專利名稱：一種用于防治幼畜腹瀉的復(fù)合制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于獸用藥，更具體地說是一種防治幼畜腹瀉的抗體中藥雙歧因子復(fù)合制劑及其制備方法。
2.幼畜腹瀉母畜防治法給產(chǎn)后母畜投藥，如蒼術(shù)香連散、母仔靈等藥，通過乳汁將藥物有效成份傳遞給幼畜，達(dá)到防治幼畜腹瀉的目的。但是由于中藥散劑有效成份含量低，用藥量大，幼畜吸乳量不均勻等原因，防治效果不夠理想。
上述兩種方法均受到母畜體況的影響，特別是母畜缺乳的時候，這些方法都沒有任何的防治效果。
3.幼畜直接給藥法(1)給幼畜直接內(nèi)服或注射抗生素和化學(xué)合成藥物，如慶大霉素、鏈霉素、青霉素、氯霉素、卡那霉素、紅霉素、先鋒霉素、土霉素、新霉素、聯(lián)磺散、氟哌酸、環(huán)丙沙星、恩諾沙星、痢特靈等。但由于多年來反復(fù)大量地使用這些藥品，產(chǎn)生了不同程度的耐藥性，其防治效果不夠理想，如常見抗生素對大腸桿菌的敏感率一般在15-70％之間；再者人用藥品與獸藥交叉使用，畜產(chǎn)品中的藥殘?jiān)黾樱祟愂秤昧诉@些高殘留藥物的食品，誘發(fā)人的抗藥性，給人類抵抗疾病、治療疾病帶來了極大的困難，因此目前世界范圍內(nèi)都逐步限制和禁止在畜禽養(yǎng)殖業(yè)中使用抗生素和化學(xué)合成藥物。
(2)給幼畜內(nèi)服各種中藥散劑，如黃白止痢散、烏梅散、蒼術(shù)香連散、白頭翁散等。由于這類散劑均由原藥直接粉碎加工而成，用量大、藥效低、使用不方便等原因，因此防治幼畜腹瀉的效果也不好。
(3)給幼畜內(nèi)服或注射高免雞卵黃抗體達(dá)到防治幼畜腹瀉的目的。本法效果好，不產(chǎn)生耐藥性，無藥殘及毒副作用，但目前都處于實(shí)驗(yàn)階段，沒有形成穩(wěn)定的制劑，不能批量地生產(chǎn)。例如肖馳等人“雞抗豬大腸埃希氏菌卵黃抗體的研制與應(yīng)用”(中國獸醫(yī)科技，1998年，第28卷，第4期)；李國平等人“豬大腸桿菌高免雞卵黃抗體的研制”(福建畜牧獸醫(yī)，1998年第2期)。
在生產(chǎn)工藝技術(shù)方面，還有黃抗體的提取工藝，常見的有“利用苯酚從卵黃中提純卵黃抗體的研究”(中國獸醫(yī)科技，1998年第28卷，第10期)；“聚乙二醇提取卵黃IgG的研究“(中國畜禽傳染病1989年第2期，總期45期)；”“水提法”、“PEG提取法”等(Jqurnal of ImmuologuicalMethods 160〔1993〕207-214)。上述方法產(chǎn)量低，難以形成工業(yè)化批量生產(chǎn)。
本發(fā)明的主要技術(shù)原理和方案在現(xiàn)代分子免疫學(xué)和中醫(yī)學(xué)相結(jié)合的基礎(chǔ)上，采用現(xiàn)代生物工程技術(shù)，從高免疫雞蛋中提取抗幼畜腹瀉的多聯(lián)多價抗體，然后將其與多種中藥有效成份、雙岐因子混合、噴霧干燥、過篩等，制得所需的產(chǎn)品。
本發(fā)明的復(fù)合制劑組成成份及其含量(以重量份數(shù)計(jì))多聯(lián)多價抗體2-15份；抗體增效保護(hù)劑5-25份；選自果寡糖、甘露低聚糖、酵母多糖中的一種或兩種以上的雙岐因子糖類，其中果寡糖0.5-5份、甘露低聚糖0.5-5份、酵母多糖0.5-5份；以及下述經(jīng)水煎噴霧干燥后的中藥干粉中的五種以上干粉黃柏0.5-10份、側(cè)柏葉0.5-10份、黃連0.5-15份、秦皮0.5-8份、白頭翁0.5-8份、蒼術(shù)0.5-10份、木香0.5-10份、苦參0.5-10份、車前草0.5-5份、澤瀉0.5-5份。
本發(fā)明的復(fù)合制劑的制備方法包括以下過程(1)制取多聯(lián)多價高免疫雞蛋a.無特定病原體蛋雞(SPF雞)在潔凈養(yǎng)殖場隔離飼養(yǎng)；b.開始產(chǎn)蛋前兩個月對蛋雞初次免疫，其方法每只雞分別同時注射以下疫苗和菌苗；沙門氏桿菌多價菌、大腸肝菌多價菌、魏氏梭菌多價菌(或者兔瘟-巴氏桿菌-魏氏梭菌三聯(lián)滅活菌或羊快疫-羔羊痢疾-猝狙-腸毒血-黑疫五聯(lián)苗)、傳染性胃腸炎疫苗、輪狀病毒性腹瀉苗，每種疫苗和菌苗的注射量0.5ml/只雞；c.兩周后對蛋雞第二次免疫，其方法每只雞分別注射下述疫苗大腸桿菌多價苗和偽狂犬滅活苗，每種疫苗和菌苗的注射量0.5ml/只雞；
d.四周后對蛋雞第三次免疫，其方法每只雞分別注射下述疫苗傳染性胃腸炎疫苗、流行性腹瀉疫苗、輪狀病毒性腹瀉苗，每種疫苗注射量0.5ml/只雞；e.六周后對蛋雞第四次免疫，其方法每只雞分別注射下述疫苗和菌苗沙門氏桿菌多價苗、大腸肝菌多價菌、魏氏梭菌多價菌(或兔瘟-巴氏桿菌-魏氏梭菌三聯(lián)滅活菌或羊快疫-羔羊痢疾-猝狙-腸毒血-黑疫五聯(lián)苗)、傳染性胃腸炎疫苗、偽狂犬滅活菌、輪狀病毒腹瀉苗，每種疫苗和菌苗的注射量為0.5ml-1.0/只雞；f.八周后進(jìn)行卵黃抗體免疫學(xué)檢測為多聯(lián)多價抗體中K88、K99、987P抗體凝集效價達(dá)標(biāo)1∶160-1∶640后收集多聯(lián)多價高免疫雞蛋，在16℃條件下保存待用，如果檢測不合格，重復(fù)步驟(e)，重新免疫，直至檢測合格；(2)多聯(lián)多價抗體提純a.將步驟(1)得到的多聯(lián)多價高免疫雞蛋先進(jìn)行消毒，再打碎雞蛋進(jìn)行分離，得到卵清和卵黃，其中卵清經(jīng)噴霧干燥，制得卵清粉；b.在(a)步卵黃中加入卵黃重量的2-10倍的無菌去離子水和0.1-1.0NHCl，使PH值至5.0-5.8，加NaCl，濃度至0.5-0.9％(W/W)，再加聚乙二醇-6000(PEG-6000)，濃度至3.5-5.0％(W/V)，然后攪拌10-20分鐘后靜置0.5-24小時，控制液體溫度為4-20℃時，在3000-15000轉(zhuǎn)/分下離心10-30分鐘，得到上清液和沉淀物，沉淀物經(jīng)噴霧干燥，得到卵黃粉；c.在(b)步的上清液中加入PEG-6000，濃度至12-15％(W/V)，再加0.1-1.0N NaOH，使PH值至6.8-7.5，攪拌10-20分鐘，靜置0.5-24小時，液體達(dá)4℃時，在3000-15000轉(zhuǎn)/分下離心20-40分鐘，棄去上清液，沉淀物即為多聯(lián)多價抗體粗制品；d.將多聯(lián)多價抗體粗制品溶于無菌去離子水中，再重復(fù)(c)步過程，取沉淀，進(jìn)行抗體效價測定為K88、K99、987P抗體凝集效價達(dá)1∶320∽1∶2560即得到精制的多聯(lián)多價抗體，所述的無菌去離子水的量為多聯(lián)多價抗體粗制品重量的2-10倍；(3)制取中藥干粉選自黃柏、側(cè)柏葉、黃連、秦皮、白頭翁、蒼術(shù)、木香、苦參、車前草、澤瀉中的五種或五種以上中草藥分別按下述過程提取，制得干粉a.中藥原料切碎、洗凈后用冷水浸泡1-5小時，至藥心充分浸透后加入原料重量的5-8倍的水，加熱至沸騰后文火煎煮，第一次煎煮30-60分鐘，倒出藥液，然后再進(jìn)行兩次煎煮，每次煎煮加水量是原料重量的5倍水，煎煮1-2小時，然后將三次藥液混合得到混合藥液，剩下的藥渣中再加入原料重量的3倍水，煎煮30分鐘，藥液用于下一批藥煎煮使用；b.將步聚(a)混合藥液，在負(fù)壓3-8千帕、溫度40-80℃下減壓濃縮，至干物質(zhì)的含水量為10-15％，再離心除去土；c.步驟(b)除去土后的物質(zhì)進(jìn)行在離心噴霧干燥機(jī)上噴霧干燥，即得到中藥干粉，所述的噴霧干燥機(jī)操作條件進(jìn)口溫度150-280℃、出口溫度70-90℃、轉(zhuǎn)速12000-30000轉(zhuǎn)/分；(4)制取抗體中藥雙岐因子復(fù)合制劑將步驟(2)制得的精制的多聯(lián)多價抗體、抗體增效保護(hù)劑、步驟(3)分別制提的中藥干粉以及包括果寡糖、甘露低聚糖、酵母多糖在內(nèi)的雙岐因子糖類經(jīng)混勻后，加無菌去離子水，至混合物的重量濃度達(dá)25-30％，然后在高速乳化機(jī)或勻質(zhì)機(jī)上乳化、過濾，然后在離心噴霧干燥機(jī)上噴霧干燥后過3-5號篩，最后進(jìn)行質(zhì)量檢查、分裝、入庫，所述的噴霧干燥機(jī)操作條件進(jìn)口溫度150-220℃、出口溫度65-90℃、轉(zhuǎn)速12000-30000轉(zhuǎn)/分、負(fù)壓10-80帕。
所述的產(chǎn)品多聯(lián)多價抗體K88、K99、987P抗體凝集效價達(dá)1∶320以上，小檗堿薄層色譜法檢查陽性，雜菌總數(shù)≤1000個/克，致病菌和大腸桿菌陰性，酵母和霉菌數(shù)≤100個/克，水份含量≤8％；本發(fā)明所述的其它成份果寡糖、甘露低聚糖、酵母多糖以及所有的中草藥都是市售產(chǎn)品，所述的抗體增效保護(hù)劑包括以下三種，它們的配方是(1)內(nèi)消旋環(huán)乙醇5％、健馬血清95％；(2)牛血清白蛋白10克、谷氨酸鈉0.83克、磷酸二氫鉀0.52克、磷酸氫二鈉1.64克、蔗糖76.62克、無菌去離子水1000毫升；(3)聚乙烯吡咯烷酮K30-351克、乳糖10克、無菌去離子水100毫升(王明俊等，《獸醫(yī)生物制品學(xué)》，中國農(nóng)業(yè)出版社，1997年第一版，第345頁和邢釗等，《獸醫(yī)生物學(xué)制品實(shí)用技術(shù)》，中國農(nóng)業(yè)出版社，2000年7月第1版第125頁)。
本發(fā)明制備過程所用的噴霧干燥器、高速乳化機(jī)或勻質(zhì)機(jī)都是已知的常用設(shè)備。
本發(fā)明K88、K99、987P抗體效價測定方法參見胡子信等的“雞抗豬大腸菌卵黃抗體的研制”(中國畜禽傳染病，1994年第2期，第26-27頁)；所述的小檗堿薄層色譜法鑒別方法見“中華人民共和國獸藥典，2000年版，附錄25頁”。
本發(fā)明的主優(yōu)點(diǎn)和效果1.本發(fā)明的復(fù)合制劑將現(xiàn)有的免疫防治、藥物防治和微生態(tài)學(xué)防治，有效地集合為一體，克服三者分別使用帶來的多種缺點(diǎn)和弊端。例如給懷孕母豬注射大腸桿菌三價苗，防治仔豬黃白痢；注射魏氏梭菌多價苗，防治仔豬紅痢，給懷孕母牛和母羊注射大腸桿菌，防治犢牛和羔羊大腸桿菌痢疾病等等。而本發(fā)明的復(fù)合制劑含有抗致病性大腸桿菌多價抗體、抗魏氏梭菌多價抗體、抗輪狀病毒腹瀉多價抗體、抗偽狂犬病毒抗體、抗沙門氏桿菌多價抗體、抗傳染性胃腸類抗體、抗流行性腹瀉抗體等，組成了多聯(lián)多價抗體，直接給幼畜灌服，不僅擺脫了主動免疫母畜給母畜帶來的種種應(yīng)激反應(yīng)，進(jìn)而影響到胚胎和幼畜，而且可精確地將各種防治腹瀉的抗體直接給幼畜，這種被動免疫，最確切、最有效地防治了幼畜腹瀉；
本發(fā)明的復(fù)合制劑幼畜直接服用，可將精制的中藥抗感染的有效成份送入畜體，克服抗生素和化學(xué)合成藥物的耐藥性和高藥殘的缺點(diǎn)，也克服了現(xiàn)有的中藥散劑用量大、藥效低、使用不方便的缺點(diǎn)；另外幼畜直接服用本發(fā)明的復(fù)合制劑可將各種雙岐因子送入畜體，有效地培育幼畜腸道雙岐桿菌和乳酸菌等有益細(xì)菌，建立良好的微生態(tài)系統(tǒng)，抑制和殺滅幼畜腸道內(nèi)的多種致病菌，有效地防治了幼畜腹瀉。
2.本發(fā)明的復(fù)合制劑的抗體增效保護(hù)劑、中藥有效成份和雙岐因子，對多聯(lián)多價抗體具有良好的保護(hù)和增加效價的作用，克服了高免卵黃抗體加工、貯藏、運(yùn)輸和使用時等條件下的不穩(wěn)定性而造成抗體的失效弊病，形成了穩(wěn)定的一種中藥型抗體生物制劑。
3.本發(fā)明中的生產(chǎn)工藝技術(shù)，對抗體提純方面在脫脂上用0.1-1.0N HCl調(diào)PH值至5.0-5.8，并加NaCl使高免卵黃水液液中NaCl的濃度達(dá)0.5-0.9％；在抗體沉淀上用0.1-1.0N NaOH調(diào)PH至6.8-7.5，使抗體的提純回收率增加1倍以上。另外在成品合成工藝上，高速離心噴霧時，控制進(jìn)口溫度150-220℃，出口溫度65-90℃，噴頭轉(zhuǎn)速12000-30000轉(zhuǎn)/分，負(fù)壓15-80帕是本發(fā)明的重要保障條件。
4.本發(fā)明中的復(fù)合制劑在預(yù)防方面，每頭新生幼畜出生后，哺乳前立即灌服0.5-1.0克，流行區(qū)幼畜、弱仔、寄養(yǎng)仔每頭灌服1.0-2.0克，可預(yù)防新生幼畜在7-21天內(nèi)不發(fā)生腹瀉疾??；在開食補(bǔ)喂飼料或斷奶飼料中添加本制劑0.2-0.5％，可預(yù)防補(bǔ)飼幼畜和斷奶幼畜發(fā)生腹瀉疾病，在治療方面，1-2周令幼畜每頭每次服2克，3-4周令幼畜每頭每次服2-4克，5周以上4-8克，每日兩至三次，三日為一療程，可均勻混合在飼料中喂服，或用生理鹽水或涼開水適量稀釋灌服，根據(jù)病情遵醫(yī)囑增減用藥量。本制劑稀釋后立即灌服，切勿高溫加熱使用，并在密閉、干燥處保存，保存期為12-18個月。
使用本發(fā)明聽復(fù)合制劑，比常見的懷孕母畜免疫防治法，幼畜腹瀉母畜防治法和幼畜直接給藥法提高幼畜成活率10-30％，使幼畜成活率達(dá)到95％以上，縮短幼畜哺乳期21-28天，增加斷奶幼畜體重8-25％左右，腹瀉幼畜治愈率90％以上，懷孕母畜免打防治幼畜腹瀉的各種疫苗，降低勞動工作量，降低生產(chǎn)成本，提高綜合經(jīng)濟(jì)效益。
綜上所述，本發(fā)明的抗體中藥雙歧因子復(fù)合制劑是在現(xiàn)代分子免疫學(xué)和中醫(yī)學(xué)相結(jié)合的理論基礎(chǔ)上，采用現(xiàn)代卵巢生物反應(yīng)器工程技術(shù)和高新理化加工技術(shù)，精制而成的一種集免疫防治、藥物防治和微生態(tài)學(xué)防治于一體的純天然、無藥殘、無污染，無耐藥性、無毒副作用的新型綠色獸藥。
圖4為兔用多聯(lián)多價高免雞蛋生產(chǎn)技術(shù)流程圖；圖5為羊用多聯(lián)多價高免雞蛋生產(chǎn)技術(shù)流程程圖。
實(shí)例1本實(shí)例是制備豬用抗體中藥雙岐因子復(fù)合制劑。
(一)本實(shí)例的復(fù)合制劑配方豬用多聯(lián)多價抗體 6.5公斤抗體增效保護(hù)劑15.0公斤果寡糖0.5公斤黃柏 1.5公斤側(cè)柏葉1.5公斤黃連 2.0公斤秦皮 0.5公斤白頭翁0.5公斤上述所有中草藥重量均為水煎提取、噴霧干燥物重量。
所述的抗體增效保護(hù)劑配方(重量)內(nèi)消旋環(huán)乙醇5％、健馬血清95％。
(二)制備過程如下1.按

圖1流程生產(chǎn)豬用多聯(lián)多價抗體高免雞蛋；2.豬用多聯(lián)多價抗體提純工藝(1)豬用多聯(lián)價抗體高免雞蛋，清毒、打蛋、分離，純卵清噴霧干燥得卵清粉；(2)多聯(lián)多價抗體高免卵黃加4倍無菌去離子水、加0.1-1.0N HCl，PH值至5.0、加NaCl，濃度至0.5％(W/W)、加PEG-6000，濃度至3.5％(W/V)，攪拌10分鐘、靜置30分鐘、液體溫度10℃，14000轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘后，棄沉淀、噴霧干燥提卵黃粉；(3)上清液中加PEG-6000，最終濃度至12％(W/V)，加0.1-1.0N NaOH，PH值至7.2，攪拌10分鐘、靜置8小時，液體溫度達(dá)4℃時，在14000轉(zhuǎn)/分，離心25分鐘后，棄去上清液，沉淀即為多聯(lián)多價抗體粗制品；(4)在多聯(lián)多價抗體粗制品加入無菌去離子水、重復(fù)步驟(3)取沉淀進(jìn)行抗體效價測驗(yàn)定，K88、K99、987P抗體效價均達(dá)到1∶1280，即得到精制豬用多取多價抗體；3.中藥水煎提取噴霧干燥工藝A.按圖2流程對黃連、黃柏、秦皮中草藥水煎提取、噴霧干燥；B.按圖3流程對白頭翁、側(cè)柏葉中草藥水煎提取、噴霧干燥；4.豬用抗體中藥雙歧因子復(fù)合制劑成品合成生產(chǎn)工藝將配方原料混合，加無菌去離子水，使干物質(zhì)濃度達(dá)28％；→在高速乳化機(jī)中，4000轉(zhuǎn)/分；→高速乳化20分鐘；→通過4號篩過濾；→在高速離心噴霧干燥機(jī)(進(jìn)口溫度165-170℃、出口溫度70-75℃、噴霧頭轉(zhuǎn)速13200轉(zhuǎn)/分、負(fù)壓20帕)；→噴霧干燥→出口物料溫度≤65℃→過4號篩→進(jìn)行質(zhì)量檢查→①K88·K99·987P抗體效價達(dá)到1∶320；②小檗堿薄層色譜法檢查陽性；③雜菌總數(shù)≤1000個/克；④致病菌和大腸桿菌陰性；⑤酵母和霉菌數(shù)≤100個/克；⑥水份含量≤8％；→分裝→貼標(biāo)→包裝→成品→入庫。
(三).豬用抗體中藥雙歧因子復(fù)后制劑的使用效果①作用與用途本制劑特異抑制和殺滅豬致病性大腸桿菌、魏氏梭菌、仔豬副傷寒沙門氏桿菌和和致瀉性輪狀病毒、豬傳染性胃腸炎病毒、流行性腹瀉病毒以及偽狂犬病毒，同時對其它病原性微生物也具有抑制和殺滅作用，激發(fā)仔豬自身免疫系統(tǒng)，延長免疫作用，提高免疫力，促進(jìn)腸道益生菌增殖和胃腸粘膜細(xì)胞生長。特效防治仔豬黃白痢、紅痢、綠痢、水樣痢等多種傳染性腹瀉。
②用法與用量預(yù)防方面，每頭新生豬仔豬0.5克，疾病流行區(qū)仔豬、弱仔、寄養(yǎng)仔每頭1.0克，每克用6-8毫升生理鹽水或涼開水稀釋，搖勻，仔豬出生后奶前立即灌服或在開食補(bǔ)畏飼料和斷奶仔豬飼料中添加本制品0.2-0.5％，預(yù)制哺乳仔豬和斷奶仔豬病原性腹瀉。
治療方面，1-2周令仔豬每頭每次2克，3-4周令仔豬每頭每次2-4克，斷奶后仔豬每頭每次4-8克，每日兩至三次，三日為一療程，可均勻混合在飲料中喂服，或用生理鹽水或涼開水稀釋灌服。
切勿高溫加熱使用，稀釋后立即灌服，密閉、涼暗干燥處保存，有效期18個月。
③防治效果a.使用本制劑預(yù)防新生仔豬腹瀉比其它常見的方法提高成活率10-20％，即每窩豬接10頭新生仔豬計(jì)算，可多成活1-2頭，增加效益至少到80-160元以上。詳見下表

b、使用本制劑治療豬仔腹瀉比其它常用的方法提高治愈率10-20％以上。詳見下表

*與其它3組相比，差異極顯著(P＜0.01)實(shí)例2本實(shí)例為兔用抗體中藥雙岐因子復(fù)合制劑1.配方兔用多聯(lián)多價抗體 2公斤抗體增效保護(hù)劑(同實(shí)例1) 5公斤甘露低聚糖 0.5公斤酵母多糖 1.0公斤黃柏 0.5公斤側(cè)柏葉 0.5公斤黃連 0.5公斤秦皮 0.5公斤蒼術(shù) 0.5公斤苦參 0.5公斤澤瀉 0.5公斤上述所有中草藥重量均為水煎提取、噴霧干燥物重量。
2.生產(chǎn)工藝
(1)按圖4工藝流程生產(chǎn)兔用多聯(lián)多價高免雞蛋(2)兔用多聯(lián)價抗體提純工藝同實(shí)例1豬用多聯(lián)多價抗體提純工藝。
(3)中藥水煎提取噴霧干燥工藝同實(shí)例1豬用中藥水煎提取噴霧干燥工藝，其中苦參、澤瀉工藝同圖2工藝流程，蒼術(shù)工藝同圖3工藝流程。
(4)兔用抗體中藥雙岐因子復(fù)合制劑合成工藝同實(shí)例1豬用工藝。
3.作用與用途特效防治兔大腸桿菌病、魏氏梭菌病、輪狀病毒性腹瀉病等多種傳染性腹瀉。
4.用法與用量每公斤體重0.4-0.6克，每日兩至三次，三日為一療程，用生理鹽水或涼開水適量稀釋灌服。
預(yù)防使用，每百公斤飼料添加200-500克本制劑。
5.使用效果本制劑比青鏈雷素抗生素治療組治愈率提高9.1％，比白頭翁散煎劑治療組治愈率提高30％以上。詳見下表

*本制劑治愈率比其它兩組效果極顯著P＜0.01。
實(shí)例3本實(shí)例為羊用抗體中藥雙岐因子復(fù)合制劑。
羊用多聯(lián)多價抗體 15公斤抗體增效保護(hù)劑 25公斤甘露低聚糖 5公斤果寡糖 5公斤黃柏 10公斤側(cè)柏葉 10公斤黃連 15公斤秦皮 8公斤白頭翁 8公斤木香 10公斤車前草 5公斤上述所有中草藥重量均為水煎提取、噴霧干燥物重量。
所述的抗體增效保護(hù)劑配方聚乙烯吡咯烷酮K30-351克、乳糖10克、無菌去離子水100毫升。
2.生產(chǎn)工藝(1)按圖5工藝流程生產(chǎn)羊用多聯(lián)多價高免雞蛋(2)羊用多聯(lián)多價抗體提純工藝同實(shí)例1豬用多聯(lián)多價抗體提純工藝。
(3)中藥水煎提取噴霧干燥工藝同實(shí)例1豬用中藥水煎提取噴霧干燥工藝，其中木香工藝同圖2工藝流程，車前草工藝同圖3工藝流程。
(4)羊用抗體中藥雙岐因子復(fù)合制劑合成工藝同實(shí)例1豬用工藝。
3.作用與用途特效防治羊大腸桿菌病、魏氏梭菌病、輪狀病毒性腹瀉病等多種傳染性腹瀉。
4.用法與用量每公斤體重0.5-0.8克，每日兩至三次，三日為一療程，用生理鹽水或涼開水適量稀釋灌服。
預(yù)防使用，每百公斤飼料添加200-500克本制劑。
5.使用效果使用本制劑治療羔羊病原性腹瀉比常用抗生素和白頭翁散煎劑治療率分別提高10％和20％左右。詳見下表

*本制劑治愈率比其它兩組效果極顯著P＜0.01。
權(quán)利要求
1一種用于防治幼畜腹瀉的復(fù)合制劑，其特征在于組成成份及其重量份數(shù)多聯(lián)多價抗體2-15份，抗體增效保護(hù)劑5-25份，選自果寡糖0.5-5份、甘露低聚糖0.5-5份、酵母多糖0.5-5份中的一種或兩種以上的雙岐因子糖類，以及選自下述經(jīng)水煎噴霧干燥后的中藥干粉中的五種以上干粉黃柏0.5-10份、側(cè)柏葉0.5-10份、黃連0.5-15份、秦皮0.5-8份、白頭翁0.5-8份、蒼術(shù)0.5-10份、木香0.5-10份、苦參0.5-10份、車前草0.5-5份、澤瀉0.5-5份。
2權(quán)利要求1所述的復(fù)合制劑的制備方法，包括以下步驟(1)制取多聯(lián)多價高免疫雞蛋a.無特定病原體蛋雞在潔凈養(yǎng)殖場隔離飼養(yǎng)；b.開始產(chǎn)蛋前兩個月對蛋雞初次免疫，其方法每只雞分別同時注射以下疫苗和菌苗，沙門氏桿菌多價菌，大腸肝菌多價菌，魏氏梭菌多價菌或者兔瘟-巴氏桿菌-魏氏梭菌三聯(lián)滅活菌、羊快疫-羔羊痢疾-猝狙-腸毒血-黑疫五聯(lián)苗，傳染性胃腸炎疫苗，輪狀病毒性腹瀉苗，每種疫苗和菌苗的注射量0.5ml/只雞；c.兩周后對蛋雞第二次免疫，其方法每只雞分別注射下述疫苗大腸桿菌多價苗和偽狂犬滅活苗，每種疫苗和菌苗的注射量0.5ml/只雞；d.四周后對蛋雞第三次免疫，其方法每只雞分別注射下述疫苗傳染性胃腸炎疫苗、輪狀病毒性腹瀉苗、流行性腹瀉疫苗，每種疫苗注射量0.5ml/只雞；e.六周后對蛋雞第四次免疫，其方法每只雞分別注射下述疫苗和菌苗沙門氏桿菌多價苗，大腸肝菌多價菌，魏氏梭菌多價菌或者兔瘟-巴氏桿菌-魏氏梭菌三聯(lián)滅活菌、羊快疫-羔羊痢疾、猝狙-腸毒血-黑疫五聯(lián)苗，傳染性胃腸炎疫苗，偽狂犬滅話苗和輪狀病毒腹瀉苗，每種疫苗和菌苗的注射量為0.5m1-1.0/只雞；f.八周后進(jìn)行卵黃抗體免疫學(xué)檢測為多聯(lián)多價抗體中K88、K99、987P抗體凝集效價1∶160-1∶640后收集多聯(lián)多價高免疫雞蛋，在16℃條件下保存待用，如果檢測不合格，重復(fù)步驟(e)，重新免疫，直至檢測合格。(2)多聯(lián)多價抗體提純a.將步驟(1)得到的多聯(lián)多價高免疫雞蛋先進(jìn)行消毒，打碎雞蛋進(jìn)行分離，得到卵清和卵黃，其中卵清經(jīng)噴霧干燥，制得卵清粉；b.在(a)步卵黃中加入卵黃重量的2-10倍的無菌去離子水和0.1-1.0NHCl，使PH值至5.0-5.8，加NaCl，濃度至0.5-0.9％(W/W)，再加聚乙二醇6000，濃度至3.5-5.0％(W/V)，然后攪拌10-20分鐘后靜置0.5-24小時，控制液體溫度為4-20℃時，在3000-15000轉(zhuǎn)/分下離心10-30分鐘，得到上清液和沉淀物，沉淀物經(jīng)噴霧干燥，得到卵黃粉；c.在(b)步的上清液中加入聚乙二醇-6000，濃度至12-15％(W/V)，再加0.1-1.0N NaOH，使PH值至6.8-7.5，攪拌10-20分鐘，靜置0.5-24小時，控制液體溫度達(dá)4℃時，在3000-15000轉(zhuǎn)/分下離心20-40分鐘，棄去上清液，沉淀物即為多聯(lián)多價抗體粗制品；d.將多聯(lián)多價抗體粗制品溶于無菌卻離子水中，再重復(fù)(c)步過程，取沉淀，進(jìn)行抗體效價測定，K88、K99、987P抗體凝集效價達(dá)1∶320∽1∶2560即得到精制的多聯(lián)多價抗體，所述的無菌去離子水的量為多聯(lián)多價抗體粗制品重量的2-10倍；(3)制取中藥干粉選自黃柏、側(cè)柏葉、黃連、秦皮、白頭翁、蒼術(shù)、木香、苦參、車前草、澤瀉中的五種或五種以上的中草藥分別按下述過程提取，制得干粉a.中藥原料切碎、洗凈后用冷水浸泡1-5小時，至藥心充分浸透后加入原料重量的5-8倍的水，加熱至沸騰后文火煎煮，第一次煎煮30-60分鐘，倒出藥液，然后再進(jìn)行兩次煎煮，每次煎煮加水量是原料重量的5倍水，煎煮1-2小時，然后將三次藥液混合得到混合藥液，剩下的藥渣中再加入原料重量的3倍水，煎煮30分鐘，藥液用于下一批藥煎煮使用；b.將步聚(a)混合藥液，在負(fù)壓3-8千帕、溫度40-80℃下減壓濃縮，至干物質(zhì)的含水量為10-15％，再離心除去土；c.步驟(b)除去土后的物質(zhì)進(jìn)行在離心噴霧干燥機(jī)上噴霧干燥，即得到中藥干粉，所述的噴霧干燥機(jī)操作條件進(jìn)口溫度150-280℃、出口溫度70-90℃、轉(zhuǎn)速12000-30000轉(zhuǎn)/分；(4)制取抗體中藥雙岐因子復(fù)合制劑將步驟(2)制得的精制的多聯(lián)多價抗體、抗體增效保護(hù)劑、步驟(3)分別制取的中藥干粉以及包括果寡糖、甘露低聚糖、酵母多糖在內(nèi)的雙岐因子糖類，經(jīng)混勻后，加無菌去離子水，至混合物的重量濃度達(dá)25-30％，然后在高速乳化機(jī)或勻質(zhì)機(jī)上乳化、過濾，然后在離心噴霧干燥機(jī)上噴霧干燥后過3-5號篩，最后進(jìn)行質(zhì)量檢查、分裝、入庫，所述的噴霧干燥機(jī)操作條件進(jìn)口溫度150-220℃、出口溫度65-90℃、轉(zhuǎn)速12000-30000轉(zhuǎn)/分、負(fù)壓10-80帕。
全文摘要
本發(fā)明是一種用于防治幼畜腹瀉的復(fù)合制劑,其特點(diǎn)是將多聯(lián)多價抗體、抗體增效保護(hù)劑、果寡糖、甘露低聚糖、酵母多糖以及由黃柏、側(cè)柏葉、黃連、秦皮、白頭翁、蒼術(shù)、木香、苦參、車前草、澤瀉中草藥經(jīng)水煎提取后噴霧干燥制得的干粉混勻后加入無菌去離子水,然后乳化、過濾和高速離心噴霧干燥機(jī)噴霧干燥、過3－5號篩即得到所需產(chǎn)品。本發(fā)明的復(fù)合制劑是一種用于防止幼畜腹瀉的獸藥,它將現(xiàn)有的免疫防治、藥物防治和微生態(tài)學(xué)防治有效的集合為一體,直接服用可提高幼畜成活率10－30%,使幼畜成活率達(dá)95%以上,縮短幼畜哺乳期21－28天,腹瀉幼畜治愈率90%以上,而且懷孕母畜可免打防治幼畜腹瀉的各種疫苗,是生產(chǎn)有機(jī)食品和綠色食品畜產(chǎn)品的藥品,可降低勞動工作量,降低生產(chǎn)成本,提高綜合經(jīng)濟(jì)效益。
文檔編號A61P1/12GK1370575SQ0210013
公開日2002年9月25日 申請日期2002年1月9日 優(yōu)先權(quán)日2002年1月9日
發(fā)明者張勇飛 申請人:張勇飛