專利名稱：一種雙歧桿菌、乳酸桿菌混合活菌滴劑及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種西藥制劑，具體涉及一種用于預(yù)防和治療各種特異、非特異性婦科炎癥和婦科腫瘤的雙歧桿菌、乳酸桿菌混合活菌滴劑以及制備方法。
本發(fā)明是通過下面的技術(shù)方案來解決上述技術(shù)問題的。其特征在于它是從年輕健康婦女陰道穹隆處分離并鑒定出雙歧桿菌、乳酸桿菌各一株，經(jīng)體外誘變培養(yǎng)、耐氧馴化，然后再加入分散劑冷凍干燥后制成。其制備方法是以PYG厭氧菌增菌培養(yǎng)基使上述菌種增菌達(dá)到濃度109～1011/ml以上，取上述濃度菌液10～30％，加10～30％脫脂牛乳、5～15％蔗糖分散劑，10～40％明膠、40～70％甘油賦形劑，充分混合后，于-80℃低溫冰箱30～60分鐘凍結(jié)，22～26小時(shí)內(nèi)-30℃～70℃冷凍干燥，再將兩種菌粉1∶1混合，使每顆藥丸含雙歧桿菌、乳酸桿菌活菌各0.4～0.6億。
本發(fā)明所得菌株生物性狀穩(wěn)定、無耐藥質(zhì)粒存在、耐氧性增強(qiáng)，適合工業(yè)生產(chǎn)。其所用菌株均來源于人體正常菌群，且局部用藥，不會(huì)產(chǎn)生全身副作用；藥物生產(chǎn)中菌液快速冷凍干燥，分散劑較少引起細(xì)菌死亡，兩利細(xì)菌可協(xié)同生長，協(xié)同抗炎、抗感染，抑菌譜較前擴(kuò)大，同時(shí)添加的雙歧桿菌具有抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)作用，使本藥物的適應(yīng)征更廣，屬新型陰道微生態(tài)制劑。
本發(fā)明雙歧桿菌、乳酸桿菌菌株的分離方法是取23～27歲健康已婚未育、無陰道炎婦女陰道穹隆分泌物0.2ml，分別以雙歧桿菌、乳酸桿菌選擇性液體培養(yǎng)基倍比稀釋，取稀釋度10-5～10-7分泌物稀釋液以鉑耳環(huán)劃線分別接種于雙歧桿菌、乳酸桿菌選擇性培養(yǎng)基平皿，厭氧培養(yǎng)24～72小時(shí)，挑單克隆于各自選擇性培養(yǎng)基進(jìn)一步選擇培養(yǎng)，再用法國梅里埃公司生產(chǎn)的AP120A厭氧鑒定試劑條進(jìn)行鑒定，結(jié)合普通光鏡形態(tài)、氣相色譜儀分析，得到長雙歧桿菌、發(fā)酵乳酸桿菌各一株，質(zhì)粒分析發(fā)現(xiàn)均無質(zhì)粒的存在；然后采用菌種體外5代或5代以上進(jìn)行傳代培養(yǎng)，氧濃度5～15％培養(yǎng)環(huán)境下進(jìn)行耐氧馴化。本發(fā)明所得菌株生物性狀穩(wěn)定、無耐藥質(zhì)粒存在、耐氧性增強(qiáng)，適合工業(yè)生產(chǎn)。其細(xì)菌分離所用的選擇性培養(yǎng)基中雙歧桿菌選擇性培養(yǎng)基PH值為6.8～7.2，乳酸桿菌選擇性培養(yǎng)基，PH值為5.8～6.2。
本發(fā)明制備方法以PYG(胰胨酵母復(fù)合培養(yǎng)基)厭氧菌增菌培養(yǎng)基使上述菌種增菌達(dá)到濃度109～1011/ml以上，取上述濃度菌液10～30％，加10～30％脫脂牛乳、5～15％蔗糖分散劑，10～40％明膠、40～70％甘油賦形劑，充分混合后，于-80℃低溫冰箱30～60分鐘凍結(jié)，24小時(shí)內(nèi)-30℃～-70℃冷凍干燥，兩種菌粉1∶1混合即可，制劑為膠囊形式；每顆藥丸含雙歧桿菌、乳酸桿菌活菌各0.5億。
本發(fā)明使用方法使用前將藥丸1顆以配備的平衡液(生理鹽水)10ml充分混合溶解，陰道內(nèi)滴入，早晚各一次。
權(quán)利要求
1.一種雙歧桿菌、乳酸桿菌混合活菌滴劑，其特征在于它是從年輕健康婦女陰道穹隆處分離并鑒定出雙歧桿菌、乳酸桿菌各一株，經(jīng)體外誘變培養(yǎng)、耐氧馴化，然后再加入分散劑冷凍干燥后制成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雙歧桿菌、乳酸桿菌混合活菌滴劑，其特征在于其分離方法是取23～27歲健康已婚未育、無陰道炎婦女陰道穹隆分泌物0.1～0.3ml，分別以雙歧桿菌選擇性培養(yǎng)基和乳酸桿菌選擇性培養(yǎng)基之液體培養(yǎng)基倍比稀釋，取稀釋度10-5～10-7分泌物稀釋液以鉑耳環(huán)劃線分別接種于雙歧桿菌選擇性培養(yǎng)基和乳酸桿菌選擇性培養(yǎng)基平皿，厭氧培養(yǎng)24～72小時(shí)，挑單克隆于各自選擇性培養(yǎng)基進(jìn)一步選擇培養(yǎng)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雙歧桿菌、乳酸桿菌混合活菌滴劑，其特征在于其菌種體外誘變是由菌種體外5代或5代以上反復(fù)傳代培養(yǎng)而成。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雙歧桿菌、乳酸桿菌混合活菌滴劑，其特征在于其耐氧馴化是在氧濃度5～15％環(huán)境下進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的雙歧桿菌、乳酸桿菌混合活菌滴劑，其特征在于雙歧桿菌選擇性培養(yǎng)基之PH為6.8～7.2，乳酸桿菌選擇性培養(yǎng)基PH為5.8～6.2。
6.一種雙歧桿菌、乳酸桿菌混合活菌滴劑制備方法，其特征在于它是以PYG厭氧菌增菌培養(yǎng)基使上述菌種增菌達(dá)到濃度109～1011/ml以上，取上述濃度菌液10～30％，加10～30％脫脂牛乳、5～15％蔗糖分散劑，10～40％明膠、40～70％甘油賦形劑，充分混合后，于-80℃低溫冰箱30～60分鐘凍結(jié)，22～26小時(shí)內(nèi)-30℃～70℃冷凍干燥，再將兩種菌粉1∶1混合，使每顆藥丸含雙歧桿菌、乳酸桿菌活菌各0.4～0.6億。
全文摘要
一種雙歧桿菌、乳酸桿菌混合活菌滴劑,其特征在于它是從年輕健康婦女陰道穹隆處分離并鑒定出雙歧桿菌、乳酸桿菌各一株,經(jīng)體外誘變培養(yǎng)、耐氧馴化,然后再加入分散劑冷凍干燥后制成。其制備方法是:以PYG厭氧菌增菌培養(yǎng)基使上述菌種增菌達(dá)到濃度10
文檔編號(hào)A61K35/74GK1347702SQ01128659
公開日2002年5月8日 申請日期2001年9月30日 優(yōu)先權(quán)日2001年9月30日
發(fā)明者盧放根 申請人:盧放根