專利名稱：二苯并[a,kI]呫噸衍生物用作抗腫瘤藥物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術領域，結構通式I的1-氧代-13c-烷氧基-1，13c-二氫二苯并[a，kl]呫噸及其衍生物用作抗腫瘤藥物。
后來H.P.Schneider等人報道(Schneider，H.P.；Streich，E.；Schurr，K.；et al，Chem.Ber.，1984，117，2660)3，3’，6，6’-四叔丁基取代的1在堿性的甲醇溶液中可被鐵氰化鉀直接一步氧化生成四叔丁基取代的2(通式I中R1＝CH3，R2＝R3＝R5＝R6＝t-Bu，R4＝R7＝H)，產(chǎn)率也不高，只有38％(見式2)。 這類結構的化合物當時是在研究氧化反應規(guī)律過程中得到的產(chǎn)物，并未用于抗腫瘤的藥理試驗。
我們在進行模擬氧化酶的研究中，發(fā)現(xiàn)氧氣在某些銅胺絡合物的催化下，可以把1氧化成2，產(chǎn)率高達94％(Tan D-M，Li H-H，Wang B，Liu H-B，Xu Z-L，Chin.J. Chem.，2001，1991)，溶劑甲醇參與了反應，產(chǎn)物中的甲氧基來自甲醇分子。當反應在其它醇中進行時，得到帶有相應烷氧基的產(chǎn)物，產(chǎn)物94～58％(見式3)。 R＝CH3，CH2CH3，CH2CH2CH3，CH(CH3)2，CH2CH(CH3)2，CH2(CH2)2CH3CH2CH2Cl，CH2CH2OCH3，CH2CH2OCH2CH3et al從對稱取代和不對稱取代的聯(lián)萘酚出發(fā)，在不同的醇溶劑(R1OH)中用銅胺絡合物-氧氣體系進行氧化反應，就可以得到通式I的化合物(見式4)。通式I中的R1來自反應物之一的醇(R1OH)。對于一些常見的低級醇，如甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇等醇的反應，可以加入大量的醇進行反應，醇既作反應物又充當溶劑。當用粘度較大或者固體的醇反應時，還可以加入丙酮、二甲基甲酰胺或二甲基亞砜等極性非質子溶劑作為稀釋劑和增溶劑。 根據(jù)所用的醇的不同，可以得到一系列不同R1取代基的化合物I。R1可以為1～12個碳的烷基，以及H，CH2CH2Cl，CH2CH2Br和(CH2CH2X)nY[其中X＝NH，O；Y＝H，CH3，CH2CH3，OAc，n＝1～10]中的任一種。
當在反應底物聯(lián)萘酚的3位和3’位上有取代基(R2和R5)時，R2和R5出現(xiàn)在產(chǎn)物I的2位和8位。根據(jù)原料的不同，R2和R5可以為H，CH3，CH2CH3，CH2OH，CH2OAc，CH2OCH3，CH2CH2OH，COOH，COOCH3，COOCH2CH3，CONH2，CONHCH3，CONHCH2Ph，CONHPh，OH，OAc，OCH3，OCH2CH3，NHAc，NHCOPh中的任一種。R2和R5可以相同或者不同。
同理，底物聯(lián)萘酚的6位和6’位上的取代基R3和R6出現(xiàn)在產(chǎn)物的5位和11位。其中R3和R6可以為H，Cl，Br，NO2，CH3，CH2CH3，CH(CH3)2，C(CH3)3和Ac中的任一種。R3和R6可以相同或者不同。
同理，底物聯(lián)萘酚的7位和7’位上的取代基R4和R7出現(xiàn)在產(chǎn)物的6位和12位。其中R4和R7可以為H，OH，OAc，OCH3，OCH2CH3和OCH2Ph中的任一種。R4和R7可以相同或者不同。
體外藥理試驗表明，上述結構通式I所示的1-氧代-13c-烷氧基-1，13c-二氫二苯并[a，kl]呫噸及其衍生物用作抗腫瘤藥物，具有明顯的抗腫瘤活性(結果見表1)，具有良好的抗腫瘤藥物開發(fā)應用前景。結構通式I中的R1為1～12個碳的烷基中的任一種，以及H，CH2CH2Cl，CH2CH2Br和(CH2CH2X)nY中的任一種，其中X＝NH，O；Y＝H，CH3，CH2CH3，Oac；n＝1～10；結構通式I中的R2和R5為H，CH3，CH2CH3，CH2OH，CH2OAc，CH2OCH3，CH2CH2OH，COOH，COOCH3，COOCH2CH3，CONH2，CONHCH3，CONHCH2Ph，CONHPh，OH，OAc，OCH3，OCH2CH3，NHAc，NHCOPh中的任一種，R2和R5可以相同或者不同；結構通式I中的R3和R6為H，Cl，Br，NO2，CH3，CH2CH3，CH(CH3)2，C(CH3)3和Ac中的任一種，R3和R6可以相同或者不同；結構通式I中的R4和R7為H，OH，OAc，OCH3，OCH2CH3和OCH2Ph中的任一種，R4和R7可以相同或者不同。
表1為部分化合物的體外抗腫瘤活性試驗結果。
表1中化合物Ia對人肝癌細胞的IC50為0.785μg/mL，而對正常人體肝上皮細胞的IC50為3.45μg/mL。對肝癌細胞的毒性是對正常細胞毒性的4.4倍，差別十分明顯。因此，化合物I可望在治療惡性腫瘤，尤其是肝癌、肺癌、子宮癌、乳腺癌、胃癌、腸癌、食道癌、鼻咽癌、膀胱癌、皮膚癌、白血病等惡性腫瘤的方面提供高效而低毒的藥物。
表1.部分化合物的體外抗腫瘤活性試驗結果

實施例1、合成I的通用方法一定量的聯(lián)萘酚或者取代聯(lián)萘酚加入到反應的醇溶劑中(必要時可以加入其它溶劑助溶，如丙酮、二甲基甲酰胺、二甲亞砜等)再加入由等摩爾量的乙醇胺與CuCl2·2H2O組成的催化劑，在氧氣的存在下反應。反應結束后減壓蒸去溶劑，加入乙酸乙酯萃取有機物，再加入稀氨水洗去銅胺絡合物。所得的有機物用重結晶或者柱層析的方法提純，得到相應的產(chǎn)物I。2、Ia的合成CuCl2·2H2O 1.7g(10mmol)溶于200mL甲醇中，攪拌下加入0.61g乙醇胺(10mmol)，配成銅胺溶液。再加入2.86g聯(lián)萘酚(10mmol)，加熱至65℃，常壓下通O2攪拌。薄層色譜跟蹤反應至原料消失(約5小時)。減壓蒸去約一半甲醇，冷卻到室溫，析出黃色晶體，為產(chǎn)物Ia。分離出晶體，依次用甲醇、清水、稀鹽酸和清水洗滌，于50～70℃下烘干。
母液中加入200ml乙酸乙酯和500ml稀氨水進行抽提，分去水層，乙酸乙酯層用清水洗滌后用無水硫酸鈉干燥，再通過一個氧化鋁層析柱，洗脫劑用石油醚—乙酸乙酯10∶1，得到另一批產(chǎn)物Ia。產(chǎn)率共94％。mp.165-167℃，νmax3064(Ar-H)，2931，1700(s，C＝O)，1454，1053，807，751cm-1.δH2.83(s，3H，OCH3)，6.26(d，J＝9.9Hz，1H，2-H)，7.06(d，J＝7.3Hz，1H，4-H)，7.09(dd，3J＝8.2Hz，4J＝1.0Hz，1H，6＝H)，7.19(d，J＝9.9Hz，1H，3-H)，7.32(d，J＝8.9Hz，1H，9-H)，7.37(dd，J4H-5H＝7.3Hz，J5H-6H＝8.2Hz，1H，5-H)，7.40-7.44(m，2H，10-H，13-H)，7.79-7.82(m，1H，11-H)，7.89(d，J＝8.9Hz，1H，8-H)，8.10-8.13(m，1H，12-H)。
其它化合物的合成見參考文獻(Tan D-M，Li H-H，Wang B，Liu H-B，Xu Z-L，Chin.J.Chem.，2001，1991)。2、藥物體外抗癌試驗(MTT比色法)把3×104/ml的肝癌細胞株7402接種于96孔培養(yǎng)板中，每孔加入200ul，用10％MEM培養(yǎng)基培養(yǎng)。溫箱中培養(yǎng)24h后去掉培養(yǎng)液，加入新配制培養(yǎng)液，并分別加入一系列濃度的待測藥物的DMSO溶液，每孔加入200ul，每劑量組設三個平行樣板，培養(yǎng)48h后每孔加入2mg/ml的MTT溶液20ul，培養(yǎng)4h。完全吸出孔內(nèi)培養(yǎng)液，各加入150ul的DMSO，震蕩10分鐘使結晶物溶解。用酶聯(lián)檢測儀檢測各孔OD值(λ＝570nm)；以OD值對藥物濃度的對數(shù)作圖，從圖上求出令半數(shù)細胞死亡的藥物濃度即IC50。
結果見前表。
權利要求
1.如結構通式I所示的1-氧代-13c-烷氧基-1，13c-二氫二苯并[a，kl]呫噸及其衍生物用作抗腫瘤藥物， 結構通式I中的R1為1～12個碳的烷基中的任一種，以及H，CH2CH2Cl，CH2CH2Br和(CH2CH2X)nY中的任一種，其中X＝NH，O；Y＝H，CH3，CH2CH3，Oac；n＝1～10；結構通式I中的R2和R5為H，CH3，CH2CH3，CH2OH，CH2OAc，CH2OCH3，CH2CH2OH，COOH，COOCH3，COOCH2CH3，CONH2，CONHCH3，CONHCH2Ph，CONHPh，OH，OAc，OCH3，OCH2CH3，NHAc，NHCOPh中的任一種，R2和R5可以相同或者不同；結構通式I中的R3和R6為H，Cl，Br，NO2，CH3，CH2CH3，CH(CH3)2，C(CH3)3和Ac中的任一種，R3和R6可以相同或者不同；結構通式I中的R4和R7為H，OH，OAc，OCH3，OCH2CH3和OCH2Ph中的任一種，R4和R7可以相同或者不同。
2.根據(jù)權利要求1的應用，其特征是所述的抗腫瘤藥物為抗肝癌藥物。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術領域,結構通式I的1－氧代－13c－烷氧基－1,13c－二氫二苯并[a,kl]呫噸及其衍生物用作抗腫瘤藥物?；衔颕在治療肝癌、肺癌、子宮癌、乳腺癌、胃癌、腸癌、食道癌、鼻咽癌、膀胱癌、皮膚癌、白血病等惡性腫瘤的藥物方面具有良好的開發(fā)應用前景。
文檔編號A61K31/352GK1364460SQ0211474
公開日2002年8月21日 申請日期2002年1月16日 優(yōu)先權日2002年1月16日
發(fā)明者許遵樂, 譚端明, 龐冀燕, 蔡敏, 陳家堃, 汪波, 劉漢標 申請人:中山大學