專利名稱：蒲黃總黃酮提取物及其制備工藝和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種中藥蒲黃的總黃酮提取物及其制備工藝和在藥物和保健食品方面的應(yīng)用。
本發(fā)明的另一個目的在于提供一種蒲黃總黃酮提取物的降解產(chǎn)物。
本發(fā)明的再一個目的在于提供一種蒲黃總黃酮提取物與某些堿或金屬鹽形成的金屬鹽類衍生物。
本發(fā)明的再一個目的在于提供一種蒲黃總黃酮提取物與某些金屬離子形成的金屬絡(luò)合物。
本發(fā)明的再一個目的在于提供蒲黃總黃酮及其某些降解產(chǎn)物、某些金屬鹽類衍生物和某些金屬絡(luò)合物的用途。
本發(fā)明提出的蒲黃總黃酮提取物，是從中藥蒲黃中提取的含有多種黃酮類活性成份的組合，其結(jié)構(gòu)式如下 其中1.R1＝R2＝H；2.R1＝H，R2＝neohesperidoside；3.R1＝H，R2＝(2G-rham)-rutinoside4.R1＝rhamnose，R2＝rutinoside 其中5.R1＝R2＝H；6.R1＝H，R2＝neohesperidoside；7.R1＝H，R2＝(2G-rham)-rutinoside8.R1＝rhamnoside，R2＝rutinoside 其中9.R1＝R2＝H；10.R1＝H，R2＝neohesperidoside；11.R1＝H，R2＝rutinoside12.R1＝H，R2＝(2G-rham)-rutinoside13.R1＝rhamnoside，R2＝rutinoside上述結(jié)構(gòu)式中各編號的化學成份名稱如下1.山柰酚；2.山柰酚-3-O-新橙皮糖甙；3.山柰酚-3-O-(2G-α-L-鼠李糖基)-蕓香糖甙；4.山柰酚-3-蕓香糖-7-鼠李糖甙；5.槲皮素；6.槲皮素-3-O-新橙皮糖甙；7.槲皮素-3-O-(2G-α-L-鼠李糖基)-蕓香糖甙；8.槲皮素-3-蕓香糖-7-鼠李糖甙；9.異鼠李素；10.異鼠李素-3-O-新橙皮糖甙；11.異鼠李素-3-O-蕓香糖甙；12.異鼠李素-3-O-(2G-α-L-鼠李糖基)-蕓香糖甙；13.異鼠李素-3-蕓香糖-7-鼠李糖甙。
本發(fā)明所述原料物蒲黃，來源于香蒲科香蒲屬的任一一種植物。有關(guān)香蒲科及香蒲屬的科學定義和范疇，參見《中國高等植物科屬詞典》(修訂版)第506頁(候?qū)捳丫?，北京科學出版社，1984.12)。作為提取蒲黃總黃酮的原材料，可以是這些植物的花粉、花穗、果實、莖、葉、地下根莖及根等任一部位或全部植株，其中優(yōu)選的部位是這些植物的成熟花粉。并且所敘述的蒲黃花粉不僅包括未經(jīng)任何炮制的生花粉，即俗稱“生蒲黃”，也包括其各種炮制品，如“炒蒲黃”，“蒲黃炭”，“酒制蒲黃”以及“醋制蒲黃”等。
本發(fā)明所述的蒲黃總黃酮提取物，是指從上述任一一種植物的任何部位提取的，包含有多種黃酮類活性成分的組合物，其中最優(yōu)選的是以上述任一植物的成熟花粉中提取制備的，含多種黃酮類活性成分的組合物。這些黃酮類活性成分，主要包括一些以異鼠李素、槲皮素、山柰酚以及以其為母核的糖甙類衍生物。
作為蒲黃總黃酮提取物，其中各種黃酮類成分百分含量的總和，應(yīng)為5～100％(w/w)，其中優(yōu)選的是50～100％(w/w)，最優(yōu)選的是95～100％(w/w)。
本發(fā)明所述的蒲黃總黃酮提取物，還包含因長時間加熱、或在酸、堿及酶的作用下發(fā)生部分降解所形成的降解產(chǎn)物，如異鼠李素、山柰酚及槲皮素的3-O-葡萄糖甙、3-O-蕓香糖甙、7-O-鼠李糖甙等。這里所指的長時間加熱，是指在40～100℃下加熱1小時以上。所用的酸，可以是無機酸，如鹽酸、硫酸、磷酸、硝酸、亞硝酸、亞硫酸、碳酸(或CO2水溶液)、氫氟酸等，也可以是有機酸，如甲酸、乙酸、冰醋酸、三氯醋酸、醋酐、枸櫞酸、草酸等。所用堿可以是氫氧化鉀、氫氧化鈉、碳酸氫鈉、碳酸氫二鈉、吡啶、氨水、二乙胺、三乙胺等。所用的酶如轉(zhuǎn)化糖酶、麥芽糖酶、苦杏仁酶、纖維素酶、蝸牛酶、橙皮甙酶、柑桔甙酶等各種糖甙鍵水解酶。以上酸、堿和酶的降解反應(yīng)一般均在加熱條件下進行。
本發(fā)明所述的蒲黃總黃酮提取物，可以與某些堿或鈉鹽、鉀鹽等金屬鹽，如氫氧化鉀、氫氧化鈉、碳酸氫鈉、碳酸氫二鈉、醋酸鈉等，形成金屬鹽類衍生物。這些衍生物具有與上述蒲黃總黃酮提取物相同或相近的藥理活性和用途。將所述提取物與0.01～5N的堿或鹽溶液混合后適當加熱即可制備成相應(yīng)的金屬鹽衍生物。
本發(fā)明所述的蒲黃總黃酮提取物，還可以與鐵、鋅、鎂、鉻、鋁、銅、鈣、鈷、鋇、鍶、鋯等金屬離子形成金屬絡(luò)合物。這些金屬絡(luò)合物不僅具有與上述蒲黃總黃酮相同或相近的藥理活性和用途，而且具有某些新的用途，如鐵絡(luò)合物可以用作補鐵劑；鋅絡(luò)合物可用作補鋅劑；鉻絡(luò)合物可用于防治糖尿病等。在所述提取物的水或醇溶液中加入0.01～5N的金屬鹽溶液，混合后適當加熱即可制備成相應(yīng)的金屬絡(luò)合物。
本發(fā)明中，在上述蒲黃總黃酮提取物所涵蓋的各種黃酮類活性成分之中，最主要的是異鼠李素-3-O-(2G-α-L-鼠李糖基)-蕓香糖甙(俗稱香蒲新甙)，以及異鼠李素-3-O-新橙皮糖甙二種成分。作為蒲黃總黃酮提取物，其中異鼠李素-3-O-(2G-α-L-鼠李糖基)-蕓香糖甙和(或)異鼠李素-3-O-新橙皮糖甙占全部總黃酮含量的20～100％(w/w)，優(yōu)選結(jié)果為50～100％(w/w)，最優(yōu)選結(jié)果為95～100％(w/w)。
本發(fā)明還提出了所述蒲黃總黃酮提取物的制備工藝，它可采用以下任一一種方法，或這些方法的任意組合進行制備(1)溶劑萃取法；(2)大孔吸附樹脂法；(3)鉛鹽沉淀法；(4)超臨界CO2萃取法；(5)柱層析法，(6)液—液逆流分配層析法。其中優(yōu)選方法為大孔吸附樹脂法和(或)柱層析法。
在使用這些方法進行制備時，一般均包括以下幾個步驟(1)提取所用溶劑可以是水或任一一種醇類、酮類及酯類溶劑，或由這些溶劑按一定比例配成的混合溶劑，或由這些溶劑與酸、堿配成的酸性或堿性溶劑，其中優(yōu)選結(jié)果為70％的乙醇。提取方法可以是加熱回流、冷浸滲漉，超聲提取、微波提取或高壓提取等。
(2)過濾包括離心、抽濾、壓濾、超濾等方法，使用或不使用以下任一種澄清劑或其組合醇沉劑；明膠；活性炭；硅藻土高嶺土；各種樹脂；聚乙二醇；聚乙三醇；殼聚糖以及天然澄清劑成品，如101果汁澄清劑、ZTC1+1天然澄清劑等。
(3)濃縮包括常壓或減壓條件下的薄膜蒸發(fā)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)及煎煮濃縮等。
(4)干燥包括真空干燥、噴霧干燥、冷凍干燥等方法；當采用溶劑萃取法進行制備時，一般是先將提取物混懸于水中，接著用低極性的酯類、烷類或醚類溶劑(如石油醚、乙醚、己烷、乙酸乙酯、汽油等)萃取除去脂溶性雜質(zhì)，然后用合適極性的溶劑，如正丁醇、異丙醇、氯仿等，或這些溶劑的組合物，萃取獲得其中的總黃酮成分，其中最優(yōu)選的萃取溶劑是正丁醇。
當采用大孔吸附樹脂法進行制備時，所用的大孔吸附樹脂可以是非極性、弱極性，中等極性，弱堿性和弱酸性任何一種類型，這些樹脂的代號由于生產(chǎn)廠家不同而不同，如D101(天津農(nóng)藥廠)、DA20，HZ-802，HZ-806，1300，1400(上海華震科貿(mào)公司)，860021，DM130(山東魯抗醫(yī)藥集團)等，其中優(yōu)選的是非極性大孔吸附樹脂，如D101、HZ-802、DM130等。所用的洗脫劑是水及含水的乙醇、甲醇、丙酮等，其中優(yōu)選的是0～100％的乙醇。
當采用鉛鹽沉淀法進行制備時，所用的鉛鹽試劑是醋酸鉛或堿式醋酸鉛，所有的脫鹽劑為H2S，磷酸鹽及硫酸鹽等。
當采用超臨界CO2萃取法進行制備時，可以對蒲黃原材料直接實施萃取，也可以對上述任一方法和步驟所獲的產(chǎn)品實施萃取。萃取時可以使用或不使用如下任一種類溶劑及其組合物水、醇類、酮類及酯類溶劑。
當采用柱層析法進行制備時，其處理的對象可以是上述提取步驟所獲得的產(chǎn)物，也可以是經(jīng)上述溶劑萃取法、大孔吸附樹脂法、鉛鹽沉淀法或超臨界CO2萃取法初步純化后的產(chǎn)物。所用的固定相可以是硅膠、聚酰胺、氧化鋁、葡聚糖(Sephadex系列或Sephadex-LH20系列)、C-8、C-18、活性炭、纖維素等，所用的洗脫液因固定相的不同而不同，一般是由水、甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯等組成的混合溶劑。其中優(yōu)選的方法是硅膠和Sephadex-LH20。
當采用液—液逆流萃取法進行制備時，其處理的對象可以是上述提取步驟所或的產(chǎn)物，也可以是經(jīng)上述溶劑萃取法、大孔吸附樹脂法、鉛鹽沉淀法或超臨界CO2萃取法初步純化后的產(chǎn)物。一般是先將提取物混懸于水中，接著用低極性的酯類、烷類或醚類溶劑(如石油醚、乙醚、己烷、乙酸乙酯、汽油等)萃取除去脂溶性雜質(zhì)，然后用合適極性的溶劑，如正丁醇、異丙醇、氯仿等，或這些溶劑的組合物，萃取獲得其中的總黃酮成分，其中最優(yōu)選的萃取溶劑是正丁醇。
本發(fā)明對上述蒲黃總黃酮提取物進行動物試驗，表明它對心血管疾病、出血癥等具有明顯的治療作用。具體試驗結(jié)果如下試驗例1急性毒性試驗給大白鼠灌胃蒲黃總黃酮提取物，測定大鼠急性毒性LD50(g/kg)，用BLISS法計算，為3.285g/kg。試驗例2降血脂及抗動脈粥樣硬化作用選體重2.0±0.2kg白色家兔，雌雄不拘，隨機分成5組，每組10只。各組動物在基本飼料基礎(chǔ)上，每天灌胃膽固醇0.2g/kg(加豬油2ml溶入)，一日一次。小劑量組以蒲黃總黃酮提取物10mg/kg灌胃，大劑量組以蒲黃總黃酮提取物30mg/kg灌胃，蒲黃總黃酮鈉鹽組和鋁絡(luò)合物組均以30mg/kg灌胃，對照組以等體積的生理鹽水灌胃，每日給藥二次，連續(xù)8周。于造型后的第2、4、6、8周由耳靜脈采血，以3000rpm離心，分離血清備測。血清總膽固醇及甘油三酯的含量測定的方法均參見文獻(陳奇主編.中藥藥理研究方法學，北京人民衛(wèi)生出版社，1993，第620頁及第624頁)，測定結(jié)果如表1和表2所示。
表1.蒲黃總黃酮提取物對血清總膽固醇含量的影響


*P＞0.05，**P＜0.05，***P＜0.01另于8周后將動物處死，取出主動脈(自心腦至骼動脈分叉處)，剔除動脈外膜的脂肪組織。在背側(cè)面縱行切開，展鋪于方盤內(nèi)，以0.5ml/ml的福爾馬林固定24小時，然后用蘇丹III染色30分鐘。染色后乳白色斑塊著色成金紅色。按照文獻(同上，第626頁)所述的方法進行主動脈斑塊的分級和斑面積的測算，從而確定斑塊指數(shù)及抑制百分率，結(jié)果如表3所示。
表2.蒲黃總黃酮提取物對血清甘油三酯的影響

*P＞0.05，**P＜0.05，***P＜0.01
表3.蒲黃總黃酮提取物對家兔動脈粥樣硬化的影響

*P＞0.05，**P＜0.05，***P＜0.01試驗例3對家兔離體心臟冠脈流量和心跳曲線的影響蒲黃總黃酮提取物制成1mg/ml的水溶液，調(diào)pH值至7.0，離心除去混濁物后備用。蒲黃總黃酮鈉鹽衍生物及鋁絡(luò)合物均制成1mg/ml的水溶液。對照組復方丹參注射液(每支2ml，每ml相當于生藥丹參和降香各1g，上海第九制藥廠產(chǎn)品)。
實驗分成蒲黃總黃酮低劑量組(0.5ml)、高劑量組(1.5ml)、鈉鹽衍生物組(1.5ml)、鋁絡(luò)合物(1.5ml)和復方丹參注射液對照組(1.5ml)，每組10只家兔，按Langendoff氏法制備離體心臟，連于灌流裝置，心跳平穩(wěn)后收集測量30s冠脈流量，同時描記心跳曲線，作為給藥前的基礎(chǔ)值。然后各組分別從管上端注入蒲黃總黃酮水溶液0.5ml、1.5ml、鈉鹽衍生物水溶液1.5ml、鋁絡(luò)合物水溶液1.5ml和復方丹參注射液1.5ml，給藥5s后，立即收集30s內(nèi)冠脈流量，同時描記心跳曲線，比較給藥前后冠脈流量和心跳曲線的振幅評價藥物的作用。實驗結(jié)果分別如表4和表5。
表4.蒲黃總黃酮提取物對離體家兔心冠脈流量的影響

**P＜0.05，***P＜0.01
表5.蒲黃總黃酮提取物對離體家兔心收縮曲線振幅的影響

*P＞0.05，**P＜0.05，***P＜0.01試驗例4對腦垂體后葉素致大鼠急性心肌缺血的影響所用試驗藥物如試驗例3。Wistar大鼠48只，雌雄各半，隨機分成6組。股靜脈注射0.5ml/kg腦垂體后葉素，描記15″、30″、45″、1′、1′30″、2′30″、3′、4′、5′II導心電圖，無心肌缺血者棄去。待大鼠心電圖恢復正常后，于股靜脈注入藥物，5′后再同法注入腦垂體后葉素，對照組給予等體積生理鹽水，同上法立即描記心電圖，觀察藥物對ST段上移和T波升高最大百分率。結(jié)果如表6。表6.蒲黃總黃酮提取物對腦垂體后葉素致大鼠急性心肌缺血心電圖的影響(±SD)

n＝8，*P＞0.05，**P＜0.05試驗例5對ADP誘導的家兔血小板聚集的影響試驗所用藥物如試驗例3。家兔50只，隨機分為5組生理鹽水組、蒲黃總黃酮提取物低劑量組、高劑量組、鈉鹽衍生物組及鋁絡(luò)合物組，每組10只。給藥組耳緣靜脈注射給藥，對照組注射等量生理鹽水，給藥后4h耳緣靜脈取血，3.8％檸檬酸鈉1∶9抗凝，離心制備富含血小板血漿(PRP，1000r/min，7min)及貧血小板血漿(PPP，4000r/min，10min)。每次實驗前將血小板聚集儀調(diào)至零點，并用PRP調(diào)至記錄紙10格處，PPP調(diào)至記錄紙80格處(記錄紙紙格共100格)。取PRP 200μl于比濁管中，37℃溫浴5min，加入5μmol的ADP 20μl，記錄5min內(nèi)的最大抑制率，并計算聚集抑制率。抑制率＝[(對照組最大聚集率—給藥組最大聚集率)/對照組最大聚集率]×100％。實驗結(jié)果見表7。
表7.蒲黃總黃酮提取物對ADP誘導的家兔血小板聚集的影響

與對照組比較，**P＜0.01試驗例6對電刺激致家兔頸動脈血栓的影響取家兔60只，隨機分為6組，生理鹽水組、尿激酶組、蒲黃總黃酮低劑量組、高劑量組，鈉鹽衍生物組及鋁絡(luò)合物組，每組10只。家兔分別按體重耳緣靜脈注射蒲黃總黃酮提取物低(1.0mg/kg)、高劑量(3.0mg/kg)、鈉鹽衍生物(3.0mg/kg)、鋁絡(luò)合物(3.0mg/kg)、尿激酶和生理鹽水，給藥后4h各組動物分別耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉麻醉，背部固定，頸部正中切口，分離右頸總動脈1.5cm長，用一塊小塑料布遮蓋傷口附近的組織，然后用2根不銹鋼電極將頸總動脈輕輕挑起，以1.5mA直流電刺激，以一半導體點式溫度計固定接觸動脈頭端，連續(xù)測量動脈表面溫度，記錄從開始電流刺激到溫度突降所需時間(occlusion time OT)，結(jié)果見表8。
表8.蒲黃總黃酮提取物對家兔頸動脈血栓的作用

*P＜0.05，**P＜0.01試驗例7對小鼠出、凝血時間的影響小鼠隨機分為空白對照組(ig等體積蒸餾水)；蒲黃總黃酮提取物低劑量組、高劑量組，鈉鹽衍生物組、鋁絡(luò)合物組及云南白藥組，連續(xù)灌胃2周，于末次給藥30min后玻璃法測定小鼠凝血時間。次日用剪尾法測定出血時間，結(jié)果見表9。
表9.蒲黃總黃酮提取物對小鼠出凝血時間的影響

*P＞0.05，**P＜0.05，***P＜0.01本發(fā)明還提出所述蒲黃總黃酮提取物的用途，它可以單獨用于制備藥物和功能性保健食品，也可以與其它任何中西藥物或食物，尤其是與某些具有活血化瘀和(或)保護心腦血管疾病的中藥配伍，用于制備藥物和功能性保健食品。
單獨由本發(fā)明的提取物制備的藥物和功能性保健食品，或由該提取物與其它中西藥物或食物組成的復方藥物和功能性保健食品，均具有降血脂、抗動脈粥樣硬化、增加冠脈流量、提高心腦組織對缺氧缺血的耐受性、抗血小板凝集、抗血栓、止血等藥理活性，可用于(1)預(yù)防和治療心腦血管疾病，如高血脂癥、動脈粥樣硬化、冠心病、心肌梗塞、腦血栓，腦中風及腦中風后遺癥等；(2)預(yù)防和治療各種血瘀所致的胸痛、胃脘疼痛、跌打損傷，婦女產(chǎn)后瘀痛及痛經(jīng)等癥；(3)用于預(yù)防和治療各種出血病癥，如咯血、衄血、吐血、便血、尿血、崩漏、皮下出血、紫癜及創(chuàng)傷性出血等。
當該提取物，或包含該提取物的藥物和食物組合，用于上述醫(yī)療和保健目的時，可以采用本專業(yè)人員所熟知的方法和技術(shù)，直接和添加必要的輔料，制成膠囊劑、片劑、注射劑、顆粒劑、口服液、糖漿、藥膏、酒劑、飲料、果汁、速溶茶、糖果等多種制劑成品。當本發(fā)明的提取物被制成片劑時，它含有的賦型劑有稀釋劑，如淀粉、糊精、乳糖等；潤濕劑或粘合劑，如水、乙醇、淀粉漿、糊精、明膠漿、低取代羥丙基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇等；崩解劑，如干燥淀粉、泡騰崩解劑、表面活性劑等；潤滑劑，如滑石粉、硬脂酸鎂、液體石蠟、聚乙二醇6000或4000等。當本發(fā)明提取物被制成膠囊劑時，它含有的賦型劑有稀釋劑，如淀粉、糊精、乳糖、氧化鎂、碳酸鎂等；潤濕劑或粘合劑，如水、乙醇、淀粉漿、糊精漿、明膠漿、低取代羥丙基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇等；崩解劑，如干燥淀粉、泡騰崩解劑、表面活性劑等；并選用明膠硬膠囊殼或軟膠囊殼。當本發(fā)明藥物組合物被制成注射劑時，它含有的賦型劑有增溶劑，如吐溫-80、甘油等；混懸劑，如羥甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纖維素等；抗氧化劑，如亞硫酸鈉、焦亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉等滲透壓調(diào)節(jié)劑，如氯化鈉或葡萄糖等；減輕疼痛的附加劑，如苯甲醇、鹽酸普魯卡因等。當本發(fā)明藥物組合物被制成糖漿劑或飲料時，它含有的賦型劑有蔗糖水溶液、矯味劑；助懸劑，如羥甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纖維素等；防腐劑，如尼伯金乙酯或尼伯金甲酯、丙二醇、苯甲酸、山梨醇等。
權(quán)利要求
1.一種蒲黃總黃酮提取物，其特征在于，該提取物由中藥蒲黃中提取獲得，并含有以下黃酮類成分(1)異鼠李素；(2)異鼠李素-3-O-新橙皮糖甙；(3)異鼠李素-3-O-蕓香糖甙；(4)異鼠李素-3-O-(2G-α-L-鼠李糖基)-蕓香糖甙；(5)異鼠李素-3-蕓香糖-7-鼠李糖甙。(6)山柰酚；(7)山柰酚-3-O-新橙皮糖甙；(8)山柰酚-3-O-(2G-α-L-鼠李糖基)-蕓香糖甙；(9)山柰酚-3-蕓香糖-7-鼠李糖甙；(10)槲皮素；(11)槲皮素-3-O-新橙皮糖甙；(12)槲皮素-3-O-(2G-α-L-鼠李糖基)-蕓香糖甙；(13)槲皮素-3-蕓香糖-7-鼠李糖甙；
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的總黃酮提取物，其特征在于蒲黃為香蒲科香蒲屬任一一種植物的全部植株或其任何部位花粉、花序、莖、葉、果實、根及根莖，其中優(yōu)選的是成熟花粉。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的總黃酮提取物，其特征在于蒲黃包括未經(jīng)炮制的生蒲黃，也包括炒蒲黃、蒲黃炭、酒制蒲黃、醋制蒲黃炮制品。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的總黃酮提取物，其特征在于上述各黃酮類成分的含量總和為5-100％(w/w)，較優(yōu)的含量為50-100％(w/w)，最優(yōu)的含量為95-100％(w/w)。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的總黃酮提取物，其特征在于各黃酮類成份中異鼠李素-3-O-(2G-α-L-鼠李糖基)-蕓香糖甙和/或異鼠李素-3-O-新橙皮糖甙的含量占黃酮類成分含量的20-100％(w/w)，較優(yōu)的含量為50-100％(w/w)，最優(yōu)的含量為95-100％(w/w)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的總黃酮提取物，其特征在于上述黃酮類成分，還包括因加熱或在酸、堿及酶的作用下發(fā)生降解所形成的降解產(chǎn)物。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的總黃酮提取物，其特征在于上述黃酮類成分，還包括其與鈉鹽、鉀鹽形成的金屬鹽衍生物。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的總黃酮提取物，其特征在于上述黃酮類成分，也包括其與鋅、鎂、鉻、鐵、鋁、銅、鈣、鈷、鋇、鍶、鋯金屬離子形成的金屬絡(luò)合物。
9.一種如權(quán)利要求1～8所述總黃酮提取物的提取方法，其特征在于，采用以下任一方法，或這些方法的任意組合(1)溶劑萃取法，(2)大孔吸附樹脂法，(3)鉛鹽沉淀法，(4)超臨界CO2萃取法，(5)柱層析法，(6)液—液逆流分配層析法，其中優(yōu)選方法為大孔吸附樹脂法和/或柱層析法。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的提取方法，其特征在于，在使用這些方法進行制備時，包括以下幾個步驟(1)提取所用溶劑可以是水或任一一種醇類、酮類及酯類溶劑，或由這些溶劑按一定比例配成的混合溶劑，或由這些溶劑與酸、堿配成的酸性或堿性溶劑，其中優(yōu)選結(jié)果為70％的乙醇，提取方法可以是加熱回流、冷浸滲漉、超聲提取、微波提取或高壓提取等；(2)過濾包括離心、抽濾、壓濾、超濾幾個步驟，使用或不使用以下任一種澄清劑或其組合醇沉劑、明膠、活性炭、硅藻土、高嶺土、各種樹脂、聚乙二醇、聚乙三醇、殼聚糖以及天然澄清劑成品；(3)濃縮包括常壓或減壓條件下的薄膜蒸發(fā)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)及煎煮濃縮等；(4)干燥包括真空干燥、噴霧干燥、冷凍干燥等方法。
11.根據(jù)權(quán)利要求9所述的提取方法，其特征在于，當采用溶劑萃取法時，是先將提取物混懸于水中，接著用低極性的酯類、烷類或醚類溶劑萃取除去脂溶性雜質(zhì)，然后用合適極性的溶劑正丁醇、異丙醇、氯仿，或這些溶劑的組合物，萃取獲得其中的總黃酮成分。
12.根據(jù)權(quán)利要求9所述的提取方法，其特征在于，當采用大孔吸附樹脂法時，所用的大孔吸附樹脂可以是非極性、弱極性，中等極性，弱堿性和弱酸性任何一種類型，其中優(yōu)選的是非極性大孔吸附樹脂，所用的洗脫劑是水及含水的乙醇、甲醇、丙酮，其中優(yōu)選的是0～100％的乙醇。
13.根據(jù)權(quán)利要求9所述的提取方法，其特征在于，當采用鉛鹽沉淀法時，所用的鉛鹽試劑是醋酸鉛或堿式醋酸鉛，所有的脫鹽劑為H2S、磷酸鹽及硫酸鹽。
14.根據(jù)權(quán)利要求9所述的提取方法，其特征在于，當采用柱層析法時，其處理的對象可以是上述提取步驟所獲得的產(chǎn)物，也可以是經(jīng)上述溶劑萃取法、大孔吸附樹脂法、鉛鹽沉淀法或超臨界CO2萃取法初步純化后的產(chǎn)物，所用的固定相可以是硅膠、聚酰胺、氧化鋁、葡聚糖、C-8、C-18、活性炭、纖維素；所用的洗脫液是由水、甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯組成的混合溶劑。
15.根據(jù)權(quán)利要求9所述的提取方法，其特征在于，當采用液—液逆流萃取法時，其處理的對象可以是上述提取步驟所獲得的產(chǎn)物，也可以是經(jīng)上述溶劑萃取法、大孔吸附樹脂法、鉛鹽沉淀法或超臨界CO2萃取法初步純化后的產(chǎn)物，具體是先將提取物混懸于水中，接著用低極性的酯類、烷類或醚類溶劑萃取除去脂溶性雜質(zhì)，然后用合適極性的溶劑正丁醇、異丙醇、氯仿，或這些溶劑的組合物，萃取獲得其中的總黃酮成分，其中優(yōu)選的萃取溶劑是正丁醇。
16.一種如權(quán)利要求1、6、7、8所述的提取物的應(yīng)用，其特征在于，該提取物可以單獨或與其它任何中西藥物或食物配伍，用于制備藥物和功能性保健食品。
17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的提取物的應(yīng)用，其特征在于，所說的藥物和保健食品主要用于預(yù)防和治療心腦血管疾病。
18.根據(jù)權(quán)利要求16所述的提取物的應(yīng)用，其特征在于，所說的藥物和保健食品還可用于預(yù)防和治療各種血瘀所致的胸痛、胃脘疼痛、跌打損傷，婦女產(chǎn)后瘀痛及痛經(jīng)病癥。
19.根據(jù)權(quán)利要求16所述的提取物的應(yīng)用，其特征在于，所說的藥物和保健食品還可用于預(yù)防和治療各種出血病癥。
20.根據(jù)權(quán)利要求16所述的提取物的應(yīng)用，其特征在于，該提取物或包含該提取物的藥物和食物組合，可以制成膠囊劑、片劑、注射劑、顆粒劑、口服液、糖漿、藥膏、酒劑、沖劑及飲料。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從中藥蒲黃中提取的總黃酮活性組份，該提取物主要包括一些以異鼠李素、槲皮素、山柰酚以及以其為母核的糖甙類衍生物。此外，還包括這些組份的降解產(chǎn)物，以及與鉀鹽、鈉鹽等形成的金屬鹽衍生物，與某些金屬離子形成的金屬絡(luò)合物等。該提取物可用溶劑萃取法等多種方法制備獲得。該提取物具有降血脂、抗動脈粥樣硬化、提高心腦組織對缺氧缺血的耐受性、抗血小板凝集、抗血栓、止血等藥理作用，可用于預(yù)防和治療心腦血管疾病、各種血瘀所致的胸痛、跌打損傷、婦女產(chǎn)后瘀痛等病癥以及各種出血病癥等。
文檔編號A61K36/88GK1468859SQ0213611
公開日2004年1月21日 申請日期2002年7月19日 優(yōu)先權(quán)日2002年7月19日
發(fā)明者周銅水 申請人:復旦大學