專利名稱：用于預(yù)防和治療內(nèi)臟疼痛和胃腸疾病的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種通過使用有效量的雙環(huán)氨基酸預(yù)防或治療內(nèi)臟疼痛和胃腸疾病如功能性腸病和炎性腸病的方法。
背景技術(shù)：
內(nèi)臟包含腹腔的器官。這些器官包括性器官、脾或消化系統(tǒng)的部分。與內(nèi)臟有關(guān)的疼痛分為消化性內(nèi)臟疼痛和非消化性內(nèi)臟疼痛。
常見的胃腸(GI)疾病包括功能性腸病(FBD)和炎性腸病(IBD)。這些GI疾病包括大量的目前僅適度控制的病癥-關(guān)于FBD包括胃食管反流、消化不良、腸易激綜合征(IBS)和功能性腹痛綜合征(FAPS)；而關(guān)于IBD包括節(jié)段性回腸炎、回腸炎和潰瘍性結(jié)腸炎，所有這些通常都產(chǎn)生內(nèi)臟疼痛。在這些病理學(xué)，特別是腸易激綜合征和消化不良中，目前已顯示表征內(nèi)臟過敏性的內(nèi)臟疼痛閾降低。其它類型的內(nèi)臟疼痛包括與痛經(jīng)、骨盆痛、膀胱炎和胰腺炎有關(guān)的疼痛。
已知少數(shù)藥物選擇性作用于與GI疾病相關(guān)的過敏性(FarthingM.J.(1998)Drugs5611-21)。
可獲得的疼痛治療劑分成兩大類1)非甾體類抗炎藥，用于治療輕度疼痛，但其治療用途受GI不良作用(胃糜爛，消化性潰瘍形成，十二指腸和結(jié)腸的炎癥)限制；2)嗎啡和相關(guān)的類阿片，用于治療中度至重度疼痛，但其治療用途受不期望的副作用，包括便秘、呼吸抑制、耐受和濫用可能性的限制。
國際專利公開WO 99/21824公開環(huán)氨基酸及其衍生物用于治療胃腸疾病如腸易激綜合征的用途。
需要能夠緩解內(nèi)臟疼痛并沒有不良副作用的藥物。
發(fā)明概述已發(fā)現(xiàn)式I-IV的化合物(以下羅列)用于治療疾病如內(nèi)臟疼痛，F(xiàn)BD如胃食管反流、消化不良、IBS和FAPS和IBD如節(jié)段性回腸炎、回腸炎和潰瘍性結(jié)腸炎，和與痛經(jīng)、骨盆痛、膀胱炎和胰腺炎有關(guān)的其它類型的內(nèi)臟疼痛。本發(fā)明者意外地發(fā)現(xiàn)式I-IV的化合物具有預(yù)防或治療與諸如以下內(nèi)臟疼痛有關(guān)的能力-FBD，包括胃食管反流、消化不良、IBS和FAPS，和-IBD，包括節(jié)段性回腸炎、回腸炎和潰瘍性結(jié)腸炎，和-與痛經(jīng)、骨盆痛、膀胱炎和胰腺炎有關(guān)的其它類型的內(nèi)臟疼痛。
本發(fā)明涉及式I-IV的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽用于制備用于預(yù)防或治療內(nèi)臟疼痛的藥物的用途， 其中n為1-4的整數(shù)，如果存在立構(gòu)中心，則每個立構(gòu)中心可以獨立地為R或S。
優(yōu)選的本發(fā)明化合物為以上式I-IV的化合物，其中n為2-4的整數(shù)。
本發(fā)明還涉及式I-IV的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽用于制備用于預(yù)防或治療胃腸疾病的藥物的用途，其中n為1-4的整數(shù)，優(yōu)選n為2-4的整數(shù)。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方案中，該化合物為式I的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。
在一個最優(yōu)選的實施方案中，該化合物選自(1α，6α，8β)(2-氨基甲基-八氫-茚-2-基)-乙酸，(2-氨基甲基-八氫-茚-2-基)-乙酸，(2-氨基甲基-八氫-并環(huán)戊二烯-2-基)-乙酸，(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚-3-基)-乙酸，(1α，3α，5α)-3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚烷-3-乙酸，(1α，5β)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)-乙酸，(1α，5β)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚-3-基)-乙酸，(1α，5β)(2-氨基甲基-八氫-并環(huán)戊二烯-2-基)-乙酸，(1α，6β)(2-氨基甲基-八氫-茚-2-基)-乙酸，(1α，7β)(2-氨基甲基-十氫-薁-2-基)-乙酸，(1α，5β)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)-乙酸，(1α，5β)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚-3-基)-乙酸，(1α，5β)(2-氨基甲基-八氫-并環(huán)戊二烯-2-基)-乙酸，(1α，6β)(2-氨基甲基-八氫-茚-2-基)-乙酸，(1α，7β)(2-氨基甲基-十氫-薁-2-基)-乙酸，(1α，3α，5α)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)-乙酸，(1α，3α，5α)(2-氨基甲基-八氫-并環(huán)戊二烯-2-基)-乙酸，(1α，6α，8α)(2-氨基甲基-八氫-茚-2-基)-乙酸，(1α，7α，9α)(2-氨基甲基-十氫-薁-2-基)-乙酸，(1α，3β，5α)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)-乙酸，(1α，3β，5α)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚-3-基)-乙酸，(1α，3β，5α)(2-氨基甲基-八氫-并環(huán)戊二烯-2-基)-乙酸，(1α，6α，8β)(2-氨基甲基-八氫-茚-2-基)-乙酸，(1α，7α，9β)(2-氨基甲基-十氫-薁-2-基)-乙酸，((1R，3R，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1R，3S，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1S，3S，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1S，3R，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，
((1R，3R，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((1R，3S，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((1S，3S，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((1S，3R，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((3αR，5R，7αS)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((3αR，5S，7αS)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((3αS，5S，7αR)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((3αS，5R，7αR)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((2R，4αS，8αR)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2S，4αS，8αR)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2S，4αR，8αS)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2R，4αR，8αS)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2R，4αS，9αR)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯(benzocyclophepten)-2-基)-乙酸，((2S，4αS，9αR)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，((2S，4αR，9αS)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，((2R，4αR，9αS)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，((1 R，3R，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1R，3S，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1S，3S，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1S，3R，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1R，3R，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((1R，3S，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((1S，3S，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((1S，3R，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((3αR，5R，7αR)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((3αR，5S，7αR)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((3αS，5S，7αS)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((3αS，5R，7αS)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，
((2R，4αR，8αR)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2S，4αS，8αR)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2S，4αR，8αS)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2R，4αS，8αS)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2R，4αR，9αR)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，((2S，4αR，9αR)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，((2S，4αS，9αS)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，和((2R，4αS，9αS)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，或其藥學(xué)上可接受的鹽。
優(yōu)選本發(fā)明涉及式Ia的(1α，3α，5α)-3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚烷-3-乙酸或其藥學(xué)上可接受的鹽用于制備用于預(yù)防或治療內(nèi)臟疼痛的藥物的用途和用于制備用于預(yù)防或治療胃腸疾病的藥物的用途。
更具體地，本發(fā)明涉及式I-IV的化合物用于制備用于預(yù)防或治療以下疾病的用途-功能性腸病，包括胃食管反流、消化不良、腸易激綜合征或功能性腹痛綜合征，-炎性腸病，包括節(jié)段性回腸炎、回腸炎或潰瘍性結(jié)腸炎-與痛經(jīng)、骨盆痛、膀胱炎痛和胰腺炎有關(guān)的疾病。
根據(jù)本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方案，該藥物為口服制劑。
本發(fā)明提供一種用于治療或預(yù)防內(nèi)臟疼痛和GI疾病的藥物組合物，所述組合物包含活性成分式I-IV的化合物，優(yōu)選該組合物包含式Ia的(1α，3α，5α)-3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚烷-3-乙酸
因此，該藥物組合物用于治療或預(yù)防選自下列的疾病功能性腸病如胃食管反流、消化不良、腸易激綜合征或功能性腹痛綜合征，炎性腸病如節(jié)段性回腸炎、回腸炎或潰瘍性結(jié)腸炎，和與痛經(jīng)、骨盆痛、膀胱炎痛和胰腺炎有關(guān)的疾病。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方案中，該藥物組合物為適于口服的劑型。
本發(fā)明提供一種用于預(yù)防或治療內(nèi)臟疼痛的方法，所述方法包括給需要治療的患者施用有效量的式I-IV的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽 其中n為1-4的整數(shù)，如果存在立構(gòu)中心，則每個立構(gòu)中心可以獨立地為R或S。
本發(fā)明的優(yōu)選的化合物為以上式I-IV的化合物，其中n為2-4的整數(shù)。
本發(fā)明還涉及一種用于預(yù)防或治療胃腸疾病的方法，所述方法包括給需要治療的患者施用有效量的上述式I-IV的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中n為1-4的整數(shù)，優(yōu)選2-4的整數(shù)。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方案中，該化合物為式I的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。
根據(jù)本發(fā)明的方法，該化合物優(yōu)選選自前述的化合物名稱清單。
在一個最優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明提供一種用于預(yù)防或治療內(nèi)臟疼痛的方法，所述方法包括給需要治療的患者施用有效量的(1α，3α，5α)-3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚烷-3-乙酸或其藥學(xué)上可接受的鹽；和一種用于預(yù)防或治療胃腸疾病的方法，所述方法包括給需要治療的患者施用有效量的(1α，3α，5α)-3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚烷-3-乙酸或其藥學(xué)上可接受的鹽。
更具體地，本發(fā)明提供一種用于預(yù)防或治療以下疾病的方法，特別是通過口服途徑-功能性腸病，包括胃食管反流、消化不良、腸易激綜合征或功能性腹痛綜合征，-炎性腸病，包括節(jié)段性回腸炎、回腸炎或潰瘍性結(jié)腸炎-與痛經(jīng)、骨盆痛、膀胱炎痛和胰腺炎有關(guān)的疾病。
附圖的簡要說明

圖1式Ia化合物對LPS誘導(dǎo)的直腸痛覺過敏的劑量反應(yīng)曲線。*＝p＜0.05發(fā)明詳述本發(fā)明者已表明式I-IV化合物在口服時有效地用于治療內(nèi)臟疼痛。所采用的一種藥理學(xué)模型為TNBS誘導(dǎo)的大鼠慢性內(nèi)臟疼痛模型(Diop L.et al，Gastroenterology 1999，116，4(2)A986)。更具體地，本發(fā)明者已意外地表明式Ia的化合物對TNBS誘導(dǎo)的慢性內(nèi)臟疼痛模型中的內(nèi)臟疼痛的效力比加巴噴丁大20倍。
而且，在LPS誘導(dǎo)的大鼠內(nèi)臟疼痛的直腸過敏性模型(Eutamene H等人，J Pharmacol Exp Ther 2000 295(1)162-7)中，式Ia化合物表現(xiàn)為可有效地治療內(nèi)臟疼痛。在此模型中，該化合物已表現(xiàn)比加巴噴丁大500倍的內(nèi)臟疼痛治療效力。
式I-IV的化合物可以以一種溶劑化物、水合物、藥學(xué)上可接受的鹽或多晶型物(不同的晶格描述符)的形式使用。
由于氨基酸是兩性的，藥理學(xué)上可接受的鹽可以是諸如以下的適宜的無機酸或有機酸的鹽鹽酸、硫酸、磷酸、乙酸、草酸、乳酸、檸檬酸、蘋果酸、水楊酸、丙二酸、馬來酸、琥珀酸和抗壞血酸。從對應(yīng)的氫氧化物或碳酸鹽開始，可以形成含有諸如以下的堿金屬或堿土金屬的鹽鈉、鉀、鎂或鈣。例如，還可以用例如四甲基銨離制備含有季銨離子的鹽。(還參見″Pharmaceutical salts″，Berge S.M.等人，(1997)J.Pharm.Sci.661-19，本文引用作為參考)。
式I-IV的化合物的前藥包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。氨基酰基-羥基乙酸(glycolic)和乳酸酯已知為氨基酸的前藥(Wermuth C.G.，Chemistry and Industry，1980433-435)。氨基酸的羰基可以由已知的方法酯化。前藥和軟性藥物(soft drugs)在本技術(shù)中是已知的(Palomino E.，Drugs of the Future，1990；15(4)361-368)。本文引用最后兩篇引文作為參考。
口服藥物的效力取決于藥物傳送通過粘膜上皮的效力和其在腸肝循環(huán)中的穩(wěn)定性。在腸胃外施用后有效但口服效力較小或者血漿半衰期認為太短的藥物可以被化學(xué)修飾成前藥形式。
前藥是已被化學(xué)修飾且可能在其作用部位無生物活性的藥物，但它可能在體內(nèi)過程中被一種或多種酶或其它物質(zhì)降低和修飾成生物活性形式。
這種化學(xué)修飾的藥物或前藥應(yīng)該具有不同于母體的藥代動力學(xué)曲線，使其能夠更容易地吸收跨過粘膜上皮，更好地形成鹽和/或具有更好的溶解度，改善的系統(tǒng)穩(wěn)定性(例如用于增加血漿半衰期)。這些化學(xué)修飾可以是1)可以被酯酶或脂肪酶裂解的酯或酰胺衍生物。對于酯衍生物，酯可以由藥物分子的羧酸部分通過已知方法衍生。對于酰胺衍生物，酰胺可以由藥物分子的羧酸部分或胺部分通過已知方法衍生。
2)可以被特異性或非特異性蛋白酶認別的肽?？梢园凑找阎椒ㄊ闺耐ㄟ^與藥物分子的胺或羧酸部分形成酰胺鍵而結(jié)合到藥物分子上。
3)通過前藥形式或修飾的前藥形式的膜選擇而蓄積在作用部位的衍生物。
4)1)-3)的任意組合。
目前的動物實驗研究已表明可以通過制備“軟”季鹽而增加某些藥物的口服吸收。季鹽稱為“軟”季鹽的原因是與普通的季鹽如R-N+(CH3)3不同，其可以在水解時釋放活性藥物。
“軟”季鹽具有比堿性藥或其鹽有用的物理性能。與其它鹽相比水溶性增大，但更為重要的是藥物的腸吸收增加。增加的吸收可能是由以下事實導(dǎo)致的“軟”季鹽具有表面活性劑性能并能夠與膽酸等形成膠束和未離子化的離子對，從而能夠更為有效地穿透腸上皮。前藥在吸收后快速地水解并釋放活性母體藥物。
本發(fā)明的化合物可以非溶劑化形式或溶劑化形式，包括水合形式存在。一般地，溶劑化形式等同于非溶劑化形式，且意在包括于本發(fā)明的范圍內(nèi)。
術(shù)語“患者”意指包括哺乳動物，特別是人。
實施根據(jù)本發(fā)明的預(yù)防或治療內(nèi)臟疼痛和GI疾病如FBD或IBD的方法所需條件是施用足以預(yù)防或治療損害癥狀，即足以控制內(nèi)臟疼痛和/或FBD或IBD量的式I-IV的化合物。待使用的式I-IV的化合物的有效量一般為大約1至大約300mg/kg患者體重。對于正常體重的成人患者典型的劑量為大約10至大約5000mg/天。
典型的FBD癥狀包括胃食管反流病、消化不良和IBS和FAPS。
典型的IBD癥狀包括回腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎和節(jié)段性回腸炎。
其它內(nèi)臟疼痛病包括與痛經(jīng)、膀胱炎、骨盆痛和胰腺炎有關(guān)的疼痛。
本發(fā)明另一方面提供一種用于治療或預(yù)防內(nèi)臟疼痛和GI疾病的藥物組合物，所述組合物包含活性成分式I-IV的化合物。本發(fā)明的藥物組合物-包括它的一種鹽，是通過配制劑量單元形式的活性成分和至少一種藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑而生產(chǎn)的。對于由本發(fā)明所用的化合物制備藥物組合物，惰性、藥學(xué)上可接受的載體可以是固體或液體。
用于口服的固體劑型包括膠囊、片劑、丸劑、散劑和顆粒劑。它們優(yōu)選含有大約5％至大約70％的式I-IV的化合物。在這種固體劑型中，將活性成分與以下成分混合物至少一種惰性常規(guī)賦形劑(如載體)如檸檬酸鈉或磷酸二鈣或(a)填充劑或膨脹劑如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖和硅酸，(b)粘合劑如羧甲基纖維素、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯樹膠，(c)濕潤劑如甘油，(d)崩解劑如瓊脂-瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯淀粉、藻酸、某些復(fù)合硅酸鹽和碳酸鈉，(e)溶液延時劑如石蠟，(f)吸收促進劑如季銨化合物，(g)潤濕劑如十六烷醇和單硬脂酸甘油酯，(h)吸附劑如高嶺土和膨潤土，和(i)潤滑劑如滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、月桂基硫酸鈉或其混合物。在膠囊、片劑和丸劑的情況下，該劑型還可以包含緩沖劑。
使用賦形劑如乳糖和高分子量聚乙二醇等，可以將類似類型的固體組合物作為軟和硬填充的明膠膠囊使用。
固體劑型如片劑、糖衣丸、膠囊、丸劑和膠囊可以與包衣和殼，如腸衣和本領(lǐng)域技術(shù)中已知的其它包衣一起制備。它們還可以是以延遲方式在腸道的某個部分釋放活性成分的組合物?？梢允褂玫陌窠M合物的實例為聚合物和蠟。如果合適的話，活性成分還可以是微膠囊的形式，含有一種或多種上述的賦形劑。
用于口服的液體劑型包括藥學(xué)上可接受的乳液、溶液、懸浮液、糖漿和酏劑。除了式I-IV的化合物，液體劑型可以包含本技術(shù)中常用的惰性稀釋劑如水或其它溶劑、增溶劑和乳化劑，例如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酸、芐醇等等。
除了活性成分，懸浮液可以包含懸浮劑如乙氧化的異十八烷醇、聚氧乙烯山梨醇酯和脫水山梨糖醇酯、微晶纖維素、偏氫氧化鋁、膨潤土、瓊脂-瓊脂和黃蓍膠或這些物質(zhì)的混合物等。
用于直腸施用的組合物優(yōu)選為栓劑，它可以通過混合本發(fā)明的化合物和適宜的非刺激性賦形劑或載體如可可油、聚乙二醇或栓劑蠟制成，這些賦形劑或載體在常溫下為固體但在體溫下為液體，并因此而在直腸熔化中并釋放活性成分。
適于腸胃外注射的組合物可以包含生理學(xué)上可接受的無菌含水或非水溶液、分散液、懸浮液或乳液，和用于重組成為無菌注射液或分散液的無菌粉末。適宜的液體載體、稀釋劑、溶劑或賦形劑包括水、乙醇、多元醇(丙二醇、聚乙二醇、甘油等)和它們的適宜混合物。
這些組合物還可以包含助劑如防腐劑、潤濕劑、乳化劑和分散劑?？梢允褂枚喾N抗菌劑和抗真菌劑如對羥基苯甲酸酯、氯代丁醇、苯酚、山梨酸等確保防止微生物的作用。還可以期望包括等滲試劑，如糖、氯化鈉等。
優(yōu)選藥物制劑為單元劑型。在這種劑型中，制劑分成含有適量式I-IV的化合物的單元劑量。該單元劑型可以是包裝制劑，該包裝包含分離數(shù)量的制劑，例如在小瓶和安瓿中的包裝片劑、膠囊和散劑。單元劑型還可以是膠囊、扁囊劑或片劑本身，或者它可以是適宜數(shù)量的任何這些包裝劑型。單元劑型的某些實例為片劑、膠囊、丸劑、散劑、栓劑、含水和非水口服液和懸浮劑，以及包裝在容器中含有一種或一些較大量的劑量單元并能夠分成單獨劑量的非腸道液體。
前述組合物中活性成分的百分率可以在寬范圍內(nèi)變化，但為實用目的，優(yōu)選在固體組合物中的濃度為至少10％，而在原始液體組合物中的濃度為至2％。最令人滿意的組合物是其中活性成分以較高的比例，如10wt％-90wt％存在的組合物。
式I-IV的化合物或它們的鹽的施用途徑為腸胃外施用，優(yōu)選口服或通過灌腸。例如，有用的口服劑量為1mg-1g，優(yōu)選20mg-800mg，而有用的靜脈內(nèi)劑量為0.1mg-1g，更優(yōu)選5mg-50mg。劑量在內(nèi)臟疼痛和GI疾病如FBD或IBD的治療中所使用劑量范圍內(nèi)，且將由醫(yī)師根據(jù)所述患者的需要而定。
本發(fā)明所用的式I-IV的化合物的單元劑型還可以包含其它用于治療內(nèi)臟疼痛和GI疾病的化合物。
在本發(fā)明中使用式I-IV化合物的優(yōu)點包括化合物具有對內(nèi)臟疼痛的選擇性活性，化合物相對無毒，制備容易，化合物被良好耐受并且藥物的靜脈注射、特別是口服給藥容易。
實施例以下通過實施例1-9描述式I-IV的化合物的合成方法。通過實施例10和11描述生物學(xué)實施例。
合成實施例實施例1(±)-(1α，6β)(2-氨基甲基-八氫-茚-2-基)-乙酸鹽酸鹽 步驟(i)0℃下和氬氣氛下將氫化鈉(0.11mg，2.7mmol)與THF(5mL)一起攪拌。滴加膦?；宜崛阴?0.5mL)并將溶液攪拌10分鐘。滴加在THF(5mL)中的酮(0.37g，7.7mmol)并攪拌和加熱至室溫。18小時后，用水(80mL)和乙醚(3×20mL)分離反應(yīng)混合物。真空下除去溶劑得到一種黃色油，通過閃式色譜法(二氧化硅，庚烷/EtOAC 19∶1)將其純化。得到0.34g(62％)酯，為一種無色油1H NMR(CDCl3)(400 MHz)1.05-1.29(9H，m，環(huán)質(zhì)子+CH3)，1.76-1.78(2H，m，環(huán)質(zhì)子)，1.87-1.97(2H，m，環(huán)質(zhì)子)，2.0-2.16(2H，m，環(huán)質(zhì)子)，2.51-2.56(1H，dd，J＝5.7，27.5Hz，環(huán)質(zhì)子)，3.12-3.18(1H，dd，J＝5.4，18.8Hz，環(huán)質(zhì)子)，4.12-4.20(2H，m，CH2)，5.77(1H，s，CH)。
MS(ES+)m/e 209[M+H]+100％。
步驟(ii)將酯(0.34g，1.63mmol)溶于THF(5mL)，并在氬氣氛下攪拌。加入硝基甲烷(0.25mL)，并將反應(yīng)混合物加熱至60℃。1小時內(nèi)將TBAF(2.3mL)滴加到熱溶液中，并攪拌4小時。用2N HCl和乙醚分配反應(yīng)混合物，并用鹽水洗滌乙醚層。真空下除去溶劑得到一種黃色油，通過閃式色譜法(二氧化硅，庚烷/EtOAC，19∶1)純化，得到0.264g(60％)產(chǎn)物，為一種無色油。
1H NMR(CDCl3)(400MHz)δ0.97-1.30(11H，m，環(huán)質(zhì)子+CH3)，1.73-1.95(6H，m，2×CH+4環(huán)質(zhì)子)，2.5(1H，d，J＝16.6Hz，CH2CO2Et)，2.7(1H，d，J＝16.6Hz，CH2CO2Et)，4.12-4.18(2H，mCH2)，4.49-4.51(1H，d，J＝11.5Hz，CH2NO2)，4.73-4.75(1H，d，J＝11.5Hz，CH2NO2)。
步驟(iii)將硝基酯(0.24g，0.9mmol)溶于含鎳海綿(Nickel sponge)的甲醇。在50psi、30℃下將反應(yīng)物氫化15小時。通過celite過濾反應(yīng)混合物，并在真空下除去溶劑以得到產(chǎn)物0.18g(85％)，為一種黃色固體。產(chǎn)物為內(nèi)酰胺和氨基酯的混合物。
步驟(iv)在6N HCl(5mL)和二噁烷(2.5mL)中處理氨基酯，并加熱回流4小時。用二氯甲烷(3×5mL)洗滌溶液，并將水溶液真空蒸發(fā)得到0.196g(99％)產(chǎn)物，為一種無色固體。
1H NMR(DMSO)(400MHz)δ0.86-1.04(2H，m)，1.08-1.17(6H，m)，1.60-1.78(6H，m)，2.35-2.39(1H，d，J＝16Hz，CH2CO2H)，2.46(1H，m，CH2CO2H)，2.83-2.87(1H，d，J＝13Hz，CH2NH2)，2.97-3.00(1H，d，J＝13Hz，CH2NH2)，7.91(2H，bs，NH2)。
MS(ES+)m/e 212[M+H]+100％。
HPLC，Prodigy C18柱，5％甲醇/乙腈。保留時間＝3.00分鐘，純度為99％。
實施例2(±)-(1α，5β)(2-氨基甲基-八氫-并環(huán)戊二烯-2-基)-乙酸鹽酸鹽
步驟(i)0℃下和氫氣氛下將氫化鈉(0.6g，14.5mmol)與THF(50mL)一起攪拌。滴加膦?；宜崛阴?2.9mL)并將溶液攪拌10分鐘。滴加在THF(10mL)中的酮(1.8g，14.5mmol)并攪拌和加熱至室溫。18小時后，用水(250mL)和乙醚(3×50mL)分離反應(yīng)混合物。真空下除去溶劑得到一種黃色油，通過閃式色譜法(二氧化硅，庚烷/EtOAC 19∶1)將其純化。得到1.95g(69％)酯，為一種無色油1H NMR(CDCl3)(400MHz)δ1.14-1.19(2H，m，CH2)，1.25-1.29(3H，m，CH3)，1.55-1.79(4H，m，2×CH2)，2.03-2.10(4H，m，2×CH2)，2.45-2.55(1H，dd，CH)，3.05-3.15(1H，dd，CH)，4.12-4.17(2H，q，J＝7.3，14.4Hz，COCH2)，5.76(1H，m，CH)。
步驟(ii)將酯(1.9g，10mmol)溶于THF(15mL)，并在氬氣氛下攪拌。加入硝基甲烷(1.4mL)，并將反應(yīng)混合物加熱至60℃。1小時內(nèi)將TBAF(14mL)滴加到熱溶液中，并攪拌5小時。用2N HCl和乙醚分離反應(yīng)混合物，并用鹽水洗滌醚層。真空下除去乙醚得到一種橙色油，通過閃式色譜法(二氧化硅，庚烷/EtOAC，19∶1)純化，得到1.59g(64％)產(chǎn)物，為一種無色油。
1H NMR(CDCl3)(400MHz)δ1.14-1.31(7H，m，CH3+環(huán)質(zhì)子)，1.64-1.72(5H，m，環(huán)質(zhì)子)，1.03-1.09(1H，m，環(huán)質(zhì)子)，2.00-2.05(2H，m，環(huán)質(zhì)子)，2.57-2.61(1H，d，J＝16.4Hz，CH2CO2Et)，2.71-2.75(1H，d，J＝16.4Hz，CH2CO2Et)，4.12-4.18(2H，q，J＝7.1，14.2Hz，OCH2CH3)，4.56-4.59(1H，d，J＝11.5 Hz，CH2NO2)，4.77-4.80(1H，d，J＝11.5Hz，CH2NO2)。
IR(neat)2957，2870，1731，1547，1374，1182，1030cm步驟(iii)將硝基酯(1.59g，5.9mmol)溶于含鎳海綿的甲醇(40mL)。在50psi、30℃下將反應(yīng)物氫化5小時。通過celite過濾反應(yīng)混合物，并在真空下除去溶劑以得到內(nèi)酰胺1.08g(97％)，為一種米色固體。
1H NMR(CDCl3)(400MHz)δ1.08-1.11(2H，m，環(huán)質(zhì)子)，1.23-1.28(2H，m，環(huán)質(zhì)子)，1.62-1.68(4H，m)，1.82-1.89(2H，m)，2.00-2.06(2H，m)，2.30-2.40(2H，m，CH2CO)，3.29-3.30(2H，M，CH2NH)，5.45(1H，bs，NH)。
MS(ES+)m/e 180[M+H]+3％，359[2M+H]+21％，381[2M+Na]+100％。
步驟(iv)在6N HCl(20mL)和二噁烷(8mL)中處理內(nèi)酰胺，并加熱回流4小時。用二氯甲烷(3×10mL)洗滌溶液，并將水溶液真空蒸發(fā)得到0.65g(84％)產(chǎn)物，為一種無色固體。
1H NMR(DMSO)(400MHz)δ1.0-1.18(4H，m，環(huán)質(zhì)子)，1.52-1.72(6H，m，環(huán)質(zhì)子)，1.95-2.02(2H，m，環(huán)質(zhì)子)，2.33-2.67(2H，m，CH2CO2H)，2.90-2.94(1H，d，J＝12.9Hz，CH2NH2)，3.00-3.03(1H，d，J＝12.7Hz，CH2NH2)，7.94(2H，bs，NH2)。
MS(ES+)m/e 198[M+H]+100％。
LCMS(ELSD)Prodigy ODS3 50mm×2mm柱，5％-50％ MeCN/H2O。
保留時間＝2.30分鐘，質(zhì)量實測值＝198。100％純度。
實施例3(1α，3α，5α)(2-氨基甲基-八氫-并環(huán)戊二烯-2-基)-乙酸鹽酸鹽
步驟(i)0℃和氬氣氛下向在THF(25mL)中的NaH(0.45g，11.3mmol)的懸浮液緩慢加入(在大約10分鐘內(nèi))膦?；宜崛阴?2.3mL，11.6mmol)，然后加入5(1.29g，10.4mmol，在2×3mL THF中)。將反應(yīng)物加熱至室溫，并將其攪拌4小時，然后用水(100mL)稀釋，用醚(2×200mL)萃取，用飽和鹽水(50mL)洗滌，并干燥(MgSO4)。柱色譜處理(9∶1庚烷/乙酸乙酯)得到產(chǎn)物，為一種無色油，1.75g，86％。
IR(薄膜)(cm-1)ν＝2964，1713，1655，1371，1208，1125，1040。
1H NMR(CDCl3)δ5.72(1H，m)，4.14(2H，q，J＝7.2)，3.02-2.92(1H，m)，2.72-2.54(3H，m)，2.52-2.42(1H，m)，2.28-2.20(1H，m)，1.85-1.31(6H，m)，1.27(3H，t，J＝7.2)。
m/zAP+195(MI+1)，純度100％。
步驟(ii)向在THF(22mL)中的6(2.75g，22.2mmol)的溶液加入TBAF(24mL，24.0mmol)，然后加入硝基甲烷(4.4mL，8.14mmol)。將反應(yīng)物加熱(60℃下的油浴)4.75小時，然后用乙酸乙酯(100mL)稀釋，并用2M HCl(30mL)洗滌，然后用飽和鹽水(40mL)洗滌，干燥(MgSO4)，并減壓濃縮。柱色譜處理(9∶1庚烷/乙酸乙酯)得到產(chǎn)物，為一種無色油，0.73g，20％。1H NMR法發(fā)現(xiàn)產(chǎn)物為9∶1的非對映異構(gòu)體混合物。
1H NMR(CDCl3)δ4.67(1H，s)，4.60(1H，s)，4.15(2H，q，J＝7.2)，4.14(2H，q，7.2)，2.58(2H，s)，2.49(2H，s)，2.12-2.0(2H+2H，m)，1.63-1.49(4H+4H，m)，1.44-1.36(2H+2H，m)1.28(3H，t，J＝7.2)，1.27(3H，t，J＝7)1.16-1.04(2H+2H，m)。
步驟(iii)在30℃下和56psi壓力下使在含有鎳海綿催化劑的甲醇(100mL)中的化合物7(0.88g，3.45mmol)氫化，然后將其保持5小時。使用前將鎳海綿催化劑洗滌數(shù)次，首先用水，然后用甲醇洗滌。氫化完成后，通過celite過濾反應(yīng)混合物，并將所得的溶液于真空下濃縮得到一種黃色固體，0.62g，80％。
1H NMR(CDCl3)δ5.43(1H，brs)，3.15(2H，s)，2.56-2.44(3H，m)，1.99(2H，dd，J＝12.6，8.2)，1.64-1.50(2H，m)，1.44-1.34(3H，m)，1.22-1.14(2H，m)。
m/z ES+226(MI+1)，純度100％。
步驟(iv)將在二噁烷(10mL)中的化合物8(0.61g，2.7mmol)和6MHCl(30mL)加熱至回流(100℃下的油浴)4小時。冷卻后，用水(40mL)稀釋反應(yīng)物，用二氯甲烷(3×40mL)洗滌反應(yīng)混合物，并真空濃縮得到一種白色結(jié)晶產(chǎn)物，為6∶1比率的非對映異構(gòu)體。用乙酸乙酯/甲醇將產(chǎn)物重結(jié)晶兩次以得到10∶1的非對映異構(gòu)體的混合物。
m/z ES+198(MI+1)，純度100％。
1H NMR(D2O)δ3.03(2H，s)，2.50-2.36(4H，m)，1.84(2H，dd，J＝12，8)，1.41(4H，s)，1.26(2H，s)，1.02(2H，m)。
HPLC柱＝Prodigy ODS3，室溫＝0.87，純度＝100％。
實施例4(1α，6α，8α)(2-氨基甲基-八氫-茚-2-基)-乙酸鹽酸鹽
化合物1的合成使用Dean-Stark汽水分離器將茚-2-酮(1.0g，7.6mmol)、乙二醇(0.43mL，7.6mmol)和對甲苯磺酸在苯(40mL)中回流6小時。將混合物冷卻，然后用乙酸乙酯(100mL)稀釋，并用飽和碳酸氫鈉溶液(60mL)洗滌。分離出有機層，并進一步用乙酸乙酯(2×50mL)萃取水層。用鹽水洗滌合并的有機餾分，干燥(MgSO4)，并將溶劑減壓蒸發(fā)。色譜處理殘余物(SiO2，庚烷/乙酸乙酯，97∶3)得到乙縮醛1(1.14g，85％)，為一種無色油；Rf(庚烷/乙酸乙酯，8∶2)0.36；νmax(膜)/cm-11483，1331，1291，1105；δH(400MHz；CDCl3)7.19-7.14(4H，m，Ph)，4.02(4H，s，2×CH2CO2)，3.18(4H，s，2×CH2O)。
化合物2的合成在氫氣氛(70Psi，50℃)下，在催化量的5％擔載在氧化鋁上的銠上將在乙醇(50mL)中的乙縮醛1(0.5g，2.84mmol)振蕩16小時。濾出催化劑，并將溶劑減壓蒸發(fā)得到乙縮醛2(0.51g，99％)，為一種無色油；νmax(薄膜)/cm-12923，1449，1337，1192，1115，1089；δH(400MHz；CDCl3)3.89-3.86(4H，m，2×CH2O)，2.10-2.00(2H，m)，1.88(2H，dd，J＝13.9，7.6)，1.81(2H，dd，J＝13.7，7.0)，1.56-1.26(6H，m)。
化合物3的合成在2N鹽酸(10mL)和丙酮(10mL)的混合物中將乙縮醛2(1.01g，5.54mmol)攪拌24小時。此后，tlc表明完全消耗原料乙縮醛。加入飽和碳酸鈉溶液(20mL)，并用醚(3×25mL)萃取混合物。用鹽水洗滌合并的醚餾分，干燥(MgSO4)，并在減壓下蒸發(fā)溶劑。色譜法(SiO2，戊烷/醚，95∶5)處理殘余物得到酮3(0.75g，97％)，為一種無色油；Rf(庚烷/乙酸乙酯，8∶2)0.42；νmax(薄膜)/cm-11743(C＝O)；δH(400MHz；CDCl3)2.37-2.28(2H，m)，2.20(2H，dd，J＝18.5，7.5)，2.12(2H，dd，J＝18.7，6.3)，1.65-1.24(10H，m)。
化合物4的合成0℃和氬氣氛下將膦?；宜崛阴?1.13mL，5.70mmol)滴加到在THF(15mL)中的氫化鈉的攪拌的懸浮液(0.22g 60％在油中的分散液，5.43mmol)。20分鐘后，加入在THF(6mL)中的酮3(0.75g，5.43mmol)。將混合物加熱至室溫，并攪拌16小時。加入水(5mL)，并用醚(15mL×3)萃取混合物。用鹽水洗滌合并的有機餾分，并干燥(MgSO4)。減壓下蒸發(fā)溶劑。色譜處理(SiO2，庚烷/乙酸乙酯，95∶5)殘余物得到酯4(0.81g，72％)，為一種無色油。Rf(庚烷/乙酸乙酯，8∶2)0.66；νmax(薄膜)/cm-11715(C＝O)，1652(C＝C)；δH(400MHz；CDCl3)5.80(1H，quin，J＝2.2，CHCO2Et)，4.15(2H，q，J＝7.1，CO2CH2Me)，2.79(1H，dd，J＝19.5，8.1)，2.69(1H，ddt，J＝19.8，7.3，2.3)，2.47(1H，dd，J＝17.3，7.2)，2.34(1H，ddt，J＝17.3，5.6，1.8)，2.14(1H，m)，2.02(1H，m)，1.60-1.22(8H，m)；m/z(ES+)209(M+H，57％)，455(2M+K，67)。
化合物5和6的合成在THF中將酯4(0.45g，2.16mmol)、硝基甲烷(0.24mL，4.31mmol)和四丁基氟化銨(3.10mmol 1M在THF中的溶液，3.10mmol)加熱至65℃，持續(xù)4小時。將混合物冷卻，用乙酸乙酯(20mL)稀釋，并用稀鹽酸(15mL)酸化。分離出有機層，并進一步用乙酸乙酯(2×15mL)萃取水層。用鹽水洗滌合并的有機餾分，干燥(MgSO4)，并在減壓下蒸發(fā)溶劑。色譜處理(SiO2，庚烷/乙酸乙酯，98∶2)殘余物得到一種9∶1比率的硝基酯5和6(0.35g，60％)，為一種黃色油；Rf(庚烷/乙酸乙酯，9∶1)0.28；νmax(薄膜)/cm-11732(C＝O)，1547(NO2)，1375(NO2)；主要異構(gòu)體5δH(400MHz；CDCl3)4.61(2H，s，CH2NO2)，4.15(2H，q，J＝7.2，OCH2Me)，2.70(2H，s，CH2CO2Et)，2.06(2H，m)，1.81(2H，dd，J＝13.9，7.1)，1.56(2H，dd，J＝13.1，6.8)，1.51-1.22(8H，m)1.28(3H，t，J＝7.2)。
化合物7和8的合成氫氣氛(50Psi，30℃)下在催化量的鎳海綿催化劑上將在甲醇(30mL)中的5和6的混合物(0.81g，3.01mmol)振蕩12小時。將混合物過濾，并在減壓下蒸發(fā)溶劑得到一種9∶1的氨基-酯7和8(0.42g，72％)的混合物，為一種白色固體；νmax(薄膜)/cm-13214(NH)，1706(C＝O)；主要異構(gòu)體7δH(400MHz；CDCl3)5.57(1H，br s，NH)，3.20(2H，s，CH2NH)，2.36(2H，s，CH2CO)，2.04-1.94(2H，m)，1.77(2H，dd，J＝13.2，7.0)，1.62(2H，dd，J＝13.4，6.7)，1.60-1.20(8H，m)；m/z(ES+)387(2M+H，97％)。
化合物9和10的合成及化合物9的拆分(1α，6α，8α)(2-氨基甲基-八氫-茚-2-基)-乙酸鹽酸鹽將7和8的混合物(0.42g，2.17mmol)溶于1，4-二噁烷(8mL)和鹽酸(20mL 6N溶液)，并將混合物回流6小時。冷卻后，用水(20mL)稀釋混合物，并用二氯甲烷(2×15mL)洗滌。減壓下蒸發(fā)水層得到9∶1的酸9和10的混合物(0.43g，79％)，為一種白色固體。用乙酸乙酯/甲醇重結(jié)晶僅得到酸9(0.27g)；δH(400MHz；d6-DMSO)12.3(1H，br s，CO2H)，7.94(2H，br s，NH2)，2.90(2H，s，CH2NH2)，2.52(2H，s，CH2CO2H)，1.97(2H，br s)，1.65(2H，dd，J＝13.5，6.7)，1.54-1.20(10H，m)；m/z(ES+)212(M+H，100％)；(發(fā)現(xiàn)C，56.4；H，8.74；N，5.43 C12H21NO2·1HCl·0.5H2O發(fā)現(xiàn)C，56.1；H，9.03；N，5.45％)；LCMS(Prodigy C18 50mm×4.6mmid柱，5％-50％乙腈/水)；保留時間＝1.53分鐘，98％純度。
實施例5((1α，6α，8β)(2-氨基甲基-八氫-茚-2-基)-乙酸鹽酸鹽
化合物1的合成-78℃和氬氣氛下將正丁基鋰(5.1mL 2.5M溶液，在氬氣氛和在己烷中，12.75mmol)滴加到在THF(20mL)和HMPA(2mL)中的硝基甲烷(0.34mL，6.3mmol的攪拌的混合物。將混合物加熱至-60℃并攪拌1小時。將混合物冷卻至-78℃并加入3(0.79g，5.73mmol)。將混合物加熱至-60℃，并進一步攪拌2小時。加入飽和氯化銨溶液(5mL)終止混合物。加熱至室溫后，加入稀鹽酸(10mL)和醚(30mL)。分離有機層，并進一步用醚(2×25mL)萃取水層。用鹽水洗滌合并的有機餾分，干燥(MgSO4)，并在減壓下蒸發(fā)溶劑。色譜處理(SiO2，庚烷/乙酸乙酯，95∶5)殘余物得到硝基醇1(0.50g，43％)，為一種白色固體；Rf(庚烷/乙酸乙酯，9∶1)0.14；νmax(CH2Cl2)/cm-13424(OH)，1548(NO2)，1379(NO2)；δH(400MHz；CDCl3)4.45(2H，s，CH2NO2)，3.26(1H，s，OH)，2.04-1.95(2H，m)，1.85-1.80(4H，m)，1.64-1.24(8H，m)。
化合物2的合成在乙酸酐(1mL)中將1(0.50g，2.49mmol)和濃硫酸(1滴)的混合物加熱至50℃，持續(xù)5分鐘。將混合物冷卻，然后用醚(100mL)和水(50mL)分配。用鹽水洗滌醚層，干燥(MgSO4)，并在減壓下蒸發(fā)溶劑得到硝基乙酸酯2(0.49g，82％)，為一種無色油；Rf(庚烷/乙酸乙酯，9∶1)0.44；νmax(薄膜)/cm-11739(C＝O)，1551(NO2)，1375(NO2)；δH(400MHz；CDCl3)4.88(2H，s，CH2NO2)，2.38-2.00(8H，m)，2.07(3H，s，MeCO)，1.62-1.32(6H，m)。
化合物3的合成0℃下將在甲醇(3mL)中的甲醇鉀(0.15g，2.04mmol)滴加到在甲醇(5mL)中的2(0.49g，2.04mmol)的攪拌溶液。10分鐘后，用醚(100mL)和水(50mL)分配混合物。用鹽水洗滌醚層，干燥(MgSO4)，并將溶劑減壓蒸發(fā)。色譜處理(SiO2，戊烷/醚，98∶2)殘余物得到硝基-烯烴3(0.21g，57％)，為一種灰黃色油；Rf(庚烷/乙酸乙酯，8∶2)0.54；νmax(薄膜)/cm-11643(C＝C)，1509(NO2)，1342(NO2)；δH(400MHz；CDCl3)7.12(1H，quin，J＝2.0，CHNO2)，3.01(1H，ddt，J＝20.5，8.0，2.1)，2.90(1H，ddt，J＝20.5，7.3，2.1)，2.54(1H，ddt，J＝17.8，7.1，2.0)，2.43(1H，ddt，J 17.7，5.6，1.9)，2.21(1H，m)，2.12(1H，m)，1.60-1.24(8H，m)。
化合物4的合成-78℃和氨氣氛下將在THF(2mL)中的乙酸乙酯(0.12mL，1.22mmol)滴加到雙(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰(1.22mL 1M溶液，在THF中，1.22mmol)的攪拌溶液中。20分鐘后，加入在THF(1mL)中的3(0.21g，1.16mmol)，并混合物攪拌2小時。加入飽和氯化銨溶液(3mL)終止混合物反應(yīng)，并將至加熱至室溫。用醚(20mL)稀釋混合物，并加入稀鹽酸(15mL)。分離有機層，并進一步用醚(2×10mL)萃取水層。用鹽水洗滌合并的餾分，干燥(MgSO4)，并在減壓下蒸發(fā)溶劑。色譜處理(SiO2，庚烷/乙酸乙酯，99∶1)殘余物得到硝基酯4(0.13g，41％)，為一種無色液體；Rf(庚烷/乙酸乙酯，9∶1)0.32；νmax(薄膜)/cm-11731(C＝O)，1547(NO2)，1375(NO2)；δH(400MHz；CDCl3)4.73(2H，s，CH2NO2)，4.14(2H，q，J＝7.1，CO2CH2Me)，2.58(2H，s，CH2CO2Et)，2.07(2H，m)，1.71-1.66(4H，m)，1.60-1.24(8H，m)，1.26(3H，t，J＝7.2，CO2CH2Me)；m/z(ES+)270(M+H，100％)。
化合物5的合成在氫氣氛(60Psi，30℃)下在催化量的鎳海綿催化劑上將在甲醇(40mL)中的4(0.122g，0.45mmol)振蕩6小時。將混合物過濾，并在減壓下蒸發(fā)溶劑得到氨基酯5(0.084g，96％)，為一種白色固體。νmax(薄膜)/cm-13228(NH)，1665(C＝O)；δH(400MHz；CDCl3)5.49(1H，br s，NH)，3.34(2H，s，CH2NH)，2.25(2H，s，CH2CO)，2.10-1.98(2H，m)，1.77(2H，dd，J＝13.2，7.1)，1.65(2H，dd，J＝13.2，6.8)，1.62-1.20(8H，m)。
化合物6的合成將(2-氨基甲基-八氫-茚-2-基)-乙酸5(0.083g，0.43mmol)溶于1，4-二噁烷(2mL)和鹽酸(8mL 6N溶液)，并將混合物回流5小時。冷卻后，用水(20mL)稀釋混合物，并用二氯甲烷(2×15mL)洗滌。減壓蒸發(fā)水層得到酸6(0.097g，91％)，為一種白色固體。用乙酸乙酯/甲醇將此固體重結(jié)晶得到純的10(0.057g)；δH(400MHz；d6-DMSO)7.90(2H，br s，NH2)，3.02(2H，s，CH2NH2)，2.43(2H，s，CH2CO2H)，2.00(2H，br s)，1.53-1.24(12H，m)；m/z(ES+)212(M+H，100％)；LCMS(Prodigy C18 50 mm×4.6 mmid柱，5％-50％乙腈/水)保留時間＝1.12分鐘，100％純度。
實施例6(1α，3α，5α)-3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚烷-3-乙酸
化合物1的合成0℃和氬氣氛下將氫化鋰鋁(69.4mL 1M在醚中的溶液，69.4mmol)滴加到在THF(60mL)中的順-環(huán)丁烷-1，2-二羧酸(5g，34.7mmol)的攪拌溶液中。將混合物加熱至室溫并攪拌16小時。將混合物冷卻至0℃并通過小心加入水水(2.7mL)、氫氧化鈉溶液(2.7mL 15％ w/v溶液)和水(8.1mL)而終止反應(yīng)。將混合物攪拌15分鐘，通過過濾除去沉淀。減壓蒸發(fā)溶劑得到醇1，為一種無色油(4.0g，98％)；δH(400MHz；CDCl3)3.85(2H，m)，3.6(2H，m)，3.2(2H，s)，2.7(2H，m)，2(2H，m)；1.55(2H，m)；δC(400MHz；CDCl3)63.15，37.83，20.40。
化合物2的合成-40℃和氬氣氛下將甲磺?；?6.2mL，79.1mmol)滴加到在二氯甲烷(150mL)中的1(4.0g，34.4mmol)的攪拌溶液中。然后滴加三乙胺(12.0mL，86.0mmol)，并將混合物緩慢加熱至室溫。攪拌16小時后，通過加入稀鹽酸(50mL)終止混合物反應(yīng)。分離有機層，并進一步用二氯甲烷(2×50mL)萃取水層。用鹽水洗滌合并的有機餾分，干燥(MgSO4)，并減壓蒸發(fā)溶劑。色譜處理(SiO2，庚烷/乙酸乙酯，6∶4)殘余物得到甲磺酸酯2(6.1g，73％)，為一種白色固體；Rf(庚烷/乙酸乙酯，1∶1)0.18.δH(400MHz；CDCl3)4.3(4H，m)，3.05(6H，s)，2.9(2H，m)，2.2(2H，m)，1.8(2H，m)；δc(400MHz；CDCl3)69.51，37.45，35.28，21.09。
化合物3的合成氬氣氛下將無水溴化鋰(10.6g，121.8mmol)加到在丙酮(50mL)中的2(5.95g，24.4mmol)的攪拌混合物，并將混合物回流2小時。冷卻后，減壓蒸餾丙酮，并用醚(50mL)處理殘余物，用水(50mL)、鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，并減壓蒸發(fā)溶劑。色譜處理(SiO2，庚烷/乙酸乙酯，95∶5)殘余物得到二溴化物3(5.36g，86％)，為一種橙色液體；Rf(庚烷-乙酸乙酯，8∶2)，0.82.δH(400MHz；CDCl3)3.6(2H，m)，3.45(2H，m)，2.85(2H，m)，2.1(2H，m)，1.7(2H，m；δC(400MHz；CDCl3)39.70，33.79，23.95。
化合物4的合成氬氣氛下，1小時內(nèi)往冷卻的(0℃)在四氫呋喃(22mL)中的氫化鉀(1.58g，39.5mmol)懸浮液(先前用戊烷洗滌3次)加入在四氫呋喃(3mL)中的甲基甲硫基甲基亞砜(methyl methylthiomethylsulfoxide)(1.36mL，13.04mmol，先前在分子篩上干燥3小時)溶液。再攪拌30分鐘后，0℃下在1小時內(nèi)加入在THF(2mL)中的3(3.17g，13.1mmol)的溶液。然后將反應(yīng)混合物加熱至室溫，并攪拌過夜。加入氯化銨水溶液(6mL，25％)終止混合物反應(yīng)。10分鐘后，濾去固體并濃縮濾液。用醚(20mL)處理殘余物，并加入9N硫酸(0.05mL)。攪拌30分鐘后，加入飽和碳酸氫鈉。分離醚層并濃縮至5mL。加入飽和亞硫酸氫鈉(1.5g)溶液并將混合物攪拌30分鐘。分離相。將醚相與飽和亞硫酸氫鈉(0.5g)溶液一起再攪拌30分鐘。分離相，用氫氧化鈉水溶液(5mL，20％)處理收集的水相，并用醚萃取。將醚相干燥(MgSO4)，并減壓蒸發(fā)得到4，為一種黃色液體(0.16g，11％)。δH(400MHz；CDCl3)3.0(2H，m)，2.15-2.45(6H，m)，1.65(2H，m)。
化合物5的合成0℃和氬氣氛下下將膦?；宜崛阴?0.32mL，1.61mmol)滴加到在THF(2mL)中的氫化鈉的攪拌懸浮液(0.059g 60％在油中的分散液，1.47mmol)。20分鐘后，滴加在THF(1mL)中的酮4(0.16g，1.45mmol)。將混合物加熱至室溫，并攪拌16小時。加入水并用乙酸乙酯。萃取混合物。用鹽水洗滌合并的有機餾分，并干燥(MgSO4)。減壓蒸發(fā)溶劑。色譜處理(SiO2，庚烷/乙酸乙酯，95∶5)殘余物得到酯5(0.166g，0.92mmol，64％)，為一種無色油；δH(400MHz；CDCl3)5.9(1H，s)，4.2(2H，q)，3.15(1H，d)，2.9(1H，m)，2.8(1H，m)；2.65(2H，m)，2.3(1H，d)，2.15(2H，m)，1.5(2H，m)，1.3(3H，t)；δC(400MHz；CDCl3)169.51，166.98，113.37，59.62，43.23，38.79，38.45，36.20， 25.62，24.95，14.44。
化合物6的合成在THF(1mL)中將酯5(0.152g，0.84mmol)、硝基甲烷(0.092mL，1.7mmol)和四叔丁基氟化銨(1.03mL 1M在THF中的溶液，1.03mmol)加熱至65℃，持續(xù)4小時。將混合物冷卻，用醚(30mL)稀釋，并用2N鹽酸(5mL)酸化。用鹽水洗滌有機層，干燥(MgSO4)，并減壓蒸餾溶劑。色譜處理(SiO2，庚烷/醚，95∶5)殘余物得到硝基-酯6(0.085g，0.35mmol，41％)as a colorless liquid；δH(400MHz；CDCl3)4.4(2H，s)，4.15(2H，q)，2.75(2H，bs)，2.7(2H，s)，2.3(2H，m)；2.1(2H，m)，1.65(4H，m)，1.15(3H，t)；δC(400MHz；CDCl3)171.48，79.68，60.52，50.10，44.15，41.06，37.36，25.76，14.28。
化合物7A和7B的合成氫氣氛(50Psi，30℃)下在催化量的鎳海綿上將在甲醇(10mL)中的硝基-酯6(0.076g，0.31mmol)振蕩12小時。將混合物過濾，減壓蒸發(fā)溶劑得到內(nèi)酰胺7A和氨基-酯7B的混合物(0.05g)，為一種白色固體。此固體不經(jīng)進一步純化和表征而使用。
化合物8的合成將7A和7B(0.05g)溶于鹽酸(2mL 6N溶液)，將混合物回流4小時。冷卻后，減壓蒸餾溶劑得到酸，為一種白色固體。用乙酸乙酯/甲醇將此固體重結(jié)晶得到純的8(0.045g，0.2mmol，64％)；δH(400MHz；D2O)3(2H，s)，2.85(4H，m+s)，2.35(2H，m)，2.1(2H，m)，1.75(4H，m).δC(400MHz；D2O)167.5，46.64，43.89，42.03，40.89，36.08，23.91.m/z(ES+)184(M+H，100％)。
實施例7(±)-(1α，5β)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚-3-基)-乙酸鹽酸鹽
化合物1的合成0℃和氬氣氛下將氫化鋰鋁(134.8mL 1M在醚中的溶液，134.8mmol)滴加到在THF(120mL)中的順-環(huán)丁烷-1，2-二羧酸(9.71g，67.39mmol)的溶液中。將混合物加熱至室溫，并攪拌16小時。將混合物冷卻至0℃，并通過小心加入水(5.2mL)、氫氧化鈉溶液(5.2mL15％w/v溶液)和水(15.7mL)而終止反應(yīng)。將混合物攪拌15分鐘，過濾除去沉淀。減壓蒸發(fā)溶劑得到醇1，為一種灰黃色油(6.73g，57.64mmol，85％)；δH(400MHz；CDCl3)3.85(2H，m)，3.6(2H，m)，2.9(2H，s)，2.7(2H，m)，2(2H，m)；1.55(2H，m)。
化合物2的合成-40℃和氫氣氛分下將甲磺酰基氯(29.3mL，373.8mmol)滴加到在二氯甲烷(500mL)中的1(8.85g，75.8mmol)的攪拌溶液中。然后滴加三乙胺(63.4mL，454.4mmol)，并將混合物緩慢加熱至室溫。攪拌16小時后，通過加入稀鹽酸(100mL)而終止混合物反應(yīng)。分離有機層，并進一步用二氯甲烷(2×100mL)萃取水層。用鹽水洗滌合并的有機餾分，干燥(MgSO4)，并減壓蒸發(fā)溶劑。色譜處理(SiO2，庚烷/乙酸乙酯，6∶4)殘余物得到甲磺酸酯2(15.89g，58.3mmol，77％)，為一種白色固體；δH(400MHz；CDCl3)3.0(6H，m)，2.6(2H，m)，2.05(2H，m)，1.8(2H，m)。
化合物3的合成氬氣氛下將無水溴化鋰(25g，287.3mmol)加到在丙酮(150mL)中的2(15.84g，57.4mmol)的攪拌的混合物中，并將混合物回流2小時。冷卻后，減壓蒸發(fā)丙酮，用醚(100mL)處理殘余物，用水(100mL)、鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，并減壓蒸發(fā)溶劑得到二溴化物3(13.5g，55.8mmol，97％)，為一種橙色液體；δH(400MHz；CDCl3)3.5(4H，m)，2.45(2H，m)，2.05(2H，m)，1.6(2H，m)。
化合物4的合成氬氣氛下，1小時內(nèi)往冷卻的(0℃)在THF(15mL)中的氫化鉀(1.08g，27mmol)(先前用戊烷洗滌3次)懸浮液中加入在THF(2mL)中的甲基甲硫基甲基亞砜(0.93mL，8.92mmol，先前在分子篩上干燥3小時)溶液。再攪拌30分鐘后，0℃下在1小時內(nèi)加入在THF(2mL)中的3(2.16g，8.93mmol)的溶液。然后將反應(yīng)混合物加熱至室溫，并攪拌過夜。加入氯化銨水溶液(6mL，25％)終止混合物反應(yīng)。10分鐘后，濾去固體并濃縮濾液。用醚(20mL)處理殘余物，并加入9N硫酸(0.03mL)。攪拌30分鐘后，加入飽和碳酸氫鈉。分離醚層并濃縮至5mL。加入飽和亞硫酸氫鈉(1.5g)溶液并將混合物攪拌30分鐘。分離相。將醚相與飽和亞硫酸氫鈉(0.5g)溶液一起再攪拌30分鐘。分離相，用氫氧化鈉水溶液(5mL，20％)處理收集的水相，并用醚萃取。將醚相干燥(MgSO4)，并減壓蒸發(fā)溶劑得到4，為一種黃色液體(0.141g，15％)；δH(400MHz；CDCl3)2.25(4H，m)，2.0(4H，m)，1.7(2H，m)。
化合物5的合成0℃和氬氣氛下將膦?；宜崛阴?0.28mL，1.41mmol)滴加到在THF(2mL)中的氫化鈉的攪拌的懸浮液(0.052g 60％在油中的分散液，1.29mmol)中。20分鐘后，滴加在THF(1mL)中的酮4(0.141g，1.28mmol)。將混合物加熱至室溫，并攪拌16小時。加入水(5mL)，并萃取混合物。用鹽水洗滌合并的有機餾分，并干燥(MgSO4)。減壓下蒸發(fā)溶劑。色譜處理(SiO2，庚烷/乙酸乙酯，95∶5)殘余物得到酯5(0.092g，0.51mmol，40％)，為一種無色油；δH(400MHz；CDCl3)5.85(1H，s)，4.1(2H，q)，3.1(1H，d.d)，2.45(1H，d.d)，2.2(2H，m)，1.75(2H，m)，1.4(2H，m)，1.25(3H，t)；δC(400MHz；CDCl3)170.53，166.57，115.13，59.62，47.06，45.69，39.89，37.24，28.52，28.17，14.44。
化合物6的合成在THF(1mL)中將酯5(0.09g，0.5mmol)、硝基甲烷(0.055mL，1.02mmol)和四叔丁基氟化銨(0.61mL 1M溶液在THF中，0.61mmol)加熱至65℃，持續(xù)4小時。將混合物冷卻，用醚(30mL)稀釋，并用2N鹽酸(5mL)酸化。用鹽水洗滌有機層，干燥(MgSO4)，并減壓蒸餾溶劑。色譜處理(SiO2，庚烷/醚，95∶5)殘余物得到硝基-酯6(0.063g，0.26mmol，52％)，為一種無色液體。δH(400MHz；CDCl3)4.65(2H，[AB]q)，4.15(2H，q)，2.65(2H，[AB]q)，1.2-1.95(3H，t和m，13H)；δC(400MHz；CDCl3)171.28，82.42，60.56，49.97，45.80，45.32，42.88，40.19，40.09，27.64，14.26。
化合物7A和7B的合成氫氣氛(50Psi，30℃)下在催化量的鎳海綿上將在甲醇(10mL)中的硝基-酯6(0.063g，0.26mmol)振蕩12小時。將混合物過濾，減壓蒸發(fā)溶劑得到內(nèi)酰胺7A和氨基-酯7B(0.051g)的混合物，為一種白色固體。此固體不經(jīng)進一步純化和表征而使用。
化合物8的合成將7A和7B(0.051g)溶于鹽酸(2mL 6N溶液)，將混合物回流4小時。冷卻后，減壓蒸餾溶劑得到酸，為一種白色固體。用乙酸乙酯/甲醇將此固體重結(jié)晶得到純的8(0.046g，0.21mmol，81％)；δH(400MHz；D2O)3.3(2H，[AB]q)，2.7(2H，[AB]q)，2(2H，m)，1.35-1.85(8H，m)；δC(400 MHz；D2O)174.8，47.50，46.59，44.28，43.61，41.64，38.37，38.09，25.88.m/z(ES+)184(M+H，100％)。
實施例8
(1α，3β，5α)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚-3-基)-乙酸鹽酸鹽 化合物(2)的合成將二溴化物1(5.7g，22.3mmol)、氰乙酸乙酯(4.8mL，44.5mmol)和碳酸鉀(6.15g，44.5mmol)一起于DMF(100mL)中攪拌48小時。加入稀鹽酸(100mL)，并用醚(3×100mL)萃取混合物。用鹽水洗滌合并的有機餾分，干燥(MgSO4)，并減壓蒸發(fā)溶劑。色譜處理(SiO2，庚烷-乙酸乙酯，98∶2)殘余物得到氰基酯2(4.3g，100％)，為一種68∶32的非對映異構(gòu)體的混合物；Rf(庚烷-乙酸乙酯，9∶1)0.28；νmax(薄膜)/cm-12241(CN)，1741(C＝O)；主要非對映異構(gòu)體δH(400MHz；CDCl3)4.30(2H，q，J 7.1，CO2CH2Me)，2.98(2H，m)，2.56-2.22(6H，m)，1.70(2H，m)，1.35(3H，t，J 7.1，Me)；次要非對映異構(gòu)體δH(400MHz；CDCl3)4.26(2H，q，J 7.1，CO2CH2Me)，3.05(2H，m)，2.56-2.22(6H，m)，1.99(2H，m)，1.33(3H，t，J 7.1，Me)。
化合物(3)的合成在DMSO(40mL)中將氰基酯2(0.76g，3.91mmol)、水(0.14mL，7.82mmol)和氯化鋰(0.66g，15.6mmol)加熱至150℃，持續(xù)22小時。將混合物冷卻，用水(150mL)稀釋，并用醚(3×50mL)萃取。用鹽水洗滌合并的醚餾分，干燥(MgSO4)，并減壓蒸餾溶劑。色譜處理(SiO2，庚烷-乙酸乙酯，95∶5)殘余物得到氰化物3(0.21g，44％)，為60∶40的非對映異構(gòu)體的混合物；Rf(庚烷-乙酸乙酯，9∶1)0.44；νmax(薄膜)/cm-12238(CN)；主要非對映異構(gòu)體δH(400MHz；CDCl3)2.97(1H，m)，2.87(2H，m)，2.32-2.18(2H，m)，2.10-1.96(3H，m)，1.92-1.78(2H，m)，1.48-1.38(1H，m)；次要非對映異構(gòu)體δH(400MHz；CDCl3)3.13(1H，m)，2.87(2H，m)，2.32-2.18(2H，m)，2.10-1.96(3H，m)，1.92-1.78(2H，m)，1.48-1.38(1H，m)。
化合物(4)的合成-78℃和氬氣氛下，在1小時內(nèi)將在THF(30mL)中的氰化物3(0.86g，7.1mmol)滴加到在THF(40mL)中的六甲基二硅烷疊化鋰(lithiumhexamethyldisilazide)的攪拌混合物(7.8mL 1M在THF中的溶液，7.8mmol)中。將混合物加熱至-40℃并攪拌2小時。將混合物冷卻至-78℃，并加入二甲基烯丙基溴化物(1.3mL，10.6mmol)。-78℃下將混合物再攪拌2小時，并加熱至室溫過夜。加入飽和氯化銨溶液(20mL)，用醚(50mL)和稀鹽酸(30mL)稀釋混合物。進一步用醚(2×50mL)萃取水層，并用鹽水洗滌合并的有機餾分，干燥(MgSO4)，并減壓蒸發(fā)溶劑。色譜處理(SiO2，庚烷-乙酸乙酯，98∶2)處理殘余物得到氰基烯烴4(0.96g，72％)，為一種無色油；Rf(庚烷-乙酸乙酯，95∶5)0.38；νmax(薄膜)/cm-12230(CN)，1673(C＝C)；δH(400MHz；CDCl3)5.27(1H，tt，J 7.6，1.3，CHCMe2)，2.89(2H，m)，2.30-2.22(4H，m)，2.10(2H，d，J 14.2)，1.94(2H，m)，1.84-1.62(2H，m)，1.65(3H，s，Me)，1.55(3H，s，Me)；m/z(AP+)190(M+H，100％)。
化合物(5)的合成-78℃下在二氯甲烷(80mL)中將氰基烯烴4(0.96g，5.1mmol)和氫氧化鈉(10.2mL 2.5M在甲醇中的溶液，25.5mmol)一起攪拌。使臭氧通過混合物，該混合物立刻變橙色。2小時后，混合物變成綠色，用氧將溶液吹掃5分鐘，然后用氮凈化。用醚(100mL)和水(100mL)稀釋攪拌混合物，并加熱至室溫過夜。進一步用醚(2×50mL)萃取水層，并用鹽水洗滌合并的有機餾分，干燥(MgSO4)，并減壓蒸發(fā)溶劑。色譜處理(SiO2，庚烷-乙酸乙酯，95∶5)殘余物得到氰基酯5(0.70g，71％)其為黃色油狀物；Rf(庚烷-乙酸乙酯，8∶2)0.36；νmax(薄膜)/cm-12233(CN)，1740(C＝O)；δH(400MHz；CDCl3)3.75(3H，s，OMe)，2.94(2H，m)，2.63(2H，s，CH2CO2Me)，2.35-2.21(4H，m)，2.00(2H，m)，1.86(2H，m)；m/z(AP+)194(M+H，95％)。
化合物(6)的合成氫氣氛(60Psi，30℃)下在催化量的鎳海綿催化劑上將在甲醇(100mL)中的氰基酯5(0.81g，4.2mmol)振蕩小時。過濾混合物，并減壓蒸發(fā)溶劑得到內(nèi)酰胺6(0.64g，92％)，為一種白色固體；νmax(薄膜)/Cm-11692(C＝O)；δH(400MHz；CDCl35.52(1H，br s，NH)，3.54(2H，s，CH2NH)，2.80(2H，m)，2.26(2H，m)，2.16(2H，s，CH2CO)，1.93(2H，ddd，J 13.4，8.1，2.4)，1.74(2H，dd，J 13.0，3.2)，1.64(2H，m)。
(1α，3β，5α)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚-3-基)-乙酸鹽酸鹽的合成將內(nèi)酰胺6(0.64g，3.87mmol)溶于1，4-二噁烷(4mL)和鹽酸(16mL 6N溶液)，并將混合物回流6小時。冷卻后，用水(20mL)稀釋混合物，并用二氯甲烷(2×15mL)洗滌。減壓蒸發(fā)水層得到酸7(0.67g，79％)，為一種白色固體。用乙酸乙酯/甲醇重結(jié)晶僅得到酸7(0.26g)；δH(400MHz；d6-DMSO)7.98(2H，br s，NH2)，3.13(2H，s，CH2NH2)，2.70(2H，s)，2.17-2.14(4H，m)，1.85(2H，dd，J 13.3，8.0)，1.63(2H，m)，1.55(2H，dd，J 12.9，5.1)；m/z(ES+)184(M+H，100％)；LCMS(Prodigy C18，50mm×4.6mmid柱，5-50％乙腈/水)保留時間＝2.40分鐘，98％純度。
由以上方法制備以下化合物(1α，5β)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)-乙酸，
(1α，5β)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚-3-基)-乙酸，(1α，5β)(2-氨基甲基-八氫-并環(huán)戊二烯-2-基)-乙酸，(1α，6β)(2-氨基甲基-八氫-茚-2-基)-乙酸，(1α，7β)(2-氨基甲基-十氫-薁-2-基)-乙酸，(1α，5β)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)-乙酸，(1α，5β)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚-3-基)-乙酸，(1α，5β)(2-氨基甲基-八氫-并環(huán)戊二烯-2-基)-乙酸，(1α，6β)(2-氨基甲基-八氫-茚-2-基)-乙酸，(1α，7β)(2-氨基甲基-十氫-薁-2-基)-乙酸，(1α，3α，5α)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)-乙酸，(1α，3α，5α)-3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚烷-3-乙酸，(1α，3α，5α)(2-氨基甲基-八氫--并環(huán)戊二烯-2-基)-乙酸，(1α，6α，8α)(2-氨基甲基-八氫--茚-2-基)-乙酸，(1α，7α，9α)(2-氨基甲基-十氫--薁-2-基)-乙酸，(1α，3β，5α)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)-乙酸，(1α，3β，5α)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚-3-基)-乙酸，(1α，3β，5α)(2-氨基甲基-八氫-并環(huán)戊二烯-2-基)-乙酸，(1α，6α，8β)(2-氨基甲基-八氫-茚-2-基)-乙酸，(1α，7α，9β)(2-氨基甲基-十氫-薁-2-基)-乙酸，((1R，3R，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1R，3S，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1S，3S，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1S，3R，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1R，3R，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((1R，3S，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((1S，3S，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((1S，3R，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((3αR，5R，7αS)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((3αR，5S，7αS)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，
((3αS，5S，7αR)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((3αS，5R，7αR)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((2R，4αS，8αR)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2S，4αS，8αR)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2S，4αR，8αS)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2R，4αR，8αS)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2R，4αS，9αR)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，((2S，4αS，9αR)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，((2S，4αR，9αS)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，((2R，4αR，9αS)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，((1R，3R，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1R，3S，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1S，3S，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1S，3R，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1R，3R，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((1R，3S，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((1S，3S，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((1S，3R，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((3αR，5R，7αR)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((3αR，5S，7αR)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((3αS，5S，7αS)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((3αS，5R，7αS)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((2R，4αR，8αR)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2S，4αS，8αR)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2S，4αR，8αS)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2R，4αS，8αS)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2R，4αR，9αR)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，((2S，4αR，9αR)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，((2S，4αS，9αS)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，和
((2R，4αS，9αS)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸。
以下方法具體涉及式Ia的化合物的制備。
實施例9方法1 在0℃-120℃的溫度下將硝基甲烷加到在溶劑如二甲亞礬或N，N-二甲基甲酰胺中的不飽和酯與堿如碳酸鉀、碳酸鈉或碳酸銫。這種方法獲得較高產(chǎn)率的硝基酯，且與以前的方法相比降低去結(jié)合酯的產(chǎn)率。
方法2A
a)將烷基氰基乙酸酯，例如氰乙酸乙酯加到在選自以下的溶劑中的式(1)的環(huán)戊酮的混合物甲苯、苯、二甲苯或正庚烷，往其中加入乙酸和β-丙氨酸或乙酸銨或哌啶。在0℃-150℃的溫度下攪拌混合物，并用Dean-Stark汽水分離器或活化的分子篩除去水，以生產(chǎn)式(2)的烯烴；b)在-100℃至110℃的溫度下將以上步驟a)的產(chǎn)物加到在選自以下溶劑中的氯化芐基鎂或溴化芐基鎂或碘化芐基鎂的混合物中四氫呋喃、1，4-二噁烷、正庚烷、甲苯、乙醚或叔丁基甲基醚以產(chǎn)生式(3)的加成產(chǎn)物；c)將以步驟b)的產(chǎn)物加到選自氫氧化鉀、氫氧化鈉、氫氧化鋰或氫氧化銫的堿的混合物中，所述堿處在選自乙二醇、2-甲氧基乙基醚、1，4-二噁烷或二乙二醇的溶劑中，并在25℃-250℃的溫度下攪拌混合物產(chǎn)生式(4)的羧酸；d)將以上步驟c)的產(chǎn)物加到在選自以下的溶劑中的碘甲烷的混合物中二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃、甲苯或1，4-二噁烷，往此混合物加入堿如1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一-7-烯(DBU)、三乙胺或1，5-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-5-烯(DBN)，并在-40℃至110℃的溫度下攪拌產(chǎn)生式(5)的酯；或在0℃-100℃的溫度范圍內(nèi)將以上步驟c)的產(chǎn)物加到甲醇和濃酸如硫酸或鹽酸的混合物中；或者在-40℃至100℃的溫度下將以上步驟c)的產(chǎn)物加到在苯或甲苯中的三甲基甲硅烷基重氮甲烷和甲醇中；或者在-40℃至40℃的溫度下將以上步驟c)的產(chǎn)物加到在溶劑如苯、甲苯、二氯甲烷或乙醚中的重氮甲烷中；e)將以上步驟d)的產(chǎn)物加到四氯化碳或乙酸乙酯和乙腈的混合物，往其中加入水、高碘酸鈉和氯化釕(III)，并在-40℃至80℃的溫度下攪拌產(chǎn)生式(6)的羧酸；f)將以上步驟e)的產(chǎn)物加到選自三乙胺或二異丙基乙基胺的堿和選自甲苯、苯、二甲苯、四氫呋喃、乙醚或正庚烷的溶劑的混合物中，往其中加入二苯基磷?；B氮化物(DPPA)，并在0℃-150℃的溫度下攪拌以產(chǎn)生式(7)的異氰酸酯；或者在-40℃至78℃的溫度下將以上步驟e)中的產(chǎn)物加到在四氫呋喃或丙酮或乙醚中的氯甲酸乙酯或氯甲酸異丁酯和堿如三乙胺或二異丙基乙基胺，然后加入在水和四氫呋喃或丙酮中的疊氮化鈉，隨后加入甲苯或苯并回流；和g)將以上步驟f)的產(chǎn)物加到選自甲苯、苯、二甲苯或正庚烷的溶劑，往其中加入甲醇或叔丁醇以得到(8)，然后在溶劑如1，4-二噁烷、乙酸或水的存在或不存在下將(8)加到濃度為0.01M-12M的鹽酸水溶液以產(chǎn)生氨基酸(9)；或者將以上步驟f)的產(chǎn)物加到選自甲苯、苯、二甲苯或正庚烷的溶劑中，往其中加入芐醇以得到(8)，然后用鎳或鈀或鉑氫化(8)得到內(nèi)酰胺，然后使之在溶劑如1，4-二噁烷、乙酸或水存在或不存在下用濃度為0.01M-12M的鹽酸水溶液水解以產(chǎn)生氨基酸(9)。
方法B a)-100℃至110℃下將氰基酯(2)加到在選自四氫呋喃、1，4-二噁烷、正庚烷、甲苯、乙醚或叔丁基甲基醚的無水溶劑中的烯丙基氯化鎂或烯丙基溴化鎂或2-烯丙基氯化鎂以產(chǎn)生式(10)的加成產(chǎn)物；b)將以上步驟a)的產(chǎn)物加到在選自乙二醇、2-甲氧基乙基醚、1，4-二噁烷或二乙二醇的溶劑中的選自氫氧化鉀、氫氧化鈉、氫氧化鋰或氫氧化銫的混合物中，并在25℃至250℃的溫度下攪拌混合物產(chǎn)生式(11)的羧酸；c)將以上步驟b)的產(chǎn)物加到在選自二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃、甲苯或1，4-二噁烷的溶劑中的碘甲烷的混合物中，往其中加入堿如1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一-7-烯(DBU)、三乙胺或1，5-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-5-烯(DBN)，并在-40℃至110℃的溫度下攪拌產(chǎn)生式(11)的酯；或者在0℃至100℃的溫度范圍內(nèi)將以上步驟b)的產(chǎn)物加到甲醇和濃酸如硫酸或鹽酸的混合物中；或者在-40℃至100℃的溫度下將以上步驟b)的產(chǎn)物加到在苯或甲苯中的三甲基甲硅烷基重氮甲烷和甲醇中；或者在-40℃至40℃的溫度下將以上步驟b)的產(chǎn)物加到在溶劑如苯、甲苯、二氯甲烷或乙醚中的重氮甲烷中；和d)將以上步驟c)的產(chǎn)物加到四氯化碳或乙酸乙酯和乙腈的混合物中，往其中加入水、高碘酸鈉和氯化釕(III)，并在-40℃至80℃的溫度攪拌以產(chǎn)生式(6)的羧酸。
方法2C a)在-100℃至0℃的溫度下將在溶劑如四氫呋喃或乙醚中的有機金屬試劑如乙烯基氯化鋰或乙烯基氯化鎂或乙烯基溴化鋰或乙烯基溴化鎂加到氰基酯(2)以得到(13)；b)將以上步驟a)的產(chǎn)物加到處在選自乙二醇、2-甲氧基乙基醚、1，4-二噁烷或二乙二醇的溶劑中的選自氫氧化鉀、氫氧化鈉、氫氧化鋰或氫氧化銫的堿的混合物中，并在25℃-250℃的溫度下攪拌混合物以產(chǎn)生式(14)的羧酸；c)將以上步驟b)的產(chǎn)物加到在選自以下的溶劑中的碘甲烷的混合物二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃、甲苯或1，4-二噁烷，往其中加入堿如1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一-7-烯(DBU)、三乙胺或1，5-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-5-烯(DBN)，并在-40℃至110℃的溫度下攪拌以產(chǎn)生式(15)的酯；或者在0℃-100℃的溫度范圍內(nèi)將以上步驟b)的產(chǎn)物加到甲醇和濃酸如硫酸或鹽酸的混合物中；或者在-40℃至100℃的溫度下將以上步驟b)的產(chǎn)物加到在苯或甲苯中的三甲基甲硅烷基重氮甲烷和甲醇中；或者在-40℃至40℃的溫度下將以上步驟b)的產(chǎn)物加到在溶劑如苯、甲苯、二氯甲烷或乙醚中的重氮甲烷中；d)在溶劑如氯仿或二氯甲烷或甲醇中臭氧解以上步驟c)的產(chǎn)物，然后在-100℃至0℃的溫度下加入終止劑如三苯基膦或二甲基硫化物以得到(16)；e)使在溶劑如甲醇或乙醇中的以上步驟d)的產(chǎn)物與氨水溶液或氨氣反應(yīng)，然后用硼氫化鈉、氰基硼氫化鈉或三乙酸基硼氫化物還原，或者在催化劑如鎳、鈀或鉑存在下氫化還原以得到(17)；和f)用濃度為0.01M-12M的鹽酸水溶液，在溶劑如1，4-二噁烷、乙酸或水存在或不存在下水解步驟e)的產(chǎn)物，以產(chǎn)生氨基酸(9)。
方法3
在-100℃-0℃下在由四氫呋喃、乙醚或1，4-二噁烷組成的溶劑混合物、協(xié)同溶劑(coordinating solvent)如HMPA或DMPU和醇如叔丁醇中將不飽和酯和芐基硫代異氰酸酯與二碘化釤一起攪拌；將所得的酯在溶劑如甲醇、乙醇、乙酸乙酯中使用催化劑如鎳、鈀、鉑或銠于20℃-100℃的溫度下氫化得到氫基酸。
方法4A a)在路易斯酸如三氟化硼醚合物或氯化鋁存在下，在溶劑如四氫呋喃或乙醚中，在-100℃至0℃的溫度下將有機金屬試劑如乙烯基氯化鋰或乙烯基氯化鎂或乙烯基溴化鋰或乙烯基溴化鎂與二甲基鋅、氯化鋅、碘化銅(I)、溴化銅(I)二甲基硫化物絡(luò)合物或氰化銅(I)混合，并加入不飽和酯(1)以得到加成產(chǎn)物(2)；b)在溶劑如氯仿或二氯甲烷或甲醇中臭氧解以上步驟a)的產(chǎn)物，然后在-100℃至0℃的溫度下加入終止劑如三苯基膦或二甲基硫化物以得到(3)；c)使在溶劑如甲醇或乙醇中的以上步驟b)的產(chǎn)物與氨水溶或氨氣反應(yīng)，然后用硼氫化鈉、氰基硼氫化鈉或三乙酸基硼氫化鈉還原或在催化劑如鎳、鈀或鉑存在下氫化還原得到(4)；和d)用濃度為0.01M-12M的鹽酸水溶液，在溶劑如1，4-二噁烷、乙酸或水存在下將以上步驟c)的產(chǎn)物水解產(chǎn)生氨基酸(5)。
方法4B a)在路易斯酸如三氟化硼醚合物或氯化鋁存在下，在溶劑如四氫呋喃或乙醚中，在-100℃至0℃的溫度下將有機金屬試劑如烯丙基氯化鎂或烯丙基溴化鎂與二甲基鋅、氯化鋅、碘化銅(I)、溴化銅(I)二甲基硫化物絡(luò)合物或氰化銅(I)混合，并加入不飽和酯(1)以得到加成產(chǎn)物(6)；或?qū)⒔饘儆袡C試劑如氯化芐基鎂或溴化芐基鎂在路易斯酸如三氟化硼醚化物或氯化鋁存在下在溶劑如四氫呋喃或乙醚中，在-100℃-0℃下與二甲基鋅、氯化鋅、碘化銅(I)、溴化銅(I)二甲基硫化物絡(luò)合物或氰化銅(I)進行混合，并加入不飽和酯(I)得到加成物(7)。
b)將以上步驟a)的產(chǎn)物加到四氯化碳或乙酸乙酯和乙腈的混合物，往其中加入水、高碘酸鈉和氯化釕(III)，并在-40℃至80℃的溫度下攪拌以產(chǎn)生式(8)的羧酸；c)將以上步驟b)的產(chǎn)物加到選自三乙胺或二異丙基乙基胺的堿和選自甲苯、苯、二甲苯、四氫呋喃、乙醚或正庚烷的溶劑的混合物中，往其中加入二苯基磷酰基疊氮化物(DPPA)，并在0℃-150℃的溫度下攪拌以產(chǎn)生式(9)的異氰酸鹽；或者在-40℃至78℃的溫度下將以上步驟b)的產(chǎn)物加到在四氫呋喃或丙酮或乙醚中的氯甲酸乙酯或氯甲酸異丁酯和堿如三乙胺或二異丙基乙基胺，然后加入在水和四氫呋喃或丙酮中的疊氮化鈉，然后加入甲苯或苯并回流；d)將以上步驟c)的產(chǎn)物加到選自甲苯、苯、二甲苯或正庚烷的溶劑，往其中加入甲醇或叔丁醇以得到(10)，然后在存在或不存在溶劑如1，4-二噁烷、乙酸或水的情況下將(10)加到濃度為0.01M-12M的鹽酸水溶液以產(chǎn)生氨基酸(5)；或者將以上步驟c)的產(chǎn)物加到選自甲苯、苯、二甲苯或正庚烷的溶劑，往其中加入芐基醇以得到(10)，然后用鎳或鈀或鉑將(10)氫化得到內(nèi)酰胺，在存在或不存在溶劑如1，4-二噁烷、乙酸或水的情況下用濃度為0.01M-12M的鹽酸水溶液水解得到氨基酸(5)。
方法5 a)將化合物(1)和氰化鉀或氰化鈉和水和乙醇或甲醇一起回流，并用Dean-Stark汽水分離器除去水以得到(2)；b)將步驟a)的產(chǎn)物與乙醇和甲苯或苯一起攪拌，并在-30℃至40℃的溫度下用鹽酸水溶液將溶液飽和以得到(3)；c)在甲醇、乙醇或乙酸乙酯中，用催化劑如鎳、鈀、鉑或銠，在15℃-60℃的溫度氫化以上步驟b)的產(chǎn)物以得到(4)；d)在存在或不存在溶劑如1，4-二噁烷、乙酸或水的情況下用濃度為0.01M-12M的鹽酸水溶液將以上步驟c)的產(chǎn)物水解以產(chǎn)生氨基酸(5)。
生物學(xué)實施例可獲得多種用于確定式I-IV的化合物是否有效治療內(nèi)臟疾病的模型。這些模型包括LPS模型(Eutamene H等人，J Pharmacol Exp Ther2000 295(1)162-7)、TNBS模型(Diop L.等人，Gastroenterology1999，116，4(2)A986)、IBD模型(Clemett D，Markham A，Drugs2000 Apr；59(4)929-56)、胰腺疼痛模型(Isla AM，Hosp Med 2000Jun；61(6)386-9)和內(nèi)臟非消化性疼痛模型(Boucher M等人，JUrol 2000 Jul；164(1)203-8)。
加巴噴丁，1-(氨基甲基)環(huán)己烷乙酸，是作為抗癲癇藥銷售，并有效地減少患者的發(fā)作頻率。
已發(fā)現(xiàn)將三硝基苯磺酸(TNBS)注射到大鼠的結(jié)腸誘導(dǎo)慢性結(jié)腸炎。加巴噴丁和化學(xué)相關(guān)的化合物已表現(xiàn)為抑制TNBS誘導(dǎo)的慢性異常疼痛模型中的結(jié)腸過敏性(Diop L.等人，(1998)Soc.Neurosci.Abstr.24639)。
已用GI疾病的內(nèi)臟疼痛的動物模型確認式I-IV的化合物選擇性治療內(nèi)臟疾病的能力。
在人類，GI疾病經(jīng)常與內(nèi)臟疼痛有關(guān)。在這些病理學(xué)中，內(nèi)臟疼痛閾值降低代表內(nèi)臟過敏性。
實施例10加巴噴丁和式Ia的化合物對TNBS誘導(dǎo)的大鼠慢性內(nèi)臟異常疼痛的作用在此清醒大鼠的結(jié)腸膨脹的實驗?zāi)Ｐ椭?，預(yù)先將TNBS注射到近端結(jié)腸已經(jīng)降低了內(nèi)臟疼痛的閾值。
材料和方法使用重量為340-400g的雄性Sprague-Dawley大鼠。在受控的環(huán)境(20±1℃，50±5％濕度，8:00am至8:00pm亮)下每只籠關(guān)養(yǎng)3只動物。第0天，在麻醉下(氯胺酮80mg/kg i.p.；乙酰丙嗪12mg/kgi.p.)下，對于對照大鼠，將TNBS(50mg/kg，在30％乙醇中)或鹽水(1.5ml/kg)注射到近端結(jié)腸壁(距盲腸1cm)。手術(shù)后，7天內(nèi)將動物單獨關(guān)養(yǎng)在聚丙烯籠中，并保持在受控環(huán)境(20±1℃，50±5％濕度，8:00a.m.-8:00p.m.亮)。在TNBS施用后第7天，通過肛門插入氣球(5-6cm長)，并通過將導(dǎo)管固定至尾巴底部而保持在適當?shù)奈恢?氣球頂端距肛門5cm)。在結(jié)腸膨脹周期之前1小時口服加巴噴丁或式Ia的化合物以5mm Hg(0.667kPa)的梯度將氣球逐漸地由0膨脹到75mm Hg，每一膨脹梯度持續(xù)30秒。通過標準恒壓器(barostat)控制結(jié)腸膨脹各周期。閾值(mm Hg)對應(yīng)于產(chǎn)生第一次腹部收縮的壓力，然后膨脹周期停止。在相同的動物上進行四次膨脹周期后測定結(jié)腸閾值。
通過比較試驗化合物治療組與僅用TNBS處理的組和對照組分析數(shù)據(jù)。計算每組值的平均值和SEM。試驗化合物每個口服劑量的抗異常疼痛活性計算如下 其中A＝試驗化合物治療組的平均閾值，T＝僅用TNBS處理組的平均閾值，C＝對照組的平均閾值。
試驗化合物治療組的測定結(jié)果表示為TNBS誘導(dǎo)的疼痛閾值降低的％抑制。采用單因子ANOVA法，然后進行Student’s不配對t檢驗來測定各組之間的統(tǒng)計學(xué)顯著性；差異在p＜0.05時認為統(tǒng)計學(xué)上是顯著的。
結(jié)果加巴噴丁的作用
*p＜0.05**p＜0.0)1***p＜0.001加巴噴丁的中值有效劑量(ED50)為321mg/kg p.o。
式Ia化合物的作用
式Ia化合物的ED50為14.4mg/kg p.o。
已知在受控條件下加巴噴丁通過皮下(s.c.)途徑不改變結(jié)腸閾值；相反，在相同條件下嗎啡(s.c.)升高TNBS處理動物和對照組的結(jié)腸閾值，這提示不同的作用機理。(Diop L.等人，(1998)Soc.Neurosci.Abstr.24639)。
式Ia的化合物在大鼠內(nèi)臟疼痛模型上產(chǎn)生強的抗異常疼痛活性，在相同條件下該化合物的活性比加巴噴丁大20倍。加巴噴丁和式Ia化合物的各自的ED50值分別為321mg/kg p.o.和14.4mg/kg p.o.。
實施例11加巴噴丁和式Ia化合物對LPS誘導(dǎo)的大鼠直腸過敏性的作用腹膜內(nèi)注射細菌脂-多糖(LPS)已顯示出在清醒大鼠上誘導(dǎo)直腸痛覺過敏。
材料和方法外科手術(shù)準備用于肌電圖測定的動物通過腹膜內(nèi)注射乙酰丙嗪(0.6mg/kg)和氯胺酮(120mg/kg)而麻醉大鼠。將三組電極植入腹外斜肌，腹股溝韌帶的正上方。將電極置于頸后部，并用與皮膚結(jié)合的玻璃管保護。將動物單獨關(guān)養(yǎng)在聚丙烯籠中，并保持在控溫室(21℃)內(nèi)。提供適量的食物(UAR pellets，Epinay，F(xiàn)rance)并且自由攝取水。
肌電圖記錄在外科手術(shù)5天后開始。用腦電圖儀(Mini VIII Alvar，Paris，F(xiàn)rance)記錄腹橫紋肌的電活性，使用短時間常數(shù)(0.03秒)除去低頻信號(＜3Hz)并使用3.6cm/分的紙速。記錄尖峰作為腹部收縮的指數(shù)。
膨脹方法將大鼠置于塑料管道(6cm直徑×25cm長)，其中它們不能移動、逃跑和回頭，以防止破壞氣球。在直腸膨脹的4天以前使動物習(xí)慣此方法以使實驗期間的緊張反應(yīng)最小化。用于膨脹的氣球是一種動脈栓子切除術(shù)導(dǎo)管(Fogarty，Edwards Laboratories Inc.)。通過在距肛門1cm處將氣球(2mm直徑×2cm長)插入直腸而完成直腸膨脹，并將導(dǎo)管固定在尾巴的底部。它隨著溫水以0.4ml梯度從0升到1.2mL而逐漸膨脹，每一膨脹梯度持續(xù)5分鐘。為了檢測可能的泄漏，在膨脹期結(jié)束時通過注射器完全移出并檢查氣球中引入的水的體積。
實驗方案給大鼠i.p.注射LPS(1mg/kg(大腸桿菌，血清型，O111B4)Sigma-Aldrich chemical Co.，St Louis，MO.)或其賦形劑，并在此施用后9和12小時完成直腸膨脹和伴隨的腹部收縮的肌電圖記錄。為了測定加巴噴丁和式Ia化合物在痛覺過敏條件下的抗傷害性能，在直腸膨脹之前1小時經(jīng)口服施用加巴噴丁(10和30mg/kg)和式Ia化合物(0.01、0.03和0.1mg/kg)或賦形劑(NaCl 0.9％ 0.3ml/大鼠)，然后(12小時)注射LPS(1mg/kg i.p.)。
藥物將所有的藥物溶于無菌NaCl(0.9％等滲鹽水)，然后立即使用。
統(tǒng)計采用單因素ANOVA法，然后采用參數(shù)Student’s非配對t檢驗統(tǒng)計分析在每個直腸膨脹期間發(fā)生的腹部收縮的次數(shù)。
結(jié)果加巴噴丁的作用30mg/kg p.o.施用加巴噴丁顯著抑制(85.3％，p＜0.001)在LPS處理的大鼠的直腸膨脹0.4ml誘導(dǎo)的腹部收縮的次數(shù)。而10mg/kg p.o.的加巴噴丁沒有產(chǎn)生顯著的抗痛覺過敏活性(24.9％)。
式Ia的化合物的作用口服后，式Ia化合物(0.01，0.03和0.1mg/kg po)以劑量相關(guān)的方式抑制在LPS處理后由直腸膨脹0.4ml誘導(dǎo)的腹部收縮的次數(shù)(圖1)。ED50為0.037mg/kg p.o。
總之，這些結(jié)果表明加巴噴丁和式Ia化合物在LPS誘導(dǎo)的大鼠過敏性內(nèi)臟疼痛模型上產(chǎn)生抗痛覺過敏活性。式Ia化合物顯著出比加巴噴丁更有效的抗痛覺過敏活性。加巴噴丁與式Ia化合物的比較表明在此內(nèi)臟疼痛模型中式Ia化合物的效力比加巴噴丁強500倍。
以上數(shù)據(jù)確定式I-IV的化合物有效地預(yù)防和治療內(nèi)臟疼痛，特別是GI疾病中如功能性腸病(FBD)和炎性腸病(IBD)的內(nèi)臟疼痛。此外，式Ia化合物的這些效力是在化合物口服之后觀察到的。
權(quán)利要求
1.式I-IV的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽用于制備用于預(yù)防或治療內(nèi)臟疼痛的藥物的用途， 其中n為1-4的整數(shù)。
2.式I-IV的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽用于制備用于預(yù)防或治療胃腸疾病的藥物的用途， 其中n為1-4的整數(shù)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的式I-IV的化合物的用途，其中n為2-4的整數(shù)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2的用途，其中的化合物為式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4的用途，其中的化合物選自(1α，6α，8β)(2-氨基甲基-八氫-茚-2-基)-乙酸，(2-氨基甲基-八氫-茚-2-基)-乙酸，(2-氨基甲基-八氫-并環(huán)戊二烯-2-基)-乙酸，(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚-3-基)-乙酸，(1α，3α，5α)-3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚烷-3-乙酸，(1α，5β)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)-乙酸，(1α，5β)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚-3-基)-乙酸，(1α，5β)(2-氨基甲基-八氫-并環(huán)戊二烯-2-基)-乙酸，(1α，6β)(2-氨基甲基-八氫-茚-2-基)-乙酸，(1α，7β)(2-氨基甲基-十氫-薁-2-基)-乙酸，(1α，5β)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)-乙酸，(1α，5β)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚-3-基)-乙酸，(1α，5β)(2-氨基甲基-八氫-并環(huán)戊二烯-2-基)-乙酸，(1α，6β)(2-氨基甲基-八氫-茚-2-基)-乙酸，(1α，7β)(2-氨基甲基-十氫-薁-2-基)-乙酸，(1α，3α，5α)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)-乙酸，(1α，3α，5α)(2-氨基甲基-八氫-并環(huán)戊二烯-2-基)-乙酸，(1α，6α，8α)(2-氨基甲基-八氫-茚-2-基)-乙酸，(1α，7α，9α)(2-氨基甲基-十氫-薁-2-基)-乙酸，(1α，3β，5α)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)-乙酸，(1α，3β，5α)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚-3-基)-乙酸，(1α，3β，5α)(2-氨基甲基-八氫-并環(huán)戊二烯-2-基)-乙酸，(1α，6α，8β)(2-氨基甲基-八氫-茚-2-基)-乙酸，(1α，7α，9β)(2-氨基甲基-十氫-薁-2-基)-乙酸，((1R，3R，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1R，3S，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1S，3S，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1S，3R，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1R，3R，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((1R，3S，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((1S，3S，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((1S，3R，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((3αR，5R，7αS)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((3αR，5S，7αS)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((3αS，5S，7αR)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((3αS，5R，7αR)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((2R，4αS，8αR)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2S，4αS，8αR)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2S，4αR，8αS)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2R，4αR，8αS)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2R，4αS，9αR)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，((2S，4αS，9αR)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，((2S，4αR，9αS)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，((2R，4αR，9αS)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，((1R，3R，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1R，3S，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1S，3S，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1S，3R，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1R，3R，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((1R，3S，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((1S，3S，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((1S，3R，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((3αR，5R，7αR)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((3αR，5S，7αR)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((3αS，5S，7αS)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((3αS，5R，7αS)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((2R，4αR，8αR)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2S，4αS，8αR)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2S，4αR，8αS)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2R，4αS，8αS)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2R，4αR，9αR)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，((2S，4αR，9αR)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，((2S，4αS，9αS)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，和((2R，4αS，9αS)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，或其藥學(xué)上可接受的鹽。
6.(1α，3α，5α)-3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚烷-3-乙酸或其藥學(xué)上可接受的鹽用于制備用于預(yù)防或治療內(nèi)臟疼痛的藥物的用途。
7.(1α，3α，5α)-3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚烷-3-乙酸或其藥學(xué)上可接受的鹽用于制備用于預(yù)防或治療胃腸疾病的藥物的用途。
8.根據(jù)權(quán)利要求2-7和7的用途，其中該疾病為功能性腸病或炎性腸病。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的用途，其中該功能性腸病為胃食管反流、消化不良、腸易激綜合征或功能性腹痛綜合征。
10.根據(jù)權(quán)利要求8的用途，其中該炎性腸病為節(jié)段性回腸炎、回腸炎或潰瘍性結(jié)腸炎。
11.根據(jù)權(quán)利要求1、3、4、5或6任一項的用途，其中該疾病與痛經(jīng)、骨盆痛、膀胱炎痛和胰腺炎有關(guān)。
12.根據(jù)權(quán)利要求1-11的用途，其中該藥物為口服制劑。
13.一種包含活性成分式I-IV化合物的用于治療或預(yù)防內(nèi)臟疼痛和GI疾病的藥物組合物。
14.根據(jù)權(quán)利要求1 3的藥物組合物，所述藥物組合物包含(1α，3α，5α)-3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚烷-3-乙酸。
15.根據(jù)權(quán)利要求13或14的用于治療或預(yù)防選自以下疾病的藥物組合物功能性腸病如胃食管反流、消化不良、腸易激綜合征或功能性腹痛綜合征，或者炎性腸病如節(jié)段性回腸炎、回腸炎或潰瘍性結(jié)腸炎，或者與痛經(jīng)、骨盆痛、膀胱炎痛和胰腺炎有關(guān)的疾病。
16.根據(jù)權(quán)利要求13-15之任一項的藥物組合物，所述組合物為適于口服的劑型。
17.一種用于預(yù)防或治療內(nèi)臟疼痛的方法，所述方法包括需要治療的患者施用有效量的式I-IV的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽， 其中n為1-4的整數(shù)。
18.一種用于預(yù)防或治療胃腸疾病的方法，所述方法包括需要治療的患者施用有效量的式I-IV的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽， 其中n為1-4的整數(shù)。
19.權(quán)利要求17或18的方法，其中該化合物選自(1α，6α，8β)(2-氨基甲基-八氫-茚-2-基)-乙酸，(2-氨基甲基-八氫-茚-2-基)-乙酸，(2-氨基甲基-八氫-并環(huán)戊二烯-2-基)-乙酸，(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚-3-基)-乙酸，(1α，3α，5α)-3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚烷-3-乙酸，(1α，5β)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)-乙酸，(1α，5β)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚-3-基)-乙酸，(1α，5β)(2-氨基甲基-八氫-并環(huán)戊二烯-2-基)-乙酸，(1α，6β)(2-氨基甲基-八氫-茚-2-基)-乙酸，(1α，7β)(2-氨基甲基-十氫-薁-2-基)-乙酸，(1α，5β)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)-乙酸，(1α，5β)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚-3-基)-乙酸，(1α，5β)(2-氨基甲基-八氫-并環(huán)戊二烯-2-基)-乙酸，(1α，6β)(2-氨基甲基-八氫-茚-2-基)-乙酸，(1α，7β)(2-氨基甲基-十氫-薁-2-基)-乙酸，(1α，3α，5α)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)-乙酸，(1α，3α，5α)(2-氨基甲基-八氫-并環(huán)戊二烯-2-基)-乙酸，(1α，6α，8α)(2-氨基甲基-八氫-茚-2-基)-乙酸，(1α，7α，9α)(2-氨基甲基-十氫-薁-2-基)-乙酸，(1α，3β，5α)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)-乙酸，(1α，3β，5α)(3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚-3-基)-乙酸，(1α，3β，5α)(2-氨基甲基-八氫-并環(huán)戊二烯-2-基)-乙酸，(1α，6α，8β)(2-氨基甲基-八氫-茚-2-基)-乙酸，(1α，7α，9β)(2-氨基甲基-十氫-薁-2-基)-乙酸，((1R，3R，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1R，3S，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1S，3S，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1S，3R，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1R，3R，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((1R，3S，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((1S，3S，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((1S，3R，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((3αR，5R，7αS)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((3αR，5S，7αS)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((3αS，5S，7αR)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((3αS，5R，7αR)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((2R，4αS，8αR)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2S，4αS，8αR)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2S，4αR，8αS)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2R，4αR，8αS)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2R，4αS，9αR)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，((2S，4αS，9αR)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，((2S，4αR，9αS)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，((2R，4αR，9αS)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，((1R，3R，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1R，3S，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1S，3S，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1S，3R，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.1.0]庚-3-基)-乙酸，((1R，3R，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((1R，3S，6R)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((1S，3S，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((1S，3R，6S)-3-氨基甲基-雙環(huán)[4.2.0]辛-3-基)-乙酸，((3αR，5R，7αR)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((3αR，5S，7αR)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((3αS，5S，7αS)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((3αS，5R，7αS)-5-氨基甲基-八氫-茚-5-基)-乙酸，((2R，4αR，8αR)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2S，4αS，8αR)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2S，4αR，8αS)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2R，4αS，8αS)-2-氨基甲基-十氫-萘-2-基)-乙酸，((2R，4αR，9αR)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，((2S，4αR，9αR)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，((2S，4αS，9αS)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，和((2R，4αS，9αS)-2-氨基甲基-十氫-苯并環(huán)戊烯-2-基)-乙酸，或其藥學(xué)上可接受的鹽。
20.根據(jù)權(quán)利要求17或18的方法，其中該化合物為式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。
21.一種用于預(yù)防或治療內(nèi)臟疼痛的方法，所述方法包括給需要治療的患者施用有效量的(1α，3α，5α)-3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚烷-3-乙酸或其藥學(xué)上可接受的鹽。
22.一種用于預(yù)防或治療胃腸疾病的方法，所述方法包括給需要治療的患者施用有效量的(1α，3α，5α)-3-氨基甲基-雙環(huán)[3.2.0]庚烷-3-乙酸或其藥學(xué)上可接受的鹽。
23.根據(jù)權(quán)利要求17-22之任一項的方法，其中該疾病為功能性腸病或炎性腸病。
24.根據(jù)權(quán)利要求23的方法，其中該功能性腸病為胃食管反流、消化不良、腸易激綜合征或功能性腹痛綜合征。
25.根據(jù)權(quán)利要求23的方法，其中該炎性腸病為節(jié)段性回腸炎、回腸炎或潰瘍性結(jié)腸炎。
26.根據(jù)權(quán)利要求17、19、20或21之任一項的方法，其中該疾病與痛經(jīng)、骨盆痛、膀胱炎痛和胰腺炎有關(guān)。
全文摘要
式I－IV化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中n為1－4的整數(shù)用于預(yù)防和治療內(nèi)臟疼痛和胃腸疾病。
文檔編號A61K31/197GK1610544SQ02804143
公開日2005年4月27日 申請日期2002年1月25日 優(yōu)先權(quán)日2001年1月26日
發(fā)明者M·肖特, L·迪奧普 申請人:沃尼爾·朗伯有限責(zé)任公司