專利名稱：4″－取代的－9－脫氧－9a－氮雜－9a－高紅霉素衍生物二磷酸鹽和其藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及在哺乳動(dòng)物中用作抗菌和抗原生動(dòng)物劑的一種新型的(2R，3S，4R，5R，8R，10R，11R，12S，13S，14R)-13-[[2，6-雙脫氧-3-C-甲基-3-O-甲基-4-C-[(丙基氨基)甲基]-α-L-核-吡喃已糖基(hexopryanosyl)]氧]-2-乙基-3，4，10-三羥基-3，5，8，10，12，14-六甲基-11-[[3，4，6-三脫氧-3-二甲氨基)-β-D-木-吡喃已糖基]氧]-1-氧雜-6-氮雜環(huán)十五烷-15-酮的二磷酸鹽結(jié)晶(下文稱為二磷酸鹽)。本發(fā)明也涉及含有這種二磷酸鹽游離堿的藥物組合物和通過給予需要治療的哺乳動(dòng)物這種二磷酸鹽游離堿治療哺乳動(dòng)物細(xì)菌和原生動(dòng)物感染的方法。當(dāng)腸胃外給予哺乳動(dòng)物時(shí)，本發(fā)明的二磷酸鹽游離堿具有抗各種細(xì)菌和原生動(dòng)物感染的有效活性。
已知大環(huán)內(nèi)酯抗生素用于治療哺乳動(dòng)物、魚和鳥中廣譜的細(xì)菌和原生動(dòng)物感染。這樣的抗生素包括紅霉素A的各種衍生物，例如阿齊霉素，該物質(zhì)是商業(yè)可得的并且在美國專利4,474,768和4,517,359中有描述，這兩篇文獻(xiàn)本文全部引做參考。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及(2R，3S，4R，5R，8R，10R，11R，12S，13S，14R)-13-[[2，6-雙脫氧-3-C-甲基-3-O-甲基-4-C-[(丙基氨基)甲基]-α-L-核-吡喃已糖基]氧]-2-乙基-3，4，10-三羥基-3，5，8，10，12，14-六甲基-11-[[3，4，6-三脫氧-3-二甲氨基)-β-D-木-吡喃已糖基]氧]-1-氧雜-6-氮雜環(huán)十五烷-15-酮的二磷酸鹽結(jié)晶(下文稱為二磷酸鹽)的兩種多晶型物，顯示如下
其中n是0至8在本發(fā)明的一項(xiàng)實(shí)施方案中，這種二磷酸鹽是具有條板狀結(jié)晶形態(tài)并顯示縱向解理但是并無側(cè)向解理的液晶。X-射線衍射顯示很少或無序。
在另一項(xiàng)實(shí)施方案中，二磷酸鹽是結(jié)晶。這種二磷酸鹽的顯微鏡檢查顯示板狀或棱晶結(jié)晶形態(tài)，它們都是高度雙折射的。這種二磷酸鹽是晶序良好的晶體，特征在于以下的X-射線衍射圖案
這種結(jié)晶二磷酸鹽在87％的相對(duì)濕度時(shí)逐漸地吸收水至大約13％，在大約90％的相對(duì)濕度時(shí)發(fā)生迅速吸收至大約48％的水分。對(duì)這種二磷酸鹽的熱解重量分析揭示在約75℃失去三份水，第四份水在約120℃失去，第五份水在約170℃失去，最后的三份水在約200℃失去。穩(wěn)定晶格必需的最大數(shù)目的水分子顯示是大約八個(gè)。在空氣中于約70℃干燥二磷酸鹽，或者真空于45℃干燥，除去水剩下假同晶。這種結(jié)晶二磷酸鹽的水溶解度是大約280mg/mL。
一種制備這種二磷酸鹽的方法，包括室溫下在無水乙醇中磁性攪拌溶解這種無水游離堿，在大約2至5分鐘之內(nèi)添加磷酸無水乙醇溶液，以產(chǎn)生沉淀，接著在少量水中部分溶解所得的固體。室溫下攪拌幾小時(shí)產(chǎn)生晶狀產(chǎn)物，它通過過濾收集，然后以一些少量的大約10/1(v/v)的乙醇-水洗滌。在這種二磷酸鹽合成之后，通過包括在水中溶解、添加二氯甲烷、增加pH至約8.5至10、收集和濃縮有機(jī)相以及從烴類溶劑結(jié)晶非晶形游離堿的方法，它再轉(zhuǎn)變成可藥用游離堿。
在哺乳動(dòng)物中具有抗菌和抗原生動(dòng)物活性的藥物組合物包括細(xì)菌和原生動(dòng)物疾病的治療中有效量的這種二磷酸鹽游離堿和可藥用載體。一種治療細(xì)菌和原生動(dòng)物感染的方法包括給予需要這種治療的哺乳動(dòng)物抗菌量的這種二磷酸鹽游離堿?？咕康挠坞x堿對(duì)哺乳動(dòng)物腸胃外給藥。
發(fā)明詳細(xì)描述本發(fā)明涉及(2R，3S，4R，5R，8R，10R，11R，12S，13S，14R)-13-[[2，6-雙脫氧-3-C-甲基-3-O-甲基-4-C-[(丙基氨基)甲基]-α-L-核-吡喃已糖基]氧]-2-乙基-3，4，10-三羥基-3，5，8，10，12，14-六甲基-11-[[3，4，6-三脫氧-3-二甲氨基)-β-D-木-吡喃已糖基]氧]-1-氧雜-6-氮雜環(huán)十五烷-15-酮的二磷酸鹽結(jié)晶的兩種多晶型物，顯示如下 其中n是0至8在本發(fā)明的一項(xiàng)實(shí)施方案中，這種二磷酸鹽是具有條板狀結(jié)晶形態(tài)并顯示縱向解理但是并無側(cè)向解理的液晶。X-射線衍射顯示很少或無序。
在另一項(xiàng)實(shí)施方案中，二磷酸鹽是吸濕性鹽結(jié)晶。這種二磷酸鹽的顯微鏡檢查顯示板狀或棱晶結(jié)晶形態(tài)，它們都是高度雙折射的。這種二磷酸鹽是晶序良好的晶體，特征在于以下的X-射線衍射圖案
本發(fā)明也涉及制備這種液晶和結(jié)晶二磷酸鹽以及結(jié)晶二磷酸鹽游離堿的藥物組合物的方法，如以下方案1所示方案1
其中n是0-8這種結(jié)晶二磷酸鹽的差示掃描量熱法在大約119℃顯示單一的現(xiàn)象(single event)，這與失水以及在釋放的水中鹽的溶解一致。該現(xiàn)象之后無結(jié)晶。
在VTI于20-25℃干燥顯示重量丟失10％；干燥過的鹽在85％RH(相對(duì)濕度)下逐漸地吸收水分至15％，接著在90％RH下迅速吸收水分至大約48％。在90％RH下，該化合物潮解。
也可以通過熱解重量分析(TGA)研究這種二磷酸鹽。樣品在87％RH再水合時(shí)[Karl Fisher(KF)滴定法測得13％水分]，注意到四個(gè)顯著的突躍。大約75℃損失3份水；大約120℃損失4份水，大約170℃損失5份水，并且大約200℃損失8份水。穩(wěn)定晶格必需的最大數(shù)目的水分子顯示是大約八個(gè)。水合物中水含量的減小并未引起X-射線衍射數(shù)據(jù)的變化，表明水合物的假同晶的形成。
晶格內(nèi)水分的流動(dòng)性直接與這種二磷酸鹽接觸到的環(huán)境的相對(duì)濕度有關(guān)。例如，在大約87％相對(duì)濕度下，化合物含有大約13％的水；在60％相對(duì)濕度下，化合物含有大約8％的水；并且在40％相對(duì)濕度下，這種二磷酸鹽含有大約5％的水(所有通過KF計(jì)算)。
在空氣中70℃或者真空下45℃干燥除去所有水分剩下假同晶。該鹽在大約87％相對(duì)濕度下再水合，產(chǎn)生八水合物形式。
下列實(shí)施例介紹本發(fā)明的方法和化合物?？梢岳斫?，本發(fā)明并不局限于這些特定的實(shí)施例。
實(shí)施例1這種二磷酸鹽的液晶(2R，3S，4R，5R，8R，10R，11R，12S，13S，14R)-13-[[2，6-雙脫氧-3-C-甲基-3-O-甲基-4-C-[(丙基氨基)甲基]-α-L-核-吡喃已糖基]氧]-2-乙基-3，4，10-三羥基-3，5，8，10，12，14-六甲基-11-[[3，4，6-三脫氧-3-二甲氨基)-β-D-木-吡喃已糖基]氧]-1-氧雜-6-氮雜環(huán)十五烷-15-酮(7.5g，97％，9.0mmol)室溫下溶解在無水乙醇(190mL)中。然后加入15mL一份的磷酸無水乙醇溶液(7.15g市售的H3PO4稀釋至100mL，9.3mmol，1.03當(dāng)量)。立即形成白色沉淀。在懸浮液于室溫下攪拌1小時(shí)后加入水(10mL)?；旌衔锝又鴶嚢?天，之后固體以布氏漏斗收集并用少量的無水乙醇洗滌兩次。室溫高真空下干燥潮濕的濾餅。所得的固體在交叉偏振光下顯示雙折射，但是不顯示X-射線衍射圖案。
對(duì)這種液晶的KF分析表明它們含水5.5％。元素分析計(jì)算和實(shí)際值如下所示計(jì)算％ 觀測％C46.4448.15H8.69 9.22N3.96 4.11
P5.84 5.83亦進(jìn)行HPLC效能測定。含水5.5％的預(yù)期效能的二磷酸鹽是76.4％；觀測值是76.9％。
空氣干燥的隨后份僅僅亦顯示無X-射線圖案。少量的液晶放入試管并溶解(加溫)在1-丙醇(含少量水)，然后放在蓋子外邊緩慢蒸發(fā)。此試驗(yàn)獲得的固體用作實(shí)施例2的晶種。
實(shí)施例2結(jié)晶磷酸八水合物鹽在無水乙醇(180mL)中，室溫下磁性攪拌溶解這種游離堿(10g，98.8％，12.3mmol)。大約3分鐘之內(nèi)加入磷酸無水乙醇溶液[18mL，11.2mmol，0.9當(dāng)量(7.15g H3PO4稀釋至100mL)]，它引起白色、粘性沉淀的生成。加入水(10mL)，混合物室溫?cái)嚢柽^夜。以布氏漏斗收集晶狀產(chǎn)物，以三小份的10/1(v/v)乙醇-水洗滌該固體。回收的、空氣干燥的固體重量為2.09g。該固體的X-射線分析表明液晶形式的存在。500mg的液晶樣品溶解(加溫)在2mL的10∶1(v/v)乙醇-水中。所得的溶液冷卻至室溫，并且以小規(guī)模試驗(yàn)、含濕1-丙醇的固體結(jié)晶?；旌衔锸覝叵聰嚢柽^夜。布氏漏斗收集所得的固體并以少量的10∶1(v/v)乙醇-水洗滌，空氣干燥重量為370mg。X-射線分析表明這種物質(zhì)晶序良好并顯示如下所示的輪廓分明的粉末圖案
這種二磷酸鹽的液晶和結(jié)晶都是吸濕的。當(dāng)在親水性溶劑進(jìn)行嘗試時(shí)，向非晶形漿料加入4％至5％(v/v)的水引起該化合物結(jié)晶為八水合物。乙醇/水中的結(jié)晶表明可能形成亞穩(wěn)態(tài)的乙醇溶劑合物。
實(shí)施例3純化結(jié)晶二磷酸鹽八水合物1.18g的非晶形二磷酸鹽八水合物結(jié)合18.5mL的無水乙醇和1.05mL的水。混合物加熱回流15分鐘以產(chǎn)生混濁的溶液。停止加熱并且攪拌過的混合物冷卻至室溫以促進(jìn)結(jié)晶。2小時(shí)的?；?，冷卻產(chǎn)品、過濾并且室溫下空氣干燥以產(chǎn)生純二磷酸八水合物鹽。
實(shí)施例4(2R，33，4R，5R，8R，10R，11R，12S，13S，14R)-13-[[2，6-雙脫氧-3-C-甲基-3-O-甲基-4-C-[(丙基氨基)甲基]-α-L-核-吡喃已糖基]氧]-2-乙基-3，4，10-三羥基-3，5，8，10，12，14-六甲基-11-[[3，4，6-三脫氧-3-二甲氨基)-β-D-木-吡喃已糖基]氧]-1-氧雜-6-氮雜環(huán)十五烷-15-酮這種二磷酸鹽(225g)分布在水(1200mL)和二氯甲烷(500mL)之間。水相的pH通過加入固體碳酸鉀從5.9升高至8.6。收集有機(jī)相，經(jīng)無水硫酸鈉干燥并濃縮成干燥、非晶形泡沫(170g)。
實(shí)施例5這種非晶形的游離堿(170g)從庚烷(700mL)結(jié)晶，以產(chǎn)生干凈、結(jié)晶游離堿(115g)，然后它被配制成適于家畜腸胃外用途的部分水溶劑。
以上的方法和所得的二磷酸鹽具有有價(jià)值的和非顯著的性能。這種二磷酸鹽的形成允許在所得的母液中清除大量的雜質(zhì)。再轉(zhuǎn)變至游離堿時(shí)，這樣產(chǎn)生在部分含水介質(zhì)制劑中形成極低水平的混濁的藥物。這產(chǎn)生適用腸胃外用途的藥學(xué)上優(yōu)良的溶液。
活性化合物通過以前介紹的途徑，可以單獨(dú)或結(jié)合可藥用載體或稀釋劑給藥，并且這樣的給藥可以一次或多劑量進(jìn)行。更具體地，這種活性化合物可以以廣泛種類的各種劑型給藥，即它們可以結(jié)合各種可藥用惰性載體以片劑、膠囊、錠劑、含片、硬糖、粉劑、噴霧劑、霜?jiǎng)?、藥膏、栓劑、凍膠、凝膠、糊劑、洗劑、軟膏、水懸浮液、注射液、酏劑、糖漿劑等等形式給藥。這樣的載體包括固體稀釋劑或填充劑、無菌含水介質(zhì)和各種無毒有機(jī)溶劑，等等。此外，口服藥物組合物可以適當(dāng)?shù)卦鎏鸷?或增香。一般，這些劑型中的活性化合物的含量以重量計(jì)是大約5.0％至大約70％。
對(duì)于腸胃外給藥，可以采用活性組合物的油、部分含水載體或含水載體的溶液。油可以選自可藥用油；例如可以采用芝麻或花生油。部分含水載體的非水成分可選自可藥用成分；例如，可以采用丙二醇或聚乙二醇。如果需要，含水溶液應(yīng)當(dāng)適當(dāng)?shù)木彌_(pH優(yōu)選小于8)。含水和部分含水溶劑適于靜脈注射目的。含水、部分含水和油溶液適合于關(guān)節(jié)內(nèi)、肌肉內(nèi)的和皮下注射目的。通過標(biāo)準(zhǔn)的為本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員已知的制藥技術(shù)可輕易地完成所有這些溶液的在無菌條件下的制備。
權(quán)利要求
1.本發(fā)明涉及到(2R，3S，4R，5R，8R，10R，11R，12S，13S，14R)-1 3-[[2，6-雙脫氧-3-C-甲基-3-O-甲基-4-C-[(丙基氨基)甲基]-α-L-核-吡喃已糖基]氧]-2-乙基-3，4，10-三羥基-3，5，8，10，12，14-六甲基-11-[[3，4，6-三脫氧-3-二甲氨基)-β-D-木-吡喃已糖基]氧]-1-氧雜-6-氮雜環(huán)十五烷-15-酮的二磷酸鹽的兩種多晶型物，它具有以下化學(xué)式
其中n是0至8，多晶型物選自以下組成的組a.液晶的近晶結(jié)晶內(nèi)消旋相；和b.顯示X-射線粉末衍射圖案的二磷酸鹽結(jié)晶
2.按照權(quán)利要求1的二磷酸鹽液晶，具有條板狀結(jié)晶形態(tài)并顯示縱向解理。
3.按照權(quán)利要求2的二磷酸鹽液晶，在大約87％的相對(duì)濕度增重大約15％重量，結(jié)果失去雙折射。
4.按照權(quán)利要求2的二磷酸鹽，其中液晶具有大約5至6％的水。
5.按照權(quán)利要求1的二磷酸鹽，其中該鹽具有大約48％的C、大約9％的H、大約4％的N、大約6％的P和大約5.5％的H2O。
6.按照權(quán)利要求1的二磷酸鹽多晶形物，具有晶序良好的結(jié)晶板狀或棱晶結(jié)晶形狀。
7.按照權(quán)利要求6的二磷酸鹽，其中板狀或棱晶結(jié)晶形狀是高度雙折射的。
8.按照權(quán)利要求1的二磷酸鹽結(jié)晶，其中該化合物在大約87％的相對(duì)濕度逐漸地吸收大約13％的水。
9.按照權(quán)利要求8的二磷酸鹽，其中在大約90％的相對(duì)濕度迅速吸收至大約48％的水分。
10.按照權(quán)利要求9的二磷酸鹽，其中在大約90％的相對(duì)濕度這種二磷酸鹽變得潮解。
11.按照權(quán)利要求1的二磷酸鹽，其中熱解重量分析揭示在約75℃失去三份水，第四份水在約120℃失去，第五份水在約170℃失去，最后的三份水在約200℃失去。
12.按照權(quán)利要求1的二磷酸鹽，其中穩(wěn)定晶格必需的最大數(shù)目的水分子是八個(gè)。
13.按照權(quán)利要求1的二磷酸鹽，其中在空氣中于大約70℃或者真空于45℃干燥除去水分，剩下假同晶。
14.按照權(quán)利要求1的二磷酸鹽，其中水溶解度是大約280mg/mL。
15.一種制備二磷酸鹽的方法，包括室溫下在無水乙醇中磁性攪拌溶解游離堿；在大約2至3分鐘之內(nèi)加入磷酸無水乙醇溶液；在水中溶解所得的固體；室溫收集結(jié)晶產(chǎn)物；以一些少量的大約10/1(v/v)乙醇-水洗滌。
16.一種轉(zhuǎn)化按照權(quán)利要求15的二磷酸鹽至無雜質(zhì)的游離堿的方法，包括分散該鹽至二氯甲烷和水之間；升高pH至大約8至10，收集并蒸發(fā)有機(jī)相。
17.一種在哺乳動(dòng)物中具有抗菌和抗原生動(dòng)物活性的藥物組合物，包括治療細(xì)菌和原生動(dòng)物疾病有效量的按照權(quán)利要求1的二磷酸鹽的游離堿和可藥用載體。
18.治療細(xì)菌和原生動(dòng)物感染的方法，包括給予需要這樣治療的牲畜和豬抗菌有效量的按照權(quán)利要求1的二磷酸鹽的游離堿。
19.權(quán)利要求18的方法，其中抗菌有效量的二磷酸鹽的游離堿是腸胃外給藥。
全文摘要
本發(fā)明涉及在哺乳動(dòng)物中用作抗菌和抗原生動(dòng)物劑的一種新型的(2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)－13－[[2,6－雙脫氧－3－C－甲基－3－O－甲基－4－C－[(丙基氨基)甲基]－α－L－核－吡喃己糖基]氧]－2－乙基－3,4,10－三羥基－3,5,8,10,12,14－六甲基－11－[[3,4,6－三脫氧－3－二甲氨基)－β－D－木－吡喃己糖基]氧]－1－氧雜－6－氮雜環(huán)十五烷－15－酮的二磷酸鹽結(jié)晶。本發(fā)明也涉及含有這種二磷酸鹽游離堿的藥物組合物和通過給予需要治療的哺乳動(dòng)物二磷酸鹽游離堿治療哺乳動(dòng)物細(xì)菌和原生動(dòng)物感染的方法。當(dāng)腸胃外給予哺乳動(dòng)物時(shí),本發(fā)明的二磷酸鹽游離堿具有抗各種細(xì)菌和原生動(dòng)物感染的有效活性。
文檔編號(hào)A61K31/7052GK1358188SQ00809635
公開日2002年7月10日 申請(qǐng)日期2000年6月13日 優(yōu)先權(quán)日1999年6月30日
發(fā)明者R·J·拉夫卡, C·B·拉甘, D·J·M·艾倫 申請(qǐng)人:輝瑞產(chǎn)品公司