專利名稱：微交變生物電場調(diào)制的醫(yī)療癌病的生物制劑藥及制法的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明主要涉及利用微交變電場技術(shù)(Micro-Alternating-fieldBiotechnology，簡稱MAB)制造藥物的方法和相應(yīng)藥物，特別是生物制劑藥及其制備方法和用途。該生物制劑藥用于預(yù)防和醫(yī)治癌病。
生物技術(shù)是當(dāng)今世界科學(xué)技術(shù)研究的熱門課題。但至今能夠應(yīng)用在人類疑難病癥治療上的生物藥十分罕見。一個基因雖然了解到了它的序列，但基因所表達的機制，催化底物的機制，以及酶催化底物的活性依然是當(dāng)今生物技術(shù)研究的難題，極大的限制著生物技術(shù)的發(fā)展。
如上所述，為什么生物技術(shù)研究處于這種不利局面呢？本發(fā)明認(rèn)為關(guān)鍵是一個研究方法的問題。常規(guī)生物技術(shù)研究采用的是生物化學(xué)、生物分子學(xué)等方法，這些方法都是由常規(guī)的化學(xué)方法衍變過來的?；瘜W(xué)方法基本上是研究非生命物質(zhì)的化合、分解、氧化還原等變化。生物則是有生命的物質(zhì)，這些生命物質(zhì)每時每分每秒都在不停地變化著，老一代死去新一代復(fù)生，交替不變。僅是在組成機體的最小單位—細(xì)胞中物質(zhì)的代謝、物質(zhì)的轉(zhuǎn)換有序的進行著，從不會停止。當(dāng)今生物技術(shù)研究把肉體這種有形的物質(zhì)作為生命全部實際上是十分不完全的。本發(fā)明的研究認(rèn)為，一個有生命的生物體最基本地應(yīng)由兩大部分組成，一部分是看得見、摸得著的肉體，即有形物質(zhì)；另一部分是常規(guī)理論認(rèn)為看不見、摸不著的無形物質(zhì)—“靈魂”。這里所指的“靈魂”并不是那種封建迷信所說的“幽靈”，而是存在于每一個生物體上的“生命電波”。在一個活的生命體上，這種生命電波不停的發(fā)射，當(dāng)這種無形的“生命電波”失去以后，生命也就停止了，肉體也就成為死的物質(zhì)—尸首(肉體)。當(dāng)今世界的所有研究都是只研究死的物質(zhì)—肉體，而從沒有人研究“生命電波”。從某種意義上說肉體是一種死的物質(zhì)，“生命電波”才是活的物質(zhì)，肉體只是“生命電波”的宿主，即發(fā)射源。只有當(dāng)肉體和“生命電波”有機地結(jié)合在一起才能稱之為生命的物質(zhì)—生物。綜上所述，在生命科學(xué)的研究上，“生命電波”的研究比肉體的研究更為重要！當(dāng)然“生命電波”的研究一定要結(jié)合肉體才能是一個完整的生物研究。
近200年來是化學(xué)技術(shù)高度發(fā)展的時代，特別是20世紀(jì)后70年來化學(xué)、生物化學(xué)、生物工程等有了突飛猛進的發(fā)展，因而創(chuàng)造了數(shù)以萬計的化學(xué)產(chǎn)品。從人類使用的工具、穿著的衣服、食用的食品、裝飾用的化妝品以及建筑材料等都是化學(xué)產(chǎn)品；化學(xué)品使傳統(tǒng)的農(nóng)業(yè)變成了化學(xué)農(nóng)業(yè)，無論是使用的肥料，還是防病、殺蟲、除草都是化學(xué)物質(zhì)；為了獲得高產(chǎn)使用化學(xué)物質(zhì)刺激作物快速生長也是使用的化學(xué)物質(zhì)。在醫(yī)學(xué)上，特別是在西方國家占據(jù)100％的市場，就是在中國也占領(lǐng)了近82％的市場。大量的抗生素、激素、干擾素等各種各樣的化學(xué)藥物無處不在。今日的世界無論是在自己的家庭還是繁華的世界每一個角落，到處是玲瑯滿目的化學(xué)品。近年來許多科學(xué)家認(rèn)為，化學(xué)工業(yè)為人類帶來了高度的發(fā)展，但也同時給人類帶來了健康的危害。這是因為大量的化學(xué)品造成了環(huán)境的污染，無論是人類食用的食物，還是飲用的水，都不同程度地受到化學(xué)品的污染；大量的化學(xué)藥物，特別是抗生素類、干擾素類、激素類藥物危害更大；就連從來不使用抗生素，甚至從來不吃藥的人也無法逃避從農(nóng)產(chǎn)品、肉、蛋、奶以及它們的制品帶來的化學(xué)物質(zhì)對身體的危害。人類攝取了大量的化學(xué)物質(zhì)，造成了奇奇怪怪的疑難病癥無法醫(yī)治。這是因為各種各樣的化學(xué)物質(zhì)造成了人體免疫系統(tǒng)的損傷、降低甚至缺失。另外大量的各種各樣的化學(xué)物質(zhì)對環(huán)境的污染，誘發(fā)了各種各樣的病原微生物，從近年來世界上各種各樣的報道可知，當(dāng)今病原微生物無論從品種上，還是從致病能力上都有了很大的提高。因此造成了人類的疾病越來越多，越來越奇怪，越來越難治療。特別是糖尿病至今日還沒有一個有效的醫(yī)治辦法。縱觀世界各種各樣的研究機構(gòu)，大量的科學(xué)家從事醫(yī)學(xué)的研究，各國政府投入了無數(shù)的資金支持醫(yī)學(xué)的研究，各種各樣的化學(xué)藥物推向市場，然而不但傳統(tǒng)的疾病沒有得到有效地控制，反而新產(chǎn)生了各種各樣的奇難雜癥不停的向醫(yī)學(xué)界發(fā)出挑戰(zhàn)！如艾滋病、瘋牛病等相繼出臺，醫(yī)學(xué)界束手無策！
綜上所述，按照世界目前的醫(yī)學(xué)研究方向和方法發(fā)展下去，不但癌病得不到有效地預(yù)防與治療，反而還會誘發(fā)更多、更新、更難治療的疾病。如何找到一個有效的、安全的控制和治療癌病等疾病的辦法是當(dāng)今世界急不可待的大事。
本發(fā)明的目的為解決上述問題而提供一種用特定的無線電波處理酵母細(xì)胞以制備具有預(yù)防和治療癌病的生物制劑藥的方法。
本發(fā)明的另一個目的是提供用上述方法獲得的生物制劑藥。
本發(fā)明采用微交變生物電場調(diào)制技術(shù)(MAB)，采用“生命電波”激活酵母“隱性功能基因”，使這些酵母變成具有激活人體免疫細(xì)胞功能的特異性酵母。再經(jīng)過本發(fā)明“生命電波”條件下的馴化培養(yǎng)，然后制成預(yù)防和治療癌病的生物制劑藥。
本發(fā)明之所以能夠成功地獲得用于癌病防治的生物制劑藥，關(guān)鍵是采用與常規(guī)生物技術(shù)完全不同的方法。
通過大量的實驗表明，本發(fā)明生物制劑藥，具有以下特性1.采用“生命電波”(MAB)的人工電波方法，與傳統(tǒng)生命科學(xué)研究完全不同；2.本發(fā)明生物制劑藥不是中藥，也不是西藥，更不是抗生素類、干擾素類、激素類等，而是一種安全無毒副作用的生物制劑藥。
本說明書包括如下附1是基因結(jié)構(gòu)的示意圖。圖2是人工模擬的微交變生物電場(MAB)的“生命電波”激活酵母“隱性功能基因”方法示意圖。圖3是特異性酵母環(huán)境適應(yīng)性培養(yǎng)的示意圖。圖4是激活后特異性酵母擴大培養(yǎng)工藝的示意圖。圖5是特異性酵母液的濃縮工藝的示意圖。圖6是生物制劑藥成品冷卻包裝工藝示意圖。
下面結(jié)合附圖，對本發(fā)明的特征作進一步詳細(xì)說明。參閱

圖1，用圖1說明本生物制劑藥的機理。癌病是人類健康的大敵，大量的研究表明，無論是什么樣的疾病都與機體的免疫力有關(guān)。當(dāng)機體的免疫力較強時各種疾病都不會發(fā)生，是各種各樣的化學(xué)物質(zhì)、各種各樣的抗生素、激素等造成機體免疫力細(xì)胞的損傷，免疫細(xì)胞代謝紊亂，免疫基因不能正常的表達，致使免疫功能衰退。免疫力衰退的機體很容易受到各種各樣病原菌的侵襲，也會受到各種各樣有毒物質(zhì)的危害，從而造成艾滋病的發(fā)生。機體免疫力的下降按照常規(guī)的檢測方法是很難發(fā)現(xiàn)的。因為常規(guī)方法檢測機體會發(fā)現(xiàn)機體內(nèi)的B、T、K、NK等免疫細(xì)胞數(shù)量正常。本發(fā)明的研究認(rèn)為，免疫細(xì)胞的數(shù)量正常與否只能是機體免疫功能指標(biāo)之一，但并表示免疫基因表達正常，更不能標(biāo)志免疫酶的性質(zhì)、活性也是正常的。這就是說免疫細(xì)胞的免疫功能不應(yīng)只是B、T、K、NK細(xì)胞數(shù)量的多少，還要辨認(rèn)這些免疫細(xì)胞中的免疫基因所表達免疫酶的性質(zhì)是否正常，免疫酶的催化活性是否足夠。本發(fā)明認(rèn)為，免疫基因所表達的免疫酶不但數(shù)量要足，而且必須有足夠的催化效力，也就是說，當(dāng)機體B、T、K、NK細(xì)胞數(shù)量正常時，所表達的免疫酶數(shù)量并不一定足量，當(dāng)免疫酶數(shù)量足夠時，也并不一定有良好的催化活性。免疫基因和其他基因一樣，按照其作用分為兩大部分，圖1示出，圖的左側(cè)部分為免疫基因的啟動子部分，其中包括啟動基因。啟動基因擔(dān)負(fù)著啟動右側(cè)功能結(jié)構(gòu)基因表達免疫酶的數(shù)量、表達的時間等功能。圖的右側(cè)稱為功能結(jié)構(gòu)基因部分，其中主要是結(jié)構(gòu)基因，結(jié)構(gòu)基因決定了該基因所表達酶的結(jié)構(gòu)，即酶性質(zhì)，也就是說只要結(jié)構(gòu)基因堿基序列和基因鏈的卷曲結(jié)構(gòu)不變，其所表達酶結(jié)構(gòu)及性質(zhì)就不會發(fā)生變化，但其所表達的數(shù)量和表達時間、何時表達酶量少一些、何時表達酶量多一些、何時表達酶到最高峰等，完全受啟動基因的控制。當(dāng)B、T、K、NK免疫細(xì)胞的免疫基因的啟動子部分受到各種有害因子的影響，造成表達異常時，直接影響到功能結(jié)構(gòu)基因所表達免疫酶數(shù)量、表達時間曲線。當(dāng)免疫基因的功能結(jié)構(gòu)基因部分受到外因子干擾，造成其堿基或卷曲形狀發(fā)生變化時，會影響功能結(jié)構(gòu)基因所表達免疫酶的性質(zhì)或者是活性，機體的免疫力已經(jīng)遭到了嚴(yán)重破壞，但常規(guī)的檢測并不容易發(fā)現(xiàn)。另外當(dāng)免疫基因所表達的免疫酶數(shù)量、性質(zhì)不變時，免疫基因?qū)τ泻σ蜃佑绊懀鞒霰磉_反應(yīng)的時間是否相一致也是十分重要的，這就是所說的免疫基因應(yīng)答能力，當(dāng)免疫基因的應(yīng)答能力下降，或應(yīng)答時間提前或滯后時都會表現(xiàn)出免疫力的下降，造成機體患病。為什么機體的B、T、K、NK細(xì)胞的免疫基因會有上述問題呢？本發(fā)明的研究發(fā)現(xiàn)許多帶有陰離子或陽離子的“自由基”、各種各樣的病原微生物所產(chǎn)生的毒素類物質(zhì)，以及多種神經(jīng)障礙、各種輻射源等都可能造成B、T、K、NK免疫細(xì)胞基因變異或“僵化”，對這種僵化的基因，在本發(fā)明中稱之為“隱性基因”，這種隱性基因不能及時、準(zhǔn)確的表達，對外界病原微生物和多種致病因子不能及時的抵御，造成機體患病，包括患了癌病。
本發(fā)明多年的研究發(fā)現(xiàn)，各種免疫基因在各自的生命活動過程中，都會發(fā)射出一種特異性的“生命電波”，不同的免疫基因所發(fā)射的“生命電波”不同，免疫基因靠這些“生命電波”傳輸免疫信息對侵害機體的有害因子作出免疫反應(yīng)。因此當(dāng)免疫基因發(fā)生變化時，所發(fā)射的“生命電波”就會發(fā)生變化，那管是一種微小的變化都會造成“生命電波”的變化。本發(fā)明的關(guān)鍵在于發(fā)現(xiàn)了基因的“生命電波”會因有害因子造成改變，但也可以在帶有有益電波物質(zhì)的調(diào)控下恢復(fù)正常，被有害因子造成“僵化”的“隱性基因”，可使用有益因子激活。可用于本發(fā)明的電波的頻率范圍是1800MHz-56000MHz，優(yōu)選3500-36000MHz，更優(yōu)選7000-11500MHz。電波的強度為115-445mv/cm。
本發(fā)明根據(jù)以上原理，采用模擬機體免疫基因“生命電波”的人工電波(MAB)，創(chuàng)造一種“有益因子”，并將這種有益因子物質(zhì)制成生物制劑藥，使用這種生物制劑藥調(diào)控變異的免疫基因，從而達到預(yù)防和治療癌病作用。通過調(diào)控免疫功能，使機體增強抵御疾病的能力，使患多種病患的機體快速恢復(fù)。
本發(fā)明通過大量的研究認(rèn)為，要通過人工模擬“生命電波”獲得一種能夠調(diào)控免疫基因的活性物質(zhì)，是一件十分困難的工作。本發(fā)明經(jīng)過20多年的探索發(fā)現(xiàn)，自然界無處不在的微生物中人類利用的僅是“九牛一毛”，這是因為人們對微生物基因功能了解得不多。時至今日，人類所了解全部基因組成和功能的微生物僅有26種，而且這26種微生物也僅是結(jié)構(gòu)簡單的種類，對于復(fù)雜的真核微生物人類還不了解。特別是人類經(jīng)常使用的酵母微生物中，含有大量沒被利用的基因，這些基因由于長期得不到應(yīng)用已經(jīng)變成了“僵化基因”，本發(fā)明稱這些“僵化基因”為“隱性功能基因”。更為重要的是在這些“隱性功能基因”中存在著本發(fā)明所需要的，能夠用于調(diào)控人類機體免疫功能的有益蛋白類物質(zhì)。本發(fā)明就是利用人工模擬生命電波的方法激活酵母中能夠表達調(diào)控機體免疫功能蛋白物質(zhì)的“隱性功能基因”實現(xiàn)的。
本發(fā)明采用模擬生命電波方法激活酵母“隱性功能基因”，培育出了4種分別激活B、T、K、NK 4種免疫細(xì)胞的特異性酵母，制成了調(diào)控機體免疫功能從而預(yù)防和醫(yī)治癌病的生物制劑藥。本發(fā)明為了使這4種特異性的酵母在食用后順利通過胃，并保證在胃中不會被大量的酸性物質(zhì)殺死，本發(fā)明又將這4種特異性酵母做了耐pH≤2.5的條件培養(yǎng)。培養(yǎng)后的酵母細(xì)胞將會順利通過胃器官到達小腸。在小腸多種酶的作用下特異性酵母細(xì)胞被裂解，釋放出包裝在細(xì)胞內(nèi)的特異性免疫功能調(diào)節(jié)酶(蛋白)。這些特異性免疫功能調(diào)節(jié)酶“專一性”的激活、調(diào)控機體相對應(yīng)免疫細(xì)胞中免疫基因的表達。本發(fā)明所涉及的4種機體免疫調(diào)節(jié)特異性酵母，由于它們都是人類長期食用或生產(chǎn)上使用的微生物，不會產(chǎn)生任何毒副作用。這些特異性酵母細(xì)胞內(nèi)釋放出的活性酶，具有瞬間激活、調(diào)節(jié)機體內(nèi)免疫基因正確、高效表達的作用，然后將會隨著機體內(nèi)的代謝很快失掉活性轉(zhuǎn)變成機體的營養(yǎng)物質(zhì)被吸收，不會造成在機體中內(nèi)殘留。
本發(fā)明所涉及的調(diào)控機體免疫功能從而預(yù)防和醫(yī)治癌病的生物制劑藥作用機理簡要說明如下調(diào)控機體免疫功能生物制劑中的核心成分是4種具有分別激活機體B、T、K、NK“隱性免疫基因”的蛋白，這4種蛋白又分別包藏在4種特異性酵母中。這4種酵母就是本發(fā)明采用人工模擬“生命電波”激活的微生物，在本發(fā)明中稱這4種被模擬“生命電波”激活“隱性功能基因”的酵母為特異性酵母。這4種特異性酵母細(xì)胞中分別含有被激活免疫調(diào)節(jié)功能酶，這些免疫調(diào)節(jié)功能酶專一性地激活機體內(nèi)免疫B細(xì)胞、免疫T細(xì)胞、免疫T細(xì)胞和免疫NK細(xì)胞免疫基因恢復(fù)、活化，使這些免疫基因正確高效表達。這些特異性的酵母是通過各自特異性的模擬“生命電波”條件培養(yǎng)出來的。本發(fā)明所使用的激活機體B細(xì)胞免疫功能特異性酵母，所使用的人工模擬電波頻率和電波強度，是由免疫B細(xì)胞的免疫基因特異性“生命電波”決定的；激活機體T細(xì)胞免疫功能特異性酵母，所使用的人工模擬電波頻率和電波強度，是由免疫T細(xì)胞的免疫基因特異性“生命電波”決定的；激活機體K細(xì)胞免疫功能特異性酵母，所使用的人工模擬電波頻率和電波強度，是由免疫K細(xì)胞的免疫基因特異性“生命電波”決定的；激活機體NK細(xì)胞免疫功能特異性酵母，所使用的人工模擬電波頻率和電波強度，是由免疫NK細(xì)胞的免疫基因特異性“生命電波”決定的。這4種不同功能的特異性酵母，經(jīng)過隱性基因激活、模擬“生命電波”條件培養(yǎng)，使細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生了具有激活、調(diào)控上述4種免疫基因的活性酶(蛋白)。使用這4種特異性酵母制劑時，特異性酵母進入機體的小腸內(nèi)，在小腸多種酶的作用下細(xì)胞裂解，裂解后的細(xì)胞釋放出免疫基因激活調(diào)控酶。這些免疫基因激活調(diào)控酶立即被小腸吸收進入血液，通過血液分別運送到4種免疫細(xì)胞內(nèi)，從而達到激活、調(diào)控4種免疫基因正確表達提高免疫力，從而預(yù)防并醫(yī)治了癌病。
本發(fā)明免疫功能生物制劑藥，是通過以下兩個方面的步驟實現(xiàn)的。第一個步驟是采用特異性的模擬“生命電波”(MAB)激活普通酵母，使這些酵母變成具有調(diào)節(jié)B、T、K、NK細(xì)胞免疫功能的特異性酵母，并將這些酵母作耐低pH條件培養(yǎng)；第二步驟是在特異模擬生命電波的條件下，擴大培育這些特異性酵母，然后將這些特異性酵母制成調(diào)控免疫功能從而預(yù)防并醫(yī)治癌病的生物藥品。這兩個方面的實施過程是通過以下的步驟實現(xiàn)的。一.激活酵母功能“隱性基因”在以上的敘述中，說明了本發(fā)明采用微交變生物電場的模擬“生命電波”(MAB)方法激活普通酵母，使酵母中隱性功能基因復(fù)活，分別表達出具有激活、調(diào)控B細(xì)胞免疫基因、T細(xì)胞免疫基因、K細(xì)胞免疫基因和NK細(xì)胞免疫基因功能的蛋白。眾所周知，普通酵母是一類發(fā)酵淀粉、糖類、蛋白類等多種物質(zhì)的發(fā)酵菌，多用于造酒、制作面包、制造各種食品、制造醫(yī)藥及其多種產(chǎn)品的菌種，雖然酵母菌的品種繁多，功能各異，但從沒有人利用酵母所表達的特異性蛋白，分別激活、調(diào)節(jié)B、T、K、NK免疫基因功能，當(dāng)然這些酵母細(xì)胞在沒有使用本發(fā)明專利之方法進行隱性基因激活之前是不具備上述功能的。
(一)激活用于調(diào)控B細(xì)胞免疫功能基因酵母“隱性功能基因”的方法步驟大量的基因技術(shù)研究證明，一個完整B細(xì)胞免疫功能基因由兩大部分組成(見圖1)，一部分為B細(xì)胞免疫功能基因的啟動基因，另一部分為B細(xì)胞免疫功能基因的結(jié)構(gòu)基因。B細(xì)胞免疫功能基因的結(jié)構(gòu)基因決定了它所表達免疫酶的性質(zhì)；B細(xì)胞免疫功能基因的啟動基因控制B細(xì)胞免疫功能基因的結(jié)構(gòu)基因所表達免疫酶的數(shù)量、免疫活性和免疫應(yīng)答能力，即免疫酶的效價。因此，要保持B細(xì)胞免疫功能基因所表達酶的性質(zhì)不變，必須設(shè)法保持B細(xì)胞免疫功能基因的結(jié)構(gòu)基因DNA序列不變；要達到B細(xì)胞免疫功能基因的結(jié)構(gòu)基因高效表達，并保持所表達免疫酶最佳免疫活性和及時的免疫應(yīng)答能力，必須設(shè)法使B細(xì)胞免疫功能基因的啟動基因高效啟動。本發(fā)明通過人工模擬“生命電波”方法，激活酵母“隱性功能基因”，獲得具有表達調(diào)控B細(xì)胞免疫功能基因蛋白的特異性酵母。
參閱圖2，本發(fā)明所涉及采用人工模擬“生命電波”激活酵母“隱性功能基因”的方法步驟如下1.按照表1的成分配制培養(yǎng)基，并滅菌處理。
2.選擇適當(dāng)?shù)慕湍阜N類(可選擇酵母見表3)，按照活酵母細(xì)胞/培養(yǎng)基≥1×108個/1000ml的比例，注入圖2所示容器內(nèi)的培養(yǎng)基中。
3.保持容器中的溫度在37±5℃之間，培養(yǎng)24-56小時。
4.打開圖2所示的電波發(fā)射儀，將輸出電波頻率調(diào)節(jié)到7200-10700MHz范圍內(nèi)。
5.將電波發(fā)射儀輸出電磁場強度調(diào)節(jié)到115-445mv/cm范圍內(nèi)。
6.將裝有酵母培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶，按照圖2所示的模式安裝到接收機放大器輸出端，將接收頻率調(diào)節(jié)到與發(fā)射儀所發(fā)射頻率相一致的頻點上。同時調(diào)節(jié)發(fā)生儀和接收儀之間的距離為100±20cm，并根據(jù)所確定的距離按照115-445mv/cm要求計算出發(fā)射機的輸出電波強度{如距離為100cm，其發(fā)射機的輸出電波強度為(115-445mv/cm)×100＝11.5-44.5v}。
7.在上述條件下，并保持37±5℃的溫度條件，激活42-72小時。
8.經(jīng)以上條件激活后酵母細(xì)胞，然后采用真空冷凍干燥的方法制成安瓿或制成粉劑保存。
T，K.NK細(xì)胞免疫功能基因調(diào)控的方法和步驟，除使用頻率不同外，其方法步驟相同。二.特異性酵母耐酸(耐低pH)的馴化以上說明了本發(fā)明采用人工模擬“生命電波”(MAB)的方法，分別激活酵母不同“隱性功能基因”，獲得4種分別用于激活、調(diào)控B細(xì)胞免疫基因、T細(xì)胞免疫基因、K細(xì)胞免疫基因和NK細(xì)胞免疫基因功能的特異性酵母。但這4種特異性酵母還不能直接用于調(diào)控各種免疫基因，這是因為它們還不能適應(yīng)機體內(nèi)的環(huán)境。眾所周知，機體內(nèi)是一個十分復(fù)雜的環(huán)境，而且各種環(huán)境因子每時每刻都在變化著。當(dāng)這4種特異性的酵母通過口腔、胃進入小腸的途徑時，很難保障其細(xì)胞的完整性，更難保障酵母細(xì)胞內(nèi)目的酶的活性，因此保障酵母細(xì)胞活性是十分關(guān)鍵的。本發(fā)明采用了對4種特異性酵母的環(huán)境因子馴化培養(yǎng)，馴化培養(yǎng)方法步驟如下本發(fā)明4種功能微生物的環(huán)境適應(yīng)性馴化是通過如圖3所示的方法實現(xiàn)的
參閱圖3，本發(fā)明4種特異性酵母環(huán)境適應(yīng)性馴化的方法步驟分別說明如下(一)馴化調(diào)控B細(xì)胞免疫基因的特異性酵母步驟1.按照表2的方法配置好培養(yǎng)基，并滅菌處理。
2.取步驟1中的培養(yǎng)基1000ml注入到圖3的容器中。
3.取調(diào)控B細(xì)胞的特異性酵母液10ml(酵母液活細(xì)胞含量≥1×108個/ml)，注入圖3所示的容器中，4.打開如圖3所示的電波發(fā)生器，并調(diào)節(jié)到調(diào)控B細(xì)胞免疫基因的特異性酵母專一性頻率7200-10700MHz上，5.調(diào)節(jié)如圖3所示的電波輸出電壓為5-10mv/ml(1000ml培養(yǎng)基所使用的電波強度為5-10v)，6.保持上述電波頻率和電波強度不變，在37±5℃的溫度條件培養(yǎng)48-96小時后，分離保存在0-4℃的條件下備用。三.本發(fā)明生物制劑藥的制法本發(fā)明所涉及的特異性酵母經(jīng)過上述方法獲得后僅是獲得了種子，要制成大量的本發(fā)明生物制劑藥，必須有足量的特異性酵母，因此需要擴大培養(yǎng)。特異性酵母培養(yǎng)是通過以下方法步驟實現(xiàn)的A、調(diào)節(jié)B細(xì)胞免疫基因功能的特異性酵母培養(yǎng)工藝本發(fā)明所涉及調(diào)節(jié)B細(xì)胞免疫功能的特異性酵母培養(yǎng)工藝工程正如圖4所示。
參閱本發(fā)明說明書圖4，本發(fā)明所涉及的調(diào)節(jié)B細(xì)胞免疫功能的特異性酵母培養(yǎng)工藝步驟如下1.按照表4的成分配制培養(yǎng)基，并經(jīng)滅菌處理后，分別注入到圖4的A、B、C罐中。
2.將經(jīng)人工模擬生命電波方法激活，并經(jīng)耐受低pH(小于pH2.5)的培養(yǎng)所獲得的調(diào)節(jié)B細(xì)胞免疫功能的特異性酵母，輸入到圖4所示的種子罐A中，作為種子液。然后按照一定的比例將A罐種子液注入到B罐的培養(yǎng)基中擴大培養(yǎng)，注入的比例為A種子液/B培養(yǎng)液＝5ml/1000ml，3.調(diào)節(jié)電波發(fā)生器，使其輸出生物電波為7200-10700MHz，并同時按照0.5-1.0v/L的要求計算，設(shè)定電波強度(如假設(shè)B罐中培養(yǎng)液的數(shù)量為50L，單磁波強度應(yīng)為0.5-1.0v/L×50L＝25v-50v)。
4.保持上述電波頻率和電波強度不變情況下，37±5℃條件下培養(yǎng)56-72小時。
5.當(dāng)B罐中調(diào)節(jié)B細(xì)胞免疫基因的特異性酵母活細(xì)胞達到20億個/ml時，將B罐酵母液輸入C罐中，準(zhǔn)備輸送到下道工藝。
T，K.NK細(xì)胞的馴化方法步驟與上述步驟相同，只是使用的頻率不同。
以下將通過具體的實施例對本發(fā)明的實施方案進行具體描述。雖然在每一個實施例中僅涉及一種具體的酵母菌，但發(fā)明人通過實驗，發(fā)現(xiàn)用其他的酵母菌菌株也可以獲得相同的結(jié)果。實施例1激活用于調(diào)控B細(xì)胞免疫功能基因酵母“隱性功能基因”的方法1.按照表1的成分配制培養(yǎng)基1000-2000ml，并滅菌處理。
2.選擇IFFI1021酵母種類，按照活I(lǐng)FFI1021細(xì)胞/培養(yǎng)基≥1×108個/1000ml的比例，注入圖2所示容器內(nèi)的培養(yǎng)基中。
3.保持容器中的溫度在37±5℃之間，培養(yǎng)24-56小時。
4.打開圖2所示的電波發(fā)射儀，將輸出電波頻率調(diào)節(jié)到7200-10700MHz范圍內(nèi)。
5.將電波發(fā)射儀輸出電磁場強度調(diào)節(jié)到11.5-44.5V(以距離為100cm為例)范圍內(nèi)。
6.將裝有酵母IFFI1021培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶，按照圖2所示的模式安裝到接收機放大器輸出端，將接收頻率與發(fā)射儀的發(fā)射頻率調(diào)節(jié)到相同的7200-10700MHz范圍內(nèi)。同時調(diào)節(jié)發(fā)生儀和接收儀之間的距離為100cm。
7.在上述條件下，并保持37±5℃的溫度條件，激活42-72小時。
8.經(jīng)以上條件激活后IFFI1021酵母細(xì)胞，采用真空冷凍干燥的方法制成安瓿或制成粉劑保存。實施例2.免疫調(diào)節(jié)劑對180腹水瘤的抑制效果a.取wates大鼠60只，分成A、B、C共3組，每組20只大鼠。A組為實驗組，B組為使用環(huán)磷酰胺對照組，C為空白對照組。
b.采用180腹水瘤，分別接種各組大白鼠。
c.從接種后的第二天開始，A組給本生物制劑液(特異性酵母細(xì)胞≥1×108個/ml)，劑量為0.6ml/kg；B組給環(huán)磷酰胺，劑量為20ug/kg；C組給生理鹽水0.6ml/kg。每天一次。
d.七天后解剖檢測腹水瘤的大小，如下表
實施例3.免疫調(diào)節(jié)劑對U-14實體瘤的抑制效果a.取wates大鼠90只，分成A、B、C共3組，每組30只大鼠。A組為實驗組，B組為使用環(huán)磷酰胺對照組，C為空白對照組。
b.采用U-14實體瘤，分別接種各組大白鼠。
c.從接種后的第二天開始，A組給本生物制劑液(特異性酵母細(xì)胞≥1×108個/ml)，劑量為0.6ml/kg；B組給環(huán)磷酰胺，劑量為20ug/kg；C組給生理鹽水0.6ml/kg。每天一次。
d.服用14天后解剖檢測腹水瘤的大小，如下表
此微生物制劑通過對老鼠的腫瘤治療取得了良好的療效，同樣，對人體預(yù)防和治療癌病也相當(dāng)有效。
參閱圖5，所示的是將馴化后的可調(diào)控各種免疫基因的酵母菌液按預(yù)防和醫(yī)治癌病最有效配方選擇一種，兩種，三種，或四種的上述的免疫基因的酵母菌液，再按預(yù)先經(jīng)臨床選定的一定比例配合后混合，再進行濃縮的說明圖，可進行兩次濃縮，以達到適當(dāng)?shù)谋阌诜庋b的濃度。
參閱圖6，圖6是將圖5所述步驟后的予防和醫(yī)治癌病的生物制劑藥濃縮冷卻，秤量、罐封出成品的步驟說明圖，經(jīng)過所述圖示的步驟，就制出了用于予防和醫(yī)治癌病的生物制劑藥。它是經(jīng)微交變生物電場(MAB)技術(shù)生產(chǎn)出的微生物藥物。
此生物制劑藥已在北京的某醫(yī)院臨床用于癌病患者。表1.激活調(diào)控(B、T、K、NK)細(xì)胞所用酵母“隱性功能基因”培養(yǎng)基成分表
表2.環(huán)境條件適應(yīng)性培養(yǎng)基成分表(以1000ml為例)
表3.本專利所涉及的微生物種類(但不僅限于本表所列微生物)釀酒酵母、橢圓釀酒酵母、薛瓦酵母、德爾布酵母、蒙古德爾布酵母、少孢酵母、發(fā)酵性酵母、洛格酵母、蜂蜜酵母、小橢圓酵母、卵形酵母、羅斯酵母、魯氏酵母、清酒酵母、樹狀假絲酵母、朗比克假絲酵母、克魯斯酵母、解脂假絲酵母、中型平滑假絲酵母、近平滑假絲酵母、鐵紅酵母、皺褶假絲酵母、熱帶假絲酵母、產(chǎn)朊假絲酵母、阿舒假囊酵母、白地霉、異常漢遜酵母、阿拉伯糖醇漢遜酵母、杰丁漢遜酵母、土星漢遜酵母、施氏漢遜酵母、亞膜漢遜酵母、檸檬形克勒克酵母、油脂酵母、粉狀畢赤酵母、膜醭畢赤酵母、紅冬孢酵母、紅酵母、小紅酵母、深紅酵母、卡爾斯酵母、葡萄汁酵母、威爾酵母、路德類酵母、中國類酵母、八孢裂殖酵母、栗酒裂殖酵母、擲孢酵母、白球擬酵母、無名球擬酵母、球擬酵母、平常球擬酵母、貝雷絲孢酵母、頭狀絲孢酵母、皮狀絲孢酵母、威克酵母。表4.特異性酵母擴大培養(yǎng)基成分表(以1000L培養(yǎng)液計)
注1.上表中各種液體均是按照物料/水＝1/10的比例加工制成的。
2.上表培養(yǎng)液要調(diào)整到pH2.5±0.2范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.制備具有預(yù)防和治療癌病的生物制劑的方法，其特征在于，用微交變生物電場(MAB)的特定頻率的無線電波處理酵母細(xì)胞。
2.權(quán)利要求1的方法，其中電波的頻率為7200-10700MHz。
3.權(quán)利要求1的方法，其中電波的強度為115-445mv/cm。
4.權(quán)利要求1的方法，其中的酵母細(xì)胞選自釀酒酵母、橢圓釀酒酵母、薛瓦酵母、德爾布酵母、蒙古德爾布酵母、少孢酵母、發(fā)酵性酵母、洛格酵母、蜂蜜酵母、小橢圓酵母、卵形酵母、羅斯酵母、魯氏酵母、清酒酵母、樹狀假絲酵母、朗比克假絲酵母、克魯斯酵母、解脂假絲酵母、中型平滑假絲酵母、近平滑假絲酵母、鐵紅酵母、皺褶假絲酵母、熱帶假絲酵母、產(chǎn)朊假絲酵母、阿舒假囊酵母、白地霉、異常漢遜酵母、阿拉伯糖醇漢遜酵母、杰丁漢遜酵母、土星漢遜酵母、施氏漢遜酵母、亞膜漢遜酵母、檸檬形克勒克酵母、油脂酵母、粉狀畢赤酵母、膜醭畢赤酵母、紅冬孢酵母、紅酵母、小紅酵母、深紅酵母、卡爾斯酵母、葡萄汁酵母、威爾酵母、路德類酵母、中國類酵母、八孢裂殖酵母、栗酒裂殖酵母、擲孢酵母、白球擬酵母、無名球擬酵母、球擬酵母、平常球擬酵母、貝雷絲孢酵母、頭狀絲孢酵母、皮狀絲孢酵母、威克酵母。
5.權(quán)利要求4的方法，其中的酵母細(xì)胞是釀酒酵母IFFI1021。
6.用權(quán)利要求1-5中任一權(quán)項的方法制得的酵母細(xì)胞。
7.一種用于預(yù)防和醫(yī)治癌病的生物制劑藥，其特征在于，含有權(quán)利要求6的酵母細(xì)胞作為活性成分。
8.權(quán)利要求6的酵母細(xì)胞在制備用于預(yù)防和醫(yī)治病的用途。
全文摘要
本發(fā)明采用微交變生物電場(Micro－Alternating－field Biotechnology,簡稱MAB)模擬生命電波,激活普通酵母隱性基因,使普通酵母變成特異性酵母,這種特異酵母所表達的特性蛋白分別具有激活、調(diào)控、校正免疫能力低下B、T、K和NK細(xì)胞免異基因功能,使用這些特異性酵母制成生物制劑藥用于調(diào)控機體免疫基因達到重建機體免疫功能,使患癌病的機體恢復(fù)健康。本生物制劑藥可用于癌病防治,效果顯著,無毒,無副作用。
文檔編號A61K41/00GK1380104SQ0111066
公開日2002年11月20日 申請日期2001年4月16日 優(yōu)先權(quán)日2001年4月16日
發(fā)明者黃金富 申請人:黃金富