專利名稱：燈盞花素滴丸口服劑型及其生產(chǎn)方法
所屬領(lǐng)域本發(fā)明涉及含有燈盞花素有效劑量的滴丸劑口服藥物。
背景技術(shù)：
燈盞花素(Brceviscapini)，為黃色粉末，可溶于堿水，微溶于甲醇，不溶于水，氯仿等，具有較明顯改善腦血循環(huán)，增加腦血管流量，降低血管阻力和抗血小板凝聚的作用，試驗(yàn)證明對閉塞性腦血管疾病所致的癱瘓及腦出血所致的后遺癥癱瘓療效較好。并且對心、肝、脾、肺、腎和胃功能無損害，也無明顯毒副使用。
以燈盞花素為主要有效成分的“燈盞花素片”、“燈盞花素注射液”及“燈盞花素凍干粉針”已由衛(wèi)生存在有效成分溶出慢，不能及時(shí)起效等缺陷。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種燈盞花素滴丸劑口服劑型及其生產(chǎn)方法，能夠滿足該類口服給藥制劑在生物用度、穩(wěn)定性、療效性及使用方便的要求，并且其生產(chǎn)方法簡單易行。
本發(fā)明提供的藥物劑型根據(jù)國家藥品監(jiān)督管理體制局制定并于2002年12月1日起施行的《藥品注冊管理辦法》之規(guī)定屬于中藥(改變劑型)。提供的口服藥物，含有有效劑量的燈盞花素作為有效成分，與適量的基質(zhì)摻合起來制成滴丸劑，該劑型按重量每粒含有燈盞花素0.2～40mg和適量的基質(zhì)，基質(zhì)選自水溶性基質(zhì)，口服劑型是滴丸劑。
所述水溶性基質(zhì)可以是聚乙二醇6000、聚乙二醇4000、聚乙二醇1500、硬脂酸鈉、甘油明膠等中的一種或幾種。
本發(fā)明產(chǎn)品最佳配方中含有組份 量(克/粒)燈盞花素 0.002～0.04基質(zhì) 0.0048～0.06
燈盞花素滴丸的制備工藝包括以下步驟取基質(zhì)適量，加熱至全部熔融，加入燈盞花素，充分混勻并在保溫狀態(tài)下滴入液體石蠟中，將成型的滴丸瀝盡，并擦除液體石蠟，干燥，即得。
燈盞花素滴丸與“燈盞花素滴丸注射液”、“燈盞花素片”及“燈盞花素凍干粉針”等已有劑型相比，優(yōu)點(diǎn)是質(zhì)量穩(wěn)定，攜帶、給藥方便，生物利用度高，能及時(shí)快速起效。
本發(fā)明產(chǎn)品按上述方法制備，其詳細(xì)組份由下列實(shí)施例給出但本發(fā)明的保護(hù)范圍，不局限于此。
實(shí)施例1組份量(克/粒)燈盞花素0.01聚乙二醇40000.025總重0.035實(shí)施例2組份量(克/粒)燈盞花素0.01聚乙二醇60000.03總重0.04實(shí)施例3 量(克/粒)燈盞花素0.008聚乙二醇15000.0135聚乙二醇60000.0135總重0.035實(shí)施例4
組份 量(克/粒)燈盞花素 0.005聚乙二醇6000 0.015聚乙二醇1500 0.015總重0.035
燈盞花素0.008聚乙二醇60000.016聚乙二醇15000.016總重0.04
聚乙二醇15000.02總重0.045
根據(jù)中藥新藥穩(wěn)定性試驗(yàn)滴丸劑項(xiàng)下的要求，對燈盞花素滴丸三批樣品在室溫放置三個(gè)月以上，進(jìn)行質(zhì)量觀察，并測定了各項(xiàng)數(shù)據(jù)，結(jié)果如下表批號(hào)020302
批號(hào)020305
批號(hào)020306 本發(fā)明通過下面試驗(yàn)證明其性能一、急性毒性試驗(yàn)昆明種小鼠雌雄各半，體重20±2g，燈盞花素滴丸，給藥后連續(xù)觀察7日，結(jié)果顯示給藥后7日內(nèi)，動(dòng)物未見死亡，一般狀況良好，飲食，二便正常，體重增長正常，未見其它明顯異常反應(yīng)，其口服最大給藥量為17.23/kg，相當(dāng)于臨床人用量的8614倍，按體表面積計(jì)算相當(dāng)于1104倍。
二、長期毒性試驗(yàn)(一)試驗(yàn)材料1、藥品燈盞花素滴丸
2、動(dòng)物Wistar大鼠，雌雄各半；體重70-90g。
(二)試驗(yàn)方法1、試驗(yàn)周期及檢測時(shí)間臨床用藥2個(gè)月/療程，長期毒性定為6個(gè)月，即27周，停藥后觀察4周，分別在給藥3個(gè)月、6個(gè)月及停藥后4周檢測各項(xiàng)指標(biāo)。
2、給藥劑量及分組(本文劑量均用mg燈盞花素/kg體重表示)按新藥毒理指南規(guī)定，設(shè)大、中、小三個(gè)劑量為120、60、30mg/kg，分別相當(dāng)于臨用量的60、30、15倍，小劑量30mg/kg等于大鼠藥效學(xué)的有效劑量。配成不同濃度，灌服，每周給藥6天，另設(shè)正常對照組，灌服等量蒸餾水。
3、觀察指標(biāo)一般情況觀察、血液學(xué)、尿液檢測、血液生化檢測、心電圖檢測、病理檢查。
(三)結(jié)論燈盞花素滴丸以120、60、30mg燈盞花素/kg連續(xù)灌胃給予大鼠(相當(dāng)臨床擬用劑量的60、30、15倍)27周，各項(xiàng)檢測如動(dòng)物狀況，體重增長、攝食量、血液學(xué)、血液生化指標(biāo)、尿液檢測、病理組織學(xué)檢查諸方面未見藥物引起的明顯異常，與對照組無明顯差異。燈盞花素滴丸長毒實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在所設(shè)大鼠的小、中、大劑量30、60、120mg的燈盞花素/kg，分別為臨床量15、30、60倍，長期使用是安全的。
藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)1、試驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^動(dòng)物試驗(yàn)考察燈盞花素滴丸抗腦卒中等作用。
2、試驗(yàn)藥品燈盞花素滴丸，燈盞花素滴丸，其它藥品均為市售。
3、試驗(yàn)動(dòng)物wistar大鼠、昆明種小鼠。
4、試驗(yàn)條件溫度24-25℃(空調(diào)控制) 濕度55％--65％5、溶劑 蒸餾水組6、試驗(yàn)內(nèi)容6.1對大鼠大腦缺血再灌注的保護(hù)作用(1)對缺血再灌注大鼠腦神經(jīng)病學(xué)(2)對缺血再灌注大鼠腦指數(shù)和腦梗塞率的影響(3)對缺血再灌注大鼠腦水腫的影響(4)對缺血再灌注大鼠腦組織改變的影響6.2對動(dòng)脈血栓形成的影響6.3對凝血時(shí)間的影響6.4對凝血酶原時(shí)間和白陶土部分凝血活酶時(shí)間的影響6.5對血液流變性的影響6.6對全腦缺血的影響6.7對常壓耐缺氧的影響7、試驗(yàn)方法和結(jié)果7.1對大鼠大腦缺血再灌注的保護(hù)作用(1)試驗(yàn)方法①尼龍栓子制備將一長40mm，直徑為4.0號(hào)龍線一端加熱為光滑球形，用酒精擦干并于距球端20mm處標(biāo)記，置于0.9％生理鹽水中備用。
②分組及給藥取體重250～300g大鼠120只，將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為假手術(shù)組(只麻醉切開皮膚，分離血管，然后縫合)、模型組、燈盞花素滴丸高、中、低劑量組織和燈盞花素片陽性對照組。實(shí)施前模型組和假手術(shù)組灌胃等容量蒸餾水，燈盞花素小、中和大量組分別灌胃燈盞花素滴丸10.8mg/kg，32.4mg/kg和97.2mg/kg(按體表面積計(jì)算，相當(dāng)于臨床人用量的1、3、9倍)，陽性對照組97.2mg/kg(相當(dāng)于臨床人用量的9倍)，每天一次，連續(xù)7天。末次藥后60min采用線栓法將大鼠用10％水合氯醛麻醉(35mg/100g)，仰臥手術(shù)臺(tái)上，頸正中切開，分離左側(cè)頸總動(dòng)脈(CCA)，頸外動(dòng)脈(ECA)，頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA)。用0’線接扎并剪斷ECA分支。沿ECA向下分離并電凝翼顎動(dòng)脈。在ECA剪一小口，將制好尼龍線插入ECA，將ECA剪斷后，經(jīng)CCA分叉處通過ICA入顱至脈前動(dòng)脈(ACA)，尼龍線插入深度約為18±2mm，2h后再灌注時(shí)拉尼龍線使其球端回至ECA內(nèi)即可恢復(fù)大腦中動(dòng)脈的血供，假手術(shù)臺(tái)組術(shù)除不插入尼龍線外其余步驟同上。各組動(dòng)物均分成兩組，一組進(jìn)行神經(jīng)病學(xué)評(píng)分、腦指數(shù)和腦梗塞率，另一組進(jìn)行腦組織病理學(xué)檢查和腦組織水分檢測。
③檢測指標(biāo)及方法A、神經(jīng)病學(xué)評(píng)分神經(jīng)病學(xué)評(píng)分在大鼠再灌注清醒后進(jìn)行評(píng)分。
(1)提尾懸空時(shí)，手術(shù)對側(cè)(右側(cè))前腳屈曲、肩內(nèi)旋，緊貼胸壁計(jì)1-4分。
(2)行走時(shí)向右側(cè)環(huán)轉(zhuǎn)圈時(shí)計(jì)1-2分。
(3)將動(dòng)物置于光滑平面上推右肩向左側(cè)移動(dòng)，阻力降低者計(jì)1-2分。
(4)右前肢肌張力降低1-2分。根據(jù)以上標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分，滿分10分。分?jǐn)?shù)越高，說明動(dòng)物行為障礙越嚴(yán)重。
B、紅四氯唑(TTC)染色測量腦梗塞百分率。
再灌注后24小時(shí)，斷頭取腦，將腦置于冰凍的生理鹽水中10分鐘，去除嗅球、小腦和低位腦干。分離左腦稱重，并冠狀切4刀，切成5扯，第一刀在腦極與視交叉連線中心點(diǎn)處，第二刀在視交叉部位，第三刀在漏斗柄部位，第四鼠在漏斗柄與后葉尾極之間。然后迅速將腦片置于5ml，含有4％TTC及1mol/LK2HPO40.1ml的溶液中，避光、溫孵30分鐘(溫度為37)。其中每隔7-8分鐘翻動(dòng)一次，經(jīng)染色后正常組織玫瑰經(jīng)色，而梗塞部分呈現(xiàn)白色，且界限分明，溫孵完畢后。用手術(shù)刀挖梗塞部分呈現(xiàn)白色的腦世片的百分率，以此評(píng)價(jià)藥效。
C、腦組織含水兩量及組織病理檢查，另取缺血再灌注大鼠24h后大鼠，麻醉后處死，立即取左腦，在左腦前極與視交叉連接處切成2部分，前部稱濕重后在60℃烘箱烘24h，稱腦干重，計(jì)算其含水量，后部做病理檢查。結(jié)果見表1、2、3、4。
表1燈盞花素滴丸對再灌注大鼠神經(jīng)病學(xué)評(píng)分(x±s)，與模型組比△P＜0.05

表2燈盞花素滴丸對再灌注大鼠腦梗塞指數(shù)及腦醒塞率的影響(x±s)

與假手術(shù)組比*P＜0.01與模型組比△P＜0.05 △△P＜0.01表3燈盞花素滴丸對再灌注大鼠腦含水量的影響(x±s)

與假手術(shù)組比*P＜0.05**p＜0.01與模型組比△P＜0.05表4燈盞花素滴丸對再灌注大鼠腦組織病理變化的影響

由表1、2、3、4可見，燈神經(jīng)病學(xué)癥狀有明顯的改變，對腦指數(shù)和腦梗塞率明顯降低，對腦組織含水量明顯下降，對腦組織變化明顯改變，說明燈盞花素滴丸對再灌注大鼠的癥狀有明顯的保護(hù)作用。
7.2對動(dòng)脈血栓形成的影響取體重200--250g大鼠，雌雄兼用，隨機(jī)分為正常組、陽性藥物組，燈盞花素滴丸小、中和大劑量組，各組按表4中劑量每日以0.5ml/100mg體重灌胃給藥連續(xù)7天，于末次給藥1h后用氯胺酮(0.5ml/100mg)麻醉，仰位固定。分離后頸總動(dòng)脈和左頸外靜脈，將放有長60cm，重約9mg的4號(hào)手術(shù)線的聚乙烯管的一端插入左頸外靜脈，另一端入右頸總動(dòng)脈，管內(nèi)肝素抗凝，開放血流15min后中斷血流，取出手術(shù)線稱濕重，于60℃恒溫干燥24h至恒重，稱干重。干重、濕重分別減去手術(shù)線重的為血栓干重和濕重，結(jié)果見表5。
表5燈盞花素滴丸對血栓形成的影響(x±s，n＝10)

與蒸餾水組比**P＜0.01由表5可見，燈盞花素滴丸對血栓形成有明顯的抑制作用，與蒸餾水組比有顯著性差異。
7.3燈盞花素滴丸對凝血時(shí)間的影響取體重20±2g小鼠50只，雌雄兼用，各組每日按表6劑量以0.2ml/10g體重灌胃給藥，連續(xù)7天，于末次給藥40min，用毛細(xì)管法測定凝血時(shí)間，結(jié)果見表6。
表6燈盞花素滴丸對凝血時(shí)間的影響(X±s)

與蒸餾水組比**P＜0.01由表6可見，燈盞花素滴丸對小鼠凝血時(shí)間明顯延長，與蒸餾水組比，有顯著性差異。
7.4燈盞花素滴丸對血瘀證模型大鼠血流流變學(xué)的影響取200-250g大鼠，雌雄兼用，隨機(jī)分為正常對照組、模型組、陽性對照組、燈盞花素滴丸小、中、大量組。各組分別按劑量每0.5ml/100g體重灌胃給藥，連續(xù)用藥7天，末次藥后40分鐘，除正常組外，其余各組大鼠皮下注射腎上腺素0.08ml/100g體重2次，間隔4h，在二次注射Adr間隔時(shí)間，將大鼠浸入冰水中5min，處置后停食造急性血瘀模型，次晨用20％烏拉坦腹腔麻醉，腹主動(dòng)脈取血抗凝，用LBY-N6A自清洗旋轉(zhuǎn)式粘度計(jì)測定血液粘度。結(jié)果見表7。
表7燈盞花素滴丸對血瘀證大鼠全血粘度比的影響(X±s，n＝10)

與蒸餾水組比**P＜0.01與模型組比△△P＜0.01由表7可見，用鹽酸腎上腺素后，大鼠的血液流變性明顯變差，黏度增加；而用燈盞花素滴丸后，血液流變性明顯改善，黏度降低，說明燈盞花素滴丸明顯改善血瘀動(dòng)物的血液流變性。
7.5燈盞花素滴丸對凝血酶原時(shí)間和白陶土部分凝血活酶時(shí)間的影響。
取220-250g大鼠，雌雄兼用，隨機(jī)分為5組，按表8中劑量給藥，0.5ml/100g體重，連續(xù)灌胃給藥7天，于末次給藥40min后用20％烏拉坦麻醉，腹主動(dòng)脈血，用0.1mol/L草酸鈉抗凝，3000rpm離心10min，得血漿。吸取血漿0.1ml放入試管中37℃預(yù)溫，加入37℃預(yù)溫兔腦粉浸出液0.01ml，再加入0.1mlCaCL2溶液37℃預(yù)溫混勻，立即開動(dòng)秒表，不斷傾斜試管，至液體流動(dòng)停止所需時(shí)間即為凝血酶原時(shí)間(PT)；再吸取血漿0.01ml放入試管中37℃水浴預(yù)溫，加白陶土部分凝血活酶懸液0.01ml，置37℃水浴預(yù)溫3min，(其間不斷振蕩)，在加入當(dāng)出現(xiàn)纖維蛋白絲時(shí)，記錄時(shí)間，即為白陶土部分凝血活酶時(shí)間(KPTT)，結(jié)果4見表8。
表8燈盞花素滴丸對PT和KPTT的影響(X±s，n＝10)

與蒸餾水組比**P＜0.01由表8可見，燈盞花素滴丸對PT和KPTT明顯延長，與蒸餾水組比，有顯著性差異。
7.6燈盞花素滴丸對全腦缺血的作用(小鼠斷頭法)取18～22g小鼠，雌雄兼用，隨機(jī)分為5組，按表9中劑量以0.2ml/10g體重灌胃給藥，連續(xù)7天，末次藥后40min小鼠在不麻醉的情況下，用大剪刀在各鼠耳根相同部位快速斷頭，記錄喘吸次數(shù)和停止喘息的時(shí)間，結(jié)果見表9。
表9燈盞花素滴丸對全腦缺血喘息次數(shù)和喘息時(shí)間的影響(X±s)

與蒸餾組比**P＜0.01由表9可見，燈盞花素滴丸明顯增加小鼠斷頭后的喘息次數(shù)，延長喘息時(shí)間，說明燈盞花素滴丸明顯對抗腦缺血的作用。
7.7燈盞花素滴丸對常壓耐缺氧時(shí)間的影響取體重18～22g小鼠，雌雄兼用，隨機(jī)分為5組，按表10劑量，各鼠每日以0.2ml/10g體重灌胃給藥，連續(xù)7天，末次藥后40min，將小鼠放入250ml玻瓶中(內(nèi)裝有5g鈉石灰)，密閉瓶口，記錄小鼠從放入至死亡時(shí)間，結(jié)果見表10。
表10燈盞花素滴丸對小鼠常壓耐缺氧時(shí)間的影響X±s

由表10可見，燈盞花素滴丸明顯延長小鼠常壓耐缺氧時(shí)間，與蒸餾水組比，有明顯差異。
8、結(jié)論由試驗(yàn)結(jié)果可見燈盞花素滴丸大鼠按10.8mg/kg，32.4mg/kg和97.2m3/kg，小鼠按15.6mg/kg、46.8mg/kg、140.4mg/kg灌胃給藥，明顯改善大鼠大腦缺血再灌注的保護(hù)作用，使神經(jīng)系統(tǒng)癥狀、腦指數(shù)和腦組織梗塞率明顯下降，且腦組織病理狀況好轉(zhuǎn)，腦水腫減輕；明顯抑制大鼠動(dòng)脈血栓重量；延長小鼠的凝血時(shí)間和延長鼠凝血酶原時(shí)間和白陶土部分凝血活酶時(shí)間；明顯改善瘀血型模型大鼠的血流變性；顯著延長小鼠斷頭的喘息時(shí)間還能顯著延長小鼠常壓下的耐缺氧時(shí)間，說明燈盞花素滴丸具有明顯的活血化瘀，通絡(luò)止痛的功效。
權(quán)利要求
1.一種含有燈盞花素有效成份的口服液劑型，其特征是該劑型按重量計(jì)每粒含燈盞花素0.2～40mg和4.8～60mg的基質(zhì)。
2.如權(quán)利要求1所述的口服劑型，其特征是上述的基質(zhì)選自水溶性基質(zhì)。
3.如權(quán)利要求1所述的口服劑型，其特征是口服劑型是滴丸劑。
4.如權(quán)利要求1和2所述的口服劑型，其特征是水溶性基質(zhì)是聚乙二醇6000、聚乙二醇4000、聚乙二醇1500，硬脂酸鈉，甘油膠中的一種或幾種。
5.一種燈盞花素滴丸口服劑型的生產(chǎn)方法，其特征是包括以下步驟按比例取基質(zhì)適量，加熱至90～100℃，待全部熔融后，加入燈盞花素，充分混勻并保溫在70℃～80℃，滴入液體石蠟中，將成型的滴丸瀝盡，并擦除液體石蠟，40℃以下干燥即得。
全文摘要
本發(fā)明涉及燈盞花素滴丸口服劑藥物及其生產(chǎn)方法，該燈盞花素滴丸劑按重量每粒(丸)含燈盞花素0.2～40mg，與適量的基質(zhì)摻合起來制成燈盞花素滴丸劑，制備工藝為取基質(zhì)適量，加熱熔融后加入燈盞花素混勻，保溫狀態(tài)下滴入液體石蠟中，瀝盡擦干，與燈盞花素的已有劑型相比，本產(chǎn)品的優(yōu)點(diǎn)是能快速被吸收利用，質(zhì)量穩(wěn)定，攜帶給藥均方便。
文檔編號(hào)A61P9/00GK1437950SQ0212808
公開日2003年8月27日 申請日期2002年12月21日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月21日
發(fā)明者李睿宇, 張?jiān)粕?申請人:李睿宇, 張?jiān)粕?br>