小時(shí)后，通過(guò)CO2窒息處死大鼠，測(cè)量體重。取出子宮，清理掉脂肪。分別稱(chēng)重蛻膜(D-角)和對(duì)照(C-角)子宮角。
f.結(jié)果分析由D-角/C-角計(jì)算蛻膜子宮角重量的增加，并用對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換使方差的正態(tài)性和同質(zhì)性最大化。用Huber M-估計(jì)量來(lái)降低劑量應(yīng)答曲線擬合和方差單向分析中所觀察到的非正常的轉(zhuǎn)換值的影響。在單向ANOVA和非線性應(yīng)答分析中，使用JMP軟件(SAS Institute，Inc.)。
g.對(duì)照化合物將所有孕激素對(duì)照化合物都以全劑量應(yīng)答曲線方式進(jìn)行試驗(yàn)，并計(jì)算對(duì)于子宮濕重的EC50值。
表7.各實(shí)驗(yàn)的預(yù)計(jì)EC50、標(biāo)準(zhǔn)偏差(SE)和95％置信區(qū)間(CI)EC5095％CI化合物 實(shí)驗(yàn) (mg/kg，s.c.)SE下限上限黃體酮 15.500.77 4.217.2026.211.12 4.418.763-酮去氧孕烯 10.110.02 0.070.16(3-Ketodesogestrel) 20.100.05 0.110.2530.060.03 0.030.14左炔諾孕酮10.080.03 0.040.1620.120.02 0.090.1730.090.02 0.060.1340.090.02 0.060.14MPA 10.420.03 0.290.6020.390.05 0.220.6730.390.04 0.250.61
表8.三種對(duì)照化合物的劑量應(yīng)答曲線中的預(yù)計(jì)平均EC50、標(biāo)準(zhǔn)偏差和95％置信區(qū)間EC5095％CI化合物 (mg/kg，s.c.)SE下限上限黃體酮5.62 0.62 4.557.003-酮去氧孕烯 0.10 0.02 0.070.14左炔諾孕酮0.10 0.01 0.080.12表9.抗孕激素RU486的預(yù)計(jì)IC50、標(biāo)準(zhǔn)偏差和95％置信區(qū)間IC5095％CI化合物實(shí)驗(yàn)(mg/kg，p.o.)SE下限 上限RU 486 1 0.210.07 0.05 0.962 0.140.02 0.08 0.27濃度實(shí)驗(yàn)中化合物的濃度(默認(rèn)為mg/kg體重)給藥路徑給予動(dòng)物化合物的路徑。
體重動(dòng)物的平均總體重(默認(rèn)為kg)。
D-角蛻膜化子宮角的濕重(默認(rèn)為mg)。
C-角對(duì)照子宮角的濕重(默認(rèn)為mg)。
蛻膜應(yīng)答[(D-C)/C]×100％促孕活性與對(duì)照載體相比，能顯著(p＜0.05)誘發(fā)蛻膜作用的化合物被認(rèn)為是有活性的。
抗孕活性顯著降低EC50黃體酮所誘發(fā)的蛻膜作用的化合物(p＜0.05)。
子宮重量的EC50使蛻膜應(yīng)答最大值增加一半時(shí)的化合物濃度(默認(rèn)為mg/kg)。
子宮重量的IC50使EC50黃體酮誘發(fā)的蛻膜應(yīng)答最大值減小一半時(shí)的化合物濃度(默認(rèn)為mg/kg)。
本文將所有引用的出版物都納入作為參考。雖然本發(fā)明是以特別優(yōu)選的實(shí)施例進(jìn)行描述的，但應(yīng)理解，可在不脫離本發(fā)明的精神情況下作一些改動(dòng)。這些改動(dòng)落于本發(fā)明所附的權(quán)利要求的范圍。
權(quán)利要求
1.一種避孕方法，其特征在于，該方法包括將下列物質(zhì)給予育齡婦女連續(xù)28天a)第一階段，給予14-21個(gè)日劑量單位的促孕藥，其促孕活性相當(dāng)于約35-150微克左炔諾孕酮；b)第二階段，給予1-11個(gè)日劑量單位的、日劑量約為2-50毫克的式I抗孕激素化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 式中A，B和D是N或CH，條件是A，B和D不能都是CH；R1和R2是選自下組的獨(dú)立取代基H，C1-C6烷基，取代的C1-C6烷基，C2-C6鏈烯基，取代的C2-C6鏈烯基，C2-C6炔基，取代的C2-C6炔基，C3-C8環(huán)烷基，取代的C3-C8環(huán)烷基，芳基，取代的芳基，雜環(huán)，取代的雜環(huán)，CORA，或NRBCORA；或R1和R2稠合形成選自a)，b)或c)的螺環(huán)，每個(gè)螺環(huán)可任選地被1-3個(gè)C1-C3烷基取代a)3-8元螺環(huán)烷基環(huán)；b)3-8元螺環(huán)鏈烯基環(huán)；或c)任選取代的3-8元雜環(huán)，它含有1-3個(gè)選自下組的雜原子O、S和N；a)，b)和c)的螺環(huán)可任選地被選自下組的1-4個(gè)基團(tuán)取代氟，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，C1-C6烷硫基，-CF3，-OH，-CN，NH2，-NH(C1-C6烷基)，或-N(C1-C6烷基)2；RA是H，C1-C3烷基，取代的C1-C3烷基，芳基，取代的芳基，C1-C3烷氧基，取代的C1-C3烷氧基，C1-C3氨烷基，或取代的C1-C3氨烷基，RB是H，C1-C3烷基，或取代的C1-C3烷基，R3是H，OH，NH2，C1-C6烷基，取代的C1-C6烷基，C3-C6鏈烯基，取代的C1-C6鏈烯基，或CORC，RC是H，C1-C3烷基，取代的C1-C3烷基，芳基，取代的芳基，C1-C3烷氧基，取代的C1-C3烷氧基，C1-C3氨烷基，或取代的C1-C3氨烷基，R4是如下所示含有取代基X、Y、和Z的三取代苯環(huán) X選自下組鹵素，CN，C1-C3烷基，取代的C1-C3烷基，C1-C3烷氧基，取代的C1-C3烷氧基，C1-C3硫代烷氧基，取代的C1-C3硫代烷氧基，氨基，C1-C3氨烷基，取代的C1-C3氨烷基，NO2，C1-C3全氟烷基，含1-3個(gè)雜原子的5或6元環(huán)，CORD，OCORD，或NRECORD；RD是H，C1-C3烷基，取代的C1-C3烷基，芳基，取代的芳基，C1-C3烷氧基，取代的C1-C3烷氧基，C1-C3氨烷基，或取代的C1-C3氨烷基；RE是H，C1-C3烷基，或取代的C1-C3烷基；Y和Z是選自下組的獨(dú)立取代基H，鹵素，CN，NO2，C1-C3烷氧基，C1-C3烷基，或C1-C3硫代烷氧基；或者R4是含1、2或3個(gè)選自下組的雜原子的5或6元環(huán)O，S，SO，SO2或NR5，并且含1-2個(gè)選自下組的獨(dú)立取代基H，鹵素，CN，NO2，和C1-C3烷基，C1-C3烷氧基，C1-C3氨烷基，CORF，或NRGCORF；RF是H，C1-C3烷基，取代的C1-C3烷基，芳基，取代的芳基，C1-C3烷氧基，取代的C1-C3烷氧基，C1-C3氨烷基，或取代的C1-C3氨烷基；RG是H，C1-C3烷基，或取代的C1-C3烷基；Q是O，S，NR6，或CR7R8；R5是H或C1-C3烷基；W是O或化學(xué)鍵；c)任選的第三階段，在28個(gè)連續(xù)日的剩余日給予藥學(xué)上可接受的口服安慰劑，其中未給予抗孕激素、孕激素或雌激素；并且第一、第二和第三階段的日劑量單位總數(shù)等于28。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該促孕藥是左炔諾孕酮，抗孕激素化合物是具有以下結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 式中A，B和D是N或CH，條件是A，B和D不能都是CH；R1是H，C1-C6烷基，取代的C1-C6烷基，C3-C8環(huán)烷基，取代的C3-C8環(huán)烷基，芳基，取代的芳基，雜環(huán)，取代的雜環(huán)，CORA，或NRBCORA；R2是H，C1-C6烷基，取代的C1-C6烷基，C2-C6鏈烯基，取代的C2-C6鏈烯基，C3-C8環(huán)烷基，取代的C3-C8環(huán)烷基，芳基，取代的芳基，雜環(huán)，取代的雜環(huán)，CORA，或NRBCORA；或者R1和R2稠合形成如上所述的任選取代的3-8元螺環(huán)烷基，鏈烯基或雜環(huán)；RA是H，C1-C3烷基，取代的C1-C3烷基，芳基，取代的芳基，C1-C3烷氧基，取代的C1-C3烷氧基，C1-C3氨烷基，或取代的C1-C3氨烷基；RB是H，C1-C3烷基，或取代的C1-C3烷基，R3是H，OH，NH2，C1-C6烷基，取代的C1-C6烷基，C3-C6鏈烯基，取代的C1-C6鏈烯基，或CORC；RC是H，C1-C4烷基，取代的C1-C4烷基，芳基，取代的芳基，C1-C4烷氧基，取代的C1-C4烷氧基，C1-C4氨烷基，或取代的C1-C4氨烷基；R4是如下所示的含取代基X、Y和Z的三取代苯環(huán) X選自鹵素，CN，C1-C3烷基，取代的C1-C3烷基，C1-C3烷氧基，取代的C1-C3烷氧基，C1-C3硫代烷氧基，取代的C1-C3硫代烷氧基，C1-C3氨烷基，取代的C1-C3氨烷基，NO2，C1-C3全氟烷基，含1-3個(gè)雜原子的5元雜環(huán)，CORD，OCORD，或NRECORD；RD是H，C1-C3烷基，取代的C1-C3烷基，芳基，取代的芳基，C1-C3烷氧基，取代的C1-C3烷氧基，C1-C3氨烷基，或取代的C1-C3氨烷基；RE是H，C1-C3烷基，或取代的C1-C3烷基；Y和Z是選自下組的獨(dú)立取代基H，鹵素，CN，NO2，C1-C3烷氧基，C1-C3烷基，或C1-C3硫代烷氧基；或者R4是含1、2或3個(gè)選自下組的雜原子的5或6元環(huán)O，S，SO，SO2或NR5，并且含1-2個(gè)選自下組的獨(dú)立取代基H，鹵素，CN，NO2，和C1-C3烷基，或C1-C3烷氧基；R5是H或C1-C3烷基；Q是O，S，NR6，或CR7R8；W是O或化學(xué)鍵。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該促孕藥是左炔諾孕酮，抗孕激素化合物是具有以下結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 式中A，B和D是N或CH，條件是A，B和D不能都是CH；R1＝R2并選自下組C1-C3烷基，取代的C1-C3烷基，或通過(guò)稠合R1和R2形成3-6元螺環(huán)所構(gòu)成的螺環(huán)烷基；R3是H，OH，NH2，C1-C6烷基，取代的C1-C6烷基，或CORC；RC是H，C1-C4烷基，或C1-C4烷氧基；R4選自a)、b)或c)a)R4是下式所示的苯環(huán) X選自下組鹵素，CN，C1-C3烷氧基，C1-C3烷基，NO2，C1-C3全氟烷基，含1-3個(gè)雜原子的5元雜環(huán)，或C1-C3硫代烷氧基；Y是在4′或5′位上的選自下組的取代基H，鹵素，CN，NO2，C1-C3烷氧基，C1-C4烷基，或C1-C3硫代烷氧基；或者b)R4是具有如下結(jié)構(gòu)的5元環(huán) U是O，S，或NR5；R5是H，或C1-C3烷基，或C1-C4CO2烷基；X′選自鹵素，CN，NO2，C1-C3烷基，或C1-C3烷氧基；Y′選自H和C1-C4烷基；c)R4是具有如下結(jié)構(gòu)的6元環(huán) X1是N或CX2；X2是鹵素，CN或NO2。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該促孕藥是左炔諾孕酮，抗孕激素化合物是具有以下結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 式中，A，B和D是N或CH，條件是A，B和D不能都是CH；R1＝R2并選自CH3和通過(guò)稠合R1和R2形成6元螺環(huán)所構(gòu)成的螺環(huán)烷基；R3是H，OH，NH2，CH3，取代的甲基，或CORC；RC是H，C1-C3烷基，或C1-C4烷氧基；R4是如下所示含取代基X和Y的二取代苯環(huán) X是鹵素，CN，甲氧基，NO2，或2-噻唑；Y是在4′或5′位且選自下組的取代基H和F；W是O或化學(xué)鍵。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該促孕藥是左炔諾孕酮，抗孕激素化合物是具有以下結(jié)構(gòu)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 式中，A，B和D是N或CH，條件是A，B和D不能都是CH；R1＝R2并選自CH3和通過(guò)稠合R1和R2形成6元螺環(huán)所構(gòu)成的螺環(huán)烷基；R3是H，OH，NH2，CH3，取代的甲基，或CORC；RC是H，C1-C3烷基，或C1-C4烷氧基；R4是具有如下結(jié)構(gòu)的5元環(huán) U是O，S，或NH；X′是鹵素，CN，或NO2；Y′是H或C1-C4烷基；W是O或化學(xué)鍵。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該抗孕激素化合物是6-(3-氯-苯基)-4，4-二甲基-1，4-二氫-3-氧雜-1，8-二氮雜-萘-2-酮，或其藥學(xué)上可接受的鹽。
7.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該促孕藥選自下組左炔諾孕酮、炔諾孕酮、去氧孕烯、3-酮去氧孕烯、炔諾酮、孕二烯酮、乙酸炔諾酮、諾孕酯、奧沙孕酮、乙酸環(huán)丙孕酮、曲美孕酮、地諾孕素、屈螺利酮、諾美孕酮或(17-脫乙?；?諾孕酯。
8.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該方法包括在28日周期內(nèi)連續(xù)給予育齡女性下列物質(zhì)a)第一階段，給予21個(gè)日劑量單位的促孕藥，促孕藥的促孕活性相當(dāng)于約35-100微克左炔諾孕酮；b)第二階段，給予3個(gè)日劑量單位的權(quán)利要求1所述的抗孕激素化合物，每個(gè)日劑量單位含有日劑量約為2-50毫克的抗孕激素化合物；和c)可任選地在28日周期中第一和第二階段后的每一日，給予4個(gè)日劑量單位的藥學(xué)上可接受的口服安慰劑。
9.一種避孕方法，其特征在于，該方法包括在連續(xù)28日期間給予育齡女性下列物質(zhì)a)第一階段，給予18-21個(gè)日劑量單位的促孕藥和乙炔雌二醇，促孕藥的促孕活性相當(dāng)于約35-150微克左炔諾孕酮，乙炔雌二醇的日劑量范圍約為10-35微克；和b)第二階段，給予1-7個(gè)日劑量單位的權(quán)利要求1所述的抗孕激素，其日劑量約為2-50毫克；和c)可任選地在連續(xù)28日中剩余的每一日給予藥學(xué)上可接受的口服安慰劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求15所述的避孕方法，它包括在連續(xù)28天的時(shí)間內(nèi)給予育齡婦女下列物質(zhì)a)第一階段，給予21個(gè)日劑量單位的促孕藥和乙炔雌二醇，促孕藥的促孕活性相當(dāng)于約35-100微克左炔諾孕酮，乙炔雌二醇日劑量范圍約為10-35微克；和b)第二階段，給予3個(gè)日劑量單位的權(quán)利要求1所述的抗孕激素，其日劑量約為2-50毫克；和c)可任選的第三階段，給予4個(gè)日劑量單位的藥學(xué)上可接受的口服安慰劑。
11.一種避孕方法，其特征在于，該方法包括在連續(xù)28日期間給予育齡婦女下列物質(zhì)a)第一階段，給予18-21個(gè)日劑量單位的促孕藥和乙炔雌二醇，促孕藥的日劑量在促孕活性上相當(dāng)于約35-150微克左炔諾孕酮，乙炔雌二醇日劑量范圍約為10-35微克；和b)第二階段，給予1-7個(gè)日劑量單位，各日劑量單位含有濃度為2-50毫克的權(quán)利要求1所述的抗孕激素和濃度約為10-35微克的乙炔雌二醇；和c)可任選的第三階段，給予日劑量單位的藥學(xué)上可接受的口服安慰劑，日劑量單位總數(shù)為28。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的避孕方法，其特征在于，該方法包括在連續(xù)28日期間給予育齡婦女下列物質(zhì)a)第一階段，給予21個(gè)日劑量單位，每個(gè)日劑量單位含有促孕藥和乙炔雌二醇，促孕藥的日劑量在促孕活性上相當(dāng)于約35-100微克左炔諾孕酮，乙炔雌二醇的日劑量范圍約為10-35微克；和b)第二階段，給予3個(gè)日劑量單位，每個(gè)日劑量單位含有濃度為2-50毫克的權(quán)利要求1所述的抗孕激素和濃度約為10-35微克的乙炔雌二醇；和c)可任選的第三階段，給予4個(gè)日劑量單位的藥學(xué)上可接受的口服安慰劑。
13.一種適合每日口服給藥的藥學(xué)上有用的藥盒，其特征在于，它包含a)用于第一階段的14-21個(gè)日劑量單位的促孕藥，促孕藥的促孕活性相當(dāng)于約35-150微克左炔諾孕酮；b)用于第二階段的1-11個(gè)日劑量單位的權(quán)利要求1所述的抗孕激素化合物，每個(gè)日劑量單位含有日劑量約為2-50毫克的抗孕激素化合物；和c)用于第三階段的日劑量單位的藥學(xué)上可接受的口服安慰劑；其中第一階段、第二階段和第三階段的日劑量單位總數(shù)等于28。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的適合每日口服給藥的藥學(xué)上有用的藥盒，其特征在于，它包含a)用于第一階段的21個(gè)日劑量單位的促孕藥，促孕藥的促孕活性相當(dāng)于約35-150微克左炔諾孕酮；b)用于第二階段的3個(gè)日劑量單位的權(quán)利要求1所述的抗孕激素化合物，每個(gè)日劑量單位含有日劑量約為2-50毫克的抗孕激素化合物；和c)用于第三階段的4個(gè)日劑量單位的藥學(xué)上可接受的口服安慰劑。
15.一種適合每日口服給藥的藥學(xué)上有用的藥盒，其特征在于，它包含a)用于第一階段的18-21個(gè)日劑量單位的促孕藥和乙炔雌二醇，促孕藥的促孕活性相當(dāng)于約35-150微克左炔諾孕酮，乙炔雌二醇的日劑量范圍約為10-35微克；和b)用于第二階段的1-7個(gè)日劑量單位的權(quán)利要求1所述的抗孕激素，其日劑量約為2-50毫克；和c)用于第三階段的0-9個(gè)日劑量單位的藥學(xué)上可接受的口服安慰劑；其中第一階段、第二階段和第三階段中的日劑量單位總數(shù)等于28。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的適合每日口服給藥的藥學(xué)上有用的藥盒，其特征在于，它包含a)用于第一階段的21個(gè)日劑量單位的促孕藥和乙炔雌二醇，促孕藥的促孕活性相當(dāng)于約35-150微克左炔諾孕酮，乙炔雌二醇的日劑量范圍約為10-35微克；和b)用于第二階段的3個(gè)日劑量單位的權(quán)利要求1所述的抗孕激素，其日劑量約為2-50毫克；和c)用于第三階段的4個(gè)日劑量單位的藥學(xué)上可接受的口服安慰劑。
17.一種適合每日口服給藥的藥學(xué)上有用的藥盒，它包含a)用于第一階段的18-21個(gè)日劑量單位，每個(gè)日劑量單位含有促孕藥和乙炔雌二醇，促孕藥的日劑量在促孕活性上相當(dāng)于約35-150微克左炔諾孕酮，乙炔雌二醇的日劑量范圍約為10-35微克；b)用于第二階段的1-7個(gè)日劑量單位，每個(gè)日劑量單位含有濃度為2-50毫克的權(quán)利要求1所述的抗孕激素和濃度約為10-35微克的乙炔雌二醇；和c)用于第三階段的0-9個(gè)日劑量單位的藥學(xué)上可接受的口服安慰劑；其中第一階段、第二階段和第三階段中的日劑量單位總數(shù)等于28。
18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的適合每日口服給藥的藥學(xué)上有用的藥盒，它包含a)用于第一階段的21個(gè)日劑量單位，每個(gè)日劑量單位含有促孕藥和乙炔雌二醇，促孕藥的日劑量在促孕活性上相當(dāng)于約35-150微克左炔諾孕酮，乙炔雌二醇的日劑量范圍約為10-35微克；b)用于第二階段的3個(gè)日劑量單位，每個(gè)日劑量單位含有濃度為2-50毫克的權(quán)利要求1所述的抗孕激素和濃度約為10-35微克的乙炔雌二醇；和c)用于第三階段的4個(gè)日劑量單位的藥學(xué)上可接受的口服安慰劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及將作為黃體酮受體拮抗劑的通式(I)的二氫吲哚衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽的循環(huán)組合療法:式中,A,B和D是N或CH,但是不能都是CH;R
文檔編號(hào)A61P15/18GK1349412SQ00807088
公開(kāi)日2002年5月15日 申請(qǐng)日期2000年5月1日 優(yōu)先權(quán)日1999年5月4日
發(fā)明者G·S·格拉布, 智林, T·K·瓊斯, C·M·特格利, 張普文, A·芬森, E·A·捷烈弗柯, J·E·弗羅貝爾, A·A·桑蒂利, A·Q·維耶, J·P·愛(ài)德華茲 申請(qǐng)人:美國(guó)家庭用品有限公司, 萊加制藥公司