專利名稱：修復(fù)和促進(jìn)胃腸道粘膜組織再生的組合物及其制備方法
本申請享有于2001年6月28日申請的題為“體內(nèi)原位培植再生干細(xì)胞實(shí)現(xiàn)組織生理修復(fù)和器官功能性再生”的美國臨時(shí)申請?zhí)朜o.60/301,961的優(yōu)先權(quán)，在此作為參考。
粘膜主要由附著于基底膜上的上皮細(xì)胞組成。與眼瞼內(nèi)層的粘膜組織不同，在胃內(nèi)表面的上皮細(xì)胞是暴露于更為嚴(yán)酷的條件下，例如酸(即氫氯酸)有時(shí)是酒精、參與食物消化的酶(如胃蛋白酶)以及從此處產(chǎn)生的廢物。粘液分泌基本保護(hù)了胃和十二指腸內(nèi)細(xì)胞免受酸或酶的損害，例如通過所含的碳酸氫鹽中和酸對胃內(nèi)壁的作用，以及用抑制劑阻斷酶活性。一旦上皮細(xì)胞粘液分泌停止，胃和十二指腸的內(nèi)壁會最終被酸和酶的聯(lián)合作用侵蝕，導(dǎo)致潰瘍。
現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究已經(jīng)確認(rèn)了許多因素引發(fā)了下列各種胃腸疾病，如急性胃炎、慢性淺表性胃炎、萎縮性胃炎、胃竇炎、老年性胃炎、膽汁回流性胃炎、食道炎、胃十二指腸潰瘍、消化不良、胃神經(jīng)衰弱癥、便秘，以及隨之引發(fā)的各種不良癥狀，包括胃酸過多、胃酸過少、脹氣、飯后不適、飲酒后胃部不適和進(jìn)食過快引起的胃部不適。這些因素包括(1)飲酒、吸煙、服藥以及通過直接損傷胃粘膜或刺激胃酸分泌來破壞胃粘膜屏障的其它因素；(2)所有微生物的感染及其引起胃腸道粘膜損傷的毒素；(3)免疫因素由IgA在胃腸液分泌減少而導(dǎo)致的免疫功能低下，損害了身體對細(xì)菌和毒素的清除，進(jìn)一步導(dǎo)致胃腸粘膜的損傷；(4)十二指腸的回流除去了胃粘膜表面的粘液，從而破壞了胃粘膜屏障；(5)慢性胃炎導(dǎo)致了胃潰瘍；(6)便秘引發(fā)或誘發(fā)胃腸疾?。?7)腸道疾病引起腸壁神經(jīng)結(jié)構(gòu)的損傷，從而導(dǎo)致便秘，等等。
胃炎和消化道潰瘍疾病中，粘膜損傷的生理機(jī)理被認(rèn)為是攻擊因子和抵抗因子之間出現(xiàn)失衡，前者如酸產(chǎn)生或胃蛋白酶，后者如粘液產(chǎn)生、氫鹽及血流。侵蝕性胃炎通常與嚴(yán)重的疾病或藥物相伴。緊張、乙醇、膽汁和非甾體抗炎藥物破壞了胃粘膜屏障，使它易受到正常吸分泌的攻擊。幽門螺桿菌(Helicobacter.pylori)是一種短小的螺旋狀、微需氧的革蘭氏陰性桿菌，它的感染被廣泛認(rèn)為是消化道潰瘍主要病因。幽門螺桿菌寄生在覆蓋胃粘膜的粘液膠體的深層，并且可能破壞它的保護(hù)作用特性。人們認(rèn)為，幽門螺桿菌實(shí)際上感染了所有慢性活動性胃炎病人。
研究人員已經(jīng)開發(fā)出了各種藥物，用于治療與受損或功能不良的胃腸道粘膜組織相關(guān)的上述疾患。其中一種方法是用抗酸劑中和胃酸以解除胃炎癥狀，例如，鋁或鎂的氫氧化物(MAALUX和MYLANTA)中和胃酸度，導(dǎo)致胃和十二指腸內(nèi)的pH值下降。鋁離子抑制平滑肌的收縮，進(jìn)而抑制胃排空。鋁和鎂抗酸混合劑被用來避免腸功能的改變。
另一種方法是使用組胺H2受體拮抗劑，抑制組織胺在具抑制酸分泌作用的壁細(xì)胞上的活動。H2受體拮抗劑的例子包括西咪替丁(TAGAMET)、尼扎替丁(AXID)、雷尼替丁(ZANTAC)、奧美拉唑(PREVACID)和雷貝拉唑(ACIPHEX)。西咪替丁抑制胃壁細(xì)胞的H2受體中的組胺，導(dǎo)致胃酸分泌和胃容量減少，以及氫離子濃度降低。尼扎替丁競爭性地抑制胃壁細(xì)胞的H2受體中的組胺，同樣導(dǎo)致胃酸分泌和胃容量減少，以及氫離子濃度降低。奧美拉唑通過抑制壁細(xì)胞H+/K+ATP泵來減少胃酸的分泌，可解輕十二指腸活動性潰瘍和侵蝕性食管炎癥狀。雷貝拉唑也通過抑制壁細(xì)胞H+/K+ATP泵來減少胃酸的分泌，可用于胃炎的短期治療，減輕癥狀；用于十二指腸活動性潰瘍的治療以及不同程度的侵蝕性食管炎。
這些抗酸或抗?jié)兯幬?，雖然能夠暫時(shí)緩解癥狀，但是沒有被證明能夠非常有效地完全治愈潰瘍和預(yù)防潰瘍的復(fù)發(fā)。在治療之后，可以修復(fù)粘膜，但是不能恢復(fù)粘膜的生理結(jié)構(gòu)和功能。另外，長期大劑量使用這些藥物會產(chǎn)生各種副作用，如便秘、腹瀉、惡心和嘔吐、腹部不適和疼痛，以及造成對中樞神經(jīng)、心血管和肝臟系統(tǒng)的其它有害反應(yīng)。因此，需要開發(fā)與目前現(xiàn)存的方法在戰(zhàn)略上完全不同新的藥物和方法，用于預(yù)防和治療胃腸道內(nèi)粘膜的損傷。
消化道潰瘍與炎癥是長期捆擾人類健康的常見疾患，現(xiàn)代臨床上一直使用各種中、西藥物或者其它物質(zhì)預(yù)防和治療這種疾患。但是各種藥物或者療法都存在各自不同的如上所述的不足之處，本領(lǐng)域的技術(shù)人員完全熟悉這些弊端，而且一直致力于尋求更加理想的手段克服這些弊端。
為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足之處，本發(fā)明的目的在于為哺乳動物、特別是人類提供一種醫(yī)藥學(xué)或營養(yǎng)保健學(xué)的新的組合物。
本發(fā)明的另一目的在于提供一種制備該組合物的方法。
本發(fā)明的另一目的在于提供該組合物的用途。
本發(fā)明的另一目的在于提供了一種適宜的藥物傳輸載體。
為了完成本發(fā)明的目的，實(shí)際上，本發(fā)明涉及一種適用于口服的藥物組合物，其特征在于它包括食用油與食用蠟、甾醇化合物的均質(zhì)混合物，其中，按該組合物總重量計(jì)算，食用蠟的含量為0.5-50％；甾醇化合物至少為0.1％.
優(yōu)選的甾醇復(fù)合物的含量重量百分比為0.5％-20％，1％-10％更佳，2％-6％最佳。
優(yōu)選的食用蠟的含量重量百分比為3％-30％，5％-20％更佳，6％-10％最佳。
食用蠟可選取適用于人體口服的任何類型的蠟，天然或合成的均可。它包括，但不限于蜂蠟、蓖麻蠟、甘油蠟以及巴西棕櫚蠟。在具體的范例中，選用蜂蠟更佳。
食用油選用適于人體口服的天然或合成的油，天然油包括，但不限于玉米油、小麥芽油、豆油、米糠油、油菜籽油、芝麻油、魚油以及其它蔬菜油和動物油。在具體的實(shí)施方案中，芝麻油為更佳的選擇。
本組合物還含有蜂膠適宜含量為重量的0.1％-30％，1％-20％更佳，5％-10％最佳。本組合物中最好不含水。但是可以含有少量的水，例如正常油脂中含有水的量。其含量按重量計(jì)算，為小于等于1％。
口服使用的本發(fā)明組合物的配制使用廣為人知的可接受的藥用載體，這樣的載體可使藥物可以制成片劑、丸劑、糖衣片、膠囊、乳劑、膠劑、糖漿、粘稠液、懸浮液等類似物，以供病人口服之用。
具體來說，本發(fā)明組合物較佳的劑型是膠囊。適用口服的膠囊，包括由明膠制所成的填充膠囊，以及由明膠和增塑劑，如甘油或山梨醇制成的軟型密封膠囊。本發(fā)明采用軟膠囊形式則更佳。本發(fā)明組合物可溶解或懸浮于適當(dāng)?shù)囊后w中，如脂肪油或液體聚乙烯醇，另外還可添加穩(wěn)定劑。
再具體例如，提供了適于口服的組合物，可作為藥品或營養(yǎng)保健品。本發(fā)明組合物的組成包括一種活性成分以及食用油和食用蠟的均質(zhì)化合物，食用蠟的含量范圍為重量的3％至30％，食用蠟形成微晶體狀，在室溫下均勻而充分地分散在食用油中。微晶體的適宜長度為0.1-100μm，5-70μm更佳，10-50μm最佳。微晶體的形態(tài)隨著含量和溫度的變化而變化，在室溫下，微晶體呈單一的針狀晶體，以及/或幾個(gè)晶體彼此聚集形成微晶復(fù)合體。
在本發(fā)明中，藥品是指在醫(yī)生處方下或無處方的被用作藥劑治療疾病的某種物質(zhì)，營養(yǎng)保健品是指促進(jìn)身體的整體健康或治療身體某種狀況的營養(yǎng)增補(bǔ)劑。營養(yǎng)保健品通常是在保健食品商店銷售的，無需醫(yī)生開具處方的商品。
本發(fā)明中所述組合物和方法用于修復(fù)和促進(jìn)胃腸道粘膜的修復(fù)和再生，從而恢復(fù)受損的或功能不全的粘膜的生理結(jié)構(gòu)和功能，提高機(jī)體吸收營養(yǎng)物質(zhì)的能力，實(shí)現(xiàn)健康和平衡的代謝，最終促進(jìn)整個(gè)機(jī)體的總體健康水平。值得注意的是，本發(fā)明所述的組合物可用于治療其它器官的功能不全的粘膜，例如鼻腔、肺、肛門、陰道、耳、眼和口腔的粘膜，以及其它器官如心臟、肝臟、胰臟、腎和肺的組織修復(fù)和再生。
本發(fā)明組合物還可以含有一種甾醇化合物，其含量按重量計(jì)算，0.1％-20％為宜，1％-10％更佳，2％-6％最佳。
另外，本發(fā)明還涉及一種適用于口服的藥物組合物，其特征在于包括一種活性成分；以及一種食用油與食用蠟的均質(zhì)混合物，食用蠟的含量按組合物總重量計(jì)算，介于3-30％之間，該組合物中食用蠟形成微晶體，在室溫下充分地均勻分散在食用油中。
上述的有效成分指治療疾病或促進(jìn)總體健康水平的任何藥物，這些藥物在分類上包括(1)胃腸用藥(2)抗生素(3)抗病毒藥物(4)抗真菌藥物(5)抗腫瘤藥物(6)止痛藥(7)鎮(zhèn)靜藥(8)麻醉拮抗劑(9)抗抑郁劑(10)抗組織胺藥(11)抗偏頭痛藥(12)心血管藥(13)鈣通道阻斷劑(14)食欲抑制劑(15)避孕藥(16)皮質(zhì)甾醇(17)局部麻醉藥(18)利尿藥(19)降壓藥(20)類固醇類(21)前列腺素類(22)抗炎癥藥(23)抗血栓劑(24)強(qiáng)心劑(25)抗麻痹劑(26)化學(xué)依賴性藥物(27)抗酸性劑(28)肽類。
根據(jù)以上實(shí)例，甾醇化合物可以是動物性甾醇，也可以是植物性甾醇(也稱植物甾醇)。例如，動物性甾醇包括膽固醇以及它的所有天然的或合成的異構(gòu)體和衍生物。甾醇復(fù)合物更好的選擇是選用豆甾醇、β-谷甾醇、菜子甾醇、海綿甾醇、γ-谷甾醇，菜籽甾醇，α-菠菜甾醇，dancosterol，24-去氫膽固醇、多孔甾醇，以及所有天然或合成的同質(zhì)異構(gòu)形式及以上述的派生物。甾醇復(fù)合物最好是由豆甾醇、β-谷甾醇和菜子甾醇混合組成，在此統(tǒng)稱為“谷甾醇”。
不言而喻，對甾醇化合物的修改，即包含側(cè)鏈也仍屬于這項(xiàng)發(fā)明所涉及的范圍。同樣，這項(xiàng)發(fā)明不受任何特別配制的多種甾醇混合物的限制。
根據(jù)以上的實(shí)施方案，本發(fā)明組合物還可含有黃芩甙，適宜含量為重量的0.01％-5％，0.1％-2％更佳，0.1％-1％最佳。
根據(jù)以上的實(shí)施方案，本發(fā)明組合物還可以含有黃芩(Radix Scutellariae)的水、有機(jī)溶劑如油和乙醇的提取物，或水和有機(jī)溶劑兩者組合的提取物。更優(yōu)選的是，該提取物是1-50重量％的黃芩在食用油，優(yōu)選是芝麻油中的提取物。最好是用黃芩根，這種植物選用唇形科(Labiatee Family)的粘毛黃芩，滇黃芩，甘肅黃芩，薄葉黃芩，麗江黃芩和川黃芩中的一種或多種均可。
根據(jù)以上的實(shí)施方案，本發(fā)明組合物中還可以包括黃柏內(nèi)酯(obacalactone)(亦稱為檸檬苦素酸)，優(yōu)選的含量范圍為重量的0.01％-5％，0.1％-2％更佳，0.1％-1％為最佳。
根據(jù)以上的實(shí)施方案，本發(fā)明組合物還可含有黃柏(Phellodendron amurenseRupr)的水、有機(jī)溶劑如油和乙醇的提取物，或水和有機(jī)溶劑兩者組合的提取物。更優(yōu)選的是，該提取物是1-50重量％的黃柏在食用油中，優(yōu)選是芝麻油中的提取物。采用黃柏樹皮為宜，黃柏選用黃皮樹，禿葉黃皮樹，峨嵋黃皮樹，云南黃皮樹和鐮刀葉黃皮樹中的一種或多種。
根據(jù)以上的實(shí)施方案，本發(fā)明組合物中可以含有黃小檗堿(obaberine)，優(yōu)選的含量范圍為重量的0.001％-0.05％，0.002％-0.03％更佳，0.003％-0.01％最佳。
根據(jù)以上的實(shí)施方案，本發(fā)明組合物還可含有黃連(coptis chinensis Franch)的水、有機(jī)溶劑如油和乙醇的提取物，或水和有機(jī)溶劑兩者組合的提取物。優(yōu)選的是，該組合物是1-50重量％的黃連在食用油，優(yōu)選為芝麻油中的提取物。最好選用黃連根，植物選用毛茛科三角葉黃連，峨嵋野連，云南黃連中的一種或多種。
根據(jù)以上的實(shí)施方案，本發(fā)明組合物還可含有小檗堿(berberine)，優(yōu)選的含量范圍是重量的0.001％-2％，0.002％-0.5％更佳，0.003％-0.1％最佳。
根據(jù)以上的實(shí)施方案，本發(fā)明組合物中也可以含罌粟殼堿(narcotoline)，優(yōu)選的含量范圍是重量的0.001％-2％，0.002％-0.5％更佳，0.003％-0.1％最佳。
根據(jù)以上的實(shí)施方案，本發(fā)明組合物還可以包括2-10重量％，罌粟殼(Papaversomniferam L.)的水、有機(jī)溶劑如油和乙醇的提取物，或水和有機(jī)溶劑兩者組合的提取物。優(yōu)選的是，所述的提取物是1-50重量％的罌粟殼在食用油，優(yōu)選是芝麻油中的提取物。
根據(jù)以上的實(shí)施方案，本發(fā)明組合物還可含有分別為2-10重量％的黃芩、黃柏和黃連的水、有機(jī)溶劑如油和乙醇的提取物，或水和有機(jī)溶劑兩者組合的提取物。優(yōu)選的是，該提取物是1-50重量％的，分別2-10重量％的黃芩、黃柏和黃連混合物在食用油中的提取物。
根據(jù)以上的實(shí)施方案，本發(fā)明組合物還可含有分別2-10重量％的黃芩、黃柏、黃連和罌粟殼的水、有機(jī)溶劑如油和乙醇的提取物，或水和有機(jī)溶劑兩者組合的提取物。優(yōu)選的是，該提取物是1-50重量％的，分別2-10重量％的黃芩、黃柏、黃連和罌粟殼混合物在食用油中的提取物。
根據(jù)以上的實(shí)施方案，本發(fā)明組合物中還可包含各種氨基酸，最好是全部18種天然氨基酸，它們?yōu)榧?xì)胞生長提供了營養(yǎng)支持。這些氨基酸既可以是化學(xué)合成，也可以是純天然的。
根據(jù)以上的實(shí)施方案，本發(fā)明組合物還可含有地龍的水、有機(jī)溶劑如油和乙醇的提取物，或水和有機(jī)溶劑兩者組合的提取物。更優(yōu)選的是，該組合物是1-50重量％的地龍?jiān)谑秤糜椭械奶崛∥铩?br> 根據(jù)以上的實(shí)施方案，本發(fā)明組合物還可以含有分別2-10重量％，黃芩、黃柏、黃連、罌粟殼和地龍的水、有機(jī)溶劑如油和乙醇的提取物，或水和有機(jī)溶劑兩者組合的提取物。更優(yōu)選的是，所述的提取物是1-50重量％的，分別2-10重量％的黃芩、黃柏、黃連、罌粟殼和地龍混合物在實(shí)用油中的提取物。
另一方面，本發(fā)明組合物提供了一些保護(hù)和修復(fù)粘膜的方法，其原理可能是促進(jìn)再生性粘膜細(xì)胞的生長。使用這些方法，損傷的或功能有障礙的粘膜可以恢復(fù)功能及生理結(jié)構(gòu)，從而提高機(jī)體吸收營養(yǎng)物質(zhì)的能力，這樣，又改善了機(jī)體的總體健康狀況，增強(qiáng)機(jī)體免疫系統(tǒng)的功能以戰(zhàn)勝疾病。
具體例如，本發(fā)明提供了一種預(yù)防宿主胃腸道中粘膜發(fā)生潰瘍或受到刺激的方法，具體做法是宿主口服一種食用油和食用蠟、甾醇化合物的均質(zhì)混合物，食用蠟的含量為重量的0.5％-50％，甾醇化合物的含量至少是0.1％。
所述的宿生最好是人類。作為預(yù)防，在食用酒類、辛辣食物或其它對胃有刺激的食物以前服用本組合物，或者也可以在食用以后服用。
另外，本發(fā)明還提供了一種治療宿主胃腸道紊亂的方法，具體做法是讓患有胃腸道紊亂疾病的宿主口服一種食用油和食用蠟、甾醇化合物的均質(zhì)混合物，食用蠟的含量為重量的0.5％-50％，甾醇化合物的含量至少是0.1％。。
同樣，該宿主最好是人類。本發(fā)明組合物可作為在醫(yī)生處方下或無處方的藥物、營養(yǎng)品或保健食品，劑量根據(jù)宿主病情嚴(yán)重程度而有所不同。例如本組合物每天宜服用0.5-10克，較佳劑量是每天2-8克，最佳劑量為每天3-6克。例如，如果本組合物為0.5克軟膠囊包裝，可服用1-10個(gè)膠囊，每天2次。
胃腸道紊亂的例子包括，但不限于胃腸疾病，如急性胃炎、慢性表面性胃炎、萎縮性胃炎、竇性胃炎、老年性胃炎、膽汁回流胃炎、食道炎、胃十二指腸潰瘍、消化不良、胃神經(jīng)炎、便秘以及各種隨之而發(fā)生的不適，如胃酸過多、胃酸過少、胃腸氣脹、飯后胃腸不適，以及服用酸性藥物如水楊酸鹽(即阿斯匹林)引起的胃炎、飲酒或禁食引起的胃不適。
再具體例如，本發(fā)明提供了一種治療胃腸道癌的方法，具體做法是給患胃腸癌的病人口服含有食用油、食用蠟和甾醇化合物均勻混合的藥物，食用蠟的含量為重量的0.5％-50％，甾醇化合物的含量至少是重量的0.1％。
胃腸道癌包括上部或下部胃腸癌，上部胃腸癌包括，但不限于(1)食道癌；(2)胃癌；(3)胰腺癌；(4)肝癌；(5)膽管癌。下部胃腸癌包括，但不限于大腸癌，如結(jié)腸直腸癌、原發(fā)性淋巴瘤、黑素瘤及大腸肉瘤。
在本發(fā)明中，本發(fā)明組合物也可采用緩釋系統(tǒng)傳輸藥物成分，例如有治療藥物的固態(tài)疏水性高分子半滲透基質(zhì)。當(dāng)前已建立了各種類型的緩釋材料，且在技術(shù)上已成熟，為人們熟知。緩釋膠囊可根據(jù)其化學(xué)性質(zhì)，在數(shù)周乃至超過100天的期限內(nèi)逐漸釋放出本發(fā)明組合物成分。
本發(fā)明還提供了一種在體內(nèi)向粘膜傳輸有效成分的組合物的制備方法。這個(gè)方法是在高于其熔點(diǎn)的溫度下加熱食用蠟；在高于食用蠟熔點(diǎn)的溫度下加熱食用油；在3∶97至20∶80的重量比范圍內(nèi)混合已熔化的蠟與油；均質(zhì)化蠟和油的混合物。
根據(jù)這一實(shí)施方案，該方法可以進(jìn)一步包括將黃芩根加入食用油，重量比范圍為1∶99至10∶90，并在高于食用蠟熔點(diǎn)的溫度下加熱混合物。
根據(jù)這一實(shí)施方案，這個(gè)方法可以進(jìn)一步包括將均質(zhì)的蠟和油混合物裝入到凝膠膠囊中，這種凝膠膠囊可以是硬的或軟的凝膠膠囊。
食用蠟最好選用熔點(diǎn)為70-80℃的蜂蠟，而食用油最好選用麻油。
蠟和油的混合物可以在均化器上混勻，最好在35-45℃溫度下均化15-20分鐘，轉(zhuǎn)速最好選擇6000-10000rpm。還可以選擇使用膠體磨均化蠟和油的混合物。
再具體例如，本發(fā)明提供了一種體內(nèi)保護(hù)和治療粘膜組織的組合物的制備方法。這個(gè)方法是在80-180℃之間加熱麻油和黃芩的混合物10至120分鐘，兩者重量比范圍為70∶30至98∶2；過濾混合物，獲得麻油濾液；冷卻麻油濾液至70-90℃之間；按3∶93至10∶90的重量比將蜂蠟加入到麻油濾液當(dāng)中；在80-180℃之間將蜂蠟和麻油濾液的混合物加熱10-60分鐘并攪拌，均質(zhì)蜂蠟和麻油濾液的混合物。
再具體例如，本發(fā)明提供了一種體內(nèi)保護(hù)和治療損傷粘膜組織的組合物的制備方法。這個(gè)方法包括在80-180℃之間加熱混合的麻油和黃芩、黃柏、黃連、罌粟和蚯蚓的組合物10至120分鐘，麻油和組合物之間的重量比是70∶30和98∶2；過濾混合物，獲得麻油濾液；冷卻麻油濾液至70-90℃之間；按3∶93-10∶90的重量比將蜂蠟加入到麻油濾液當(dāng)中；在80-180℃之間將蜂蠟和麻油濾液的混合物加熱10-60分鐘并攪拌；均質(zhì)蜂蠟和麻油濾液的混合物。
根據(jù)以上的組合物生產(chǎn)方法，混勻蜂蠟和麻油濾液的混合物應(yīng)該包括將混合物混勻，直至蜂蠟微?；蛭⒕w在室溫下被穩(wěn)定均勻地分散在油內(nèi)。
圖2描繪培養(yǎng)成體再生干細(xì)胞、促進(jìn)組織生理性修復(fù)和功能性器官的再生所使用的特殊技術(shù)。
圖3A顯示在攝入乙醇后大鼠胃出現(xiàn)嚴(yán)重的潰瘍。
圖3B顯示在攝入乙醇后大鼠胃出現(xiàn)嚴(yán)重的潰瘍后，連續(xù)三周服用胃腸膠囊內(nèi)容物0.8g/Kg。
圖4A顯示蜂蠟與麻油混合、但未均質(zhì)化后呈現(xiàn)的鴿巢樣結(jié)構(gòu)。
圖4B電鏡下，蜂蠟與麻油混合、但未均質(zhì)化的表現(xiàn)圖5A顯微鏡下，蜂蠟與麻油均質(zhì)化后，呈現(xiàn)蜂蠟單個(gè)的針狀微晶體。
圖5B顯微照片顯示當(dāng)蜂蠟與麻油混勻后呈現(xiàn)蜂蠟微晶復(fù)合體。
圖6描述本發(fā)明組合物的生產(chǎn)過程。
圖7A-H顯微照片分別顯示第24，30，38，42，50，85，90天培養(yǎng)的小鼠腸組織。左側(cè)圖片是對照組，右側(cè)為治療組。
圖8A-H顯微照片顯示第24，30，38，42，50，70，85和90天培養(yǎng)的小鼠胃組織。左側(cè)圖片是對照組，右側(cè)為治療組。
本發(fā)明人用實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示了本發(fā)明組合物能夠維持并刺激體外粘膜細(xì)胞強(qiáng)壯成長，以促進(jìn)動物模型的胃潰瘍的生理性愈合。本發(fā)明人認(rèn)為，本發(fā)明的組合物能通過在消化道，特別是胃腸道，尤其是在胃里，提供再生的修復(fù)條件，有效地修復(fù)受損的粘膜。服用后，本發(fā)明組合物在胃腸道和胃中的粘液混和，與胃粘液粘附，在粘膜表面形成保護(hù)膜。這種人工膜保護(hù)粘膜不受酸、酒精、食物及其它胃內(nèi)食物的刺激。在這種條件下，本發(fā)明組合物的有效成份緩慢釋放到作用部位，激活再生性干細(xì)胞，促進(jìn)粘膜迅速修復(fù)。由于本發(fā)明的組合物在體內(nèi)原位提供再生的有利條件，粘膜可以得以修復(fù)并/或再生，恢復(fù)其生理結(jié)構(gòu)及功能。如圖3B所示，本發(fā)明組合物成功地治愈了動物模型的胃潰瘍，而對照組中的大鼠，未經(jīng)本發(fā)明組合物治療，其胃潰瘍更加惡化(3A)。而且，由于其獨(dú)特劑型，本發(fā)明組合物可以有效地通過改變胃幽門螺桿菌的形態(tài)，有效地抑制毒性。隨著健康的胃腸道的再生，有利于胃幽門螺桿菌駐留的潰瘍性環(huán)境被破壞了，從而間接地抑制了這種細(xì)菌的生長。此外，由于受損或功能不全的粘膜恢復(fù)了正常的生理結(jié)構(gòu)和功能，機(jī)體吸收營養(yǎng)成份的能力增強(qiáng)了，從而使代謝變得平衡和健康，整個(gè)機(jī)體的健康也得以實(shí)現(xiàn)。
在傳統(tǒng)的療法中，治療胃腸道不適通常的方法是通過應(yīng)用單一藥物(如雷尼替丁)來中和胃酸，或抑制組織胺H2-受體，而本發(fā)明則公布了與傳統(tǒng)療法完全不同的、在以下基本原則指導(dǎo)下的治療方法1.成體組織修復(fù)和器官再生的基本原則本發(fā)明揭示了成體組織在體內(nèi)原位修復(fù)和再生的基本原則，如

圖1所示。1)總原則從總體而論，如果給完全發(fā)育的成體提供一個(gè)再生的環(huán)境，它有能力修復(fù)受損的組織和再生器官。如圖1所示，作為對創(chuàng)傷或其它類型損傷的應(yīng)答，損傷器官的殘存成活細(xì)胞可被激活，并自己轉(zhuǎn)化為成體干細(xì)胞(ASCs)，即胚胎干細(xì)胞的對應(yīng)物。成體干細(xì)胞的這種誘導(dǎo)能力但是，這些新生的干細(xì)胞相當(dāng)脆弱，各種環(huán)境因素產(chǎn)生的細(xì)胞毒素以及細(xì)胞對損傷的失控反應(yīng)，都易引起這些干細(xì)胞的死亡。如圖1所示，在本發(fā)明組合物提供的適宜的培養(yǎng)條件下，這些成體干細(xì)胞遵循胚胎發(fā)育階段就已被遺傳性程序化的指令，進(jìn)行增殖、發(fā)育成各種多能性組織干細(xì)胞。這種多能性功能組織干細(xì)胞的生成確保各種類型的細(xì)胞的足量供應(yīng)，這些細(xì)胞是形成生理性功能組織所需要的再看一看圖1，在本發(fā)明組合物提供的最優(yōu)選的培養(yǎng)條件下，這些組織干細(xì)胞增生擴(kuò)散、分化成特定類型組織的特定類型細(xì)胞。特定類型的分化細(xì)胞通過特定組織的細(xì)胞粘連彼此相互聯(lián)接，形成新生組織。這種特定組織細(xì)胞的聯(lián)系方式在此統(tǒng)稱為“細(xì)胞連接”。然后，再生的新組織通過形成特定器官的組織與組織連接，并模仿發(fā)育期胎兒的組織組裝過程，組合成為新生器官。在成體中這種特定器官的組織連接方式在此統(tǒng)稱為“組織組合”。
最后，在重組的器官中的新生組織在本發(fā)明組合的調(diào)控下，發(fā)育成熟為單個(gè)的、具有功能性的組織，具有生理性平衡的細(xì)胞種類和數(shù)量。同時(shí)，這些組織通過有生命的器官網(wǎng)中的組織交流，經(jīng)歷進(jìn)一步的重塑，并最終形成完全功能性的、成熟的器官(圖1)。
遵循上述描述的再生途徑，受損或丟失的組織可以修復(fù)，重獲它們的生理結(jié)構(gòu)和功能。正如用大鼠作模型的范例一節(jié)中所示，本發(fā)明方法可以修復(fù)胃潰瘍組織。
發(fā)明人相信，在優(yōu)選的發(fā)育條件下，通過體內(nèi)原位培養(yǎng)再生的干細(xì)胞的方法，可以再生受損的器官，并使之完全恢復(fù)其生理結(jié)構(gòu)和功能。在本發(fā)明提供的內(nèi)源性和外源性材料的調(diào)控下，這個(gè)再生過程在體內(nèi)自然發(fā)生。從根本上而言，器官的成功再生依賴于生理性適宜的特定組織的多細(xì)胞粘連、特定器官的多組織組合和活體內(nèi)多器官的自我平衡性和免疫性相容的共存。2)重新定義“干細(xì)胞”基于這一基本原則和臨床中在器官再生方面的成功應(yīng)用，對干細(xì)胞的含義在本發(fā)明中有了重新的定義。
在傳統(tǒng)的定義中，干細(xì)胞應(yīng)具備下列屬性1)它不是自身終末分化，即不處于分化的最末端；2)它可以無限地，或至少在動物的生命期內(nèi)進(jìn)行分裂；3)當(dāng)它分裂時(shí)，每一個(gè)子細(xì)胞既可保持為干細(xì)胞狀態(tài)，也可開始不可逆的終末分化的進(jìn)程。[參見細(xì)胞分子生物學(xué)(Molecular Biology of the Cell)，Alberts等主編，第三版(1994)，1155-1156頁，Garland Publishing公司，紐約和倫敦]根據(jù)這一定義，從人體組織中分離出來的干細(xì)胞，例如從人體胚泡的內(nèi)細(xì)胞群分離出來的胚胎干細(xì)胞，即使完全是從一個(gè)活人身上分離出來，而后駐存在體外的培養(yǎng)基中，它們?nèi)耘f是干細(xì)胞。這些所謂的干細(xì)胞，雖然可以無限地分裂和分化成各種類型的組織細(xì)胞，卻未能顯示具有再生一個(gè)完全功能性的人體器官的能力，更不用說在體外再生一個(gè)活人。
為避免與傳統(tǒng)的干細(xì)胞定義混淆，本發(fā)明將干細(xì)胞稱為“再生干細(xì)胞”。這種再生細(xì)胞具有以下特征(1)它存在于活體內(nèi)；(2)它受身體的生理控制和調(diào)控；(3)它與身體的組織和器官共存；(4)它在活體內(nèi)可不斷地進(jìn)行細(xì)胞分裂；(5)它具有修復(fù)組織、再生器官、恢復(fù)再生器官的生理結(jié)構(gòu)和功能的能力。3)機(jī)體的自然再生人體具有巨大的再生能力。具有細(xì)胞更新高比率的組織，如血液和上皮在整個(gè)生命過程中都不斷地再生。其它組織，如肝臟、骨骼、肌肉、血管和腎上腺皮層當(dāng)受到損傷時(shí)會出現(xiàn)再生。肝臟通過補(bǔ)償性的增生進(jìn)行再生，而其它組織可能是通過增大間葉細(xì)胞派生的組織再生，激活儲備干細(xì)胞或祖細(xì)胞來實(shí)現(xiàn)再生，或是在再生的組織中實(shí)現(xiàn)再生。例如，造血細(xì)胞，如T細(xì)胞，B細(xì)胞，中性粒細(xì)胞，以及紅血球均由骨髓中的造血干細(xì)胞再生而來。如果手指的末梢到末端的指關(guān)節(jié)被切除，指尖仍可再生。但是，無論是骨骼還是肌肉都不能越過間隙再生，而且其它器官如皮膚、胰腺、心臟和脊髓受到損傷后，愈后常會留下瘢痕組織。
本發(fā)明中公布的獨(dú)特而新穎的方法的焦點(diǎn)是，利用身體本身固有的能力進(jìn)行自我修復(fù)和再生。在適宜的生理?xiàng)l件下，如浸泡在溫暖的無菌羊水中，胎兒可以自然愈合創(chuàng)面，不會留下疤痕，也不會失去功能。遺憾的是，完全發(fā)育的人類卻是生存在一個(gè)完全不同的、更為敵對的環(huán)境中。在外在和內(nèi)在條件的影響下，自然的成體創(chuàng)面愈合和器官生長經(jīng)歷一個(gè)稍微不同的軌跡，最終往往留下疤痕，造成器官功能不全。這種自然愈合過程完全是被動的，不受治療方法的控制，是一個(gè)混亂無序的細(xì)胞增殖、分化和再生組織重建的過程。此外，胃腸系統(tǒng)粘膜經(jīng)常性地暴露在粗糙的酸性環(huán)境，一旦受到損傷，如果不進(jìn)行治療就無法自我修復(fù)。4)在原則應(yīng)用中發(fā)展的方法論本發(fā)明提供了積極地控制組織修復(fù)和器官再生整個(gè)過程的方法和組合物。在這個(gè)過程中，細(xì)胞——生命的最小單位受到刺激，進(jìn)行增殖、分化和彼此結(jié)合，生理性地修復(fù)受損組織或再生被各種原因，如創(chuàng)傷和疾病破壞的組織。這些初生的組織然后連結(jié)在一起，形成具有完全功能的器官。
為了在成人身上實(shí)現(xiàn)這種結(jié)果，就需要一個(gè)特效的、積極的人為治療方法。在本發(fā)明中展示的這種治療方法的總指導(dǎo)原則是1)對于損傷或損壞的組織，應(yīng)最大限度地保留殘存組織中的成活細(xì)胞；2)應(yīng)盡早去除壞死細(xì)胞或組織；3)應(yīng)該在一個(gè)模仿再生細(xì)胞自身原始生理?xiàng)l件內(nèi)激活和增殖再生細(xì)胞；4)對再生的器官應(yīng)用細(xì)胞生長和分化的調(diào)節(jié)劑，以指導(dǎo)正確的組織生理修復(fù)。
具體來說，本發(fā)明的方法論包括以下八大技術(shù)，見圖2中的大圖。
a)成體干細(xì)胞(ASCs)的激活和調(diào)節(jié)在體內(nèi)原位產(chǎn)生多能性成體干細(xì)胞依賴于a)激活休眠的組織干細(xì)胞，如上皮干細(xì)胞，它們可能存在于毛囊的凸起部分；b)誘導(dǎo)完全逆分化的細(xì)胞進(jìn)行逆分化，將其轉(zhuǎn)變?yōu)锳SCs。
b)在體內(nèi)原位培養(yǎng)ASCs在生理的濕潤環(huán)境中培養(yǎng)脆弱的初生ASCs，使之快速生長和定向分化。
c)液化壞死組織的排出或滲出粘膜壞死組織的去除是通過粘附本發(fā)明組合物，自動地從創(chuàng)面滲出來完成，從而大大降低了對殘存的成活組織造成物理或化學(xué)損傷的危險(xiǎn)。
d)外源性培養(yǎng)基中的組織體內(nèi)原位培養(yǎng)在本發(fā)明組合物提供外源性培養(yǎng)基中，ASCs及其分化的細(xì)胞迅速生長、結(jié)合和移動，從而生理性地修復(fù)損傷的組織或再生丟失的組織。
e)非殺菌方式抑制細(xì)菌毒性對于引起創(chuàng)面感染的細(xì)菌，不是通過局部使用抗生素來殺死細(xì)菌性細(xì)胞，而是讓細(xì)菌性細(xì)胞在本發(fā)明組合物提供的環(huán)境下進(jìn)行遺傳性復(fù)制，并改變形態(tài)，降低毒素產(chǎn)生，從而大大降低因身體對細(xì)菌毒素的免疫反應(yīng)而引起的炎癥。
f)粘膜再生的生理濕潤環(huán)境的產(chǎn)生本發(fā)明組合物粘附上胃粘膜上，提供了一個(gè)濕潤的、酸性少、有利于再生的上皮干細(xì)胞生長從而修復(fù)粘膜潰瘍的環(huán)境。
g)創(chuàng)面與外界環(huán)境的微觀隔離口服本發(fā)明組合物進(jìn)入胃腸道后，在其粘膜上形成一層人造膜，該膜將損傷的粘膜與外界粗糙的環(huán)境隔離開，但又可以使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)和氧緩慢持續(xù)地滲透到底下的組織中。這樣，粘膜及其底下的組織可以得到再生，依次又恢復(fù)胃腸道中器官的正常功能，如營養(yǎng)攝取和代謝。
h)再生所需的氧和營養(yǎng)的供應(yīng)各種營養(yǎng)物質(zhì)，如天然氨基酸的完整光譜、多糖、脂肪酸和磷酸鹽均由外源提供。細(xì)胞生長所需的氧可通過這層膜滲透到底下的組織。同時(shí)，將細(xì)菌和其它環(huán)境污染物與下在進(jìn)行修復(fù)和再生的組織隔離開。5)本發(fā)明方法與其它方法在技術(shù)的對比目前臨床上使用的替代損壞的器官和組織的方法是器官移植和植入仿生裝置。器官移植的主要缺點(diǎn)是供體短缺和免抑制免疫力的副作用。植入仿生裝置的缺點(diǎn)是無法生產(chǎn)出與天生組織一樣的耐久力、強(qiáng)度、形式、功能和生物相容性的人造材料。
二十世紀(jì)九十年代出現(xiàn)的再生醫(yī)學(xué)，目前尚處于試驗(yàn)階段，它著重于兩個(gè)主要策略進(jìn)行細(xì)胞移植力求在移植部位形成新組織；植入體外組建的生物人造組織。
細(xì)胞移植包括干細(xì)胞的體外培養(yǎng)和增殖，而后將它們或它們分化的產(chǎn)品移植到受損器官的位置。雖然生育學(xué)方面所取得的進(jìn)步有可能將細(xì)胞移植應(yīng)用于臨床，但仍存在多種實(shí)際的限制，而且臨床結(jié)果在生理學(xué)和美學(xué)上也不盡如人意。這種方法的限制之一是難以在眾多的組織中鑒別和分離多能性干細(xì)胞。盡管最近已經(jīng)培養(yǎng)出了多能性人體胚胎干細(xì)胞(ESC)系，但ESCs的定向分化仍舊是個(gè)謎。
動物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果雖然很鼓舞人心，但仍不能在機(jī)能上轉(zhuǎn)化為人們依賴的人體療法。例如，體外神經(jīng)干細(xì)胞派生出來的小鼠神經(jīng)元細(xì)胞和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，以及在體外來自ESCs的心肌細(xì)胞，當(dāng)注射入成體腦部和心臟時(shí)，它們會分別與周圍組織結(jié)合。多能人體神經(jīng)干細(xì)胞注射進(jìn)正在發(fā)育的小鼠腦部時(shí)，它們會在整個(gè)腦部移動，并在特定部位分化。
利用體外培養(yǎng)的干細(xì)胞實(shí)現(xiàn)器官的成功再生，還面臨首許多障礙。體外培養(yǎng)的干細(xì)胞一旦移植入患病區(qū)域，它們必須被引導(dǎo)向特定顯型分化，因此，這就必須完全譯解這個(gè)過程所需的信號，以便指導(dǎo)設(shè)計(jì)體外組織培養(yǎng)條件。一些研究人員在技術(shù)上得到的實(shí)驗(yàn)資料表明，盡管通過在培養(yǎng)基中添加白血病抑制因子，可實(shí)現(xiàn)多能性人間葉細(xì)胞、小鼠神經(jīng)干細(xì)胞和小鼠胚胎干細(xì)胞在體外的生長，但小鼠ESCs在體內(nèi)和體外隨機(jī)性分化。技術(shù)上的進(jìn)步將有可能使小鼠胚胎干細(xì)胞(ESCs)在體外被誘導(dǎo)分化為多能性神經(jīng)膠質(zhì)祖細(xì)胞，并把它們移植入髓磷脂不足的大鼠腦中。但是，當(dāng)人們將這些從特定的組織中采集來的或從體外胚胎干細(xì)胞中分化而來的多能性干細(xì)胞植入受傷的成體組織時(shí)，它們是否能成為特定部位的組織，這個(gè)問題還是未能得到解答。
移植產(chǎn)生的免疫排斥是細(xì)胞移植中另一個(gè)主要難題。由于異源細(xì)胞可用于一些實(shí)例中(如，來自骨髓的間葉干細(xì)胞)，大多數(shù)移植的細(xì)胞將是異源的。研究人員已試圖采用遺傳改變和細(xì)胞生物的策略，以促進(jìn)異體或異種移植宿主的耐受性，如將二倍體的體細(xì)胞置于去除細(xì)胞核的人體或其它哺乳動物的受精卵中，用由此產(chǎn)生的胚囊產(chǎn)生干細(xì)胞，這些方法引起了對生物倫理的關(guān)注，這成了一個(gè)更為棘手的問題。
植入在體外組建的人造生物組織也面臨不少障礙。例如，合成仿生植入物所用的支架材料即是一大挑戰(zhàn)，因?yàn)榉律踩胛镄枰芯_的地形學(xué)、表面屬性、生長和分化的信號，以利于細(xì)胞移動、粘連、增殖和分化，以及各種組織和器官形狀的可塑性。目前正在使用或試驗(yàn)的人造生物材料包括各種陶瓷、聚亞安酯人造橡膠、聚酯、聚酣以及聚磷腈。這些材料為細(xì)胞提供了機(jī)械支撐、移動通道以及粘性的表面。
與上述簡述的技術(shù)背景相對立的是，本發(fā)明組合物的使用，實(shí)際上就提供了成體組織修復(fù)和器官再生的一種創(chuàng)新性方法。該方法與目前這一領(lǐng)域的研究人員所采用的通行的體外干細(xì)胞培養(yǎng)方法形成強(qiáng)烈對比，它著重于成體干細(xì)胞在體內(nèi)原位的激活和培養(yǎng)。通過利用身體本身固有的自我修復(fù)和再生能力，該方法為身體的自然再生提供了一個(gè)適宜的條件，這是一個(gè)模仿健康胎兒發(fā)育所需的再生環(huán)境。本發(fā)明提供的組合物可激活休眠的干細(xì)胞進(jìn)行增殖，或誘導(dǎo)成體組織細(xì)胞轉(zhuǎn)變化再生干細(xì)胞，并保持這些干細(xì)胞的活躍增殖以及定向地分化為體內(nèi)原位再生所需的所有細(xì)胞?；钚猿煞莸男屡浞揭灿欣谛纬梢粋€(gè)生理濕潤的、營養(yǎng)的和自我平衡的環(huán)境，以確保組織和器官的修復(fù)和再生，使之完全恢復(fù)它們的生理結(jié)構(gòu)和功能。2.胃腸道的再生醫(yī)學(xué)在上述闡述的基本原則和方法的指導(dǎo)下，人們可以預(yù)想到本發(fā)明可以在細(xì)胞生育學(xué)領(lǐng)域和醫(yī)藥學(xué)實(shí)踐中得到廣泛的應(yīng)用，特別是，本發(fā)明組合物已研制成為維持胃腸道正常功能或修復(fù)胃腸道粘膜和其它組織的醫(yī)藥或營養(yǎng)保健藥用品。
根據(jù)體外體內(nèi)的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷膹?qiáng)有力證據(jù)，發(fā)明人相信，只要提供適宜的再生環(huán)境，作為對組織修復(fù)信號，即對創(chuàng)傷和潰瘍的反應(yīng)，人體內(nèi)任何器官的組織細(xì)胞均可被激活，生成再生干細(xì)胞。完全發(fā)育的成體的生理性組織修復(fù)和功能性器官再生與妊娠早期階段胎兒的無疤合創(chuàng)面愈合不同，它的唯一途徑是通過體內(nèi)原位提供外源性培養(yǎng)基，刺激并維持成體干細(xì)胞的快速增殖和定向分化，并確保各種器官特定組織的正確組裝，而不致在結(jié)構(gòu)和功能上出現(xiàn)實(shí)質(zhì)性的丟失。
發(fā)明人認(rèn)為，盡管很難標(biāo)定和分離多能性成體干細(xì)胞(ASCs)，但可以通過體內(nèi)原位激活休眠的組織干細(xì)胞以及/或誘導(dǎo)成體組織細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)锳SCs(圖1)的方式產(chǎn)生成體干細(xì)胞。最近在干細(xì)胞研究方面的新進(jìn)展以及本發(fā)明中闡述的基本原則在應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)和臨床試驗(yàn)所取得的資料均佐證了這一觀點(diǎn)。
最近，在肝臟、胰腺以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)中均發(fā)現(xiàn)了ASCs。從骨髓中分離出了間葉干細(xì)胞，而且有證據(jù)表明類似的細(xì)胞甚至可能存在于整個(gè)身體組織的結(jié)締組織室。研究人員曾大范圍地搜索ASCs的位置，并推測它們可能存在于特定的小生境中。
不論各種ASCs的精確位置在哪里，本發(fā)明提供的方法和組合物均可用于激活體內(nèi)的ASCs，在體內(nèi)原位修復(fù)損傷組織和再生功能不全的器官。由此可以預(yù)見，這種創(chuàng)新性的方法可以用來恢復(fù)哺乳動物，尤其是人類體內(nèi)的任何組織和任何器官的生理結(jié)構(gòu)和功能。在下列將描述胃腸道失調(diào)的預(yù)防和治療的應(yīng)用。
一方面，本發(fā)明的組合物能激活或誘導(dǎo)胃腸道組織中的再生干細(xì)胞，修復(fù)胃腸道內(nèi)有疾病的或損傷的粘膜和器官。
在小腸的內(nèi)層，細(xì)胞排列為單層上皮細(xì)胞，上皮細(xì)胞覆蓋了凸進(jìn)腸內(nèi)臟的絨毛的表面，分泌粘液的杯狀細(xì)胞散布在上皮內(nèi)具有吸收功能的刷狀緣細(xì)胞之中。上皮細(xì)胞上排列著許多隱窩，均凸進(jìn)底下的結(jié)締組織。每個(gè)隱窩由250個(gè)上皮細(xì)胞組成，其中包括了上皮干細(xì)胞。這些多能性干細(xì)胞位于每個(gè)隱窩的附近或底部。參考Loeffler等人，(1993)J.Theor.Biol.160471-491.腸上皮干細(xì)胞能對間質(zhì)的生存或分化的指令作出反應(yīng)。通常來說，這些細(xì)胞再生過程很緩慢，更象是毛囊干細(xì)胞。它們中的一些轉(zhuǎn)化為迅速但短暫的增殖細(xì)胞，移行到中部位置后，隨即分化成具有吸收功能的刷狀緣腸細(xì)胞，即分泌粘液的杯狀細(xì)胞，或者分化為絨毛的腸內(nèi)細(xì)胞。為了維持自我平衡，分化的細(xì)胞隨即死亡，從絨毛中脫落，進(jìn)入腸內(nèi)腔。
隨著身體的老化，腸內(nèi)上皮干細(xì)胞的生長能力逐漸減弱，而且也越來越難以激活干細(xì)胞。結(jié)果，腸道維持健康地?cái)z取營養(yǎng)物的能力大打折扣，出現(xiàn)了營養(yǎng)不良，從而加速了老化。
為停止這種惡性循環(huán)，本發(fā)明提供了提高哺乳動物，尤其是人類營養(yǎng)攝取力的組合物和方法。本發(fā)明組合物與粘膜強(qiáng)力粘合，傳輸各種營養(yǎng)物質(zhì)和/或活性成分，刺激組織修復(fù)和再生的ASCs?？诜?，本發(fā)明組合物與胃腸道的粘膜粘合，保護(hù)粘膜免受因飲酒、食辛辣食物等引起的刺激。本發(fā)明組合物的一個(gè)具體產(chǎn)品由“公認(rèn)安全的”天然物質(zhì)的提取物組成。因此，本發(fā)明組合物可用于健康人的飲食補(bǔ)充品或營養(yǎng)保健品，用來保護(hù)粘膜，預(yù)防因粘膜受損或衰弱引起的各種不適的發(fā)作。而且，由于本發(fā)明組合物的獨(dú)特劑型，刺激身體再生的活性成分是以一種緩慢釋放的方式傳輸，不斷地提供充足的營養(yǎng)物質(zhì)，支持和刺激粘膜和其它類型組織在體內(nèi)原位生長。此外，隨著胃腸道內(nèi)老化的組織細(xì)胞返老還童，胃腸道內(nèi)可以從食物和其它途徑更好地吸收營養(yǎng)物質(zhì)，通過血液傳輸營養(yǎng)物質(zhì)，身體的其它組織和器官的生理功能也得以提高。
與此相關(guān)，本發(fā)明的組合物也可用于治療由于消化道的各個(gè)器官，即口腔、食道、胃和大小腸受到了損傷而導(dǎo)致的人體消化疾病，這種疾病包括消化器官潰瘍疾病，腸炎疾病以及其它損傷。消化道疾病可能是由于人體消化道器官或營養(yǎng)通道包括口、食道、胃及大小腸的損傷或紊亂所造成，消化道紊亂包括胃潰瘍、腸道類疾病及其他損傷。
胃腸道疾病的通常是由幽門螺桿菌感染Helicobacter pylori(H.pylori)引起的，這些感染可引起活動性的慢性胃炎，并通常導(dǎo)致聯(lián)合綜合證，如十二指腸潰瘍、胃潰瘍、MALT淋巴瘤或巨大肥厚性胃炎綜合癥。消滅或抑制幽門螺桿菌可以減少十二指腸和胃潰瘍的復(fù)發(fā)。
持久性的胃炎與幽門螺桿菌感染有關(guān)，往往與胃粘膜上類似于腸道特點(diǎn)的表達(dá)有關(guān)，這種情況稱為腸(樣)組織變形(IM)，可能是胃癌風(fēng)險(xiǎn)加大的信號，這是全球第二大因癌致死的病癥。
IM的病因尚不清楚，可能是一種突變性的適應(yīng)作用，或是對幽門螺桿菌的防御作用，有人推測變形的粘膜可能產(chǎn)生粘液或其他物質(zhì)，這些物質(zhì)創(chuàng)造了一個(gè)對抗幽門螺桿菌的環(huán)境，因此，對幽門螺桿菌進(jìn)行普遍治療應(yīng)當(dāng)可以降低胃癌的發(fā)病率。
本發(fā)明人認(rèn)為，本發(fā)明組合物通過在胃腸道，特別是胃內(nèi)提供再生的條件，可以有效地修復(fù)損傷的粘膜。使用本組合物后，藥物在胃腸道中與胃粘膜混合，形成保護(hù)膜，其中含有粘蛋白，隔離粘膜與胃內(nèi)的酸、酒、食物以及其他物質(zhì)引起的進(jìn)一步刺激。在這種情況下，本發(fā)明組合物中的甾體化合物及其他選擇性的有效成分被釋放到特定部位，激活該部位的再生性干細(xì)胞，從而促進(jìn)粘膜的快速愈合。如圖3可知，本發(fā)明組合物成功地治愈了動物胃潰瘍。此外，本組合物也可以通過改變細(xì)菌形態(tài)，有效地抑制幽門螺桿菌的毒性。隨著健康的胃腸道的再生，有利于幽門螺桿菌的潰瘍條件被破壞，因而間接地抑制細(xì)菌的生長。
本發(fā)明組合物可用于治療幽門螺桿菌感染以及與之相關(guān)的疾病(如潰瘍、胃癌、非潰瘍性消化不良、胃炎以及與胃一食管回流病相關(guān)的食管疾病)。本發(fā)明組合物可用于治療這些疾病是因?yàn)樗鼘ξ改c道有總體的保護(hù)作用，而且它還能促進(jìn)維護(hù)粘膜的完整性。
本發(fā)明組合物可用來抑制幽門螺桿菌在粘膜上吸附或形成菌落，也可用來促進(jìn)因幽門螺桿菌感染引起的組織損傷的愈合，在這一點(diǎn)上，意味著在融合的腸上皮細(xì)胞的受損單層上加入本發(fā)明組合物，可以激活隱窩中的上皮干細(xì)胞，增加上皮細(xì)胞向創(chuàng)面移行的速率。
正如本發(fā)明組合物可用來保護(hù)胃腸道或消化道，比如腸的其它部位那樣，它也可用于保護(hù)口腔及食管免受因放療和化療造成的損傷。放療和全身服用抗癌藥物對快速增殖細(xì)胞，如淋巴細(xì)胞、粘膜細(xì)胞和毛發(fā)細(xì)胞有產(chǎn)生細(xì)胞毒素的影響，分別導(dǎo)致脊髓壓迫、粘膜炎和甚至脫發(fā)?？拱┋煼ǖ倪@些副作用不但大大降低了病的生活質(zhì)量，而且還給病人及其家屬造成許多痛苦。特別是，對粘膜的損傷造成了提高對抗癌癥的身體免疫系統(tǒng)所需的營養(yǎng)物質(zhì)的吸收不良。因此，使用本發(fā)明組合物后，可以修復(fù)受損的粘膜，恢復(fù)其生理功能，因而間接地抑制了癌細(xì)胞的生長和轉(zhuǎn)移。
另一方面，本發(fā)明的組合物也可用于治療或預(yù)防影響到內(nèi)臟器官，如胃腸道器官的上皮細(xì)胞造成的過度增生性的疾病或前期癌變，口服本發(fā)明組合物后，通過重新建立宿主的癌前期細(xì)胞與健康細(xì)胞之間的交叉對話，可以恢復(fù)這些器官的內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定。
癌癥通常被認(rèn)為是細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞之間的內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定調(diào)節(jié)發(fā)生紊亂的結(jié)果，一旦內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的平衡失去了，就會發(fā)生惡性病變，微環(huán)境因子如基質(zhì)組成成分的降解，以及宿主和腫瘤間的相互作用都是惡性細(xì)胞生存和生長的不可少的條件。
通過采用本發(fā)明的組合物和方法，組織的內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定平衡是可以恢復(fù)的，而且不會失去生理功能。正如在以下“實(shí)施例”部分展示的那樣，本發(fā)明組合物具有促進(jìn)胃腸細(xì)胞的生長，在體外形成組織的能力，表明了本發(fā)明組合物很可能通過刺激各種細(xì)胞膜蛋白質(zhì)如聯(lián)接蛋白和鈣粘蛋白介導(dǎo)的交叉對話，調(diào)節(jié)細(xì)胞間交流，促進(jìn)細(xì)胞間相互作用，最終使細(xì)胞的生長、分化、凋亡和遷移得到協(xié)調(diào)的調(diào)節(jié)。
本發(fā)明組合物可通過促進(jìn)宿主細(xì)胞與前期癌細(xì)胞或癌細(xì)胞的間隙接合點(diǎn)的生長而恢復(fù)組織內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的平衡。間隙接合是出現(xiàn)在大多數(shù)動物細(xì)胞類型中的一種特殊細(xì)胞間接合。兩個(gè)相鄰的細(xì)胞通過形成間隙接合點(diǎn)和細(xì)胞膜蛋白質(zhì)和聯(lián)接蛋白相互作用。6個(gè)相同的聯(lián)接蛋白形成一個(gè)結(jié)合質(zhì)，兩個(gè)結(jié)合質(zhì)相連跨過細(xì)胞的間隙形成連續(xù)的水通道，把兩個(gè)細(xì)胞連接起來。每個(gè)間隙接合點(diǎn)是一簇均勻的膜內(nèi)的粒子與漿膜的細(xì)胞漿折斷面的結(jié)合。每個(gè)膜內(nèi)粒子對應(yīng)于一個(gè)結(jié)合質(zhì)，間隙接合點(diǎn)使小分子保持細(xì)胞之間的通道，與各種生命過程如發(fā)育、細(xì)胞代謝及細(xì)胞生長控制有關(guān)。
大部分聯(lián)接蛋白轉(zhuǎn)移后被磷酸化，主要是作用在絲氨酸等氨基酸部位上，聯(lián)接蛋白是各種蛋白質(zhì)激酶的靶子，其中有些酶已確認(rèn)，包括蛋白質(zhì)激酶C，促有絲分裂原激活的蛋白質(zhì)激酶以及v-Sre酶氨酸蛋白質(zhì)激酶。磷酸化與許多連接過程的調(diào)節(jié)有關(guān)，如交換、組合/折離、降解以及間隙接合通道的控制。
此外，另一種細(xì)胞膜蛋白鈣粘蛋白在細(xì)胞與細(xì)胞粘連和遷移中起著重要的作用，研究發(fā)現(xiàn)，在蛋白質(zhì)酶氨酸激酶(PTK)變形的細(xì)胞中鈣粘蛋白介導(dǎo)的細(xì)胞與細(xì)胞的粘連作用受到干擾，而鈣粘蛋白本身卻不是PTK的良好底質(zhì)；它們的細(xì)胞質(zhì)結(jié)合伴侶Arm鏈蛋白卻是PTK的優(yōu)良底質(zhì)，因此是作為介導(dǎo)PTK誘發(fā)的鈣粘蛋白行為的變化良好候選物。例如β-鏈蛋白與傳統(tǒng)鈣粘蛋白的細(xì)胞質(zhì)區(qū)結(jié)合，起到調(diào)節(jié)吸附作用并/或鈣粘蛋白與肌纖維蛋白細(xì)胞骨骼的橋梁作用。
本發(fā)明組合物很可能可以激活這些激酶，這些激酶然后把聯(lián)接蛋白和鈣粘蛋白的細(xì)胞結(jié)合伴侶如鏈蛋白進(jìn)行磷酸化。通過這些與細(xì)胞粘連相關(guān)的蛋白質(zhì)適當(dāng)?shù)牧姿峄?，腫瘤細(xì)胞與宿主細(xì)胞之間恢復(fù)了信息交換通道。腫瘤與宿主的連接恢復(fù)后，腫瘤細(xì)胞受到了宿主的調(diào)控。在宿主的調(diào)控下，腫瘤細(xì)胞將誘導(dǎo)發(fā)生凋亡(程序控制的細(xì)胞死亡)，或分化成為非致腫瘤的細(xì)胞，于是，組織的內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的平衡得到恢復(fù)，可以預(yù)防或抑制腫瘤的惡變。
在特殊方面，本發(fā)明組合物的方法可用于治療上下胃腸道的癌癥。上胃腸道癌癥包括，但不限于下列幾種(1)由過量使酒、堿攝入、弛緩不能、吸煙、接觸硝胺類化合物、巴特雷氏粘膜、胼胝形成、霉菌毒素、變形病毒的感染如大乳頭瘤病毒(HPV)、單純皰疹病毒(HSV)、巨細(xì)胞病毒(CMV)及非洲淋巴細(xì)胞瘤病毒(EBV)普文二氏綜合癥等引起的食道癌；2)由于胃酸缺乏、幽門螺旋菌感染、以往的胃切除手術(shù)以及Billroth II操作引起的胃癌；(3)由吸煙、接觸β-萘胺、聯(lián)苯胺及慢性胰腺炎引起的胰腺癌；(4)由乙肝病毒、慢性肝病如慢性活動性肝炎及肝硬變、接觸霉菌毒素、電離輻射、甾體激素及硬化物引起的肝癌，以及(5)由于硬化性膽管類，寄生蟲感染及甾體激素引起的膽管癌。下胃腸癌包括結(jié)腸惡性腫瘤，如結(jié)腸直腸癌，原發(fā)性淋巴瘤、黑瘤、大腸肉瘤。腺癌占大腸癌的90％以上，類癌瘤占了大部分結(jié)腸直腸往上的其它腫瘤。
一方面，該組合物的用途是能夠促進(jìn)細(xì)胞生長、組織修復(fù)和器官再生，尤其是在體內(nèi)條件下。需要注明的是，這些成分也可以被作為體外，例如試管內(nèi)細(xì)胞生長培養(yǎng)基或在體外重建組織和/或器官。
特別是，該組合物用于修復(fù)和促進(jìn)胃腸道的粘膜再生，以便恢復(fù)損傷或功能不全的粘膜的恢復(fù)生理結(jié)構(gòu)和功能，提高機(jī)體吸收營養(yǎng)物質(zhì)的能力，實(shí)現(xiàn)健康和平衡的生理代謝，最終促進(jìn)整個(gè)機(jī)體的總體健康水平。應(yīng)該注意到，該組合物還可用來治療其它器官，如鼻、肺、肛門、陰道、耳、眼和口的功能不全粘膜。
具體地講，本發(fā)明涉及一種適用于口服的藥物組合物，其特征在于它包括食用油與食用蠟、甾醇化合物的均質(zhì)混合物，其中，按該組合物總重量計(jì)算，食用蠟的含量為0.5-50％；甾醇化合物至少為0.1％.
優(yōu)選的甾醇化合物的含量重量百分比為0.5％-20％，1％-10％更佳，2％-6％最佳。
優(yōu)選的食用蠟的含量重量百分比為3％-30％，5％-20％更佳，6％-10％最佳。
甾醇化合物可以是動物性甾醇，也可以是植物性甾醇(也稱植物甾醇)。例如，動物性甾醇包括膽固醇以及它的所有天然的或合成的異構(gòu)體和衍生物。甾醇復(fù)合物更好的選擇是選用豆甾醇、β-谷甾醇、菜子甾醇、海綿甾醇、γ-谷甾醇，菜籽甾醇，α-菠菜甾醇，胡蘿卜甙，24-去氫膽固醇、多孔甾醇，以及所有天然或合成的同質(zhì)異構(gòu)形式及以上述的派生物。甾醇復(fù)合物最好是豆甾醇、β-谷甾醇和菜子甾醇的混合物，在此統(tǒng)稱為“谷甾醇”。
雖然不希望受到有關(guān)甾醇在組織修復(fù)和器官再生中的作用機(jī)理的理論限制，發(fā)明人認(rèn)為，甾醇復(fù)合物在通過改變細(xì)胞膜的流動性和滲透性來誘導(dǎo)細(xì)胞形態(tài)方面發(fā)揮重要作用。如結(jié)果顯示，很多細(xì)胞膜有關(guān)的蛋白如激酶和磷酸酶可以被激活來刺激細(xì)胞生長。也許休眠的干細(xì)胞由于細(xì)胞膜形態(tài)的改變而被激活。進(jìn)一步而言，分化的成體組織細(xì)胞也會被誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化為一個(gè)非分化型即進(jìn)入被稱作“反分化”的過程。隨著細(xì)胞膜滲透性的改變，其它有絲分裂原和調(diào)節(jié)分子可以更容易被細(xì)胞吸收，從而刺激生理性組織修復(fù)和功能器官再生所需的多種細(xì)胞的平衡生長。而且，細(xì)胞粘連分子(CAMs)的表達(dá)和磷酸化可以被刺激，據(jù)推測，這是由于在形態(tài)形成過程中的細(xì)胞膜約束蛋白被激活，從而進(jìn)一步地增強(qiáng)同族細(xì)胞間的聯(lián)合，形成特定的組織，同族組織的組合在體內(nèi)形成了全功能的器官。此外，受甾醇復(fù)合物的刺激，產(chǎn)生前列腺素(PG)，它又刺激了胃粘膜的分泌，形成有效的屏障以抵制對粘膜的刺激。
不言而喻，對甾醇化合物的修改，即包含側(cè)鏈也仍屬于這項(xiàng)發(fā)明所涉及的范圍。同樣，這項(xiàng)發(fā)明不受任何特別配制的多種甾醇混合物的限制。換句話說，任何單獨(dú)的甾醇化合物或是與其它甾醇化合物按要求，根據(jù)最終的形式的自然特性，以不同的比率進(jìn)行配制組合，也都屬于這項(xiàng)發(fā)明所涉及的范圍。
在這項(xiàng)發(fā)明中使用的甾醇化合物來自于各種天然來源。例如，植物甾醇類可以從加工的植物油(包括水生植物)中獲取，如玉米油、小麥籽油、大豆提取物、大米提取物、米糠、油菜籽油、芝麻油、和其它植物油以及魚油。對上述物質(zhì)的普遍性沒有任何限定，因此不用說，甾醇化合物還有其它的來源，如海洋動物，本發(fā)明組合物有可能就是由海洋動物油制備而來的。例如，甾醇化合物可以從植物油泥使用溶劑，如甲醇，制備而來。另外可選擇的方法是從林業(yè)的副產(chǎn)品高油樹脂或肥皂中提取。
食用油選用適于人體口服的天然或合成的油，天然油包括，但不限于玉米油、小麥芽油、豆油、米糠油、油菜籽油、芝麻油、魚油以及其它蔬菜油和動物油。
食用蠟可以是適用于人體口服的任何類型的蠟，天然或合成的均可。它包括，但不限于蜂蠟、蓖麻蠟、甘油蠟以及巴西棕櫚蠟。
食用蠟，比如蜂蠟，其熔點(diǎn)通常高于食用油(如芝麻油)。在室溫下，蜂蠟呈固態(tài)，加熱到70-80℃時(shí)熔化。充分?jǐn)嚢韬?，熔化的蠟可與油混合。但是，當(dāng)蜂蠟和芝麻油的混合物的溫度降至室溫時(shí)，即20-25℃，由于兩者不同的熱物質(zhì)屬性，蜂蠟比油降溫更快。因此，固態(tài)的蠟形成三維結(jié)構(gòu)，內(nèi)有小“鴿巢”，將油滴包繞在其中。圖4A展現(xiàn)了蜂蠟形成鴿巢包繞油滴的結(jié)構(gòu)模型。圖4B是10％的蜂蠟和約90％的芝麻油混合物的電鏡圖。從圖4B可見，蜂蠟形成三維含鴿巢的結(jié)構(gòu)，平均每一個(gè)巢的大小為19μm，每一個(gè)巢內(nèi)都包繞了油滴。
經(jīng)比較，當(dāng)蜂蠟和芝麻油在標(biāo)準(zhǔn)型的攪拌器內(nèi)均質(zhì)化，蠟會分布得更平均。用勻漿機(jī)或膠質(zhì)磨機(jī)通過乳化作用，可以獲得蜂蠟和油的勻化物。膠質(zhì)磨機(jī)可以通過不斷循環(huán)的研磨過程，提供剪切力和后壓力這兩種雙重力，因而更受青睞。
肉眼觀察可發(fā)現(xiàn)蜂蠟和芝麻油的均質(zhì)混合物呈膠狀。在室溫下，以顯微鏡觀察，可見離散的蜂蠟微晶體透過紋理或多或少地均勻分布。圖5A-B顯示了蜂蠟微晶體一個(gè)具體范例，該組合物由7％蜂蠟和92％芝麻油均質(zhì)后形成。正如圖5A-B所示，微晶體有兩種主要形式針狀微晶體以及(圖5A)和束狀或各種星狀的微晶體聯(lián)合體(圖5B)。在圖4B中，油滴包繞在由蜂蠟組成的“鴿巢”中，與此相對比，此處的蜂蠟微晶體非常均勻地散布在油液中，未形成連接的三維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)中。針狀的微晶體大小差異很大，小者長7μm，寬0.4μm，中等的長為28μm，寬0.6μm，大者長52μm，寬0.8μm。微晶體聯(lián)合體大小也有不同，小者直徑18μm，中度直徑36μm，大者直徑50μm。
令人稱奇的是，由蜂蠟和油均質(zhì)化形成的該組合物的獨(dú)特特性，是它能與粘膜強(qiáng)力粘附，尤其對于治療動物因飲酒而引起的急性潰瘍具有很好的療效。在實(shí)驗(yàn)室研究中，對照組選7只大鼠，經(jīng)無水乙醇灌胃后，僅飲水即出現(xiàn)潰瘍，潰瘍面積平均為68mm2。另一組，7只大鼠經(jīng)無水乙醇灌胃前2小時(shí)，服用一次具有鴿巢結(jié)構(gòu)(圖4B)的一種物質(zhì)，未能阻止胃潰瘍發(fā)生，潰瘍面積平均為110mm2。但是，在另一組中(8只大鼠)，多次服用以上組合物(每天一次，連續(xù)三天)，可以預(yù)防潰瘍發(fā)展。與此大不相同的是，具有蜂蠟微晶體結(jié)構(gòu)的組合物可均勻地穿過膠質(zhì)肌理，因此在另一動物組中，8只大鼠在無水乙醇灌胃2小時(shí)前僅服用了本組合物一次，就有效地防止了潰瘍的發(fā)展。在這些大鼠中，平均潰瘍面積約為15mm2，比在同等條件治療下服用具蜂蠟鴿巢結(jié)構(gòu)的物質(zhì)所出現(xiàn)的潰瘍面積小7倍。
這些結(jié)果表明，含有蠟和油均質(zhì)化的本發(fā)明組合物特別有效地與粘膜在胃腸道內(nèi)粘附，保護(hù)粘膜在飲酒后不會出現(xiàn)潰瘍。相比之下，與酒精接觸時(shí)，具有蜂蠟鴿巢結(jié)構(gòu)、內(nèi)包繞油滴的物質(zhì)與胃粘膜的粘附能力較差，而且/或者速度太慢。
發(fā)明人不希望拘泥于理論，認(rèn)為蜂蠟的微晶體比大顆?；虿捎螟澇步Y(jié)構(gòu)的蜂蠟可能更容易與胃腸道中的粘液混合。在與粘液混合時(shí)，蜂蠟微晶體也可能誘導(dǎo)在粘膜上形成膠狀的人造膜，從而保護(hù)粘膜有飲酒后不會發(fā)生潰瘍。通過與粘膜表面緊密的粘附，這層人造膜可以提高微循環(huán)，擴(kuò)張局部粘膜毛細(xì)血管，加快血液和淋巴的循環(huán)，促進(jìn)結(jié)締組織的有效代謝。而且，隨著這層人造膜在胃里的逐漸腐蝕，包繞在膠體內(nèi)的有效成份緩慢地釋放到粘膜及其下層組織。在有效成分的傳輸中，這樣的緩釋有利于刺激粘膜和其它組織細(xì)胞的生長，從而進(jìn)行修復(fù)和再生。
為了維持結(jié)構(gòu)的完整性和化學(xué)穩(wěn)定性，本組合物含有少量的水，優(yōu)選的含量范圍是重量的1％，低于0.1％更佳，低于0.01％則最佳。
除了提供本發(fā)明組合物與粘膜粘附的結(jié)構(gòu)支持外，蜂蠟還具有許多有益的生物化學(xué)屬性。長期以來，蜂蠟就被用作生產(chǎn)外用藥的賦形劑。在中國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中，蜂蠟具有解毒、生肌、定痛，治急心痛，下痢膿血，久瀉不止，胎動下血，瘡癰內(nèi)攻，久潰不斂，水火燙傷。(《中國中藥大詞典》，上?？萍汲霭嫔纾?986，2581頁)。
蜂蠟的成分可被分為4類，即脂類、游離酸類、游離醇類和烴類。蜂蠟還含有微量的芳香油和色素。在脂類里包括軟脂酸蜂花酯、蠟酸蜂花酯和蜂花生油酸蜂花酯。在游離酸類中有蠟酸、廿四酸、褐煤酸、蜂花酸、葉虱酸、落花生油酸、新蠟酸。在游離醇類中有正廿八醇、蜂花醇。在烴類中有廿五烷、廿七烷、廿九烷卅一烷以及被作蜂花烯的石蠟。在蜂蠟中還發(fā)現(xiàn)了一種芳香性有色物質(zhì)，名為蟲蠟素。
發(fā)明人不希望拘泥于理論，認(rèn)為蜂蠟的這些成分，一旦從本發(fā)明組合物形成的人造膜中釋放到粘膜上，會對機(jī)體產(chǎn)生許多有益的影響。蜂蠟的這些成分還可對本發(fā)明組合物的有效成分(如甾醇化合物)產(chǎn)生增效作用，進(jìn)一步促進(jìn)機(jī)體的總體健康，治愈各種機(jī)體不適。例如，一些成分可以提高單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的噬菌細(xì)胞能力，以及組織細(xì)胞的滲透性和機(jī)體代謝。蜂蠟中的一些成分還具有抗炎和抗?jié)冏饔?，蜂蠟中的二十八烷乙醇可增?qiáng)精力、能量和力量，提高肌肉力量，增加反射靈敏度，提高機(jī)體抵抗有害物質(zhì)刺激的能力，加速性激素的分泌，抑制痙攣，提高肌肉和心肌功能，降低心臟收縮的壓力以及增加基礎(chǔ)代謝率。
本發(fā)明組合物還含有蜂膠適宜含量為重量的0.1％-30％，1％-20％更佳，5％-10％最佳。
蜂膠是粘稠膠狀物，用來構(gòu)建蜂箱。完整無缺的蜂膠含有多種微量成分，主要為樹脂、蜂蠟、芳香油及花粉這些主要成份的均勻混合物，另外還有其他成分，包括黃酮、酚及羧酸類。天然蜂膠幾乎不能溶于水，有怪味。蜂膠可從蜂箱中用有機(jī)溶劑如乙醇、乙醚及氯仿提取制得，蜂膠中含有能抗致病菌性微生物及抗原生質(zhì)體的成分，并能增強(qiáng)人體免疫功能，促進(jìn)組織再生并有抗氧化作用。
本組合物中的食用油起到溶劑的作用，可溶解有效成分，分散蜂蠟小顆?；蛭⒕w。配制本組合物時(shí)最好使用麻油。本發(fā)明人不希望拘泥于理論，認(rèn)為麻油對身體有以下益處(1)潤腸通便；(2)抗炎、抗感染并促進(jìn)組織修復(fù)；(3)直接保護(hù)胃粘膜；(4)通過與麻油中的油酸及亞油酸共同作用，加速胃粘液分泌，間接保護(hù)胃粘膜并抗?jié)儯?5)麻油中含有芝麻酚和維生素E，它們有強(qiáng)抗氧化作用，可以消除自由基，保護(hù)生物膜的結(jié)構(gòu)及功能，保護(hù)胃腸粘膜；(6)麻油中的芝麻素可促進(jìn)正常細(xì)胞代謝；(7)提供修復(fù)胃腸粘膜所需的營養(yǎng)物質(zhì)，如氨基酸、脂質(zhì)及微量元素；(8)作為賦形劑，減少藥物的刺激作用、胃排空以及食物對藥物療效的影響。
用于口服的本發(fā)明組合物的配制使用廣為人知的可接受的藥用載體，這樣的載體可使藥物可以制成片劑、丸劑、糖衣片、膠囊、乳劑、膠劑、糖漿、粘稠液、懸浮液等類似物，以供病人口服之用。
具體來說，本組合物較佳的劑型是膠囊。適用口服的膠囊，包括由明膠制所成的填充膠囊，以及由明膠和增塑劑，如甘油或山梨醇制成的軟型密封膠囊。填充膠囊含有效成分和填充劑如乳糖、結(jié)合劑如淀粉以及/或潤滑劑如滑石粉、硬脂酸鎂，有時(shí)還含有穩(wěn)定劑。本發(fā)明采用軟膠囊形式則更佳。本發(fā)明組合物可溶解或懸浮于適當(dāng)?shù)囊后w中，如脂肪油或液體聚乙烯醇，另外還可添加穩(wěn)定劑。所有供口服的配方都應(yīng)含適合于這種用法的劑量。
用于口服的本組合物也可以與一種固體賦形劑混合，磨細(xì)，加工成顆?；旌衔?，再加入適當(dāng)?shù)妮o助劑，制成片劑或糖衣片芯，合適的賦形劑包括填充劑和纖維素制劑，特別是前者，前者如糖類，包括乳糖、蔗糖、甘露糖醇或山梨糖醇；后者如玉米淀粉、小麥淀粉、大米淀粉、土豆淀粉、明膠、黃蓍膠，甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉及/或聚乙烯吡咯酮、瓊脂或藻朊酸或其鹽類，如藻朊酸鈉。
糖衣芯需有適當(dāng)?shù)陌?，為此，可采用濃縮糖液，它也可含有阿拉伯膠、滑石粉、聚乙烯吡咯酮、聚羧乙烯膠、聚乙烯醇，以及/或二氧化鈦、漆溶液和適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑或混合溶劑。還可在片劑或糖衣片的包衣中添加染料或色素，以辨認(rèn)或特征化有效化合物劑量的不同組合。
本發(fā)明組合物還含有黃芩甙(baicalin)，適宜含量為重量的0.01％-5％，0.1％-2％更佳，0.1％-1％最佳。
不拘泥于理論，黃芩甙被認(rèn)為對損傷或患病組織具有消炎作用，有助于創(chuàng)造一種低炎癥的環(huán)境以利于器官再生，它模擬了胎兒在妊娠早期的無疤痕創(chuàng)傷愈合。黃芩甙也可以與細(xì)胞膜上的多糖如選擇蛋白的受體結(jié)合，進(jìn)一步促進(jìn)細(xì)胞粘合。黃芩甙的其它益處包括(1)抗炎作用；(2)抗過敏；(3)抗脂質(zhì)過氧化作用，可能通過抑制脂肪過氧化物的生成消除自由基；(4)抑制血小板凝聚并加速血液循環(huán)；(5)抑制腸平滑肌痙攣并改善平滑肌的功能；(6)抗致病性微生物如細(xì)菌、真菌和病毒；(7)解毒作用，降低痙攣強(qiáng)度，減少死亡率。
用油、醇或其它有機(jī)溶劑提取黃芩(Radix Scutellariae)水溶液，可得黃芩甙，油的溫度在100℃以上為宜，較佳的溫度為120-200℃，最佳溫度為160-180℃。最好是用黃芩根，植物選用唇形科(Labiatee Family)中的粘毛黃芩，滇黃芩，甘肅黃芩，薄葉黃芩，麗江黃芩和川黃芩的一種或多種均可。參考中藥大辭典，上?？萍汲霭嫔?988，2017-2021頁。
本發(fā)明組合物中還含有黃柏內(nèi)酯(obacalactone)(亦稱為檸檬苦素酸)，優(yōu)選的含量范圍為重量的0.01％-5％，0.1％-2％更佳，0.1％-1％為最佳。用油、醇或其它有機(jī)溶劑提取黃柏(Phellodendron amurense Rupr)，可得黃柏內(nèi)酯，油的溫度在100℃以上為宜，較佳的溫度為120-200℃，最佳溫度為160-180℃。也可用醇類如乙醇提取黃柏而得黃柏內(nèi)酯。采用黃柏樹皮為宜，植物選用黃皮樹，禿葉黃皮樹，峨嵋黃皮樹，云南黃皮樹和鐮刀葉黃皮樹中的一種或多種。參考中藥大辭典，上?？萍汲霭嫔?988，2031-2035頁。
本發(fā)明組合物中可含有黃小檗堿(obaberine)，優(yōu)選的含量范圍為重量的0.00 1％-0.05％，0.002％-0.004％更佳，0.003％-0.01％最佳。
在水溶液、油、醇或其它有機(jī)溶劑中提取黃芩、黃柏以及/或黃連(coptischinensis Franch)，可得黃小檗堿。最好選用黃連根，植物選用毛茛科的三角葉黃連，峨嵋野連，云南黃連中的一種或多種。參考中藥大辭典，上海科技出版社1988，2022-2030頁。
本發(fā)明組合物還可含有小檗堿(berberine)，優(yōu)選的含量范圍是重量的0.001％-2％，0.002％-0.5％更佳，0.003％-0.1％最佳。
本發(fā)明組合物中也可含罌粟殼堿(narcotoline)，優(yōu)選的含量范圍是重量的0.001％-2％，0.002％-0.5％更佳，0.003％-0.1％最佳。
黃小檗堿、小檗堿和罌粟殼堿單獨(dú)或進(jìn)行組合后均有能抑制平滑肌收縮，對損傷組織有止痛作用。
本發(fā)明組合物中還可包含各種氨基酸，最好是全部18種天然氨基酸，它們?yōu)榧?xì)胞生長提供了營養(yǎng)支持。這些氨基酸既可以是化學(xué)合成，也可以是天然界獲得。例如，地龍是富含蛋白質(zhì)和氨基酸，用油或醇提取地龍，可以得到天然氨基酸的全譜。本發(fā)明組合物還包含了核酸基質(zhì)，如腺嘌呤、鳥嘌呤、胸腺嘧啶和尿嘧啶。
另一方面，本發(fā)明組合物提供了一些保護(hù)和修復(fù)粘膜的方法，其原理可能是促進(jìn)再生性粘膜細(xì)胞的生長。使用這些方法，損傷的或功能有障礙的粘膜可以恢復(fù)功能及生理結(jié)構(gòu)，從而提高機(jī)體吸收營養(yǎng)物質(zhì)的能力，這樣，又改善了機(jī)體的總體健康狀況，增強(qiáng)機(jī)體免疫系統(tǒng)的功能以戰(zhàn)勝疾病。
具體例如，本發(fā)明提供了一種預(yù)防宿主胃腸道中粘膜發(fā)生潰瘍或受到刺激的方法，具體做法是宿主口服一種含食用油與食用蠟、甾醇化合物均勻混合的組合物，食用蠟的含量為0.5％-50％，甾醇化合物的含量至少是0.1％。
根據(jù)這一具體范例，作為預(yù)防，在食用酒類、辛辣食物或其它對胃有刺激的食物以前服用本組合物，或者也可以在食用以后服用。
再具體例如，本發(fā)明提供了一種治療宿主胃腸道紊亂的方法，具體做法是讓患有胃腸道紊亂疾病的宿主口服含有食用油、食用蠟和甾醇化合物均勻混合的藥物，食用蠟的含量為0.5％-50％，甾醇化合物的含量至少是0.1％。
根據(jù)這一具體范例，宿主最好是人類。本組合物可作為在醫(yī)生處方下或無處方的藥物、營養(yǎng)品或保健食品，劑量根據(jù)宿主病情嚴(yán)重程度而有所不同。本組合物每天宜服用0.5-10克，較佳劑量是每天2-8克，最佳劑量為每天3-6克。例如，如果本組合物為0.5克軟膠囊包裝，可服用1-10個(gè)膠囊，每天2次。
胃腸道紊亂的例子包括，但不限于胃腸疾病，如急性胃炎、慢性表面性胃炎、萎縮性胃炎、竇性胃炎、老年性胃炎、膽汁回流胃炎、食道炎、胃十二指腸潰瘍、消化不良、胃神經(jīng)炎、便秘以及各種隨之而發(fā)生的不適，如胃酸過多、胃酸過少、胃腸氣脹、飯后胃腸不適，以及服用酸性藥物如水楊酸鹽(即阿斯匹林)引起的胃炎、飲酒或禁食引起的胃不適。
再具體例如，本發(fā)明提供一種治療胃腸道癌的方法，具體做法是給患胃腸癌的病人口服含有食用油、食用蠟和甾醇化合物均勻混合的藥物，食用蠟的含量為0.5％-50％，甾醇化合物的含量至少是0.1％。
胃腸道癌包括上部或下部胃腸癌，上部胃腸癌包括，但不限于(1)食道癌；(2)胃癌；(3)胰腺癌；(4)肝癌；(5)膽管癌。下部胃腸癌包括，但不限于大腸癌，如結(jié)腸直腸癌、原發(fā)性淋巴瘤、黑素瘤及大腸肉瘤。
本發(fā)明組合物也可采用緩釋系統(tǒng)傳輸藥物成分，如有治療藥物的固態(tài)疏水性高分子半滲透基質(zhì)。當(dāng)前已建立了各種類型的緩釋材料，且在技術(shù)上已成熟，為人們熟知。緩釋膠囊可根據(jù)其化學(xué)性質(zhì)，在數(shù)周乃至超過100天的期限內(nèi)逐漸釋放出本發(fā)明組合物成分。4.口服藥物的傳輸載體本組合物由均勻分布的食用蠟(如蜂蠟)與食用油(如麻油)構(gòu)成，根據(jù)其獨(dú)特的物理和生化特性，為口服使用提供了一種適宜的藥物傳輸載體。本藥物載體的組成包括食用油與食用蠟均勻混合，蜂蠟含量按重量計(jì)算，百分比為0.5-50％。在室溫下，食用蠟形成微晶體，均勻分布在食用油中，微晶體的適宜長度在0.1-100μm之間，尤以5-70μm為宜，最佳長度為10-50μm。微晶體的形態(tài)隨著含量和溫度的變化而變化，在室溫下，微晶體呈單一的針狀晶體，以及/或幾個(gè)晶體彼此聚集形成微晶復(fù)合體。
本組合物還含有一種甾醇化合物，其含量按重量計(jì)算，0.1％-20％為宜，1％-10％更佳，2％-6％最佳。
分布在麻油中的蜂蠟微晶體具有極強(qiáng)的與粘膜粘附的能力，使溶解于油中或陷于微晶體中的有效成分可以持續(xù)緩慢地釋放，進(jìn)入粘膜組織和其它下層組織。而且，由于蜂蠟和麻油有很強(qiáng)的抗酸和抗氧化能力，可以保護(hù)本組合物中的有效成分，免受胃中酸性及氧化性環(huán)境的分解，這些特性不僅對提高生物利用度是很有利的，而且還可以提高有效成分的治療指數(shù)。
許多藥物都可以用上述基質(zhì)配成，特別是那些適合于口服的藥物。但是，由于缺乏生物利用度，以其它物質(zhì)組成的、被認(rèn)為不適于口服的藥物，也可以考慮與本發(fā)明的藥物載體組合，如果這種組合可以提高藥物的生物利用度。
這些藥物按照分類，包括(1)胃腸用藥(2)抗生素(3)抗病毒藥物(4)抗真菌藥物(5)抗腫瘤藥物(6)止痛藥(7)鎮(zhèn)靜藥(8)麻醉拮抗劑(9)抗抑郁劑(10)抗組織胺藥(11)抗偏頭痛藥(12)心血管藥(13)鈣通道阻斷劑(14)食欲抑制劑(15)避孕藥(16)皮質(zhì)甾醇(17)局部麻醉藥(18)利尿藥(19)降壓藥(20)甾醇類(21)前列腺素類(22)消炎藥(23)抗血栓形成藥(24)強(qiáng)心甙(25)抗帕金森氏病藥(26)化學(xué)依賴性藥物(27)酸性藥物(28)肽類。
胃腸用藥的實(shí)例包括，但不限于，組織胺H2受體拮抗劑，如尼扎替丁、法莫替丁、西咪替丁、雷尼替丁、瀉藥如磺琥辛酯鈉、比沙可啶，以及止嘔吐藥，如，敏克靜、滅吐靈、氟哌利多、氟哌丁苯、氟哌啶醇和普魯米近。
止痛藥的實(shí)例包括，但不限于丁丙諾啡、可待因、芬太尼、嗎啡和氫嗎啡酮。
消炎藥的實(shí)例包括，但不限于布洛芬、消炎痛、萘普生、二氯芬酸、托芬那酸和吡羅昔康。
鎮(zhèn)靜藥的實(shí)例包括，但不限于安定、氟哌啶(droperiodol)，氟斯必靈、氟哌啶醇和氯羥去甲安定。
強(qiáng)心甙的實(shí)例包括，但不限于地高辛和毒毛花甙G。
麻醉拮抗劑的實(shí)例包括，但不限于納洛酮和烯丙嗎啡。
抗帕金森氏病藥物的實(shí)例包括，但不限于溴隱亭、雙環(huán)哌丙醇，苯海索和苯扎托品。
抗抑郁藥物的實(shí)例包括，但不限于丙咪嗪、去甲阿米替林以及pritiptylene.
抗腫瘤藥物的實(shí)例包括，但不限于博來霉素、環(huán)孢菌素A、氟二氧嘧啶、巰(基)嘌呤、氨甲葉酸、喜樹堿、紫杉醇、阿霉素和絲裂霉素。
抗病毒藥物的實(shí)例包括，但不限于碘苷、阿昔洛韋、干擾素、迭氮胸腺嘧啶核苷AZT以及阿糖腺苷。
抗生素藥物的實(shí)例包括，但不限于氯林可霉素、紅霉素、夫西地酸、慶大霉素以及四環(huán)素。
抗真菌藥的實(shí)例包括，但不限于雙氯苯咪唑、酮康唑、甲硝唑、克霉唑、兩性霉素B以及制霉菌素。
食欲抑制藥的實(shí)例包括，但不限于氟苯丙胺、馬吲哚和芬特明。
抗組織胺藥的實(shí)例包括，但不限于，撲爾敏、特非那定和苯丙烯啶。
抗偏頭痛藥的實(shí)例包括，但不限于雙氫麥角胺、麥角胺以及苯噻啶。
心血管藥物的實(shí)例包括，但不限于利心平、硫氮卓酮、硝酸甘油、消心痛、嗎多明、異搏定以及類似藥物。
鈣通道阻斷劑的實(shí)例包括，但不限于異搏定、利心平、硫氮卓酮以及尼卡地平。
甾醇類藥物的實(shí)例包括，但不限于雌二醇、雌酮、雌三醇、聚雌二醇、聚雌三醇、己二烯雌酚、己烯雌酚、二氫麥角甾醇、環(huán)丙[氯地]孕酮、達(dá)那唑、睪酮、黃體酮、炔諾酮、左旋甲基炔諾酮、炔諾醇、肟炔諾酮、烯丙雌烯醇，3-地索高諾酮、地美孕酮、丙甲雄酚、睪酮、螺內(nèi)酯及其酯化合物。
抗血栓形成藥物的實(shí)例包括，但不限于肝磷脂和芐丙酮香豆素。
利尿藥的實(shí)例包括，但不限于雙氫克尿塞、氟腦嗪和米諾地爾。
抗高血壓藥物的實(shí)例包括，但不限于萘心安、美多心安、可樂定以及吲哚洛爾。
化學(xué)依賴藥物的實(shí)例包括，但不限于尼古丁和美沙酮。
局部麻醉藥的實(shí)例包括，但不限于利多卡因、丙胺卡因以及苯坐卡因。
皮質(zhì)甾柱藥物的實(shí)例包括，但不限于氯地米松、倍他米松、氯倍他索、丙縮強(qiáng)羥龍、去氧米松、地塞米松、二氫可龍、二氟美松、氟輕松、氟輕松醋酸酯、氫化可的松、甲基強(qiáng)的松龍、曲安奈德、曲安奈德以及哈西奈德。
酸性藥物的實(shí)例包括，但不限于水楊酸鹽如乙酰水楊酸(阿司匹林)。
肽類的實(shí)例包括，但不限于生長激素釋放因子，生長因子，表面生長因子(EGF)，神經(jīng)生長因子(NGF)，TGF，PDGF，胰島素生長因子(IGF)，纖維細(xì)胞生長因子(αFGF，βFGF，等)及其類似的化合物，生長激素抑制素，降血鈣素，胰島素，抗利尿激素，干擾素，IL-2，尿激酶，serratiopeptidase，超氧化物歧化酶(SOD)、tryrotropin釋放激素(TRH)，黃體化激素釋放激素(LH-RH)，促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(CRF)，生長激素釋放激素(GHRH)，腦下垂體后葉荷爾蒙，(促)紅細(xì)胞生成素(EPO)，以及克隆刺激因子(CSF)。
根據(jù)本發(fā)明組合物中加入的其它有效成分的特殊實(shí)例包括唑類衍生物，如咪唑和mazoles及其衍生物；硝基化合物，如戊基硝酸鹽，硝化甘油硝酸鹽和硝酸異山梨醇；胺類化合物，如pilocaine，oxyabutyninchloride，利多卡因，苯坐卡因，對氨基苯(甲)酸乙酯，煙堿，氯屈米，特非那定、苯丙烯啶、萘心安、美多心安及其鹽類；昔康衍化物如康吡氧噻嗪；黏多糖如硫粘多糖酶；鴉片類化合物如嗎啡和嗎啡類似藥，如丁丙諾啡、二氫羥嗎啡酮、氫嗎啡酮、羥甲左嗎南、芬太奴和芬太尼衍生物和類似物；前列腺素如PGA，PGB，PGE，或PGF系列的成分，如米索前列醇或enaprostil；苯甲酰胺如滅吐靈，東莨菪堿；黃嘌呤，如咖啡因、茶堿；兒茶酚胺，如麻黃素、舒喘寧、特布他林；二氫吡啶如利心平；噻嗪化物，如氫氯噻嗪，氟桂利嗪；a sydnonimine如嗎多明；硫酸化多聚糖，如肝磷脂。實(shí)施例1下面是本發(fā)明組合物(以下稱為“GI膠囊”)具體制備實(shí)施例。GI膠囊的生產(chǎn)過程GI膠囊的生產(chǎn)過程見圖6工藝簡圖。首先，按工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，凈選生產(chǎn)GI膠囊所需的原材料，將芝麻油過濾后注入儲油罐中，清洗黃芩(含flavonoids)根部，切成小段，粉碎、過篩，放入儲備桶中備用。用水煮法精制蜂蠟。
接著，將精制的麻油和黃芩(100kg5kg)放入反應(yīng)罐，加熱反應(yīng)罐，當(dāng)溫度升到120℃時(shí)，停止加熱，保溫50分鐘，同時(shí)充分?jǐn)嚢?，過濾，去除藥渣，留取提取油液，即制成藥油I。
第三步，將藥油I壓入另一反應(yīng)罐，加熱，當(dāng)溫度升至85℃時(shí)加入清制后的蜂蠟，按比例稱取藥油I 93kg蜂蠟7kg，充分?jǐn)嚢?，待溫度升?20℃，停止加熱，連續(xù)攪拌，保溫20分鐘，即制成藥油II。
最后，用膠體壓榨機(jī)將藥油II進(jìn)行研磨，壓榨機(jī)的齒距為0.6-0.8m，輸出速度為15Kg/15min?；蛘?，也可用均質(zhì)機(jī)在40±2℃條件下，以每分鐘6000-10000轉(zhuǎn)速的速度均質(zhì)15-20分鐘。
在100rpm條件下攪拌均質(zhì)物，抽真空至0.09MP以下，降溫至40±2℃時(shí)，保溫50分鐘。等溫度降到20℃時(shí)，真空度達(dá)到0.6~0.8MP時(shí)，連續(xù)保持20分鐘，膠囊內(nèi)容物即制作完成。
然后，根據(jù)規(guī)范操作，將膠囊內(nèi)容物壓入由明膠和甘油制成的軟較囊中。簡單地說，先將明膠加入制膠罐中，同時(shí)加入防腐劑，浸泡約12小時(shí)。加入足量的水、甘油和防腐劑等，攪拌，加熱，溫度控制在65℃。待明膠完全溶解后，連續(xù)攪拌、抽真空及保溫2小時(shí)，再降溫到32℃。用軟膠囊機(jī)將GI膠囊內(nèi)容物(如500mg/粒)壓入由上述所說的由明膠和甘油制成的膠囊殼內(nèi)。膠囊呈橢圓形，軟膠囊的厚度為0.7-0.8mm。實(shí)施例2GI膠囊中功效成份的含量GI膠囊中功效成份包括總黃酮、γ-谷甾醇、亞油酸和油酸，這些成份的含量按照氣相色譜法測定(中華人民共和國藥典2000版二部)。表1所列為100g GI膠囊內(nèi)容物中各成份的含量范圍。
表1成份每100g含量天然維生素E15mg-50mg總黃酮 20mg-60mgβ-谷甾醇 0.20g-1.0g亞油酸 35g-55g油酸25g-45g實(shí)施例3GI膠囊內(nèi)容物的毒理學(xué)研究1)急性毒理實(shí)驗(yàn)GI膠囊內(nèi)容物經(jīng)口灌胃分別給Wistar種大鼠(體重180-200g)和昆明種小鼠(體重18-20g)，劑量見表2和表3，灌胃前停食16小時(shí)。在實(shí)驗(yàn)期間所有動物活動均正常，毛色光澤度良好，未發(fā)現(xiàn)任何癥狀。兩組動物的實(shí)驗(yàn)結(jié)果分別見表2和3。如表2和表3所示，動物口服GI膠囊內(nèi)容物后，未引起實(shí)物動物的死亡，即便劑量高達(dá)21.5g/Kg。因此，膠囊內(nèi)容物以急性毒性分級，均屬無毒性級。因此，受試動物的半數(shù)致死劑量(LD50)大于21.5g/Kg。
表2Wistar鼠雄性雌性劑量動物數(shù)死亡數(shù)動物數(shù)死亡數(shù)21.5g/kg 5 0 5 010.0g/kg 5 0 5 04.64g/kg 5 0 5 02.15g/kg 5 0 5 0表3昆明種小鼠雄性雌性劑量動物數(shù)死亡數(shù)動物數(shù)死亡數(shù)21.5g/kg 5 0 5 010.0g/kg 5 0 5 04.64g/kg 5 0 5 02.15g/kg 5 0 5 02)微核試驗(yàn)昆明種小鼠，體重24-28g，隨機(jī)分為5組，每組動物10只，雌雄各半。劑量組為按人群每日推薦量0.083g/Kg體重的100、50和10倍3個(gè)劑量組，即8.3g/Kg、4.15g/Kg和0.83g/Kg。另設(shè)陽性對照組(環(huán)磷酰胺35mg/kg)及陰性對照組(正常飲食)共5組。所有動物連續(xù)給予受試物二天(間隔24小時(shí))，于末次給藥后6小時(shí)，動物頸椎脫臼處死，取胸骨骨髓，按常規(guī)制片、染色、鏡檢。每只動物觀察1000個(gè)PCE，記錄含微核PCE數(shù)，計(jì)算微核率，見表4。
表4組別 動物數(shù) 觀察 含微核 微核率(‰) 動物數(shù) 觀察 含微核微核率PCE數(shù) PCE數(shù) PCE數(shù) PCE數(shù)雄鼠 雌鼠 (‰)8.30g/k 55000 3 0.6±0.55 5 5000 3 0.6±0.55g4.20g/k 55000 5 1.0±0.71 5 5000 4 0.8±0.45g0.83g/k 55000 5 1.0±1.22 5 5000 4 0.8±1.10gCP 55000 10621.2±2.28 5 5000 103 20.6±2.4135mg/kg陰性對照55000 4 0.8±0.45 5 5000 3 0.6±0.55組如表4所示，各劑量組與陰性對照組相比，無顯著性差異(P＞0.05)。而陽性對照組與陰性對照相比有非常顯著的差異(P＜0.01)。試驗(yàn)結(jié)果表明在本實(shí)驗(yàn)劑量范圍內(nèi)，GI膠囊內(nèi)容物不誘發(fā)微核率的增加。3)精子畸變試驗(yàn)昆明種小鼠，體重24-28g，隨機(jī)分為5組，每組動物10只。劑量組為按人群每日推薦量0.083g/Kg體重的100、50和10倍3個(gè)劑量組，即8.3g/Kg、4.15g/Kg和0.83g/Kg。另設(shè)陽性對照組(環(huán)磷酰胺35mg/kg，CP組)及陰性對照組(正常飲食)共5組。所有動物連續(xù)給予受試物5天，于第一次給藥后35天處死，取雙側(cè)附睪按常規(guī)制片、染色、鏡檢。每只動物觀察1000個(gè)精子，記錄精子畸變數(shù)，計(jì)算畸變率，見表5。
表5組別 動物數(shù)(只)精子數(shù)量精子畸變數(shù)畸變率(％)8.30g/kg 10 10000 1381.38±0.134.20g/kg 10 10000 1361.38±0.170.83g/kg 10 10000 1321.32±0.22CP 35mg/kg 10 10000 2080 20.80±0.98陰性對照組 10 10000 1061.06±0.53如表5所示，各劑量組與陰性對照組相比，精子畸變率無顯著性差異(P＞0.05)。而陽性對照組和陰性對照組差異顯著，環(huán)磷酰胺治療組的精子畸變率遠(yuǎn)高于陰性對照組。試驗(yàn)結(jié)果表明在本實(shí)驗(yàn)劑量范圍內(nèi)，GI膠囊內(nèi)容物不誘發(fā)精子畸變。4)Ames試驗(yàn)為試驗(yàn)GI膠囊內(nèi)容物的誘導(dǎo)突變作用，用四種突變株菌進(jìn)行Ames試驗(yàn)A96a，TA98移碼型突變株，TA100和TA102堿基置換型突變株。Ames(1983)MutationResearch 113173-215。四株的五個(gè)遺傳特性經(jīng)測定都符合其規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。GI膠囊內(nèi)容物的實(shí)驗(yàn)濃度選定為五個(gè)測試濃度5mg/皿，2.5mg/皿，1.0mg/皿，0.5mg/皿，0.1mg/皿。對照組使用PBS。陽性對照為2-AF(2-氨基芴)100μg/皿，MMS(甲基甲烷磺酸酯)2μg/皿，fluorenone0.2μg/皿，2-AA12μg/皿。表6為受試物、陽性對照組和陰性對照組的突變資料。
表6受試物TA97a TA98 TA100TA102mg/皿+S9 -S9 +S9 -S9 +S9 -S9 +S9 -S9GI膠囊 第一次136.33111.3332.0026.67121.00126.00319.33247.335.0±16.50 ±38.07 ±8.89 ±2.52 ±7.94±19.05 ±13.32 ±10.02133.67117.6725.3324.33140.00147.67350.67261.672.5±33.00 ±11.93 ±4.93 ±3.21 ±17.35 ±19.09 ±23.46 ±67.17139.00129.0027.3324.67139.33141.00323.00265.001.0±14.11 ±26.46 ±3.06 ±3.21 ±21.20 ±23.58 ±26.15 ±41.62112.00128.6726.3325.33135.67158.33349.00278.330.5±19.97 ±20.40 ±2.08 ±4.51 ±9.07±18.23 ±32.91 ±31.56132.00124.6728.6726.00143.33139.67339.00268.330.1±6.24±6.81±2.52 ±2.65 ±6.51±16.56 ±16.09 ±18.56His-(PBS+0.1ml DMSO)117.00109.5027.0024.67125.25136.75351.50260.75±9.42±8.96±4.96 ±2.89 ±21.33 ±23.67 ±30.92 ±22.59受試物 TA97a TA98 TA100 TA102mg/皿+S9 -S9 +S9 -S9 +S9 -S9 +S9 -S9GI膠囊 第二次135.67140.0026.3327.67105.33113.33317.33230.675.0±5.13±8.19±3.51 ±1.53 ±11.15 ±17.79 ±21.13 ±43.84143.67140.3331.0029.33116.00125.00311.00251.672.5±13.58 ±10.26 ±2.65 ±2.08 ±11.53 ±7.21±17.06 ±18.01
136.67130.0029.33 27.33 121.00 122.33 326.00 243.001.0±13.01 ±12.12 ±6.11 ±2.08 ±7.55 ±3.06 ±18.19 ±18.11151.33132.0028.33 28.00 122.67 124.33 331.67 248.000.5±8.08±6.24±5.03 ±8.61 ±13.05 ±7.37 ±18.56 ±13.00138.67126.3330.33 26.67 124.00 117.33 322.33 252.000.1±11.06 ±4.51±3.06 ±2.52 ±5.57 ±6.66 ±12.50 ±10.15His-(PBS+0.1ml DMSO)141.67134.3331.00 29.67 126.33 123.00 320.00 252.67±14.57 ±13.05 ±3.61 ±1.53 ±3.51 ±4.58 ±19.16 ±6.51對照組/皿2-AF 1596.00 3208.0010ug ±33.94 ±362.04芴酮 3158.00 2388.000.2ug ±398.81 ±220.622-AF1345.0010ug±111.42MMS 1460.00 2960.002ul ±141.42 ±486.492-AA 1411.0012ug ±315.37如表6，在代謝活化+S9或無代謝活化-S9系統(tǒng)的條件下，GI膠囊內(nèi)容物對四種突變株沒有明顯的誘導(dǎo)突變作用。實(shí)施例4GI膠囊內(nèi)容物的潤腸通便作用GI膠囊內(nèi)容物的潤腸通便作用實(shí)驗(yàn)用小鼠模型進(jìn)行。選健康的昆明種小鼠，隨機(jī)分為五組，每組各20只。設(shè)三個(gè)劑量組，以推薦日攝入量83.3mg/kg體重為低劑量；10倍攝入量833mg/kg體重為中劑量；20倍攝入量1666mg/kg體重為高劑量。同時(shí)設(shè)一陰性對照組20只小鼠，正常飲食；和一陽性對照組20只小鼠，按50mg/kg體重喂以復(fù)方地酚諾酯。
以蒸餾水為溶劑將受試物配成所需濃度，按0.1ml/10g BW(體重)經(jīng)口灌胃，每天一次，連續(xù)十四天，在此期間小鼠正常飲食。小鼠給受試物末日，隔夜禁食24小時(shí)，但不限水。以受試物對三個(gè)劑量組動物經(jīng)口灌胃一次。20分鐘后，以復(fù)方地酚諾酯(50mg/kg)按0.1ml/10g體重對除陰性對照組外全體動物經(jīng)口灌胃。十分鐘后，以碳素墨水(活性炭5％，阿拉伯膠10％)按0.ml/10g體重對各組動物經(jīng)口灌胃，隨即各組動物一分為二，每組10只，觀察24小時(shí)排便情況。另外每組10只動物20分鐘后處死，剖腹測量小腸全長及炭末前沿與幽門的距離，計(jì)算碳素推進(jìn)率。
表7列出了上述作法對五組小鼠體重的影響。由表7可知，與對照組相比，在劑量組范圍內(nèi)，GI膠囊內(nèi)容物對小鼠的體重沒有造成異常變化。
表7體重組別(mg/kg)動物數(shù)第0天第7天 第14天(只)陰性對照組 20 19.6±1.225.8±0.929.7±1.3低劑量(83.3) 20 19.5±1.225.9±1.029.5±1.5中劑量(833) 20 19.6±1.225.7±0.928.6±1.1高劑量(1666) 20 19.1±1.125.3±1.229.1±1.4陽性對照 20 19.5±1.225.3±0.929.2±1.4表8列出了上述作法對五組小鼠排便情況的影響。由表8可知，三個(gè)劑量組的首次排便時(shí)間和總排便量與陰性對照組相似。而陽性對照組的小鼠經(jīng)復(fù)方地酚諾酯誘發(fā)首次排便時(shí)間長和總排便量小，表明GI膠事內(nèi)容物具有對便秘小鼠有潤腸通便作用。
表8體重動物數(shù)組別(mg/kg)首次排便時(shí)間(分) 糞便粒數(shù)(顆) 總排便量(只)(克)陰性對照組10 95.9±34.1* 36.9±4.6* 2.8±0.7*低劑量(83.3) 10 122.8±41.2* 37.1±6.7* 2.9±0.6*中劑量(833) 10 99.9±47.2* 40.5±6.0* 2.7±0.4*高劑量(1666) 10 106.2±27.0* 34.0±5.4* 2.9±0.4*陽性對照 10 230.6±56.0 16.4±3.61.0±0.2*與陽性對照組相比P＜0.05表9列出了五組動物小鼠的碳素推進(jìn)率。由表9可知，三個(gè)劑量組碳素率與陰性對照組相似，而陽性對照組的推進(jìn)率低得多。以上結(jié)果證實(shí)了GI膠囊內(nèi)容物對復(fù)方地酚諾酯引起的便秘有潤腸通便的作用，因此對患便秘的鼠有潤腸通便作用。
表9
組別(mg/kg)動物數(shù)量(只) 碳素推進(jìn)率(％)陰性對照組 10 65.1±13.0低劑量(83.3)10 62.1±4.5*中劑量(833) 10 60.8±9.7*高劑量(1666)10 62.1±7.7*陽性對照組 10 33.2±10.5*與陽性對照組相比P＜0.05實(shí)施例5GI膠囊內(nèi)容物對胃腸道粘膜的保護(hù)作用為了了解GI膠囊內(nèi)容物在因無水乙醇致大鼠胃粘膜損傷方面的保護(hù)作用，我們進(jìn)行了以下試驗(yàn)。選健康Wistar種雄性大鼠，體重60-100g，隨機(jī)分成五組，每組10只。設(shè)三個(gè)劑量組417mg/kg為低劑量組，834mg/kg為中劑量組以及1667mg/kg為高劑量組，依次是人體日推薦劑量的5倍、10倍和20倍。另設(shè)陰性對照組和陽性對照組，每組各10只大鼠。
以蒸餾水為溶劑將受試物配成所需濃度，按0.1ml/10g BW(體重)經(jīng)口灌胃，每天一次，連續(xù)三十天。試驗(yàn)結(jié)束后，全體動物禁食48小時(shí)，不限水，對除陰性對照組外全體動物經(jīng)口灌胃無水乙醇(1ml/只)。一小時(shí)后處死動物，解剖取胃，1％甲醛因定，觀察胃粘膜損傷程度，計(jì)算潰瘍指數(shù)，條索狀損傷的長充大于1mm測其長度，每mm計(jì)1分，寬度大于1mm計(jì)分加倍，積分總數(shù)為潰瘍指數(shù)。
表10列出了五組大鼠的潰瘍指數(shù)。由表10可知，服用GI膠囊內(nèi)容物的大鼠的潰決指數(shù)明顯低于陽性對照組，結(jié)果說明，GI膠囊內(nèi)容物對無水乙醇所致?lián)p傷的胃腸粘膜有保護(hù)作用。
表10組別 動物數(shù)(只) 潰瘍指數(shù)陰性對照10 3.7±1.6*低劑量 10 19.1±6.0*中劑量 10 18.4±6.6*高劑量 10 17.4±3.7*陽性對照10 65.1±20.3*與陽性對照相比P＜0.05實(shí)施例6胚胎小鼠體外腸組織植塊體外生長在這個(gè)實(shí)施例中，設(shè)計(jì)了體外實(shí)驗(yàn)，目的是表明本發(fā)明組合物對(粘膜)細(xì)胞和(腸)組織器官特異性生長具有獨(dú)特的促進(jìn)作用。在實(shí)驗(yàn)中，從胚胎小鼠身上取小腸粘膜，并在體外進(jìn)行培養(yǎng)。組織培養(yǎng)分為兩組對照組在正常的組織培養(yǎng)基(MEM)中培養(yǎng)，治療組中的培養(yǎng)基除了MEM培養(yǎng)基外，還添加了本發(fā)明組合物。
在體外實(shí)驗(yàn)中，使用了本發(fā)明組合物的一個(gè)具體實(shí)例。該組合物包括7％蜂蠟、約1％的甾醇，以上兩者與干黃芩(2％w/w)、黃柏(2％w/w)、黃連(2％w/w)、罌粟殼(2％w/w)和地龍(2％w/w)的芝麻油提取物進(jìn)行均質(zhì)化。
取一只孕16日齡的昆明種雌性小白鼠，處死后，立即取出小腸粘膜(長度約2cm)，剪成面積約1mm×1mm的植塊，將植塊置于12孔培養(yǎng)板上，加入MEM培養(yǎng)液，遵循Donaldson and Kapadia在1980年提出的“胃粘膜的器官培養(yǎng)優(yōu)勢和局限性”的方案進(jìn)行培養(yǎng)(每一孔2.5ml培養(yǎng)液，每一孔5個(gè)粘膜植塊)。細(xì)胞生物學(xué)的方法學(xué)院出版社，21B349。在治療組中，加入3克本發(fā)明組合物，在對照組加入3ml MEM，每4-5天更新兩組的生長培養(yǎng)基。連續(xù)觀察97天的培養(yǎng)情況，記錄顯微鏡下的表現(xiàn)。
圖7A-H展示了在24、30、38、42、50、85、90和97天小鼠腸粘膜在本發(fā)明組合物中或非本發(fā)明組合物中培養(yǎng)的體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果。左側(cè)圖片為對照組情況，右側(cè)為治療組情況。在培養(yǎng)的前7天，對照組和治療組的粘膜保持完整。從第8天開始，兩組的粘膜開始分解成極小的組織片，肉眼幾乎看不見。顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)在兩組均出現(xiàn)了單個(gè)細(xì)胞和細(xì)胞的克隆。但是，從第18天起，對照組的細(xì)胞逐漸變暗、收縮以至死亡。見左側(cè)圖7A-H。
相反，治療組的細(xì)胞仍保持強(qiáng)勁的生長，顯示了成活細(xì)胞的典型形態(tài)。如右側(cè)圖7A所示，在培養(yǎng)的第24天，出現(xiàn)了大量的單個(gè)腸細(xì)胞的生長，但沒有出現(xiàn)克隆。但是，第30天時(shí)，出現(xiàn)了多重克隆，細(xì)胞的數(shù)量隨著培養(yǎng)時(shí)間的推進(jìn)而增加，見右側(cè)圖7B。更有意思和令人驚奇的是，到了第38天，觀察到在培養(yǎng)中形成了一片相對完整的腸粘膜。粘膜上的細(xì)胞彼此粘附，類似于體內(nèi)的腸粘膜的粘附。隨著培養(yǎng)時(shí)間的推移，粘膜片的數(shù)量越來越多，在整個(gè)培養(yǎng)中散開，見右側(cè)圖7C-E。在實(shí)驗(yàn)的最后，即97天時(shí)，小片粘膜互相粘附，形成一大片粘膜。與此形成強(qiáng)烈對比的是，對照組的所有細(xì)胞早已死亡，至少是在培養(yǎng)開始的24天內(nèi)。
這些如果表明，本發(fā)明組合物不但促進(jìn)了腸粘膜細(xì)胞的生長，而且推進(jìn)了細(xì)胞與同類組織的粘附，在培養(yǎng)中形成粘膜。對照組和治療組的強(qiáng)烈對比表明，本發(fā)明組合物在刺激細(xì)胞生長和組織型粘附方面有獨(dú)特的作用。在培養(yǎng)中，出現(xiàn)不斷的細(xì)胞生長和形成粘膜組織還表明，再生性干細(xì)胞可能被激活，從而產(chǎn)生大量的細(xì)胞，支持了粘膜細(xì)胞的生長和分化，最終在體外形成粘膜。這與本發(fā)明組合物對動物粘膜細(xì)胞的作用效果也是一致的。實(shí)施例7 胚胎小鼠體外胃組織植塊體外生長在這個(gè)實(shí)施例中，設(shè)計(jì)了體外實(shí)驗(yàn)，目的是表明本發(fā)明組合物對粘膜細(xì)胞和胃組織器官型生長具有獨(dú)特的促進(jìn)作用。在實(shí)驗(yàn)中，從胚胎小鼠身上取出胃組織，在體外進(jìn)行培養(yǎng)。組織培養(yǎng)分為兩組對照組在正常的組織培養(yǎng)基(全部用MEM)中培養(yǎng)，治療組中的培養(yǎng)基除了MEM培養(yǎng)基外，還添加了本發(fā)明組合物。
在體外實(shí)驗(yàn)中，使用了本發(fā)明組合物的一個(gè)具體實(shí)例，物質(zhì)組成包括7％蜂蠟、約1％的甾醇、約0.5％黃柏內(nèi)酯、約0.3％黃芩甙和約0.5％小檗堿，以上成分在芝麻油進(jìn)行混合。
取一只孕16日齡的昆明種雌性小白鼠，處死后，立即取出整個(gè)胃組織，剪成面積約1mm×1mm的植塊，將植塊置于12孔培養(yǎng)板上，加入MEM培養(yǎng)液，遵循Donaldson and Kapadia在1980年提出的“胃粘膜的器官培養(yǎng)優(yōu)勢和局限性”的方案進(jìn)行培養(yǎng)(每一孔2.5ml培養(yǎng)液，每一孔5個(gè)粘膜植塊)。細(xì)胞生物學(xué)的方法學(xué)院出版社，21B349。在治療組中，加入3克本發(fā)明組合物，在對照組加入3ml MEM，每4-5天更新兩組的生長培養(yǎng)基。連續(xù)觀察90天的培養(yǎng)情況，記錄顯微鏡下的表現(xiàn)。
圖8A-H展示了在24、30、38、42、50、70、85和90天小鼠胃粘膜在本發(fā)明組合物中或非本發(fā)明組合物中培養(yǎng)的體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果。左側(cè)圖片為對照組情況，右側(cè)為治療組情況。在培養(yǎng)的前7天，對照組和治療組的胃組織保持完整。從第8天開始，兩組的胃組織開始分解成極小的組織片，肉眼幾乎看不見。顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)在兩組均出現(xiàn)了單個(gè)細(xì)胞和細(xì)胞的克隆。但是，從第18天起，對照組的細(xì)胞逐漸變暗、收縮以至死亡。見左側(cè)圖8A-H。
相反，治療組的細(xì)胞仍保持強(qiáng)勁的生長，顯示了成活細(xì)胞的典型形態(tài)。如右側(cè)圖8A所示，在培養(yǎng)的第24天，出現(xiàn)了胃細(xì)胞生長的克隆，克隆繼續(xù)進(jìn)行，內(nèi)中的細(xì)胞顯示了強(qiáng)勁的生命力，見右側(cè)圖8B-C。在實(shí)驗(yàn)的最后，即90天時(shí)，克隆的生長仍保持強(qiáng)勁勢頭，胃組織在培養(yǎng)中仍不斷擴(kuò)張，如圖8D-H所示。相比之下，對照組的所有細(xì)胞早已死亡，至少是在培養(yǎng)開始的24天內(nèi)。
與上述的腸粘膜植塊的培養(yǎng)中所觀察到的情況一致，本發(fā)明組合物也能促進(jìn)胃細(xì)胞的生長，通過體外組織型的細(xì)胞與細(xì)胞的粘附形成胃組織。培養(yǎng)過程中，細(xì)胞的不斷生長和胃組織的形成表明，再生干細(xì)胞，可能是上皮干細(xì)胞可能被激活，從而產(chǎn)生大量的細(xì)胞，支持了胃細(xì)胞的生長和分化，最終在體外形成胃組織。這與本發(fā)明組合物對動物胃細(xì)胞的作用效果也是一致的。
權(quán)利要求
1.一種適用于口服的藥物組合物，其特征在于它包括食用油與食用蠟、甾醇化合物的均質(zhì)混合物，其中，按該組合物總重量計(jì)算，食用蠟的含量為0.5-50％；甾醇化合物至少為0.1％。
2.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該組合物中甾醇化合物的含量按重量計(jì)算，介于0.5-20％之間。
3.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該組合物中甾醇化合物的含量按重量計(jì)算，介于1-10％之間。
4.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該組合物中食用蠟的含量按重量計(jì)算，介于3-30％之間。
5.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該組合物中食用蠟的含量按重量計(jì)算，介于5-20％之間。
6.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該組合物中食用蠟的含量按重量計(jì)算，介于6-10％之間。
7.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該組合物中食用蠟選自下列類型的蠟，包括蜂蠟、蓖麻蠟、甘油蠟和巴西棕櫚蠟。
8.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該組合物中的食用蠟是蜂蠟。
9.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該組合物中的食用油是一種動物油或者植物油。
10.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物， 其特征在于該組合物中食用油是選自玉米油、麥芽油、豆油、米糠油、油菜籽油、芝麻油和魚油。
11.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該組合物中的食用油是芝麻油。
12.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該組合物中還含有蜂膠，含量按重量計(jì)算，介于0.1-30％。
13.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該組合物中可以含有水，其含量按重量計(jì)算，為小于等于1％。
14.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物， 其特征在于所述的口服可以選自下列劑型，包括片劑、丸劑、糖衣丸、膠囊、乳狀液、凝膠體、糖漿、漿和懸浮液。
15.如權(quán)利要求14所述的藥物組合物，其特征在于所述的膠囊是一種柔軟或硬的凝膠狀膠囊。
16.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該組合物中的的甾醇化合物是一種動物性甾醇或植物性甾醇類。
17.如權(quán)利要求16所述的藥物組合物，其特征在于所述的植物性甾醇自下列甾醇類，包括豆甾醇、菜油甾醇、β-谷甾醇、角甾醇、γ-谷甾醇、菜子甾醇、α-菠菜甾醇、胡蘿卜甙、鏈甾、多孔甾醇及其所有天然或合成的，異構(gòu)和衍生物。
18.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于所述的甾醇可以是豆甾醇、β-谷甾醇和菜油甾醇的組合。
19.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該甾醇化合物是β-谷甾醇。
20.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該組合物中還可以含有黃芩甙。
21.如權(quán)利要求20所述的藥物組合物，其特征在于按組合物總重量計(jì)算，所述的黃芩甙的含量范圍是0.01-5％。
22.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該組合物中還可以含有用水溶液、有機(jī)溶劑或者其混合物對黃芩的提取物。
23.如權(quán)利要求22所述的藥物組合物，其特征在于所述的黃芩的提取物是1-50重量％黃芩在食用油中的提取物。
24.如權(quán)利要求22或23所述的藥物組合物，其特征在于所述黃芩選自唇形科的粘毛黃芩，滇黃芩，甘肅黃芩，薄葉黃芩，麗江黃芩和川黃芩。
25.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于它還可以含有黃柏內(nèi)酯。
26.如權(quán)利要求25所述的藥物組合物，其特征在于黃柏內(nèi)酯含量按重量計(jì)算，介于0.01-50％之間。
27.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該組合物還可以含有用水溶液、有機(jī)溶劑或者兩者的混合物對黃柏的提取物。
28.如權(quán)利要求27所述的藥物組合物，其特征在于所述的黃柏的提取物是1-50重量％黃柏在食用油中的提取物。
29.如權(quán)利要求27或28所述的藥物組合物，其特征在于所述的黃柏選自黃皮樹，禿葉黃皮樹，峨嵋黃皮樹，云南黃皮樹和鐮刀葉黃皮樹。
30.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于它還可以含有黃小檗堿，含量范圍為0.001-0.05％。。
31.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于它還可含有小檗堿(berberine)，含量范圍是重量的0.001％-2％。
32.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該組合物中還可以含有用水溶液、有機(jī)溶劑或者兩者的混合物對黃連的提取物。
33.如權(quán)利要求32所述的藥物組合物，其特征在于所述的黃連的提取物是1-50重量％黃連在食用油中的提取物。
34.如權(quán)利要求32或33所述的藥物組合物，其特征在于所述的黃連選自毛莨科的三角葉黃連，峨嵋野連，云南黃連。
35.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該組合物還可以含有罌粟殼堿，含量范圍為0.001-0.02重量％。
36.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該組合物還可以含有用水溶液、有機(jī)溶劑或者兩者的混合物對2-10重量％罌粟殼的提取物。
37.如權(quán)利要求36所述的藥物組合物，其特征在于所述的罌粟殼的提取物是1-50重量％罌栗殼在食用油中的提取物。
38.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該組合物中還可以含有用水溶液、有機(jī)溶劑或者兩者混合物對分別是2-10重量％黃芩、黃柏和黃連混合物的提取物。
39.如權(quán)利要求38所述的藥物組合物，其特征在于黃芩、黃柏和黃連混合物的提取物是1-50重量％的，對分別是2-10重量％黃芩、黃柏和黃連的混合物在食用油中的提取物。
40.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該組合物還可以進(jìn)一步含有用水溶液、有機(jī)溶劑或者兩者混合物對分別是2-10重量％，黃芩、黃柏、黃連和罌粟殼混合物的提取物。
41.如權(quán)利要求40所述的藥物組合物，其特征在于所述的黃芩、黃柏、黃連和罌粟殼混合物的提取物是1-50重量％，對分別是2-10重量％黃芩、黃柏、黃連和罌粟殼混合物在食用油中的提取物。
42.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該組合物還可以進(jìn)一步含有用水溶液、有機(jī)溶劑或者兩者的混合物對2-10重量％蚯蚓的提取物。
43.如權(quán)利要求42所述的藥物組合物，其特征在于所述的蚯蚓的提取物是1-50重量％蚯蚓在食用油中的提取物。
44.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該組合物還可以進(jìn)一步含有用水溶液、有機(jī)溶劑或者兩者混合物對分別是2-10重量％的黃芩、黃柏、黃連、罌粟殼和蚯蚓混合物的提取物。
45.如權(quán)利要求44所述的藥物組合物，其特征在于所述的黃芩、黃柏、黃連、罌粟殼和蚯蚓混合物的提取物是1-50重量％，對分別是2-10重量％的黃芩、黃柏、黃連、罌粟殼和蚯蚓混合物在食用油中的提取物。
46.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于所述的食用蠟在室溫下呈微晶體。
47.如權(quán)利要求46所述的藥物組合物，其特征在于所述食用蠟是蜂蠟。
48.如權(quán)利要求47所述的藥物組合物，其特征在于所述的蜂蠟的微晶體的長度是0.1-100微米。
49.如權(quán)利要求47所述的藥物組合物，其特征在于該組合物中蜂蠟的至少兩個(gè)微晶體聚合成微晶復(fù)合物。
50.如權(quán)利要求47所述的藥物組合物，其特征在于所述的蜂蠟微晶體充分地均勻分散在食用油中。
51.一種適用于口服的藥物組合物，其特征在于包括一種活性成分；以及一種食用油與食用蠟的均質(zhì)混合物，食用蠟的含量按組合物總重量計(jì)算，介于3-30％之間，該組合物中食用蠟形成微晶體，在室溫下充分地均勻分散在食用油中。
52.如權(quán)利要求51所述的藥物組合物，其特征在于所述的食用蠟是蜂蠟。
53.如權(quán)利要求52所述的藥物組合物，其特征在于所述的蜂蠟微晶體的長度為0.1-100微米。
54.如權(quán)利要求52所述的藥物組合物，其特征在于所述的蜂蠟微晶體的長度為5-70微米。
55.如權(quán)利要求52所述的藥物組合物，其特征在于所述的蜂蠟微晶體的長度為10-50微米。
56.如權(quán)利要求52所述的藥物組合物，其特征在于組合物中至少兩個(gè)蜂蠟微晶體聚合成一個(gè)微晶體復(fù)合物。
57.如權(quán)利要求51所述的藥物組合物，其特征在于還含有甾醇化合物，其含量按組合物總重量計(jì)算，介于0.1-20％之間。
58.如權(quán)利要求51所述的藥物組合物，其特征在于所述的活性成分選自胃腸劑、抗生素、抗病毒劑、抗真菌劑、抗腫瘤劑、止痛劑、鎮(zhèn)定劑、麻醉劑拮抗劑、抗抑郁劑、抗組胺劑、抗偏頭痛藥、心血管藥、鈣通道阻滯劑、食欲抑制劑、避孕藥、皮質(zhì)類固醇類、局部麻醉劑、利尿劑、類固醇類、前列腺素、抗炎癥藥、抗血栓劑、強(qiáng)心劑、抗麻痹劑、化學(xué)依賴藥、抗酸性劑、肽類。
59.一種如權(quán)利要求1所述的組合物在制備預(yù)防人的消化道疾病包括潰瘍或者粘膜炎癥的藥物中的應(yīng)用。
60.如權(quán)利要求69所述的應(yīng)用，其特征在于消化道疾病包括急性胃炎、慢性淺表性胃炎、萎縮性胃炎、胃竇炎、老年性胃炎、膽汁回流性胃炎、食道炎、胃、十二指腸潰瘍、結(jié)腸炎，消化不良、胃神經(jīng)官能癥、便秘、胃酸過多癥、胃酸過少、胃脹、食后胃腸不適、飲酒后胃部不適、禁食引起的胃部不適。
61.一種如權(quán)利要求12、20、22、23、25、27、28、30、31、32、33、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45中任何一項(xiàng)所述的組合物在制備預(yù)防人的消化道疾病包括潰瘍或者粘膜炎癥的藥物中的應(yīng)用。
62.如權(quán)利要求61所述的應(yīng)用，其特征在于消化道疾病包括急性胃炎、慢性淺表性胃炎、萎縮性胃炎、胃竇炎、老年性胃炎、膽汁回流性胃炎、食道炎、胃、十二指腸潰瘍、結(jié)腸炎，消化不良、胃神經(jīng)官能癥、便秘、胃酸過多癥、胃酸過少、胃脹、食后胃腸不適、飲酒后胃部不適、禁食引起的胃部不適。
63.一種如權(quán)利要求1所述的組合物在制備治療消化道癌癥藥物中的應(yīng)用。
64.如權(quán)利要求63所述的應(yīng)用，其特征在于所述的消化道癌癥包括口腔癌、食道癌、胃癌、胰腺癌、肝癌和膽管癌、原發(fā)性淋巴瘤、黑色素瘤原發(fā)性淋巴瘤、黑色素瘤、結(jié)腸惡性腫瘤和直腸癌。
65.一種如權(quán)利要求1所述的組合物在制備治療消化道癌癥藥物中的應(yīng)用。
66.一種如權(quán)利要求12、20、22、23、25、27、28、30、31、32、33、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45中任何一項(xiàng)所述的組合物在制備治療消化道癌癥藥物中的應(yīng)用。
67.一種如權(quán)利要求1所述的組合物在制備預(yù)防宿主消化道因某種酸性藥物引起的粘膜潰瘍或者粘膜炎癥的藥物中的應(yīng)用。
68.一種如權(quán)利要求12、20、22、23、25、27、28、30、31、32、33、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45中任何一項(xiàng)所述的組合物在制備預(yù)防宿主消化道因某種酸性藥物引起的粘膜潰瘍或者粘膜炎癥的藥物中的應(yīng)用。
69.如權(quán)利要求67所述的應(yīng)用，其特征在于所述的酸性藥物是水楊酸鹽。
70.一種在體內(nèi)傳輸活性成分至粘膜組織的藥物組合物的生產(chǎn)方法，其特征在于包括在高于食用蠟熔點(diǎn)的溫度加熱食用蠟；在高于食用蠟的熔點(diǎn)的溫度加熱食用油；在3∶97至20∶80的重量比范圍內(nèi)混合熔化的蠟和油，使蠟和油的混合物均勻混合。
71.如權(quán)利要求70所述的方法，其特征在于均勻混合蠟和油混合物的方法包括在35-45℃的溫度下，在一個(gè)均化器中以6000-10000rmp的速度攪拌該混合物15-20分鐘。
72.如權(quán)利要求70所述的方法，其特征在于均勻混合蠟和油的混合物的方法包括在齒距為0.2-0.8微米的膠體壓榨機(jī)上均質(zhì)該混合物。
73.如權(quán)利要求70所述的方法，其特征在于該方法還包括在1∶99-10∶90重量比的范圍內(nèi)將黃芩根加入食用油中，在高于食用蠟熔點(diǎn)的溫度加熱該混合物。
74.如權(quán)利要求70所述的方法，其特征在于該方法還包括將均勻的蠟和油的混合物加入到凝膠狀膠囊中。
75.如權(quán)利要求74所述的方法，其特征在于所述的凝膠膠囊是一種由凝膠和甘油制成的軟凝膠膠囊。
76.如權(quán)利要求70所述的方法，其特征在于食用蠟是熔點(diǎn)為70-80℃的蜂蠟。
77.如權(quán)利要求70所述的方法，其特征在于食用油是芝麻油。
78.如權(quán)利要求70所述的方法，其特征在于該方法還包括將活性成分加入食用油中，在高于食用蠟熔點(diǎn)的溫度下加熱食用油。
79.一種在體內(nèi)保護(hù)或者治療受損的組織粘膜的藥物組合物的生產(chǎn)方法，其特征在于包括在80-140℃溫度下，加熱在70∶30至98∶2重量比范圍內(nèi)混合的芝麻油和黃芩的混合物30-120分鐘；過濾該混合物，獲得芝麻油濾出液；冷卻芝麻油濾出液至70-90℃之間；添加蜂蠟到芝麻油濾出液中，重量比在3∶93至10∶90之間；在80-140℃溫度下，加熱蜂蠟和芝麻油濾出液的混合物20-60分鐘，并攪拌；均質(zhì)化蜂蠟和芝麻油濾出液的混合物。
80.如權(quán)利要求79所述的方法，其特征在于所述的述蜂蠟和芝麻油濾出液的混合物的均質(zhì)包括均勻該混合物直至形成蜂蠟微晶體，并在室溫下充分均勻地分散在油中。
81.一種在體內(nèi)保護(hù)或治療受損粘膜組織的藥物組合物的生產(chǎn)方法，其特征在于包括在80-180℃溫度下，加熱在70∶30至98∶2重量比范圍內(nèi)芝麻油與黃芩、黃柏、黃連、罌粟殼和蚯蚓化合物的混合物30-120分鐘；過濾該混合物，獲得芝麻油濾出物；冷卻芝麻油濾出物至70-90℃之間；添加蜂蠟到芝麻油濾出物中，重量比在3∶93-10∶90之間；在80-180℃溫度下，加熱蜂蠟和芝麻油濾出液的混合物10-60分鐘，并攪拌；均質(zhì)化蜂蠟和芝麻油濾出液的混合物；均勻蜂蠟和芝麻油濾出液的混合物。如權(quán)利要求81所述的方法，其特征在于所述均質(zhì)化蜂蠟和芝麻油濾出液的混合物包括均勻該混合物直至形成蜂蠟微晶體，并且在常溫下充分地均勻分散在油中。
82.如權(quán)利要求81所述的方法，其特征在于均勻蜂蠟和芝麻油混合物的方法包括在35-45℃的溫度下，在一個(gè)均化器中以6000-10000rmp的速度攪拌該混合物15-20分鐘。
83.如權(quán)利要求81所述的方法，其特征在于均勻混合蜂蠟和芝麻油混合物包括在一個(gè)齒距為0.2-0.8微米的膠體碾磨機(jī)上攪勻該混合物。
全文摘要
本發(fā)明為保護(hù)和促進(jìn)細(xì)胞生長，恢復(fù)機(jī)體粘膜組織，特別是胃腸道粘膜的生理結(jié)構(gòu)和功能，提供了新型的組合物和其制備方法。該組合物可用作藥品或營養(yǎng)保健品，用于治療胃腸不適或促進(jìn)動物，特別是人類的總體健康水平。該組合物為口服劑型，其組成包括0.5－50重量％的食用蠟、至少0.1重量％的甾醇化合物與食用油。該組合物還可以含有其它藥物成分，并用于將其它有效成分傳輸?shù)轿改c道，用以治療各種疾病。
文檔編號A61K36/539GK1404835SQ0210554
公開日2003年3月26日 申請日期2002年4月16日 優(yōu)先權(quán)日2001年6月28日
發(fā)明者徐榮祥 申請人:徐榮祥