專利名稱：用非多肽環(huán)－磷酸腺苷水平調(diào)節(jié)劑誘導(dǎo)排卵的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及通過給予非多肽環(huán)一磷酸腺苷(cAMP)水平調(diào)節(jié)劑誘導(dǎo)排卵來增加雌性宿主生育能力的方法。
背景技術(shù)：
排卵是從卵巢釋放出一個卵子或多個卵子的過程。月經(jīng)周期的排卵時間是受精的首要因素。普遍認(rèn)為，卵泡受到垂體促性腺激素刺激生長和成熟后具有排卵能力。卵泡刺激素(FSH)主要負(fù)責(zé)卵泡生長，而黃體生成激素(LH)刺激排卵。卵泡受促性腺激素刺激成熟的協(xié)調(diào)過程確保了排卵時排出感受態(tài)卵子。該準(zhǔn)備充分的卵子在排卵后數(shù)小時內(nèi)再與精子受精。
排卵是一個精確時控的過程，由卵巢的垂體促性腺激素刺激驅(qū)動，并通過卵泡對促性腺激素刺激生長和生化(例如類固醇生成、抑制素分泌等)應(yīng)答而被修飾。在婦女的正常月經(jīng)周期期間，這些激素呈周期模式。月經(jīng)周期按功能可分為三個時期卵泡期、排卵期和黃體期。上一個非妊娠周期的黃體期結(jié)束，則卵泡期開始，先于或與月經(jīng)開始同時發(fā)生。一個周期開始，F(xiàn)SH在血液中的水平瞬時上升，刺激一批卵泡發(fā)育。采集的生長卵泡直徑約為5毫米。在自然月經(jīng)周期中，通常在卵泡期中建立一個大或優(yōu)勢卵泡，使它生長至成熟。被考慮可以排出的人卵泡的直徑約15毫米或以上。
在卵泡期中卵巢內(nèi)發(fā)生的第二件關(guān)鍵事件是卵泡內(nèi)粒細(xì)胞獲得LH受體，從而逐漸增大對LH的應(yīng)答。首先，卵巢慢慢分泌雌二醇和雌酮，隨著卵泡直徑增大以及卵泡對LH的靈敏度增加而增多。雌激素和抑制素水平相對升高，造成下丘腦分泌促性腺激素釋放激素(GnRH)和垂體分泌促性腺激素。在LH峰前一天雌激素的產(chǎn)生到達(dá)最高水平，對雌激素升高和孕酮濃度緩慢增加的神經(jīng)內(nèi)分泌應(yīng)答是排卵前釋放促性腺激素，下文將作進(jìn)一步討論。
在排卵期期間，對雌激素和孕酮的神經(jīng)內(nèi)分泌應(yīng)答發(fā)生改變。在周期此時，雌激素上升引發(fā)排卵前血清中出現(xiàn)FSH和LH峰，這是由于對下丘腦的正反饋造成的，此時雌激素刺激GnRH水平迅速上升，隨后FSH和LH從垂體釋放出來。促性腺激素峰誘導(dǎo)卵泡成熟完成，并使優(yōu)勢卵泡或格雷夫氏卵泡破裂，在出現(xiàn)LH峰之后約16至24小時排出卵子。在排卵前出現(xiàn)峰之后的期間內(nèi)，血清雌二醇水平暫時下降，血漿孕酮水平開始上升。
在排卵之后，后排卵的卵泡細(xì)胞受LH影響而黃體化，形成黃體，即是黃體期。月經(jīng)周期中黃體期的診斷標(biāo)記物是黃體分泌的孕酮明顯增多，以及應(yīng)答孕酮中出現(xiàn)的子宮的變化。與黃體孕酮生成相關(guān)的是，血清雌激素水平增幅較少。在黃體期的大部分時間內(nèi)，LH和FSH隨著孕酮和雌激素上升而下降。接近非妊娠月經(jīng)周期的黃體期結(jié)束，黃體消退，而血清FSH水平開始上升，啟動下一個周期的卵泡生長。
FSH和LH以各自刺激卵泡發(fā)育或排卵的能力來相互區(qū)別。眾所周知，兩者均能刺激胞內(nèi)cAMP濃度增大。業(yè)已表明，與cAMP相似的兩種藥劑，例如弗司扣林(forskolin)或cAMP穩(wěn)定類似物，在體外具有與FSH對未成熟卵泡的粒細(xì)胞的類似作用，以及具有與LH對成熟卵泡的細(xì)胞的類似作用。雖然有人提出FSH和LH的可替換胞內(nèi)通道，但cAMP被刺激是應(yīng)答該兩種促性腺激素的觀點(diǎn)已被普遍接受。如果和當(dāng)cAMP水平的升高與卵泡發(fā)育和卵泡成熟有關(guān)時，排卵誘導(dǎo)取決于細(xì)胞類型和各自的受體是否存在。事實(shí)上已經(jīng)證明，缺乏特定磷酸二酯酶的小鼠排卵受損，而且粒細(xì)胞對促性腺激素的靈敏度減弱。
目前臨床采用的不孕癥治療結(jié)合上述一些調(diào)控事件。氯米芬(clomiphene)是刺激卵泡生長，并可用于治療不排卵的其中一種藥劑。氯米芬是一種非類固醇抗雌激素，在雌激素的結(jié)合位點(diǎn)上與雌激素競爭。一般認(rèn)為，氯米芬與下丘腦和垂體內(nèi)的雌激素受體結(jié)合，并且阻斷卵巢雌激素施加的負(fù)反饋。此結(jié)果造成卵泡早期促性腺激素(FSH和LH)生成增加。氯米芬的作用是增加內(nèi)源性FSH血清水平以及改善卵泡生長和成熟。內(nèi)源性LH或者外源性LH/CG再誘導(dǎo)這些患者排卵。
除了氯米芬之外，用排卵誘導(dǎo)方案治療婦女，包括市售的人促性腺激素制劑，包括卵泡刺激素(FSH)和黃體生成激素(LH)或者絨毛膜促性腺激素(CG)，所有這些激素最初是通過純化妊娠婦女的尿而獲得的，最近則利用重組技術(shù)獲得。通常，這種治療方法在刺激卵泡生成和類固醇生成方面極為有效。治療引起的并發(fā)癥是因?yàn)檫@些制劑和方案能夠過度刺激卵泡發(fā)育和卵泡成熟所致。在一小組患者中，其卵巢被過度刺激，導(dǎo)致超數(shù)排卵，最后發(fā)生多胎出生。卵巢過度刺激不但威脅到母親的生命安全，而且往往造成新生兒出生體重低，這樣一些新生兒需要加強(qiáng)護(hù)理。一般認(rèn)為，促性腺激素誘導(dǎo)的過度刺激和多胎妊娠引起的主要并發(fā)癥可能是hCG的作用時間延長所致。另外，在排卵誘導(dǎo)方案中使用促性腺激素可導(dǎo)致在注射部位有反應(yīng)，包括局部性或全身性。因此，與使用高效注射藥劑的治療相比，研究使用口服有較弱類促性腺激素活性的活性藥劑的排卵誘導(dǎo)方案可能產(chǎn)生顯著有益的效果。更重要的是，如果可以開發(fā)排卵誘導(dǎo)方案，使卵巢過度刺激減少，從而降低對母親的危險以及生產(chǎn)健康新生兒，它具有明顯的優(yōu)點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明第一方面提供非多肽環(huán)一磷酸腺苷(cAMP)水平調(diào)節(jié)劑，優(yōu)選是磷酸二酯酶(PDE□抑制劑，更好是PDE4抑制劑在制備誘導(dǎo)患者排卵的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明第二方面提供非多肽環(huán)cAMP水平調(diào)節(jié)劑，優(yōu)選是PDE抑制劑，更好是PDE4抑制劑在誘導(dǎo)患者排卵中的應(yīng)用。
本發(fā)明第三方面提供非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑，優(yōu)選是PDE抑制劑，更好是PDE4抑制劑在制備一種治療方案中誘導(dǎo)患者排卵的藥物中的應(yīng)用，在所述方案中，誘導(dǎo)排卵之前先用氯米芬或芳香酶抑制劑誘導(dǎo)卵泡成熟，優(yōu)選的芳香酶抑制劑選自YM-511、來曲唑(letrozole)、法倔唑(fadrozole)和阿那曲唑(anastrazole)，更好是選自來曲唑和阿那曲唑。
本發(fā)明第四方面提供非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑，優(yōu)選是PDE抑制劑，更好是PDE4抑制劑在一種治療方案中誘導(dǎo)患者排卵中的應(yīng)用，在所述方案中，誘導(dǎo)排卵之前先用氯米芬或芳香酶抑制劑誘導(dǎo)卵泡成熟，優(yōu)選的芳香酶抑制劑選自YM-511、來曲唑、法倔唑和阿那曲唑，更好是選自來曲唑和阿那曲唑。
本發(fā)明第五方面提供一種用于誘導(dǎo)排卵的試劑盒，該試劑盒包括排卵誘導(dǎo)劑量的非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑，優(yōu)選是PDE抑制劑，更好是PDE4抑制劑，和誘導(dǎo)排卵的使用說明書。
本發(fā)明第六方面提供一種用于排卵誘導(dǎo)和/或輔助生殖技術(shù)(ART)的試劑盒，該試劑盒包括足夠的每日劑量的FSH和/或具有FSH作用的化合物，優(yōu)選是氯米芬或芳香酶抑制劑，更好是選自YM-511、來曲唑、法倔唑和阿那曲唑的芳香酶抑制劑，以引發(fā)卵泡成熟，和排卵誘導(dǎo)劑量的非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑，優(yōu)選是PDE抑制劑，更好是PDE4抑制劑，以及該試劑盒在誘導(dǎo)排卵或ART中的使用說明書。
本發(fā)明第七方面提供非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑，優(yōu)選是PDE抑制劑，更好是PDE4抑制劑在一種治療方案中誘導(dǎo)患者排卵中的應(yīng)用，在所述方案中，還給予hCG或LH誘導(dǎo)排卵，而給予的hCG或LH劑量與正常情況下誘導(dǎo)同一個患者排卵所需的hCG或LH量相比是降低的。
本發(fā)明涉及提高雌性宿主生育能力的方法，所述方法包括把非多肽環(huán)一磷酸腺苷(cAMP)水平調(diào)節(jié)劑給予該雌性宿主。本發(fā)明另一方面提出在排卵周期的黃體期之前特異性給予非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑，誘導(dǎo)優(yōu)勢成熟卵泡排卵。優(yōu)選的非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑包括磷酸二酯酶(PDE)抑制劑，特別是磷酸二酯酶4同種型的抑制劑。
雖然PDE抑制劑在體外對粒細(xì)胞中LH刺激的類固醇生成的影響已有報導(dǎo)，但本發(fā)明敘述兩個新發(fā)現(xiàn)。首先，PDE抑制劑在體內(nèi)不能增強(qiáng)FSH刺激的卵泡生長，盡管FSH和LH細(xì)胞通道中cAMP的作用已為人所接受。此外，有證據(jù)顯示，PDE抑制劑在體外能夠增加促性腺激素刺激的類固醇生成，這進(jìn)一步說明了PDE抑制劑對LH依賴性排卵有新的活性。第二，在缺少添加LH或hCG的情況下，PDE抑制劑在體內(nèi)增加排卵率?？紤]到PDE抑制劑的口服活性，第二個發(fā)現(xiàn)為排卵誘導(dǎo)中首次可能采用非注射方案提供了基礎(chǔ)，因?yàn)镻DE抑制劑可與下文所述的現(xiàn)有方案結(jié)合使用。
本發(fā)明還提出在給予非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑之前刺激卵泡發(fā)育，包括在宿主排卵周期的卵泡期期間給予能增大FSH濃度的藥劑。本發(fā)明增加FSH的目的僅涉及卵泡發(fā)育和成熟，并不涉及排卵誘導(dǎo)。優(yōu)選的藥劑包括FSH本身、氯米芬、選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑、芳香酶抑制劑和神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)節(jié)FSH生成的選擇性調(diào)節(jié)劑。
本發(fā)明另一方面提供在雌性宿主排卵周期的黃體期之前共給予非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑與LH或絨毛膜促性腺激素(CG)。共給予可先后或同時發(fā)生，輸送方式可相同或不同(例如腸胃外和/或口服)。另外，與現(xiàn)有排卵誘導(dǎo)方案中使用的LH或CG濃度相比，本發(fā)明使用的給予宿主的LH或CG的濃度更低，從而減少卵巢過度刺激的可能性。
本發(fā)明還提供非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑作為治療藥劑在體外受精采集卵母細(xì)胞中取代或增強(qiáng)hCG或LH的作用中的應(yīng)用。
所以，本發(fā)明提供非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑作為一小分子治療劑(例如磷酸二酯酶抑制劑)的應(yīng)用，其以口服而非注射方式給予，對于蛋白質(zhì)按要求的途徑給予口在現(xiàn)有排卵誘導(dǎo)方案中按給藥方式給予。口服給藥避免了與注射相關(guān)的急性和全身性副作用。最重要的是，小分子治療劑誘導(dǎo)排卵是有效的，可單獨(dú)給予或者與LH或CG結(jié)合或不結(jié)合，可選擇的LH或CG的濃度比現(xiàn)時使用的濃度低，因此，較少機(jī)會發(fā)生卵巢過度刺激及其相關(guān)危險。故可防止母親和新生兒出現(xiàn)多胎出生和有生命威脅的并發(fā)癥。另外，本發(fā)明還提供比現(xiàn)有涉及使用CG的排卵誘導(dǎo)方案更早的妊娠診斷測試機(jī)會。
本發(fā)明的治療方法將用于治療人和其他哺乳動物(例如馬和牲畜，譬如牛、綿羊、奶牛等)及其他物種例如魚類(譬如魚)和鳥類((譬如鳥)的不孕癥。


圖1所示為人的通用排卵誘導(dǎo)方案的示意圖。
圖2所示為磷酸二酯酶抑制劑(即化合物1和化合物2)在體外對增加粒細(xì)胞胞內(nèi)cAMP水平的影響的柱狀圖。
圖3所示為磷酸二酯酶抑制劑(即化合物1)在體內(nèi)對大鼠卵泡成熟的影響的柱狀圖。
圖4所示為磷酸二酯酶抑制劑(即化合物1)在體內(nèi)對大鼠用CG排卵的影響的柱狀圖。
圖5所示為磷酸二酯酶抑制劑(即化合物1)在體內(nèi)對大鼠用或不用CG排卵的影響的柱狀圖。
圖6所示為磷酸二酯酶抑制劑(即化合物2)在體內(nèi)對大鼠用或不用CG排卵的影響的柱狀圖。
圖7所示為磷酸二酯酶抑制劑(即化合物2)對口服和皮下給藥之后排卵的影響的柱狀圖。
圖8所示為磷酸二酯酶抑制劑化合物3對口服和皮下給藥之后排卵的影響的柱狀圖。
圖9所示為磷酸二酯酶抑制劑化合物4在體內(nèi)對次有效劑量hCG存在或不存在下排卵的影響的柱狀圖。
圖10所示為磷酸二酯酶抑制劑化合物2對排卵和生育的影響的柱狀圖。
具體實(shí)施例方式
I.定義一般來說，下列字句或詞語在本說明書、實(shí)施例或權(quán)利要求書中使用時有指定的定義。
“給予”指把治療劑遞送到雌性宿主。在本發(fā)明上下文中，該術(shù)語將包括遞送非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑和/或增大FSH濃度的藥劑。該術(shù)語在下文題為“藥物組合物”的部分中有完整描述。
本文所用的“排卵”指從卵巢釋放出一個卵子或多個卵子的過程。隨著周期中期的來臨，雌激素大幅升高，然后出現(xiàn)LH峰和幅度較低的FSH峰。這時引發(fā)優(yōu)勢卵泡排卵。排卵包括卵泡快速增大，隨后卵泡自卵巢皮層表面突出。最終卵泡破裂導(dǎo)致擠出卵丘復(fù)合體。該優(yōu)勢卵泡的其余部分再重組變成黃體。
“不排卵”指沒有排卵。
“非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑”指整體上不是由氨基酸組成，不論是否有糖基化，能直接或間接作用增加胞內(nèi)cAMP水平的化合物。這些化合物可通過刺激cAMP合成或者抑制其降解，或者通過這二方面作用來增加cAMP水平?？稍黾觕AMP合成的調(diào)節(jié)劑的例子包括腺苷酸環(huán)化酶激活劑，例如弗司扣林。可降低cAMP降解的調(diào)節(jié)劑的例子包括磷酸二酯酶抑制劑，例如茶堿。
“雌性宿主”指根據(jù)本發(fā)明被給予藥劑的物種的雌性個體。本文定義包括人或其他哺乳動物和其他物種，例如魚和鳥。
“磷酸二酯酶抑制劑”指阻斷或抑制磷酸二酯酶(PDE)的化合物，其作用是通過水解切割3’-磷酸二酯鍵使PDE的環(huán)核苷酸靶(即cAMP和cGMP)失活，導(dǎo)致特異性環(huán)核苷酸被動積聚。抑制劑可以對全部磷酸二酯酶同種型是無選擇性的，或者對特異性同種型有選擇性。參見下文引述的化合物。
“磷酸二酯酶同種型”指負(fù)責(zé)胞內(nèi)第二信使cAMP和cGMP的代謝或降解的一族同工酶或同種型。特異性同種型可能具有高度選擇性的細(xì)胞或亞細(xì)胞定位。磷酸二酯酶同種型的例子包括PDE3和PDE4。
“卵泡期”指月經(jīng)周期的第一個階段，其特點(diǎn)是格雷夫氏卵泡發(fā)育導(dǎo)致雌二醇和抑制素B循環(huán)水平逐漸增大。
“在黃體期之前”指月經(jīng)周期從雌激素主導(dǎo)的卵泡期轉(zhuǎn)為孕酮主導(dǎo)的黃體期之前的階段。在黃體期之前，對于直徑為16毫米的卵泡，雌激素水平一般大于或等于150pg/ml/卵泡，卵泡直徑通常不小于14毫米。這些標(biāo)準(zhǔn)不是絕對的，因不同患者而異。在本發(fā)明上下文中，就非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑的給予時間而言，在現(xiàn)有排卵誘導(dǎo)方案中正常情況下將hCG或LH給予所述雌性宿主的時間點(diǎn)為給予該宿主非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑的時間。
“排卵周期”或“月經(jīng)周期”指在一種物種的一段特定時間內(nèi)發(fā)生的一系列周期性事件，包括卵泡生長和發(fā)育、募集、選擇、長成優(yōu)勢、排卵以及黃體形成和消失。該周期按功能可分為三個時期卵泡期、排卵期和黃體期。也可將這一周期稱為月經(jīng)周期。
“排卵誘導(dǎo)”指使用多肽和/或合成化學(xué)物質(zhì)引致不排卵的雌性宿主排卵，從而誘導(dǎo)卵泡破裂和排出可受精卵母細(xì)胞的過程。排卵誘導(dǎo)不包括卵泡成熟和發(fā)育的排卵周期中發(fā)生的先行事件。
“卵巢過度刺激”指從藥理上干預(yù)排卵或不排卵月經(jīng)周期。它需要多個卵泡成熟，使許多卵泡呈現(xiàn)共顯性，得到多個可受精的卵母細(xì)胞。
“卵泡”指卵子周圍填充有體液的小囊，該小囊還含有粒細(xì)胞。
“卵泡發(fā)育”指卵泡的逐漸生長和發(fā)育，特別是在排卵周期的卵泡期期間，以致可采集預(yù)定排卵的卵泡，并使該卵泡長成優(yōu)勢。
“卵泡刺激素(FSH)及同種型”指由垂體釋放的一種刺激卵泡生長的激素及FSH同種型，例如參照納入本文作為參考的美國專利申請?zhí)朥S5,087,615中所描述。
“選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑”指在下丘腦和腦下垂體水平上作為雌激素受體拮抗劑和在子宮水平上作為激動劑的化合物或多肽。這些調(diào)節(jié)劑的例子可包括他莫西芬(tamoxifen)、雷諾昔芬(raloxifene)、托瑞米芬(toremifene)、氯米芬和屈洛昔芬(droloxifene)。納入下列文獻(xiàn)作為參考Endocrinology，1999December138(12)5476-5484。
“芳香酶抑制劑”指阻斷或抑制將雄激素轉(zhuǎn)化為雌激素的芳香酶活性的化合物或多肽。芳香酶抑制劑的例子包括來曲唑、阿那曲唑和伏羅唑(vorozole)。納入下列文獻(xiàn)作為參考1)Journal of Endocrinology，2000 Feb164(2)224-238；2)Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology，1997April61(3-6)157-166。
“有關(guān)類固醇生成的酶”指參與合成雌激素和孕酮的生化反應(yīng)中催化作用的任何一種酶，包括3-β-羥基類固醇脫氫酶，這種酶的抑制劑包括黃豆甙原(daidzein)、三羥基異黃酮(genistein)、鷹嘴豆素A(biochanin A)和芒柄花黃素(formononetin)。納入下列文獻(xiàn)作為參考Journal of Steroid Biochemistry andMolecular Biology，1996 April58(1)95-101。
“氯米芬”指2-[4-(2-氯-1，2-聯(lián)苯基乙烯基)苯氧基]-N，N-二乙基乙胺及其鹽。
“黃體生成激素(LH)”指由垂體釋放出來的一種激素，起著使優(yōu)勢卵泡釋放卵子和刺激黃體分泌孕酮的雙重作用。
“降低濃度”指當(dāng)與所給予藥劑的標(biāo)準(zhǔn)水平相比，該藥劑的給予濃度降低。在本發(fā)明上下文中，給予的LH和CG的濃度比現(xiàn)有排卵誘導(dǎo)方案低。
“現(xiàn)有排卵誘導(dǎo)方案”指目前誘導(dǎo)排卵的方法，包括使用氯米芬、促性性激素(例如FSH、LH和CG)或這些藥劑的組合，以促進(jìn)不排卵雌性卵泡生成和誘導(dǎo)排卵。這些方案在藥劑的給藥時間、頻率和濃度是可變化的。該定義包括對現(xiàn)有方案的修改，但在排卵誘導(dǎo)方案期間的某些時間點(diǎn)仍需要給予hCG或LH。納入關(guān)于雌性不孕癥、刺激的卵泡生成和排卵誘導(dǎo)的下列論文作為參考Reproductive Endocrinology，Surgery，and Technology，Volumes 1and 2；EditorsE.Y.Adashi，J.A.Rock and Z.Rosenwaks；Lippincott-RavenPublishers，Philadelphia，199；Female Infertility Therapy Current Practice；EditorsZ.Shoham，C.M.Howles and H.S.Jacobs；Martin Dunitz Ltd，London，1999。
“絨毛膜促性腺激素(CG)”指一種生理和免疫上與垂體LH相似的糖蛋白激素。在正常妊娠中，CG由胎盤產(chǎn)生，因?yàn)槠渌皆谘鍧舛戎猩?，故可用作妊娠的診斷標(biāo)記物?？s寫hCG是指人絨毛膜促性腺激素。
“增大FSH濃度的藥劑”指物質(zhì)、蛋白或合成化學(xué)物質(zhì)的任何組合物，當(dāng)被給予雌性宿主時，通過給予FSH本身或一種能刺激其內(nèi)源性產(chǎn)生或抑制其內(nèi)源性降解的藥劑，它能直接或間接地增大血清中FSH的濃度。該詞組和藥劑的定義包括可能不會增大FSH濃度，但具有刺激素生物功能和活性的化合物。
II.排卵誘導(dǎo)方案的原則自上世紀(jì)六十年代以來已經(jīng)確認(rèn)，不足夠或不適當(dāng)促性腺激素水平等問題是造成排卵障礙的原因。使用的各種促性腺激素制劑的臨床效果與FSH的給予量成比例。最初證據(jù)顯示，在排卵誘導(dǎo)期間獲得足夠的排卵生成不需要外源性LH。然而，越來越明顯的是，僅給予外源性FSH的婦女無法產(chǎn)生足夠的卵泡雌二醇進(jìn)行排卵誘導(dǎo)。在人進(jìn)行排卵誘導(dǎo)時至少給予一定量的外源性或內(nèi)源性LH似乎是重要的。圖1所示為通用排卵誘導(dǎo)方案的示意圖。最初7天每日給予75IU FSH制劑。第7天結(jié)束，進(jìn)行超聲波掃描評估卵泡直徑，并測定血清雌二醇水平。如果卵泡直徑少于12毫米，將FSH劑量增加一倍，在下一個5至7天期間進(jìn)行超聲波掃描。卵泡直徑≥15毫米的患者接受排卵推注劑量的hCG。
III.通用排卵誘導(dǎo)方案排卵誘導(dǎo)是一門結(jié)合科學(xué)的藝術(shù)。雖然有很多治療方案，但沒有一種方法或特定的方案是唯一正確的。某些原則確實(shí)是適用的，但也只提供了安全有效治療的基礎(chǔ)。然而，應(yīng)當(dāng)注意，以下陳述的誘導(dǎo)排卵標(biāo)準(zhǔn)僅作為舉例說明目的，可隨著臨床情況、患者本人及治療目的而有很大變化。
第一個周期通常涉及在月經(jīng)結(jié)束第4天至第7天開始每日給予FSH。通過雌激素水平和超聲波監(jiān)測卵泡生長和反應(yīng)。連續(xù)7至14天給予FSH一般可達(dá)到足夠的卵泡刺激。用FSH治療少于8天會增加妊娠患者的自然流產(chǎn)率。
一旦獲得足夠的卵泡發(fā)育(有2個16至18毫米的卵泡，而且血清雌激素逐漸上升至500-1,000pg/ml)，才給予hCG(5,000或10,000IU)。hCG的給予時間非常重要，這是因?yàn)閔CG的作用時間延長可能導(dǎo)致促性腺激素誘導(dǎo)的過度刺激和多胎妊娠引起的主要并發(fā)癥。雖然hCG的半衰期約為8小時，但注射后7至10天在患者的血液中還可被檢測到，并有可能被誤診為妊娠治療獲得成功。給予hCG之后，指示夫婦在當(dāng)晚性交，而接下來的48小時還需要作多1或2次性交。
關(guān)于給予促性腺激素的基本準(zhǔn)則是每個治療周期必須因人而異，并要監(jiān)測和作適當(dāng)調(diào)整。監(jiān)測不僅對增加排卵和妊娠率是必要的，而且對于減少嚴(yán)重的卵巢過度刺激，其產(chǎn)生的可能后果及多胎妊娠也是不可缺少的。
這可通過經(jīng)常測定血漿/血清雌二醇水平和超聲波檢查卵巢來達(dá)到。雌二醇水平一般與生長卵泡數(shù)有關(guān)，但與成熟卵泡數(shù)無必然聯(lián)系。依靠雌二醇水平作為卵泡成熟的標(biāo)記物，在有多個小卵泡存在下可能會錯誤提示卵泡已經(jīng)成熟，以致在成熟前給予hCG。因?yàn)槁雅萆L與卵子成熟直接相關(guān)，所以超聲波評估平均卵泡直徑可作為評估卵泡成熟及hCG給予時間的較好指標(biāo)。因此，雌二醇水平應(yīng)該用來評估早期卵泡發(fā)育，作為對促性腺激素反應(yīng)的指標(biāo)，超聲波應(yīng)用來評估成熟卵泡的數(shù)目和尺寸。
大部分治療的目的是使單胎妊娠的可能性最大化，同時減少過度刺激綜合征的風(fēng)險。雌二醇水平在1000至1500pg/mL之間似乎是最佳的，但實(shí)際水平可取決于使用的實(shí)驗(yàn)室和醫(yī)生的經(jīng)驗(yàn)?；忌线^度刺激的風(fēng)險隨雌二醇水平上升而增加。通常，當(dāng)血清雌二醇超過2000pg/mL，給予hCG時應(yīng)該十分謹(jǐn)慎，或者應(yīng)停止給予以便使卵泡退回。低促性腺激素性功能減退癥在妊娠周期患上數(shù)值大于2400pg/mL的嚴(yán)重過度刺激的風(fēng)險是5％，在非妊娠周期是1％。此外，因?yàn)檫^度刺激傾向與已有的卵泡數(shù)相互關(guān)聯(lián)，所以停止給予hCG的決定還可基于用超聲波發(fā)現(xiàn)有10個或以上的發(fā)育卵泡這一結(jié)果。
納入下列關(guān)于雌性不孕癥、刺激的卵泡生成和排卵誘導(dǎo)的論文作為參考Reproductive Endocrinology，Surgery，and Technology，Volumes 1 and 2；EditorsE.Y.Adashi，J.A.Rock and Z.Rosenwaks；Lippincott-Raven Publishers，Philadelphia，199；Female Infertility Therapy Current Practice；EditorsZ.Shoham，C.M.Howles and H.S.Jacobs；Martin Dunitz Ltd，London，1999。
IV.本發(fā)明的方法本發(fā)明涉及一種排卵誘導(dǎo)的方法，包括在一種排卵誘導(dǎo)方案中給予非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑，給予該調(diào)節(jié)劑可以增強(qiáng)或取代通常在誘導(dǎo)或自然排卵周期的黃體期之前給予的hCG(或LH)。調(diào)節(jié)劑可單獨(dú)給予或者與hCG(或LH)同時或先后共給予，輸送方式可以不同(例如腸胃外和/或口服)。
本發(fā)明另一方面提供在雌性宿主排卵周期的黃體期之前，同時或先后共給予非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑與LH(或CG)。另外，因?yàn)橐话阆嘈舎CG的作用時間延長可能導(dǎo)致促性腺激素誘導(dǎo)的過度刺激和多胎妊娠引起的主要并發(fā)癥，所以本發(fā)明提供給予宿主所用的LH或CG濃度與現(xiàn)有排卵誘導(dǎo)方案中所用的濃度相比是降低的，因此減少卵巢過度刺激的可能性，最后避免了與此條件相關(guān)的副作用多胎出生、新生兒體重低及影響母親健康的并發(fā)癥。
應(yīng)當(dāng)注意，在排卵周期期間給予非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑對卵泡成熟和發(fā)育沒有治療作用。
所以，本發(fā)明涉及誘導(dǎo)雌性宿主排卵的方法，包括把非多肽環(huán)一磷酸腺苷(cAMP)水平調(diào)節(jié)劑給予該雌性宿主。非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑的作用直接或間接地增加胞內(nèi)cAMP水平。這些化合物通過刺激cAMP合成或抑制其降解，或者通過這二方面作用增加cAMP水平。可增加cAMP合成的調(diào)節(jié)劑的例子包括腺苷酸環(huán)化酶激活劑，例如弗司扣林?？山档蚦AMP降解的調(diào)節(jié)劑的例子包括磷酸二酯酶抑制劑，例如茶堿。優(yōu)選的非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑包括磷酸二酯酶抑制劑，特別是磷酸二酯酶4同種型的抑制劑。
本發(fā)明另一方面提出在宿主排卵周期的黃體期之前特異性給予非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑。作為排卵誘導(dǎo)方案中hCG的增強(qiáng)劑或替代物，在該排卵誘導(dǎo)方案中，hCG通常在排卵周期接近卵泡期結(jié)束但在黃體期之前的時間內(nèi)給予。給予非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑的優(yōu)選時間是宿主排卵周期的黃體期之前。
本發(fā)明還提出在給予非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑誘導(dǎo)排卵之前刺激卵泡發(fā)育，包括在宿主排卵周期的卵泡期期間給予能增大FSH濃度的藥劑。優(yōu)選的藥劑包括FSH本身、氯米芬、選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑、芳香酶抑制劑以及不是FSH但有FSH生物功能和活性的試劑。所以，本發(fā)明要求保護(hù)在指定時間給予本文所述與卵泡生長和成熟有關(guān)的藥劑，改善排卵過程和隨后要懷孕必須進(jìn)行的受精過程。
應(yīng)當(dāng)注意，當(dāng)單獨(dú)給予非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑，以及不與hCG共給予時，本發(fā)明提供比現(xiàn)有涉及使用CG的排卵誘導(dǎo)方案更早的妊娠診斷測試機(jī)會。
V.磷酸二酯酶抑制劑至于磷酸二酯酶抑制劑用作非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑，基本上任何一種無毒性的PDE抑制劑都可用在本發(fā)明的方法中，包括選擇性和非選擇性PDE4抑制劑。合適的非選擇性PDE4抑制劑和PDE3/PDE4組合抑制劑包括茶堿、異丁基甲基黃嘌呤、AH-21-132、Org-30029(Organon)、Org-20241(Organon)、Org-9731(Organon)、扎達(dá)維林(Zardaverine)、長春西汀(vinpocetine)、EHNA(MEP-1)、咪利酮(Milrinone)、氰胍佐旦(Siguazodan)、扎普司特(Zaprinast)、SK+F 96231、托拉芬群(Tola6entrine)(Byk Gulden)、非明司特(Filaminast)(Wyeth-Ayerst藥廠)。
特別優(yōu)選的是對PDE4有特異性的選擇性抑制劑。許多公知的選擇性PDE4抑制劑屬于六種化學(xué)結(jié)構(gòu)之一類咯利普蘭(rolipram-like)、黃嘌呤、硝喹宗(nitraquazones)、苯并呋喃、萘和喹啉。類咯利普蘭類似物的例子包括咯利普蘭的咪唑烷酮和吡咯烷酮類似物，例如Ro 20-1724以及咯利普蘭的苯甲酰胺衍生物，例如RP 73401(Rhone-Poulenc Rorer藥廠)。黃嘌呤類似物包括登布茶堿(Denbufylline)(SmithKline Beecham藥廠)和阿羅茶堿(Arofylline)(Almirall藥廠)；硝喹宗類似物包括CP-77,059(Pfizer)及一系列吡啶[2，3d]噠嗪-5-酮(Syntex)；苯并呋喃類似物包括EP-685479(Bayer)；萘類似物包括T-440(Tanabe Seiyaku)；喹啉類似物包括SDZ-ISQ-844(Novartis)。
更優(yōu)選的是下列化合物WO 97/42174(Pfizer，Inc.)公開的化合物 式中，R1是環(huán)戊基或環(huán)己基，R2是乙基，R3是羧酸、酯或伯酰胺、羥甲基或羰基，R4是氰基；美國專利號US5,710,160和5,710,170(Merck Frost Canada，Inc.)公開的化合物 式中，R選自H、CO-(4-甲哌嗪基)、CO-(吡咯烷基)、CHNOH、5-四唑基、(CH)OHCH3、COCH3、CONHSO2CH3、CONHSO2Ph、CONHSO2CF3、CONHSO2C6H4CH3(鄰)、CH2CONHSO2Ph、CH2CONHSO2CF3、COH(CF3)2和SO2NHCOC6H4CH3(鄰)。
WO 98/2007(Darwin Discovery)公開的化合物，以下式表示 WO 98/14432(Janssen Pharm NV)公開的化合物， 式中，R1是H或CH3，R2是CH3或CHF2，R3是環(huán)戊基、茚滿基、環(huán)丙基甲基、Ph(CH2)5、THF。
WO 98/18796(Novartis)公開的化合物
式中，X是NH2、OH、NHPh、NPh2、Ph、C6H4CO2H，Y是Cl、CN、NO2。
WO 97/49702(Pfizer，Inc.)公開的化合物，以下式表示 WO 97/48697(Rhne-Poulenc Rorer)公開的化合物 式中，R1是環(huán)戊基、環(huán)丙基、Ph(CH2)3、苯甲基或H，R2是CH3、苯甲基、甲苯磺?；騂，R3是CH3或Cl，A是CH、C-烷基、O或N，B是C或N。
WO 98/02440(Bayer AG)公開的化合物 式中，R1是CH3、OH、Oallyl、OCH3、C2H5、丙基或乙?；琑2是3-Cl、2，4-Cl2、3-NO2、3-Br、4-F、4-Cl、2，4-(CH3)2或2，4(CH3O)2。
WO 97/44337、WO 97/44036、WO 97/44322(Chiroscience Ltd.)公開的化合物
式中，R1是CH3、乙基或丙基，R2和R3獨(dú)立地選自H、任意取代的芳基或雜芳基，R4和R5獨(dú)立地選自?；?、烷基(可被OH或鹵素任意取代的)、芳基、雜芳基以及被芳基或雜芳基取代的?；?。
美國專利號US6,303,789(Byk Gulden Lomberg Chemische Fabrik GmbH)公開的化合物，以及這些化合物的鹽和其吡啶N-氧化物或其鹽 式中，R1是被氟完全或主要取代的1-6C-烷氧基、3-7C-環(huán)烷氧基、3-7C-環(huán)烷基甲氧基、芐氧基或1-4C-烷氧基；R2是氫；R3是氫；或者R2和R3都是亞甲基；R4是被氟完全或主要取代的氫、1-8C-烷基、1-6C-烷氧基-1-4C-烷基、1-6C-烷基硫-1-4-烷基、1-6C-烷基亞磺酰基-1-4C-烷基、1-6C-烷基磺?；?1-4C-烷基、1-8C-烷基羰基、3-7C-環(huán)烷基、3-7C-環(huán)烷基甲基、苯基-1-4C-烷基或1-4C-烷基；R5是苯基、吡啶基、被R51、R52和R53取代的苯基或者被R54、R55、R56和R57取代吡啶基，其中R51是羥基、鹵素、氰基、羧基、三氟甲基、1-4C-烷基、1-4C-烷氧基、1-4C-烷氧基羰基、1-4C-烷基羰基、1-4C-烷基羰氧基、氨基、一或二-1-4C-烷基氨基或1-4C-烷基羰基氨基；R52是氫、羥基、鹵素、氨基、三氟甲基、1-4C-烷基或1-4C-烷氧基；R53是氫、鹵素、1-4C-烷基或1-4C-烷氧基；R54是羥基、鹵素、氰基、羧基、1-4C-烷基、1-4C-烷氧基、1-4C-烷氧基羰基或氨基；R55是氫、鹵素、氨基、或1-4C-烷基；R56是氫或鹵素；R57是氫或鹵素；n是1或2；m是1或2；而m和n的總和只可以是2或3。
美國專利號US6,316,472(Merck Frosst Canada)公開的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或水合物
式中，Y表示N或N-氧化物；y表示0、1或2；R1和R2獨(dú)立地選自H、C1-6烷基和鹵代C1-6烷基，R3和R4獨(dú)立地選自H和C1-6烷基，或者連接于同一個碳原子上的R3和R4一起表示羰基氧原子，或者連接于不同碳原子上的R3和R4與它們連接的碳原子以及任何介入的原子綜合考慮，表示5-、6-或7-元飽和碳環(huán)，R5和R6獨(dú)立地表示選自H、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基和CN的其中一個成員；n表示0至6的整數(shù)；Ar1是芳基。
特別優(yōu)選的是下列化合物咯利普蘭、阿羅茶堿(Almirall藥廠)、Ariflo(SmithKline Beecham)、Roflumilast(Byk Gulden)、登布茶堿(SmithKline Beecham)、RS-17597(Syntex)、SDZ-ISQ-844(Novartis)、4-[2，3-二(羥甲基)-6，7-二乙氧基萘基]-1-(2-羥乙基)氫化吡啶-2-酮(T-440；Tanabe Seiyaku)、3-[6-(2H-3，4，5，6-四氫吡喃-2-基氧基)-2-(3-噻吩基羰基)苯并[b]呋喃-3-基]丙酸甲酯(Bayer)、2-甲基-1-[2-(甲乙基)(8-氫化吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基)]丙-1-酮(Ibudilast；Kyorin)、N-(3，5-二氯(4-吡啶基))(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)羧酰胺(RP 73401；Rhne-PoulencRorer)、(1E)-l-氮雜-2-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙-1-烯基氨基酸鹽(PDA-641；American Home Products)、4-氰基-4-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)環(huán)己烷羧酸(SB207499；SmithKline Beecham)、西潘茶堿(Cipamfylline)(SmithKlineBeecham)、5-[3-((2S)二環(huán)[2.2.1]庚-2-氧基)-4-甲氧基苯基]-1，3-diazaperhydroin-2-one(CP-80633；Pfizer)、1-(3-硝基苯基)-3-(3-吡啶基甲基)-1，3-二氫吡啶并[2，3-d]嘧啶-2，4-二酮(RS-25344；Syntex)、4-((1R)-1-苯基-2-(4-吡啶基)乙基)-2-環(huán)戊氧基-1-甲氧基苯(CDP-840；Celltech)、(3-{[(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)甲基]氨基}吡唑-4-基)甲-1-醇、Ro-20-1724(Roche Holding AG)、吡拉米司特(Piclamilast)、多索茶堿(Doxoftlline)(Instituto BiologicoChemioterapico ABC SpA)、RPR-132294(Rhne-Poulenc Rorer)、RPR-117658A(Rhone-Poulenc Rorer)、L-787258(Merck Frosst Canada)、E-4021(Eisai Co.Ltd.)、GF-248(Glaxo Wellcome)、SKF-107806(SmithKline Beecham)、IPL-4088(Inflazyme Pharmaceuticals Ltd.)、{3-[(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)甲基]-8-(甲乙基)嘌呤-6-基}乙胺(V-11294A；Napp Research Centre Ltd.)、Atizoram(Pfizer)、5-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)吡啶-2-羧酰胺(CP-353164；Pfizer)、3-[2，4-二氧-3-芐基-1，3-二氫吡啶并[2，3-d]嘧啶基]苯甲酸甲酯(CP-77059；Pfizer)、CP-146523(Pfizer)、CP-293321(Pfizer)、CI-1044(Pfizer)、PD-189659(Pfizer)、CI-1018(Pfizer)、CP-220629(Pfizer)、1-(3-硝基苯基)-3-(4-吡啶基甲基)-1，3-二氫吡啶并[2，3-d]嘧啶-2，4-二酮(RS-25344-000；Roche Bioscience)、Mesopram(Schering AG)、N-(2，5-二氯(3-吡啶基))(8-甲氧基(5-喹啉基))羧酰胺(D-4418；Chiroscience)、T-2585(Tanabe Seiyaku)、4-[4-甲氧基-3-(5-苯基戊氧基)苯基]-2-甲基苯甲酸、XT-044(Hokuriku University)、XT-611(KanzawaUniversity)、WAY-126120(Wyeth-Ayerst Pharmaceuticals Inc.)、1-氮雜-10-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)-7，8-二甲基-3-氧雜螺[4.5]癸-7-烯-2-酮(WAY-122331；Wyeth-Ayerst Pharmaceuticals Inc.)、[(3S)-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基-5-氧吡唑烷基]-N-(3-吡啶基甲基)羧酰胺(WAY-127093B；Wyeth-Ayerst Pharmaceuticals Inc.)、PDB-093(Wyeth-Ayerst Pharmaceuticals Inc.)、3-(1，3-二氧苯并[c]唑啉-2-基)-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙酰胺(CDC-801；Celgene Corp.)、CC-7085(Celgene Corp.)、CDC-998(Celgene Corp.)、NCS-613(CNRS)、CH-3697(Chiroscience)、CH-3442(Chiroseience)、CH-2874(Chiroscience)、CH-4139(Chiroscience)、RPR-114597(Rhone-Poulenc Rorer)、RPR-122818(Rhne-Poulenc Rorer)、(7aS，7R)-7-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)-7a-甲基-2，5，6，7，7a-五氫-2-氮雜吡咯嗪-3-酮、GW-3600(Glaxo-Wellcome)、KF-19514(Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd.)、CH-422(Celltech Group)、CH-673(Celltech Group)、CH-928(Celltech Group)、D-22888(Asta Medica)、AWD-12-232(Asta Medica)、YM-58997(Yamanouchi)、IC-485(ICOS Corp.)、KW-4490(Kyowa Hakko Kogyo Co.Ltd.)、YM-976(Yamanouchi)、Sch-351591(Celltech Group)、AWD-12-343(Asta Medica)、N-(3，5-二氯(4-吡啶基))-2-{1-[(4-氟苯基)甲基]-5-羥基吲哚-3-基}-2-氧乙酰胺(AWD-12-281；Asta Medica)、異丁司特(Ibudilast)(Kyorin Pharmaceutical Co.Ltd.)、Cilomilast(SmithKlineBeecham)、BAY-19-8004(Bayer)、3-{2-[(4-氯苯基)羰基]-6-羥基苷并[b]呋喃-3-基}丙酸甲酯、5-甲基-4-[(4-甲基硫苯基)羰基]-4-咪唑啉-2-酮、5，6-二乙氧基苯并[b]噻吩-2-羧酸(Tibenelast)以及4-(3-溴苯基)-1-乙基-7-甲基氫化吡啶并[2，3-b]吡啶-2-酮(YM-58897；Yamanouchi)。
在一實(shí)施例中，本發(fā)明提供PDE抑制劑，優(yōu)選是PDE4抑制劑在用FSH誘導(dǎo)卵泡生長和成熟之后引發(fā)排卵中的應(yīng)用。PDE抑制劑，特別是PDE4抑劑在用具有FSH活性的化合物或制劑誘導(dǎo)卵泡生長和成熟之后引發(fā)排卵中的應(yīng)用也屬于本發(fā)明范圍之內(nèi)。FSH治療的特別優(yōu)選的替代物或輔助物是芳香酶抑制劑，例如YM-551(Yamanouchi)、來曲唑(Novartis)、阿那曲唑(AstraZeneca)或法倔唑(Novartis)。在需要獲得多個卵母細(xì)胞以作體外受精的優(yōu)選輔助生殖技術(shù)方案中，從月經(jīng)周期的第3天或約第3天至第7天或約第7天、或者第3天或約第3天至第8天或約第8天將芳香酶抑制劑(例如每日2.5-5或約2.5-5毫克來曲唑或阿那曲唑)與每日50-225或約50-225IUFSH，優(yōu)選每日50-150IU FSH，一起給予患者，從月經(jīng)周期的第3天或約第3天至第7天或約第7天開始，持續(xù)給予FSH直到至少有兩個直徑大于或等于16或約16毫米的優(yōu)勢卵泡。此時，給予能引發(fā)排卵的足夠劑量的PDE抑制劑，特別是PDE4抑制劑。
另一個選擇是，芳香酶抑制劑可作為單一的卵泡生長刺激劑(即不給予FSH)來使用，采用較高劑量的芳香酶抑制劑(例如每日2-10毫克來曲唑或阿那曲唑)和/或延長給予的時間(例如第3天至第8天，第3天至第9天，第3天至第10天)。當(dāng)以超聲波判斷卵泡成熟是足夠的，就給予排卵引發(fā)劑量的PDE抑制劑，特別是PDE4抑制劑。此方案允許采集多個卵母細(xì)胞，同時避免應(yīng)用注射途徑，因?yàn)樗兴巹┒际强诜摹?br> 在排卵誘導(dǎo)中，希望能僅釋放一個卵子。根據(jù)本發(fā)明，這可按如下方法實(shí)現(xiàn)用FSH刺激卵泡生長和成熟，然后給予PDE抑制劑，特別是PDE4抑制劑引發(fā)排卵。用FSH的替代物例如芳香酶抑制劑誘導(dǎo)卵泡生長和成熟的排卵誘導(dǎo)方案也屬于本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
在優(yōu)選的排卵誘導(dǎo)方案中，從月經(jīng)周期的第3天或約第3天至第7天或約第7天、或者第5天或約第5天至第9天或約第9天將一定劑量的芳香酶抑制劑(例如每日2.5-5毫克來曲唑或阿那曲唑)給予患者。另一個選擇是，從月經(jīng)周期的第3天或約第3天或者第4天或約第4天給予單劑量的芳香酶抑制劑(例如5-30毫克來曲唑或阿那曲唑，最好10或20毫克)。用排卵引發(fā)劑量的PDE抑制劑，特別是PDE4抑制劑引發(fā)排卵。此方案提供一種無需注射的排卵誘導(dǎo)方案。
VI.藥物組合物可以將本發(fā)明的非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑和能增大雌性宿主體內(nèi)的FSH濃度的藥劑(本文也稱“活性化合物”)、其衍生物、片段、類似物和同系物配成適合給予的藥物組合物。這些組合物通常含有活性化合物和藥學(xué)上可接受的載體。本文所用的“藥學(xué)上可接受的載體”包括與藥學(xué)上給藥相容的任何或全部溶劑、分散介質(zhì)、包衣、抗菌和抗真菌藥劑、等滲和吸收延遲劑等。合適的載體在本領(lǐng)域的標(biāo)準(zhǔn)參考文章最新版的Remington′s PharmaceuticalScience中有描述，納入作為本文的參考文獻(xiàn)。例如，優(yōu)選的載體或稀釋劑包括但不限于水、鹽水、格林氏溶液、葡糖溶液及5％人血清白蛋白。也可使用脂質(zhì)體和非水溶性賦形劑，例如硬化油。這些介質(zhì)和藥劑應(yīng)用于具有藥學(xué)活性的物質(zhì)已為本領(lǐng)域所公知。除了在任何常規(guī)介質(zhì)或藥劑與活性化合物不相容的情況之外，可考慮將它們應(yīng)用于組合物中。在組合物中還可加入補(bǔ)充的活性化合物。
本發(fā)明的藥物組合物可按其預(yù)定的給藥途徑配制。例如，給藥途經(jīng)包括腸胃外(例如靜脈內(nèi)、皮內(nèi)、皮下)、口服、吸入、透皮(局部)、跨粘膜、和直腸給藥。用于腸胃外、皮內(nèi)、皮下途徑的溶液或懸浮液包括下列組分無菌稀釋劑，例如注射用水、鹽水溶液、硬化油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其他合成溶劑；抗菌藥，例如苯甲醇或羥苯甲酸甲酯；抗氧化劑，例如抗壞血酸或亞硫酸氫鈉；螯合劑，例如乙二胺四乙酸；緩沖液，例如醋酸鹽、檸檬酸鹽或磷酸鹽，毒性調(diào)節(jié)劑，例如氯化鈉或葡萄糖。pH值可用酸或堿調(diào)節(jié)，例如鹽酸或氫氧化鈉。腸胃外制劑可封裝于安瓿、一次性注射器或者多劑量玻璃或塑料小瓶中。
適合注射用的藥物組合物包括無菌水溶液(能溶于水)或分散劑以及即時制作無菌注射液或分散劑的無菌粉末。靜脈內(nèi)給藥的合適載體包括生理鹽水、抑菌水、Cremophor ELTM(BASF，Parsippany，N.J.)或磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)。在所有情況下，組合物必須是無菌的，而且流動性為易于注射。它在制造和儲存條件下必須是穩(wěn)定的，并且保存時防止抗細(xì)菌和真菌等微生物的污染作用。載體可以是含有例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液體聚乙二醇等)的溶劑或分散介質(zhì)及其適當(dāng)混合物。例如，通過使用卵磷脂，若是分散介質(zhì)保持所需的顆粒度以及使用表面活性劑，都可維持適當(dāng)?shù)牧鲃有?。?yīng)用各種抗菌藥或抗真菌藥，例如對羥苯甲酯、氯丁醇、苯酚、抗壞血酸、硫柳汞等，可防止微生物作用。在許多情況下，組合物最好包括等滲試劑，例如糖、甘露醇、山梨醇等多元醇、氯化鈉。組合物中可包括延遲吸收的試劑，例如一硬脂酸鋁和明膠，將注射組合物的吸收時間延長。
在適當(dāng)溶劑中將所需量的活性化合物，如果有需要，與上面列舉的成分其中之一或組合混合，然后過濾滅菌，可制成無菌注射液。通常，將活性化合物與含有基本分散介質(zhì)和按需要與上面列舉的其他成分的無菌賦形劑混合，可制成分散劑。在制備無菌注射液的無菌粉末時，制造方法是真空干燥和凍干法，得到活性成分和任何附加的所希望的成分的粉末口所希望的成分來自己被無菌過濾的溶液。
口服組合物一般包括惰性稀釋劑或食用載體。它們可封裝在凝膠膠囊中或壓縮成片劑。當(dāng)用于口服治療給藥時，可將活性化合物與賦形劑混合，制成片劑、錠劑、或膠囊。口服組合物還可用供作為嗽口水用的流體載體制備，其中流體載體中的化合物經(jīng)口腔施加、嗽口和吐出或吞下。組合物的一部分可包括藥學(xué)上相容的結(jié)合劑和/或輔助劑材料。片劑、丸劑、膠囊、錠劑等可含有下列相似性質(zhì)的任何成分或化合物結(jié)合劑，例如微晶纖維素、黃蓍膠或凝膠；賦形劑，例如淀粉或乳糖；崩解劑，例如褐藻酸、原膠或玉米淀粉；潤滑劑，例如硬脂酸鎂或Sterotes；助流劑，例如膠體二氧化硅；甜味劑，例如蔗糖或糖精；或香味劑，例如薄荷、甲基水楊酸鹽或甜橙味劑。
當(dāng)用作吸入給藥途徑時，化合物以含有適當(dāng)助推劑，如二氧化碳等氣體的加壓容器或分散器的氣溶膠噴射形式，或者以噴霧器形式輸送。
全身給藥也可以通過跨粘膜或透皮方式進(jìn)行。當(dāng)用作跨粘膜或透皮給藥途徑時，可配制成適合待滲透障礙物的滲透劑。這樣一些滲透劑通常已為本領(lǐng)域所公知，例如包括，用于跨粘膜給藥的是去污劑、膽鹽、和梭鏈孢酸衍生物?？缯衬そo藥可通過使用鼻噴霧劑或栓劑實(shí)現(xiàn)。用于透皮給藥時，可將活性化合物配制成本技術(shù)領(lǐng)域公知的藥膏、軟膏、凝膠、或乳脂。
非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑(包括磷酸二酯酶)和氯米芬、選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑、芳香酶抑制劑和類固醇生成酶抑制劑的優(yōu)選給藥途徑是口服途徑。這些活性化合物還可經(jīng)皮下注射、靜脈內(nèi)或經(jīng)陰道(局部給藥)給予。FSH、LH或hCG的優(yōu)選給藥途徑是皮下注射，但也可經(jīng)靜脈內(nèi)給予。
化合物也可以制成栓劑(例如，與常規(guī)栓劑基質(zhì)，譬如可可脂和其他甘油酯)或灌腸劑形式，供直腸或陰道輸送。
在一實(shí)施例中，使活性化合物與將保護(hù)化合物免于在體內(nèi)快速清除的載體一起配制，例如控釋制劑，包括植入物和微囊包裹型輸送系統(tǒng)。可使用生物可降解和生物可相容的聚合物，例如乙烯-乙酸乙烯共聚物、聚酸酐、聚乙二醇酸、膠原、聚原磷酯、和聚乳酸。這些制劑的制備方法對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的。所述材料也可從Alza Corporation and NovaPharmaceutical，Inc.買到。
本發(fā)明的化合物可單獨(dú)使用或者與一或多種上面討論的其他治療劑聯(lián)用，與常規(guī)賦形劑混合制成藥物組合物，例如，賦形劑可以是藥學(xué)上可接受的適合口服、腸胃外、腸內(nèi)或局部給藥，而又不與活性化合物起有害反應(yīng)，并對受者無害的有機(jī)或無機(jī)載體物質(zhì)。合適的藥學(xué)上可接受的載體包括但不限于水、鹽溶液、醇、蔬菜油、聚乙二醇、明膠、乳糖、淀粉糖、硬脂酸鎂、滑石、硅酸、粘性石蠟、香油、脂肪酸一酸甘油酯和二酸甘油酯、petroethralfatty acid esters、羥甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮等?？蓪⑺幬锝M合物滅菌，如果有需要，可與不會和活性化合物起有害反應(yīng)的輔助劑混合，例如潤滑劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、濕潤劑、乳化劑、影響滲透壓的鹽、緩沖液、著色劑、香味劑和/或芳香物質(zhì)等。
特別有利的是把口服或腸胃外組合物配制成單位劑量形式以方便給藥和劑量一致。本文所用的劑量單位形式是指適合作為待治療受試者的劑量的單個物理單位，每個單位含有經(jīng)過計(jì)算的預(yù)定量活性化合物，與所需要的藥學(xué)載體一起產(chǎn)生所希望的治療效果。關(guān)于本發(fā)明劑量單位形式的說明遵照且直接取決于活性化合物的獨(dú)有特性、所要達(dá)到的特定治療效果、以及本領(lǐng)域中用這樣一種活性化合物治療個體的固有限制。
應(yīng)當(dāng)知道，在一給定治療中活性化合物的實(shí)際優(yōu)選用量隨著所使用的特定化合物、明確配制的組合物、給藥模式、給藥的具體部位等而變化。本領(lǐng)域技術(shù)人員參照上文提供的指南進(jìn)行常規(guī)的劑量測定試驗(yàn)，可輕易確定一給定給藥方案的最佳給藥速度。也可參見Remington′s Pharmaceutical Science。一般而言，本發(fā)明一或多種化合物，特別是當(dāng)使用本發(fā)多種有效化合物時，適當(dāng)?shù)挠行┝繛槊咳彰壳Э耸苷唧w重0.01至100毫克范圍內(nèi)，優(yōu)選為每日每千克受者體重0.01至20毫克范圍內(nèi)，更好為每日每千克受者體重每日0.05至4毫克范圍內(nèi)。所希望的劑量是適合每日給予1次，或者在一天內(nèi)相隔適當(dāng)時間，或者按照其他適當(dāng)?shù)臅r間表分多次小劑量給予，例如分2至4劑。這些小劑量可以單位劑量形式給予，例如每劑含有0.05至10毫克本發(fā)明的化合物。
藥物組合物可封裝于容器、包裝或分散器內(nèi)，并提供給藥說明書。
以下，給合下列非限制性實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行說明。
VII.實(shí)施例本發(fā)明研制了一個體內(nèi)排卵模型，把FSH給予未成熟大鼠，1日2次，持續(xù)2天或3天，以誘導(dǎo)卵泡成熟，然后給予1次排卵劑量的hCG。注射單劑非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑(例如化合物1、化合物2等)，與次排卵劑量的hCG共給予，或者單獨(dú)給予非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑，誘導(dǎo)排卵。實(shí)驗(yàn)結(jié)果與口模型一致，在該模型中，升高的cAMP水平增強(qiáng)或取代hCG，但不是FSH。任何排卵誘導(dǎo)方案中FSH的作用是促進(jìn)卵泡發(fā)育和成熟，而不是誘導(dǎo)排卵。
實(shí)施例1至9的化合物如下化合物1是順-4-氰基-4-(3-(環(huán)戊氧基)-4-甲氧基苯基)環(huán)己烷-1-羧酸；化合物2是3-(環(huán)戊氧基)-N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-4-甲氧基苯甲酰胺；化合物3是2-(4-(6，7-二乙氧基-2，3-二(羥甲基)萘-1-基)吡啶-2-基)-4-(3-吡啶基)pthalazin-1(2H)-酮鹽酸鹽；化合物4是7-芐氨基-6-氯-2-哌嗪并-4-吡咯烷蝶啶。
實(shí)施例1化合物1和化合物2單獨(dú)或與促性腺激素聯(lián)合在體外對大鼠卵巢粒細(xì)胞cAMP水平的影響在垂體被切除并用己烯雌酚治療的25天齡Sprague-Dawley大鼠中切除卵巢。用27號針在卵巢重復(fù)刺孔，使卵泡釋放出粒細(xì)胞。細(xì)胞清洗后重懸于McCoys 5A介質(zhì)+1％BSA+2μM雄烯二酮中。存活的細(xì)胞數(shù)是100,000，全部裝入容積為1.0毫升的6孔組織培養(yǎng)皿中(化合物1和化合物2的濃度是25微摩爾，單獨(dú)或者與低劑量0.1pM的促性腺激素結(jié)合)?？装逶?7℃、濕度100％和5.0％二氧化碳的培養(yǎng)器中培養(yǎng)48小時。在對cAMP特異的放射性免疫測定法(RIA)中分析條件培養(yǎng)液。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)方差表示。參見圖2，在次有效濃度的促性腺激素存在下，化合物1和2導(dǎo)致cAMP水平顯著上升。
實(shí)施例2 PDE抑制劑化合物1在體內(nèi)對卵泡成熟的影響用次佳劑量的FSH(1.08IU/大鼠/注射；1日2次，3天)結(jié)合或不結(jié)合給予化合物1(0.1、1、10和50毫克/千克/注射；1日2次，3天)，治療未成熟雌性大鼠，使其產(chǎn)生成熟卵泡。注射單劑排卵劑量的hCG(20IU)，最后注射FSH。結(jié)合次佳劑量的FSH給予PDE抑制劑。所有注射均是皮下途徑。給予hCG后18小時計(jì)算輸卵管內(nèi)的卵母細(xì)胞，確定排卵情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)方差表示。參見圖3，數(shù)據(jù)表示每一組所有大鼠輸卵管內(nèi)的平均卵母細(xì)胞數(shù)及排卵大鼠的排卵發(fā)生率。從圖3還可以看到，PDE抑制劑(化合物1)為50毫克/千克時抑制(而不是刺激)排卵。這些結(jié)果證實(shí)，增加PDE劑量不能增大次佳劑量的FSH準(zhǔn)備卵泡排卵的能力。
實(shí)施例3 PDE抑制劑化合物1在次有效劑量的hCG存在下在體內(nèi)對排卵的影響用有效劑量的FSH(2.16IU/大鼠/注射；1日2次，2天)治療未成熟雌性大鼠，使其產(chǎn)生成熟卵泡，注射單劑hCG誘導(dǎo)排卵。hCG的給予量是次有效劑量(3IU)，在最后注射FSH時結(jié)合或不結(jié)合單劑注射化合物1(50、10和1毫克/千克)。給予hCG后18小時計(jì)算輸卵管內(nèi)的卵母細(xì)胞，確定排卵情況。參見圖4，注射單劑化合物1，與次排卵量的hCG共給予，誘導(dǎo)排卵。所有注射均是皮下途徑。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)方差表示。數(shù)據(jù)顯示，非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑，在此實(shí)施例是PDE抑制劑，在給予次佳劑量的hCG時能增強(qiáng)hCG誘導(dǎo)的排卵。圖中示出化合物1(一種公知的PDE抑制劑)的影響。
實(shí)施例4 PDE抑制劑化合物1在次有效劑量的hCG存在或不存在下在體內(nèi)對排卵的影響用FSH誘導(dǎo)卵泡成熟之后(2.16IU/大鼠/注射；1日2次，2天)，注射化合物1，結(jié)合或不結(jié)合次有效劑量的hCG。給予hCG/化合物1后18小時計(jì)算輸卵管內(nèi)的卵母細(xì)胞，確定排卵情況。數(shù)據(jù)表示每一組所有大鼠輸卵管內(nèi)的平均卵母細(xì)胞數(shù)及排卵大鼠的排卵發(fā)生率。參見圖5，注射單劑化合物1，不給予次排卵劑量的hCG，誘導(dǎo)預(yù)先用FSH處理的大鼠排卵。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)方差表示。本實(shí)施例數(shù)據(jù)顯示，非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑，在此實(shí)施例是PDE抑制劑即化合物1，在不注射任何hCG的情況下能誘導(dǎo)排卵。前面的實(shí)施例及本實(shí)施例均顯示，用這些劑量的FSH制造的卵泡不能自然排卵，需要在后來的時間給予hCG。
實(shí)施例5 PDE抑制劑化合物2在次有效劑量的hCG存在或不存在下在體內(nèi)對排卵的影響用FSH誘導(dǎo)卵泡成熟之后(2.16IU/大鼠/注射；1日2次，2天)，注射化合物2，結(jié)合或不結(jié)合次有效劑量的hCG。給予hCG/化合物2后18小時計(jì)算輸卵管內(nèi)的卵母細(xì)胞，確定排卵情況。數(shù)據(jù)表示每一組所有大鼠輸卵管內(nèi)的平均卵母細(xì)胞數(shù)及排卵大鼠的排卵發(fā)生率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)方差表示。參見圖6，僅注射單劑化合物2，不給予次排卵劑量的hCG，誘導(dǎo)預(yù)先用FSH處理的大鼠排卵。本實(shí)施例數(shù)據(jù)顯示，非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑，在此實(shí)施例是PDE抑制劑即化合物2，在不注射任何hCG的情況下能誘導(dǎo)排卵。
實(shí)施例6 PDE抑制劑化合物2口服和皮下給予之后在體內(nèi)對排卵的影響用FSH誘導(dǎo)卵泡成熟之后(2.16IU/大鼠/注射；1日2次，2天)，皮下注射(皮下組織)或者口服化合物2。給予化合物2后18小時計(jì)算輸卵管內(nèi)的卵母細(xì)胞，確定排卵情況。數(shù)據(jù)表示每一組所有大鼠輸卵管內(nèi)的平均卵母細(xì)胞數(shù)及排卵大鼠的排卵發(fā)生率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)方差表示。參見圖7，經(jīng)皮下或口服途徑給予化合物2，誘導(dǎo)預(yù)先用FSH處理的大鼠排卵。本實(shí)施例數(shù)據(jù)顯示，非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑，在此實(shí)施例是PDE抑制劑即化合物2，當(dāng)口服給予時能誘導(dǎo)排卵。
實(shí)施例7 PDE抑制劑化合物3口服和皮下給予之后在體內(nèi)對排卵的影響用FSH誘導(dǎo)卵泡成熟之后(2.16IU/大鼠/注射；1日2次，2天)，皮下注射(皮下組織)或者口服化合物3。給予化合物3后18小時計(jì)算輸卵管內(nèi)的卵母細(xì)胞，確定排卵情況。數(shù)據(jù)表示每一組所有大鼠輸卵管內(nèi)的平均卵母細(xì)胞數(shù)及排卵大鼠的排卵發(fā)生率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)方差表示。參見圖8，經(jīng)皮下或口服途徑給予化合物3，誘導(dǎo)預(yù)先用FSH處理的大鼠排卵。本實(shí)施例數(shù)據(jù)顯示，非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑，在此實(shí)施例是PDE抑制劑即化合物3，當(dāng)口服給予時能誘導(dǎo)排卵。
實(shí)施例8 PDE抑制劑化合物4在次有效劑量的hCG存在或不存在下在體內(nèi)對排卵的影響用FSH誘導(dǎo)卵泡成熟之后(2.16IU/大鼠/注射；1日2次，2天)，皮下注射化合物4，結(jié)合或不結(jié)合次有效劑量的hCG。給予hCG/化合物4后18小時計(jì)算輸卵管內(nèi)的卵母細(xì)胞，確定排卵情況。數(shù)據(jù)表示每一組所有大鼠輸卵管內(nèi)的平均卵母細(xì)胞數(shù)及排卵大鼠的排卵發(fā)生率。參見圖9，注射單劑化合物4，并給予次排卵劑量的hCG，誘導(dǎo)預(yù)先用FSH處理的大鼠排卵。僅給予注射化合物4誘導(dǎo)少量或不誘導(dǎo)排卵。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)方差表示。本實(shí)施例數(shù)據(jù)顯示，非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑，在此實(shí)施例是PDE抑制劑即化合物4，單獨(dú)給予不足以誘導(dǎo)排卵，但在次有效劑量的hCG存在下能誘導(dǎo)排卵。
實(shí)施例9 PDE抑制劑化合物2對排卵和生育的影響用FSH(4.33IU/大鼠/注射；1日2次，2天)和懷孕母馬的血清促性腺激素(PMSG)(1.5IU/大鼠/注射；1日2次，2天)誘導(dǎo)未成熟大鼠的卵泡成熟。以前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，該組合能誘導(dǎo)卵泡成熟和促進(jìn)交配行為，同時在不另外注射hCG的情況下可保持較低自然排卵率。接著，皮下給予化合物2(12只大鼠)或?qū)φ战橘|(zhì)(12只大鼠)治療FSH和PMSG誘導(dǎo)的大鼠。在一群大鼠(每種治療6只大鼠)中，給予化合物2或?qū)φ战橘|(zhì)后18小時計(jì)算輸卵管內(nèi)的卵母細(xì)胞，確定排卵情況。為了評估生育率，將另一群大鼠(每種治療6只大鼠)各自與一只已確認(rèn)有生育能力的成年雄性大鼠關(guān)在籠中一晚。第二天，取走雄性大鼠，將雌性大鼠按組別關(guān)在一起直至分娩。記錄分娩時觀察到的妊娠足月存活幼鼠數(shù)目。參見圖10，注射單劑化合物2誘導(dǎo)預(yù)先用FSH和PMSG處理的大鼠排卵。另外，用化合物2治療的大鼠分娩出的存活幼鼠數(shù)目較多。排卵和存活幼鼠的結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)方差表示。此實(shí)施例數(shù)據(jù)顯示，非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑，在此實(shí)施例是PDE抑制劑即化合物2，可誘導(dǎo)能夠進(jìn)行體內(nèi)受精的卵母細(xì)胞排卵。
本發(fā)明并不限制于此處敘述的具體實(shí)施例的范圍。事實(shí)上，除了此處敘述的實(shí)施例之外，本領(lǐng)域技術(shù)人員給合本說明書和附圖還可以輕易對本發(fā)明作各種改變。這些改變屬于所附權(quán)利要求書的范圍之內(nèi)。本申請引用的全部文獻(xiàn)、專利和公開的專利申請的全文被納入作為參考。
權(quán)利要求
1.一種誘導(dǎo)雌性宿主排卵的方法，其特征在于所述方法包括把非多肽環(huán)一磷酸腺苷(cAMP)水平調(diào)節(jié)劑給予所述宿主。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑是磷酸二酯酶抑制劑。
3.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述磷酸二酯酶抑制劑是磷酸二酯酶4同種型的抑制劑。
4.一種誘導(dǎo)雌性宿主排卵的方法，其特征在于所述方法包括在所述宿主排卵周期的黃體期之前把非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑給予所述宿主。
5.如權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于所述非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑是磷酸二酯酶抑制劑。
6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述磷酸二酯酶抑制劑是磷酸二酯酶4同種型的抑制劑。
7.一種刺激雌性宿主卵泡發(fā)育和排卵誘導(dǎo)的綜合治療方法，其特征在于所述方法包括在所述宿主排卵周期的卵泡期期間給予能增大所述宿主體內(nèi)卵泡刺激素濃度的藥劑，以及在所述宿主排卵周期的黃體期之前把非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑給予所述宿主。
8.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于所述藥劑是卵泡刺激素。
9.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于所述藥劑是氯米芬。
10.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于所述藥劑是選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑。
11.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于所述藥劑是芳香酶抑制劑。
12.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于所述藥劑是導(dǎo)致雌激素總體產(chǎn)生減少的相關(guān)類固醇生成酶抑制劑。
13.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于所述非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑是磷酸二酯酶抑制劑。
14.如權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于所述磷酸二酯酶抑制劑是磷酸二酯酶4同種型的抑制劑。
15.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于在所述宿主排卵周期的黃體期之前還把黃體生成激素給予所述宿主誘導(dǎo)排卵。
16.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于在所述宿主排卵周期的黃體期之前給予的黃體生成激素濃度與現(xiàn)有方案給予所述宿主以誘導(dǎo)排卵的濃度相比是降低的。
17.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于在所述宿主排卵周期的黃體期之前還把絨毛膜促性腺激素給予所述宿主誘導(dǎo)排卵。
18.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于在所述宿主排卵周期的黃體期之前給予的絨毛膜促性腺激素濃度與現(xiàn)有方案給予所述宿主以誘導(dǎo)排卵的濃度相比是降低的。
19.一種誘導(dǎo)雌性宿主排卵的方法，其特征在于所述方法包括在現(xiàn)有排卵誘導(dǎo)方案中給予所述宿主hCG或LH的時間點(diǎn)，把非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑給予所述宿主。
20.如權(quán)利要求19所述的方法，其特征在于非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑與hCG或LH共同給予。
21.如權(quán)利要求19所述的方法，其特征在于非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑是單獨(dú)給予的，不與hCG或LH共同給予。
22.一種非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑，其特征在于它用作排卵誘導(dǎo)劑。
23.一種非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑，其特征在于它在治療排卵障礙中的應(yīng)用。
24.一種含有非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑的藥物組合物，其特征在于所述組合物在治療排卵障礙中的應(yīng)用。
25.非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑在治療排卵障礙的藥物組合物中的應(yīng)用。
26.非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑在制備用于治療排卵障礙的藥物中的應(yīng)用。
27.一種采集體外受精的卵母細(xì)胞的方法，其特征在于所述方法包括給予非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑。
28.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述磷酸二酯酶抑制劑選自由下列化合物組成的組咯利普蘭、阿羅茶堿(Almirall藥廠)、Ariflo(SmithKline Beecham)、Roflumilast(Byk Gulden)、登布茶堿(SmithKline Beecham)、RS-17597(Syntex)、SDZ-ISQ-844(Novartis)、4-[2，3-二(羥甲基)-6，7-二乙氧基萘基-1-(2-羥乙基)氫化吡啶-2-酮(T-440；TanabeSeiyaku)、3-[6-(2H-3，4，5，6-四氫吡喃-2-基氧基)-2-(3-噻吩基羰基)苯并[b]呋喃-3-基]丙酸甲酯(Bayer)、2-甲基-1-[2-(甲乙基)(8-氫化吡唑并[1，5-a]吡啶-3-基)]丙-1-酮(Ibudilast；Kyorin)、N-(3，5-二氯(4-吡啶基))(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)羧酰胺(RP 73401；Rhne-Poulenc Rorer)、(1E)-1-氮雜-2-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙-1-烯基氨基酸鹽(PDA-641；American HomeProducts)、4-氰基-4-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)環(huán)己烷羧酸(SB207499；SmithKline Beecham)、西潘茶堿(Cipamfylline)(SmithKline Beecham)、5-[3-((2S)二環(huán)[2.2.1]庚-2-氧基)-4-甲氧基苯基]-1，3-diazaperhydroin-2-one(CP-80633；Pfizer)、1-(3-硝基苯基)-3-(3-吡啶基甲基)-1，3-二氫吡啶并[2，3-d]嘧啶-2，4-二酮(RS-25344；Syntex)、4-((1R)-1-苯基-2-(4-吡啶基)乙基)-2-環(huán)戊氧基-1-甲氧基苯(CDP-840；Celltech)、(3-{[(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)甲基]氨基}吡唑-4-基)甲-1-醇、Ro-20-1724(Roche Holding AG)、吡拉米司特(Piclamilast)、多索茶堿(Doxofylline)(Instituto Biologico ChemioterapicoABC SpA)、RPR-132294(Rhne-Poulenc Rorer)、RPR-117658A(Rhone-Poulenc Rorer)、L-787258(Merck Frosst Canada)、E-4021(Eisai Co.Ltd.)、GF-248(Glaxo Wellcome)、SKF-107806(SmithKline Beecham)、IPL-4088(Inflazyme Pharmaceuticals Ltd.)、{3-[(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)甲基]-8-(甲乙基)嘌呤-6-基}乙胺(V-11294A；Napp Research Centre Ltd.)、Atizoram(Pfizer)、5-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)吡啶-2-羧酰胺(CP-353164；Pfizer)、3-[2，4-二氧-3-芐基-1，3-二氫吡啶并[2，3-d]嘧啶基]苯甲酸甲酯(CP-77059；Pfizer)、CP-146523(Pfizer)、CP-293321(Pfizer)、CI-1044(Pfizer)、PD-189659(Pfizer)、CI-1018(Pfizer)、CP-220629(Pfizer)、1-(3-硝基苯基)-3-(4-吡啶基甲基)-1，3-二氫吡啶并[2，3-d]嘧啶-2，4-二酮(RS-25344-000；RocheBioscience)、Mesopram(Schering AG)、N-(2，5-二氯(3-吡啶基))(8-甲氧基(5-喹啉基))羧酰胺(D-4418；Chiroscience)、T-2585(Tanabe Seiyaku)、4-[4-甲氧基-3-(5-苯基戊氧基)苯基]-2-甲基苯甲酸、XT-044(HokurikuUniversity)、XT-611(Kanzawa University)、WAY-126120(Wyeth-AyerstPharmaceuticals Inc.)、1-氮雜-10-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)-7，8-二甲基-3-氧雜螺[4.5]癸-7-烯-2-酮(WAY-122331；Wyeth-Ayerst PharmaceuticalsInc.)、[(3S)-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲基-5-氧吡唑烷基]-N-(3-吡啶基甲基)羧酰胺(WAY-127093B；Wyeth-Ayerst Pharmaceuticals Inc.)、PDB-093(Wyeth-Ayerst Pharmaceuticals Inc.)、3-(1，3-二氧苯并[c]唑啉-2-基)-3-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)丙酰胺(CDC-801；Celgene Corp.)、CC-7085(Celgene Corp.)、CDC-998(Celgene Corp.)、NCS-613(CNRS)、CH-3697(Chiroscience)、CH-3442(Chiroscience)、CH-2874(Chiroscience)、CH-4139(Chiroscience)、RPR-114597(Rhone-Poulenc Rorer)、RPR-122818(Rhne-Poulenc Rorer)、(7aS，7R)-7-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)-7a-甲基-2，5，6，7，7a-五氫-2-氮雜吡咯嗪-3-酮、GW-3600(Glaxo-Wellcome)、KF-19514(KyowaHakko Kogyo Co Ltd.)、CH-422(Celltech Group)、CH-673(CelltechGroup)、CH-928(Celltech Group)、D-22888(Asta Medica)、AWD-12-232(Asta Medica)、YM-58997(Yamanouchi)、IC-485(ICOS Corp.)、KW-4490(Kyowa Hakko Kogyo Co.Ltd.)、YM-976(Yamanouchi)、Sch-351591(Celltech Group)、AWD-12-343(Asta Medica)、N-(3，5-二氯(4-吡啶基))-2-{1-[(4-氟苯基)甲基]-5-羥基吲哚-3-基}-2-氧乙酰胺(AWD-12-281；AstaMedica)、異丁司特(Ibudilast)(Kyorin Pharmaceutical Co.Ltd.)、Cilomilast(SmithKline Beecham)、BAY-19-8004(Bayer)、3-{2-[(4-氯苯基)羰基]-6-羥基苷并[b]呋喃-3-基}丙酸甲酯、5-甲基-4-[(4-甲基硫苯基)羰基]-4-咪唑啉-2-酮、5，6-二乙氧基苯并[b]噻吩-2-羧酸(Tibenelast)以及4-(3-溴苯基)-1-乙基-7-甲基氫化吡啶并[2，3-b]吡啶-2-酮(YM-58897；Yamanouchi)。
29.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述磷酸二酯酶抑制劑選自由下列化合物組成的組茶堿、異丁基甲基黃嘌呤、AH-21-132、Org-30029(Organon)、Org-20241(Organon)、Org-9731(Organon)、扎達(dá)維林(Zardaverine)、長春西汀(vinpocetine)、EHNA(MEP-1)、咪利酮(Milrinone)、氰胍佐旦(Siguazodan)、扎普司特(Zaprinast)、SK+F 96231、托拉芬群(Tolafentrine)(Byk Gulden)、非明司特(Filaminast)(Wyeth-Ayerst藥廠)。
30.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述磷酸二酯酶抑制劑選自由下列化合物組成的組順-4-氰基-4-(3-(環(huán)戊氧基)-4-甲氧基苯基)環(huán)己烷-1-羧酸、3-(環(huán)戊氧基)-N-(3，5-二氯吡啶-4-基)-4-甲氧基苯甲酰胺、2-(4-(6，7-二乙氧基-2，3-二(羥甲基)萘-1-基)吡啶-2-基)-4-(3-吡啶基)pthalazin-1(2H)-酮鹽酸鹽、7-芐氨基-6-氯-2-哌嗪并-4-吡咯烷蝶啶。
全文摘要
本發(fā)明涉及誘導(dǎo)雌性宿主排卵的方法，所述方法包括把非多肽環(huán)一磷酸腺苷(cAMP)水平調(diào)節(jié)劑給予該雌性宿主。本發(fā)明另一方面提出在宿主排卵周期的黃體期之前特異性給予磷酸二酯酶抑制劑。優(yōu)選的非多肽cAMP水平調(diào)節(jié)劑包括磷酸二酯酶抑制劑，特別是磷酸二酯酶4同種型的抑制劑。
文檔編號A61K31/00GK1582146SQ01823951
公開日2005年2月16日 申請日期2001年12月14日 優(yōu)先權(quán)日2001年12月14日
發(fā)明者S·帕爾瑪, M·泰珀, S·麥克肯納, M·C·麥克納米, A·艾斯克爾 申請人:應(yīng)用研究系統(tǒng)Ars股份公司