專利名稱：解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗血小板聚集的藥物組合物及其制備的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗血小板聚集的藥物組合物及其制備。
具體而言，本發(fā)明涉及一種新的解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗血小板聚集的藥物組合物，含有1)阿司匹林或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽；和2)川芎嗪或其藥學(xué)上可接受的鹽。
作為活性成分的阿司匹林以其游離形式或藥學(xué)上可接受的鹽、酯或酯的鹽形式存在；川芎嗪以其游離形式或藥學(xué)上可接受的鹽形式存在。通過該組合物的使用，阿司匹林及川芎嗪發(fā)揮協(xié)同作用，在保證療效的前提下，降低了阿司匹林的副作用，比如胃腸道刺激的副作用。
背景技術(shù)：
藥物是用于治療、預(yù)防疾病的特殊的物質(zhì)。一般情況下，要求藥品安全、有效、穩(wěn)定可控。當(dāng)然也有例外，比如抗癌藥，它安全性的要求就比其它藥物低。
藥品的有效性指的是藥品要有療效。此外藥品還要安全，即毒性或副作用小。尤其是某些需要長期甚至是終生治療的疾病，更需要高效低毒的藥品。高效意味著治療效果好。低毒就保證了在長期使用藥品的情況下，不會(huì)因?yàn)樗幤范a(chǎn)生另一種對(duì)身體有不良作用的癥狀或疾病。某些藥物即使不長期使用，但由于需要大劑量使用，也會(huì)對(duì)身體產(chǎn)生不希望的毒副反應(yīng)。有些藥物即使單次用量小，但長期使用或頻繁給藥，由于積儲(chǔ)、耐藥等原因，也會(huì)有不良的副作用。
解熱鎮(zhèn)痛抗炎藥(antipyretic analgesic andanti-inflammatory drugs)也稱為非甾體抗炎藥(non-steroidalanti-inflammatory，NSAIDs)是一類具有解熱、鎮(zhèn)痛作用的藥物，該類藥物絕大多數(shù)兼具有抗炎和抗風(fēng)濕作用。抑制花生四烯酸代謝過程中的環(huán)氧酶(cycloxygenase，COX)，使前列腺素(PG)合成減少，是該類藥物共同的作用機(jī)制。參見文獻(xiàn)李端主編，藥理學(xué)，第四版，150頁，1999.11，人民衛(wèi)生出版社。
眾所周知，阿司匹林(aspirin，式I化合物)屬于非甾體抗炎藥。它的化學(xué)名為2-乙酰氧基苯甲酸(2-Acetoxy benzozic acid)，又稱乙酰水楊酸，阿斯匹林。
式I化合物經(jīng)過100年來的臨床應(yīng)用，證明阿司匹林為一有效的抗炎、解熱、鎮(zhèn)痛藥物。由于它的抗炎、解熱、鎮(zhèn)痛作用，現(xiàn)在仍廣泛用于治療傷風(fēng)、感冒、頭痛、神經(jīng)痛、急性和慢性風(fēng)濕及類風(fēng)濕痛等。近年來發(fā)現(xiàn)阿司匹林為不可逆的花生四烯酸環(huán)氧化酶抑制劑。還能抑制血小板中血栓素A2(TXA2)的合成，具有強(qiáng)效的抗血小板凝聚作用，因此，現(xiàn)在阿司匹林已經(jīng)用于心腦血管系統(tǒng)疾病的預(yù)防和治療。而且其應(yīng)用范圍還在不斷被拓展。參見文獻(xiàn)1)鄭虎主編，藥物化學(xué)，第四版，2000年12月，人民衛(wèi)生出版社；2)耿洪業(yè)、王少華主編，實(shí)用治療藥物學(xué)，344-354頁，1997年4月，人民衛(wèi)生出版社。為了更好地說明本發(fā)明，將全面引述上述文獻(xiàn)。
1)用于解熱鎮(zhèn)痛 一般口服0.3-0.6g即可達(dá)到解熱鎮(zhèn)痛作用。劑量加大可延長作用時(shí)間，但其效能不一定增加，且增加副作用。常用于發(fā)熱、感冒、頭痛、神經(jīng)痛、關(guān)節(jié)痛、肌肉痛、月經(jīng)痛等療效可靠。
2)治療偏頭疼 常與普萘洛爾聯(lián)合使用3)用于抗風(fēng)濕 阿司匹林具有較強(qiáng)的抗炎、抗風(fēng)濕作用，是目前治療風(fēng)濕熱、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的重要藥物。阿司匹林用于風(fēng)濕治療需要給予大劑量才能生效，通常成人每次0.5-1g，每日3-5次；小兒每日0.1g/kg，分三次服用。
尤其用于抗風(fēng)濕時(shí)的劑量會(huì)引起嚴(yán)重的胃腸刺激性副作用。
4)、治療痛風(fēng) 每日口服1-2g阿司匹林可通過鎮(zhèn)痛抗炎作用，用于治療急、慢性痛風(fēng)，但療效有限。
5)預(yù)防暫時(shí)性腦缺血及中風(fēng) 中風(fēng)多由腦缺血發(fā)展而來，而腦缺血又多因腦動(dòng)脈硬化所引起。阿司匹林對(duì)防治一過性腦缺血發(fā)作和腦梗塞有效，系與其抑制血小板聚集有關(guān)。每次40-50mg，每天1次。
6)、治療腦血栓 在病理狀態(tài)下的血管內(nèi)膜細(xì)胞損傷，可使前列腺環(huán)素形成受阻，破壞了血栓烷A2和前列腺環(huán)素的平衡，容易觸發(fā)血栓形成，現(xiàn)已證實(shí)腦血栓患者的血栓烷A2顯著增加和前列腺環(huán)素減少。
7)防治心絞痛和心肌梗死 當(dāng)冠狀動(dòng)脈血流受阻時(shí)，血漿中血小板凝血因子IV及血漿球蛋白升高，冠狀竇內(nèi)血栓烷B2升高，均促進(jìn)血栓烷A2的生成，阿司匹林抑制血小板對(duì)血管壁的粘附作用和抑制凝血酶原在肝內(nèi)的形成，因而可用于防治心絞痛和心肌梗塞。
阿司匹林的應(yīng)用如此廣泛，但是也有副作用，尤其需要長期或較大劑量服用時(shí)。它的主要的副作用之一是胃腸道反應(yīng)?？诜⑺酒チ謱?duì)胃粘膜有直接刺激作用，引起上腹部不適、消化不良、厭食、胃痛、惡心、嘔吐等癥狀，個(gè)別患者可引起便秘。大劑量時(shí)可引起糜爛性胃炎、潰瘍及出血和潛血。據(jù)報(bào)道，每日服用4-6g阿司匹林，約有70％服藥者每日出血3-10ml。對(duì)于健康人，大量出血可能發(fā)生于偶服阿司匹林的第1、2天內(nèi)。此外，阿司匹林還可引起胃一食管反流性食管狹窄。在本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)中也證實(shí)了它的胃腸刺激性副作用。
因此，希望能夠繼續(xù)使用阿司匹林但又希望能減少它的毒副作用。
組合物的使用可使得不同化合物組分間產(chǎn)生相同的藥理活性而抵消一些副作用，或者化合物間產(chǎn)生協(xié)同作用而提高藥效。這樣就可以使得單次用藥量減少以及整個(gè)病程的總用藥量減少而療效不變甚至提高，并且副作用降低。
目前，已經(jīng)開發(fā)了許多復(fù)方在臨床上使用，具體的講有如下例子1)用于解熱鎮(zhèn)痛時(shí)常與其它藥物組成復(fù)方，現(xiàn)有的復(fù)方有
a、復(fù)方阿司匹林，每片含阿司匹林0.2268g、非那西丁0.16g、咖啡因0.35g。飯后服用1-2片，每日3次。
b、阿司匹林鈣片，每片含阿司匹林0.324g、枸櫞酸32.4mg、碳酸鈣97.2mg、糖精鈉3.3mg。每次1-3片，每日3次。
c、復(fù)方撲爾敏片，每片含阿司匹林0.2688g、撲爾敏2mg、非那西丁0.162g、咖啡因32.4mg。每次1-2片，每日3次。
d、復(fù)方醋氨酚片，每片含阿司匹林0.23g、醋氨酚0.1265g、咖啡因30mg。每次1-2片，每日2-3次。
上述復(fù)方只適合解熱鎮(zhèn)痛，不適合于抗炎與抗血小板聚集。
2)治療偏頭疼 阿司匹林與普萘洛爾聯(lián)合應(yīng)用，治療偏頭疼有良效。每次口服阿司匹林0.5-1g，普萘洛爾20-30mg，每日3次。
3)、治療腦血栓對(duì)腦血栓患者可采用以阿司匹林為主的腦血管擴(kuò)張復(fù)方制劑進(jìn)行治療。常用者有a、阿司匹林0.1g、罌粟堿30mg、煙酸50mg、安定2.5mg、維生素B610mg，此為一次量，每日2-3次。
b、阿司匹林0.1-0.2g、蘆丁20mg-40mg、維生素B610mg、維生素C0.1g，此為一次量，每日2-3次。
c、雙嘧達(dá)莫(即潘生丁)200mg，阿司匹林25mg的復(fù)方制劑已經(jīng)上市。
上述復(fù)方制劑對(duì)已有腦血栓者有治療效果，對(duì)腦動(dòng)脈硬化、腦血管痙攣者有防止發(fā)生中風(fēng)的效果。也有學(xué)者認(rèn)為對(duì)已經(jīng)發(fā)生腦血栓的患者，應(yīng)采用較大劑量的阿司匹林并伍用雙嘧達(dá)莫(潘生丁)進(jìn)行治療。阿司匹林每次1g，每日2-3次，進(jìn)餐時(shí)服用；雙嘧達(dá)莫每次50mg，每日3次，餐前服，7-10天后逐漸減量。
4)防治心絞痛和心肌梗死 有75mg/150mg阿司匹林和60mg異山梨醇單硝酸酯的復(fù)方可供心絞痛的使用。
以上所述的含有阿司匹林的復(fù)方雖然很多，但是以降低阿司匹林的胃腸副作用為目的的復(fù)方卻沒有。尤其能夠保證鎮(zhèn)痛、抗炎、抗血小板聚集各方面藥效甚至提高的同時(shí)又降低阿司匹林副作用(主要是胃腸刺激副作用)的協(xié)同藥物組合物卻沒有。
此外，上述的含有阿司匹林的復(fù)方只能用于解熱鎮(zhèn)痛、抗炎、抗血小板聚集中的某一個(gè)方面。各復(fù)方之間沒有通用性。比如適合于解熱鎮(zhèn)痛的復(fù)方不適合于抗風(fēng)濕與抗血小板聚集的應(yīng)用；適合于抗血小板聚集的復(fù)方又不適合于其它方面的應(yīng)用；適合于心絞痛的復(fù)方又不適合于鎮(zhèn)痛抗風(fēng)濕。
因此，希望開發(fā)出阿司匹林新的復(fù)方制劑。它能保留甚至提高阿司匹林解熱鎮(zhèn)痛、抗炎、抗血小板聚集的治療或預(yù)防效果，同時(shí)又降低它的胃腸道副作用。
已有阿司匹林與硝酸酯類藥物聯(lián)合應(yīng)用減少胃腸道副作用的報(bào)道。但其中的硝酸酯有其固有的缺點(diǎn)，即耐藥性，尤其當(dāng)需要大劑量、頻繁給藥、長期使用時(shí)。見文獻(xiàn)耿洪業(yè)、王少華主編，實(shí)用治療藥物學(xué)，636頁，1997年4月，人民衛(wèi)生出版社。
美國專利US4287174(1979)，公開了將阿司匹林與表面活性劑聯(lián)合應(yīng)用，有保護(hù)黏膜、減少胃腸潰瘍的效果。但表面活性劑沒有增強(qiáng)阿司匹林藥理活性的作用。
川芎嗪(Ligustrazine)又稱四甲基吡嗪(tetramethylpyrazine)(式II化合物)，文獻(xiàn)(季宇彬主編，中藥活血化瘀有效成分藥理與應(yīng)用，第71-85頁，1994年4月，黑龍江科學(xué)技術(shù)出版社)對(duì)川芎嗪有詳細(xì)的描述，并綜述了臨床用途與用法。為了更好地說明本發(fā)明，將全面引述該文獻(xiàn)。
式II化合物臨床上常用川芎嗪的鹽，比如川芎嗪單磷酸鹽一水合物，簡稱為磷酸川芎嗪。還有鹽酸川芎嗪也是常用的。
川芎嗪有多種藥理作用，比如對(duì)腦缺血損傷的保護(hù)作用，對(duì)心肌缺血的保護(hù)作用，抗血栓形成抑制血小板聚集，防治動(dòng)脈硬化、降壓、抗心律失常等。在臨床上，可用于1)慢、急性缺血性腦血管病的治療，每次80-160mg，每天一次；2)治療良性陣發(fā)性眩暈 每次100mg，每天一次；3)治療腦血管病頭痛每次80mg，每天一次；4)治療顱腦外傷；5)治療慢性腎炎，與腎功能衰竭等；6)治療肝炎 80-240mg/次，1次/天。

發(fā)明內(nèi)容
組合物的使用可使得不同化合物組分間產(chǎn)生相同的藥理活性而抵消一些副作用，或者化合物間產(chǎn)生協(xié)同作用而提高藥效。這樣就可以使得單次用藥量減少以及整個(gè)病程的總用藥量減少而療效不變甚至提高，副作用降低。
現(xiàn)在，令人出乎意料地，本發(fā)明人經(jīng)過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)阿司匹林或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽和川芎嗪或其藥學(xué)上可接受的鹽有著活性增強(qiáng)的協(xié)同作用，而且胃腸道的刺激性副反應(yīng)大大降低。含有阿司匹林和川芎嗪的藥物組合物適合于在解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗血小板聚集方面應(yīng)用。
所以，本發(fā)明的主要目的是提供一種新的鎮(zhèn)痛、抗炎、抗血小板聚集的藥物組合物及其制備。具體的講，該組合物含有阿司匹林與川芎嗪，由于兩者的協(xié)同作用，使得組合物可以在保證甚至提高療效的前提下，降低了阿司匹林潛在的副作用，解決了阿司匹林的胃腸道副作用。
在本發(fā)明所述的藥物組合物中，阿司匹林以游離或其可藥用鹽、酯或酯的鹽形式存在；川芎嗪以游離或可藥用鹽的形式存在。
合適的阿司匹林鹽有無機(jī)鹽和有機(jī)鹽。無機(jī)鹽比如鈉、鎂、鋅、鉀、鋁鹽等；有機(jī)鹽，比如賴氨酸鹽等氨基酸鹽、川芎嗪鹽；合適的阿司匹林酯比如阿司匹林甲酯、阿司匹林乙酯等；還包括阿司匹林氨基乙酯鹽酸鹽、馬來酸鹽等。
合適的川芎嗪的鹽包括它的無機(jī)鹽和有機(jī)鹽。無機(jī)酸鹽的例子有鹽酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、氫溴酸等；有機(jī)酸鹽的例子有馬來酸鹽、富馬酸鹽、甲磺酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽、阿魏酸鹽、阿司匹林鹽等。此外還包括這些鹽的水合物等其它溶劑合物，比如磷酸川芎嗪一水合物。
為了更好的說明本發(fā)明，在本發(fā)明中以阿司匹林和磷酸川芎嗪一水合物(式III化合物，又稱磷酸川芎嗪)為例來說明本發(fā)明。此處所說的磷酸川芎嗪一水合物即川芎嗪的單磷酸鹽的一水合物。為了方便起見，以下我們將阿司匹林(aspirin)稱為Asp，將磷酸川芎嗪一水合物(phosphoric acid Ligustrazine)稱為Pal。由結(jié)構(gòu)式可以看出，1重量份的Pal相當(dāng)于0.54重量份的川芎嗪。
式III化合物許多公認(rèn)的方法已經(jīng)用于藥物的安全性與有效性評(píng)價(jià)。文獻(xiàn)1)徐叔云主編，藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)，人民衛(wèi)生出版社，第一版；和2)中華人民共和國衛(wèi)牛部藥政局，新藥(西藥)臨床前研究指導(dǎo)原則匯編，1993.7，提供了許多翔實(shí)的文獻(xiàn)。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例提供了組合物的鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)。鎮(zhèn)痛藥的藥效評(píng)價(jià)一般在整體動(dòng)物上進(jìn)行。小白鼠或大白鼠扭體法是常用的評(píng)價(jià)法。參見文獻(xiàn).中華人民共和國衛(wèi)牛部藥政局，新藥(西藥)臨床前研究指導(dǎo)原則匯編，1993.7，50-52頁。向小白鼠腹腔內(nèi)注入化學(xué)刺激物可引起深部的、大面積而較持久的疼痛刺激，致使小白鼠產(chǎn)生“扭體”反應(yīng)。鎮(zhèn)痛藥對(duì)此有抑制作用，可明顯減少發(fā)生“扭體”反應(yīng)的小白鼠數(shù)。本發(fā)明采用的化學(xué)刺激物為0.7％的醋酸溶液。本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)空白組小鼠扭體次數(shù)為30.88±13.12；Asp(200mg/kg)組小鼠扭體次數(shù)為8.00±6.45；Asp+Pal(100+100mg/kg)組小鼠扭體次數(shù)為5.43±8.31。說明Asp+Pal(100+100mg/kg)所達(dá)到的鎮(zhèn)痛效果與Asp200mg/kg的鎮(zhèn)痛效果還好。說明Asp與Pal之間有協(xié)同的鎮(zhèn)痛作用。其協(xié)同作用使得在提高療效的前提下，組合物中Asp的劑量只有正常的1/2，大大減少Asp的劑量。
本發(fā)明還提供了組合物的解熱藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)。通過考察組合物對(duì)啤酒干酵母所至大鼠發(fā)熱的影響實(shí)驗(yàn)確證在解熱方面，阿司匹林與川芎嗪有協(xié)同作用。Asp+Pal(70+70mg/kg)所達(dá)到的解熱效果與Asp140mg/kg所達(dá)到的解熱效果相當(dāng)，說明Asp與Pal之間有協(xié)同的解熱作用。其協(xié)同作用使得在提高療效的前提下，組合物中Asp的劑量只有正常的1/2，大大減少Asp的劑量。
本發(fā)明的實(shí)施例還提供了組合物的抗炎藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)。本發(fā)明采用小鼠耳二甲苯致眼炎法評(píng)價(jià)抗炎效果。參件文獻(xiàn).中華人民共和國衛(wèi)生部藥政局，新藥(西藥)臨床前研究指導(dǎo)原則匯編，1993.7，50-52頁。取體重26-30g的雄性小鼠，隨機(jī)分組，每組十只，設(shè)陰性與陽性對(duì)照。致炎前30-60分鐘給藥。將二甲苯0.03-0.05ml滴于鼠右耳，左耳對(duì)照。30分鐘后處死小鼠，打圓耳片，稱重，求左右耳片重量之差，作為腫脹度。腫脹度越小，說明炎癥輕，藥物的抗炎效果越好。本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)空白組小鼠腫脹度為14.00±3.22(mg)；Asp(200mg/kg)組小鼠腫脹度為10.31±4.73(mg)；Asp+Pal(50+50mg/kg)組小鼠腫脹度為11.06±4.97(mg)。說明Asp+Pal(50+50mg/kg)所達(dá)到的抗炎效果與Asp200mg/kg的抗炎效果相當(dāng)。說明Asp與Pal之間有協(xié)同的抗炎作用。其協(xié)同作用使得在保證療效的前提下，組合物中Asp的劑量只用正常的1/4，大大減少Asp的劑量。
本發(fā)明還提供了藥物組合物抗血小板聚集的藥效實(shí)驗(yàn)?？寡“寰奂乃幮?shí)驗(yàn)方法有多種，在本發(fā)明中，提供了組合物對(duì)ADP誘導(dǎo)的血小板聚集的藥效模型的實(shí)驗(yàn)、小鼠體外凝血時(shí)間影響實(shí)驗(yàn)、小鼠尾出血時(shí)間的影響實(shí)驗(yàn)。
抗ADP誘導(dǎo)的血小板聚集的藥效實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明家兔灌胃給藥Asp+Pal(9.25+9.25mg/kg、18.5+18.5mg/kg、37+37mg/kg)1hr后，中、高劑量組與正常對(duì)照組比較，對(duì)ADP誘導(dǎo)的血小板聚集抑制作用有非常顯著性差異，且有明顯的量效關(guān)系，與單方Asp或Pal組比，作用明顯增強(qiáng)。Asp+Pal(18.5+18.5mg/kg)的藥效比Asp37mg/kg或Pal37mg/kg的藥效要好。它們的血小板聚集抑制率分別為37.0±9.5％，23.0±22.4％，36.5±18.5％。從數(shù)字上很容易得出結(jié)論，Asp與Pal抗血小板聚集有著協(xié)同作用。組合物中Asp的用量為單用Asp一半的量時(shí)，組合物比Asp有著更好的藥效。而且Asp用量減少一半。
組合物對(duì)小鼠體外凝血時(shí)間的影響實(shí)驗(yàn)表明Asp+Pal(25+25mg/kg)的藥效與Asp100mg/kg或Pal100mg/kg的藥效相當(dāng)。用它們給藥的小鼠體外凝血時(shí)間分別為180.3±70.0(s)，180.0±46.4(s)，186.1±60.1(s)。而Asp+Pal(50+50mg/kg)組的凝血時(shí)間為206.4±54.9(s)。本實(shí)驗(yàn)也說明了Asp與Pal之間有協(xié)同抗血小板聚集作用。其協(xié)同作用使得在保證療效的前提下，組合物中Asp的劑量只用正常的1/4，大大減少Asp的使用劑量。
組合物對(duì)小鼠尾出血時(shí)間的影響實(shí)驗(yàn)表明Asp+Pal(50+50mg/kg)的藥效與Asp100mg/kg的藥效相當(dāng)。它們各自給藥組的小鼠尾出血時(shí)間分別為1489.3±595.9(s)，1406.1±737.1(s)。也就是說組合物Asp的量為正常單方Asp的量一半時(shí)，其藥效是一致的。
本發(fā)明還提供了藥物組合物抗血栓形成作用實(shí)驗(yàn)。對(duì)家兔實(shí)施頸總動(dòng)脈血栓手術(shù)，術(shù)后2hr取出并稱量所形成血栓的濕重。試驗(yàn)結(jié)果表明家兔灌胃給藥Asp+Pal(9.25+9.25mg/kg、18.5+18.5mg/kg、37+37mg/kg)，2hr后中、高劑量組動(dòng)物形成的血栓重量明顯減少，與對(duì)照組比較，有非常顯著性差異，且有明顯的量效關(guān)系，與單方Asp(37mg/kg)或Pal(37mg/kg)組比，作用明顯增強(qiáng)。各組血栓濕重分別為21.8±3.2mg，10.2±1.9mg，9.5±0.8mg，15.6±2.5mg，14.8±3.2mg。以上數(shù)據(jù)表明，當(dāng)以Asp+Pal(18.5+18.5mg/kg)給藥時(shí)，組合物的藥效比單獨(dú)給藥Asp(37mg/kg)或Pal(37mg/kg)的抗血栓形成效果要好。說明Asp和Pal之間確有抗血栓形成的協(xié)同作用。而且Asp使用劑量可以小一半。
本發(fā)明還提供一個(gè)考察Asp與Pal之間配伍關(guān)系的實(shí)施例。在本實(shí)驗(yàn)中，以膠原誘導(dǎo)大鼠半體內(nèi)發(fā)血小板聚集抑制率為指標(biāo)，用金氏概率相加法研究不同劑量、不同比例Asp與Pal相互作用關(guān)系。Asp+Pal＝70+70mg/kg，即Asp∶Pal＝1∶1(重量比)給藥組q＝1.2，協(xié)同作用最好。
本發(fā)明還提供了藥物組合物的胃腸道刺激性實(shí)驗(yàn)。在本實(shí)驗(yàn)中，測定各組阿司匹林致小鼠急性潰瘍的潰瘍指數(shù)或相對(duì)應(yīng)的潰瘍抑制率來評(píng)價(jià)組合物對(duì)胃腸的保護(hù)作用。潰瘍指數(shù)越小越好，潰瘍抑制率越大越好。實(shí)驗(yàn)表明小鼠連續(xù)灌胃給予Pal(5、10、20、40mg/kg)或Asp+Pal(25+25、50+50、100+100mg/kg)7天后，與正常對(duì)照組間比較，除5mg/kgPal外，其余各組對(duì)阿司匹林致小鼠急性潰瘍都有顯著或非常顯著的保護(hù)作用。組合物Asp+Pal的抗?jié)冏饔糜忻黠@的量效關(guān)系，劑量越大，抗?jié)冏饔迷胶?。這保證了在大劑量用藥以發(fā)揮最大藥效時(shí)對(duì)胃腸道的保護(hù)作用。解決了胃腸道的刺激性問題，尤其當(dāng)阿司匹林大劑量使用時(shí)的胃腸道刺激性問題。
本發(fā)明還提供了藥物組合物的急性毒性實(shí)驗(yàn)。觀察受試動(dòng)物一次性灌胃及腹腔注射給予小鼠后所產(chǎn)生的急性毒性反應(yīng)及死亡情況，以考察其臨床用藥的安全性。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)Asp+Pal(1∶2)灌胃給小鼠LD50及可信限為2143.4±171.0mg/kg；腹腔注射給小鼠LD50及可信限為731±127.0mg/kg；Asp灌胃給小鼠LD50及可信限為1559.7±288.0mg/kg；Pal灌胃給小鼠LD50及可信限為1135.0±157.0mg/kg。以上數(shù)據(jù)說明Asp+Pal的藥物組合物其急性毒性小于Asp及Pal，也即更安全。
綜上所述，使用含Asp與Pal的協(xié)同組合物，與單獨(dú)使用Asp相比，具有更好的解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗血小板聚集和抗血栓形成作用。盡管不同藥理作用其在劑量、持續(xù)時(shí)間和測試方法的結(jié)果上略有差別。兩者在解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗血小板聚集各方面有協(xié)同作用，通過Asp與Pal的組合物使用，可以在保持甚至是提高療效的前提下，通過對(duì)胃腸道的保護(hù)作用，將Asp的副作用，比如胃腸道潰瘍等刺激性副作用最小化。
本發(fā)明所述的解熱、抗炎、鎮(zhèn)痛、抗血小板聚集藥物組合物其制成制劑，對(duì)于100重量份的Asp含有50-800重量份的Pal，即相當(dāng)于100重量份的Asp含有27-432重量份的川芎嗪?；蛳喈?dāng)于這些量的阿司匹林的鹽、酯以及相應(yīng)的相當(dāng)于這些量的川芎嗪或其它可藥用鹽。其中阿司匹林以每日25-2000mg的量使用，優(yōu)選每日25-1000mg的量使用，再優(yōu)選每日25-500mg的量使用。
基于所述的藥物組合物可經(jīng)腸給藥，諸如口服，所述的藥物組合物可制成片劑、膠囊劑、顆粒劑等固體制劑。當(dāng)然也可制成口服溶液。本發(fā)明所述的組合物還可以制成經(jīng)非腸道給藥的制劑形式。比如注射劑。當(dāng)制成制劑時(shí)，制劑包含指定量的阿司匹林或其鹽、酯、酯的鹽和川芎嗪或其鹽，以及在藥物制劑制備中常用的稀釋劑、載體和助劑。比如可包括稀釋劑/賦形劑、吸收劑、粘合劑、潤濕劑、崩解劑、潤滑劑、助流劑、包衣劑、著色劑、干燥劑、乳化劑、助溶劑、矯味劑、抗結(jié)塊劑、增塑劑、助懸劑和增稠劑等。
上述藥物組合物制備成的固體單位制劑應(yīng)含有25-500mg的阿司匹林，優(yōu)選50-150mg，或相當(dāng)于這些量的阿司匹林的鹽、酯、酯的鹽。Pal的單位劑量應(yīng)為25-500mg，優(yōu)選50-150mg，或相當(dāng)于這些量的川芎嗪或其它可藥用鹽?；谒霭l(fā)明的藥物組合物的每日用量取決于給藥方法或治療條件，但在口服情況下，成人每日優(yōu)選給藥1-4次。
各種含有一定量活性成分的藥物組合物的片劑制備方法是已知的，例如見藥劑學(xué)，第四版，畢殿洲主編，人民衛(wèi)生出版社，1999.11。本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例提供了組合物的片劑制備方法。


在圖1中，阿代表Asp；川代表Pal。給藥劑量以mg/kg為計(jì)量單位。
具體實(shí)施例方式基于下列非限定性的實(shí)施例將更詳細(xì)地解釋本發(fā)明。
在實(shí)施例中所述的阿司匹林為購買到的商品。同樣，川芎嗪單磷酸鹽一水合物也是購買到的商品。兩者在市場上都有大量的商品供應(yīng)。
I、藥物組合物的鎮(zhèn)痛藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)施例1、阿司匹林和復(fù)方阿司匹林對(duì)醋酸所至小鼠扭體反應(yīng)的影響一.藥品與器材(1)復(fù)方阿司匹林高劑量Asp200mg/kg+Pal200mg/kg中劑量Asp100mg/kg+Pal100mg/kg低劑量Asp50mg/kg+Pal50mg/kg(2)阿司匹林(3)0.7％醋酸二.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄各半，體重18-22g。
三.實(shí)驗(yàn)方法小鼠隨機(jī)分為7組，每組10-20只。于實(shí)驗(yàn)前一天晚禁食，實(shí)驗(yàn)日灌胃給予阿司匹林和復(fù)方阿司匹林高、中、低劑量。給藥1h后，腹腔注射0.7％醋酸溶液，立即記錄15min內(nèi)的小鼠扭體次數(shù)。
三.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表1.阿司匹林和復(fù)方阿司匹林對(duì)對(duì)醋酸所至小鼠扭體反應(yīng)的影響組別劑量(mg/kg)只數(shù) 扭體次數(shù)空白組 —— 16 30.88±13.12Asp200 15 8.00±6.45**Asp100 13 7.77±6.62**Asp50 15 13.00±11.84**Asp+Pal200+200 14 1.71±1.94**##Asp+Pal100+100 14 5.43±8.31**Asp+Pal50+5014 11.43±9.82****P＜0.01，與空白組比較##P＜0.01，與阿司匹林140mg/kg比較如表1所示，空白組小鼠扭體次數(shù)為30.88±13.12；Asp(200mg/kg)組小鼠扭體次數(shù)為8.00±6.45；Asp+Pal(100+100mg/kg)組小鼠扭體次數(shù)為5.43±8.31。說明Asp+Pal(100+100mg/kg)所達(dá)到的鎮(zhèn)痛效果與Asp200mg/kg的鎮(zhèn)痛效果還好。說明Asp與Pal之間有協(xié)同的鎮(zhèn)痛作用。其協(xié)同作用使得在提高療效的前提下，組合物中Asp的劑量只有正常的1/2，大大減少Asp的劑量。而且隨著組合物的劑量增加，鎮(zhèn)痛作用加強(qiáng)。
II、藥物組合物的抗炎藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)施例2、阿司匹林和復(fù)方阿司匹林對(duì)二甲苯所至小鼠耳腫脹的影響一、藥品與器材(1)復(fù)方阿司匹林Asp50mg/kg+Pal50mg/kg(2)阿司匹林(3)二甲苯(4)TN-100B型托盤式扭力天平二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠，雌雄各半，體重18～22g。
三、實(shí)驗(yàn)方法隨機(jī)分為組，每組12～14只。每日灌胃給予阿司匹林和復(fù)方阿司匹林，連續(xù)6天。于實(shí)驗(yàn)前一天晚禁食，實(shí)驗(yàn)日給藥1h后，在小鼠右耳廓前后兩面均勻涂抹二甲苯共25μL，30min后處死小鼠，剪下左、右兩耳廓，用8mm打孔器打下左、右兩耳片，稱重，計(jì)算腫脹度。
腫脹度(mg)＝右耳片重(mg)-左耳片重(mg)四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果表2 阿司匹林和復(fù)方阿司匹林對(duì)二甲苯所至小鼠耳腫脹的影響組別 劑量(mg/kg)只數(shù)腫脹度(mg)空白組 —— 13 14.00±3.22Asp 200 14 10.31±4.73*Asp 100 13 13.07±3.60Asp+Pal 50+5012 11.06±4.97*P＜0.05，與空白組比較如表2所示，本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)空白組小鼠腫脹度為14.00±3.22(mg)；Asp(200mg/kg)組小鼠腫脹度為10.31±4.73(mg)；Asp+Pal(50+50mg/kg)組小鼠腫脹度為11.06±4.97(mg)。說明Asp+Pal(50+50mg/kg)所達(dá)到的抗炎效果與Asp200mg/kg的抗炎效果相當(dāng)。說明Asp與Pal之間有協(xié)同的抗炎作用。其協(xié)同作用使得在保證療效的前提下，組合物中Asp的劑量只用正常的1/4，大大減少Asp的劑量。
III、藥物組合物的解熱藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)施例3、復(fù)方阿司匹林對(duì)啤酒干酵母所至大鼠發(fā)熱的影響一、藥品與器材(1)復(fù)方阿司匹林高劑量Asp200mg/kg+Pal200mg/kg中劑量Asp100mg/kg+Pal100mg/kg低劑量Asp 50mg/kg+Pal50mg/kg(2)阿司匹林(3)啤酒干酵母臨用時(shí)配置成20％的啤酒酵母混懸液。
(4)數(shù)字式溫度計(jì)二.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SD大鼠，雌雄各半，體重160-200g。
三.實(shí)驗(yàn)方法大鼠隨機(jī)分為7組，每組10-20只。于實(shí)驗(yàn)前一天測定肛溫，使大鼠適應(yīng)溫度計(jì)的刺激。實(shí)驗(yàn)前一天晚禁食，實(shí)驗(yàn)日隔1h測定大鼠肛溫一次，共2次，肛溫之差超過0.3℃的大鼠棄之不用。取2次的肛溫平均值為大鼠基礎(chǔ)體溫。大鼠皮下注射10ml/kg的20％啤酒干酵母混懸液。5h后測定肛溫，肛溫升高不到1.0℃的大鼠棄之不用。灌胃給予阿司匹林和復(fù)方阿司匹林高、中、低劑量。分別于給藥1h、2h、3h、4h、6h后，測定肛溫的變化。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖1所示，Asp+Pal(70+70mg/kg)所達(dá)到的解熱效果與Asp140mg/kg所達(dá)到的解熱效果相當(dāng)，說明Asp與Pal之間有協(xié)同的解熱作用。其協(xié)同作用使得在保證療效的前提下，組合物中Asp的劑量只有正常的1/2，大大減少Asp的劑量。
IV、藥物組合物抗血小板聚集的藥效實(shí)驗(yàn)實(shí)施例4、對(duì)ADP誘導(dǎo)的血小板聚集的藥效模型的實(shí)驗(yàn)取家兔48只，體重2.5-3.0kg，雌雄兼用。隨機(jī)分成6組正常對(duì)照組、Asp/Pal低、中、高劑量組、Asp組、Pal組、，每組8只。正常對(duì)照組灌胃0.5％CMC-Na溶液，給藥容積為5ml/kg體重，其余各組按相等容積灌胃給相應(yīng)藥物，給藥后1hr耳緣靜脈取血，用3.8％枸櫞酸鈉(1∶9)抗凝、制備PRP和PPP，確定聚集劑ADP濃度為2.2μM，測定血小板聚集率并求出聚集抑制率。
聚集抑制率％＝(對(duì)照組聚集％-給藥組聚集％)/對(duì)照組聚集％×100％以聚集率為指標(biāo)進(jìn)行組間比較，顯著性檢驗(yàn)。
試驗(yàn)結(jié)果如表1所示家兔灌胃給藥Asp+Pal(9.25+9.25mg/kg、18.5+18.5mg/kg、37+37mg/kg)1hr后，中、高劑量組與正常對(duì)照組比較，對(duì)ADP誘導(dǎo)的血小板聚集抑制作用有非常顯著性差異，且有明顯的量效關(guān)系，與單方Asp或Pal組比，作用明顯增強(qiáng)。
表3 復(fù)方阿司匹林對(duì)ADP誘導(dǎo)的血小板聚集性的影響(n＝8，x±s)組別血小板聚集率劑量 抑制率(mg/kg)(％)(％)對(duì)照組 - 52.4±10.0Asp+Pal 37+37 22.0±11.1**++-58.0±21.2Asp 37 41.8±11.6 23.0±22.4Pal 37 33.2±9.7**36.5±18.5與對(duì)照組比較**p＜0.01與Asp組比較++p＜0.01與Pal組比較-p＜0.05如表3所示，Asp+Pal(18.5+18.5mg/kg)的藥效比Asp37mg/kg或Pal37mg/kg的藥效要好。它們的血小板聚集抑制率分別為37.0±9.5％，23.0±22.4％，36.5±18.5％。從數(shù)字上可得出結(jié)論，Asp與Pal抗血小板聚集有著協(xié)同作用。組合物中Asp的用量為單用Asp一半的量時(shí)，組合物比Asp有著更好的藥效。而且Asp用量減少一半。
實(shí)施例5、小鼠體外凝血時(shí)間影響實(shí)驗(yàn)取小鼠60只，體重18-22g，雌雄兼用。隨機(jī)分為6組對(duì)照組、Asp+Pal低、中、高劑量組、Asp組、Pal組，每組10只。各組動(dòng)物分別灌胃給予相應(yīng)藥物，給藥容積為0.2ml/10g體重，給藥后1hr測定體外凝血時(shí)間。
試驗(yàn)結(jié)果如表4所示小鼠灌胃給予Asp+Pal(25+25/kg、50+50mg/kg、100+100mg/kg)后1hr，與正常對(duì)照組間比較，復(fù)方高劑量組對(duì)小鼠體外凝血時(shí)間有顯著的延長作用。
表4 復(fù)方阿司匹林對(duì)小鼠體外凝血時(shí)間的影響(n＝10，x±s)劑量凝血時(shí)間組別 (mg/kg)(s)對(duì)照組 - 171.5±42.525+25 180.3±70.0Asp/Pal 50+50 206.4±54.9100+100 223.0±60.5*Asp 100 180.0±46.4Pal 100 186.1±60.1與對(duì)照組比較*p＜0.05組合物對(duì)小鼠體外凝血時(shí)間的影響實(shí)驗(yàn)表明Asp+Pal(25+25mg/kg)的藥效與Asp100mg/kg或Pal100mg/kg的藥效相當(dāng)。用它們給藥的小鼠體外凝血時(shí)間分別為180.3±70.0(s)，180.0±46.4(s)，186.1±60.1(s)。而Asp+Pal(50+50mg/kg)組的凝血時(shí)間為206.4±54.9(s)。本實(shí)驗(yàn)也說明了Asp與Pal之間有協(xié)同抗血小板聚集作用。其協(xié)同作用使得在保證療效的前提下，組合物中Asp的劑量只用正常的1/4，大大減少Asp的使用劑量。
實(shí)施例6、小鼠尾出血時(shí)間的影響實(shí)驗(yàn)。
取小鼠60只，體重18-22g，雌雄各半。實(shí)驗(yàn)前禁食6hr，隨機(jī)分為6組對(duì)照組、Asp+Pal低、中、高劑量組、Asp組、Pal組，每組10只。給藥后1hr測定尾出血時(shí)。
試驗(yàn)結(jié)果如表5所示小鼠灌胃給予Asp+Pal(25+25/kg、50+50mg/kg、100+100mg/kg)后，與正常對(duì)照組間比較，復(fù)方高劑量組對(duì)小鼠體外凝血時(shí)間有顯著的延長作用。
表5 復(fù)方阿司匹林對(duì)小鼠尾出血時(shí)的影響(n＝10，x±s)劑量 尾出血時(shí)組別 (mg/kg) (s)對(duì)照組 - 1016.7±565.625+25 1070.6±516.8Asp/Pal50+50 1489.3±595.9100+1001726.3±587.3*Asp1001406.1±737.1Pal1001532.6±792.1與對(duì)照組比較*p＜0.05組合物對(duì)對(duì)小鼠尾出血時(shí)間的影響實(shí)驗(yàn)表明Asp+Pal(50+50mg/kg)的藥效與Asp100mg/kg的藥效相當(dāng)。它們各自給藥組的小鼠尾出血時(shí)間分別為1489.3±595.9(s)，1406.1±737.1(s)。也就是說組合物Asp的量為正常單方Asp的量一半時(shí)，其藥效是一致的。
實(shí)施例7、藥物組合物抗血栓形成作用實(shí)驗(yàn)取家兔36只，體重1.5-2.5kg，雌雄兼用，隨機(jī)分為6組對(duì)照組、Asp+Pal低、中、高劑量組、Asp組、Pal組，每組6只。對(duì)照組灌胃0.5％CMC-Na，給藥容積為5ml/kg體重，其余各組按相等容積灌胃給相應(yīng)藥物。給藥后1hr，對(duì)家兔實(shí)施頸總動(dòng)脈血栓手術(shù)，術(shù)后2hr取出并稱量所形成血栓的濕重。
試驗(yàn)結(jié)果表6所示家兔灌胃給藥Asp+Pal(9.25+9.25mg/kg、18.5+18.5mg/kg、37+37mg/kg)，2hr后中、高劑量組動(dòng)物形成的血栓重量明顯減少，與對(duì)照組比較，有非常顯著性差異，且有明顯的量效關(guān)系，與單方Asp或Pal組比，作用明顯增強(qiáng)。
表6 復(fù)方阿司匹林對(duì)家兔頸總動(dòng)脈血栓形成的影響(n＝6，x±s)劑量 血栓濕重G組別 (mg/kg) (mg)對(duì)照組 - 21.8±2.89.25+9.25 21.8±3.2Asp/Pal 18.5+18.5 10.2±1.9***+-37+37 9.5±0.8***+++-Asp 37 15.6±2.5**Pal 37 14.8±3.2**與對(duì)照組比較**p＜0.01，***p＜0.001；與Asp組比較+p＜0.05，+++p＜0.001與Pal組比較-p＜0.05，-p＜0.01以上數(shù)據(jù)表明，當(dāng)以Asp+Pal(18.5+18.5mg/kg)給藥時(shí)，組合物的藥效比單獨(dú)給藥Asp(37mg/kg)或Pal(37mg/kg)的抗血栓形成效果要好。說明Asp和Pal之間確有抗抗血栓形成的協(xié)同作用。而且Asp使用劑量可以小一半。
IV、篩方實(shí)驗(yàn)實(shí)施例8、試驗(yàn)?zāi)康奶接懓⑺酒チ峙c磷酸川芎嗪配伍后對(duì)膠原誘導(dǎo)的大鼠半體內(nèi)法血小板聚集的抑制作用及較好的配伍關(guān)系。
受試藥物Asp臨用前用0.5％CMC-Na配成所需濃度混懸液。
Pal臨用前用0.5％CMC-Na配成所需濃度混懸液。
受試動(dòng)物Wistar大鼠，雄性，體重250±20g，動(dòng)物總數(shù)160只(每組10只)。
試驗(yàn)方法1.Asp、Pal合并用藥效果的研究受試動(dòng)物在飼養(yǎng)觀察室內(nèi)觀察一周(觀察室溫度20±3℃，相對(duì)濕度30-70％，12h光照，喂機(jī)制料塊，飲自來水。)受試動(dòng)物按下表隨機(jī)分組。灌胃給藥后1h在清醒狀態(tài)下，從眶靜脈取血，用3.8％枸櫞酸抗凝(9∶1)，常規(guī)制備PRP、PPP，選擇引起對(duì)照組50+10％血小板聚集的膠原量為20μl(按文獻(xiàn)方法自制)并以此膠原量測定各給藥組血小板聚集率均數(shù)與對(duì)照組聚集率的均數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，顯著性檢驗(yàn)，并求出各給藥組血小板聚集抑制率，聚集抑制％＝(對(duì)照組聚集％-給藥組聚集％)/對(duì)照組聚集％，以抑制率為指標(biāo)，按公式q＝EAB/(EA+EB-EA.EB)，求出各組Q值，其中Asp/Pal＝70/70mg/kg組q值最大，q＝1.2，說明兩藥按此比例配伍對(duì)膠原誘導(dǎo)的半體內(nèi)法血小板聚集的抑制呈協(xié)同作用(詳見表7)。
表7 阿司匹林、磷酸川芎嗪合并用藥效果研究分組一覽表受試藥物劑量(mg/kg)Asp 17.535 70Pal 35 70 140Asp/Pal 17.5/35 17.5/70 17.5/140Asp/Pal 35/35 35/70 35/140Asp/Pal 70/35 70/700 70/1402.阿司匹林、磷酸川芎嗪優(yōu)化組合試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)分組及試驗(yàn)結(jié)果如表8所示，按L9(32)列正交表，以血小板聚集抑制率(％)為指標(biāo)，通過直觀法分析，結(jié)果表明，Pal極差值R＝30.0，Asp極差值R＝19.5；F檢驗(yàn)，結(jié)果表明磷酸川芎嗪F＝38.04(p＜0.05)，阿司匹林F＝9.10(p＞0.05)。
試驗(yàn)結(jié)果在阿司匹林、磷酸川芎嗪組成的復(fù)方中，以阿司匹林70mg/kg、磷酸川芎嗪70mg/kg對(duì)膠原誘導(dǎo)的大鼠半體內(nèi)法血小板聚集呈明顯抑制作用，用金氏概率相加法證明，兩藥按此比例配伍，藥效增強(qiáng)，呈協(xié)同作用，q＝1.20。
表8 阿司匹林、磷酸川芎嗪合并用藥效果分析(對(duì)膠原誘導(dǎo)的大鼠半體內(nèi)法血小板聚集的影響)n＝10劑量組別 (mg/kg) 血小板聚集率(％) 抑制率(％) Q值對(duì)照組 - 51.8±9.9 -A1 17.540.9±11.8 21.1±23.4A2 35 48.9±3.3 5.6±6.4A3 70 31.4±10.3 39.0±20.0P1 35 40.9±13.0 20.7±25.1P2 70 32.5±8.2 36.9±16.0P3 140 25.2±10.6 51.1±20.6Asp/Pal(A/P)A1/P117.5/35 43.9±5.3 15.1±10.4 0.40A1/P217.5/70 26.6±8.5 47.9±16.5 0.97A1/P317.5/14026.3±11.1 48.6±21.5 0.80A2/P135/35 39.0±6.5 24.4±12.6 0.97A2/P235/70 23.2±14.0 55.0±27.1 1.11A2/P335/140 21.8±13.2 57.7±25.6 0.95A3/P170/35 33.3±13.0 35.3±25.3 0.68A3/P270/70 13.3±6.0 74.1±11.7 1.20A3/P370/140 21.7±11.6 57.9±22.5 0.83L9(32)表9不同比例阿司匹林、磷酸川芎嗪復(fù)方制劑對(duì)膠原誘導(dǎo)大鼠半體內(nèi)法血小板聚集的影響磷酸川芎嗪試驗(yàn)號(hào)阿司匹林(A) (P) 抑制率(mg/kg) (mg/kg) (％)117.5 35.015.1±10.4217.5 70.047.9±16.5317.5 140.0 48.6±21.5435.0 35.024.4±12.6535.0 70.055.0±27.1635.0 140.0 57.7±25.6770.0 35.035.3±25.3870.0 70.074.1±11.7970.0 140.0 57.9±22.5A K1＝111.6 L K1＝74.5 K2＝136.9K2＝177.3 y＝46.2K3＝167 K3＝164.4 K1＝37.4K1＝24.8K2＝45.6K2＝59.1K3＝56.7K3＝54.8R19.5 30
表10 不同比例阿司匹林、磷酸川芎嗪對(duì)膠原誘導(dǎo)的血小板聚集抑制作用方差分析表離均差平方和變異來源(1) 自由度(n) 均方(MS) FP(1) (2)(3) (4)＝(2)÷(3)(5) (6)9.10阿司匹林500.36 2 250.180＞0.0538.0磷酸川芎嗪 2090.69 2 1045.34 40 ＜0.05誤差109.93 4 27.48總計(jì)2700.98以上實(shí)驗(yàn)表明，Asp∶Pal＝100∶50-800(重量比)各種不同配比的組合物均有療效，但Asp+Pal(70+70mg/kg)時(shí)協(xié)同作用效果最佳。即Asp與Pal重量比為1∶1時(shí)給藥效果最佳。
V、急性毒性實(shí)驗(yàn)實(shí)施例9、觀察受試物一次性灌胃及腹腔注射給予小鼠后所產(chǎn)生的急性毒性反應(yīng)及死亡情況，以考察其臨床用藥的安全性。
試驗(yàn)材料1.受試物1.1名稱Asp配制方法用上皿電子天平稱取一定量藥物，加入0.5％CMC-Na配制成所需給藥濃度溶液。
1.2名稱Pal配制方法同前。
2.受試動(dòng)物名稱小鼠品系昆明種性別雌雄兼用體重18-22g每組動(dòng)物數(shù)10只試驗(yàn)方法與結(jié)果1.灌胃給藥小鼠急性毒性試驗(yàn)1.1復(fù)方阿司匹林(Asp+Pal，1∶1)將40只小鼠，試驗(yàn)前禁食16小時(shí)，隨機(jī)分為四組，每組10只，雌雄各半。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)確定Dm為2933mg/kg，Dn為1077mg/kg；給藥劑量分別為2933mg/kg、2199.8mg/kg、1649.8mg/kg、1237.4mg/kg，劑距為1∶0.75，給藥容積為0.2ml/10g。灌胃給藥后觀察受試動(dòng)物的中毒反應(yīng)，連續(xù)一周。多數(shù)小鼠灌胃后表現(xiàn)為拒食、拒水，呼吸加快，死前躁動(dòng)，給藥后30min出現(xiàn)死亡，小鼠死亡絕大部分出現(xiàn)在灌藥后12小時(shí)內(nèi)，未死亡小鼠在灌胃后48小時(shí)活動(dòng)、飲食逐漸恢復(fù)正常。尸檢肉眼下未發(fā)現(xiàn)受試小鼠主要臟器有明顯病變。LD50及95％可信限用Bliss法計(jì)算，結(jié)果見表11。
表11 復(fù)方阿司匹林灌胃給小鼠LD50及95％可信限組別動(dòng)物數(shù) 劑量(mg/kg) 死亡數(shù)(n)死亡率(P)1 102933 9 0.92 102199.85 0.53 101649.82 0.24 101237.40 0.0LD50＝2143.4mg/kg LD50的95％可信限為1998.8-2340.8mg/kg1.2阿司匹林試驗(yàn)方法同前。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)確定Dm為3500mg/kg，Dn為1200mg/kg；給藥劑量分別為3500mg/kg、2450mg/kg、1715mg/kg、1200.5mg/kg，劑距為1∶0.7，給藥容積為0.2ml/10g。灌胃給藥后觀察受試動(dòng)物的中毒反應(yīng)，連續(xù)一周。部分小鼠灌胃后表現(xiàn)為拒食、拒水，肌張力下降，平衡性差，呼吸急促，死前躁動(dòng)，給藥后17min出現(xiàn)死亡，小鼠死亡絕大部分出現(xiàn)在給藥后12h內(nèi)，未死亡小鼠在灌胃后24h活動(dòng)、飲食逐漸恢復(fù)正常。尸檢肉眼下未發(fā)現(xiàn)受試小鼠胃腸道有明顯病變。LD50及95％可信限用Bliss法計(jì)算，結(jié)果見表12。
表12 阿司匹林灌胃給小鼠LD50及95％可信限組別動(dòng)物數(shù) 劑量(mg/kg) 死亡數(shù)(n) 死亡率(P)1 10350010 1.02 1024509 0.93 1017155 0.54 101200.5 3 0.3LD50＝1559.7mg/kg LD50的95％可信限為1271.7-1847.7mg/kg1.3 磷酸川芎嗪試驗(yàn)方法同前。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)確定Dm為2600mg/kg，Dn為892mg/kg；給藥劑量分別為2600mg/kg、1820mg/kg、1274mg/kg、891.8mg/kg，劑距為1∶0.7，給藥容積為0.2ml/10g。灌胃給藥后觀察受試動(dòng)物的中毒反應(yīng)，連續(xù)一周。多數(shù)小鼠灌胃后見拒食、拒水，行動(dòng)遲緩，運(yùn)動(dòng)不協(xié)調(diào)，呼吸急促，死前躁動(dòng)，給藥后30min出現(xiàn)死亡，小鼠死亡絕大部分出現(xiàn)在給藥后5小時(shí)h內(nèi)，未死亡小鼠在灌胃后24h活動(dòng)、飲食逐漸恢復(fù)正常。尸檢肉眼下未發(fā)現(xiàn)受試小鼠主要臟器有明顯病變。LD50及95％可信限用Bliss法計(jì)算，結(jié)果見表13。
表13 磷酸川芎嗪灌胃給小鼠LD50及95％可信限組別動(dòng)物數(shù) 劑量(mg/kg) 死亡數(shù)(n) 死亡率(P)1 102600 10 1.02 101820 9 0.93 101274 7 0.44 10891.8 2 0.2LD50＝1135.0mg/kg LD50的95％可信限為978.0-1292.0mg/kg2、復(fù)方阿司匹林腹腔注射給藥小鼠急性毒性試驗(yàn)將40只小鼠，隨機(jī)分為四組，每組10只，雌雄各半。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)確定Dm為1238mg/kg，Dn為867mg/kg；給藥劑量分別為1238mg/kg、928.5mg/kg、696.4mg/kg、522.3mg/kg，劑距為1∶0.75，給藥容積為0.2ml/10g。腹腔注射給藥后連續(xù)觀察一周，給藥后大部分小鼠出現(xiàn)活動(dòng)減少、拒食拒水、四肢無力、運(yùn)動(dòng)不協(xié)調(diào)、對(duì)刺激反應(yīng)遲鈍、個(gè)別死前躁動(dòng)，給藥后10min出現(xiàn)死亡，死亡時(shí)間集中在給藥后12h內(nèi)。存活者在24h后活動(dòng)、攝食逐漸恢復(fù)正常。尸檢肉眼下未發(fā)現(xiàn)受試小鼠主要臟器有明顯病變。LD50及95％可信限用Bliss法計(jì)算結(jié)果見表14。
表14 復(fù)方阿司匹林、磷酸川芎嗪靜脈注射給小鼠LD50及95％可信限組別 動(dòng)物數(shù) 劑量(mg/kg) 死亡數(shù)(n) 死亡率(P)1 10 1237.51012 10 928.5 9 0.93 10 696.4 3 0.34 10 522.3 1 0.1LD50＝731.7mg/kg LD50的95％可信限為604.7-858.7mg/kg結(jié)論復(fù)方阿司匹林灌胃和腹腔注射給小鼠LD50用Bliss法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)LD50及95％可信限分別為2143.4±171.0mg/kg、731.7±127.0mg/kg；阿司匹林灌胃給小鼠LD50及95％可信限為1559.7±288.0mg/kg；磷酸川芎嗪灌胃給小鼠LD50及95％可信限為1135.0±157.0mg/kg。以上數(shù)據(jù)說明Asp+Pal的藥物組合物其急性毒性小于Asp及Pal，也即更安全。
VI、胃腸道保護(hù)作用實(shí)驗(yàn)實(shí)施例10、對(duì)阿司匹林致小鼠急性胃潰瘍的影響取雄性小鼠80只，體重18-22g。共分8組，分別為模型對(duì)照組，單方Pal四個(gè)劑量組、復(fù)方阿司匹林三個(gè)劑量組。連續(xù)七天給藥，末次給藥前禁食不禁水24hr，給藥后30min灌胃給予72mg/kg Asp(0.2ml/10g)，4h后測定各組潰瘍指數(shù)局部充血發(fā)紅為1分，點(diǎn)狀出血或糜爛各為1分，線狀糜爛1個(gè)為3分，總計(jì)后作為指數(shù)，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
試驗(yàn)結(jié)果如表15所示小鼠連續(xù)灌胃給予Pal(5、10、20、40mg/kg)或Asp+Pal(25+25、50+50、100+100mg/kg)7天后，與正常對(duì)照組間比較，除5mg/kgPal外，其余各組對(duì)阿司匹林致小鼠急性潰瘍都有顯著或非常顯著的保護(hù)作用表15 單方磷酸川芎嗪和復(fù)方阿司匹林對(duì)阿司匹林致小鼠急性胃潰瘍的影響(n＝10，x±s)劑量 抑制率組別潰瘍指數(shù)(mg/kg) (％)模型組 -13.3±5.5 -Pal510.6±6.4 20.3Pal10 7.2±4.5*45.9Pal20 5.5±6.2**58.6Pal40 3.3±4.0***75.2Asp+Pal25+257.8±5.3*41.3Asp+Pal50+505.4±5.6**59.3Asp+Pal100+100 4.4±4.7**66.9與模型組比較*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001在本實(shí)驗(yàn)中，阿司匹林是潰瘍模型的致潰瘍藥物。Pal與Asp+Pal都表現(xiàn)出優(yōu)良的抗?jié)冃Ч?。有明顯地的量效關(guān)系。組合物劑量越大，抗?jié)冃Ч胶?。所以本發(fā)明所述的組合物很好地解決阿司匹林的胃腸道刺激性問題，尤其是大劑量時(shí)的胃潰瘍問題。
V、制劑的制備實(shí)施例11、普通片的制備根據(jù)表16所示的成分和含量，用常規(guī)制備片劑的方法制備成獨(dú)立的片。
表16組分 用量(mg)阿司匹林 75mg磷酸川芎嗪 75mg預(yù)膠化淀粉 150mg羧甲基淀粉鈉 20mg95％乙醇 適量滑石粉 5mg微粉硅膠 2mg
權(quán)利要求
1.一種新的解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗血小板聚集的藥物組合物，含有1)阿司匹林或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽；和2)川芎嗪或其藥學(xué)上可接受的鹽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗血小板聚集的藥物組合物，其中對(duì)于100重量份的阿司匹林或含有相當(dāng)量的其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽，所述的川芎嗪為27-432重量份或含有相當(dāng)量的其藥學(xué)上可接受的鹽。
3.根據(jù)權(quán)利要求1、2所述的解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗血小板聚集的藥物組合物，其配制成經(jīng)腸道給藥的口服制劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗血小板聚集的藥物組合物，其配制成固體制劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗血小板聚集的藥物組合物，其配制成片劑形式的單位制劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求4、5所述的解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗血小板聚集的藥物組合物，其所述的單位制劑含有1)25-600mg的阿司匹林或相當(dāng)于這些量的阿司匹林可藥用鹽、酯、酯的鹽；和2)13.5-324mg的川芎嗪或相當(dāng)于這些量的川芎嗪可藥用鹽；和3)可藥用載體。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗血小板聚集的藥物組合物，其所述的單位制劑優(yōu)選含有1)25-150mg的阿司匹林或相當(dāng)于這些量的阿司匹林可藥用鹽、酯、酯的鹽；和2)13.5-81mg的川芎嗪或相當(dāng)于這些量的川芎嗪可藥用鹽；和3)可藥用載體。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗血小板聚集的藥物組合物，其所述的單位制劑含有1)75mg的阿司匹林；和2)75mg的磷酸川芎嗪一水合物；和3)可藥用載體。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種新的解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗血小板聚集的藥物組合物及其制備。具體而言，是一種含有1)阿司匹林或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽；和2)川芎嗪或其藥學(xué)上可接受的鹽。其中對(duì)于100重量份的阿司匹林或含有相當(dāng)量的其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽，所述的川芎嗪為27－432重量份或含有相當(dāng)量的其藥學(xué)上可接受的鹽。通過該組合物的使用，阿司匹林及川芎嗪發(fā)揮協(xié)同作用，在保證療效的前提下，降低了阿司匹林的副作用，比如胃腸道刺激的副作用。
文檔編號(hào)A61P7/02GK1507870SQ02144970
公開日2004年6月30日 申請(qǐng)日期2002年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月20日
發(fā)明者王鵬, 王 鵬 申請(qǐng)人:沈陽華泰藥物研究有限公司