專利名稱：稀土雜多酸鹽(藍(lán))類抗艾滋病藥物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于化學(xué)合成藥物領(lǐng)域，涉及到稀土雜多酸鹽(藍(lán))類化合物。
背景技術(shù)：
自80年代發(fā)現(xiàn)首例艾滋病病例以來艾滋病在全球迅速蔓延，目前全球累計(jì)約有6000萬的HIV感染/艾滋病患者，每天約有16000名新的感染者。這種疾病是由人類免疫缺陷為基本特征的一種傳染病，艾滋病通過艾滋病毒在細(xì)胞內(nèi)大量繁殖，破壞了CD4細(xì)胞，使細(xì)胞的免疫能力下降和喪失。美國FDA批準(zhǔn)的核苷類藥物(AZT)和蛋白酶抑制劑單獨(dú)或聯(lián)合使用，可以抑制病毒復(fù)制，部分地恢復(fù)了機(jī)體的免疫水平，延緩了病人的壽命，但是這些藥物存在著價(jià)格昂貴，易產(chǎn)生耐藥性，毒副作用較大。
雜多化合物地藥物化學(xué)研究自七十年代初就有報(bào)道，八十年代中期，發(fā)現(xiàn)鎢銻雜多化合物(NH4)17Na[NaSb9W21O86]·14H2O(HPA-23)[美國專利，4,759,929]，它能競爭性的抑制艾滋病毒的逆轉(zhuǎn)錄酶，作為抗AIDS藥物被用作臨床研究。后來發(fā)現(xiàn)它能產(chǎn)生嚴(yán)重的毒副作用而停止臨床使用，90年代初發(fā)現(xiàn)Keggin結(jié)構(gòu)雜多化合物具有一定的抗HIV-1活性，且毒性較低，例如K7[PTi2W10O40](Inouye Y.，Take Y.，TokutakeY.，Chem.Pharm.Bull.1990，38(1)285)。最近，美國的C.L.Hill報(bào)道含鈮的雜多化合物(K7[P2W17(NbO2)O61]、K7[P2W17NbO62])能抑制艾滋病毒的蛋白酶。(Deborah A.Judd，James H.Nettles，Neysa Nevins，James P.Snyder，Dennis C.Liotta，Jordan Tang，JacquesErmolieff，Raymond F.Schinazi，Craig L.Hill.J.Am.Chem.Soc.2001，123，886-897.
迄今，在現(xiàn)有報(bào)道中沒有含有通式Ax(H2O)x[AyLnz(H2O)2xClqXjTimMa12-mO40]·nOg(I)化合物作為有效成分在猴體內(nèi)抗艾滋病方面的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一在于提供一種抗病毒活性高、毒性低、價(jià)格低廉的抗艾滋病毒類的藥物。
本發(fā)明的目的之二在于提供一種制備上述藥物的方法。
本發(fā)明的目的是這樣達(dá)到的
本發(fā)明的抗HIV-1藥物是以通式Ax(H2O)x[AyLnz(H2O)2xClqXjTimMa12-mO40]·nOg所表示的具有Keggin結(jié)構(gòu)的Mo或W系稀土雜多酸化合物。配原子通常是Mo或W。雜原子X通常是周期表中的p區(qū)或d區(qū)元素。雜原子X以四面體配位(XO4)與四個(gè)氧原子連接，配原子M以八面體配位與周圍六個(gè)氧原子結(jié)合，三金屬簇(M3O13)是構(gòu)成雜多陰離子的一個(gè)重要的結(jié)構(gòu)單元，在M3O13中，三個(gè)八面體共邊相連，每個(gè)八面體公用邊上的角頂氧原子被三個(gè)金屬原子共用，Keggin結(jié)構(gòu)中就是由這樣四個(gè)三金屬簇連接而成，每一個(gè)不同M3O13結(jié)構(gòu)單元中的八面體共角連接。雜多藍(lán)是雜多酸還原后得到的混合價(jià)態(tài)配合物。，Keggin結(jié)構(gòu)雜多陰離子還原成雜多藍(lán)后得到的電子進(jìn)入不同的邊共用三金屬簇內(nèi)，陰離子結(jié)構(gòu)仍保持母體酸或鹽結(jié)構(gòu)，這種雜多化合物中的雜多陰離子具有如下一般特征
(1)陰離子結(jié)構(gòu)為籠型，離子半徑一般為5-30，分子量為1000-5000。
(2)多數(shù)可得粉未狀固體，易溶于水及極性溶劑中。
(3)含有較多的結(jié)晶水。
(4)對(duì)酸堿穩(wěn)定性較強(qiáng)，具有較強(qiáng)的抗堿解能力。
本發(fā)明的抗HIV-1藥物的水溶液在pH＝2～8時(shí)化學(xué)性質(zhì)是穩(wěn)定的，其水溶液中的酸堿穩(wěn)定性是依據(jù)電位滴定法測定的。
二水合鎢酸鈉(或鉬酸鈉)600克(1.82mol)、含IIIA-VA族或d區(qū)過渡元素的化合物0.86mol(例如磷酸二氫鈉、硅酸鈉等)溶解在2000克的蒸餾水中，滴加四氯化鈦61克(0.32mol)后，回餾，過濾，向?yàn)V液中加入一定量(8.1mol)堿金屬鹽或氨基酸鹽得白色沉淀物，沉淀物用500克熱水重結(jié)晶，得到一定質(zhì)量的固體AxXjTimMa12-mO40·nH2O。其中A為堿金屬，氨基酸陽離子，X為周期表中IIIA-VA族，或d區(qū)過渡元素中的一種，M＝W或Mo，x＝1～6，j＝1，m＝1～3，n＝3-5.一定質(zhì)量的AxXjTimM12-mO40·nH2O溶于500克水，加入一定量還原劑攪拌，再加入一定量稀土鹽，在40～80℃下攪拌2～8小時(shí)，幾天后析出固體Ax(H2O)x[AyLnz(H2O)2xClqXjTimMa12-mO40]·nOg。通常下，x＝1～6，y＝1～5，z＝0.5～1，q＝1，j＝1，m＝1～3，n＝1～5，a為M的化合價(jià)，一般為+6或+5價(jià)。
本發(fā)明用作藥物時(shí)，可以直接使用，或者以藥物組合物形式使用。
本發(fā)明所述的藥用載體賦形劑是一種或多種固體、半固體和液體稀釋劑，填料以及藥物制品輔劑。本發(fā)明藥物可經(jīng)口服或注射(靜脈注射、肌肉注射)兩種形式給藥。
該藥物價(jià)格低廉、毒副作用低，對(duì)猴體內(nèi)的SIV(猴免疫缺陷病毒)，細(xì)胞內(nèi)的HIV有強(qiáng)烈的抑制病毒復(fù)制的作用。
為了更好地理解本發(fā)明的實(shí)質(zhì)、下面將用本發(fā)明的通式(I)所包含的化合物K4(H2O)4[K3.5La0.5(H2O)8ClPTi2W10O40]·NH2OH(代號(hào)HPB-1)的藥理作用結(jié)果為例，來說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)，但本發(fā)明的內(nèi)容并不局限于此。
(一)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)
一.體外實(shí)驗(yàn)
采用三種細(xì)胞株(MT4、H9、PBMC)，分別感染HIV-1，觀察HPB-1對(duì)HIV-1復(fù)制的抑制作用。
1.MT4細(xì)胞
方法
①實(shí)驗(yàn)在96孔培養(yǎng)板進(jìn)行，于各孔加入100μL不同濃度HPB-1藥液，每個(gè)濃度藥液至少設(shè)兩個(gè)孔，另取新鮮培養(yǎng)的MT4細(xì)胞，每毫升5×105，加HIV-1病毒1×103TCID50/mL，37℃、CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)1.5-2.0小時(shí)，離心棄去上清，再用RPMI1640洗一次，去除游離的病毒，加入完全培養(yǎng)基到1ml，于96孔板每個(gè)加有藥的孔中加入100μl此感染HIV-1的細(xì)胞(5×104/100μl)，37℃、CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，三天后換藥，于孔中吸出100μl的上清，加入100μl與本孔相同濃度的藥液，對(duì)照組加入100μl的培養(yǎng)基。第六天收集各孔取上清，采用Microelisa方法及試劑，測定P24抗原量。每次實(shí)驗(yàn)設(shè)病毒對(duì)照、細(xì)胞對(duì)照及AZT陽性藥對(duì)照，根據(jù)所測P24抗原量下列公式計(jì)算抑制率。
不同濃度藥液所得的不同抑制率，經(jīng)統(tǒng)計(jì)處理，求得半數(shù)抑制量，體外實(shí)驗(yàn)即半數(shù)抑制濃度(IC50)
②HPB-1對(duì)MT4細(xì)胞毒性的檢測
按上法于96孔板加入藥液及正常細(xì)胞(未感染病毒)，三天后用MTT法測定細(xì)胞毒性，計(jì)算出半數(shù)毒性濃度(TC50)。
結(jié)果
六天抑制實(shí)驗(yàn)的半數(shù)抑制量(IC50)
濃度(μg/mL) 25 12.5 6.25 3.13
抑制率 92.587.6 62.5 34.3
半數(shù)抑制量(IC50)＝5.3μg/mL
半數(shù)毒性濃度(TC50)＝537μg/mL
2.H9細(xì)胞
實(shí)驗(yàn)在96孔培養(yǎng)板進(jìn)行，每孔加入100μL不同濃度藥液，每個(gè)濃度藥液設(shè)兩個(gè)孔，取新鮮培養(yǎng)的H9細(xì)胞，每毫升5×105，加HIV-1病毒1×103TCID50/mL，37℃、CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，兩小時(shí)后離心棄去上清，再用RPMI 1640洗一次，去除游離的病毒，加入培養(yǎng)基到1ml，于96孔板每個(gè)加有藥的孔中加入100μl感染HIV-1的細(xì)胞(5×105/100μl)，37℃、CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，第四天、第六天，每2天換藥，于孔中吸出100μl的上清，加入100μl與本孔相同濃度的藥液，對(duì)照組加入100μl的培養(yǎng)基。實(shí)驗(yàn)設(shè)病毒對(duì)照、細(xì)胞對(duì)照及AZT陽性藥對(duì)照，每2天取上清，每孔取100μl，放-80℃保存，全部收集完測定RT，藥物組與病毒對(duì)照組比較計(jì)算。
結(jié)果HPB-1抑制HIV-1在H9細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制(RT test)
時(shí)間(天)4 6 8
0.4mg/mL抑制率(％) 97.9 99.3 99.7
0.2mg/mL抑制率(％) 98.1 99.1 99.6
3.PBMC細(xì)胞
方法醫(yī)院新鮮取得的PBMC，計(jì)數(shù)、離心1200rpm，棄去上清，配成3×106cell/mL，所用培養(yǎng)基應(yīng)加入IL2(每毫升培養(yǎng)基加入1μl 1000單位的IL2)，37℃ 37℃過夜。)實(shí)驗(yàn)以5×106為一感染單位，HPB-1濃度為0.1mg/mL，相同濃度設(shè)兩孔，病毒對(duì)照，細(xì)胞對(duì)照均各設(shè)兩孔，24孔板每孔5×106細(xì)胞在0.5mL藥液或培養(yǎng)基中(對(duì)照孔)，每孔加入4×104IU的HIV-1(NL4)病毒，吹打均勻，轉(zhuǎn)入12孔板，再加入相同藥液或培養(yǎng)基1.5mL，使總量為2mL，37℃培養(yǎng)，每3-4天取上清，每孔取100μl，放-80℃保存，全部收集完測定RT，藥物組與病毒對(duì)照組比較計(jì)算。
結(jié)果HPB-1抑制HIV-1在PRMC細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制(RT test)
二.體內(nèi)實(shí)驗(yàn)HPB-1對(duì)感染SIV的恒河猴體內(nèi)藥效學(xué)研究
受試藥物1.HPB-1和AZT
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)用恒河猴，體重為4.5-5.5kg，雌雄各半，共16只。
飼料膨化飼料，恒河猴購自中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所靈長類繁殖中心。
實(shí)驗(yàn)分組1.HPB-1低劑量治療組(35mg/kg)
2.HPB-1中劑量治療組(115mg/kg)
3.HPB-1高劑量治療組(350mg/kg)
4.AZT治療組(100mg/kg)
5.SIVmac251感染對(duì)照組
實(shí)驗(yàn)方法
1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)用恒河猴，4.5-5.5kg，雌雄各半，共16只，購自中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所靈長類繁殖中心。用商品化膨化飼料飼養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)前經(jīng)體檢無異常，經(jīng)血清學(xué)間接免疫熒光(IFA)抗體檢查法檢查排除潛在的猴免疫缺陷病毒(SIV)，猴逆轉(zhuǎn)錄D型病毒(SRV)和猴T淋巴細(xì)胞性I型病毒(STLV-I)的感染。
2.感染毒株和劑量用美國Aaron Diamond艾滋病研究中心贈(zèng)與的SIVmac251病毒株，每只動(dòng)物用相當(dāng)于3MID100病毒劑量的病毒液1ml靜脈感染。
3實(shí)驗(yàn)治療方案HPB-1和AZT膠囊均由中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院，病毒研究所提供，(HPB-1原料為東北師大化學(xué)系提供)。動(dòng)物分HPB-1低劑量治療組、HPB-1中劑量治療組、HPB-1高劑量治療組、AZT陽性藥物治療和SIVmac251感染對(duì)照組，每組動(dòng)物3～4只，雌雄各半。病毒感染后30分鐘開始口服給藥，HPB-1低劑量組(每膠囊含35mg)每動(dòng)物每日一次，每次1粒，中劑量組(每膠囊含115mg)每動(dòng)物每日一次，一次1粒，高劑量組(每膠囊含350mg)每動(dòng)物每日給藥一次，每一次1粒，AZT陽性藥物對(duì)照組每動(dòng)物每日給藥一次，每次100mg，SIVmac251感染對(duì)照組不給藥治療，藥物治療程為連續(xù)不間斷給藥60天。
4.感染前后觀察感染前除一般體檢外，稱體重，采血(作感染前的各項(xiàng)指標(biāo)檢查)。感染和治療繼續(xù)做一般觀察和檢查，并按程序定時(shí)采血漿病毒滴度、血液中CD4+淋巴細(xì)胞數(shù)和抗體滴度。60天實(shí)驗(yàn)結(jié)束，處死動(dòng)物。
5.血漿病毒分離動(dòng)物感染SIVmac251后，選擇第7、11、14、21、28、42、60天采取血樣，肝素抗凝分離血漿，血漿分別從200μl開始以5倍遞減量稀釋于24孔板內(nèi)，以10％小牛血清RPMI-1640補(bǔ)至每孔1ml，然后加入105個(gè)SIVmac251敏感細(xì)胞株CEMx174細(xì)胞液0.6ml，置37℃，CO2孵箱，每3～4天觀察和細(xì)胞傳代一次。以接種最小的標(biāo)本仍然出現(xiàn)典型的細(xì)胞融合病變?yōu)闃?biāo)本的病毒滴度。標(biāo)本觀察3周判定病毒分離結(jié)果。
6.血液中CD4淋巴細(xì)胞數(shù)測定選擇動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前和感染SIVmac251后第14、28、42、60天采取血樣標(biāo)本，計(jì)算出血液中CD4+含淋巴細(xì)胞的總數(shù)。
7.抗SIVmac251病毒抗體測定選擇動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前和感染SIVmac251后第14、28、42、60天采取血樣標(biāo)本，測定血漿中抗SIVmac251病毒抗體的水平。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
1.血漿病毒分離感染對(duì)照組動(dòng)物從感染后7天開始4/4的動(dòng)物血漿中分離到病毒，2周左右病毒滴度達(dá)到高峰，以后病毒血癥水平逐漸降低，8周時(shí)仍有2/3的動(dòng)物存在低水平的病毒血癥(6至8周期間有1只動(dòng)物死亡)，這符合SIVmac251的感染特征；而HPB-1低劑量組、HPB-1中劑量組、HPB-1高劑量組、AZT治療組4組動(dòng)物的病毒血癥水平與感染對(duì)照組相比，均表現(xiàn)出了不同程度的抑制作用，主要表現(xiàn)在(1)在病毒感染后7天病毒血癥出現(xiàn)時(shí)，4組動(dòng)物病毒分離陽性率較感染對(duì)照組動(dòng)物低，分別為2/3、1/3、0/3、1/3；(2)在病毒感染后2周病毒血癥達(dá)到高峰時(shí)，4組動(dòng)物的病毒血癥平均水平明顯低于病毒感染對(duì)照組動(dòng)物，HPB-1高劑量組略高于AZT治療組的病毒繁殖抑制水平；(3)病毒感染后1周至6周期間，4個(gè)治療組動(dòng)物的各采樣點(diǎn)的病毒血癥平均水平，低于病毒感染對(duì)照組動(dòng)物相對(duì)應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)的病毒血癥平均水平。
2.血液中CD4+淋巴細(xì)胞數(shù)測定感染對(duì)照組動(dòng)物血液中CD4+淋巴細(xì)胞數(shù)在感染SIV病毒后至感染后4周期間有一個(gè)急劇的降低過程，4周以后逐漸穩(wěn)定在一低水平上；4個(gè)藥物治療組動(dòng)物血液中CD4+淋巴細(xì)胞數(shù)的變化規(guī)律與感染對(duì)照組動(dòng)物基本相似，稍不同的是4個(gè)藥物治療組動(dòng)物血液中CD4+淋巴細(xì)胞數(shù)與感染對(duì)照組動(dòng)物相比較在感染SIV病毒膈感染4周期間下降速度相對(duì)較慢，此結(jié)果表明HPB-1和AZT治療組與感染對(duì)照組相比由于病毒血癥平均水平較低，所以降低了SIV感染所造成的細(xì)胞免疫損害。
3抗SIVmac251病毒抗體的測定，感染對(duì)照組動(dòng)物感染后2周抗體開始出現(xiàn)并逐漸上升，于8周左右達(dá)到并維持在較高水平；HPB-1低劑量組、HPB-1中劑量組、HPB-1高劑量組、AZT治療組4組動(dòng)物的病毒特異抗體檢測情況基本與感染對(duì)照組動(dòng)物相同。
4.一般情況SIV病毒感染后兩周后起，5組動(dòng)物均有淺表淋巴結(jié)進(jìn)行性腫大，這是猴SIV感染的主要臨床表現(xiàn)之一，表明5組動(dòng)物在臨床上感染成功。一般精神和食欲尚可。HPB-1低劑量組、HPB-1中劑量組、HPB-1高劑量組、AZT治療組4組動(dòng)物未發(fā)生嚴(yán)重的感染并發(fā)癥和死亡。
以上結(jié)果表明HPB-1口服后，可明顯抑制病毒復(fù)制，其作用隨劑量的增加而增大，高者可達(dá)96.3％。HPB-1恒河猴體內(nèi)實(shí)驗(yàn)血漿病毒血癥動(dòng)態(tài)變化見圖1，HPB-1，AZT恒河猴體內(nèi)實(shí)驗(yàn)對(duì)SIV病毒抑制率的比較見圖4
三.作用靶點(diǎn)的研究
病毒生活周期包括病毒進(jìn)入細(xì)胞，逆轉(zhuǎn)錄酶，整合酶，轉(zhuǎn)錄，蛋白酶等階段也即是藥物作用的靶點(diǎn)。進(jìn)入細(xì)胞的階段，又包括病毒，CD4受體，CCR5輔助受體(M細(xì)胞)，CXCR4輔助受體(T細(xì)胞)幾個(gè)部位?！半u尾酒療法”是采用作用于逆轉(zhuǎn)錄酶的靶點(diǎn)藥物及作用于蛋白酶靶點(diǎn)的藥物聯(lián)合應(yīng)用，因而大大提高了有效率，和延長壽命，從而了解藥物作用的靶點(diǎn)十分重要。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用病毒基因重組的“單一生活周期”(single life cycle)模型，研究HPB-1作用的靶點(diǎn)。此模型中感染后2-6小時(shí)是病毒進(jìn)入細(xì)胞階段，10-14小時(shí)為逆轉(zhuǎn)錄階段，20小時(shí)以后是整合、轉(zhuǎn)錄、蛋白合成階段。藥物在何時(shí)間段產(chǎn)生作用，表明作用于何靶點(diǎn)。
1)HPB-1作用靶點(diǎn)分析
實(shí)驗(yàn)方法1)MAGI法實(shí)驗(yàn)用“單一生活周期”(single life cycle)的模型。用24孔板接種Hela-CD4+-LTR-X-Gel細(xì)胞0.4×105/孔，放置24小時(shí)，使之吸附，貼壁，第二天，吸去孔中上清，加入定量HIV(NL4)，不同時(shí)間(0，6，12，18，24，36小時(shí))于不同孔各加入100μl不同濃度的HPB-1藥液或陽性對(duì)照藥液，培養(yǎng)基對(duì)照(Mock)，37℃、CO2培養(yǎng)箱，三小時(shí)后再加入200μl相同藥液，37℃、CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48小時(shí)，收集上清以備檢測，各孔吸去上清加入固定液1毫升，再以K4[Fe(CN)6]、K3[Fe(CN)6]及x-gel染色，顯微鏡下藍(lán)色細(xì)胞表示帶有病毒基因。根據(jù)每孔藍(lán)色細(xì)胞數(shù)計(jì)算抑制率，
結(jié)果結(jié)果表明HPB-1主要作用于病毒進(jìn)入細(xì)胞階段(圖5)
2)HPB-1作用于病毒進(jìn)入細(xì)胞階段中輔助受體作用部位的分析
病毒進(jìn)入細(xì)胞與三個(gè)部位有關(guān)，即病毒的gp120蛋白，細(xì)胞膜上的CD4受體及輔助受體CCR5(嗜M細(xì)胞)及CXCR4(嗜T細(xì)胞)
實(shí)驗(yàn)方法
方法同上(MAGI test)但不同輔助受體所用細(xì)胞株及病毒則不同，CXCR4用的病毒株為NL4，細(xì)胞株為Hela-CD4-LTR-β-Galatosidase(嗜T)、CCR5用的病毒為YU2細(xì)胞株為293T(嗜M)，48小時(shí)后同法檢測結(jié)果。
結(jié)果對(duì)兩種輔助受體均有抑制作用(如下表)
結(jié)果HPB-1對(duì)輔助受體的作用對(duì)兩種輔助受體均有抑制作用，說明不一定對(duì)輔助受體本身有作用，而可能作用于CD4或病毒脫殼等，有待進(jìn)一步分析。
濃度(mg/mL) 輔助受體 細(xì)胞株、病毒 抑制率(％)
0.4 CCR5 293T、YU2 98.6
0.04 98.3
0.004 97.3
濃度(mg/mL) 輔助受體 細(xì)胞株、病毒 抑制率(％)
0.499.7
Hela-CD4-LTR-X-Gel、
0.04 CXC4 99.2
NL4
0.004 91.0
(二)急性毒性實(shí)驗(yàn)
將30只昆明系小白鼠，體重20±2g種，雌雄各半，隨機(jī)分成3組，每組10只(雌雄各半)，一次灌胃觀察一周后死亡情況，結(jié)果表明最大耐受劑量為1500mg/kg，絕對(duì)致死量為4000mg/kg。半數(shù)致死量LD50為2254mg/kg，LD50可信限范圍2425～2094mg/Kg。
下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步對(duì)本發(fā)明實(shí)質(zhì)內(nèi)容進(jìn)行說明
實(shí)施例1HPB-1的制備
二水合鎢酸鈉(600克，1.82mol)，磷酸二氫鈉(120克，0.86mol)溶在2000克蒸餾水中，滴加四氯化鈦(61克，0.32mol)，回餾20分鐘，過濾，向?yàn)V液中加入600克固體KCl得白色沉淀物。沉淀物用500克熱水重結(jié)晶，得到固體K7PTi2W10O40·5H2O66克，K7PTi2W10O40·5H2O66克溶于500克水，加入11克鹽酸羥胺攪拌，再加入11克氯化鑭，40～80℃攪拌2～8小時(shí)，幾天后析出無色晶體K4(H2O)4[K3.5La0.5(H2O)8ClPTi2W10O40]·NH2OH。分子結(jié)構(gòu)圖見附圖1。HPB-1生產(chǎn)流程圖見附圖2。
實(shí)施例2HPB-2的制備
按上述實(shí)施例1的方法制備K7PTi2W10O40·5H2O，K7PTi2W10O40·5H2O66克溶于500克水，加入9克水合肼攪拌，再加入12克氯化釹，40～80℃攪拌2-8小時(shí)。幾天后析出紫色晶體K4(H2O)4[K3.5Nd0.5(H2O)8ClPTi2W10O40]·NH2NH2(HPB-2)80g。
以上實(shí)施例1、2的制備方法可按配方的質(zhì)量比任意放大或縮小。
將所合成的HPB-1，HPB-2與賦形劑可重量比1∶3比例，制成膠囊。按其與賦形劑重量比1∶3比例，制成壓片。按常規(guī)注射液制法加注射用水，過濾，灌封滅菌制成注射液。


附圖1為HPB-1的分子結(jié)構(gòu)。
附圖2為HPB-1生產(chǎn)流程圖。
附圖3 HPB-1恒河猴體內(nèi)實(shí)驗(yàn)血漿病毒血癥動(dòng)態(tài)變化(TCID/mL)示意圖。
附圖4 HPB-1，AZT恒河猴體內(nèi)實(shí)驗(yàn)對(duì)SIV病毒抑制率的比較示意圖。
附圖5感染后加入HPB-1后的時(shí)間響應(yīng)示意圖。
權(quán)利要求
1.稀土雜多酸鹽(藍(lán))類抗艾滋病藥物，其特征是通式為Ax(H2O)x[AyLnz(H2O)2xClqXjTimMa12-mO40]·nOg，其中A為堿金屬，氨基酸陽離子，X為周期表中IIIA-VA族或d區(qū)過渡元素中的一種，M為Mo或W，Ln為La、Pr、Nd和Sm，Og為羥胺或肼。通常下，x＝1～6，y＝1～5，z＝0.5～1，q＝1，j＝1，m-1～3，n＝1～5，a為M的化合價(jià)，一般為+6或+5價(jià)。
2.如權(quán)利要求1所述稀土雜多酸鹽(藍(lán))類抗艾滋病藥物，其特征是所述的Ax(H2O)x[AyLnz(H2O)2xClqXjTimMa12-mO40]·nOg為K4(H2O)4[K3.5La0.5(H2O)8ClPTi2W10O40]·NH2OH或K4(H2O)4[K3.5Nd0.5(H2O)8ClPTi2W10O40]·NH2NH2。
(1).稀土雜多酸鹽(藍(lán))類抗艾滋病藥物的制備方法，其特征是將二水合鎢酸鈉(或鉬酸鈉)600克(1.82mol)、含IIIA-VA族或d區(qū)過渡元素的化合物0.86mol(例如磷酸二氫鈉、硅酸鈉等)溶解在2000克的蒸餾水中，滴加四氯化鈦61克(0.32mol)后，回餾，過濾，向?yàn)V液中加入一定量(8.1mol)堿金屬鹽或氨基酸鹽得白色沉淀物，沉淀物用500克熱水重結(jié)晶，得到一定質(zhì)量的固體AxXjTimMa12-mO40·nH2O。其中A為堿金屬，氨基酸陽離子，X為周期表中IIIA-VA族，或d區(qū)過渡元素中的一種，M＝W或Mo，x＝1～6，j＝1，m＝1～3，n＝3-5.一定質(zhì)量的AxXjTimM12-mO40·nH2O溶于500克水，加入一定量還原劑攪拌，再加入一定量稀土鹽，在40～80℃下攪拌2～8小時(shí)，幾天后析出固體Ax(H2O)x[AyLnz(H2O)2xClqXjTimMa12-mO40]·nOg。
(2).如權(quán)利要求(1)所述的稀土雜多酸鹽(藍(lán))類抗艾滋病藥物的制備方法，其特征是將二水合鎢酸鈉(600克，1.82mol)，磷酸二氫鈉(120克，0.86mol)溶在2000克蒸餾水中，滴加四氯化鈦(61克，0.32mol)，回餾20分鐘，過濾，向?yàn)V液中加入600克固體KCl得白色沉淀物。沉淀物用500克熱水重結(jié)晶，得到固體K7PTi2W10O40·5H2O66克，K7PTi2W10O40·5H2O(66克)溶于500克水，加入11克鹽酸羥胺攪拌，再加入11克氯化鑭，40～80℃攪拌2～8小時(shí)，幾天后析出固體K4(H2O)4[K3.5La0.5(H2O)8ClPTi2W10O40]·NH2OH。
3.如權(quán)利要求(1)所述的稀土雜多酸鹽(藍(lán))類抗艾滋病藥物的制備方法，其特征是將二水合鎢酸鈉(600克，1.82mol)，磷酸二氫鈉(120克，0.86mol)溶在2000克蒸餾水中，滴加四氯化鈦(61克，0.32mol)，回餾20分鐘，過濾，向?yàn)V液中加入600克固體KCl得白色沉淀物，沉淀物用500克熱水重結(jié)晶，得到固體K7PTi2W10O40·5H2O66克，K7PTi2W10O40·5H2O66克溶于500克水，加入9克水合肼攪拌，再加入11克氯化釹，40～80℃攪拌2～8小時(shí)，幾天后析出固體K4(H2O)4[K3.5Nd0.5(H2O)8ClPTi2W10O40]·NH2NH2。
全文摘要
本發(fā)明屬于化學(xué)合成藥物領(lǐng)域，發(fā)明了一類稀土雜多酸鹽(藍(lán))類抗艾滋病的藥物，其通式為Ax(H2O)x[AyLnz(H2O)2xClqXjTimMa12－mO40]·nOg。特別是K4(H2O)4[K3.5La0.5(H2O)8ClPTi2W10O40]·NH2OH(代號(hào)HPB－1)，該藥物價(jià)格低廉、毒副作用低，對(duì)HIV感染的細(xì)胞，SIV(急性猴免疫缺陷病毒)有強(qiáng)烈的抑制病毒復(fù)制的作用。
文檔編號(hào)A61P31/00GK1502339SQ0212844
公開日2004年6月9日 申請(qǐng)日期2002年7月31日 優(yōu)先權(quán)日2002年7月31日
發(fā)明者王恩波, 李澤琳, 韓正波, 曾毅, 劉術(shù)俠 申請(qǐng)人:東北師范大學(xué), 病毒病預(yù)防控制所