專利名稱：注射用大黃素、含大黃素的提取物在制備治療手術(shù)后胃腸功能恢復(fù)及預(yù)防腸粘連藥物的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種注射用大黃素及含有大黃素的提取物在制藥領(lǐng)域中的新應(yīng)用，具體涉及其在制備治療手術(shù)后胃腸功能恢復(fù)及預(yù)防腸粘連的藥物中的新應(yīng)用。
背景技術(shù)：
腹部手術(shù)是外科最常見的手術(shù)，一般手術(shù)后病人的胃腸功能比較虛弱，手術(shù)后胃腸功能的恢復(fù)對(duì)病人的康復(fù)，包括疾病的痊愈，減少腸粘連等并發(fā)癥，均具有重要意義。
恢復(fù)手術(shù)后的胃腸功能，主要是恢復(fù)一定強(qiáng)度的胃腸蠕動(dòng)。但由于手術(shù)后病人不能進(jìn)食，如果使胃的過早蠕動(dòng)，會(huì)因胃內(nèi)無食物而引起上腹不適。
據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，腹部手術(shù)后發(fā)生不同程度腸粘連的比例高達(dá)80-90％(Menies D，Ellis H.Intestinal obstruction from adhesion howbig is the problem.Ann R Coll Surg Engl，1990，7260)，手術(shù)后滲出的纖維蛋白，10小時(shí)起開始形成纖維粘連[靳珠華等.大黃素對(duì)豚鼠離體腸管作用的影響。《中國中西醫(yī)結(jié)合雜志》，1994，14(7)429～431]；而腸粘連的發(fā)生，與手術(shù)后的腹腔滲出及腸蠕動(dòng)過弱有關(guān)，減少滲出或改善蠕動(dòng)，將可減少粘連的發(fā)生。
目前，胃腸動(dòng)力藥物，對(duì)胃腸特別是胃的作用過強(qiáng)，易引起上腹不適及嘔吐，雖可促進(jìn)腸蠕動(dòng)藥物能促進(jìn)腸蠕動(dòng)，但不能減輕炎性反應(yīng)，減少炎性物質(zhì)及纖維蛋白滲出；且基本為口服給藥，因手術(shù)后禁食不能使用，因此，不適于手術(shù)后胃腸功能的恢復(fù)。
可減少腸粘連藥物有非甾體類抗炎藥和甾體類抗炎藥。甾體類抗炎藥如地塞米松能減輕炎性反應(yīng)，減少炎性物質(zhì)及纖維蛋白滲出，但抑制腸粘連發(fā)生的同時(shí)，也嚴(yán)重影響腹腔內(nèi)手術(shù)部位及腹壁切口的愈合；非甾體抗炎藥可減少滲出，但現(xiàn)在臨床使用劑量常常引起胃腸道不良反應(yīng)；促進(jìn)纖維蛋白溶解吸收的藥物有東菱克栓酶等，應(yīng)用時(shí)有出血傾向等副作用。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)上述技術(shù)缺陷，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種注射用大黃素在制備治療恢復(fù)胃腸功能及預(yù)防腸粘連的藥物的新用途。
其中，本發(fā)明中大黃素可以采用現(xiàn)有技術(shù)進(jìn)行化學(xué)合成或從植物中提取，但優(yōu)選從植物中提取。
本發(fā)明內(nèi)容進(jìn)一步為含有大黃素的植物提取物在制備治療胃腸功能恢復(fù)及預(yù)防腸粘連的藥物新用途，其中含有大黃素的提取物優(yōu)選從大黃、虎杖、何首烏或決明子中提取得到；當(dāng)從大黃植物中提取時(shí)，本發(fā)明中含有大黃素的植物提取物為含有大黃素的蒽醌提取物；優(yōu)選為含有大黃素的游離型蒽醌提取物。
在本發(fā)明中上述的含有大黃素的植物提取物當(dāng)中，大黃素在提取物中的重量百分比含量為22％-99％，優(yōu)選重量百分比為60-99％。
當(dāng)從大黃植物中提取時(shí)，本發(fā)明中含有大黃素的進(jìn)一步優(yōu)選為含有大黃素和蘆薈大黃素的游離蒽醌提取物，其中大黃素和蘆薈大黃素在提取物中的重量百分比含量為22％-99％，優(yōu)選重量百分比為60-99％。
本發(fā)明大黃素及含有大黃素的植物提取物在制備治療胃腸功能恢復(fù)及預(yù)防腸粘連的藥物的應(yīng)用中，本發(fā)明大黃素及含有大黃素的植物提取物的給藥方式為以注射方式給藥，如肌肉注射、腹腔注射、靜脈注射、皮下注射等，其中優(yōu)選靜脈注射；本發(fā)明中，大黃素及含有大黃素的植物提取物可以和本領(lǐng)域常規(guī)藥用輔料采用常規(guī)的制備工藝制成注射液或注射用凍干粉針劑以靜脈注射的方式給藥。
本發(fā)明中，進(jìn)一步優(yōu)選為大黃素或含有大黃素植物提取物和堿性物質(zhì)如氫氧化鉀、氫氧化鈉、碳酸鈉、碳酸氫鈉或胺等反應(yīng)制成大黃素鹽，然后單獨(dú)或和藥用輔料組合制成注射液或凍干粉針劑以靜脈注射方式給藥；優(yōu)選和胺反應(yīng)制成大黃素胺鹽，然后單獨(dú)或和藥用輔料組合制成注射液或凍干粉針劑以靜脈注射方式給藥。
更進(jìn)一步優(yōu)選為取大黃素加入甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇或丙酮溶液中，加熱使之溶解；另取甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇或丙酮溶解的葡甲胺溶液，在攪拌下將其滴加到大黃素溶液中，攪拌，過濾，減壓蒸除溶劑，干燥，即得大黃素葡甲胺鹽；然后采用常規(guī)的制備工藝將其單獨(dú)或和藥用輔料組合制成注射液或凍干粉針劑以靜脈注射方式給藥。
本發(fā)明大黃素及含有大黃素的提取物在制備治療胃腸功能恢復(fù)及預(yù)防腸粘連的藥物應(yīng)用中，其相對(duì)于成人的給藥劑量范圍為100～200mg/日(以大黃素計(jì)算)；其相對(duì)于大鼠的給藥劑量范圍為10～20mg/kg(以大黃素計(jì)算)。
本發(fā)明經(jīng)過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，手術(shù)后前期(手術(shù)后1-3天)靜脈注射給藥大黃素或含有大黃素的提取物，一次靜脈給藥10mg/kg(以大黃素計(jì)算)對(duì)大鼠結(jié)腸墨汁有明顯的推動(dòng)作用，明顯增加大鼠在體回腸張力與活動(dòng)力；一次靜脈給藥5mg/kg明顯抑制小鼠毛細(xì)血管通透性；靜脈給藥10mg/kg7天明顯抑制大鼠棉球肉牙腫形成；用藥5天明顯抑制大鼠腸粘連的形成，表明大黃素能減輕炎性反應(yīng)，減少炎性物質(zhì)及纖維蛋白滲出，促進(jìn)胃腸蠕動(dòng)藥物。
本發(fā)明注射用大黃素及含有大黃素的植物提取物在制備治療胃腸功能恢復(fù)及預(yù)防腸粘連的藥物新應(yīng)用，具有療效好，副作用低；并克服了手術(shù)后短期內(nèi)(手術(shù)后1-3日)口服給藥而不利于胃腸功能恢復(fù)的缺陷。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合實(shí)驗(yàn)例和實(shí)驗(yàn)例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的闡述，但并不受限于此。
實(shí)施例1、大黃素的制備取虎杖粗粉100g，加入3倍量95％乙醇加熱回流3次，每次1小時(shí)，合并提取液，減壓濃縮成浸膏，然后用少量95％乙醇加熱溶解，之后加10倍量水稀釋，用酸調(diào)至PH＝2，攪拌、靜置、抽濾得棕色粉末沉淀，然后用吡啶加乙醇重結(jié)晶，即得大黃素，為橙黃色晶體。
實(shí)施例2、含有大黃素的游離性蒽醌提取物制備。
大黃粗粉100g，加入5倍量70％乙醇加熱回流水解1小時(shí)，抽濾，用2倍量70％乙醇清洗，合并濾液并減壓濃縮至原液體積的30％，得稀糖漿狀物，趁熱加入濃HCL(1體積濃鹽酸/10倍量藥材)攪拌10min以上，然后加入甲苯(2體積/1倍量藥材)加熱回流1小時(shí)以上，分液，甲苯層(上層液)用5％的Na2CO3溶液萃取，往Na2CO3萃取液中加鹽酸調(diào)PH值為2，過濾、水洗至中性、干燥即得，棕色粉末。
實(shí)施例3、大黃素葡甲胺鹽的制備稱取2.7g大黃素，加入300ml乙醇，加熱使之溶解；另取1.95g葡甲胺，用100ml乙醇超聲溶解，在攪拌下，將葡甲胺乙醇液滴加到大黃素乙醇液中，加畢，繼續(xù)攪拌30分鐘，濾液減壓蒸除溶劑，加水溶解，過濾，冷凍干燥即得。
實(shí)施例4、大黃素葡甲胺鹽的制備稱取2.7g大黃素，加入300ml丙酮，加熱使之溶解；另取1.95g葡甲胺，用100ml丙酮加熱溶解，制得葡甲胺甲醇溶液，攪拌下將葡甲胺丙酮液滴加到大黃素丙酮液中，加畢，繼續(xù)攪拌30分鐘，過濾，濾液減壓蒸除溶劑，干燥即得。
實(shí)施例5、大黃素注射液的制備取大黃素葡甲胺10g，用注射用水溶解至1000ml，調(diào)節(jié)PH值，過濾、除熱原，分裝，滅菌后即得大黃素注射液。
實(shí)施例6、大黃素凍干粉針劑的制備取大黃素葡甲胺10g，5％甘露醇，用注射用水溶解至1000ml溶解，過濾、除熱原，分裝，采用常規(guī)凍干工藝制成凍干粉針劑。
以下實(shí)驗(yàn)例1-5中所用的大黃素均為按本發(fā)明實(shí)施例5的方法制備而獲得的。
試驗(yàn)例1、大黃素對(duì)大鼠結(jié)腸推動(dòng)的影響取大鼠50只，雄性，體重180～220g，分5組，20％烏拉坦麻醉，麻醉體積0.5mg/100g，沿大鼠腹中線剪開，找出回盲端，回盲端中部注射墨汁，注射體積0.5ml/只，隨后立即靜脈給藥，給藥體積0.4ml/100g，模型組給予同體積的NS，2小時(shí)后處死大鼠，以墨汁在結(jié)腸中的推進(jìn)距離與結(jié)腸總長(zhǎng)之比值為指標(biāo)，進(jìn)行組間t檢驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果如下(表1)表1 大黃素對(duì)大鼠結(jié)腸墨汁的推進(jìn)影響組別 劑量 推進(jìn)距離結(jié)腸長(zhǎng)度推進(jìn)率(％)NS 2.5±2.114.3±0.9 17.2±14.8硫酸新斯的明 0.10mg/kg 5.9±1.115.6±0.58 37.5±5.9ΔΔ大黃素高劑量組20mg/kg4.9±2.714.5±0.8 33.6±18.7Δ大黃素中劑量組10mg/kg4.4±1.914.5±0.7 30.2±13.9Δ大黃素低劑量組5mg/kg 3.6±2.013.8±0.7 26.6±15.6ΔΔP＜0.01；ΔP＜0.05試驗(yàn)結(jié)果表明 大黃素高劑量組、中劑量組與模型組比較，對(duì)大鼠結(jié)腸墨汁推進(jìn)有明顯作用，P＜0.05；大黃素低劑量組對(duì)大鼠結(jié)腸墨汁推進(jìn)沒有顯著性作用，但有一定趨勢(shì)。
試驗(yàn)例2、大黃素對(duì)小鼠毛細(xì)血管通透性的影響取小鼠60只，雄性，體重19～21g，隨機(jī)分為5組，每組12只，給藥體積0.20ml/20g，給藥后立即給小鼠靜脈注射0.5％伊文思藍(lán)溶液，給藥體積0.20ml/20g。隨即腹腔注射1.0％的醋酸0.20ml，20分鐘后處死小鼠，吸取6.0ml生理鹽水，注入腹腔，輕揉腹部，吸取腹腔液，離心(3000rpm，10min)，于590nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收值，進(jìn)行組間t檢驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果如下(表2)表2 大黃素對(duì)小鼠毛細(xì)血管通透性的影響組別 劑量 ODSNS 0.603±0.159雙氯芬酸鈉5mg/kg0.301±0.102ΔΔ大黃素高劑量組20mg/kg 0.469±0.103Δ大黃素中劑量組10mg/kg 0.487±0.099Δ大黃素低劑量組5mg/kg0.579±0.134Δp＜0.05；ΔΔp＜0.01試驗(yàn)結(jié)果表明大黃素高劑量組、中劑量組與模型組比較，對(duì)抑制小鼠毛細(xì)血管通透性有明顯作用，P＜0.05。
試驗(yàn)例3、大黃素對(duì)大鼠腸粘連的影響動(dòng)物禁食16h，以10％水合氯醛腹腔內(nèi)麻醉。麻醉體積0.35ml/100g，麻醉后將大鼠仰臥固定于手術(shù)板上，腹部脫毛，消毒皮膚，鋪無菌巾，取下腹部正中長(zhǎng)約2cm切口，提出盲腸，置于干紗布上約5分鐘，使?jié){膜干燥，以解剖刀片輕刮整個(gè)盲腸漿膜10遍，造成輕度滲血，以止血鉗用同樣力度夾小腸兩下，再滴入無水酒精于創(chuàng)面上。分兩層以1-0絲線關(guān)腹，隨機(jī)分組，隨后立即給藥，分籠飼養(yǎng)。每天給藥一次，給藥體積0.4ml/100g，模型組給予同體積的NS，陽性對(duì)照組給予地塞米松，隔天給藥，劑量10mg/kg，給藥體積同給藥組。術(shù)后第7d處死，腹部取“n”形切口開腹，分別進(jìn)行粘連程度分級(jí)評(píng)分。觀察指標(biāo)粘連程度分級(jí)判斷標(biāo)準(zhǔn)參考Nair1制定的5級(jí)分類法，確定分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，見附表1，試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行組間秩和檢驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果如下(表3、4)表3 腸粘連程度分級(jí)評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)

表4 iv大黃素對(duì)大鼠腸粘連的影響

試驗(yàn)結(jié)果表明大黃素高劑量組、中劑量組與模型組比較，對(duì)抑制大鼠腸粘連有明顯作用，P＜0.05。
試驗(yàn)例4、大黃素對(duì)棉球致大鼠肉牙腫形成的影響大鼠隨機(jī)分為5組(生理鹽水組，陽性藥組，EMD大、中、小劑量組)，每組10只，乙醚麻醉，肩胛部皮膚碘酊消毒，酒精脫碘，肩胛間切一1cm的切口，止血鉗鈍性分離兩側(cè)皮膚與皮下組織，切口兩側(cè)皮下各植入消毒棉球一個(gè)(重19.8～20.2mg)，縫合切口。手術(shù)當(dāng)日開始給藥。陽性對(duì)照組隔日im注射給藥一次，給藥劑量10mg/kg，給藥體積0.4ml/100g；生理鹽水組及EMD給藥組，每次給藥體積0.4ml/100g。一周后脫臼處死，取出棉球，剔除脂肪組織，70℃烘24小時(shí)，稱重，減去棉球原重，即為肉牙腫重量，進(jìn)行組間t檢驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果如下(表5)表5 大黃素對(duì)大鼠棉球肉牙腫形成的影響組別 劑量(mg/kg)肉牙腫重(mg)生理鹽水組-42.2±12.5地塞米松組10 13.6±4.8ΔΔ大黃素低劑量組537.2±6.9大黃素中劑量組10 27.8±7.0ΔΔ大黃素高劑量組20 21.0±5.2ΔΔΔΔP＜0.01，與生理鹽水組比較。
試驗(yàn)結(jié)果表明iv大黃素高劑量組、中劑量組與模型組比較，對(duì)抑制大鼠棉球肉牙腫形成有明顯作用，P＜0.01。
試驗(yàn)例5、大黃素對(duì)在體大鼠小腸張力的影響取大鼠30只，體重180～220g，雌雄各半，20％烏拉坦麻醉，麻醉體積0.5mg/100g，沿大鼠腹中線剪開，找出距回盲部3cm處回腸，兩頭固定，腸中點(diǎn)穿孔縫一棉線與換能器連接，張力為2g，用Powerlab記錄一段正常收縮曲線后，靜脈給藥，給藥組劑量為10mg/kg，給藥體積0.4ml/100g，陽性對(duì)照組給予im新斯的明劑量為0.10mg/kg，給藥體積0.4ml/100g，模型組給予NS，給予體積同給藥組。觀察給藥后1小時(shí)后小腸張力與收縮頻率，進(jìn)行組間t檢驗(yàn)。
試驗(yàn)結(jié)果如下(表6)表6 iv大黃素對(duì)在體大鼠小腸張力、頻率、活動(dòng)力的影響

ΔΔ P＜0.01，與生理鹽水組比較試驗(yàn)結(jié)果表明iv大黃素10mg/kg與模型組比較，對(duì)大鼠小腸張力與活動(dòng)力有明顯的升高作用，P＜0.01。
權(quán)利要求
1.一種注射用大黃素在制備治療手術(shù)后胃腸功能恢復(fù)及預(yù)防腸粘連的藥物的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物的應(yīng)用，其特征為注射用含有大黃素的植物提取物在制備治療手術(shù)后胃腸功能恢復(fù)及預(yù)防腸粘連的藥物的應(yīng)用。
3.權(quán)利要求2所述的藥物的應(yīng)用，其特征為含有大黃素的大黃植物提取物在制備治療手術(shù)后胃腸功能恢復(fù)及預(yù)防腸粘連的藥物中的應(yīng)用。
4.據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物的應(yīng)用，其特征為含有大黃素的虎杖植物提取物在制備治療手術(shù)后胃腸功能恢復(fù)及預(yù)防腸粘連的藥物的應(yīng)用。
5.據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物的應(yīng)用，其特征為含有大黃素的何首烏或決明子植物提取物在制備治療手術(shù)后胃腸功能恢復(fù)及預(yù)防腸粘連的藥物的應(yīng)用。
6.根據(jù)權(quán)利要求3的藥物的應(yīng)用，其特征在于含有大黃素的大黃植物提取物為含有大黃素的蒽醌提取物在制備治療手術(shù)后胃腸功能恢復(fù)及預(yù)防腸粘連的藥物的應(yīng)用。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的藥物的應(yīng)用，其特征在于含有大黃素的植物提取物為含有大黃素的游離型蒽醌提取物在制備治療手術(shù)后胃腸功能恢復(fù)及預(yù)防腸粘連的藥物的應(yīng)用。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的藥物的應(yīng)用，其特征在于含有大黃素的植物提取物為含大黃素和蘆薈大黃素的游離型蒽醌提取物在制備治療手術(shù)后胃腸功能恢復(fù)及預(yù)防腸粘連的藥物的應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求2-7任一所述的藥物的應(yīng)用，其特征在大黃素在提取物中重量百分比含量為20-99％。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的藥物的應(yīng)用，其特征為大黃素和蘆薈大黃素在提取物中重量百分比含量為20-99％。
11.根據(jù)上述任一權(quán)利要所述的藥物的應(yīng)用，其特征在于大黃素或含有大黃素的提取物可以和藥用輔料組合以注射的方式給藥。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的藥物的應(yīng)用，其特征在于大黃素或含有大黃素的提取物可以和藥用輔料組合以靜脈注射方式給藥。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的藥物的應(yīng)用，其特征在于大黃素或含有大黃素的提取物和堿性物質(zhì)反應(yīng)制成大黃素鹽，然后可以和藥用輔料組合制成注射液或凍干粉針劑以靜脈注射方式給藥
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的藥物的應(yīng)用，其特征在于大黃素或含有大黃素的提取物和胺反應(yīng)制成大黃素胺鹽，然后可以和藥用輔料組合制成注射液或凍干粉針劑以靜脈注射方式給藥。
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的藥物的應(yīng)用，其特征在于取大黃素加入甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇或丙酮溶液中，加熱使之溶解；另取甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇或丙酮溶解的葡甲胺溶液，在攪拌下將其滴加到大黃素溶液中，攪拌，過濾，減壓蒸除溶劑，干燥，得大黃素葡甲胺鹽；然后采用常規(guī)的制備工藝將其單獨(dú)或和藥用輔料組合制成注射液或凍干粉針劑以靜脈注射方式給藥。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種注射用大黃素及含有大黃素的提取物在制備治療手術(shù)后胃腸功能恢復(fù)及預(yù)防腸粘連的藥物中的新應(yīng)用，具有療效好，副作用低；并克服了手術(shù)后短期內(nèi)口服給藥而不利于胃腸功能恢復(fù)的缺陷。
文檔編號(hào)A61P41/00GK1489993SQ02146279
公開日2004年4月21日 申請(qǐng)日期2002年10月18日 優(yōu)先權(quán)日2002年10月18日
發(fā)明者傅風(fēng)華, 蔣王林, 孫盛茂, 田京偉, 劉珂 申請(qǐng)人:山東綠葉天然藥物研究開發(fā)有限公司